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    专题一0七 细胞工程与胚胎工程(含解析)-【考点剖析】2025届高考生物一轮复习考点剖析

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    专题一0七 细胞工程与胚胎工程(含解析)-【考点剖析】2025届高考生物一轮复习考点剖析

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    这是一份专题一0七 细胞工程与胚胎工程(含解析)-【考点剖析】2025届高考生物一轮复习考点剖析,共29页。试卷主要包含了单项选择题,多项选择题等内容,欢迎下载使用。
    考点58 动物细胞工程5颗星(6-10题,18-20题,28-30题)
    考点59 胚胎工程5颗星(11-14题,21-23题,31-33题)
    考试时间:90分钟 满分:100分
    说明:请将选择题正确答案填写在答题卡上,主观题写在答题纸上
    第I卷(选择题)
    一、单项选择题(本题共14小题,每小题1分,共12分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是最符合题目要求的。)
    1.鬼白类木质素具有广谱抗癌活性,对小细胞肺癌、白血病、神经胶质瘤等多种癌症具有特殊疗效。鬼臼类木质素的合成相当困难,依赖从天然生药资源植物中提取分离。下列关于利用植物组织培养技术生产生药资源植物的叙述,错误的是( )
    A.在生药资源植物组织培养过程中包括脱分化和再分化的过程
    B.培养基中添加的生长素和细胞分裂素的比例将影响植物细胞的发育方向
    C.愈伤组织是不定形的薄壁细胞团块,其代谢类型为自养需氧型
    D.培育过程中不是所有的阶段都需要光照
    2.摇摆式间歇浸没生物反应器通过摆动架的倾斜摆动,使培养液周期性间歇浸没组培苗,实现组培苗的快速生长。相关叙述正确是( )
    A.获得组织苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
    B.获得组培苗的步骤:外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
    C.间歇摆动提高培养液溶氧量,有利于组培苗进行有氧呼吸,提高生长速度
    D.经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
    3.通过植物细胞工程对光果甘草进行培养以获得药物甘草西定,过程如图所示。下列相关叙述正确的有( )
    A.过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养
    B.过程④常用射线或化学物质处理即可大量所需的突变体植株丙
    C.所得三种植株中乙和丙的遗传信息与甲相同,植株丁和甲是同一物种
    D.过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得,应将愈伤组织细胞悬浮培养
    4.花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑,紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的新品种,如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白,结果如图2所示。下列相关说法错误的是( )
    A.新品种的产生说明花椰菜和紫罗兰之间不存在生殖隔离
    B.图1中,②过程可以利用物理法和化学法诱导原生质体融合
    C.根据图2结果判定,最可能属于杂种植株的是4和5
    D.将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上,根据病斑面积占叶片总面积的百分比可筛选抗病性强的杂种植株
    5.科研人员利用野生型清水紫花苜蓿(2n=32)和里奥百脉根(2n=12)为材料培育抗鼓胀病的新型牧草,研究主要流程如下图。下列说法正确的是( )
    注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的功能
    A.用酶解法获得原生质体,需控制处理时间,以免酶破坏细胞膜
    B.②过程需要利用选择培养基筛选出杂种愈伤组织
    C.③过程诱导生芽的培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比值高于②过程
    D.图示技术可克服远缘杂交不亲和的障碍,③过程产生的再生植株是不可育的多倍体
    6.灌流式培养是把细胞和培养液一起加入反应器后,在细胞增长和产物形成过程中,不断地将部分培养液取出,同时又连续不断地灌注新的培养液。下列相关叙述错误的是( )
    A.进行动物细胞培养时,新鲜培养液中往往需要加入动物血清等天然成分
    B.反应器通常需保持95%的空气和5%的CO2的气体环境
    C.配制灌流式培养的培养液时应考虑细胞生存环境的渗透压
    D.当灌流式培养细胞的密度达到一定值时,不需要进行稀释再培养
    7.为确定治疗性克隆技术是否适用于治疗糖尿病,科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述正确的是( )
    A.小鼠皮肤细胞细胞核全能性的恢复依赖于自身细胞质
    B.获得的重组细胞经过程②后可直接获得胚胎干细胞悬浮液
    C.过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
    D.过程④采用胚胎移植技术
    8.继世界上首只克隆哺乳动物多利羊之后。中国科学家利用同样的技术克隆出了两只具有相同核基因的长尾狒猴“中中”和“华华”,标志着中国体细胞克隆技术走向成熟,实验用疾病模型猴批量克隆成为现实。下图表示体细胞克隆猴的技术流程,以下叙述正确的是( )
    A.图中的①是指去核,即去除MI期卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物
    B.体细胞克隆技术得到的猕猴的性状与提供胚胎成纤维细胞的个体的性状完全相同
    C.利用猿猴胚胎成纤维细胞进行体细胞核移植的难度高于胚胎细胞
    D.体细胞克隆技术依据的原理是动物细胞具有全能性
    9.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述正确的是( )
    A.制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理肝组织块
    B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右,以刺激细胞呼吸
    C.为了保证细胞培养所需的无毒环境,需添加适量的各种抗生素
    D.本实验应设置对照实验,以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小
    10.目前,肝移植是治疗肝衰竭的唯一有效方法。但由于肝脏器官的短缺,肝细胞移植被作为肝移植的替代策略。用海藻酸盐微胶囊包裹可增殖的人肝细胞类器官(eLO),并用于移植是治疗肝衰竭的一种有前途的策略。下列叙述错误的是( )
    A.供体肝组织需先用胰蛋白酶将其分散,再进行原代培养
    B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右,主要作用是维持培养液的pH值
    C.异体移植细胞会发生免疫排斥,用海藻酸盐包裹有利于形成免疫保护屏障
    D.若eLO与空微囊治疗组的效果相当,可证明微胶囊包裹不影响肝细胞功能
    11.近年来由于栖息地丧失和人为捕猎,亚洲黑熊数量骤减,近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊,其过程如下图。以下说法正确的是( )
    A.胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
    B.A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
    C.D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
    D.E后代遗传性状与A和C一致,F后代遗传性状与B一致
    12.目前,精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一,该方法以精子作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是( )
    A.获得外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA聚合酶
    B.导入外源基因精子能与从卵巢中获取的卵细胞直接完成②过程
    C.②采用体外受精技术,受精的标志是观察到3个极体
    D.④过程是胚胎移植,需移植到同种生理状态相同的代孕雌鼠子宫中
    13.我国科研人员利用胚胎工程技术培育出了“试管牛”,操作流程如图所示。下列有关叙述错误的是( )
    A.过程①是对供体母牛注射了促性腺激素,使其排出更多的卵子
    B.进行过程③前,要对代孕母牛进行同期发情处理
    C.“试管牛”的遗传特性与代孕母牛一致
    D.胚胎分割是要将囊胚的内细胞团均等分割
    14.2023年9月,我国科学家在猪体内培养胚胎人源肾脏达28天,这是科学家第一次能够在另一物种体内培养出实体人源器官,具体过程如图所示。下列叙述错误的是( )
    A.细胞甲常选择受精卵,因其具有发育为个体的能力
    B.可采用胚胎分割技术提高胚胎成活率
    C.该过程利用的现代生物技术不仅仅是早期胚胎培养和胚胎移植
    D.代孕母猪对外来胚胎不发生免疫排斥是胚胎移植能存活的基础
    15.植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用,并且取得了显著的社会效益和经济效益。如位列中华“九大仙草”之首的铁皮石斛(二倍体),已通过植物组织培养技术实现了工厂化量产。下列相关叙述正确的是( )
    A.取用铁皮石斛的花粉粒经花药离体培养得到的植株高度不育
    B.铁皮石斛体细胞与绞股蓝体细胞杂交属于无性生殖,其结果可获得杂种植株
    C.取铁皮石斛茎尖组织培养获得的无毒幼苗可抵抗病毒的侵染
    D.组织培养时外植体用化学试剂消毒后需经自来水冲洗才可用于接种
    16.下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径,下列叙述正确的是( )
    A.该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
    B.过程①需控制好培养基中植物激素的比例
    C.植物细胞工程技术获得的紫杉醇属于红豆杉基本生命活动必需的物质
    D.可将悬浮培养的细胞置于低渗溶液中涨破获取紫杉醇
    17.苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物,灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能,某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株,过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是( )
    A.①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
    B.图中过程与植物体细胞杂交过程相比,去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
    C.离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶,目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
    D.图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验,获得的融合株染色体数目加倍
    18.下图为单克隆抗体的制备过程(图中的抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团),下列相关叙述错误的是( )
    A.小鼠经抗原多次免疫后取其脾脏,获取B淋巴细胞,1号试管内只含有特定的B淋巴细胞
    B.骨髓瘤细胞培养时会出现细胞贴壁和接触抑制,因此细胞融合前需用胰蛋白酶处理
    C.3号试管的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特异性抗体
    D.杂交瘤细胞经筛选并克隆化培养获得的4种抗体都能与抗原特异性结合
    19.单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体,但拥有类似于正常干细胞分裂分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如图所示。下列叙述不正确的是( )
    A.体外受精前应将卵母细胞培养至MⅠ中期
    B.建立的单倍体胚胎干细胞中只含一条性染色体X或Y
    C.上述过程涉及动物细胞培养、体外受精和核移植等操作
    D.理论上可用物质激活卵母细胞完成MⅡ实现由①直接转变为④
    20.基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实验。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术,改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”,使其“变性”,然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用),最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列相关叙述错误的是( )
    A.体外培养卵母细胞时,需将培养皿置于只含CO2的培养箱中进行培养
    B.需对代孕母鼠进行同期发情处理后,再进行胚胎移植
    C.“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与,其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
    D.移植后的囊胚进一步扩大,会导致滋养层破裂,胚胎从其中伸展出来
    二、多项选择题(本题共10小题,每小题3分,共30分。在每小题给出的四个选项中,每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分,选对但不全的得1分,错选或不答的得0分。)
    21.关于胚胎早期发育,正确的是( )
    A.孵化前,细胞平均体积在不断减少,胚胎所含的有机物总量不断降低
    B.受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的,囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段
    C.卵裂是有丝分裂和减数分裂
    D.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚,因为此时细胞还未分化
    22.研究人员制备哺乳动物膀胱生物反应器,用其获得人体特殊功能蛋白W的基本过程如下图所示。下列有关叙述错误的是( )
    A.步骤①和②所代表的操作分别是显微注射、受精卵获能
    B.与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制
    C.步骤③中代孕母体需做超数排卵处理
    D.转基因的动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞中都能表达W基因
    23.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞,制备流程如图。下列叙述错误的是( )
    A.用胰蛋白酶将细胞间的蛋白质消化后可获得分散的胚胎干细胞
    B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
    C.细胞a和细胞b内的核基因不同,所以全能性高低不同
    D.为获得更多的囊胚,可给小鼠注射雄性激素以促进雄鼠产生更多的精子
    第Ⅱ卷(非选择题)
    二、非选择题(共3小题,共30分。)
    24.科学家通过植物体细胞杂交的方法,培育出第一个杂种植物:番茄—马铃薯(番茄2N=24,马铃薯4N=48)。虽然这种植株并没有像科学家预料的那样,地上结番茄,地下结马铃薯,但却为植物体细胞杂交在生产实践中的应用拉开了帷幕。以下为番茄和马铃薯体细胞杂交的步骤:
    回答下列问题:
    (1)植物体细胞杂交技术的原理是________________和________________番茄—马铃薯植株染色体数目是________________。
    (2)①过程常用________________,________________除去植物细胞的细胞壁。
    (3)将杂种细胞培育成试管苗经历的过程④和过程⑤分别称为________________和________________。
    25.野生草莓是二倍体植物,其浆果芳香多汁,营养丰富,素有“水果皇后”的美称。但草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒易危害草莓,导致减产。培育脱毒和抗病毒的草莓品种是解决草莓产量下降的有效方法。利用草莓茎尖培养脱毒苗过程如图甲,利用基因工程培育抗病毒草莓苗过程如图乙,请回答下列相关问题:
    (1)图甲中草莓脱毒苗培养依据的主要原理是_______________,到生根培养的过程中,茎叶与根产生的时间段不同,其调控方法是调整培养基的获得试管苗,对脱毒苗进行病毒检测时,可采用________________方法检测病毒的基因。
    (2)图乙中A代表的是___________,B代表的试剂是____________。受体细胞导入目的基因的方法除图示方法外,我国科学家独创的一种方法是___________________。
    (3)若在个体水平鉴定草莓植株是否具有抗病毒特性的方法是_____________,观察其生长状况。
    26.植物体在干旱、虫害或微生物侵害等胁迫过程中会产生防御物质,这类物质属于次生代谢产物。次生代谢产物在植物抗虫、抗病等方面发挥作用,也是药物、香料和色素等的重要来源。次生代谢产物X的研发流程如下:
    筛选高产细胞→细胞生长和产物X合成关系的确定→发酵生产X
    回答下列问题:
    (1)获得高产细胞时,以X含量高的植物品种的器官和组织作为_________,经脱分化形成愈伤组织,然后通过液体振荡和用一定孔径的筛网进行_________获得分散的单细胞。
    (2)对分离获得的单细胞进行_________培养,并通过添加_________或营养缺陷培养方法获取细胞周期同步、遗传和代谢稳定、来源单一的细胞群。为进一步提高目标细胞的X含量,将微生物菌体或其产物作为诱导子加入到培养基中,该过程模拟了_________的胁迫。
    (3)在大规模培养高产细胞前,需了解植物细胞生长和产物合成的关系。培养细胞生产次生代谢产物的模型分为3种,如图所示。若X只在细胞生长停止后才能合成,则X的合成符合图_________(填“甲”“乙”“丙”),根据该图所示的关系,从培养阶段及其目标角度,提出获得大量X的方法。_________
    (4)多种次生代谢产物在根部合成与积累,如人参、三叶青等药用植物,可通过_________培养替代细胞悬浮培养生产次生代谢产物。随着基因组测序和功能基因组学的发展,在全面了解生物体合成某次生代谢产物的_________和_________的基础上,可利用合成生物学的方法改造酵母菌等微生物,利用_________工程生产植物的次生代谢产物。
    27.不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物,但由于红豆杉野生资源匮乏,且红豆杉植株紫杉醇含量极低,导致了紫杉醇的供应严重不足。因此,研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合,培育能产生紫杉醇的柴胡,过程如下图。请回答下列问题。
    注:X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等,使细胞不再持续分裂;碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂。
    (1)过程①中需将植物组织经____后接种于MS培养基上诱导____过程,产生愈伤组织。
    (2)过程②中将愈伤组织加入____酶液去壁,离心后弃去上清液,加入洗液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____。对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为____。
    (3)采用二乙酸荧光素(FDA)法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光,当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质,该荧光物质不能透过活细胞质膜,会留在细胞内发出荧光。据此应选择____的原生质体用于融合。
    (4)过程③常用的化学试剂是____,经诱导融合后,只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团,原因是____。
    (5)过程④中,再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y,逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比,未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时,未分化细胞群将分化出芽,则植物激素X的名称是____。
    (6)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定,结果如下:
    由表可知,后代植株中____类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源亲本____的染色体,另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中,而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组,作出以上推测的依据是____。
    28.M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。回答下列问题:
    (1)在构建含有片段F的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是____________,这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的____________断开。
    (2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,需要定期更换培养液,目的是____________。
    (3)与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率更低,原因是____________。
    (4)鉴定转基因动物:以免疫小鼠的____________淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选融合杂种细胞,制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路。____________。
    29.在体细胞克隆猴的培育过程中,我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞。有评论者认为该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”,攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示,请结合图示回答问题。
    注:Kdm4d为组蛋白去甲基化酶,TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂,二者可以调节基因的表达,促进囊胚的发育,提高代孕母猴的妊娠率。
    (1)采集卵子之前,需给母猴注射适量的__________,以增加排卵。卵母细胞需培养到__________期,再通过__________法去除细胞核,得到去核卵母细胞。
    (2)重构胚的发育类似正常的早期胚胎发育,培养液的成分除了有机盐、氨基酸、无机盐等营养物质以外,还需添加__________。代孕母猴对移入子宫的重构胚__________,这为胚胎在受体内的__________提供了可能。
    (3)胚胎移植的实质是__________。胚胎分割可以增加胚胎数量,在对囊胚进行分割时要注意__________。
    30.白头叶猴是我国特有的珍稀灵长类动物。下图是某兴趣小组关于扩大白头叶猴种( )
    群数量的技术路线构想。回答下列问题:
    (1)体外培养白头叶猴的体细胞时,培养基中应含有细胞所需要的____(答2点)等营养物质,此外,还需要加入____等一些天然成分。
    (2)采集到的白头叶猴卵母细胞,需在体外培养到_______________期。去除动物卵母细胞的细胞核,目前普遍采用_______________法。
    (3)获得的重构胚一般可用____(答1点)等物理或化学方法激活,从而使其能够完成_______________进程。通过图中技术路线获得的白头叶猴后代与核供体的性状体外培养体
    并不完全相同,其原因可能是_______________。
    (4)除上述技术路线外,还可以使用____(答1点)等现代生物技术来人工繁育白头叶猴。
    31.为了避免母亲把线粒体缺陷遗传给孩子,医生去除线粒体捐赠者的卵母细胞中的细胞核,接着用患者(母亲)卵母细胞中的细胞核取而代之,最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育,即“三亲婴儿”。“线粒体捐赠”的其中一种方式为纺锤体移植,过程如图所示。回答下列有关问题:
    (1)利用纺锤体移植培育“三亲婴儿”的过程中涉及的主要技术手段有_____________(答出2点即可)。
    (2)在提取捐赠者的卵母细胞前通常需要用_对其进行超数排卵处理。纺锤体移植是指在受精前将患者(母亲)的_____________期卵母细胞中的___________复合物提取出来,移植到捐赠者的去核卵母细胞中,再与父亲的精子结合完成受精作用,“三亲婴儿”的培育属于_____________(填“有性”或“无性”)生殖。
    (3)精子与卵母细胞在体外受精后,将受精卵移入动物胚胎的培养液中继续培养,哺乳动物胚胎的培养液成分一般比较复杂,除一些水和无机盐外,还需要添加___________(答出2点即可)等营养成分和物质。
    (4)与试管婴儿技术相比,设计试管婴儿技术的主要区别是植入前对胚胎进行_____________诊断。虽然我国政府对于生殖性克隆人保持四不原则,但我国不反对治疗性克隆,在利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病时,去除卵母细胞细胞核的同时,可用微型吸管把位于_____________之间的第一极体一并吸出。
    32.如图所示为两种途径获得高产优质奶牛的过程,回答下列问题:
    (1)途径Ⅰ中卵母细胞去核常用的方法是显微操作法,也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法,这些方法的使用均不能穿透卵母细胞的_____________结构。
    (2)途径Ⅱ中“?”表示_____________处理,人工受精前要对精子进行获能处理,其原因是__________________________。
    (3)途径Ⅰ和途径Ⅱ均用到了胚胎移植技术,胚胎移植前除需进行遗传病筛查外,途径Ⅱ中胚胎还需进行鉴定。
    (4)途径Ⅰ中重构胚需用物理或化学方法激活,目的是:__________________________。
    (5)请说出两种途径获得的高产奶牛体细胞核中遗传物质来源的差异:
    ____________________________________________________。
    33.我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术,成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠,实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示,请回答下列问题:
    (1)卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程;体外培养动物细胞时,首先应保证其处于____________的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制的气体条件是_____________。
    (2)要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚,此卵母细胞应体外培养到____________期。在对卵母细胞进行去核时,除了显微操作外还可以采用___________(至少答出两种)等方法处理,得到的重构胚通常需要发育到____________阶段才能进行胚胎移植。
    (3)不考虑致死情况,得到的孤雄小鼠性染色体组成为____________。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠,在分割囊胚阶段的胚胎时,要注意____________。利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是________________________(从遗传物质角度分析)。
    答案以及解析
    1.答案:C
    解析:A、植物组织培养过程中包括脱分化和再分化两个阶段,A正确;
    B、培养基中添加的生长素和细胞分裂素的浓度、比例都将影响植物细胞的发育方向,若生长素和细胞分裂素的比值高有利于根的分化抑制芽的分化,比值低时有利于芽的分化抑制根的分化,比例适中有利于愈伤组织的形成,B正确;
    C、愈伤组织是不定形的薄壁细胞团块,细胞内没有叶绿体,代谢类型为异养需氧型,C错误;
    D、诱导愈伤组织期间一般不需要光照,再分化阶段必须给予适当时间和强度的光照,D正确。
    故选C。
    2.答案:C
    解析:A、琼脂是凝固剂,不提供营养,A错误;
    B、外植体脱分化可以形成愈伤组织,愈伤组织再分化形成胚状体,B错误;
    C、间歇摆动提高培养液溶氧量,有利于组培苗进行有氧呼吸,有氧呼吸能为组培苗的生长发育提供能量,因此可以提高生长速度,C正确;
    D、植物组织培养是在无菌条件下进行的,经过间歇浸没培养获得的植株不需要消毒处理,D错误。
    故选C。
    3.答案:D
    解析:A、生长素/细胞分裂素的值高时,利于生根,该值低时利于生芽,过程③需先生芽,再生根,所以需要先在生长素与细胞分裂素比例低的培养基中培养,A错误;
    B、过程④常用射线或化学物质处理后经筛选,并进一步培养才能获得大量所需的突变体植株丙,B错误;
    C、所得三种植株中乙和丙的遗传信息不一定与甲相同,因为植株丙是诱变育种得到的,遗传信息可能会发生改变,C错误;
    D、过程⑥中甘草西定可通过植物细胞培养获得,应将愈伤组织细胞悬浮培养,即植物组织培养,D正确。
    4.答案:A
    解析:A、花椰菜和紫罗兰是两个不同的物种,因此它们之间存在生殖隔离,A错误;B、图1中,②过程是原生质体融合的过程,可以利用物理法和化学法诱导原生质体融合,B正确;C、根据图谱分析4号和5号个体含有两种类型的蛋白质,最可能是杂种细胞,C正确;D、可将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株,正确。故选A。
    5.答案:C
    解析:A、细胞壁成分是纤维素和果胶,用纤维素酶和果胶酶获得原生质体,细胞膜无纤维素和果胶,由于酶具有专一性,不会破坏细胞膜,A错误;B、②过程是脱分化形成愈伤组织,不需要选择培养基筛选,B错误;C、②过程是脱分化形成愈伤组织,细胞分裂素与生长素的浓度比值低,③过程诱导生芽的培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比值高,C正确;D、图示技术是植物体细胞杂交技术,该技术可克服远缘杂交不亲和的障碍,使远缘杂交成为可能,其原理是染色体变异,③过程产生的再生植株是可育的多倍体,D错误。故选C。
    6.答案:D
    解析:A、培养动物细胞时,常常需要在培养液中加入动物血清等天然成分,A正确;
    B、进行动物细胞培养时通常置于含有95%空气和5%的CO2的混合气体的培养箱中培养,B正确;
    C、动物细胞的细胞外液的渗透压是相对稳定且适宜的,配制灌流式培养液时应考虑细胞生存环境的渗透压,C正确;
    D、由于培养瓶中生存空间和营养是有限的,当细胞增殖达到一定密度后,需要分离出一部分细胞进行稀释后再培养,否则会影响细胞进一步的增殖,D错误。
    故选D。
    7.答案:C
    解析:A、小鼠皮肤细胞细胞核全能性的恢复并不完全依赖于自身细胞质,虽然细胞质在提供支持和调控环境方面发挥重要作用,但细胞核的完整性和外部环境的调控同样不可或缺,A错误;B、获得的重组细胞经过程②后需要用胰蛋白酶消化后将细胞分散开,才能获得胚胎干细胞悬浮液,B错误;C、细胞分化的实质是基因的选择性表达,过程③是诱导分化过程,其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达,C正确;D、过程④采用器官或细胞移植,D错误。故选C。
    8.答案:C
    解析:A、图中的①是指对卵母细胞进行去核,即去除MⅡ期卵母细胞中的纺锤体一染色体复合物,A错误; B、由于细胞核来自于胚胎成纤维细胞,所以体细胞克隆技术得到的猕猴的大多数性状与提供胚胎成纤维细胞的个体的性状相同,而不是完全相同,B错误; C、猕猴胚胎成纤维细胞属于体细胞,动物体细胞分化程度高,表现全能性十分困难,而胚胎细胞分化程度低,所以利用猕猴胚胎成纤维细胞进行体细胞核移植的难度高于胚胎细胞,C正确; D、体细胞克隆技术依据的原理是动物细胞的细胞核具有全能性,D错误。
    故选:C。
    9.答案:D
    解析:A、动物细胞培养制备细胞悬液时,应用胰蛋白酶进行处理,A错误;
    B、恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右,以维持培养液的pH,B错误;
    C、为了防止杂菌污染,保证细胞培养所需的无毒环境,需适量添加抗生素,C错误;
    D、为了检测药物对甲、乙细胞的毒性大小,应设置培养液中不加该药物的对照实验,D正确。
    故选D。
    10.答案:D
    解析:A、供体肝组织要用机械法或胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理分散成单个细胞,再进行原代培养,A正确;
    B、动物细胞培养时,恒温培养箱中的CO2浓度应维持在5%左右,主要作用是维持培养液的pH值,B正确;
    C、异体移植细胞会发生免疫排斥,用海藻酸盐包裹形成能够防止免疫系统识别,C正确;
    D、若海藻酸盐微胶囊包裹可增殖人肝细胞类器官(eLO)与空微囊治疗组的效果相当,说明空微囊也可以治疗肝衰竭,不能证明微胶囊包裹不影响肝细胞功能,D错误。
    故选D。
    11.答案:B
    解析:A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵,A错误;
    B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力,C的精子获能后才能发生受精,B正确;
    C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎,所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理,目的是使体内的生理环境保持一致,提高胚胎的存活率,而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞,所以不需要同期发情处理,C错误;
    D、E后代遗传物质来源于A和C,F后代遗传物质来源于A和B,D错误。
    故选B。
    12.答案:D
    解析:A、获得外源基因一般需要用到限制酶,构建基因表达载体用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶,A错误;B、导入外源基因的精子需获能培养后才能与从卵巢中获取的卵细胞完成②过程,B错误;C、观察卵子是否受精的重要标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体,两原核融合形成合子标志着受精作用完成,C错误;D、④过程是胚胎移植,早期胚胎需移植到与供体有相同的生理基础的代孕雌鼠子宫内,D正确。
    13.答案:C
    解析:A、过程①是对供体母牛注射了促性腺激素,使其超数排卵,排出更多的卵子,A正确;B、进行过程③前,要对代孕母牛进行同期发情处理,因为哺乳动物发情排卵后,不管是否妊娠,发情后母牛的生殖器官的生理变化相同,为供体胚胎移入受体提供了相同的生理环境,B正确;C、代孕母牛“试管牛”的遗传特性与代孕母牛无关,C错误;D、胚胎分割时要将囊胚的内细胞团均等分割,防止影响胚胎的进一步发育,D正确。故选C。
    14.答案:B
    解析:A、细胞甲常选择受精卵,因其具有发育为个体的能力,其它细胞没有,A正确;
    B、可采用胚胎分割技术提高胚胎利用率,而不是能提高成活率,B错误;
    C、本研究主要涉及基因工程、早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术,C正确;
    D、代孕母猪(受体)对外来胚胎不发生免疫排斥是胚胎移植能存活的基础,D正确。
    故选B。
    15.答案:AB
    解析:A、用铁皮石斛的花粉粒经花药离体培养得到的植株是单倍体,没有同源染色体,因此该单倍体高度不育,A正确;B、植物体细胞杂交技术没有生殖细胞的形成和结合,应属于无性生殖,结果是获得杂种植株,B正确;C、植物茎尖组织附近的病毒极少,甚至无病毒,因此利用茎尖植物组织培养获得的植株几乎无病毒,从而可以获得无毒幼苗,但该无毒幼苗不一定能抵抗病毒的侵染,C错误;D、组织培养时外植体用化学试剂消毒后需经无菌水冲洗才可用于接种,D错误。故选AB。
    16.答案:ACD
    解析:A、图中利用的原理是细胞增殖,A错误;B、图中①是脱分化过程,而决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例,因此该过程需控制好培养基中植物激素的比例,B正确;C、植物细胞工程技术获得的紫杉醇是次生代谢产物,不属于红豆杉基本生命活动必需的物质,C错误;D、植物细胞具有细胞壁,在低渗溶液中也不会涨破,D错误。故选ACD
    17.答案:ABD
    解析:A、①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合,PEG不具有诱导细胞壁再生的作用,A错误;B、去除细菌细胞壁和植物细胞的细胞壁都可以用酶解法,但所用酶的种类不同;图中为细菌细胞的杂交过程,与植物体细胞杂交过程相比,诱导融合的方法不完全相同;图中过程与植物体细胞杂交所依据的原理均有细胞膜具有一定的流动性,但植物体细胞杂交还利用了植物细胞具有全能性的原理,将杂种细胞培育为杂种植物,B错误;C、溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁。离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶,目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体,C正确;D、筛选到的融合株,还要从个体生物学水平检测其是否具有杀灭玉米螟和杀灭蚊子的能力,所以图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验,获得的融合株既有苏云金杆菌的基因,又有灭蚊球孢菌的基因,但这两种生物是原核生物,不含染色体,D错误。故选ABD。
    18.答案:AB
    解析:A、由于抗原上有多种抗原表位,不同的抗原表位可以结合不同的B淋巴细胞,导致增殖和分化,因此1 号试管内可能含有多种 B 细胞,A错误;
    B、普通的体细胞培养会出现细胞贴壁和接触抑制现象,而骨髓瘤细胞能无限增殖,不会出现细胞贴壁和接触抑制现象,因此细胞融合前不需用胰蛋白酶处理,B错误;
    C、3 号试管的杂交瘤细胞是特定的抗原表位刺激产生的效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的,既能迅速大量增殖又能合成和分泌特异性抗体,C正确;
    D、杂交瘤细胞经筛选并克隆化培养获得的 4 种抗体,在抗原上都存在相应的抗原表位,因此 4 种抗体都能与抗原特异性结合,D正确。
    故选AB。
    19.答案:ABD
    解析:A、体外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期,A错误;
    B、精子中含有的性染色体为X染色体或Y染色体,卵细胞中含有的性染色体为X染色体,由图可知,在建立单倍体胚胎干细胞过程中,是去除雄原核,所以获得的单倍体干细胞中含有的性染色体是X染色体,而不含Y染色体,B错误;
    C、由图可知,在培养单倍体胚胎干细胞的过程中,首先发生体外受精,然后通过核移植去除雄原核,再对去除雄原核的细胞进行培养,C正确;
    D、激活卵母细胞完成MI得到的是次级卵母细胞和极体,不能得到单倍体胚胎干细胞,D错误。
    20.答案:ACD
    解析:A、体外培养卵母细胞时,需将培养皿置于含95%空气和5%CO2的培养箱中培养,A错误;
    B、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为个体的技术;胚胎移植的实质是早期胚胎在同种生理环境条件下空间位置的转移,为了保证胚胎移植的成功率需对代孕母鼠进行同期发情处理后,再进行胚胎移植,B正确;
    C、“孤雌小鼠”是由修饰后的次级卵母细胞和一个第二极体结合后发育形成的,同时由于配子在形成过程中会经历减数分裂的基因重组,或发生基因突变,将导致“孤雌小鼠”的基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同,C错误;
    D、移植后的囊胚进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫作孵化,D错误。
    21.答案:AB
    解析:A.一个精原细胞经过减数分裂后可直接产生4个精细胞,精细胞还需要经过变形才能成为精子,A正确;
    B.受精卵发育为囊胚的过程是在透明带内完成的,囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段,B正确。
    22.答案:ACD
    解析:A、①表示将目的基因导入受体细胞,常采用显微注射的方法将载体注入受精卵,继而对受精卵进行早期胚胎的培养(②),直到适合移植,A错误;B、与乳腺生物反应器(只能是雌性,其性成熟)相比,膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制,B正确;C、步骤③的代孕性体需进行同期发情处理,这样移植胚胎容易成功着床,C错误;D、W基因是选择性表达,只在膀胱上皮细胞中表达,D错误。故选ACD。
    23.答案:CD
    解析:A、胰蛋白酶可以将细胞间的蛋白纤维成分酶解,使细胞分散开,获得单个细胞,A正确;
    B、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养,以维持培养液的酸碱平衡,B正确;
    C、图中a为内细胞团细胞,b为滋养层细胞,细胞和细胞b是由同一个受精卵分裂分化形成的,含有相同的核基因,C错误;
    D、为获得更多的囊胚,采用激素(促性腺激素)注射促进雌鼠产生更多的卵母细胞(超数排卵),D错误。
    故选CD。
    24.答案:(1)细胞膜具有一定的流动性;植物细胞具有全能性;72
    (2)纤维素酶;果胶酶
    (3)脱分化;再分化
    解析:(1)植物体细胞杂交技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性,番茄2N=24,马铃薯4N=48,所以番茄—马铃薯细胞中有72条染色体。
    (2)过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b,通常使用的纤维素酶和果胶酶。
    (3)过程④是脱分化过程形成愈伤组织e,过程⑤是再分化生成完整植株。
    25.答案:(1)植物细胞的全能性;生长素和细胞分裂素的比例PCR技术、核酸分子杂交、DNA分子杂交
    (2)已转入含抗病毒基因表达载体的农杆菌秋水仙素;花粉管通道法
    (3)将相关草莓病毒(草莓斑驳病毒或草莓轻型黄边病毒)分别接种到转基因和非转基因的草莓植株上
    解析:(1)图甲中草莓脱毒苗培养属于植物组织培养技术,依据的主要原理是植物细胞的全能性。调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例可获得试管苗,对脱毒苗进行病毒检测时属于分子水平的检测,其方法有PCR技术、核酸分子杂交、DNA分子杂交。
    (2)图乙中利用的是农杆菌转化法将表达载体导入植物细胞,则A代表已转入含抗病毒基因表达载体的农杆菌。图乙是单倍体育种方法,需要用B秋水仙素将单倍体愈伤组织的染色体加倍。我国科学家独创的导入植物细胞的方法是花粉管通道法。
    (3)个体水平上的鉴定方法为抗病鉴定,即在个体生物学水平鉴定草莓植株是否具有抗病毒特性的方法是将相关草莓病毒(草莓斑驳病毒或草莓轻型黄边病毒)分别接种到转基因和非转基因的草莓植株上,观察其生长状况进行判断。
    26.答案:(1)外植体;过滤
    (2)扩大;过量的胸苷;微生物侵害
    (3)丙;将细胞培养至稳定期(即停止生长时期)一定时间后,通过分离提纯获得大量X
    (4)根的水培养;相关基因组成;基因表达过程;基因工程和发酵
    解析:(1)植物体的器官和组织、细胞都可以作为外植体,经脱分化形成愈伤组织,将愈伤组织进行振荡培养,使其分散成小的细胞团或单细胞,然后用适当孔径的不锈钢筛网过滤,除去大的细胞团和残渣,离心除去小的残渣,得到单细胞悬浮液。
    (2)分离获得的单细胞进行扩大培养,并通过添加过量胸苷,(向细胞培养液中加入过量胸首(TdR),处于S期的细胞立刻被抑制,洗去TdR后可恢复正常分裂,而处于其它时期的细胞不受过量TdR影响)或营养缺陷培养方法获取细胞周期同步、遗传和代谢稳定、来源单一的细胞群。将微生物菌体或其产物作为诱导子加入到培养基中,模拟了微生物侵害的迫害条件。
    (3)由题可知X只在细胞生长停止后才能合成,所以丙图符合。所以要获得大量X的方法,是将细胞培养知稳定期(即停止生长时期)一定时间后,通过分离提纯获得大量X。
    (4)由题知,多种次生代谢产物在根部合成与积累,所以要对根进行培养,为了方便进行次生代谢物的收集,可以对根进行水培。要大量获得次生代谢物可以通过基因工程,将相关基因转入酵母菌体内,然后通过发酵工程获得,基因工程的前提是要了解生物体合成某次生代谢产物的相关基因组成和基因表达过程。
    27.答案:(1)①.消毒②.脱分化
    (2)①.纤维素酶、果胶酶②.去除原生质体上残留的酶液③.X射线、碘乙酰胺
    (3)有荧光
    (4)①.PEG##聚乙二醇②.杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补,使细胞恢复正常分裂
    (5)细胞分裂素
    (6)①.乙②.柴胡③.甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似,且含有双亲的DNA片段
    解析:(1)植物组织培养之前需要对外植体进行消毒,之后诱导脱分化形成愈伤组织。
    (2)原生质体为去除了植物细胞壁后的结构,要获得原生质体,需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞;为了去除原生质体上残留的酶液需要加入洗液多次洗涤后获得原生质体;要培育能产生紫杉醇的柴胡,红豆杉是供体需要X射线照射,柴胡是受体需要碘乙酰胺处理。
    (3)根据题干信息可知,荧光的强度与原生质体的活力呈正相关,因此应选择发荧光的原生质体用于融合。
    (4)诱导原生质体融合常用的的化学方法有聚乙二醇融合法;X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等,使细胞不再持续分裂,碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂,单独的红豆杉和柴胡细胞都不能分裂,杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补,使细胞恢复正常分裂,因此只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。
    (5)在植物组织培养中,生长素/细胞分裂素比例高时有利于根的分化,比例低时有利于芽的分化,比例适中促进愈伤组织的形成,因此植物激素X的名称是细胞分裂素。
    (6)根据表格信息可知,植株后代乙无红豆杉DNA片段,说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似,且含有双亲的DNA片段,说明甲、丙植株属于杂种植株,它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成,红豆杉亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中,而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组。
    28.答案:(1)限制性核酸内切酶(限制酶);磷酸二酯键
    (2)清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,同时给细胞提供足够营养
    (3)动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难
    (4)B;取动物A和克隆动物A的肝组织细胞,分别提取蛋白质进行抗原—抗体杂交
    解析:(1)基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶),故在构建含有片段F的重组质粒过程中,切割质粒DNA的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶)。限制酶是作用于其所识别序列中两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
    (2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时,从培养液吸收营养,往培养液排出代谢产物,所以需要定期更换培养液,清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,同时给细胞补充足够营养。
    (3)由于动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难,故与胚胎细胞核移植技术相比,体细胞核移植技术的成功率低。
    (4)先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,制备M蛋白的单克隆抗体;若要利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活,如果M基因已经失活,则克隆动物A中无法产生M蛋白的单克隆抗体,则可利用抗原—抗体杂交技术进行检测,故实验思路为:提取克隆动物A的肝细胞,培养肝细胞,在肝细胞加入带有荧光标记的抗Mda,检测有无荧光出现。若有荧光出现,说明克隆动物A中的M基因未失活;若无荧光出现,说明克隆动物A中的M基因失活。
    29.答案:(1)促性腺激素;MⅡ;显微操作
    (2)血清等天然成分;不发生免疫排斥反应;存活
    (3)早期胚胎在生理条件相同的条件下空间位置的转移;将内细胞团均等分割
    解析:(1)用促性腺激素处理,能促使卵巢产生更多的卵细胞,使其超数排卵。卵母细胞培养到减数第二次分裂中期即MⅡ期(该期细胞中含有激发细胞核全能性的物质,便于重组细胞的发育),再通过显微操作法去除细胞核,得到去核卵母细胞。
    (2)人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,在使用合成培养基时,通常需加入血清等一些天然成分。代孕母猴对移入子宫的重构胚不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
    (3)①是胚胎移植,实质是早期胚胎在生理条件相同的条件下空间位置的转移。分割囊胚时要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
    30.答案:(1)糖类、氨基酸、无机盐、维生素;血清
    (2)MⅡ;显微操作
    (3)电刺激;Ca2+载体;乙醇;蛋白酶合成抑制剂;细胞分裂和发育;二者的核遗传物质虽然相同,但细胞质中的遗传物质有区别
    (4)人工授精;体外受精;胚胎分割等
    解析:(1)体外培养动物的体细胞时,培养基中应含有细胞所需要的糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质,此外,还需要加入血清等一些天然成分。
    (2)采集到的动物卵母细胞,需在体外培养到MⅡ期。去除动物卵母细胞的细胞核,目前普遍采用显微操作法。
    (3)获得的重构胚一般可用物理或化学方法进行激活,如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等,从而使其能够完成细胞分裂和发育进程。通过图中路线获得的白头叶猴后代与核供体的性状并不完全相同,
    其原因可能是二者的核遗传物质虽然相同,但细胞质中的遗传物质有区别。
    (4)除上述技术路线外,还可以使用人工授精、体外受精、胚胎分割等现代生物技术来人工繁育白头叶猴
    31.答案:(1)动物细胞核移植技术、动物细胞培养技术、体外受精技术、胚胎移植技术
    (2)促性腺激素MⅡ纺锤体一染色体有性
    (3)糖类、氨基酸、维生素、核苷酸、血清
    (4)遗传学卵细胞膜与透明带
    解析:(1)根据题意可知,“三亲婴儿”的培育涉及核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。
    (2)促性腺激素可促进雌性个体超数排卵。去核处理的实质是去除纺锤体-染色体复合物,纺锤体移植是指在受精前将患者(母亲)的处于减数第二次分裂后期卵母细胞(经受精作用后才能进一步完成减数分裂)中的纺锤体-染色体复合物提取出来。“三亲婴儿”的培育涉及受精作用,属于有性生殖。
    (3)动物细胞培养液中常需加入血清以满足一些复杂成分的需求,加入抗生素以减少污染的发生。
    (4)与试管婴儿技术相比,设计试管婴儿技术的主要区别是植入前对胚胎进行遗传学诊断(或基因检测或基因诊断),确保胚胎的健康情况,如本题应确保胚胎不含有相关缺陷线粒体。第一极体位于卵细胞膜与透明带之间。
    32.答案:(1)透明带
    (2)同期发情;精子不能直接与卵子受精,必须经获能处理后才能获得受精能力
    (3)性别
    (4)使重构胚能完成细胞分裂和发育进程
    (5)途径Ⅰ获得的高产奶牛细胞核遗传物质只来源于高产奶牛;途径Ⅱ获得的高产奶牛细胞核遗传物质来源于优质公牛和高产奶牛
    解析:(1)卵母细胞去核常用的方法是显微操作法,也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法,这些方法的使用均不能穿透卵母细胞的透明带结构。
    (2)途径工中“?”表示同期发情处理,人工受精前要对精子进行获能处理,其原因是精子不能直接与卵子受精,必须经获能处理后才能获得受精能力。
    (3)胚胎移植前除需进行遗传病筛查外,途径工中胚胎还需进行性别鉴定。
    (4)途径I中重构胚需用物理或化学方法激活,目的是:使重构胚能完成细胞分裂和发育进程。
    (5)途径I获得的高产奶牛细胞核遗传物质只来源于高产奶牛;途径工获得的高产奶牛细胞核遗传物质来源于优质公牛和高产奶牛。
    33.答案:(1)脱分化;无菌、无毒;5%的空气和5%的CO2的混合气体
    (2)MⅡ(减数第二次分裂中期)梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理;桑葚胚或囊胚
    (3)XX,XY或YY;将内细胞团均等分割;遗传物质相同,可以基本排除由基因不同造成的个体差异
    解析:(1)卵细胞激活转化成phFSC,通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC,获得甲,从而得到孤雌小鼠。精子激活转化成ahFSC,通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC,获得乙,从而得到孤雄小鼠。卵细胞是高度分化的细胞,转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段。体外培养时,首先应保证其处于无菌、无毒的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是95%空气与5%二氧化碳的混合气体,二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH值。故答案为:脱分化,无菌、无毒,95%的空气和5%的CO2的混合气体。
    (2)重组细胞时,需将去核卵母细胞培养至减数第二次分裂中期。要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚,在对卵母细胞进行去核时,除了显微操作外,还可以采用梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理,得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植,因为此时的胚胎易操作,且处于游离状态。故答案为:Mll(减数第二次分裂中);梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理;桑葚胚或囊胚。
    (3)不考虑致死,孤雌小鼠具有双母亲来源,因此其染色体组成为XX,而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子,精子的性染色体为X或Y,所以其性染色体可能是XX、XY或YY。在分割囊胚阶段的胚胎时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠,这些小鼠遗传物质相同,所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异,进而可以通过这些遗传背景相同的个体进行对比来分析致病原因。故答案为:XX,XY或YY;将内细胞团均等分割;遗传物质相同,可以基本排除由基因不同造成的个体差异。
    后代植株类型
    染色体数目、形态
    DNA分子标记鉴定

    12,形态与柴胡染色体相似
    含双亲DNA片段

    12,形态与柴胡染色体相似
    无红豆杉DNA片段

    12,形态与柴胡染色体相似
    含双亲DNA片段和新的DNA片段

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