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    高效课堂同步课件:4-3酵母细胞的固定化(选修1)

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    高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题3 酵母细胞的固定化教课课件ppt

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    这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题3 酵母细胞的固定化教课课件ppt,共25页。PPT课件主要包含了不溶于,水的多孔性载体,琼脂糖,海藻酸钠,醋酸纤维素,聚丙烯酰胺,葡萄糖异构酶,酶颗粒,反应溶液,干酵母细胞等内容,欢迎下载使用。
    课程标准尝试制备和应用固定化酶。课标解读1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。2.尝试制备固定化酵母细胞。3.尝试利用固定化细胞进行酒精发酵。
    1.固定化酶和固定化细胞技术是利用 和 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括 、 和 。2.固定化细胞多采用 固定化,而固定化酶多采用 和 。与固定化酶技术相比,固定化细胞技术制备的成本 ,操作 。
    固定化酶和固定化细胞技术
    3.用包埋法固定化细胞是将微生物细胞均匀地包埋于 中,常用的包埋载体有 、 、 、 和 等。4.固定化酶的应用实例——高果糖浆的生产固定化酶技术已经应用于高果糖浆的生产中,生产高果糖浆所需要的酶是 ,所使用的反应柱上的孔应满足 不能通过筛板上的小孔,而 却可以自由出入。
    [思维激活1] 日常生活中人们用来蒸馒头的发酵粉在浸泡宜用凉水、温水还是开水?提示 浸泡发酵粉最好用温水——温度过低,不利于发挥酶活性;温度过高会杀死酵母细胞。
    1.固定化酶的应用实例(1)固定化酶的反应柱示意图:将酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。(2)利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例:高果糖浆的生产需要使用葡萄糖异构酶,它能将葡萄糖转化成果糖。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。
    2.直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较(见下表)
    特别提醒 固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可以反复使用。
    【巩固1】 固定化酶和固定化细胞的主要区别是(  )。A.前者只能固定胞外酶,后者只能固定胞内酶B.前者只能固定胞内酶,后者只能固定胞外酶C.前者可以固定胞内酶和胞外酶,后者只可以固定胞内酶D.前者只可以固定胞外酶,后者可以固定胞外酶和胞内酶解析 微生物产生的酶的种类很多,有的存在于细胞内,有的分泌到细胞外。因此,固定化酶可以固定胞内酶和胞外酶,固定化细胞只能固定胞内酶。答案 C
    1.制备固定化酵母细胞的操作步骤:酵母细胞的 →配制物质的量浓度为0.05 ml/L的 溶液→配制 溶液→ 溶液与 混合→ 酵母细胞。2.在配制海藻酸钠溶液时,加热时要用 ,或者 ,反复几次,直到海藻酸钠完全 为止。如果加热太快,海藻酸钠会 。
    酵母细胞的固定化技术
    3.固定化酵母细胞需要的材料是 、 、 。4.用固定化酵母细胞发酵:将凝胶珠加入用于发酵的 溶液后,发现有 产生,同时有 散发。
    [思维激活2] 用于固定酵母细胞的载体是什么?载体的浓度越高固定效果越好吗?提示 用于固定酵母细胞的载体是海藻酸钠,海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量——浓度过低形成的凝胶珠内包埋的细胞过少,浓度过高则不易形成凝胶珠。
    1.固定化酵母细胞的制备酵母细胞的活化:1 g干酵母+10 mL蒸馏水→50 mL烧杯中,搅拌均匀,放置1 h↓配制0.05 ml/L的CaCl2溶液:无水CaCl20.83 g+150 mL蒸馏水→200 mL烧杯↓配制海藻酸钠溶液:0.7 g海藻酸钠+10 mL水放入50 mL小烧杯→小火加热,完全溶化加蒸馏水定容至10 mL↓
    海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:将海藻酸钠溶液冷却至室温后加入活化的酵母细胞,充分搅拌使其混合均匀,转移至注射器中↓固定化酵母细胞:以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加至配制好的CaCl2溶液中,形成凝胶珠,使其在溶液中浸泡30 min↓冲洗:将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2~3次↓发酵:将150 mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移至200 mL的锥形瓶中,加入固定好的酵母细胞,25 ℃下发酵24 h
    2.固定化实验中的有关问题
    特别提醒 制备固定化酵母细胞的注意事项(1)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:冷却后再混合,注意混合均匀,不要进入气泡。(2)凝胶珠的颜色和形状:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。(3)细胞的固定要在严格无菌条件下进行;反复使用固定化酵母细胞时,需要避免微生物的污染。
    【巩固2】 酵母细胞固定化的实验中,下列实验操作与目的不相符的是(  )。A.干酵母加入蒸馏水搅拌均匀后,放置一段时间,使酵母细胞活化B.采用小火间断加热的方法,防止海藻酸钠发生焦糊C.将活化的酵母细胞加入海藻酸钠溶液,轻轻搅拌,以免产生气泡D.用注射器滴加溶液时要接近CaCl2溶液的液面,防止凝胶珠出现“尾巴”
    解析 实验中,为了防止凝胶珠出现“尾巴”,注射器应离CaCl2溶液的液面远一些。答案 D
    【例1】 下列说法不正确的是(  )。A.固定化酶和固定化细胞的方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法B.固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法C.由于细胞个体大,而酶分子很小,因此细胞多采用物理吸附法固定D.反应物是大分子物质应采用固定化酶
    思维导图:深度剖析 在酶和细胞的固定化技术中,通常有包埋法、化学结合法和物理吸附法,其中由于酶分子小,又多带电荷,易从多孔性物质中漏出,因此多使用化学结合法与物理吸附法,而细胞个体大,难以被多孔性物质吸附或结合,因而多采用包埋法。答案 C
    [归纳整合]固定化酶与固定化细胞技术及其应用
    【例2】 试分析下图中与用海藻酸钠作载体制的固定化酵母细胞相似的是(  )。思维导图:

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