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广东省清远市四校2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题（原卷版+解析版）
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1. 近年来，清远市正如火如荼地开展生态文明建设，“绿水青山就是金山银山”的理念结出了丰硕成果。生态足迹是“生态清远”建设要考虑的问题之一，下列说法正确的是（ ）
A. 北江河流治理过程中选种的净化能力强的水生植物，有利于减小生态足迹
B. 周末返校时搭乘公交车属于低碳交通，能使人类的生态足迹增大
C. 加大生活废水处理等措施能有效增大人类的生态足迹
D. 全市提倡垃圾分类、回收再利用可增大人类的生态足迹
【答案】A
【解析】
【分析】生态足迹：又叫生态占用，指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域面积。生态足迹越大，代表人类所需的资源越多，对生态和环境的影响越大。
【详解】A、北江河流治理过程中选种净化能力强的水生植物，可以减少吸纳废物的土地及水域面积，有利于减小生态足迹，A正确；
B、周末返校时搭乘公交车属于低碳交通，能使人类的生态足迹减小，B错误；
CD、提倡低碳生活方式、垃圾分类、回收再利用、生活废水处理和建立人工湿地等能有效降低人类的生态足迹，CD错误.
故选A。
2. 有关人与自然和谐共生，二十大报告中这样说：我们坚持绿水青山就是金山银山的理念，坚持山水林田湖草沙一体化保护和系统治理，生态文明制度体系更加健全，生态环境保护发生历史性、转折性、全局性变化，我们的祖国天更蓝、山更绿、水更清。下列关于全球性生态问题的叙述错误的是（ ）
A. 全球性生态环境问题主要包括全球气候变暖、水资源短缺、臭氧层破坏、土地荒漠化、生物多样性丧失以及环境污染等
B. 人口增长过快会导致资源短缺、交通拥堵、人口老龄化等问题，人口停止增长或负增长会导致劳动力不足
C. “桑基鱼塘”应用了生态工程的循环、协调、自生等原理，有利于经济效益和生态效益的同步发展
D. 作为中学生的我们应该身体力行、积极宣传生态文明建设，践行经济、社会、生态相互协调的可持续发展理念
【答案】B
【解析】
【分析】全球性生态环境问题：水体污染的原因主要是企业排放生产污水、生活污水的排放、垃圾堆放等；形成酸雨的原因主要是煤、石油、天然气等的燃烧；臭氧层破坏的原因主要是人们大量使用氯氟烃、四氯化碳、甲烷等物质，加速了臭氧层的破坏；生物多样性下降的原因主要是生物栖息地的丧失和破碎化、荒漠化、过度利用与消费，大量的野生生物资源遭到过度开发和利用等。
【详解】A、全球性生态环境问题是全球范围内的生态环境问题，有全球气候变暖、水资源短缺、臭氧层破坏、土地荒漠化、生物多样性丧失、环境污染等，A正确；
B、人口增长过快不会导致人口老龄化，B错误；
C、“桑基鱼塘”中蚕粪喂鱼，塘泥肥桑，兼顾自然-社会-经济效益，运用了循环、协调、整体、自生等原理，有利于经济效益和生态效益的同步发展，C正确；
D、作为中学生，我们应该从自身做起，积极践行绿色生活方式，参与环保活动，宣传环保理念，支持可持续发展政策和项目，并勇于创新和实践。通过我们的努力，可以为建设美丽中国和实现可持续发展目标贡献一份力量，D正确。
故选B。
3. 湿地是地球上重要的生态系统，中国湿地面积占国土面积的比例远低于世界平均水平，并面临气候变化和人类活动的影响，中国政府高度重视并切实加强湿地保护与恢复工作。下列关于湿地的叙述，正确的是（ ）
A. 湿地生态系统的生物多样性在促进基因流动、协同进化等直接价值方面具有重要作用
B. 保护湿地生物多样性，关键是要处理好人与自然的相互关系。
C. 人工湿地可以净化污水，改善水质，调节小气候，体现了生物多样性的直接价值
D. 恢复湿地遵循自然规律，兼顾生态和经济效益，是循环原理的体现
【答案】B
【解析】
【分析】生物多样性的价值直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；潜在价值：目前人类不清楚的价值。
【详解】A、生物多样性在促进生态系统中基因流动和协同进化等方面，具有重要的科研价值和生态价值，这属于直接价值和间接价值，A错误；
B、保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系，做到协调发展，B正确；
C、间接价值是对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能），人工湿地可以净化污水，改善水质，调节小气候，体现了生物多样性的间接价值，C错误；
D、遵循整体原理要求构建生态工程是为人类的生活创造更好的生存条件以及生活条件，发展经济，恢复湿地遵循自然规律，兼顾生态和经济效益，是整体原理的体现，D错误。
故选B。
4. 下列关于生态工程所遵循的基本原理的叙述，不正确的是（ ）
A. 湿地生态工程中，通过移除富营养化沉积物和有毒物质，创造有益于水生生物生存的环境，体现了自生原理
B. “无废弃物农业”将人、畜的粪便等用来肥田，改善土壤结构，体现了循环原理
C. 进行生态工程建设时，不仅要考虑自然生态系统的规律，也要考虑经济和社会系统的影响力，体现了协调原理
D. 生态系统的各组分之间要有适当比例，优化结构和功能，体现了自生原理
【答案】C
【解析】
【分析】生态工程以生态系系统的自我组织、自我调节为基础，遵循着自生、循环、协调、整体等生态学基本原理。
【详解】A、自生原理是指通过有效选择生物组分并合理布设，有助于生态系统维持自生能力，湿地生态工程中，移除河流中的富营养化沉积物和有毒物质来降低水体污染，有利于生态系统的自生，体现了自生原理，A正确；
B、“无废弃物农业”指的是生态农业中一些物质被循环利用，没有直接作为废弃物抛弃而污染环境，这一成就所遵循的基本原理是物质循环再生原理，将人、畜的粪便等用来肥田，改善土壤结构，体现了循环原理，B正确；
C、进行生态工程建设时，不仅要考虑自然生态系统的规律，也要考虑经济和社会系统的影响力，体现了整体原理而非协调原理，C错误；
D、生态系统的各组分之间要有适当比例，优化结构和功能，这体现了生态系统的自生原理，通过确保各组分之间的适当比例和优化结构和功能，可以维持生态系统的稳定和可持续发展，从而实现生态系统的自我调节和自我修复能力，D正确。
故选C。
5. 小龙虾作为一种水产资源被广泛开发利用。小龙虾有挖洞筑巢的习性，以昆虫、稻田杂草、某些小鱼等为食。农业技术人员建立稻虾共作的田间工程（如图所示），通过挖掘环形沟环绕稻田，为小龙虾提供繁殖和栖息环境。根据以上信息，下列有关稻虾共作的田间工程表述不合理的是（ ）
A. 小龙虾在该生态系统中属于消费者，且可同时处于多个营养级
B. 稻虾共作农田生态系统的抵抗力稳定性比普通稻田生态系统的低
C. 稻虾共作中小龙虾的粪便可减少化肥的使用，体现了生态工程的循环原理
D. 稻虾共作中常选择茎秆粗壮抗倒伏的水稻品种体现了生态工程的协调原理
【答案】B
【解析】
【分析】生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益。建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，促进物质循环，减少化肥的使用，减少环境污染。
【详解】A、小龙虾有挖洞筑巢的习性，以昆虫、稻田杂草、某些小鱼等为食，小龙虾在该生态系统中属于消费者，且可同时处于多个营养级，A正确；
B、普通稻田的农田生态系统，由于成分比较单一，营养结构简单，自我调节能力弱，所以其抵抗力稳定性比稻虾共作农田生态系统的抵抗力稳定性低，B错误；
C、稻虾共作中小龙虾的粪便可减少化肥的使用，粪便经分解者分解产生无机物被生产者利用，体现了生态工程的循环原理，C正确；
C、在进行生态工程建设时，也需要考虑生物与环境、生物与生物的协调与适应，稻虾共作中常选择茎秆粗壮抗倒伏的水稻品种体现了生态工程的协调原理，D正确。
故选B。
6. 传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，可以用于腐乳、酱、酱油、醋、泡菜和豆豉等的加工。相关叙述正确的是（ ）
A. 传统发酵技术制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
B. 传统发酵过程中为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
C. 制作果酒时，挑选新鲜葡萄，去除枝梗后用清水冲洗再榨汁
D. 通过传统发酵技术也可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
【答案】A
【解析】
【分析】直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的。利用传统发酵技术制作的食品还有酱、酱油、醋泡菜和豆豉等，它们是我国传统饮食文化的重要组成部分。
【详解】A、传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物，统发酵技术制作果酒、果醋和腐乳是利用植物体表面天然的微生物来进行发酵的，A正确；
B、传统发酵过程中为降低杂菌污染，发酵前需要对器具进行消毒，传统发酵技术通常利用原料中的野生菌种进行发酵，原料不能消毒和灭菌，B错误；
C、制作果酒时挑选新鲜葡萄，应先用清水冲洗，再去除葡萄的枝梗，以防止杂菌的污染，C错误；
D、单细胞蛋白本生就是一种微生物，并不是一种微生物细胞的提取物，D错误。
故选A。
7. 获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术的发展应围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列有关无菌技术的说法，正确的是（ ）
A. 配制固体培养基时，应该先倒平板再进行湿热灭菌
B. 对于实验者的衣物、手及涂布器等不应进行灭菌，只要消毒即可
C. 在用平板划线法接种的过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线
D. 用过的培养基应该灭菌后再丢弃，长时间未使用的培养基仍然可直接使用
【答案】C
【解析】
【分析】常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒。
【详解】A、配制好的培养基先灭菌后再进行倒平板，这样做可以最大程度上避免其他杂菌对培养基和实验的污染，A错误；
B、对于实验者的衣物、手不应进行灭菌，只要消毒即可，而涂布器需要经过灭菌，B错误；
C、在用平板划线法接种的过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线，避免高温杀伤菌种，C正确；
D、使用过的微生物培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃，以防止杂菌污染环境，长时间未使用的培养基不可再使用，D错误。
故选C。
8. 反刍动物，如牛和羊具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。科研小组欲培养和分离分解尿素的微生物。下列叙述正确的是（ ）
A. 在培养分解尿素微生物的培养基中加入蛋白胨等物质提供氮源。
B. 分解尿素的微生物选择需要获取瘤胃的消化物进行稀释筛选培养。
C. 若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可进行平板划线法接种。
D. 分解尿素的微生物鉴定时可用刚果红指示剂。
【答案】B
【解析】
【分析】瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是异养厌氧型的微生物。筛选尿素分解菌分解菌需要以尿素为唯一氮源的选择培养基，微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法。尿素分解菌的鉴定方法是酚红指示剂。
【详解】A、从瘤胃中分离尿素分解菌时，培养基中应以尿素为唯一氮源，在该培养基上只有能分解尿素的微生物能生长，其它微生物不能生长，A错误；
B、分解尿素的微生物选择可以通过获取瘤胃的消化物进行稀释筛选培养，这是因为瘤胃消化物中可能含有能够分解尿素的微生物，B正确；
C、微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法不能计数，因此若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可进行稀释涂布平板法接种，C错误；
D、刚果红指示剂主要用于检测纤维素分解菌，因为它能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可以鉴定出纤维素分解菌，分解尿素的微生物鉴定时可用酚红指示剂，D错误。
故选B。
9. 下图是啤酒生产的主发酵阶段工艺流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 过程a的目的是获得大量的淀粉酶，过程b温度不宜过高
B. 过程e中蒸煮是为了终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
C. 过程f是发酵工程的中心环节，需要严格控制温度、pH和溶氧量等
D. 过程g杀死啤酒中所有微生物，以保证啤酒的品质和风味
【答案】D
【解析】
【分析】大麦种子萌发时，其贮存的大分子物质淀粉、蛋白质分解为小分子，为种子萌发提供物质和能量。酒精发酵的原理是在无氧条件下，酵母菌无氧呼吸产生酒精，并释放能量。
【详解】A、大麦萌发时会产生大量的淀粉酶，过程a的目的是获得大量的淀粉酶，过程b温度不宜过高，温度过高会降低淀粉酶的活性，A正确；
B、酶活性的发挥需要适宜的温度，而蒸煮过程中淀粉酶活性因高温丧失，因此蒸煮过程可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B正确；
C、发酵过程，即操作f是发酵工程的中心环节，为了提高发酵效率，该过程需要严格控制温度、pH和溶氧量等，C正确；
D、过程g通常不采用高温蒸煮法进行消毒，以免影响啤酒的品质，而是采用过滤的方法进行消毒以除去啤酒中的大部分微生物，以延长其保存的时间，D错误。
故选D。
10. 武夷山“大红袍”因其品质优良，被列入国家级非物质文化遗产名录茶类中。利用植物组织培养手段快速繁殖优良品种，是实现武夷山岩茶高品质品种大规模生产的途径。下列哪项不是成功的要素（ ）
A. 对培养基、器械等都要进行高压蒸汽灭菌，并确保无菌操作
B. 为保持大红袍的优良遗传性状，应选用花粉进行离体培养
C. 对植物材料进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物材料的耐受能力
D. 根据植物不同的营养需求，适当地调节培养基的营养成分及激素类物质的种类和比例
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养是指将离体的植 物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，其原理为植物细胞的全能性。
【详解】A、植物组织培养中细胞表现出全能性的条件为：离体、严格的无菌条件、适宜的培养条件及适宜浓度和比例的激素，因此要对培养基、器械等都要进行高压蒸汽灭菌，并确保无菌操作，A正确；
B、为保持大红袍的优良遗传性状，可采用无性繁殖如嫁接，花粉形成经过减数分裂，配子遗传物质发生重组，优良性状不一定得以维持，B错误；
C、对植物的活体材料进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物材料的耐受能力，不能使细胞死亡，C正确；
D、根据植物不同时期的营养及发育需求，适当地调节培养基的营养成分及激素类物质的种类和比例，如生长素与细胞分裂素比值高，有利于根的分化，反之，利于芽的分化，D正确。
故选B。
11. 在治疗大面积烧伤时，通常采用烧伤病人的健康皮肤细胞进行贴壁培养并移植。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 培养时应定期更换培养液以便清除代谢废物
B. 培养前需对培养液和用具进行灭菌处理
C. 动物细胞培养过程中在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸
D. 培养中贴壁细胞相互接触时通常会停止分裂
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害，应定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物，A正确；
B、实验在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，B正确；
C、动物细胞培养过程中在培养液中通入5%的CO2作用是维持培养环境的pH，C错误；
D、实验中贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，D正确。
故选C。
12. 科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒
B. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
D. 将纯化的核衣壳反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
【答案】A
【解析】
【分析】1、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。2、该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【详解】A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，A正确；
B、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；
C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C错误；
D、用纯化核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫反应，以获得相应的B细胞，从小鼠血清中分离的抗体数量少，不是单克隆抗体，D错误。
故选A。
13. 我国科学家通过对动物体细胞进行基因编辑，得到含有修饰后的目的基因的细胞作为供体，利用体细胞核移植技术获得基因修饰克隆动物。下列叙述错误的是（ ）
A. 使用的受体卵母细胞需处于MⅡ期且去除核膜包被的细胞核
B. 需要用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育
C. 为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎进行分割
D. 体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因；克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
【详解】A、卵母细胞需处于MⅡ期中的核其实是纺锤体—染色体复合物，此时没有核膜，A错误；
B、使用电刺激、Ca2+载体等方法可以激活重构胚, 使其完成细胞分裂和发育过程，B正确；
C、为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎（桑葚胚或囊胚）进行分割，属于无性繁殖，C正确；
D、体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷，需进一步探索和完善，D正确。
故选A。
14. 广州动物园计划引进梅花鹿进行异地繁殖保护。梅花鹿季节性发情，属于单胎动物。科研人员通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 采集梅花鹿的卵母细胞和精子可直接用于体外受精
B. 卵母细胞受精时完成减数第二次分裂，同时产生三个第二极体
C. 卵母细胞受精时，防止多精子入卵的机制是透明带反应
D. 梅花鹿胚胎早期发育时，囊胚时发生细胞分化现象
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。（2）桑椹（桑葚）胚：32个细胞左右的胚胎。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、体外受精时卵母细胞需要培养到MII中期（减数第二次分裂中期），精子需要获能才能具有受精能力，A错误；
B、多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，因而不会形成第二极体，B错误；
C、卵母细胞受精时，防止多精子入卵的机制是透明带反应和卵细胞膜反应，C错误；
D、胚胎发育至囊胚时开始细胞分化，出现内细胞团和滋养层等结构，D正确。
故选D。
15. 1978年科学家将小鼠的桑椹胚一分为二获得成功，目前胚胎工程技术发展越来越成熟，下图中a、b、c表示现代胚胎工程中使用的多项技术，①②③分别表示其结果。下列说法不正确的是（ ）
A. 若a是体细胞核移植技术，则①反映了动物体细胞核具有全能性
B. 若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型不一定相同
C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D. 若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
【答案】C
【解析】
【分析】1、动物细胞核移植技术体现动物细胞核具有全能性；
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物；
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
【详解】A、若a是体细胞核移植技术，则①反应了动物体细胞的细胞核具有全能性，A正确；
B、胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同，但表现型不一定完全相同，因为表型还受环境的影响，B正确；
C、①②③中作为供体的动物品种是珍惜的或存量少的雌性动物，而受体只要健康和具有良好的繁殖能力即可，不需要是珍稀或存量少的雌性动物，C错误；
D、若b是体外受精技术，则②为试管动物，这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故选C。
16. 新疆光照最多可达到18个小时以上，生产的棉花以绒长、品质好、产量高著称于世，其年产量超500万吨，占国内产量比重约87%，但在棉花在种植过程中常常会受到棉铃虫的侵袭，这会使棉花大量减产，早期农业科技工作者采用重组DNA技术获得抗充棉新品种，下列关于基本工具的说错误的是（ ）
A. T4 DNA连接酶只能连接双链DNA片段的平末端
B. 细菌细胞内含有的限制酶不能对自身DNA进行切割
C. 限制酶切割DNA后不一定能产生黏性末端
D. 质粒是基因工程中常用的载体
【答案】A
【解析】
【分析】两种DNA连接酶(E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：相同点：都缝合磷酸二酯键。不同点：E·cliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。
【详解】A、T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低，A错误；
B、限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的碱基序列，并在特定的位点上进行切割，然而，原核生物中不存在该酶的识别序列，或者识别序列已经被修饰，因此限制酶不会切割原核生物自身的DNA，这种机制确保了细菌自身的DNA不会被误切，同时也能够抵御外源DNA的入侵，B正确；
C、限制酶切割DNA后不一定能产生黏性末端，也可能是平末端，C正确；
D、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，质粒是基因工程中常用的载体，D正确。
故选A。
17. 薇甘菊是一种喜光的多年生藤本植物，能快速覆盖于木本植物上，导致其无法进行光合作用而死亡。薇甘菊多侵害疏于管理的路边或林地，并快速形成群落中的单优势种群，被称为“生态系统生物多样性终极杀手”。回答下列问题：
（1）薇甘菊入侵初期，其种群数量快速增长的原因是__________（至少答出两点）。
（2）薇甘菊入侵的过程中发生了群落的次生演替。被入侵后的生态系统自我调节能力________，其原因是___________。
（3）科研人员采用具有较高经济价值的本地红薯作为替代物种治理薇甘菊入侵。红薯是一种有很强无性繁殖能力的攀援藤本植物，具有与薇甘菊相似的形态特征，是本地的主要粮食作物之一。
①利用本地红薯进行替代控制，遵循了生态工程的_____________原理。
②科研人员对不同种植模式下薇甘菊和红薯的生长特征进行了定量分析，结果如下表。
依据表中数据推测，混种模式下薇甘菊单株总生物量显著降低的原因是_______________。
③综合以上信息，请分析红薯可以作为对薇甘菊进行替代控制的理想物种之一的原因（答出两点）________________。
【答案】（1）入侵地环境适宜，且薇甘菊在与其他植物种间竞争中处于优势
（2） ①. 降低 ②. 薇甘菊的入侵使群落的营养结构复杂程度（物种丰富度）降低
（3） ①. 协调、整体 ②. 在混种模式下，薇甘菊叶柄短、叶面积小，易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物 ③. 混种模式下红薯处于竞争优势，可有效阻止薇甘菊的入侵；红薯具有较高经济价值；种植红薯可避免因引种带来的二次生物入侵风险
【解析】
【分析】演替的类型包括初生演替和次生演替。二者最主要的区别是起点不同。初生演替是指在一个从来没有被植物覆盖的地面，或者原来存在过植被、但被彻底消灭了的地方发生的演替。次生演替是指在原有植被虽不存在，但原有土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体的地方发生的演替。生态系统中的组分越多，食物网越复杂，其自我调节能力就越强，抵抗力稳定性就越高。
【小问1详解】
薇甘菊是一种喜光的多年生藤本植物，能快速覆盖于木本植物上，导致其无法进行光合作用而死亡。薇甘菊多侵害疏于管理的路边或林地，并快速形成群落中的单优势种群，由此判断薇甘菊入侵初期，其种群数量快速增长的原因是：入侵地环境适宜，且薇甘菊在与其他植物的种间竞争中处于优势。
【小问2详解】
薇甘菊入侵的过程中发生了群落的次生演替，入侵后，快速形成群落中的单优势种群，使群落的营养结构复杂程度（物种丰富度）降低，自我调节能力降低，抵抗力稳定性差。
【小问3详解】
①红薯是一种有很强无性繁殖能力的攀援藤本植物，具有与薇甘菊相似的形态特征，二者是种间竞争关系，可以用于治理薇甘菊入侵，利用本地红薯进行替代控制，遵循了生态工程的协调、整体原理。
②根据表格数据可知，1:1混种模式下，和红薯相比，薇甘菊叶柄短、叶面积小，薇甘菊易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物，导致薇甘菊单株总生物量显著降低。
③1:1混种模式下，和红薯相比，薇甘菊叶柄短、叶面积小，薇甘菊易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物，红薯处于竞争优势，可有效阻止薇甘菊的入侵，此外红薯是本地的主要粮食作物之一，具有较高的经济价值，且种植红薯可避免因引种带来的二次生物入侵风险。
18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。
（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了______________技术，三种植株中核遗传物质与甲相同的是________。
（2）①选择幼嫩的叶用于接种的原因是_________，启动②③的关键激素是__________。⑤原生质体的培养液需要维持一定浓度，原因是_______________。
（3）正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是________。
【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 乙、丁
（2） ①. 分裂能力强，分化程度低 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定
（3）茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物
【解析】
【分析】据图分析，①表示将植株甲幼嫩的叶接种到培养基中，使其生长；②表示经过脱分化过程培养出愈伤组织；③表示再分化形成芽、根；④表示对植物的愈伤组织进行诱变处理，促使其发生突变；⑤表示植物体细胞杂交获得原生质体；⑥表示植物体细胞培养。
【小问1详解】
狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都是经过在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株的过程，都利用了植物组织培养技术；植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同，植株乙、丁形成过程未作诱变处理，遗传物质与甲植株相同。
【小问2详解】
幼嫩的叶有丝分裂旺盛，细胞分裂能力强，分化程度低，有利于植物组织培养，因此①选择幼嫩的叶用于接种；在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素的主要作用是促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽，所以启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；⑤在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体；此外为保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定，原生质体的培养液需要维持一定浓度。
【小问3详解】
由题意可知，加入茉莉酸甲酯和水杨酸后，愈伤组织细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，说明茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物。
19. 采后的葡萄在运输、贮藏等过程中，易受黑曲霉感染而腐烂引起“黑粉病”，食用价值下降。为解决这一问题，研究人员从葡萄园土壤中分离、纯化和筛选出对黑曲霉有较强抑制作用的拮抗细菌，具体流程如图。
（1）步骤Ⅰ采用的接种方法是________，采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的目的是_______________。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的________结构。
（3）下列关于步骤Ⅳ的说法正确的有 。
A. 拮抗细菌与黑曲霉竞争营养与生存空间
B. 拮抗细菌可能产生了某种物质抑制黑曲霉的生长、繁殖
C. 黑曲霉可能产生了某种抗生素抑制拮抗细菌的生长、繁殖
D. 拮抗细菌对黑曲霉抑制作用越大，则其周围的透明圈越大
（4）为进一步研究拮抗细菌对葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人员进行了如图实验，其中施加的处理①是____________，②是_________。
【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 防止冷凝水倒流，污染培养基
（2）DNA （3）ABD
（4） ①. 接种黑曲霉 ②. 接种黑曲霉和拮抗细菌
【解析】
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
小问1详解】
结合平板上菌落的分布（分别较均匀），可知步骤1采用的接种方法是稀释涂布平板法。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是防止冷凝水倒流，污染培养基。
【小问2详解】
在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的DNA结构。
【小问3详解】
结合步骤Ⅲ和Ⅳ可知，在拮抗细菌的中间接种了黑曲霉，最后拮抗细菌周围出现透明圈，而黑曲霉的菌落消失。
A、黑曲霉与拮抗细菌都接种在同一块平板上，最终黑曲霉没有生长而拮抗细菌生长较好，可能是由于拮抗细菌与黑曲霉竞争营养与生存空间，且拮抗细菌的竞争能力更强，A正确；
B、拮抗细菌可能产生了某种物质抑制黑曲霉的生长繁殖，使得黑曲霉不能生长，B正确；
C、若黑曲霉可能产生了某种抗生素抑制拮抗细菌的生长繁殖，则结果应为有黑曲霉的菌落而无拮抗细菌的菌落，与图示结果不符，C错误；
D、透明圈内黑曲霉均无法生长，拮抗细菌对黑曲霉抑制作用越大，则其周围的透明圈越大，D正确。
故选ABD。
【小问4详解】
①发生腐烂，应该加的是黑曲霉；②未发生腐烂，根据前面的结果可知，拮抗细菌有抑制黑曲霉的作用，因此②加入的是拮抗细菌和黑曲霉。
20. 下图为筛选、制备单克隆抗体的示意图，①~⑤代表相关过程，a～g代表相关细胞。据图回答下列问题：
（1）由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有_________________，过程①是给小鼠注射S抗原蛋白，其目的是________________。
（2）图中过程③④为两次筛选过程，过程③是指把c细胞群稀释，然后都放在_____培养基的多孔培养皿中培养，只有____________________能够存活且增殖，因此细胞集落为单个存活细胞的克隆；过程④是用________方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
（3）抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。如下图所示，ADC依靠__________（填“a”或“b”）最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养和动物细胞融合技术 ②. 为了让小鼠能产生抗S抗原的抗体的B淋巴细胞
（2） ①. 特定的选择培养基 ②. 融合的杂交瘤细胞 ③. 抗原-抗体杂交检测
（3）b
【解析】
【分析】抗体药物偶联物（ADC） 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。
【小问1详解】
由图可知，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合技术，给小鼠注射S抗原蛋白，是为了让小鼠能产生抗S抗原的抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】
图中过程③④为两次筛选过程，将细胞群稀释之后都放在特定的选择培养基的多孔培养皿中培养，只有融合的杂交瘤细胞能够存活且增殖。再利用④抗原-抗体杂交的检测法筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
【小问3详解】
抗体—药物偶联物依靠b药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。
21. 研究发现人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取)，过程如下图所示。其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而影响亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸)，基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题。
（1）过程②需要的限制酶是____________；
（2）为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是________________。为达到筛选目的，培养基的营养成分中应不含有________。将成纤维细胞培养一段时间后观察，筛选出________(选填“显示”或“不显示”)绿色荧光的细胞用于过程⑤。
（3）过程④常用________法，过程⑨为胚胎移植，图中早期胚胎的________(结构)将发育成转基因羊。
【答案】（1）BamHⅠ、HindIII
（2） ①. 基因Leu、基因GFP ②. 亮氨酸 ③. 不显示
（3） ①. 显微注射 ②. 内细胞团
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
过程②是获取目的基因，据图分析，B形成的黏性末端GATCC…与BamHⅠ的识别序列一致，黏性末端AGCTT…与HindⅢ的识别序列一致，故物质 B 是用限制酶BamHⅠ、HindⅢ切割的结果。
【小问2详解】
为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是基因Leu（通过亮氨酸含量进行比较）和基因GFP（控制合成绿色荧光蛋白）；据（1）分析可知，用限制酶BamHⅠ、HindⅢ切割质粒S和目的基因，形成的重组质粒 T是（Leu+XbaⅠ+B），不含有基因GFP，无法控制合成绿色荧光蛋白，而标记基因 Leu 控制合成亮氨酸，为达到筛选目的，培养基的营养成分中应不含有亮氨酸，将成纤维细胞培养一段时间后观察，含重组质粒T的成纤维细胞可以合成亮氨酸而存活，只需要筛选出不显示绿色荧光的细胞用于过程⑤即可。
【小问3详解】
过程④是将目的基因导入受体细胞，动物常用显微注射法；过程⑨为胚胎移植，是将早期胚胎移植到受体子宫内的过程，早期胚胎中的内细胞团具有全能性，将发育成转基因羊。种植模式
叶柄长（cm）
叶面积（cm2）
单株总生物量（g）
单独种植薇甘菊
7.05
21.71
12.42
1：1混种
薇甘菊
6.80
14.26
2.81
红薯
14.13
88.68
13.28
限制酶
BamHⅠ
BglⅡ
HindⅢ
XbaⅠ
识别序列和切割位点
G↓GATCC
A↓GATCT
A↓AGCTT
T↓CTAGA
1. 近年来，清远市正如火如荼地开展生态文明建设，“绿水青山就是金山银山”的理念结出了丰硕成果。生态足迹是“生态清远”建设要考虑的问题之一，下列说法正确的是（ ）
A. 北江河流治理过程中选种的净化能力强的水生植物，有利于减小生态足迹
B. 周末返校时搭乘公交车属于低碳交通，能使人类的生态足迹增大
C. 加大生活废水处理等措施能有效增大人类的生态足迹
D. 全市提倡垃圾分类、回收再利用可增大人类的生态足迹
【答案】A
【解析】
【分析】生态足迹：又叫生态占用，指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域面积。生态足迹越大，代表人类所需的资源越多，对生态和环境的影响越大。
【详解】A、北江河流治理过程中选种净化能力强的水生植物，可以减少吸纳废物的土地及水域面积，有利于减小生态足迹，A正确；
B、周末返校时搭乘公交车属于低碳交通，能使人类的生态足迹减小，B错误；
CD、提倡低碳生活方式、垃圾分类、回收再利用、生活废水处理和建立人工湿地等能有效降低人类的生态足迹，CD错误.
故选A。
2. 有关人与自然和谐共生，二十大报告中这样说：我们坚持绿水青山就是金山银山的理念，坚持山水林田湖草沙一体化保护和系统治理，生态文明制度体系更加健全，生态环境保护发生历史性、转折性、全局性变化，我们的祖国天更蓝、山更绿、水更清。下列关于全球性生态问题的叙述错误的是（ ）
A. 全球性生态环境问题主要包括全球气候变暖、水资源短缺、臭氧层破坏、土地荒漠化、生物多样性丧失以及环境污染等
B. 人口增长过快会导致资源短缺、交通拥堵、人口老龄化等问题，人口停止增长或负增长会导致劳动力不足
C. “桑基鱼塘”应用了生态工程的循环、协调、自生等原理，有利于经济效益和生态效益的同步发展
D. 作为中学生的我们应该身体力行、积极宣传生态文明建设，践行经济、社会、生态相互协调的可持续发展理念
【答案】B
【解析】
【分析】全球性生态环境问题：水体污染的原因主要是企业排放生产污水、生活污水的排放、垃圾堆放等；形成酸雨的原因主要是煤、石油、天然气等的燃烧；臭氧层破坏的原因主要是人们大量使用氯氟烃、四氯化碳、甲烷等物质，加速了臭氧层的破坏；生物多样性下降的原因主要是生物栖息地的丧失和破碎化、荒漠化、过度利用与消费，大量的野生生物资源遭到过度开发和利用等。
【详解】A、全球性生态环境问题是全球范围内的生态环境问题，有全球气候变暖、水资源短缺、臭氧层破坏、土地荒漠化、生物多样性丧失、环境污染等，A正确；
B、人口增长过快不会导致人口老龄化，B错误；
C、“桑基鱼塘”中蚕粪喂鱼，塘泥肥桑，兼顾自然-社会-经济效益，运用了循环、协调、整体、自生等原理，有利于经济效益和生态效益的同步发展，C正确；
D、作为中学生，我们应该从自身做起，积极践行绿色生活方式，参与环保活动，宣传环保理念，支持可持续发展政策和项目，并勇于创新和实践。通过我们的努力，可以为建设美丽中国和实现可持续发展目标贡献一份力量，D正确。
故选B。
3. 湿地是地球上重要的生态系统，中国湿地面积占国土面积的比例远低于世界平均水平，并面临气候变化和人类活动的影响，中国政府高度重视并切实加强湿地保护与恢复工作。下列关于湿地的叙述，正确的是（ ）
A. 湿地生态系统的生物多样性在促进基因流动、协同进化等直接价值方面具有重要作用
B. 保护湿地生物多样性，关键是要处理好人与自然的相互关系。
C. 人工湿地可以净化污水，改善水质，调节小气候，体现了生物多样性的直接价值
D. 恢复湿地遵循自然规律，兼顾生态和经济效益，是循环原理的体现
【答案】B
【解析】
【分析】生物多样性的价值直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；潜在价值：目前人类不清楚的价值。
【详解】A、生物多样性在促进生态系统中基因流动和协同进化等方面，具有重要的科研价值和生态价值，这属于直接价值和间接价值，A错误；
B、保护生物多样性的关键是要处理好人与自然的相互关系，做到协调发展，B正确；
C、间接价值是对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能），人工湿地可以净化污水，改善水质，调节小气候，体现了生物多样性的间接价值，C错误；
D、遵循整体原理要求构建生态工程是为人类的生活创造更好的生存条件以及生活条件，发展经济，恢复湿地遵循自然规律，兼顾生态和经济效益，是整体原理的体现，D错误。
故选B。
4. 下列关于生态工程所遵循的基本原理的叙述，不正确的是（ ）
A. 湿地生态工程中，通过移除富营养化沉积物和有毒物质，创造有益于水生生物生存的环境，体现了自生原理
B. “无废弃物农业”将人、畜的粪便等用来肥田，改善土壤结构，体现了循环原理
C. 进行生态工程建设时，不仅要考虑自然生态系统的规律，也要考虑经济和社会系统的影响力，体现了协调原理
D. 生态系统的各组分之间要有适当比例，优化结构和功能，体现了自生原理
【答案】C
【解析】
【分析】生态工程以生态系系统的自我组织、自我调节为基础，遵循着自生、循环、协调、整体等生态学基本原理。
【详解】A、自生原理是指通过有效选择生物组分并合理布设，有助于生态系统维持自生能力，湿地生态工程中，移除河流中的富营养化沉积物和有毒物质来降低水体污染，有利于生态系统的自生，体现了自生原理，A正确；
B、“无废弃物农业”指的是生态农业中一些物质被循环利用，没有直接作为废弃物抛弃而污染环境，这一成就所遵循的基本原理是物质循环再生原理，将人、畜的粪便等用来肥田，改善土壤结构，体现了循环原理，B正确；
C、进行生态工程建设时，不仅要考虑自然生态系统的规律，也要考虑经济和社会系统的影响力，体现了整体原理而非协调原理，C错误；
D、生态系统的各组分之间要有适当比例，优化结构和功能，这体现了生态系统的自生原理，通过确保各组分之间的适当比例和优化结构和功能，可以维持生态系统的稳定和可持续发展，从而实现生态系统的自我调节和自我修复能力，D正确。
故选C。
5. 小龙虾作为一种水产资源被广泛开发利用。小龙虾有挖洞筑巢的习性，以昆虫、稻田杂草、某些小鱼等为食。农业技术人员建立稻虾共作的田间工程（如图所示），通过挖掘环形沟环绕稻田，为小龙虾提供繁殖和栖息环境。根据以上信息，下列有关稻虾共作的田间工程表述不合理的是（ ）
A. 小龙虾在该生态系统中属于消费者，且可同时处于多个营养级
B. 稻虾共作农田生态系统的抵抗力稳定性比普通稻田生态系统的低
C. 稻虾共作中小龙虾的粪便可减少化肥的使用，体现了生态工程的循环原理
D. 稻虾共作中常选择茎秆粗壮抗倒伏的水稻品种体现了生态工程的协调原理
【答案】B
【解析】
【分析】生态农业是一个农业生态经济复合系统，将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益。建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，促进物质循环，减少化肥的使用，减少环境污染。
【详解】A、小龙虾有挖洞筑巢的习性，以昆虫、稻田杂草、某些小鱼等为食，小龙虾在该生态系统中属于消费者，且可同时处于多个营养级，A正确；
B、普通稻田的农田生态系统，由于成分比较单一，营养结构简单，自我调节能力弱，所以其抵抗力稳定性比稻虾共作农田生态系统的抵抗力稳定性低，B错误；
C、稻虾共作中小龙虾的粪便可减少化肥的使用，粪便经分解者分解产生无机物被生产者利用，体现了生态工程的循环原理，C正确；
C、在进行生态工程建设时，也需要考虑生物与环境、生物与生物的协调与适应，稻虾共作中常选择茎秆粗壮抗倒伏的水稻品种体现了生态工程的协调原理，D正确。
故选B。
6. 传统发酵技术通常是家庭式或作坊式的，可以用于腐乳、酱、酱油、醋、泡菜和豆豉等的加工。相关叙述正确的是（ ）
A. 传统发酵技术制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
B. 传统发酵过程中为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
C. 制作果酒时，挑选新鲜葡萄，去除枝梗后用清水冲洗再榨汁
D. 通过传统发酵技术也可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
【答案】A
【解析】
【分析】直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的。利用传统发酵技术制作的食品还有酱、酱油、醋泡菜和豆豉等，它们是我国传统饮食文化的重要组成部分。
【详解】A、传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物，统发酵技术制作果酒、果醋和腐乳是利用植物体表面天然的微生物来进行发酵的，A正确；
B、传统发酵过程中为降低杂菌污染，发酵前需要对器具进行消毒，传统发酵技术通常利用原料中的野生菌种进行发酵，原料不能消毒和灭菌，B错误；
C、制作果酒时挑选新鲜葡萄，应先用清水冲洗，再去除葡萄的枝梗，以防止杂菌的污染，C错误；
D、单细胞蛋白本生就是一种微生物，并不是一种微生物细胞的提取物，D错误。
故选A。
7. 获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术的发展应围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列有关无菌技术的说法，正确的是（ ）
A. 配制固体培养基时，应该先倒平板再进行湿热灭菌
B. 对于实验者的衣物、手及涂布器等不应进行灭菌，只要消毒即可
C. 在用平板划线法接种的过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线
D. 用过的培养基应该灭菌后再丢弃，长时间未使用的培养基仍然可直接使用
【答案】C
【解析】
【分析】常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒。
【详解】A、配制好的培养基先灭菌后再进行倒平板，这样做可以最大程度上避免其他杂菌对培养基和实验的污染，A错误；
B、对于实验者的衣物、手不应进行灭菌，只要消毒即可，而涂布器需要经过灭菌，B错误；
C、在用平板划线法接种的过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线，避免高温杀伤菌种，C正确；
D、使用过的微生物培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃，以防止杂菌污染环境，长时间未使用的培养基不可再使用，D错误。
故选C。
8. 反刍动物，如牛和羊具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。科研小组欲培养和分离分解尿素的微生物。下列叙述正确的是（ ）
A. 在培养分解尿素微生物的培养基中加入蛋白胨等物质提供氮源。
B. 分解尿素的微生物选择需要获取瘤胃的消化物进行稀释筛选培养。
C. 若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可进行平板划线法接种。
D. 分解尿素的微生物鉴定时可用刚果红指示剂。
【答案】B
【解析】
【分析】瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是异养厌氧型的微生物。筛选尿素分解菌分解菌需要以尿素为唯一氮源的选择培养基，微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法。尿素分解菌的鉴定方法是酚红指示剂。
【详解】A、从瘤胃中分离尿素分解菌时，培养基中应以尿素为唯一氮源，在该培养基上只有能分解尿素的微生物能生长，其它微生物不能生长，A错误；
B、分解尿素的微生物选择可以通过获取瘤胃的消化物进行稀释筛选培养，这是因为瘤胃消化物中可能含有能够分解尿素的微生物，B正确；
C、微生物接种的方法常用的有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法不能计数，因此若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可进行稀释涂布平板法接种，C错误；
D、刚果红指示剂主要用于检测纤维素分解菌，因为它能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可以鉴定出纤维素分解菌，分解尿素的微生物鉴定时可用酚红指示剂，D错误。
故选B。
9. 下图是啤酒生产的主发酵阶段工艺流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 过程a的目的是获得大量的淀粉酶，过程b温度不宜过高
B. 过程e中蒸煮是为了终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
C. 过程f是发酵工程的中心环节，需要严格控制温度、pH和溶氧量等
D. 过程g杀死啤酒中所有微生物，以保证啤酒的品质和风味
【答案】D
【解析】
【分析】大麦种子萌发时，其贮存的大分子物质淀粉、蛋白质分解为小分子，为种子萌发提供物质和能量。酒精发酵的原理是在无氧条件下，酵母菌无氧呼吸产生酒精，并释放能量。
【详解】A、大麦萌发时会产生大量的淀粉酶，过程a的目的是获得大量的淀粉酶，过程b温度不宜过高，温度过高会降低淀粉酶的活性，A正确；
B、酶活性的发挥需要适宜的温度，而蒸煮过程中淀粉酶活性因高温丧失，因此蒸煮过程可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌，B正确；
C、发酵过程，即操作f是发酵工程的中心环节，为了提高发酵效率，该过程需要严格控制温度、pH和溶氧量等，C正确；
D、过程g通常不采用高温蒸煮法进行消毒，以免影响啤酒的品质，而是采用过滤的方法进行消毒以除去啤酒中的大部分微生物，以延长其保存的时间，D错误。
故选D。
10. 武夷山“大红袍”因其品质优良，被列入国家级非物质文化遗产名录茶类中。利用植物组织培养手段快速繁殖优良品种，是实现武夷山岩茶高品质品种大规模生产的途径。下列哪项不是成功的要素（ ）
A. 对培养基、器械等都要进行高压蒸汽灭菌，并确保无菌操作
B. 为保持大红袍的优良遗传性状，应选用花粉进行离体培养
C. 对植物材料进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物材料的耐受能力
D. 根据植物不同的营养需求，适当地调节培养基的营养成分及激素类物质的种类和比例
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养是指将离体的植 物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，其原理为植物细胞的全能性。
【详解】A、植物组织培养中细胞表现出全能性的条件为：离体、严格的无菌条件、适宜的培养条件及适宜浓度和比例的激素，因此要对培养基、器械等都要进行高压蒸汽灭菌，并确保无菌操作，A正确；
B、为保持大红袍的优良遗传性状，可采用无性繁殖如嫁接，花粉形成经过减数分裂，配子遗传物质发生重组，优良性状不一定得以维持，B错误；
C、对植物的活体材料进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物材料的耐受能力，不能使细胞死亡，C正确；
D、根据植物不同时期的营养及发育需求，适当地调节培养基的营养成分及激素类物质的种类和比例，如生长素与细胞分裂素比值高，有利于根的分化，反之，利于芽的分化，D正确。
故选B。
11. 在治疗大面积烧伤时，通常采用烧伤病人的健康皮肤细胞进行贴壁培养并移植。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 培养时应定期更换培养液以便清除代谢废物
B. 培养前需对培养液和用具进行灭菌处理
C. 动物细胞培养过程中在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸
D. 培养中贴壁细胞相互接触时通常会停止分裂
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、动物细胞培养中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害，应定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物，A正确；
B、实验在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，B正确；
C、动物细胞培养过程中在培养液中通入5%的CO2作用是维持培养环境的pH，C错误；
D、实验中贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，D正确。
故选C。
12. 科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒
B. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
D. 将纯化的核衣壳反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
【答案】A
【解析】
【分析】1、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。2、该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【详解】A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，A正确；
B、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；
C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C错误；
D、用纯化核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫反应，以获得相应的B细胞，从小鼠血清中分离的抗体数量少，不是单克隆抗体，D错误。
故选A。
13. 我国科学家通过对动物体细胞进行基因编辑，得到含有修饰后的目的基因的细胞作为供体，利用体细胞核移植技术获得基因修饰克隆动物。下列叙述错误的是（ ）
A. 使用的受体卵母细胞需处于MⅡ期且去除核膜包被的细胞核
B. 需要用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育
C. 为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎进行分割
D. 体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷
【答案】A
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因；克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
【详解】A、卵母细胞需处于MⅡ期中的核其实是纺锤体—染色体复合物，此时没有核膜，A错误；
B、使用电刺激、Ca2+载体等方法可以激活重构胚, 使其完成细胞分裂和发育过程，B正确；
C、为同时获得多个遗传背景相同的动物，移植前可对早期胚胎（桑葚胚或囊胚）进行分割，属于无性繁殖，C正确；
D、体细胞核移植技术日趋成熟，但许多克隆动物仍表现出遗传和生理缺陷，需进一步探索和完善，D正确。
故选A。
14. 广州动物园计划引进梅花鹿进行异地繁殖保护。梅花鹿季节性发情，属于单胎动物。科研人员通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 采集梅花鹿的卵母细胞和精子可直接用于体外受精
B. 卵母细胞受精时完成减数第二次分裂，同时产生三个第二极体
C. 卵母细胞受精时，防止多精子入卵的机制是透明带反应
D. 梅花鹿胚胎早期发育时，囊胚时发生细胞分化现象
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。（2）桑椹（桑葚）胚：32个细胞左右的胚胎。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、体外受精时卵母细胞需要培养到MII中期（减数第二次分裂中期），精子需要获能才能具有受精能力，A错误；
B、多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，因而不会形成第二极体，B错误；
C、卵母细胞受精时，防止多精子入卵的机制是透明带反应和卵细胞膜反应，C错误；
D、胚胎发育至囊胚时开始细胞分化，出现内细胞团和滋养层等结构，D正确。
故选D。
15. 1978年科学家将小鼠的桑椹胚一分为二获得成功，目前胚胎工程技术发展越来越成熟，下图中a、b、c表示现代胚胎工程中使用的多项技术，①②③分别表示其结果。下列说法不正确的是（ ）
A. 若a是体细胞核移植技术，则①反映了动物体细胞核具有全能性
B. 若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型不一定相同
C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D. 若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
【答案】C
【解析】
【分析】1、动物细胞核移植技术体现动物细胞核具有全能性；
2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物；
3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
【详解】A、若a是体细胞核移植技术，则①反应了动物体细胞的细胞核具有全能性，A正确；
B、胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同，但表现型不一定完全相同，因为表型还受环境的影响，B正确；
C、①②③中作为供体的动物品种是珍惜的或存量少的雌性动物，而受体只要健康和具有良好的繁殖能力即可，不需要是珍稀或存量少的雌性动物，C错误；
D、若b是体外受精技术，则②为试管动物，这为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故选C。
16. 新疆光照最多可达到18个小时以上，生产的棉花以绒长、品质好、产量高著称于世，其年产量超500万吨，占国内产量比重约87%，但在棉花在种植过程中常常会受到棉铃虫的侵袭，这会使棉花大量减产，早期农业科技工作者采用重组DNA技术获得抗充棉新品种，下列关于基本工具的说错误的是（ ）
A. T4 DNA连接酶只能连接双链DNA片段的平末端
B. 细菌细胞内含有的限制酶不能对自身DNA进行切割
C. 限制酶切割DNA后不一定能产生黏性末端
D. 质粒是基因工程中常用的载体
【答案】A
【解析】
【分析】两种DNA连接酶(E·cliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：相同点：都缝合磷酸二酯键。不同点：E·cliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。
【详解】A、T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低，A错误；
B、限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的碱基序列，并在特定的位点上进行切割，然而，原核生物中不存在该酶的识别序列，或者识别序列已经被修饰，因此限制酶不会切割原核生物自身的DNA，这种机制确保了细菌自身的DNA不会被误切，同时也能够抵御外源DNA的入侵，B正确；
C、限制酶切割DNA后不一定能产生黏性末端，也可能是平末端，C正确；
D、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，质粒是基因工程中常用的载体，D正确。
故选A。
17. 薇甘菊是一种喜光的多年生藤本植物，能快速覆盖于木本植物上，导致其无法进行光合作用而死亡。薇甘菊多侵害疏于管理的路边或林地，并快速形成群落中的单优势种群，被称为“生态系统生物多样性终极杀手”。回答下列问题：
（1）薇甘菊入侵初期，其种群数量快速增长的原因是__________（至少答出两点）。
（2）薇甘菊入侵的过程中发生了群落的次生演替。被入侵后的生态系统自我调节能力________，其原因是___________。
（3）科研人员采用具有较高经济价值的本地红薯作为替代物种治理薇甘菊入侵。红薯是一种有很强无性繁殖能力的攀援藤本植物，具有与薇甘菊相似的形态特征，是本地的主要粮食作物之一。
①利用本地红薯进行替代控制，遵循了生态工程的_____________原理。
②科研人员对不同种植模式下薇甘菊和红薯的生长特征进行了定量分析，结果如下表。
依据表中数据推测，混种模式下薇甘菊单株总生物量显著降低的原因是_______________。
③综合以上信息，请分析红薯可以作为对薇甘菊进行替代控制的理想物种之一的原因（答出两点）________________。
【答案】（1）入侵地环境适宜，且薇甘菊在与其他植物种间竞争中处于优势
（2） ①. 降低 ②. 薇甘菊的入侵使群落的营养结构复杂程度（物种丰富度）降低
（3） ①. 协调、整体 ②. 在混种模式下，薇甘菊叶柄短、叶面积小，易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物 ③. 混种模式下红薯处于竞争优势，可有效阻止薇甘菊的入侵；红薯具有较高经济价值；种植红薯可避免因引种带来的二次生物入侵风险
【解析】
【分析】演替的类型包括初生演替和次生演替。二者最主要的区别是起点不同。初生演替是指在一个从来没有被植物覆盖的地面，或者原来存在过植被、但被彻底消灭了的地方发生的演替。次生演替是指在原有植被虽不存在，但原有土壤条件基本保留，甚至还保留了植物的种子或其他繁殖体的地方发生的演替。生态系统中的组分越多，食物网越复杂，其自我调节能力就越强，抵抗力稳定性就越高。
【小问1详解】
薇甘菊是一种喜光的多年生藤本植物，能快速覆盖于木本植物上，导致其无法进行光合作用而死亡。薇甘菊多侵害疏于管理的路边或林地，并快速形成群落中的单优势种群，由此判断薇甘菊入侵初期，其种群数量快速增长的原因是：入侵地环境适宜，且薇甘菊在与其他植物的种间竞争中处于优势。
【小问2详解】
薇甘菊入侵的过程中发生了群落的次生演替，入侵后，快速形成群落中的单优势种群，使群落的营养结构复杂程度（物种丰富度）降低，自我调节能力降低，抵抗力稳定性差。
【小问3详解】
①红薯是一种有很强无性繁殖能力的攀援藤本植物，具有与薇甘菊相似的形态特征，二者是种间竞争关系，可以用于治理薇甘菊入侵，利用本地红薯进行替代控制，遵循了生态工程的协调、整体原理。
②根据表格数据可知，1:1混种模式下，和红薯相比，薇甘菊叶柄短、叶面积小，薇甘菊易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物，导致薇甘菊单株总生物量显著降低。
③1:1混种模式下，和红薯相比，薇甘菊叶柄短、叶面积小，薇甘菊易被红薯遮挡，不利于其光合作用合成有机物，红薯处于竞争优势，可有效阻止薇甘菊的入侵，此外红薯是本地的主要粮食作物之一，具有较高的经济价值，且种植红薯可避免因引种带来的二次生物入侵风险。
18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。
（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了______________技术，三种植株中核遗传物质与甲相同的是________。
（2）①选择幼嫩的叶用于接种的原因是_________，启动②③的关键激素是__________。⑤原生质体的培养液需要维持一定浓度，原因是_______________。
（3）正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是________。
【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 乙、丁
（2） ①. 分裂能力强，分化程度低 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定
（3）茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物
【解析】
【分析】据图分析，①表示将植株甲幼嫩的叶接种到培养基中，使其生长；②表示经过脱分化过程培养出愈伤组织；③表示再分化形成芽、根；④表示对植物的愈伤组织进行诱变处理，促使其发生突变；⑤表示植物体细胞杂交获得原生质体；⑥表示植物体细胞培养。
【小问1详解】
狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都是经过在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株的过程，都利用了植物组织培养技术；植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同，植株乙、丁形成过程未作诱变处理，遗传物质与甲植株相同。
【小问2详解】
幼嫩的叶有丝分裂旺盛，细胞分裂能力强，分化程度低，有利于植物组织培养，因此①选择幼嫩的叶用于接种；在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素的主要作用是促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽，所以启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；⑤在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体；此外为保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定，原生质体的培养液需要维持一定浓度。
【小问3详解】
由题意可知，加入茉莉酸甲酯和水杨酸后，愈伤组织细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，说明茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物。
19. 采后的葡萄在运输、贮藏等过程中，易受黑曲霉感染而腐烂引起“黑粉病”，食用价值下降。为解决这一问题，研究人员从葡萄园土壤中分离、纯化和筛选出对黑曲霉有较强抑制作用的拮抗细菌，具体流程如图。
（1）步骤Ⅰ采用的接种方法是________，采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的目的是_______________。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的________结构。
（3）下列关于步骤Ⅳ的说法正确的有 。
A. 拮抗细菌与黑曲霉竞争营养与生存空间
B. 拮抗细菌可能产生了某种物质抑制黑曲霉的生长、繁殖
C. 黑曲霉可能产生了某种抗生素抑制拮抗细菌的生长、繁殖
D. 拮抗细菌对黑曲霉抑制作用越大，则其周围的透明圈越大
（4）为进一步研究拮抗细菌对葡萄中黑曲霉的抑制效果，研究人员进行了如图实验，其中施加的处理①是____________，②是_________。
【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 防止冷凝水倒流，污染培养基
（2）DNA （3）ABD
（4） ①. 接种黑曲霉 ②. 接种黑曲霉和拮抗细菌
【解析】
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
小问1详解】
结合平板上菌落的分布（分别较均匀），可知步骤1采用的接种方法是稀释涂布平板法。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是防止冷凝水倒流，污染培养基。
【小问2详解】
在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的DNA结构。
【小问3详解】
结合步骤Ⅲ和Ⅳ可知，在拮抗细菌的中间接种了黑曲霉，最后拮抗细菌周围出现透明圈，而黑曲霉的菌落消失。
A、黑曲霉与拮抗细菌都接种在同一块平板上，最终黑曲霉没有生长而拮抗细菌生长较好，可能是由于拮抗细菌与黑曲霉竞争营养与生存空间，且拮抗细菌的竞争能力更强，A正确；
B、拮抗细菌可能产生了某种物质抑制黑曲霉的生长繁殖，使得黑曲霉不能生长，B正确；
C、若黑曲霉可能产生了某种抗生素抑制拮抗细菌的生长繁殖，则结果应为有黑曲霉的菌落而无拮抗细菌的菌落，与图示结果不符，C错误；
D、透明圈内黑曲霉均无法生长，拮抗细菌对黑曲霉抑制作用越大，则其周围的透明圈越大，D正确。
故选ABD。
【小问4详解】
①发生腐烂，应该加的是黑曲霉；②未发生腐烂，根据前面的结果可知，拮抗细菌有抑制黑曲霉的作用，因此②加入的是拮抗细菌和黑曲霉。
20. 下图为筛选、制备单克隆抗体的示意图，①~⑤代表相关过程，a～g代表相关细胞。据图回答下列问题：
（1）由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有_________________，过程①是给小鼠注射S抗原蛋白，其目的是________________。
（2）图中过程③④为两次筛选过程，过程③是指把c细胞群稀释，然后都放在_____培养基的多孔培养皿中培养，只有____________________能够存活且增殖，因此细胞集落为单个存活细胞的克隆；过程④是用________方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
（3）抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。如下图所示，ADC依靠__________（填“a”或“b”）最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养和动物细胞融合技术 ②. 为了让小鼠能产生抗S抗原的抗体的B淋巴细胞
（2） ①. 特定的选择培养基 ②. 融合的杂交瘤细胞 ③. 抗原-抗体杂交检测
（3）b
【解析】
【分析】抗体药物偶联物（ADC） 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。
【小问1详解】
由图可知，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合技术，给小鼠注射S抗原蛋白，是为了让小鼠能产生抗S抗原的抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】
图中过程③④为两次筛选过程，将细胞群稀释之后都放在特定的选择培养基的多孔培养皿中培养，只有融合的杂交瘤细胞能够存活且增殖。再利用④抗原-抗体杂交的检测法筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
【小问3详解】
抗体—药物偶联物依靠b药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。
21. 研究发现人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取)，过程如下图所示。其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而影响亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸)，基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题。
（1）过程②需要的限制酶是____________；
（2）为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是________________。为达到筛选目的，培养基的营养成分中应不含有________。将成纤维细胞培养一段时间后观察，筛选出________(选填“显示”或“不显示”)绿色荧光的细胞用于过程⑤。
（3）过程④常用________法，过程⑨为胚胎移植，图中早期胚胎的________(结构)将发育成转基因羊。
【答案】（1）BamHⅠ、HindIII
（2） ①. 基因Leu、基因GFP ②. 亮氨酸 ③. 不显示
（3） ①. 显微注射 ②. 内细胞团
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【小问1详解】
过程②是获取目的基因，据图分析，B形成的黏性末端GATCC…与BamHⅠ的识别序列一致，黏性末端AGCTT…与HindⅢ的识别序列一致，故物质 B 是用限制酶BamHⅠ、HindⅢ切割的结果。
【小问2详解】
为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是基因Leu（通过亮氨酸含量进行比较）和基因GFP（控制合成绿色荧光蛋白）；据（1）分析可知，用限制酶BamHⅠ、HindⅢ切割质粒S和目的基因，形成的重组质粒 T是（Leu+XbaⅠ+B），不含有基因GFP，无法控制合成绿色荧光蛋白，而标记基因 Leu 控制合成亮氨酸，为达到筛选目的，培养基的营养成分中应不含有亮氨酸，将成纤维细胞培养一段时间后观察，含重组质粒T的成纤维细胞可以合成亮氨酸而存活，只需要筛选出不显示绿色荧光的细胞用于过程⑤即可。
【小问3详解】
过程④是将目的基因导入受体细胞，动物常用显微注射法；过程⑨为胚胎移植，是将早期胚胎移植到受体子宫内的过程，早期胚胎中的内细胞团具有全能性，将发育成转基因羊。种植模式
叶柄长（cm）
叶面积（cm2）
单株总生物量（g）
单独种植薇甘菊
7.05
21.71
12.42
1：1混种
薇甘菊
6.80
14.26
2.81
红薯
14.13
88.68
13.28
限制酶
BamHⅠ
BglⅡ
HindⅢ
XbaⅠ
识别序列和切割位点
G↓GATCC
A↓GATCT
A↓AGCTT
T↓CTAGA
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