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广东省茂名市信宜市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版）
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这是一份广东省茂名市信宜市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版），文件包含广东省茂名市信宜市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题原卷版docx、广东省茂名市信宜市2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共31页， 欢迎下载使用。
高二生物学
试卷共8页，卷面满分100分。考试用时75分钟。
注意事项
1.答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的班级、姓名、试室号、座位号和考号填写在答题卡上，必须用2B铅笔把考号的对应数字方框涂满涂黑。
2.选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。在试卷上作答无效。
3.非选择题必须用黑色迹钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内的相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液，不按以上要求作答的答案无效。
4.考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，请将答题卡交回。
一、选择题:本题共 16 小题，共 40 分，第 1-12 小题，每小题2分；第13-16 小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。
1. 油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。下列相关表述正确的是（ ）
A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌不存在竞争关系
B. 乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2
C. 发酵产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道
D. 臭豆腐的发酵和腐乳的发酵原理是完全相同的
【答案】C
【解析】
【分析】腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。
【详解】A．乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，因此二者存在竞争关系，A错误；
B．乳酸菌发酵的产物是乳酸，不产生二氧化碳，B错误；
C．微生物发酵将豆腐中的蛋白质和脂肪分解产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道，C正确；
D．臭豆腐的发酵和腐乳的发酵原理不完全相同，D错误。
故选C。
2. 蔬菜水果在常温下放置时，很容易受到微生物污染和侵袭。下列关于日常保存蔬菜水果的说法错误的是（ ）
A. 密封保存能够阻碍所有微生物的生长和繁殖
B. 低温保存能够降低微生物的代谢，阻碍微生物生长
C. 腌制保存能够扩大所有微生物细胞外的渗透压
D. 干制保存能够降低食品的水分含量
【答案】A
【解析】
【分析】食物腐败变质是由于微生物的生长和大量繁殖而引起的，根据食物腐败变质的原因，食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖。
【详解】A、密封保存食物使得其中缺氧，抑制需氧型微生物生长和繁殖，A错误；
B、低温保存食物，使微生物细胞中酶活性降低，从而降低微生物的代谢，阻碍微生物生长，B正确；
C、微生物细胞生活在食物中，腌制保存食物能够扩大所有微生物细胞外的渗透压，从而使微生物细胞失水死亡，C正确；
D、干制降低食品的含水量，使微生物在含水量低的环境中不易生长和繁殖，食品保存时间延长，D正确。
故选A。
3. 生活饮用水中大肠杆菌超标会引起肠道外感染和急性腹泻，严重时会危及生命。某研究小组利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行培养和计数，下列叙述正确的是（ ）
A. 该培养基为选择培养基，只允许大肠杆菌生长繁殖
B. 配置培养基时，应先进行灭菌后再调节pH值
C. 可根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量
D. 为防止杂菌污染，应向培养基中添加适量抗生素
【答案】C
【解析】
【分析】分析表格可知，该培养基中加入了显色剂，属于鉴别培养基，该培养基中的碳源有蔗糖、乳糖和蛋白胨，蛋白胨还可提供氮源，在配制培养基时应先调节pH，再灭菌后倒平板，若先灭菌，后调pH，可能在调pH的过程中再次引发杂菌污染。
【详解】A、该培养基中含伊红—亚甲蓝显色剂，根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A错误；
B、在配制培养基时应先调节pH值，再灭菌后倒平板，B错误；
C、在该培养基上生长的大肠杆菌，其菌落颜色为具有金属光泽的紫黑色，可以根据培养基上的紫黑色菌落数计算出大肠杆菌的数量，C正确；
D、不可以在培养基中添加抗生素，以免影响大肠杆菌的生长，D错误。
故选C。
4. 发酵工程在多个领域发挥着不可或缺的作用，从医药到食品生产，从能源开发到环境保护，均展现了其巨大的应用潜力和社会价值。下列关于发酵工程的表述正确的是（ ）
A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵
B. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化只会影响微生物的生长繁殖
D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误；
B、通过发酵工程获得的产品一般有微生物的代谢物、酶及菌体本身，B正确；
C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C错误；
D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，D错误。
故选B。
5. 春秋姜黄是集观赏和食用等价值为一体的新型花卉，传统的根茎繁殖方式存在着速度慢、易染病等问题，植物组织培养技术为其提供了高效的繁殖途径。下列叙述，错误的是（ ）
A. 在接种前对外植体进行消毒，并在火焰旁进行接种可减少污染
B. 从接种外植体到形成试管苗的过程中，需将其转接到不同的培养基
C. 将愈伤组织接种到含生长素浓度较高的培养基中，更利于诱导其生芽
D. 移栽幼苗前通常先将其移植到消过毒的环境中，待其长壮后再移栽入土
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】A、植物组织培养时，在接种前对外植体进行消毒，并在火焰旁进行接种可减少污染，A正确；
B、外植体一般先诱导生芽，再诱导生根，外植体首先在诱导愈伤组织的培养基上生长，一段时间后转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步形成试管苗，因此，从接种外植体到形成试管苗的过程中，需将其转接到不同的培养基，B正确；
C、将愈伤组织接种到含生长素浓度较高的培养基中，更利于诱导其生根，C错误；
D、幼苗移栽到大田前要进行“炼苗”，即将幼苗先移植到消过毒的至石或者珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D正确。
故选C。
6. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。某研究小组用花椰菜、紫罗兰两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生（图1）和鉴定（图2），最终获得高产抗病再生植株。下列相关说法不正确的是（ ）
A. 花椰菜和紫罗兰之间存在生殖隔离
B. 图1中，②常利用灭活的病毒来诱导原生质体融合
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
【答案】B
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、根据图谱分析，4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明是杂种细胞，而1、2、3号个体只有花椰菜中的蛋白质，说明不是杂种细胞。
【详解】A、花椰菜和紫罗兰是两个不同的物种，因此它们之间存在生殖隔离，A正确；
B、灭活的病毒通常用于动物细胞的融合，B错误；
C、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，是杂种细胞，而1号个体只有1种蛋白质，且与Ⅰ花椰菜的条带相同，很可能是花椰菜，C正确；
D、将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，百分比越大，说明抗病性能越弱，故可以筛选出抗病性强的杂种植株，D正确。
故选B。
7. 有研究团队正在尝试建立HA(Human Leukcyte Antigen，人类白细胞抗原)多态性丰富的iPS细胞库，可以为需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。下列关于iPS细胞培养的表述正确的是（ ）
A. 培养iPS细胞的环境中需要95%O2和5%CO2
B. iPS细胞要经过脱分化形成愈伤组织才能获得
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
D. 培养瓶中的iPS细胞需定期用胃蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：
（1）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）营养：通常需加入血清、血浆等天然成分。
（3）温度、pH和渗透压：适宜温度：哺乳动物多是36.5°C+0.5°C; pH: 7.2~7.4。
（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、iPS细胞属于动物细胞，动物细胞培养过程需要95%空气+5%CO2，A错误；
B、iPS细胞培养不需要脱分化，植物组织培养过程要经过脱分化形成愈伤组织，B错误；
C、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等，通常需加入血清、血浆等天然成分，C正确；
D、动物细胞培养过程中，需要添加胰蛋白酶分散细胞，而非胃蛋白酶，D错误。
故选C。
8. 2017年，世界上首个体细胞克隆猴“中中”和“华华”在中国科学院神经科学研究所（上海）、脑科学与智能技术卓越创新中心的非人灵长类平台诞生。其培育过程如下图。据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 克隆猴的成功证明了动物细胞核仍具有全能性
B 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作
C. 图中卵母细胞必须完成减数第二次分裂才能使用
D. 体细胞、卵母细胞供体和受体动物都会影响克隆后代的表现型
【答案】C
【解析】
【分析】克隆动物的培育过程中需要进行细胞核移植，早期的细胞核移植操作会将供体细胞的细胞核取出，再植入去核的卵母细胞，后期的核移植操作是直接将供体细胞注射到MⅡ期时期的去核卵母细胞外的透明带位置，再通过电刺激的方法诱导细胞融合，从而实现供体细胞核进入去核卵母细胞，形成重构胚，运用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
【详解】A、利用核移植技术培育的克隆猴证明了动物细胞核仍具有全能性，A正确；
B、克隆猴培育过程中涉及到对供受体细胞的培养，以及向去核卵母细胞中进行细胞核移植操作，B正确；
C、卵母细胞需培养至MⅡ期再进行核移植操作，C错误；
D、克隆猴的核遗传物质来自体细胞，质遗传物质来自卵母细胞，其性状受核遗传物质和质遗传物质共同影响，同时还可能受到受体动物的影响，如受体动物营养不良等，D正确。
故选C。
9. “DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程如下图。下列选项是某同学的总结，其中叙述错误的是（ ）
A. ①过程为裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B. ②过程为分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C. ③过程为沉淀：反复多次可以完全去除蛋白质杂质
D. ④过程为鉴定：在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
【答案】C
【解析】
【分析】DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法对它们进行提取。例如，DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 ml/L 的NaCl溶液。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、①过程为裂解过程，称取样品放入研钵中，倒 入研磨液，充分研磨，使细胞破裂释放出DNA等物质，A正确；
B、②过程为分离过程，在漏斗中垫上纱布，将研磨液过滤到烧杯中，在 4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可去除混合物中的多糖、蛋白质等，B正确；
C、③过程为沉淀，在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液，静置 2〜3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌， 卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。反复多次可以提高DNA的纯度，但无法完全去除蛋白质杂质，C错误；
D、④过程为鉴定，在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂，D正确。
故选C。
10. 同尾限制酶简称同尾酶，指一类限制性核酸内切酶，它们的来源不同，能够对DNA切割产生相同的黏性末端，而其识别序列的特异性不同。下表中，属于同尾酶的组合是（ ）
（注：Y=C或T；R=A或G ）
A. BamH I和Sau3A IB. EcR I和Kpn IC. Sau3A I和Sma ID. Hind II和Sma I
【答案】A
【解析】
【分析】根据题意可知，切割出相同的黏性末端的限制酶称为同尾酶。
【详解】A、BamH I和Sau3A I限制酶切割后形成的黏性末端分别是、，属于同尾酶，A正确；
B、EcR I和Kpn I限制酶切割后形成的黏性末端分别是、，不属于同尾酶，B错误；
C、Sma I限制酶切割后形成的末端是平末端，Sau3A I限制酶切割后形成的是黏性末端，不属于同尾酶，C错误；
D、Hind II和Sma I限制酶切割后形成的末端均是平末端，且末端序列不同，不属于同尾酶，D错误。
故选A
11. 研究人员将一种抗逆基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染拟南芥细胞，获得了不同株系的拟南芥。下列相关表述正确的是（ ）
A. 构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶、DNA聚合酶
B. 将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体
C. Ti质粒标记基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等
D. 只要检测出拟南芥细胞中含有抗逆基因，就代表抗逆拟南芥培育成功
【答案】B
【解析】
【分析】农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）
1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶，A错误；
B、利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，故将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体，B正确；
C、Ti质粒标记基因是DNA片段，不含尿嘧啶，C错误；
D、只有拟南芥具有抗逆性才能代表抗逆拟南芥培育成功，含有抗逆基因若不表达，也不会形成抗逆植株，D错误。
故选B。
12. 胚胎工程是指对生殖细胞、受精卵或早期胚胎进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移植到雌性动物子宫内生产后代。自然条件下，不同动物的胚胎进入子宫时，其发育阶段有明显的差异（见下表）下列叙述，正确的是（ ）
A. 进行胚胎移植可发挥雄性优良个体的繁殖潜力
B. 相对来说，在进入子宫时小鼠胚胎发育程度最高，猪胚胎发育程度最低
C. 在胚胎移植前可取内细胞团的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定
D. 在进行马胚胎移植时，应选择发育到囊胚阶段的胚胎移植到相应受体
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析表格可知：不同动物进入子宫时发育天数和发育阶段不同，马的受精卵进入子宫时已经发育到囊胚阶段，发育程度最高，而猪的发育程度最低，是4~6 细胞；
2、胚胎早期发育的过程：
（1）卵裂期：细胞在透明带中进行有丝分裂，细胞数量不断增加；
（2）桑葚胚：细胞数目约为32个，每个细胞都具有全能性；
（3）囊胚：①细胞开始出现分化(内细胞团将来发育成各种组织，滋养层细胞将来发囊胚育为胎膜和胎盘)；②出现囊胚腔；③透明带破裂，胚胎从中伸展出来(即孵化)；
（4）原肠胚：①分化为内胚层、中胚层和外胚层三原肠胚个胚层；②出现原肠腔；
【详解】A、进行胚胎移植可发挥雌性优良个体的繁殖潜力，A错误；
B、据表格数据可知，相对来说，在进入子宫时马的胚胎发育到囊胚，发育程度最高，猪胚胎发育到4~6 细胞，发育程度最低，B错误；
C、在胚胎移植前可取滋养层的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定，C错误；
D、在进行马胚胎移植时，为提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，应选择桑椹胚或囊胚阶段的胚胎移植到相应受体，D正确。
故选D。
13. PCR 技术不仅可用于基础研究，还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。采用PCR方法进行研究，其反应程序如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A. PCR 反应中的每次循环的变性、复性、延伸过程，都涉及氢键的形成或断裂
B. 延伸和后延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸
C. PCR应用于临床病原菌检测，所用的引物应该能与病原菌的两条单链DNA特异性结合
D. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
【答案】B
【解析】
【分析】1、PCR全称为聚合酶链式反应，是在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA的复制。
2、PCR技术的条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
3、PCR技术共包括三步：
①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；
②低温复性：引物结合到互补链DNA上；
③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR 反应中的每次循环的变性过程DNA分子双链解螺旋，氢键断裂；复性时，引物与模板链通过形成氢键相结合；延伸过程中，游离的脱氧核糖核苷酸与模板链通过形成氢键相结合，游离的脱氧核苷酸固定在模板链上。每次循环的变性、复性、延伸过程都重复以上过程，因此，都涉及氢键的形成或断裂，A正确；
B、PCR技术合成的是DNA分子，因此，延伸和后延伸过程中需要DNA聚合酶、4种脱氧核糖核苷酸，不需要ATP（四种dNTP即可以提供能量又可以原料），B错误；
C、PCR技术中所使用的引物是根据一段已知的病原菌的基因序列合成的，因此，PCR应用于临床病原菌检测，所用的引物能与病原菌的两条单链DNA特异性结合，C正确；
D、后延伸过程是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，D正确。
故选B。
14. 脐带间充质干细胞（MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。科研人员采用不同浓度血清培养MSCs，48h后收集各组上清液，用以培养角膜上皮细胞（HCEcs），过程及结果如下表。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 本实验的自变量为血清浓度，因变量为HCECs活细胞数目
B 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使HCEcs分散以检测吸光度
C. 由表格数据可知，血清浓度越低越有利于获得更多的HCECs
D. 前期培养的MSCs可能产生某种物质而不利于HCECs增殖
【答案】C
【解析】
【分析】1、根据题意和表格信息可知，该实验的自变量为血清浓度，因变量为HCECs活细胞数目。
2、胰蛋白酶处理可以使细胞团分散成单个细胞。
【详解】A、根据表格可知，实验自变量为实验过程中人为设置的变量，即不同浓度的血清，因变量为因自变量而引起的变量，即通过测吸光度而反应出的HCECs活细胞数目，A正确；
B、为检测HCEcs吸光度，可利用胰蛋白酶处理使HCEcs分散成单个细胞，B正确;
C、由表中数据可知，在所给血清浓度中，浓度为3%时，HCECs细胞数目最多，但与血清浓度为1%时的数据相差不大，可得出血清浓度较低时有利于获得更多的HCECs细胞，C错误；
D、利用不同的血清培养MSCs得到的上清液来培养HCEcs，其原因可能是MSCs在培养过程中产生某种物质调控HCECs增殖。高浓度血清培养MSCs细胞后取上清液继续培养HCEcs，HCEcs活细胞数量低于低浓度血清条件下的结果，可能是由于高浓度血清条件下培养的MSCs细胞数量更多，产生的不利于HCECs增殖的物质更多导致，D正确。
故选C。
15. 阳江豆豉是广东省阳江市的一种传统发酵豆制品，其风味主要由酯、醛、醇等挥发性物质决定。科研人员从自然发酵的豆豉(约有23种不同的菌株)中分离纯化出1种产香能力较强的菌株(WLW)。纯种WLW的发酵和自然发酵的豆豉挥发性成分对比如下图所示。下列分析不正确的是（ ）
A. 自然发酵比WLW纯种发酵得到的豆豉醇香浓郁
B. 可以利用菌落特征对WLW进行菌种鉴定
C. 分离纯化WLW菌种可以采用稀释涂布平板法进行接种
D. 纯种发酵比自然发酵所产生的挥发性物质的总量更高
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、由图可知，WLW纯种发酵比自然发酵得到的豆豉醇类物质含量低，据此推测自然发酵比WLW纯种发酵得到的豆豉醇香浓郁，A正确；
B、不同微生物形成的菌落特征不同，可以利用菌落特征对WLW进行菌种鉴定，B正确；
C、微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，分离纯化WLW菌种可以采用稀释涂布平板法进行接种，C正确；
D、图示为挥发性成分，由图可知，纯种发酵比自然发酵所产生的挥发性物质的总量低，D错误。
故选D。
16. 变质的酸奶会因内部发酵而产生大量气体，如果看到包装很鼓，说明酸奶已经变质，不要喝。某同学选择过期的酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，有关叙述正确的是（ ）
A. 使用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢，但不破坏其营养成分
B. 变质的酸奶会由于其中的微生物进行有氧呼吸产生大量CO2
C. 利用图示方法向培养基接种前和接种后都要对接种环进行灼烧灭菌
D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个
【答案】D
【解析】
【分析】1、酸奶制作的原理是乳酸菌发酵，乳酸菌属于原核生物，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
2、乳酸菌的无氧呼吸可将葡萄糖分解形成乳酸，并释放少量的能量。
【详解】A、无菌技术包括消毒和灭菌两个方面，其中消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），使用巴氏消毒法不可以杀死牛奶中的芽孢，A错误；
B、变质的酸奶会由于其中的微生物进行无氧呼吸产生大量CO2，B错误：
C、图示接种方法为稀释涂布平板法，应该使用涂布器进行接种，C错误；
D、利用公式C÷V×M，可以计算1mL酸奶中该微生物数量为180÷0.2×104=9×106，D正确。
故选D。
二、非选择题：共60分，考生根据要求作答。
17. 银妃三华李是信宜市的一带一路产品，经网上一带一路飞向全中国。钱排镇在鲜果销售的基础上，开发了三华李果酒和三华李果醋等新型产品。请回答下列问题
（1）银妃三华李表面的白膜是一层______菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；再利用醋酸菌在________________条件下，将酒精转化成醋酸酿的果醋。
（2）为了纯化获得醋酸产率较高优良醋酸菌菌种，快捷的接种方法是__________。
（3）相比于直接利用果汁原浆酿醋，（1）中用果酒生产果醋的优势有_____（填编号）。
①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率
②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率
③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中
（4）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见下表。
①该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有_______（填写两种）。
②据表可知，本实验醋酸发酵的最适初始酒精浓度是___________；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，依据数据和所学知识，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有_______________（填写两个方面）。
【答案】（1） ① 酵母菌 ②. 30～35℃，有氧
（2）平板划线法 （3）①③
（4） ①. 氮源、无机盐、水 ②. 6% ③. 适当降低初始酒精浓度；增加氧气供应；适当提高温度等
【解析】
【分析】1、在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
2、酿制果酒，发酵液中产生的酒精能抑制杂菌的生长。
3、培养基的成分，四大基础营养物质分别是碳源、氮源、水、无机盐。
【小问1详解】
在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在果皮上的野生型酵母菌。所以，银妃三华李表面的白膜是一层酵母菌。把酒转化成醋的菌是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。因此，要将酒精转化成醋酸，要在30～35℃、有氧条件下培养醋酸菌。
【小问2详解】
微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法，平板划线法比稀释涂布平板法操作快捷，所以为了纯化获得醋酸产率较高的优良醋酸菌菌种，快捷的接种方法是平板划线法。
【小问3详解】
①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，①正确；
②酿制果酒时形成的醋酸菌膜会造成局部缺氧，导致果醋产率不高，②错误；
③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，③正确。
故选①③。
【小问4详解】
①微生物生长基本营养物质：氮源，碳源，水，无机盐等，题中酒精作为碳源。因此，该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有氮源、无机盐、水。
②初始酒精浓度为6%时，醋酸含量最高，是发酵的最适浓度。可通过适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等措施来提高醋酸含量。
18. 某同学从土壤中分离得到A和B两株可以降解秸秆的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解秸秆的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，纤维素，刚果红。
培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，纤维素，刚果红。
操作步骤：
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ。
回答下列问题。
（1）培养基在制备的过程中需要灭菌，最常用的灭菌方式是____________。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________（答出2种即可）等生物大分子。
（2）为了比较A、B降解秸秆的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈），推测该同学的实验思路是：在无菌条件下，__________。
（3）该同学还设计了一个利用秸秆生产燃料乙醇的小型实验。实验流程如图所示。
①在粉碎的秸秆中接种菌T，菌T应该选择______（A/B）更适宜，其原因是_______。
②本实验收集的淋洗液中的_______可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是_____________。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法 ②. DNA、RNA、蛋白质
（2）将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解纤维素的能力
（3） ①. A ②. 从实验结果可知，A分解纤维素的能力更强 ③. 葡萄糖 ④. 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广
【解析】
【分析】1、纤维素是多糖，不溶于水，在人和动物体内很难被消化，即使草食类动物有发达的消化器官，也需借助某些微生物的作用才能分解这类多糖，是植物细胞细胞壁的主要组成成分。
2、微生物发酵产生乙醇的原理为酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生乙醇。
【小问1详解】
培养基需要保持水分，因此选择种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的湿热灭菌法，常见的是高压蒸汽灭菌法；N元素是组成细胞的基本元素之一，可参与合成核酸（DNA和RNA）、蛋白质等生物大分子。
【小问2详解】
分析表格数据可知，实验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解纤维素的能力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍然能降解纤维素，而B菌株不能降解，根据实验的单一变量和对照原则，推测该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解纤维素的能力。
【小问3详解】
①秸秆的主要组成成分是纤维素，利用纤维素产生乙醇，需要利用能分解纤维素的微生物将其分解为葡萄糖，再通过酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生乙醇，因此应选择分解纤维素能力强的A菌，因为由实验结果可知，A菌分解纤维素的能力更强。
②乙醇发酵的原理为酵母菌通过无氧呼吸将葡萄糖转化为乙醇，因此用收集淋洗液中的纤维素分解产物葡萄糖；秸秆中的纤维素不能被动物大量吸收利用，因此利用秸秆生成乙醇可以实现废物的资源化利用，具有节约粮食、废物利用、清洁环保、生成成本低、原料来源广等优点。
19. 2023年6月，云开山国家级自然保护区和华南农业大学按照紫荆木的生境，选择在云开山保护区的适生区域进行了22株人工培育实生苗的野外回归前期实验。为探究紫荆木原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组进行了如下图的实验探究：
（1）植物细胞壁的主要成分为____________，在获取悬浮原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。
（2）①过程去壁处理前，要对外植体_____处理后才可接种培养；②过程称为________，在该过程中所用到的关键植物激素有____________。
（3）LEA蛋白在植物遭受如盐害等胁迫时可起到很大的保护作用，某研究团队将耐盐酵母LEA蛋白基因NLEAs作为目的基因构建基因表达载体导人紫荆木培育转耐盐基因紫荆植株。将NLEAs基因导人紫荆细胞，常采用______法，获得含NLEAs基因的紫荆组织细胞后，可通过_______________技术，得到转基因紫荆幼苗。如何鉴定转耐盐基因紫荆植株是否培育成功？____________________。
【答案】（1）纤维素和果胶
（2） ①. 消毒 ②. 再分化 ③. 生长素和细胞分裂素
（3） ①. 农杆菌转化法 ②. 植物组织培养 ③. 移栽转耐盐基因紫荆植株至盐碱地或移栽后用一定浓度的盐水浇灌转耐盐基因紫荆植株，观察其是否正常生长
【解析】
【分析】1、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
2、植物细胞一般具有全能性。在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，这称为愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
【小问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，制备原生质体时，常用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。
【小问2详解】
外植体来自野外生存着的个体，携带有各种微生物，因此，在去壁处理前，要对外植体进行消毒处理后才可接种培养，防止微生物污染愈伤组织。
愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。愈伤组织经②过程后，长出了芽，因此，②过程为再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
【小问3详解】
受体细胞为植物细胞时，可用农杆菌转化法把基因表达载体导入受体细胞。已分化的植物细胞在体外条件下经植物组织培养技术可发育成幼苗。因此，获得含NLEAs基因的紫荆组织细胞后，可通过植物组织培养技术，得到转基因紫荆幼苗。要鉴定转耐盐基因紫荆植株是否培育成功，可以鉴定转基因作物是否有耐盐性。因此，可移栽转耐盐基因紫荆植株至盐碱地或移栽后用一定浓度的盐水浇灌转耐盐基因紫荆植株，观察其是否正常生长以。
20. 将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单克隆抗体，并构建抗体药物偶联物（ADC),其主要技术路线如图所示。
（1）步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射__________________和 _______________。
（2）步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是________________。
（3）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入______进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗p72抗体，原因是_________。
（4）单克隆抗体的优点是____________。单克隆抗体是ADC中的________（填“a”或“b”）部分。
【答案】（1） ①. 非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 ②. 产生特定抗体的杂交瘤细胞
（2）能够无限增殖 （3） ①. 抗原或非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 ②. 参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗p72抗体
（4） ①. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 ②. a
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的，应该注射非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72；步骤⑤是将产生特定抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。
【小问2详解】
步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖。
【小问3详解】
根据抗原—抗体杂交原理，应该用抗原或非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72检测其中是否含抗p72的抗体；一般而言，一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体，由于形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗p72抗体。
【小问4详解】
单克隆抗体由于纯度高，因而表现出的典型优点是特异性强、灵敏度高，由于杂交瘤细胞可以无限增殖，因此单克隆抗体具有可大量制备的优点；ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，起到定向作用到癌细胞的作用，其对应图中的a部分。
21. 2022年8月，九价HPV疫苗的使用人群扩展到9~45岁适龄女性。研究发现，人类99.7%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）持续感染引起的。科研人员将HPV病毒表面L1衣壳蛋白基因构建重组质粒，导入大肠杆菌制备HPV疫苗，过程如下图所示。请回答下列问题：
（1）构建重组质粒之前，可利用PCR技术扩增L1基因，此时需要在反应体系中添加的有机物有___________、__________、模板DNA和dNTP等。图b的启动子的作用是_________。
（2）为构建重组HPV疫苗，科研人员将L1基因插入质粒中，最好选择限制酶____________进行共同切割，原因是______________（答出2点即可）。重组质粒导入大肠杆菌后，可用添加___________________的选择性培养基筛选。
（3）有人认为，与传统的减毒或灭活疫苗相比，重组疫苗安全性更高，试从疫苗的成分角度推测其这一观点的合理性：____________。
（4）HPV疫苗也可能通过蛋白质工程来生产。蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，通过________对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的需求。
【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. 引物 ③. RNA聚合酶识别和结合部位
（2） ①. BamHI、HindⅢ ②. 不会导致标记基因都被破坏/避免目的基因自身环化/避免载体自身环化/避免目的基因反向连接到载体上/BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控 ③. 氨苄青霉素
（3）传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒核酸，无侵染能力
（4）改造或合成基因
【解析】
【分析】基因表达载体的结构：启动子：是RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动RNA转录；终止子：使转录停止的“信号灯”；标记基因：便于重组DNA分子的筛选；目的基因；复制原点。
【小问1详解】
利用PCR技术扩增目的基因，需要往反应体系中添加模板DNA、四种脱氧核苷酸、分别与两条模板链结合的2种引物、Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）等。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位。
【小问2详解】
构建重组质粒时选择的限制酶应该能在目的基因两端产生不同的黏性末端，这样可以保证目的基因以正确的方向插入到质粒中，还可以避免目的基因和载体自身环化等，所以应该在目的基因两端各选择一个限制酶的切割位点。BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控，Sau3AI在载体上没有相关酶切位点，因此要选用BamHI、HindⅢ。含有重组质粒的大肠杆菌具有氨苄青霉素抗性，能够在含有氨苄青霉素的培养基上存活并繁殖形成菌落。
【小问3详解】
传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒结构，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞。
【小问4详解】
蛋白质工程是通过改造或合成基因对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的需求。成分
蛋白胨
蔗糖
乳糖
K2HPO4
显色剂（伊红—亚甲蓝）
琼脂
含量
10.0g
5.0g
2.0g
2.0g
0.2g
12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
BamH I
G↓ GATCC
Kpn I
GGTAC↓ C
EcR I
G↓ AATTC
Sau3A I
↓GATC
Hind II
GTY↓RAC
Sma I
CCCT↓GGG
动物种类
小鼠
绵羊
猪
马
牛
发育阶段
桑椹胚
16 细胞
4~6 细胞
囊胚
8~ 16细胞
实验步骤
A组
B组
C组
D组
配制不同浓度的血清
1%
3%
5%
10%
培养MSCs细胞48 h后，取上清液
进行
进行
进行
进行
用上清液培养HCEcs
进行
进行
进行
进行
24 h后测吸光度（数值越大代表活细胞数目越多）
0．67
0．68
0．52
0．48
初始酒精浓度（%）
3
4
5
6
7
8
9
10
醋酸含量（g/100mL）
2.80
2.94
3.33
3.97
3.82
3.40
2.52
1.98
菌株
透明圈大小
平板Ⅰ
平板Ⅱ
A
+++
++
B
++
-
高二生物学
试卷共8页，卷面满分100分。考试用时75分钟。
注意事项
1.答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的班级、姓名、试室号、座位号和考号填写在答题卡上，必须用2B铅笔把考号的对应数字方框涂满涂黑。
2.选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。在试卷上作答无效。
3.非选择题必须用黑色迹钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内的相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新的答案；不准使用铅笔和涂改液，不按以上要求作答的答案无效。
4.考生必须保持答题卡的整洁。考试结束后，请将答题卡交回。
一、选择题:本题共 16 小题，共 40 分，第 1-12 小题，每小题2分；第13-16 小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。
1. 油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。下列相关表述正确的是（ ）
A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌不存在竞争关系
B. 乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2
C. 发酵产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道
D. 臭豆腐的发酵和腐乳的发酵原理是完全相同的
【答案】C
【解析】
【分析】腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。
【详解】A．乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，因此二者存在竞争关系，A错误；
B．乳酸菌发酵的产物是乳酸，不产生二氧化碳，B错误；
C．微生物发酵将豆腐中的蛋白质和脂肪分解产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道，C正确；
D．臭豆腐的发酵和腐乳的发酵原理不完全相同，D错误。
故选C。
2. 蔬菜水果在常温下放置时，很容易受到微生物污染和侵袭。下列关于日常保存蔬菜水果的说法错误的是（ ）
A. 密封保存能够阻碍所有微生物的生长和繁殖
B. 低温保存能够降低微生物的代谢，阻碍微生物生长
C. 腌制保存能够扩大所有微生物细胞外的渗透压
D. 干制保存能够降低食品的水分含量
【答案】A
【解析】
【分析】食物腐败变质是由于微生物的生长和大量繁殖而引起的，根据食物腐败变质的原因，食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖。
【详解】A、密封保存食物使得其中缺氧，抑制需氧型微生物生长和繁殖，A错误；
B、低温保存食物，使微生物细胞中酶活性降低，从而降低微生物的代谢，阻碍微生物生长，B正确；
C、微生物细胞生活在食物中，腌制保存食物能够扩大所有微生物细胞外的渗透压，从而使微生物细胞失水死亡，C正确；
D、干制降低食品的含水量，使微生物在含水量低的环境中不易生长和繁殖，食品保存时间延长，D正确。
故选A。
3. 生活饮用水中大肠杆菌超标会引起肠道外感染和急性腹泻，严重时会危及生命。某研究小组利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行培养和计数，下列叙述正确的是（ ）
A. 该培养基为选择培养基，只允许大肠杆菌生长繁殖
B. 配置培养基时，应先进行灭菌后再调节pH值
C. 可根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量
D. 为防止杂菌污染，应向培养基中添加适量抗生素
【答案】C
【解析】
【分析】分析表格可知，该培养基中加入了显色剂，属于鉴别培养基，该培养基中的碳源有蔗糖、乳糖和蛋白胨，蛋白胨还可提供氮源，在配制培养基时应先调节pH，再灭菌后倒平板，若先灭菌，后调pH，可能在调pH的过程中再次引发杂菌污染。
【详解】A、该培养基中含伊红—亚甲蓝显色剂，根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A错误；
B、在配制培养基时应先调节pH值，再灭菌后倒平板，B错误；
C、在该培养基上生长的大肠杆菌，其菌落颜色为具有金属光泽的紫黑色，可以根据培养基上的紫黑色菌落数计算出大肠杆菌的数量，C正确；
D、不可以在培养基中添加抗生素，以免影响大肠杆菌的生长，D错误。
故选C。
4. 发酵工程在多个领域发挥着不可或缺的作用，从医药到食品生产，从能源开发到环境保护，均展现了其巨大的应用潜力和社会价值。下列关于发酵工程的表述正确的是（ ）
A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵
B. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
C. 在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化只会影响微生物的生长繁殖
D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误；
B、通过发酵工程获得的产品一般有微生物的代谢物、酶及菌体本身，B正确；
C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C错误；
D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，D错误。
故选B。
5. 春秋姜黄是集观赏和食用等价值为一体的新型花卉，传统的根茎繁殖方式存在着速度慢、易染病等问题，植物组织培养技术为其提供了高效的繁殖途径。下列叙述，错误的是（ ）
A. 在接种前对外植体进行消毒，并在火焰旁进行接种可减少污染
B. 从接种外植体到形成试管苗的过程中，需将其转接到不同的培养基
C. 将愈伤组织接种到含生长素浓度较高的培养基中，更利于诱导其生芽
D. 移栽幼苗前通常先将其移植到消过毒的环境中，待其长壮后再移栽入土
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】A、植物组织培养时，在接种前对外植体进行消毒，并在火焰旁进行接种可减少污染，A正确；
B、外植体一般先诱导生芽，再诱导生根，外植体首先在诱导愈伤组织的培养基上生长，一段时间后转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步形成试管苗，因此，从接种外植体到形成试管苗的过程中，需将其转接到不同的培养基，B正确；
C、将愈伤组织接种到含生长素浓度较高的培养基中，更利于诱导其生根，C错误；
D、幼苗移栽到大田前要进行“炼苗”，即将幼苗先移植到消过毒的至石或者珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D正确。
故选C。
6. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。某研究小组用花椰菜、紫罗兰两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生（图1）和鉴定（图2），最终获得高产抗病再生植株。下列相关说法不正确的是（ ）
A. 花椰菜和紫罗兰之间存在生殖隔离
B. 图1中，②常利用灭活的病毒来诱导原生质体融合
C. 图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
【答案】B
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
2、根据图谱分析，4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明是杂种细胞，而1、2、3号个体只有花椰菜中的蛋白质，说明不是杂种细胞。
【详解】A、花椰菜和紫罗兰是两个不同的物种，因此它们之间存在生殖隔离，A正确；
B、灭活的病毒通常用于动物细胞的融合，B错误；
C、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，是杂种细胞，而1号个体只有1种蛋白质，且与Ⅰ花椰菜的条带相同，很可能是花椰菜，C正确；
D、将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，百分比越大，说明抗病性能越弱，故可以筛选出抗病性强的杂种植株，D正确。
故选B。
7. 有研究团队正在尝试建立HA(Human Leukcyte Antigen，人类白细胞抗原)多态性丰富的iPS细胞库，可以为需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。下列关于iPS细胞培养的表述正确的是（ ）
A. 培养iPS细胞的环境中需要95%O2和5%CO2
B. iPS细胞要经过脱分化形成愈伤组织才能获得
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
D. 培养瓶中的iPS细胞需定期用胃蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：
（1）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）营养：通常需加入血清、血浆等天然成分。
（3）温度、pH和渗透压：适宜温度：哺乳动物多是36.5°C+0.5°C; pH: 7.2~7.4。
（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、iPS细胞属于动物细胞，动物细胞培养过程需要95%空气+5%CO2，A错误；
B、iPS细胞培养不需要脱分化，植物组织培养过程要经过脱分化形成愈伤组织，B错误；
C、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等，通常需加入血清、血浆等天然成分，C正确；
D、动物细胞培养过程中，需要添加胰蛋白酶分散细胞，而非胃蛋白酶，D错误。
故选C。
8. 2017年，世界上首个体细胞克隆猴“中中”和“华华”在中国科学院神经科学研究所（上海）、脑科学与智能技术卓越创新中心的非人灵长类平台诞生。其培育过程如下图。据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 克隆猴的成功证明了动物细胞核仍具有全能性
B 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作
C. 图中卵母细胞必须完成减数第二次分裂才能使用
D. 体细胞、卵母细胞供体和受体动物都会影响克隆后代的表现型
【答案】C
【解析】
【分析】克隆动物的培育过程中需要进行细胞核移植，早期的细胞核移植操作会将供体细胞的细胞核取出，再植入去核的卵母细胞，后期的核移植操作是直接将供体细胞注射到MⅡ期时期的去核卵母细胞外的透明带位置，再通过电刺激的方法诱导细胞融合，从而实现供体细胞核进入去核卵母细胞，形成重构胚，运用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
【详解】A、利用核移植技术培育的克隆猴证明了动物细胞核仍具有全能性，A正确；
B、克隆猴培育过程中涉及到对供受体细胞的培养，以及向去核卵母细胞中进行细胞核移植操作，B正确；
C、卵母细胞需培养至MⅡ期再进行核移植操作，C错误；
D、克隆猴的核遗传物质来自体细胞，质遗传物质来自卵母细胞，其性状受核遗传物质和质遗传物质共同影响，同时还可能受到受体动物的影响，如受体动物营养不良等，D正确。
故选C。
9. “DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程如下图。下列选项是某同学的总结，其中叙述错误的是（ ）
A. ①过程为裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B. ②过程为分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C. ③过程为沉淀：反复多次可以完全去除蛋白质杂质
D. ④过程为鉴定：在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
【答案】C
【解析】
【分析】DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法对它们进行提取。例如，DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 ml/L 的NaCl溶液。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、①过程为裂解过程，称取样品放入研钵中，倒 入研磨液，充分研磨，使细胞破裂释放出DNA等物质，A正确；
B、②过程为分离过程，在漏斗中垫上纱布，将研磨液过滤到烧杯中，在 4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可去除混合物中的多糖、蛋白质等，B正确；
C、③过程为沉淀，在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液，静置 2〜3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌， 卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。反复多次可以提高DNA的纯度，但无法完全去除蛋白质杂质，C错误；
D、④过程为鉴定，在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂，D正确。
故选C。
10. 同尾限制酶简称同尾酶，指一类限制性核酸内切酶，它们的来源不同，能够对DNA切割产生相同的黏性末端，而其识别序列的特异性不同。下表中，属于同尾酶的组合是（ ）
（注：Y=C或T；R=A或G ）
A. BamH I和Sau3A IB. EcR I和Kpn IC. Sau3A I和Sma ID. Hind II和Sma I
【答案】A
【解析】
【分析】根据题意可知，切割出相同的黏性末端的限制酶称为同尾酶。
【详解】A、BamH I和Sau3A I限制酶切割后形成的黏性末端分别是、，属于同尾酶，A正确；
B、EcR I和Kpn I限制酶切割后形成的黏性末端分别是、，不属于同尾酶，B错误；
C、Sma I限制酶切割后形成的末端是平末端，Sau3A I限制酶切割后形成的是黏性末端，不属于同尾酶，C错误；
D、Hind II和Sma I限制酶切割后形成的末端均是平末端，且末端序列不同，不属于同尾酶，D错误。
故选A
11. 研究人员将一种抗逆基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染拟南芥细胞，获得了不同株系的拟南芥。下列相关表述正确的是（ ）
A. 构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶、DNA聚合酶
B. 将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体
C. Ti质粒标记基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等
D. 只要检测出拟南芥细胞中含有抗逆基因，就代表抗逆拟南芥培育成功
【答案】B
【解析】
【分析】农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）
1、农杆菌转化法的具体过程：
（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。
（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。
（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。
（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。
2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。
3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。
4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】A、构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶，A错误；
B、利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，故将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体，B正确；
C、Ti质粒标记基因是DNA片段，不含尿嘧啶，C错误；
D、只有拟南芥具有抗逆性才能代表抗逆拟南芥培育成功，含有抗逆基因若不表达，也不会形成抗逆植株，D错误。
故选B。
12. 胚胎工程是指对生殖细胞、受精卵或早期胚胎进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移植到雌性动物子宫内生产后代。自然条件下，不同动物的胚胎进入子宫时，其发育阶段有明显的差异（见下表）下列叙述，正确的是（ ）
A. 进行胚胎移植可发挥雄性优良个体的繁殖潜力
B. 相对来说，在进入子宫时小鼠胚胎发育程度最高，猪胚胎发育程度最低
C. 在胚胎移植前可取内细胞团的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定
D. 在进行马胚胎移植时，应选择发育到囊胚阶段的胚胎移植到相应受体
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析表格可知：不同动物进入子宫时发育天数和发育阶段不同，马的受精卵进入子宫时已经发育到囊胚阶段，发育程度最高，而猪的发育程度最低，是4~6 细胞；
2、胚胎早期发育的过程：
（1）卵裂期：细胞在透明带中进行有丝分裂，细胞数量不断增加；
（2）桑葚胚：细胞数目约为32个，每个细胞都具有全能性；
（3）囊胚：①细胞开始出现分化(内细胞团将来发育成各种组织，滋养层细胞将来发囊胚育为胎膜和胎盘)；②出现囊胚腔；③透明带破裂，胚胎从中伸展出来(即孵化)；
（4）原肠胚：①分化为内胚层、中胚层和外胚层三原肠胚个胚层；②出现原肠腔；
【详解】A、进行胚胎移植可发挥雌性优良个体的繁殖潜力，A错误；
B、据表格数据可知，相对来说，在进入子宫时马的胚胎发育到囊胚，发育程度最高，猪胚胎发育到4~6 细胞，发育程度最低，B错误；
C、在胚胎移植前可取滋养层的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定，C错误；
D、在进行马胚胎移植时，为提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，应选择桑椹胚或囊胚阶段的胚胎移植到相应受体，D正确。
故选D。
13. PCR 技术不仅可用于基础研究，还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。采用PCR方法进行研究，其反应程序如图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A. PCR 反应中的每次循环的变性、复性、延伸过程，都涉及氢键的形成或断裂
B. 延伸和后延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸
C. PCR应用于临床病原菌检测，所用的引物应该能与病原菌的两条单链DNA特异性结合
D. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
【答案】B
【解析】
【分析】1、PCR全称为聚合酶链式反应，是在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA的复制。
2、PCR技术的条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
3、PCR技术共包括三步：
①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；
②低温复性：引物结合到互补链DNA上；
③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR 反应中的每次循环的变性过程DNA分子双链解螺旋，氢键断裂；复性时，引物与模板链通过形成氢键相结合；延伸过程中，游离的脱氧核糖核苷酸与模板链通过形成氢键相结合，游离的脱氧核苷酸固定在模板链上。每次循环的变性、复性、延伸过程都重复以上过程，因此，都涉及氢键的形成或断裂，A正确；
B、PCR技术合成的是DNA分子，因此，延伸和后延伸过程中需要DNA聚合酶、4种脱氧核糖核苷酸，不需要ATP（四种dNTP即可以提供能量又可以原料），B错误；
C、PCR技术中所使用的引物是根据一段已知的病原菌的基因序列合成的，因此，PCR应用于临床病原菌检测，所用的引物能与病原菌的两条单链DNA特异性结合，C正确；
D、后延伸过程是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，D正确。
故选B。
14. 脐带间充质干细胞（MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。科研人员采用不同浓度血清培养MSCs，48h后收集各组上清液，用以培养角膜上皮细胞（HCEcs），过程及结果如下表。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 本实验的自变量为血清浓度，因变量为HCECs活细胞数目
B 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使HCEcs分散以检测吸光度
C. 由表格数据可知，血清浓度越低越有利于获得更多的HCECs
D. 前期培养的MSCs可能产生某种物质而不利于HCECs增殖
【答案】C
【解析】
【分析】1、根据题意和表格信息可知，该实验的自变量为血清浓度，因变量为HCECs活细胞数目。
2、胰蛋白酶处理可以使细胞团分散成单个细胞。
【详解】A、根据表格可知，实验自变量为实验过程中人为设置的变量，即不同浓度的血清，因变量为因自变量而引起的变量，即通过测吸光度而反应出的HCECs活细胞数目，A正确；
B、为检测HCEcs吸光度，可利用胰蛋白酶处理使HCEcs分散成单个细胞，B正确;
C、由表中数据可知，在所给血清浓度中，浓度为3%时，HCECs细胞数目最多，但与血清浓度为1%时的数据相差不大，可得出血清浓度较低时有利于获得更多的HCECs细胞，C错误；
D、利用不同的血清培养MSCs得到的上清液来培养HCEcs，其原因可能是MSCs在培养过程中产生某种物质调控HCECs增殖。高浓度血清培养MSCs细胞后取上清液继续培养HCEcs，HCEcs活细胞数量低于低浓度血清条件下的结果，可能是由于高浓度血清条件下培养的MSCs细胞数量更多，产生的不利于HCECs增殖的物质更多导致，D正确。
故选C。
15. 阳江豆豉是广东省阳江市的一种传统发酵豆制品，其风味主要由酯、醛、醇等挥发性物质决定。科研人员从自然发酵的豆豉(约有23种不同的菌株)中分离纯化出1种产香能力较强的菌株(WLW)。纯种WLW的发酵和自然发酵的豆豉挥发性成分对比如下图所示。下列分析不正确的是（ ）
A. 自然发酵比WLW纯种发酵得到的豆豉醇香浓郁
B. 可以利用菌落特征对WLW进行菌种鉴定
C. 分离纯化WLW菌种可以采用稀释涂布平板法进行接种
D. 纯种发酵比自然发酵所产生的挥发性物质的总量更高
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、由图可知，WLW纯种发酵比自然发酵得到的豆豉醇类物质含量低，据此推测自然发酵比WLW纯种发酵得到的豆豉醇香浓郁，A正确；
B、不同微生物形成的菌落特征不同，可以利用菌落特征对WLW进行菌种鉴定，B正确；
C、微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，分离纯化WLW菌种可以采用稀释涂布平板法进行接种，C正确；
D、图示为挥发性成分，由图可知，纯种发酵比自然发酵所产生的挥发性物质的总量低，D错误。
故选D。
16. 变质的酸奶会因内部发酵而产生大量气体，如果看到包装很鼓，说明酸奶已经变质，不要喝。某同学选择过期的酸奶，按图中的操作流程，研究其中的某微生物生长情况，有关叙述正确的是（ ）
A. 使用巴氏消毒法可以杀死牛奶中的微生物和芽孢，但不破坏其营养成分
B. 变质的酸奶会由于其中的微生物进行有氧呼吸产生大量CO2
C. 利用图示方法向培养基接种前和接种后都要对接种环进行灼烧灭菌
D. 若3个平板的平均菌落数是180个，则1mL酸奶中该微生物个数为9×106个
【答案】D
【解析】
【分析】1、酸奶制作的原理是乳酸菌发酵，乳酸菌属于原核生物，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
2、乳酸菌的无氧呼吸可将葡萄糖分解形成乳酸，并释放少量的能量。
【详解】A、无菌技术包括消毒和灭菌两个方面，其中消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），使用巴氏消毒法不可以杀死牛奶中的芽孢，A错误；
B、变质的酸奶会由于其中的微生物进行无氧呼吸产生大量CO2，B错误：
C、图示接种方法为稀释涂布平板法，应该使用涂布器进行接种，C错误；
D、利用公式C÷V×M，可以计算1mL酸奶中该微生物数量为180÷0.2×104=9×106，D正确。
故选D。
二、非选择题：共60分，考生根据要求作答。
17. 银妃三华李是信宜市的一带一路产品，经网上一带一路飞向全中国。钱排镇在鲜果销售的基础上，开发了三华李果酒和三华李果醋等新型产品。请回答下列问题
（1）银妃三华李表面的白膜是一层______菌，在18～25℃、无氧条件下酿造果酒；再利用醋酸菌在________________条件下，将酒精转化成醋酸酿的果醋。
（2）为了纯化获得醋酸产率较高优良醋酸菌菌种，快捷的接种方法是__________。
（3）相比于直接利用果汁原浆酿醋，（1）中用果酒生产果醋的优势有_____（填编号）。
①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率
②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率
③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中
（4）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见下表。
①该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有_______（填写两种）。
②据表可知，本实验醋酸发酵的最适初始酒精浓度是___________；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，依据数据和所学知识，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有_______________（填写两个方面）。
【答案】（1） ① 酵母菌 ②. 30～35℃，有氧
（2）平板划线法 （3）①③
（4） ①. 氮源、无机盐、水 ②. 6% ③. 适当降低初始酒精浓度；增加氧气供应；适当提高温度等
【解析】
【分析】1、在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
2、酿制果酒，发酵液中产生的酒精能抑制杂菌的生长。
3、培养基的成分，四大基础营养物质分别是碳源、氮源、水、无机盐。
【小问1详解】
在果酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在果皮上的野生型酵母菌。所以，银妃三华李表面的白膜是一层酵母菌。把酒转化成醋的菌是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。因此，要将酒精转化成醋酸，要在30～35℃、有氧条件下培养醋酸菌。
【小问2详解】
微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法，平板划线法比稀释涂布平板法操作快捷，所以为了纯化获得醋酸产率较高的优良醋酸菌菌种，快捷的接种方法是平板划线法。
【小问3详解】
①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，①正确；
②酿制果酒时形成的醋酸菌膜会造成局部缺氧，导致果醋产率不高，②错误；
③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，③正确。
故选①③。
【小问4详解】
①微生物生长基本营养物质：氮源，碳源，水，无机盐等，题中酒精作为碳源。因此，该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有氮源、无机盐、水。
②初始酒精浓度为6%时，醋酸含量最高，是发酵的最适浓度。可通过适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等措施来提高醋酸含量。
18. 某同学从土壤中分离得到A和B两株可以降解秸秆的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解秸秆的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，纤维素，刚果红。
培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，纤维素，刚果红。
操作步骤：
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ。
回答下列问题。
（1）培养基在制备的过程中需要灭菌，最常用的灭菌方式是____________。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________（答出2种即可）等生物大分子。
（2）为了比较A、B降解秸秆的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈），推测该同学的实验思路是：在无菌条件下，__________。
（3）该同学还设计了一个利用秸秆生产燃料乙醇的小型实验。实验流程如图所示。
①在粉碎的秸秆中接种菌T，菌T应该选择______（A/B）更适宜，其原因是_______。
②本实验收集的淋洗液中的_______可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是_____________。
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法 ②. DNA、RNA、蛋白质
（2）将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解纤维素的能力
（3） ①. A ②. 从实验结果可知，A分解纤维素的能力更强 ③. 葡萄糖 ④. 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广
【解析】
【分析】1、纤维素是多糖，不溶于水，在人和动物体内很难被消化，即使草食类动物有发达的消化器官，也需借助某些微生物的作用才能分解这类多糖，是植物细胞细胞壁的主要组成成分。
2、微生物发酵产生乙醇的原理为酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生乙醇。
【小问1详解】
培养基需要保持水分，因此选择种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的湿热灭菌法，常见的是高压蒸汽灭菌法；N元素是组成细胞的基本元素之一，可参与合成核酸（DNA和RNA）、蛋白质等生物大分子。
【小问2详解】
分析表格数据可知，实验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解纤维素的能力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍然能降解纤维素，而B菌株不能降解，根据实验的单一变量和对照原则，推测该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解纤维素的能力。
【小问3详解】
①秸秆的主要组成成分是纤维素，利用纤维素产生乙醇，需要利用能分解纤维素的微生物将其分解为葡萄糖，再通过酵母菌利用葡萄糖进行无氧呼吸产生乙醇，因此应选择分解纤维素能力强的A菌，因为由实验结果可知，A菌分解纤维素的能力更强。
②乙醇发酵的原理为酵母菌通过无氧呼吸将葡萄糖转化为乙醇，因此用收集淋洗液中的纤维素分解产物葡萄糖；秸秆中的纤维素不能被动物大量吸收利用，因此利用秸秆生成乙醇可以实现废物的资源化利用，具有节约粮食、废物利用、清洁环保、生成成本低、原料来源广等优点。
19. 2023年6月，云开山国家级自然保护区和华南农业大学按照紫荆木的生境，选择在云开山保护区的适生区域进行了22株人工培育实生苗的野外回归前期实验。为探究紫荆木原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组进行了如下图的实验探究：
（1）植物细胞壁的主要成分为____________，在获取悬浮原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。
（2）①过程去壁处理前，要对外植体_____处理后才可接种培养；②过程称为________，在该过程中所用到的关键植物激素有____________。
（3）LEA蛋白在植物遭受如盐害等胁迫时可起到很大的保护作用，某研究团队将耐盐酵母LEA蛋白基因NLEAs作为目的基因构建基因表达载体导人紫荆木培育转耐盐基因紫荆植株。将NLEAs基因导人紫荆细胞，常采用______法，获得含NLEAs基因的紫荆组织细胞后，可通过_______________技术，得到转基因紫荆幼苗。如何鉴定转耐盐基因紫荆植株是否培育成功？____________________。
【答案】（1）纤维素和果胶
（2） ①. 消毒 ②. 再分化 ③. 生长素和细胞分裂素
（3） ①. 农杆菌转化法 ②. 植物组织培养 ③. 移栽转耐盐基因紫荆植株至盐碱地或移栽后用一定浓度的盐水浇灌转耐盐基因紫荆植株，观察其是否正常生长
【解析】
【分析】1、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
2、植物细胞一般具有全能性。在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，这称为愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
【小问1详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，制备原生质体时，常用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。
【小问2详解】
外植体来自野外生存着的个体，携带有各种微生物，因此，在去壁处理前，要对外植体进行消毒处理后才可接种培养，防止微生物污染愈伤组织。
愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。愈伤组织经②过程后，长出了芽，因此，②过程为再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
【小问3详解】
受体细胞为植物细胞时，可用农杆菌转化法把基因表达载体导入受体细胞。已分化的植物细胞在体外条件下经植物组织培养技术可发育成幼苗。因此，获得含NLEAs基因的紫荆组织细胞后，可通过植物组织培养技术，得到转基因紫荆幼苗。要鉴定转耐盐基因紫荆植株是否培育成功，可以鉴定转基因作物是否有耐盐性。因此，可移栽转耐盐基因紫荆植株至盐碱地或移栽后用一定浓度的盐水浇灌转耐盐基因紫荆植株，观察其是否正常生长以。
20. 将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗 p72 的单克隆抗体，并构建抗体药物偶联物（ADC),其主要技术路线如图所示。
（1）步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射__________________和 _______________。
（2）步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是________________。
（3）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入______进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗p72抗体，原因是_________。
（4）单克隆抗体的优点是____________。单克隆抗体是ADC中的________（填“a”或“b”）部分。
【答案】（1） ①. 非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 ②. 产生特定抗体的杂交瘤细胞
（2）能够无限增殖 （3） ①. 抗原或非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 ②. 参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗p72抗体
（4） ①. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 ②. a
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的，应该注射非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72；步骤⑤是将产生特定抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。
【小问2详解】
步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖。
【小问3详解】
根据抗原—抗体杂交原理，应该用抗原或非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72检测其中是否含抗p72的抗体；一般而言，一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体，由于形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗p72抗体。
【小问4详解】
单克隆抗体由于纯度高，因而表现出的典型优点是特异性强、灵敏度高，由于杂交瘤细胞可以无限增殖，因此单克隆抗体具有可大量制备的优点；ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，起到定向作用到癌细胞的作用，其对应图中的a部分。
21. 2022年8月，九价HPV疫苗的使用人群扩展到9~45岁适龄女性。研究发现，人类99.7%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）持续感染引起的。科研人员将HPV病毒表面L1衣壳蛋白基因构建重组质粒，导入大肠杆菌制备HPV疫苗，过程如下图所示。请回答下列问题：
（1）构建重组质粒之前，可利用PCR技术扩增L1基因，此时需要在反应体系中添加的有机物有___________、__________、模板DNA和dNTP等。图b的启动子的作用是_________。
（2）为构建重组HPV疫苗，科研人员将L1基因插入质粒中，最好选择限制酶____________进行共同切割，原因是______________（答出2点即可）。重组质粒导入大肠杆菌后，可用添加___________________的选择性培养基筛选。
（3）有人认为，与传统的减毒或灭活疫苗相比，重组疫苗安全性更高，试从疫苗的成分角度推测其这一观点的合理性：____________。
（4）HPV疫苗也可能通过蛋白质工程来生产。蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，通过________对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的需求。
【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶 ②. 引物 ③. RNA聚合酶识别和结合部位
（2） ①. BamHI、HindⅢ ②. 不会导致标记基因都被破坏/避免目的基因自身环化/避免载体自身环化/避免目的基因反向连接到载体上/BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控 ③. 氨苄青霉素
（3）传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒核酸，无侵染能力
（4）改造或合成基因
【解析】
【分析】基因表达载体的结构：启动子：是RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动RNA转录；终止子：使转录停止的“信号灯”；标记基因：便于重组DNA分子的筛选；目的基因；复制原点。
【小问1详解】
利用PCR技术扩增目的基因，需要往反应体系中添加模板DNA、四种脱氧核苷酸、分别与两条模板链结合的2种引物、Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）等。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位。
【小问2详解】
构建重组质粒时选择的限制酶应该能在目的基因两端产生不同的黏性末端，这样可以保证目的基因以正确的方向插入到质粒中，还可以避免目的基因和载体自身环化等，所以应该在目的基因两端各选择一个限制酶的切割位点。BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控，Sau3AI在载体上没有相关酶切位点，因此要选用BamHI、HindⅢ。含有重组质粒的大肠杆菌具有氨苄青霉素抗性，能够在含有氨苄青霉素的培养基上存活并繁殖形成菌落。
【小问3详解】
传统疫苗灭活或减毒不彻底可能会导致接种者患病，重组疫苗不具有病毒结构，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞。
【小问4详解】
蛋白质工程是通过改造或合成基因对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类的需求。成分
蛋白胨
蔗糖
乳糖
K2HPO4
显色剂（伊红—亚甲蓝）
琼脂
含量
10.0g
5.0g
2.0g
2.0g
0.2g
12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
限制酶名称
识别序列和切割位点
限制酶名称
识别序列和切割位点
BamH I
G↓ GATCC
Kpn I
GGTAC↓ C
EcR I
G↓ AATTC
Sau3A I
↓GATC
Hind II
GTY↓RAC
Sma I
CCCT↓GGG
动物种类
小鼠
绵羊
猪
马
牛
发育阶段
桑椹胚
16 细胞
4~6 细胞
囊胚
8~ 16细胞
实验步骤
A组
B组
C组
D组
配制不同浓度的血清
1%
3%
5%
10%
培养MSCs细胞48 h后，取上清液
进行
进行
进行
进行
用上清液培养HCEcs
进行
进行
进行
进行
24 h后测吸光度（数值越大代表活细胞数目越多）
0．67
0．68
0．52
0．48
初始酒精浓度（%）
3
4
5
6
7
8
9
10
醋酸含量（g/100mL）
2.80
2.94
3.33
3.97
3.82
3.40
2.52
1.98
菌株
透明圈大小
平板Ⅰ
平板Ⅱ
A
+++
++
B
++
-
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