高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第三节 传统发酵技术当堂检测题

【名师】第三节传统发酵技术-2优质练习

一．单项选择

1．下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（    ）

①培养微生物的试剂和器具都要进行灭菌

②接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧

③倒平板时，倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖

④平板划线操作中，随着划线次数的不断增加其接种环上的菌种会越来越少

⑤高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

⑥为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落．接种后的培养皿要倒置

⑦使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃

⑧配培养基．倒平板．接种需要在酒精灯火焰旁进行

A．①②④⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．③④⑥⑦

2．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是(    )

A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质

3．图是高压蒸汽灭菌锅及其局部剖面示意图，其中甲．乙．丙依次指（    ）

A．安全阀．排气阀．温度表 B．排气阀．安全阀．压力表

C．安全阀．排气阀．压力表 D．排气阀．安全阀．温度表

4．下列有关菌种保藏的有关叙述，错误的是（    ）

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏

B．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

D．需要长期保存的菌种，可采用低温（－4℃）保藏的方法

5．.研究小组利用微生物实验操作技术来探究某池塘中大肠杆菌数量，下列叙述正确的是(　　)

A. Ⅰ B. Ⅱ C. Ⅲ D. Ⅳ

6．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒

B．培养基．接种环可用干热灭菌法灭菌

C．消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即打开排气阀排气降温

7．下面是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1．2．3．4．5。下列叙述正确的是（    ）

A．在五个区城中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落

C．划线操作时完全打开皿盖，将接种环伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖

D．第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

8．培养基是一种人工配制的．适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述错误的是（    ）

A．从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养自养型微生物

B．加入的KH2PO4即可从养分上提供P和K，又可缓冲培养基的pH

C．若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需添加葡萄糖

D．如果再加入指示剂，该培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基

9．无菌操作技术在生产生活中应用广泛。下列相关叙述正确的是（    ）

A．对培养皿等玻璃器皿宜采用灼烧灭菌

B．对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力未降到零就打开排气阀可能造成污染

C．微生物培养后的废弃物经过简单消毒处理后可直接丢弃

D．在取走培养皿盖的培养皿中倒平板时，需要在火焰旁操作

10．硝化细菌广泛存在子通气性较好的土壤中，其部分代谢反应如图所示，下列关于硝化细菌的培养条件的描述正确的是（　　）

A．碳源为葡萄糖 B．培养时需隔绝空气

C．氮源是氨气 D．培养时需冷藏

11．下列叙述错误的是（    ）

A．灭菌是以能杀死除芽孢和孢子外的所有活细胞为标准的

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数

C．统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果

D．测定亚硝酸盐含量时，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色

12．总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是

A．总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外

B．总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关

C．相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多

D．接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好

13．菌种保藏是一切微生物工作的基础，下列有关叙述不正确的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入－4℃的冰箱中保藏

C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温－20℃的冷冻箱中

14．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌

D．培养基灭菌后，立即在酒精灯火焰附近倒平板

15．下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（    ）

A．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

B．尿素固体培养基一般是将尿素涂布到固体平面培养基上制成的

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是维持渗透压

D．倒平板时，应将打开的培养皿盖放在一边，防止培养基溅到皿盖上

16．漆酶属于木质素（木质素是一类参与维管植物和一些藻类的支持组织如细胞壁组成的重要结构物质）降解酶类，在环境修复．农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离．纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（    ）

A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B．筛选培养基中需要加入纤维素，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化

D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

17．研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量。每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（    ）

A．涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后还要冷却8～10s

B．涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养

C．计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均

D．若空白对照组上有5个菌落，则实验组数据基础上减去5，以获得最准确数据

18．关于灭菌和消毒理解不正确的是（    ）

A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子

B．消毒和灭菌实质上是相同的

C．接种环用灼烧法灭菌

D．常用的灭菌和消毒方法有加热法．灼烧法．紫外线法．化学药品法

参考答案与试题解析

1．【答案】A

【解析】

试题分析：

获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的污染。无菌操作主要包括：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，惊喜清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基进行灭菌。

③为避免周围环境中的微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

①培养微生物的试剂和器具都要进行灭菌，①正确；

②接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧，②正确；

③倒入培养基后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，③错误；

④平板划线操作中，随着划线次数的不断增加其接种环上的菌种会越来越少，④正确；

⑤高压灭菌加热结束时，应等压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，⑤错误；

⑥接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落，⑥错误；

⑦使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃，⑦正确；

⑧配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，⑧错误。

综上所述，①②④⑦正确，其他错误。

故选A。

2．【答案】A

【解析】

试题分析：

解答：

自养型微生物与异养型微生物的主要差别在于自养型微生物可以利用无机碳合成自身的有机物，用于各项生命活动；而异养型微生物只能以有机碳作为碳源，所以两种培养基的主要差别在于碳源，A正确。

故选A。

3．【答案】C

【解析】

试题分析：

据图分析，图示为高压蒸汽灭菌锅，其中甲是安全阀，乙是排气阀，丙是压力表。

解答：

微生物培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；根据以上分析已知，图中甲是安全阀，乙是排气阀，丙是压力表，故选C。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

有关菌种的保藏方法：①临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后将试管放入4°C的冰箱中保藏。②甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存。

解答：

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，A正确；

B．对于频繁使用的菌种，我们可以采用临时保藏的方法，B正确；

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上，C正确；

D．需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存，D错误。

故选D。

5．【答案】C

【解析】A．进行涂布平板操作时，取少量菌液（不超过0.1ml）滴加到培养基表面，再用灭菌后的涂布器推匀，A错误；

B．涂布完成后，在培养皿底做好标记，并将培养皿倒置，B错误；

C．计数时一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，选项中各菌落数符合要求，求平均值即可，C正确；

D．设置空白对照组的目的是判断有无杂菌污染，题目中空白对照组有5个菌落，说明在培养过程中有杂菌污染，应重新开展实验，D错误。

故选C。

6．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒，A正确；

B．培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；

C．消毒能杀死物体表面或内部的部分微生物，不包芽孢和孢子，C错误；

D．高压蒸汽灭菌时间达到后应等待冷却．降温，然后排气，D错误。

故选A。

7．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
（一）．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
（二）．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
（三）．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
（四）．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，A错误；
B．划线操作接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，B正确；

C．划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，C错误；
D．划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误。
故选B。

8．【答案】C

【解析】

试题分析：

各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求；培养基按其物理状态可分为固体培养基．液体培养基和半固体培养基三类，液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基；培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。

解答：

A．根据表格分析，该培养基中含有氮源．无机盐．水，没有碳源，可以用来培养自养型微生物，A正确；

B．表格中的KH2PO4可以为微生物提供P和K元素，还可以缓冲培养基的pH，B正确；

C．若要观察微生物的菌落特征，需要使用固体培养基，应该加入琼脂，C错误；

D．该培养基中没有碳源，属于选择培养基，若再加入指示剂，还可以作为鉴别培养基，D正确。

故选C。

9．【答案】B

【解析】

试题分析：

常用的灭菌方法：干热灭菌法．灼烧灭菌法．高压蒸汽灭菌法。

解答：

A．对玻璃器皿常用干热灭菌法处理，A错误；

B．对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力未降到零就打开排气阀可能造成污染，需要将其中原有的冷空气彻底排除后，B正确；

C．微生物培养后的废弃需要经过彻底灭菌处理才能丢弃，C错误；

D．倒平板时，应该用手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能将培养皿盖取走，D错误。

故选B。

10．【答案】C

【解析】

试题分析：

培养基中需要具备碳源．氮源．无机盐．水等，另外在考虑温度．PH等条件。土壤中的硝化细菌能进行化能合成作用，硝化细菌能利用氨气氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，属于自养生物，因此选择提供无机碳源．无机氮源。

解答：

A．土壤中的硝化细菌能进行化能合成作用，培养基中不需要有机碳源，其碳源为二氧化碳，A错误；

B．硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，所以培养时不能隔绝空气，B错误；

C．硝化细菌的培养过程中氮源是氨气，C正确；

D．硝化细菌能利用NH3氧化释放的能量把二氧化碳和水合成有机物，需要酶的催化作用，所以培养时需要适宜的温度，D错误。

故选C。

11．【答案】A

【解析】

试题分析：

灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。

计数：操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落）。

亚硝酸盐含量的测定原理：与显色剂(N-1-萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合)反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量。

解答：

A．灭菌是杀死全部微生物，包括芽孢和孢子，A错误；

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数（SN标准要求为25~250个菌落），B正确；

C．统计菌落数目时，培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果，C正确；

D．制作泡菜和测定亚硝酸盐含量时，与显色剂反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色，D正确；

故选A。

12．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

总状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。

13．【答案】B

【解析】

试题分析：

菌种保存

解答：

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，A正确；
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，放入4℃的冰箱中保藏，B错误；
C．临时保藏菌种容易被污染或产生变异，C正确；
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏，置于低温-20℃的冷冻箱中，D正确。
故选B。

14．【答案】D

【解析】

试题分析：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。

解答：

A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A正确；

B．溶化时，将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，C正确；

D．培养基灭菌后，待培养基冷却至50°C左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。

故选D。

15．【答案】A

【解析】

试题分析：

本题主要考察了微生物的实验时培养，使用稀释涂布平板法可以用来对菌种进行计数，但所测量的数值比真实值少。培养基中必须具备的营养成分有水．碳源．氮源和无机盐等。整个过程需要严格的无菌操作。

解答：

A．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法统计的菌落数往往要比活菌的实际数目少，A正确；

B．尿素培养基是在配制培养基的时候就添加进去的，B错误；

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是提供碳源，C错误；

D．倒平板的时候不能把培养皿盖完全打开放到一边，会增加空气中杂菌污染培养基的机会，D错误；

故选A。

16．【答案】C

【解析】

试题分析：

分析题图：分离．纯化和保存菌株的一般流程为：取样→制成样品悬液→涂布→划线→接种。

解答：

A．根据题文可知，漆酶属于木质素降解酶类，因此要分离产漆酶菌株应该到富含木质素的环境中（如森林的土壤中）取样，A错误；

B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物木质素，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B错误；

C．由题图可知，在涂布平板上长出的菌落，还需要再通过划线进一步纯化，C正确；

D．临时保存菌种时需要将菌种接种到固体斜面培养基上，使用该方法时，菌种容易被污染或产生变异，因此这种保存方法不能用于菌种的长期保存。要想长期保存需要使用甘油管藏法于-20℃保存，D错误。

故选C。

17．【答案】A

【解析】

试题分析：

常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，目的是让聚集在一起的微生物分散成单个细胞，然后得到由这个细胞繁殖而来的肉眼可见的单个群落。稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

解答：

A．使用涂布器在酒精灯下涂布时，要先将涂布器沾有少量酒精进行灼烧灭菌，燃尽后还要冷却8~10s再进行涂布，A正确；

B．涂布完成后，在培养皿的皿底上做标记，B错误；

C．计算平板上的菌落数时，应选择菌落数在30~300的平板进行计数，C错误；

D．若空白对照组上有5个菌落，说明培养基灭菌不彻底，需要重新进行实验，D错误。

故选A。

18．【答案】B

【解析】

试题分析：

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌．干热灭菌和高压蒸汽灭菌。

消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

A．灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；

B．消毒是指消除或杀灭外环境中的病原体，使其无害化，灭菌则是要将所有的微生物和病毒全部杀灭，以达到无菌的目的，灭菌一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；

C．接种环等接种工具常用灼烧法灭菌，C正确；

D．常用的消毒方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等，灭菌可以采用高温蒸汽灭菌法．灼烧法，D正确。

故选B。