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甘肃省张掖市某重点校2022-2023学年高二下学期6月月考生物试卷（含答案）
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这是一份甘肃省张掖市某重点校2022-2023学年高二下学期6月月考生物试卷（含答案），共34页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题，实验题，探究题等内容，欢迎下载使用。
甘肃省张掖市某重点校2022-2023学年高二下学期6月月考生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1、为研究甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制菠萝酒的效果，研究人员进行了有关实验，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.接种前，可以用干热灭菌法对菠萝汁进行灭菌
B.利用四种酵母菌酿制菠萝酒，效果最差的是丙
C.6～7d，丁组酒精度不再上升可能是菠萝汁中的葡萄糖耗尽所致
D.利用菠萝果酒制作菠萝果醋，发酵过程中要始终保持有氧状态
2、图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列有关叙述中，正确的是( )
A.甲装置可先用于果醋的制作，后用于果酒的制作
B.用甲装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀b
C.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵
D.过程③和④都需要氧气的参与，但反应场所不同
3、豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟的大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32h内定期取样观测发酵效果。下列有关叙述错误的是( )
A.该实验的自变量是菌种和发酵时间
B.若该发酵菌是好氧菌，那么发酵容器内底层大豆的发酵效果比上层的要好
C.在大豆到豆豉的过程中，蛋白质会转变为肽和氨基酸，脂肪会转变为脂肪酸和甘油
D.若32h内发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间
4、已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是( )
A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D.培养该细菌的培养基中无需添加氮源
5、如图表示纯培养X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
B.步骤②将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液进行平板划线
C.步骤③通过连续划线使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D.步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数
6、某些土壤细菌可将尿素分解成NH3，NH3再转化为、等被植物吸收。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述，正确的是( )
A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的
B.接种后，不能将培养皿倒置培养，并在皿盖上做好标记
C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定
D.稀释涂布平板法用到的工具有接种环、涂布器、酒精灯等
7、在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是( )
A.透明圈内的刚果红染料已被分解
B.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强
C.图中菌落可能是细菌也可能是真菌
D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制
8、有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，被广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等农药残留超标，且有不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法错误的是( )
A.在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养，以获取相应的微生物
B.若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，测定结果往往比实际值偏小
C.在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格
D.制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂，若培养基需要调节pH，则应在灭菌之前调节
9、空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
下列有关叙述错误的是( )
A.该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨
B.该培养基中的成分X通常是琼脂
C.步骤③中，实验组的操作是将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，闭盖保存一段时间
D.某一实验组平板上的菌落平均数量为36个，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基已被污染，应重新做实验
10、化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是( )
A.可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，来确定接种时菌液的最佳稀释倍数
B.制备的牛肉膏蛋白胨固体培养基，可为微生物提供碳源、氮源、维生素等营养
C.由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法
D.挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是纯化菌株
11、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法，为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法错误的是( )
A.制成平板后直接培养可判断有无污染
B.灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
C.图示结果表明该菌需要的生长因子为乙或丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
12、马铃薯脱毒苗的培育过程如图1所示，马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。下列有关叙述正确的是( )
A.培育脱毒苗时常采用含抗病毒基因的芽尖、茎尖作为实验材料
B.培育马铃薯脱毒苗体现了茎尖细胞的全能性
C.马铃薯脱毒苗的培育，发生的变异有基因突变和基因重组
D.由图2可知，大小为0.12mm的茎尖外植体最适宜马铃薯脱毒苗的培养
13、科学家利用拟南芥的愈伤组织进行实验，探究植物组织培养过程中诱导愈伤组织生根的机理，结果如图所示。诱导生根的培养基（RIM）的配方中含有生长素（IAA），wei8是拟南芥生长素合成基因。下列说法正确的是( )
A.诱导形成愈伤组织和诱导生根、生芽过程均需避光处理
B.增加培养基中IAA的浓度，1组的生根效果会更好
C.2、4组比较，没有遵循实验设计中的单一变量原则
D.培养基中的IAA和自身产生的生长素有利于愈伤组织生根
14、拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花卉。下列有关叙述正确的是( )
A.愈伤组织是一团高度液泡化、有特定形态的薄壁组织
B.在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C.培养基中生长素与细胞分裂素的比例大于1时，诱导生芽
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型不一定相同
15、下图A、B、C、D表示以二倍体植物（染色体数为2n）为材料进行的四种人工繁殖过程，下列叙述错误的是( )
A.外植体流水冲洗后，再用酒精和次氯酸钠进行消毒处理
B.利用B过程所示途径可大量获得人参皂苷干粉
C.过程②可用物理或化学方法诱导形成融合细胞
D.将A、D植株的根尖细胞制成临时装片，在中期分别可观察到1个和4个染色体组
16、下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是( )
A.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
B.两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程叫动物细胞融合
C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，所依据的原理相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D.动植物细胞培养都要经过脱分化形成愈伤组织
17、为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。在愈伤组织悬浮培养时，检测细胞干重、培养液中蔗糖浓度和pH的变化，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.实验的自变量是培养时间，因变量是细胞干重、pH、蔗糖浓度的变化
B.蔗糖的作用只有一个，即提供能源
C.细胞干重在12d后下降与培养液中蔗糖浓度下降、pH降低有关
D.多倍体愈伤组织产生的次生代谢产物量常高于二倍体，可能与多倍体内染色体数目多，基因表达量多有关
18、治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应等问题。下图表示治疗性克隆的过程，有关叙述不正确的是( )
A.上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B.上述过程充分说明动物细胞具有全能性
C.① 过程的完成离不开胚胎干细胞的增殖和分化潜能
D.①②过程都发生DNA的复制和蛋白质的合成
19、小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述正确的是( )
A.使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B.培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C.培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象
D.相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
20、2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是( )
A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
B.捐献者携带的红绿色盲基因不会遗传给三亲婴儿
C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
D.三亲婴儿的培育要用到核移植技术、体外受精技术、胚胎移植技术
21、下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是( )
①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞
②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞
③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养
④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞
⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
⑥从小鼠腹水中提取抗体
⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合
A.实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥
B.③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆
C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖
D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选
22、如图为细胞或原生质体融合的简略过程。下列相关叙述错误的是( )
A.如果a和b分别是白菜和甘蓝的体细胞，则需要用纤维素酶和果胶酶处理这两种细胞
B.如果d经分裂和分化形成的是有性杂交后代，则a和b融合实现了基因重组
C.如果培养可得到单克隆抗体，则细胞d既能迅速大量增殖也能产生抗体
D.将d培养成体细胞杂交植株的过程可以说明植物细胞具有全能性
23、为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤。用EBV（一种病毒）感染已被抗原X致敏的动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株，这样的细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。下列相关分析不合理的是( )
A.杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
B.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
C.骨髓瘤细胞无法在添加了Oua的HAT培养基中存活
D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力
24、下列有关干细胞培养及应用的说法，错误的是( )
A.干细胞存在于早期胚胎、脊髓和脐带血等多种组织和器官中
B.从早期胚胎的内细胞团中分离出的胚胎干细胞，具有细胞全能性
C.体外诱导iPS细胞形成组织或器官，可以解决器官移植中供体不足和免疫排斥的问题
D.造血干细胞、神经干细胞属于成体干细胞，仍然具有分裂和分化能力
25、图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似于胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法。以下分析错误的是( )
A.图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的再分化过程
B.研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长，由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化可能是小鼠乙发生免疫反应造成的
C.图2中，研究人员使小鼠丙超数排卵，再利用SrCl2溶液处理后体外培养至④囊胚期，再筛选出单倍体干细胞
D.研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想模型
26、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①②③分别表示其结果，下列说法错误的是( )
A.若a是核移植技术，则①是无性繁殖的结果
B.若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型不一定都相同
C.①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D.若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
27、NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体，在肿瘤血管的形成与肿瘤细胞的迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用。为探究NRP-1mAb（抗NRP-1抗体）对乳腺癌的治疗作用，研究人员以兔子为实验材料进行相关实验得到相关数据，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.据图推测，NRP-1mAb能够有效降低肿瘤的体积，中、高剂量组的降低效果比低剂量组的降低效果更显著
B.NRP-1mAb的制备过程中利用灭活的病毒诱导两细胞融合，其原理是病毒表面含有的糖蛋白和相关酶可与细胞膜上的糖蛋白发生作用
C.将NRP-1反复给兔子注射，提取已免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的融合细胞都是杂交瘤细胞
D.NRP-1mAb的作用机理可能是NRP-1mAb与NRP-1特异性结合，阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合，从而抑制了肿瘤血管的形成和肿瘤细胞的分散、转移
28、通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是( )
A.对供体和受体母牛都要进行相同激素处理
B.受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行
C.胚胎移植的优势是可以充分发挥受体的繁殖潜力
D.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
29、下列关于胚胎早期发育的叙述，正确的有几项?( )
①合子形成后在输卵管内即开始发育
②卵裂过程中细胞中有机物的含量不断减少，但有机物的种类在增加
③早期胚胎发育依次经过受精卵、囊胚、桑葚胚、原肠胚几个时期
④滋养层细胞是在囊胚期形成的⑤胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化
⑥原肠胚的外胚层和内胚层分化成各种组织和器官
A.2项 B.3项 C.4项 D.5项
30、下图表示移植卵裂期胚胎和囊胚的流产率与受孕妇女年龄的关系，相关叙述正确的是( )
A.体外受精时，采集到的精子需要进行获能处理，卵细胞可直接参与受精
B.卵裂期细胞和囊胚细胞均未分化
C.实验结果表明，卵裂期胚胎移植成功率较高
D.受孕妇女年龄越大，胚胎移植的流产风险越高
31、精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述不正确的是( )
A.野生型菌液的培养皿中不会出现菌落
B.培养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基
C.菌落A是采用平板划线法接种后培养得到的纯培养物
D.菌落A是野生型菌种，菌落B为鸟氨酸发酵的优良菌种
二、多选题
32、黄酒为世界三大古酒之一。关于黄酒的酿造方法，古遗六法中描述到：秫稻必齐，曲蘖必时，湛炽必洁，水泉必香，陶器必良，火齐必得（注：曲蘖主要指酒曲，湛炽是指浸泡和蒸煮）。下列叙述正确的是( )
A.黄酒中的酒精是酵母菌利用“秫稻”在无氧条件下的代谢产物
B.曲蘖必时，可能是受酵母菌的生长繁殖需要适宜的温度等的影响
C.湛炽必洁，起到消毒的作用，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响
D.黄酒酿造过程中，发酵液出现的气体都是在酵母菌细胞质基质中产生的
33、研究者探索了利用清水紫花苜蓿和里奥百脉根进行植物体细胞杂交过程中，酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如下图。下列说法错误的是( )
A.可用纤维素酶和果胶酶酶解获得原生质体
B.通过无菌水梯度稀释，可在血细胞计数板中统计原生质体数量
C.植物体细胞杂交过程依赖酶的专一性以及细胞膜的流动性
D.酶解10h对清水紫花苜蓿原生质体产生最佳，里奥百脉根大约为12h
34、哺乳动物的单倍体胚胎干细胞（haESCs）是指只含有一套染色体（性染色体只含X染色体）、拥有类似于正常胚胎干细胞特性的细胞类群，可分为孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞两种类型，在研究隐性基因突变、表观遗传修饰和配子发育中具有独特的优势。下列说法错误的是( )
A.在体外培养条件下，haESCs可以由成纤维细胞转化而来
B.推测仅携带Y染色体的早期单倍体胚胎可能难以发育到囊胚阶段
C.haESCs与成体干细胞类似，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官
D.haESCs中通常不含等位基因，为获取遗传操作的动物模型提供了新思路
35、下图表示试管牛的培育过程。下列相关叙述正确的是( )
A.经①过程采集的卵细胞和精子直接同时放到受精溶液中即可完成受精
B.②过程依赖于细胞膜的流动性，体现了细胞膜进行信息交流的功能
C.④过程中，需要将胚胎移植到与供体性状相同的雌牛体内
D.③过程DNA总量增加，但每个细胞中核DNA数量不变
三、读图填空题
36、发酵工程生产产品的流程如图所示。回答下列问题：
（1）性状优良的菌种可以从自然界中获取，随着技术的发展，也可以通过_________或基因工程育种等途径获得。
（2）发酵工程的中心环节是_________。此时，要随时检测培养基配制培养液中的________、_________等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，严格控制__________（答出两点即可）等发酵条件。在醋酸发酵过程中需要对发酵液进行不断地搅拌，目的是__________（答出两点）。
（3）如果发酵产品是微生物细胞本身，在发酵结束之后，采用__________等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如分离、提纯产物果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的__________措施来获得产品，若发酵产品为高效分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）的菌株H，说明菌株H能分泌___________。
（4）青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点?__________。为什么?__________。
37、新型冠状病毒的结构如图1所示，新型冠状病毒表面的刺突蛋白是引起人体患肺炎的关键蛋白。图2是利用SARS病毒的抗原蛋白（SARS-CoVS）制备特异性单克隆抗体的过程。请回答下列问题：
（1）若从已免疫小鼠血液中获取单个B淋巴细胞，____________（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶处理。
（2）在SARS-CoVS特异性单克隆抗体的制备过程中，需要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术，一般来说，动物细胞培养需要的条件有_____________（至少答出两点）；诱导动物细胞融合的方法有_____________（至少答出两种）。
（3）与康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗SARS-CoVS的单克隆抗体的优点是______________，其制备的过程中，第二次筛选的目的是_____________。
（4）制备单克隆抗体最重要的目的是对SARS病毒引起的肺炎进行免疫______________（填“治疗”或“预防”）。
（5）SARS-CoVS单克隆抗体_____________（填“能”或“不能”）对新型冠状病毒发挥作用，理由是_____________。
38、为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，回答下列问题：
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有____________。
（2）从B牛体内获得的卵子，需要培养到_____________（填时期）才能和获能的精子结合完成受精。胚胎移植后需要对____________检查，E牛的性别可能是____________。
（3）卵细胞去核的方法普遍使用的是__________，“去核”实质上是去除_________。用于核移植的供体细胞一般选择传代10代以内的细胞，原因是_____________。
（4）方法1中，若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对囊胚阶段的胚胎进行分割，分割时应注意____________。
（5）某农场对牛进行同期发情处理，统计结果如下表。
两种同期发情方法的同期化结果比较
方法
处理牛数量/头
处理48h后发情牛数量/头
方法1（PGF法）
9
5
方法2（孕酮+PGF法）
9
6
①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供____________。
②与方法1相比，方法2的优点是_____________。
四、实验题
39、为分离和培养土壤中能分解尿素的细菌，实验小组使用了下列培养基配方，将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基；经接种、培养后统计每克土壤样品中的活菌数目，回答下列问题：
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
蛋白胨
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
1.0g
10.0g
1.0g
15.0g
（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________（填“能”或“不能”）。原因是____________。
（2）培养基常用____________法灭菌，培养皿常用____________法灭菌。待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止___________，以免造成污染。
（3）稀释涂布平板法能用来统计活菌的数目，其原理是___________。
（4）某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）____________。
（5）若在培养分解尿素的细菌的过程中，发现了另一种B细菌，在B细菌周围分解尿素的细菌的生长繁殖受到抑制，甲同学提出的观点是B细菌产生了不利于（抑制）分解尿素的细菌生存的物质，请你在以下实验的基础上继续完善实验流程来验证甲同学的观点：
__________→__________培养一段时间→观察A细菌的生长情况
五、探究题
40、平菇具有味道鲜美，抗杂菌污染的优势，杏鲍菇具有菌丝强壮，生长旺盛的优势。为获得具有优良性状的平菇形菌株，研究者利用原生质体融合技术，进行了如下研究。回答下列问题：
（1）以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是__________。
（2）用酶解法处理平菇和杏鲍菇获取原生质体时，要严格控制酶的____________（至少答出两点），以获得存活质量较高的原生质体，培养原生质体时，需要向培养液中加入适宜浓度的甘露醇来维持___________，以维持细胞正常的形态和功能。
（3）采用不同浓度PEG诱导原生质体融合，实验结果如表1所示。
表1
PEG质量分数
25%
30%
35%
40%
原生质体状态
有破碎现象，哑铃型细胞比例<0.01%
表现正常，哑铃型细胞比例0.03%
原生质体出现缩小现象，哑铃型细胞比例0.01～0.02%
原生质体出现缩小现象，哑铃型细胞比例0.01～0.02%
两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞，融合的原理是___________。实验结果显示：___________。
（4）鉴定菌株间遗传关系时，常将待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，说明二者的遗传关系较远（见图1）。借助此原理，快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌株X，请按照图1模式图在图2中绘制模式图，标注接种菌丝体位置，注明菌株类型，并预测拮抗线的位置。__________
（5）对上述融合菌株接种培养，筛选出外形为平菇形的5株新菌株，结果如表2所示。
表2
菌株编号
长满营养基质的时间/d
平均产量/（kg·sack-1）
1
27
0.55
2
27.6
0.54
3
26.4
0.51
4
26.2
0.68
5
25.8
0.58
根据上述结果，科研人员最终选择____________作为目的菌种。理由是___________。
参考答案
1、答案：A
解析：A.菠萝汁不能用干热灭菌法灭菌，因为干热灭菌法针对于耐高温且需要保持干燥的物品，若选用干热灭菌法会使菠萝汁的水分蒸发，A错误；B.由图可知，四种酵母菌中，丙的酒精度最低，因此利用四种酵母菌酿制菠萝酒，效果最差的是丙，B正确；C.6-7d，丁组酒精度不再上升的原因有：较高的酒精度对细胞有毒害作用，菠萝中的葡萄糖耗尽等，C正确；D.由于醋酸菌是好氧菌，因此利用菠萝果酒制作菠萝果醋时，发酵过程要始终保持有氧状态，D正确。故选A。
2、答案：D
解析：因为醋酸菌可利用酒精生产醋酸，但酵母菌不能利用醋酸生产酒精，故甲装置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，A错误；甲装置中，阀b控制排气，阀a控制进气，制作果酒时应关闭阀a以创造缺氧环境，适时打开阀b以排出产生的CO2，B错误；果醋发酵所需的最适温度高于果酒发酵所需的最适温度，C错误；过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，该过程需要氧气的参与，发生在线粒体中，过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该过程需要氧气的参与，但醋酸菌是原核生物，没有线粒体，故③和④过程的反应场所不同，D正确。
3、答案：B
解析：A、由题意“为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟的大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32h内定期取样观测发酵效果”可知，该实验的自变量是菌种的类型和发酵时间，A正确；
B、如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，由于上层有氧气，而下层的氧气含量极低、甚至没有氧气，据此说明该发酵菌是好氧菌，B错误；
C、大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质在蛋白酶的作用下转变为氨基酸和肽，脂肪在脂肪酶的作用下转变为脂肪酸和甘油，C正确；
D、若发现32h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间。若要确定最佳的发酵时间，可在原操作的基础上，继续延长发酵时间，并观测发酵效果，D正确。
故选B。
4、答案：B
解析：某种细菌以CO2为唯一碳源,可推测该细菌的代谢类型为自养型,但不确定是否为需氧型,A错误;无机盐参与复杂有机物的组成, 是该细菌不可缺少的营养物质,B正确;CO2不能作为能源物质,C错误;氮元素参与核酸、蛋白质的组成,培养该细菌的培养基中需要添加氮源,D错误。
5、答案：C
解析：图中①是倒平板，②是用接种环蘸取菌液，③是进行平板划线，④是培养。倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错误；灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再蘸取菌液进行平板划线，B错误；步骤③通过连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离得到由一个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确；平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，因此无法对其计数，D错误。
6、答案：C
解析：A、分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；
B、接种后，应将培养皿倒置培养，要在培养皿皿底做好标记，B错误；
C、培养基中KH2PO4能够作为无机盐，其作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；
D、稀释涂布平板法用到的工具有涂布器、酒精灯等，不需要使用接种环，D错误。
故选C。
7、答案：C
解析：A、刚果红染液可以和纤维素结合形成红色的复合物，所以透明圈内的纤维素已被分解，A错误；B、菌落②所在的透明圈不是最大，说明菌落②中的菌株降解纤维素能力不是最强，B错误；C、图中菌落能产生纤维素酶，可能是细菌也可能是真菌，C正确；D、培养基中要以纤维素作为唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D错误。故选：C。
8、答案：B
解析：A、被有机磷农药污染的土壤中富含高效降解有机磷农药的微生物，为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，应该先在被有机磷农药污染的土壤中取样，然后用含有有机磷农药的选择培养基进行选择培养，A正确；
B、若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，测定结果往往比实际值偏大，因此用血细胞计数板直接计数无法区分死菌与活菌，B错误；
C、在接种前，为检测培养基平板灭菌是否合格，应该随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，观察是否有菌落产生，C正确；
D、制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂，制备培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板等步骤，若培养基需要调节pH，则应在灭菌之前调节，D正确。
故选B。
9、答案：C
解析：A、牛肉膏、蛋白胨都含有含碳有机物和含氮有机物，该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨，A正确；
B、该培养基需要收集空气中微生物获得菌落，该培养基中的成分X通常是琼脂，B正确；
C、步骤③中，实验组的操作是将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖保存一段时间，如果闭盖空气中微生物不能进入培养皿，C错误；
D、某一实验组平板上的菌落平均数量为36个，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，空白对照组没有接种不应出现菌落，说明培养基已被污染，应重新做实验，D正确。
故选C。
10、答案：D
解析：A、菌液稀释后可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，来确定接种时菌液的最佳稀释倍数，A正确；
B、培养基一般含有水、无机盐、碳源和氮源等营养成分，制备的牛肉膏蛋白胨固体培养基，可为微生物提供碳源、氮源、维生素等营养，B正确；
C、菌落分布均匀，故在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，C正确；
D、挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是增大菌株的数量（扩大培养），D错误。
故选D。
11、答案：C
解析：A、平板上不含任何生长因子，若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；
B、灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），B正确；
C、图中菌落生活在乙丙区域之间，说明同时需要乙和丙，C错误；
D、不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选菌种，D正确。
故选C。
12、答案：B
解析：A、培育脱毒苗时常采用芽尖、茎尖作为实验材料，是由于茎尖、芽尖处的细胞病毒很少，甚至无病毒，A错误；
B、培育马铃薯脱毒苗是由茎尖细胞经过植物组织培养获得完整植物的过程，故体现了茎尖细胞的全能性，B正确；
C、马铃薯脱毒苗的培育原理是植物细胞的全能性，经过脱分化和再分化获得完整个体，在此过程中细胞进行有丝分裂，不可能发生基因重组，C错误；
D、由图2可知，大小为0.12mm的茎尖外植体脱毒率高但成苗率低，因此不适宜作为马铃薯脱毒苗培养，D错误。故选B。
13、答案：D
解析：A、诱导形成愈伤组织需避光处理，A错误；
B、生长素具有低浓度促进、高浓度抑制的作用特点，继续增加其浓度，到一定值后会产生抑制作用，B错误；
C、2、4组实验进行比较，除自变量是否含IAA外，其他变量一致，遵循单一变量原则，C错误；
D、分析第1组结果可知，培养基中的IAA和自身产生的生长素有利于愈伤组织生根，D正确。
故选D。
14、答案：D
解析：同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同,如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半,D正确。
故选D。
15、答案：B
解析：A、外植体流水冲洗后，用体积分数为70%的酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒后，立即用无菌水清洗2-3次，A正确；
B、①为脱分化、再分化，B表示通过胚状体进行无性繁殖，B错误；
C、D表示植物体细胞杂交，过程②可用物理或化学方法诱导形成融合细胞，C正确；
D、A细胞是单倍体，体细胞内含1个染色体组，D细胞是两个细胞融合得到的，故中期细胞内含4个染色体组，D正确。故选B。
16、答案：B
解析：A、细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，A错误；
B、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般多数为两个细胞的融合，B正确；
C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不完全相同，而且动物细胞融合不能形成杂种个体，只能形成杂种细胞，C错误；
D、植物细胞培养需要经过脱分化处理，动物细胞培养不需要经过脱分化处理，D错误。
故选B。
17、答案：B
解析：A、分析曲线图：实验的自变量是培养时间，因变量是细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化，A正确；
B、培养液中蔗糖除了能为愈伤组织提供能量，还可以调节渗透压，B错误；
C、随培养天数的增加，蔗糖浓度和pH在不断降低，从而影响了细胞的增殖，12天后，细胞干重下降，C正确；
D、多倍体内染色体数目多，其基因表达量多，使得多倍体愈伤组织产生的次生代谢产物量较多，D正确。
故选B。
18、答案：B
解析：形成重组细胞利用了动物细胞核移植技术；重组细胞形成囊胚利用了动物细胞培养技术。由于最终没有形成个体，故不能体现动物细胞具有全能性。①②过程都有细胞的增殖、分化，因此都会发生DNA的复制和蛋白质的合成。
19、答案：C
解析：A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清等天然成分，A错误；
B、抗生素具有抑菌或杀菌作用，但对病毒无用，培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境，B错误；
C、上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上，消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞，培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确；
D、动物细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象，上皮细胞更易出现接触抑制现象，相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不相同，D错误。
故选C。
20、答案：C
解析：A、母亲的线粒体遗传病基因不会遗传给后代，A正确；
B、卵母细胞捐献者提供的是细胞质，而红绿色盲基因位于细胞核中，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不会遗传给后代，B正确；
C、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲和母亲，C错误；
D、三亲婴儿的培育运用了核移植技术，而且还需要采用早期胚胎培养技术、胚胎移植等技术，体外受精技术，D正确。
故选C。
21、答案：C
解析：A、在制备单克隆抗体的过程中，需要给小鼠进行免疫，获得特定的浆细胞，然后用诱导剂使浆细胞与骨髓瘤细胞融合，在选择培养基中选择出杂交瘤细胞；由于杂交瘤细胞有多种，因此还需要第二次选择，以获得能产生抗X抗体的杂交瘤细胞，最后通过注射到小鼠腹腔中或体外培养，以获得单克隆抗体，A正确；
B、由同一种杂交瘤细胞增殖获得的细胞群，称为克隆，B正确；
C、利用诱导剂使细胞融合时，有同种细胞融合和异种细胞融合，而同种B细胞融合的杂交细胞不能无限增殖，C错误；
D、在单克隆抗体的制备过程中，共需要两次筛选，D正确．
故选：C。
22、答案：B
解析：A、植物体细胞杂交过程中需先用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，以除去细胞壁得到原生质体，A正确；
B、有性杂交后代是受精卵发育形成的个体，精子和卵细胞融合的过程是受精作用，B错误；
C、单克隆抗体是由浆细胞和骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞形成的，杂交瘤细胞既能分泌抗体又能无限增殖，C正确；
D、将植物细胞培养成植株的过程可以说明植物细胞具有全能性，故将d培养成体细胞杂交植株的过程可以说明植物细胞具有全能性，D正确。
故选B。
23、答案：D
解析：杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失，可能会导致杂交瘤细胞抗体产生能力下降，A项正确；
成熟的B细胞主要分布在淋巴结和脾脏，可以从抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处获得B淋巴细胞，B项正确；
由图可知，在添加了Oua的HAT培养基上培养时，骨髓瘤细胞死亡，说明骨髓瘤细胞在添加了Oua的HAT培养基中无法存活，C项正确；
题中所用B淋巴细胞被EBV感染，根据免疫调节的有关过程可推知，题中培养的是可分泌抗X抗体的杂交瘤细胞，不会产生抗EBV抗体，D项错误。
24、答案：A
解析：A、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A错误；
B、从早期胚胎的内细胞团中分离出的胚胎干细胞，具有细胞全能性，B正确；
C、iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以解决器官移植中供体不足和避免免疫排斥反应，C正确；
D、造血干细胞、神经干细胞具有分裂分化能力，属于成体干细胞，D正确。
故选A。
25、答案：A
解析：A、图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，即从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，过程类似于植物组织培养中的脱分化过程，A错误；
B、将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是小鼠乙（受体）发生免疫反应，使得iPS细胞团失去生命力，B正确；
C、图2中，对实验小鼠丙注射促性腺激素使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrCl2溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至④囊胚期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞，C正确；
D、单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型，D正确。
故选A。
26、答案：C
解析：A、动物细胞通过核移植技术获得动物个体，该过程中①是无性繁殖的结果，A正确；
B、胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割，进行胚胎移植获得多个后代个体，属于无性繁殖系，获得的个体的基因型一定相同，但是表现型是基因型和环境条件共同作用的结果，环境不同，表现型不一定相同，B正确；
C、珍稀的或存量少的雌性动物属于保护动物，不能作为生物工程的受体，应该用本地中数量较多的雌性动物，C错误；
D、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，它可充分发挥优良个体的繁殖潜力，为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故选C。
27、答案：C
解析：由图可知，NRP-1mAb能够有效降低肿瘤的体积，中、高剂量组的降低效果比低剂量组的降低效果更显著，A正确。灭活的病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确。提取已免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的融合细胞不都是杂交瘤细胞，需要通过选择培养基进行筛选从而获得杂交瘤细胞，C错误。根据题干信息“NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体，在肿瘤血管的形成与肿瘤细胞的迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用”可推测，NRP-1mAb与NRP-1特异性结合，阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合，从而抑制了肿瘤血管的形成和肿瘤细胞的分散、转移，D正确。
28、答案：D
解析：A、对供体和受体母牛都用孕激素进行同期发情处理但供体牛还需用促性腺激素对其进行超数排卵，A错误；
B、受精和胚胎的早期培养可以在体内进行，B错误；
C、胚胎移植的优势是可以充分发挥供体(雌性优良个体)的繁殖潜力，受体的任务就是妊娠和育仔，C错误；
D、早期胚胎需移植到与供体生理状态相同的代孕母牛体内，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。
故选D。
29、答案：C
解析：①合子形成后在输卵管内即开始发育，①正确；
②卵裂过程中，细胞进行有丝分裂消耗能量，细胞中有机物的含量不断减少，但有机物的种类在增加，②正确；
③早期胚胎发育依次经过受精卵、桑葚胚、囊胚、原肠胚几个时期，③错误；
④滋养层细胞是在囊胚期形成的，④正确；
⑤孵化是指囊胚从透明带出来进入母体子宫内，并植入子宫内膜的过程，⑤错误；
⑥原肠胚的外胚层和内胚层会分化形成各种组织和器官，⑥正确。
故选C。
30、答案：D
解析：A、体外受精时，采集到的精子需要进行获能处理，卵细胞需要培养成熟后参与受精，A错误；
B、卵裂期细胞和桑椹胚细胞均未分化，具有发育的全能性，而囊胚分化形成内细胞团和滋养层细胞，B错误；
C、实验结果表明，卵裂期胚胎移植流产率高，成功率低，C错误；
D、根据表格分析，受孕妇女年龄越大，胚胎移植的流产风险越高，D正确。
故选D。
31、答案：C
解析：A、液体培养基只是用作细菌的快速大量繁殖，如果需要形成菌落,那么应该接种在培养基上，因此野生型菌液的培养皿中不会出现菌落，A正确；
B、图甲平板上只有A菌落，过程②向培养基甲中添加精氨酸才出现B菌落，因此培养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基，B正确；
C、菌落A是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，C错误；
D、由分析可知，菌落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D正确。故选C。
32、答案：ABC
解析：A、在无氧条件下酵母菌也能进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，所以黄酒中的酒精是酵母菌利用“林稻”在无氧条件下的代谢产物，A正确；
B、曲蘖主要指酒曲，其中含有酵母菌，20℃左右最适合酵母菌繁殖，所以曲蘖必时，可能是受酵母菌的生长繁殖需要适宜的温度等的影响，B正确；
C、湛炽是指浸泡和蒸煮，经过高温，起到消毒的作用，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响，C正确；
D、参与黄酒酿造的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，有氧呼吸产生CO2的场所是线粒体基质，而无氧呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，D错误。
故选ABC。
33、答案：BCD
解析：A、细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；
B、血细胞计数板法适用于较大细胞或颗粒，对原生质体进行显微计数，必须将原生质体制成的悬浮液滴加在血细胞计数板上，原生质体制成的悬浮液不可用无菌水稀释，B错误；
C、植物体细胞杂交过程依赖膜的流动性和植物细胞的全能性，C错误；
D、据图分析，清水紫花苜蓿酶解10h，原生质体产量最高和活力最大；里奥百脉根酶解12h时，原生质体产量最高，酶解14h时，原生质体活力较大，故酶解10h对紫花苜蓿原生质体产生最佳，百脉根为12～14h，D错误。故选BCD。
34、答案：AC
解析：A、单倍体胚胎干细胞只含有一套染色体，在体外培养条件下，haESCs不能由成纤维细胞转化而来，A错误；
B、根据题干信息“单倍体胚胎干细胞性染色体只含X染色体”推测，仅携带Y染色体的早期单倍体胚胎可能难以发育到囊胚阶段，B正确；
C、单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，具有发育的全能性，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官，而成体干细胞来源于已经分化组织中的未分化细胞，如造血干细胞，其只能分化为所来源的组织和器官的类型的细胞，C错误；
D、单倍体胚胎干细胞中不含等位基因，动物细胞核具有全能性，需要核移植技术才能培育成单倍体动物，为获取遗传操作的动物模型提供了新思路，D正确。
故选AC。
35、答案：BD
解析：A、经①过程采集的卵细胞需要培养到MⅡ期才能与获能的精子受精，经①过程采集的精子需要进行获能处理后，在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程，A错误；
B、②过程是精子与卵细胞的结合，依赖于细胞膜的流动性，体现了细胞膜进行信息交流的功能，B正确；
C、④过程为胚胎移植，需要将胚胎移植到与供体同期发情处理的母牛体内，C错误；
D、③过程为早期胚胎培养，DNA总量增加，但每个细胞中核DNA数量不变，D正确。
故选BD。
36、答案：（1）诱变育种
（2）发酵罐内发酵；微生物数量；产物浓度；温度、pH和溶解氧含量；溶解更多的氧气，同时利于醋酸菌与营养物质充分接触
（3）过滤、沉淀；提取、分离和纯化；蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
（4）不认同；因为青霉素只能杀灭部分杂菌，且某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，因此生产青霉素的过程中也要防止杂菌污染
解析：（1）性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧与转速等发酵条件。醋酸菌为好氧菌，在醋酸发酵过程中需要对发酵液进行不断地搅拌，溶解更多的氧气，同时有利于醋酸菌与营养物质充分接触。
（3）不同微生物产品分离、提纯方法不同，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。因餐厨垃圾主要成分是蛋白质、淀粉、油脂等，故菌株H能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶从而降解垃圾。
（4）青霉素只能杀灭部分杂菌，且某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，因此生产青霉素的过程中也要防止杂菌污染。
37、答案：（1）不需要
（2）无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境；PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法
（3）单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备；筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
（4）治疗（5）不能；新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同，SARS-CoVS单克隆抗体，只能与SARS-CoVS发生特异性结合
解析：（1）用胰蛋白酶处理组织块，可以分解细胞间的连接物，使组织细胞分散开，因为血液中的细胞本身就是分散的状态，不需要用胰蛋白酶处理，就能从已免疫小鼠血液中获取单个B淋巴细胞。
（2）动物细胞培养需要的条件有无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境等。诱导动物细胞融合的方法有PEG（聚乙二醇）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等。
（3）康复者捐献的血浆中的抗体疗效显著，但是可能因为康复者本身的差异而导致疗效不同，而且来源有限，受赠者也可能因此感染体液传染病。与康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗SARS-CoVS的单克隆抗体的优点是单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。在制备单克隆抗体时，在经过第一次筛选后得到杂交瘤细胞，由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，因此经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞，所以要进行第二次筛选，目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
（4）疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品，注射SARS病毒疫苗，能引起机体产生免疫反应，产生抗体和记忆细胞，记忆细胞可以在机体保留较长的时间，是预防SARS病毒的有效措施，属于免疫预防；给患者输入相应的抗体，抗体与SARS病毒结合后会引起进一步变化，例如，引起SARS病毒被其他免疫细胞吞噬消化，这个过程属于免疫治疗。制备单克隆抗体最重要的目的是对SARS病毒引起的肺炎进行免疫治疗。
（5）抗体能跟抗原发生特异性结合，即一种抗体只能与一种抗原结合。因为新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同，所以SARS-CoVS单克隆抗体只能与SARS-CoVS发生特异性结合，不能对新型冠状病毒发挥作用。
38、答案：（1）动物细胞培养、胚胎移植
（2）MⅡ期；受体进行妊娠；雌性或雄性
（3）显微操作去核法；纺锤体-染色体复合物；保证了正常的二倍体核型
（4）将内细胞团均等分割
（5）相同的生理环境；同期发情率高
解析：（1）试管牛和克隆牛都需要用到的生物工程技术有动物细胞培养，试管牛需要培养精子、卵细胞、受精卵等，克隆牛需要培养卵母细胞、体细胞、早期胚胎等。试管牛和克隆牛都需要进行胚胎移植。
（2）卵子需要培养到MⅡ期，此时期细胞中使细胞核全能性表达的物质含量高。胚胎移植后需要对受体进行妊娠检查，了解胚胎是否正常发育。E牛是精卵结合形成的受精卵发育来的，可能是雌性或雄性。
（3）卵细胞去核的方法普遍使用的是显微操作去核法，即在显微镜下操作去核，此时是减数第二次分裂中期，“去核”实质上是去除纺锤体-染色体复合物。用于核移植的供体细胞一般选择传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞发生变异的概率低，保证了正常的二倍体核型。
（4）胚胎分割时需要将内细胞团均等分割，如果内细胞团分割不均匀，会影响胚胎发育。
（5）①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，使供体和受体的生殖器官的状态相同。表格中②与方法1相比，方法2的优点是同期发情率高。
39、答案：（1）不能；培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物
（2）高压蒸汽灭菌；干热灭菌；培养皿盖上的水珠落入培养基
（3）当样品稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落的数目，就能推测出样品中大约有多少个活菌
（4）2.34×109
（5）去除③中的B细菌，保留培养基；再接种A细菌
解析：（1）据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物，故不能分离尿素分解菌。
（2）培养基常用高压蒸汽灭菌方法灭菌，培养皿常用干热灭菌法灭菌。待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，以免造成污染。
（3）固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法适用干微生物的统计计数，其原理为当样品稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落的数目，就能推测出样品中大约有多少个活菌。
（4）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=234÷0.1×106=2.34×109。
（5）该实验的目的是验证A细菌生长繁殖受到抑制原因是B细菌产生了不利于(抑制)A细菌生存的物质，可以利用培养B细菌的培养基培养A细菌，看A细菌的繁殖是否受到影响，实验过程为：去除③中的B细菌，保留培养基→再接种A细菌→培养一段时间→观察A细菌的生长情况。
40、答案：（1）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
（2）使用种类、浓度、温度和处理时间等；（一定的）渗透压
（3）细胞膜的流动性；质量分数为30%的PEG溶液诱导原生质体融合效果最好，高于或低于30%不利于获得融合的原生质体
（4）
（5）菌株4；长满营养基质的时间短，平均产量高
解析：（1）以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。
（2）原生质体放在低渗溶液中，会吸水涨破，放在高渗溶液中会失水皱缩，利用酶解法去除细胞壁时，应严格控制使用种类、浓度、温度和处理时间等条件﹐以提高原生质体产量并降低破损率，以获得存活质量较高的原生质体。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压以维持原生质体的形态和活性。
（3）原生质体融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，已知两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞。实验结果显示：质量分数30%的PEG溶液诱导原生质体融合效果最好，高于或低于30%不利于获得融合的原生质体。
（4）已知待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，说明二者的遗传关系较远。借助此原理，若要快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌株X，可接种菌丝如下：
（5）分析表格中长满营养基质的时间和平均产量可知，菌株4的培养时间较短，且平均产量最大，故科研人员最终选择菌株4作为目的菌种。
甘肃省张掖市某重点校2022-2023学年高二下学期6月月考生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1、为研究甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制菠萝酒的效果，研究人员进行了有关实验，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.接种前，可以用干热灭菌法对菠萝汁进行灭菌
B.利用四种酵母菌酿制菠萝酒，效果最差的是丙
C.6～7d，丁组酒精度不再上升可能是菠萝汁中的葡萄糖耗尽所致
D.利用菠萝果酒制作菠萝果醋，发酵过程中要始终保持有氧状态
2、图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列有关叙述中，正确的是( )
A.甲装置可先用于果醋的制作，后用于果酒的制作
B.用甲装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀b
C.酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵
D.过程③和④都需要氧气的参与，但反应场所不同
3、豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟的大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32h内定期取样观测发酵效果。下列有关叙述错误的是( )
A.该实验的自变量是菌种和发酵时间
B.若该发酵菌是好氧菌，那么发酵容器内底层大豆的发酵效果比上层的要好
C.在大豆到豆豉的过程中，蛋白质会转变为肽和氨基酸，脂肪会转变为脂肪酸和甘油
D.若32h内发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间
4、已知某种细菌以CO2为唯一碳源,下列相关叙述正确的是( )
A.可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型
B.无机盐是该细菌不可缺少的营养物质
C.培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质
D.培养该细菌的培养基中无需添加氮源
5、如图表示纯培养X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
B.步骤②将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液进行平板划线
C.步骤③通过连续划线使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D.步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数
6、某些土壤细菌可将尿素分解成NH3，NH3再转化为、等被植物吸收。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述，正确的是( )
A.分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的
B.接种后，不能将培养皿倒置培养，并在皿盖上做好标记
C.培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定
D.稀释涂布平板法用到的工具有接种环、涂布器、酒精灯等
7、在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是( )
A.透明圈内的刚果红染料已被分解
B.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强
C.图中菌落可能是细菌也可能是真菌
D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制
8、有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，被广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等农药残留超标，且有不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法错误的是( )
A.在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养，以获取相应的微生物
B.若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，测定结果往往比实际值偏小
C.在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格
D.制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂，若培养基需要调节pH，则应在灭菌之前调节
9、空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
下列有关叙述错误的是( )
A.该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨
B.该培养基中的成分X通常是琼脂
C.步骤③中，实验组的操作是将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，闭盖保存一段时间
D.某一实验组平板上的菌落平均数量为36个，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基已被污染，应重新做实验
10、化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是( )
A.可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，来确定接种时菌液的最佳稀释倍数
B.制备的牛肉膏蛋白胨固体培养基，可为微生物提供碳源、氮源、维生素等营养
C.由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法
D.挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是纯化菌株
11、生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法，为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法错误的是( )
A.制成平板后直接培养可判断有无污染
B.灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
C.图示结果表明该菌需要的生长因子为乙或丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
12、马铃薯脱毒苗的培育过程如图1所示，马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。下列有关叙述正确的是( )
A.培育脱毒苗时常采用含抗病毒基因的芽尖、茎尖作为实验材料
B.培育马铃薯脱毒苗体现了茎尖细胞的全能性
C.马铃薯脱毒苗的培育，发生的变异有基因突变和基因重组
D.由图2可知，大小为0.12mm的茎尖外植体最适宜马铃薯脱毒苗的培养
13、科学家利用拟南芥的愈伤组织进行实验，探究植物组织培养过程中诱导愈伤组织生根的机理，结果如图所示。诱导生根的培养基（RIM）的配方中含有生长素（IAA），wei8是拟南芥生长素合成基因。下列说法正确的是( )
A.诱导形成愈伤组织和诱导生根、生芽过程均需避光处理
B.增加培养基中IAA的浓度，1组的生根效果会更好
C.2、4组比较，没有遵循实验设计中的单一变量原则
D.培养基中的IAA和自身产生的生长素有利于愈伤组织生根
14、拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花卉。下列有关叙述正确的是( )
A.愈伤组织是一团高度液泡化、有特定形态的薄壁组织
B.在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C.培养基中生长素与细胞分裂素的比例大于1时，诱导生芽
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型不一定相同
15、下图A、B、C、D表示以二倍体植物（染色体数为2n）为材料进行的四种人工繁殖过程，下列叙述错误的是( )
A.外植体流水冲洗后，再用酒精和次氯酸钠进行消毒处理
B.利用B过程所示途径可大量获得人参皂苷干粉
C.过程②可用物理或化学方法诱导形成融合细胞
D.将A、D植株的根尖细胞制成临时装片，在中期分别可观察到1个和4个染色体组
16、下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是( )
A.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
B.两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程叫动物细胞融合
C.动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，所依据的原理相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D.动植物细胞培养都要经过脱分化形成愈伤组织
17、为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。在愈伤组织悬浮培养时，检测细胞干重、培养液中蔗糖浓度和pH的变化，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.实验的自变量是培养时间，因变量是细胞干重、pH、蔗糖浓度的变化
B.蔗糖的作用只有一个，即提供能源
C.细胞干重在12d后下降与培养液中蔗糖浓度下降、pH降低有关
D.多倍体愈伤组织产生的次生代谢产物量常高于二倍体，可能与多倍体内染色体数目多，基因表达量多有关
18、治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应等问题。下图表示治疗性克隆的过程，有关叙述不正确的是( )
A.上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B.上述过程充分说明动物细胞具有全能性
C.① 过程的完成离不开胚胎干细胞的增殖和分化潜能
D.①②过程都发生DNA的复制和蛋白质的合成
19、小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述正确的是( )
A.使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分
B.培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境
C.培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象
D.相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同
20、2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是( )
A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代
B.捐献者携带的红绿色盲基因不会遗传给三亲婴儿
C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核
D.三亲婴儿的培育要用到核移植技术、体外受精技术、胚胎移植技术
21、下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是( )
①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞
②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞
③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养
④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞
⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
⑥从小鼠腹水中提取抗体
⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合
A.实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥
B.③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆
C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖
D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选
22、如图为细胞或原生质体融合的简略过程。下列相关叙述错误的是( )
A.如果a和b分别是白菜和甘蓝的体细胞，则需要用纤维素酶和果胶酶处理这两种细胞
B.如果d经分裂和分化形成的是有性杂交后代，则a和b融合实现了基因重组
C.如果培养可得到单克隆抗体，则细胞d既能迅速大量增殖也能产生抗体
D.将d培养成体细胞杂交植株的过程可以说明植物细胞具有全能性
23、为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤。用EBV（一种病毒）感染已被抗原X致敏的动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株，这样的细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。下列相关分析不合理的是( )
A.杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
B.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
C.骨髓瘤细胞无法在添加了Oua的HAT培养基中存活
D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力
24、下列有关干细胞培养及应用的说法，错误的是( )
A.干细胞存在于早期胚胎、脊髓和脐带血等多种组织和器官中
B.从早期胚胎的内细胞团中分离出的胚胎干细胞，具有细胞全能性
C.体外诱导iPS细胞形成组织或器官，可以解决器官移植中供体不足和免疫排斥的问题
D.造血干细胞、神经干细胞属于成体干细胞，仍然具有分裂和分化能力
25、图1表示的是科学家获得iPS细胞（类似于胚胎干细胞），再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法。以下分析错误的是( )
A.图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的再分化过程
B.研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长，由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化可能是小鼠乙发生免疫反应造成的
C.图2中，研究人员使小鼠丙超数排卵，再利用SrCl2溶液处理后体外培养至④囊胚期，再筛选出单倍体干细胞
D.研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想模型
26、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①②③分别表示其结果，下列说法错误的是( )
A.若a是核移植技术，则①是无性繁殖的结果
B.若c是胚胎分割技术，则③中个体的基因型和表型不一定都相同
C.①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物
D.若b是体外受精技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能
27、NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体，在肿瘤血管的形成与肿瘤细胞的迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用。为探究NRP-1mAb（抗NRP-1抗体）对乳腺癌的治疗作用，研究人员以兔子为实验材料进行相关实验得到相关数据，结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.据图推测，NRP-1mAb能够有效降低肿瘤的体积，中、高剂量组的降低效果比低剂量组的降低效果更显著
B.NRP-1mAb的制备过程中利用灭活的病毒诱导两细胞融合，其原理是病毒表面含有的糖蛋白和相关酶可与细胞膜上的糖蛋白发生作用
C.将NRP-1反复给兔子注射，提取已免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的融合细胞都是杂交瘤细胞
D.NRP-1mAb的作用机理可能是NRP-1mAb与NRP-1特异性结合，阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合，从而抑制了肿瘤血管的形成和肿瘤细胞的分散、转移
28、通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是( )
A.对供体和受体母牛都要进行相同激素处理
B.受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行
C.胚胎移植的优势是可以充分发挥受体的繁殖潜力
D.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
29、下列关于胚胎早期发育的叙述，正确的有几项?( )
①合子形成后在输卵管内即开始发育
②卵裂过程中细胞中有机物的含量不断减少，但有机物的种类在增加
③早期胚胎发育依次经过受精卵、囊胚、桑葚胚、原肠胚几个时期
④滋养层细胞是在囊胚期形成的⑤胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化
⑥原肠胚的外胚层和内胚层分化成各种组织和器官
A.2项 B.3项 C.4项 D.5项
30、下图表示移植卵裂期胚胎和囊胚的流产率与受孕妇女年龄的关系，相关叙述正确的是( )
A.体外受精时，采集到的精子需要进行获能处理，卵细胞可直接参与受精
B.卵裂期细胞和囊胚细胞均未分化
C.实验结果表明，卵裂期胚胎移植成功率较高
D.受孕妇女年龄越大，胚胎移植的流产风险越高
31、精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述不正确的是( )
A.野生型菌液的培养皿中不会出现菌落
B.培养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基
C.菌落A是采用平板划线法接种后培养得到的纯培养物
D.菌落A是野生型菌种，菌落B为鸟氨酸发酵的优良菌种
二、多选题
32、黄酒为世界三大古酒之一。关于黄酒的酿造方法，古遗六法中描述到：秫稻必齐，曲蘖必时，湛炽必洁，水泉必香，陶器必良，火齐必得（注：曲蘖主要指酒曲，湛炽是指浸泡和蒸煮）。下列叙述正确的是( )
A.黄酒中的酒精是酵母菌利用“秫稻”在无氧条件下的代谢产物
B.曲蘖必时，可能是受酵母菌的生长繁殖需要适宜的温度等的影响
C.湛炽必洁，起到消毒的作用，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响
D.黄酒酿造过程中，发酵液出现的气体都是在酵母菌细胞质基质中产生的
33、研究者探索了利用清水紫花苜蓿和里奥百脉根进行植物体细胞杂交过程中，酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如下图。下列说法错误的是( )
A.可用纤维素酶和果胶酶酶解获得原生质体
B.通过无菌水梯度稀释，可在血细胞计数板中统计原生质体数量
C.植物体细胞杂交过程依赖酶的专一性以及细胞膜的流动性
D.酶解10h对清水紫花苜蓿原生质体产生最佳，里奥百脉根大约为12h
34、哺乳动物的单倍体胚胎干细胞（haESCs）是指只含有一套染色体（性染色体只含X染色体）、拥有类似于正常胚胎干细胞特性的细胞类群，可分为孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞两种类型，在研究隐性基因突变、表观遗传修饰和配子发育中具有独特的优势。下列说法错误的是( )
A.在体外培养条件下，haESCs可以由成纤维细胞转化而来
B.推测仅携带Y染色体的早期单倍体胚胎可能难以发育到囊胚阶段
C.haESCs与成体干细胞类似，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官
D.haESCs中通常不含等位基因，为获取遗传操作的动物模型提供了新思路
35、下图表示试管牛的培育过程。下列相关叙述正确的是( )
A.经①过程采集的卵细胞和精子直接同时放到受精溶液中即可完成受精
B.②过程依赖于细胞膜的流动性，体现了细胞膜进行信息交流的功能
C.④过程中，需要将胚胎移植到与供体性状相同的雌牛体内
D.③过程DNA总量增加，但每个细胞中核DNA数量不变
三、读图填空题
36、发酵工程生产产品的流程如图所示。回答下列问题：
（1）性状优良的菌种可以从自然界中获取，随着技术的发展，也可以通过_________或基因工程育种等途径获得。
（2）发酵工程的中心环节是_________。此时，要随时检测培养基配制培养液中的________、_________等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，严格控制__________（答出两点即可）等发酵条件。在醋酸发酵过程中需要对发酵液进行不断地搅拌，目的是__________（答出两点）。
（3）如果发酵产品是微生物细胞本身，在发酵结束之后，采用__________等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如分离、提纯产物果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的__________措施来获得产品，若发酵产品为高效分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）的菌株H，说明菌株H能分泌___________。
（4）青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点?__________。为什么?__________。
37、新型冠状病毒的结构如图1所示，新型冠状病毒表面的刺突蛋白是引起人体患肺炎的关键蛋白。图2是利用SARS病毒的抗原蛋白（SARS-CoVS）制备特异性单克隆抗体的过程。请回答下列问题：
（1）若从已免疫小鼠血液中获取单个B淋巴细胞，____________（填“需要”或“不需要”）用胰蛋白酶处理。
（2）在SARS-CoVS特异性单克隆抗体的制备过程中，需要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术，一般来说，动物细胞培养需要的条件有_____________（至少答出两点）；诱导动物细胞融合的方法有_____________（至少答出两种）。
（3）与康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗SARS-CoVS的单克隆抗体的优点是______________，其制备的过程中，第二次筛选的目的是_____________。
（4）制备单克隆抗体最重要的目的是对SARS病毒引起的肺炎进行免疫______________（填“治疗”或“预防”）。
（5）SARS-CoVS单克隆抗体_____________（填“能”或“不能”）对新型冠状病毒发挥作用，理由是_____________。
38、为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，回答下列问题：
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物工程技术有____________。
（2）从B牛体内获得的卵子，需要培养到_____________（填时期）才能和获能的精子结合完成受精。胚胎移植后需要对____________检查，E牛的性别可能是____________。
（3）卵细胞去核的方法普遍使用的是__________，“去核”实质上是去除_________。用于核移植的供体细胞一般选择传代10代以内的细胞，原因是_____________。
（4）方法1中，若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对囊胚阶段的胚胎进行分割，分割时应注意____________。
（5）某农场对牛进行同期发情处理，统计结果如下表。
两种同期发情方法的同期化结果比较
方法
处理牛数量/头
处理48h后发情牛数量/头
方法1（PGF法）
9
5
方法2（孕酮+PGF法）
9
6
①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供____________。
②与方法1相比，方法2的优点是_____________。
四、实验题
39、为分离和培养土壤中能分解尿素的细菌，实验小组使用了下列培养基配方，将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基；经接种、培养后统计每克土壤样品中的活菌数目，回答下列问题：
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
蛋白胨
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
1.0g
10.0g
1.0g
15.0g
（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________（填“能”或“不能”）。原因是____________。
（2）培养基常用____________法灭菌，培养皿常用____________法灭菌。待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止___________，以免造成污染。
（3）稀释涂布平板法能用来统计活菌的数目，其原理是___________。
（4）某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）____________。
（5）若在培养分解尿素的细菌的过程中，发现了另一种B细菌，在B细菌周围分解尿素的细菌的生长繁殖受到抑制，甲同学提出的观点是B细菌产生了不利于（抑制）分解尿素的细菌生存的物质，请你在以下实验的基础上继续完善实验流程来验证甲同学的观点：
__________→__________培养一段时间→观察A细菌的生长情况
五、探究题
40、平菇具有味道鲜美，抗杂菌污染的优势，杏鲍菇具有菌丝强壮，生长旺盛的优势。为获得具有优良性状的平菇形菌株，研究者利用原生质体融合技术，进行了如下研究。回答下列问题：
（1）以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是__________。
（2）用酶解法处理平菇和杏鲍菇获取原生质体时，要严格控制酶的____________（至少答出两点），以获得存活质量较高的原生质体，培养原生质体时，需要向培养液中加入适宜浓度的甘露醇来维持___________，以维持细胞正常的形态和功能。
（3）采用不同浓度PEG诱导原生质体融合，实验结果如表1所示。
表1
PEG质量分数
25%
30%
35%
40%
原生质体状态
有破碎现象，哑铃型细胞比例<0.01%
表现正常，哑铃型细胞比例0.03%
原生质体出现缩小现象，哑铃型细胞比例0.01～0.02%
原生质体出现缩小现象，哑铃型细胞比例0.01～0.02%
两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞，融合的原理是___________。实验结果显示：___________。
（4）鉴定菌株间遗传关系时，常将待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，说明二者的遗传关系较远（见图1）。借助此原理，快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌株X，请按照图1模式图在图2中绘制模式图，标注接种菌丝体位置，注明菌株类型，并预测拮抗线的位置。__________
（5）对上述融合菌株接种培养，筛选出外形为平菇形的5株新菌株，结果如表2所示。
表2
菌株编号
长满营养基质的时间/d
平均产量/（kg·sack-1）
1
27
0.55
2
27.6
0.54
3
26.4
0.51
4
26.2
0.68
5
25.8
0.58
根据上述结果，科研人员最终选择____________作为目的菌种。理由是___________。
参考答案
1、答案：A
解析：A.菠萝汁不能用干热灭菌法灭菌，因为干热灭菌法针对于耐高温且需要保持干燥的物品，若选用干热灭菌法会使菠萝汁的水分蒸发，A错误；B.由图可知，四种酵母菌中，丙的酒精度最低，因此利用四种酵母菌酿制菠萝酒，效果最差的是丙，B正确；C.6-7d，丁组酒精度不再上升的原因有：较高的酒精度对细胞有毒害作用，菠萝中的葡萄糖耗尽等，C正确；D.由于醋酸菌是好氧菌，因此利用菠萝果酒制作菠萝果醋时，发酵过程要始终保持有氧状态，D正确。故选A。
2、答案：D
解析：因为醋酸菌可利用酒精生产醋酸，但酵母菌不能利用醋酸生产酒精，故甲装置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，A错误；甲装置中，阀b控制排气，阀a控制进气，制作果酒时应关闭阀a以创造缺氧环境，适时打开阀b以排出产生的CO2，B错误；果醋发酵所需的最适温度高于果酒发酵所需的最适温度，C错误；过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，该过程需要氧气的参与，发生在线粒体中，过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该过程需要氧气的参与，但醋酸菌是原核生物，没有线粒体，故③和④过程的反应场所不同，D正确。
3、答案：B
解析：A、由题意“为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟的大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32h内定期取样观测发酵效果”可知，该实验的自变量是菌种的类型和发酵时间，A正确；
B、如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，由于上层有氧气，而下层的氧气含量极低、甚至没有氧气，据此说明该发酵菌是好氧菌，B错误；
C、大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质在蛋白酶的作用下转变为氨基酸和肽，脂肪在脂肪酶的作用下转变为脂肪酸和甘油，C正确；
D、若发现32h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间。若要确定最佳的发酵时间，可在原操作的基础上，继续延长发酵时间，并观测发酵效果，D正确。
故选B。
4、答案：B
解析：某种细菌以CO2为唯一碳源,可推测该细菌的代谢类型为自养型,但不确定是否为需氧型,A错误;无机盐参与复杂有机物的组成, 是该细菌不可缺少的营养物质,B正确;CO2不能作为能源物质,C错误;氮元素参与核酸、蛋白质的组成,培养该细菌的培养基中需要添加氮源,D错误。
5、答案：C
解析：图中①是倒平板，②是用接种环蘸取菌液，③是进行平板划线，④是培养。倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错误；灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再蘸取菌液进行平板划线，B错误；步骤③通过连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离得到由一个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确；平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，因此无法对其计数，D错误。
6、答案：C
解析：A、分解尿素的细菌是异养型，不能以CO2作为碳源，A错误；
B、接种后，应将培养皿倒置培养，要在培养皿皿底做好标记，B错误；
C、培养基中KH2PO4能够作为无机盐，其作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；
D、稀释涂布平板法用到的工具有涂布器、酒精灯等，不需要使用接种环，D错误。
故选C。
7、答案：C
解析：A、刚果红染液可以和纤维素结合形成红色的复合物，所以透明圈内的纤维素已被分解，A错误；B、菌落②所在的透明圈不是最大，说明菌落②中的菌株降解纤维素能力不是最强，B错误；C、图中菌落能产生纤维素酶，可能是细菌也可能是真菌，C正确；D、培养基中要以纤维素作为唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D错误。故选：C。
8、答案：B
解析：A、被有机磷农药污染的土壤中富含高效降解有机磷农药的微生物，为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，应该先在被有机磷农药污染的土壤中取样，然后用含有有机磷农药的选择培养基进行选择培养，A正确；
B、若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，测定结果往往比实际值偏大，因此用血细胞计数板直接计数无法区分死菌与活菌，B错误；
C、在接种前，为检测培养基平板灭菌是否合格，应该随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，观察是否有菌落产生，C正确；
D、制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂，制备培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板等步骤，若培养基需要调节pH，则应在灭菌之前调节，D正确。
故选B。
9、答案：C
解析：A、牛肉膏、蛋白胨都含有含碳有机物和含氮有机物，该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨，A正确；
B、该培养基需要收集空气中微生物获得菌落，该培养基中的成分X通常是琼脂，B正确；
C、步骤③中，实验组的操作是将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖保存一段时间，如果闭盖空气中微生物不能进入培养皿，C错误；
D、某一实验组平板上的菌落平均数量为36个，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，空白对照组没有接种不应出现菌落，说明培养基已被污染，应重新做实验，D正确。
故选C。
10、答案：D
解析：A、菌液稀释后可用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目，来确定接种时菌液的最佳稀释倍数，A正确；
B、培养基一般含有水、无机盐、碳源和氮源等营养成分，制备的牛肉膏蛋白胨固体培养基，可为微生物提供碳源、氮源、维生素等营养，B正确；
C、菌落分布均匀，故在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，C正确；
D、挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是增大菌株的数量（扩大培养），D错误。
故选D。
11、答案：C
解析：A、平板上不含任何生长因子，若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；
B、灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），B正确；
C、图中菌落生活在乙丙区域之间，说明同时需要乙和丙，C错误；
D、不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选菌种，D正确。
故选C。
12、答案：B
解析：A、培育脱毒苗时常采用芽尖、茎尖作为实验材料，是由于茎尖、芽尖处的细胞病毒很少，甚至无病毒，A错误；
B、培育马铃薯脱毒苗是由茎尖细胞经过植物组织培养获得完整植物的过程，故体现了茎尖细胞的全能性，B正确；
C、马铃薯脱毒苗的培育原理是植物细胞的全能性，经过脱分化和再分化获得完整个体，在此过程中细胞进行有丝分裂，不可能发生基因重组，C错误；
D、由图2可知，大小为0.12mm的茎尖外植体脱毒率高但成苗率低，因此不适宜作为马铃薯脱毒苗培养，D错误。故选B。
13、答案：D
解析：A、诱导形成愈伤组织需避光处理，A错误；
B、生长素具有低浓度促进、高浓度抑制的作用特点，继续增加其浓度，到一定值后会产生抑制作用，B错误；
C、2、4组实验进行比较，除自变量是否含IAA外，其他变量一致，遵循单一变量原则，C错误；
D、分析第1组结果可知，培养基中的IAA和自身产生的生长素有利于愈伤组织生根，D正确。
故选D。
14、答案：D
解析：同一植株不同细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同,如花粉细胞培养形成的愈伤组织细胞的基因只有体细胞的一半,D正确。
故选D。
15、答案：B
解析：A、外植体流水冲洗后，用体积分数为70%的酒精和次氯酸钠对外植体进行消毒后，立即用无菌水清洗2-3次，A正确；
B、①为脱分化、再分化，B表示通过胚状体进行无性繁殖，B错误；
C、D表示植物体细胞杂交，过程②可用物理或化学方法诱导形成融合细胞，C正确；
D、A细胞是单倍体，体细胞内含1个染色体组，D细胞是两个细胞融合得到的，故中期细胞内含4个染色体组，D正确。故选B。
16、答案：B
解析：A、细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，A错误；
B、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般多数为两个细胞的融合，B正确；
C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均不完全相同，而且动物细胞融合不能形成杂种个体，只能形成杂种细胞，C错误；
D、植物细胞培养需要经过脱分化处理，动物细胞培养不需要经过脱分化处理，D错误。
故选B。
17、答案：B
解析：A、分析曲线图：实验的自变量是培养时间，因变量是细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化，A正确；
B、培养液中蔗糖除了能为愈伤组织提供能量，还可以调节渗透压，B错误；
C、随培养天数的增加，蔗糖浓度和pH在不断降低，从而影响了细胞的增殖，12天后，细胞干重下降，C正确；
D、多倍体内染色体数目多，其基因表达量多，使得多倍体愈伤组织产生的次生代谢产物量较多，D正确。
故选B。
18、答案：B
解析：形成重组细胞利用了动物细胞核移植技术；重组细胞形成囊胚利用了动物细胞培养技术。由于最终没有形成个体，故不能体现动物细胞具有全能性。①②过程都有细胞的增殖、分化，因此都会发生DNA的复制和蛋白质的合成。
19、答案：C
解析：A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清等天然成分，A错误；
B、抗生素具有抑菌或杀菌作用，但对病毒无用，培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境，B错误；
C、上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上，消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞，培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确；
D、动物细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象，上皮细胞更易出现接触抑制现象，相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不相同，D错误。
故选C。
20、答案：C
解析：A、母亲的线粒体遗传病基因不会遗传给后代，A正确；
B、卵母细胞捐献者提供的是细胞质，而红绿色盲基因位于细胞核中，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不会遗传给后代，B正确；
C、三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲和母亲，C错误；
D、三亲婴儿的培育运用了核移植技术，而且还需要采用早期胚胎培养技术、胚胎移植等技术，体外受精技术，D正确。
故选C。
21、答案：C
解析：A、在制备单克隆抗体的过程中，需要给小鼠进行免疫，获得特定的浆细胞，然后用诱导剂使浆细胞与骨髓瘤细胞融合，在选择培养基中选择出杂交瘤细胞；由于杂交瘤细胞有多种，因此还需要第二次选择，以获得能产生抗X抗体的杂交瘤细胞，最后通过注射到小鼠腹腔中或体外培养，以获得单克隆抗体，A正确；
B、由同一种杂交瘤细胞增殖获得的细胞群，称为克隆，B正确；
C、利用诱导剂使细胞融合时，有同种细胞融合和异种细胞融合，而同种B细胞融合的杂交细胞不能无限增殖，C错误；
D、在单克隆抗体的制备过程中，共需要两次筛选，D正确．
故选：C。
22、答案：B
解析：A、植物体细胞杂交过程中需先用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，以除去细胞壁得到原生质体，A正确；
B、有性杂交后代是受精卵发育形成的个体，精子和卵细胞融合的过程是受精作用，B错误；
C、单克隆抗体是由浆细胞和骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞形成的，杂交瘤细胞既能分泌抗体又能无限增殖，C正确；
D、将植物细胞培养成植株的过程可以说明植物细胞具有全能性，故将d培养成体细胞杂交植株的过程可以说明植物细胞具有全能性，D正确。
故选B。
23、答案：D
解析：杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失，可能会导致杂交瘤细胞抗体产生能力下降，A项正确；
成熟的B细胞主要分布在淋巴结和脾脏，可以从抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处获得B淋巴细胞，B项正确；
由图可知，在添加了Oua的HAT培养基上培养时，骨髓瘤细胞死亡，说明骨髓瘤细胞在添加了Oua的HAT培养基中无法存活，C项正确；
题中所用B淋巴细胞被EBV感染，根据免疫调节的有关过程可推知，题中培养的是可分泌抗X抗体的杂交瘤细胞，不会产生抗EBV抗体，D项错误。
24、答案：A
解析：A、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A错误；
B、从早期胚胎的内细胞团中分离出的胚胎干细胞，具有细胞全能性，B正确；
C、iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以解决器官移植中供体不足和避免免疫排斥反应，C正确；
D、造血干细胞、神经干细胞具有分裂分化能力，属于成体干细胞，D正确。
故选A。
25、答案：A
解析：A、图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，即从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，过程类似于植物组织培养中的脱分化过程，A错误；
B、将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是小鼠乙（受体）发生免疫反应，使得iPS细胞团失去生命力，B正确；
C、图2中，对实验小鼠丙注射促性腺激素使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrCl2溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至④囊胚期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞，C正确；
D、单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究隐性基因功能的理想细胞模型，D正确。
故选A。
26、答案：C
解析：A、动物细胞通过核移植技术获得动物个体，该过程中①是无性繁殖的结果，A正确；
B、胚胎分割技术是将一个囊胚或者桑椹胚分割，进行胚胎移植获得多个后代个体，属于无性繁殖系，获得的个体的基因型一定相同，但是表现型是基因型和环境条件共同作用的结果，环境不同，表现型不一定相同，B正确；
C、珍稀的或存量少的雌性动物属于保护动物，不能作为生物工程的受体，应该用本地中数量较多的雌性动物，C错误；
D、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，它可充分发挥优良个体的繁殖潜力，为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。
故选C。
27、答案：C
解析：由图可知，NRP-1mAb能够有效降低肿瘤的体积，中、高剂量组的降低效果比低剂量组的降低效果更显著，A正确。灭活的病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确。提取已免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的融合细胞不都是杂交瘤细胞，需要通过选择培养基进行筛选从而获得杂交瘤细胞，C错误。根据题干信息“NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体，在肿瘤血管的形成与肿瘤细胞的迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用”可推测，NRP-1mAb与NRP-1特异性结合，阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合，从而抑制了肿瘤血管的形成和肿瘤细胞的分散、转移，D正确。
28、答案：D
解析：A、对供体和受体母牛都用孕激素进行同期发情处理但供体牛还需用促性腺激素对其进行超数排卵，A错误；
B、受精和胚胎的早期培养可以在体内进行，B错误；
C、胚胎移植的优势是可以充分发挥供体(雌性优良个体)的繁殖潜力，受体的任务就是妊娠和育仔，C错误；
D、早期胚胎需移植到与供体生理状态相同的代孕母牛体内，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。
故选D。
29、答案：C
解析：①合子形成后在输卵管内即开始发育，①正确；
②卵裂过程中，细胞进行有丝分裂消耗能量，细胞中有机物的含量不断减少，但有机物的种类在增加，②正确；
③早期胚胎发育依次经过受精卵、桑葚胚、囊胚、原肠胚几个时期，③错误；
④滋养层细胞是在囊胚期形成的，④正确；
⑤孵化是指囊胚从透明带出来进入母体子宫内，并植入子宫内膜的过程，⑤错误；
⑥原肠胚的外胚层和内胚层会分化形成各种组织和器官，⑥正确。
故选C。
30、答案：D
解析：A、体外受精时，采集到的精子需要进行获能处理，卵细胞需要培养成熟后参与受精，A错误；
B、卵裂期细胞和桑椹胚细胞均未分化，具有发育的全能性，而囊胚分化形成内细胞团和滋养层细胞，B错误；
C、实验结果表明，卵裂期胚胎移植流产率高，成功率低，C错误；
D、根据表格分析，受孕妇女年龄越大，胚胎移植的流产风险越高，D正确。
故选D。
31、答案：C
解析：A、液体培养基只是用作细菌的快速大量繁殖，如果需要形成菌落,那么应该接种在培养基上，因此野生型菌液的培养皿中不会出现菌落，A正确；
B、图甲平板上只有A菌落，过程②向培养基甲中添加精氨酸才出现B菌落，因此培养基甲中缺少精氨酸是一种选择培养基，B正确；
C、菌落A是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，C错误；
D、由分析可知，菌落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D正确。故选C。
32、答案：ABC
解析：A、在无氧条件下酵母菌也能进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，所以黄酒中的酒精是酵母菌利用“林稻”在无氧条件下的代谢产物，A正确；
B、曲蘖主要指酒曲，其中含有酵母菌，20℃左右最适合酵母菌繁殖，所以曲蘖必时，可能是受酵母菌的生长繁殖需要适宜的温度等的影响，B正确；
C、湛炽是指浸泡和蒸煮，经过高温，起到消毒的作用，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响，C正确；
D、参与黄酒酿造的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，有氧呼吸产生CO2的场所是线粒体基质，而无氧呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，D错误。
故选ABC。
33、答案：BCD
解析：A、细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体，A正确；
B、血细胞计数板法适用于较大细胞或颗粒，对原生质体进行显微计数，必须将原生质体制成的悬浮液滴加在血细胞计数板上，原生质体制成的悬浮液不可用无菌水稀释，B错误；
C、植物体细胞杂交过程依赖膜的流动性和植物细胞的全能性，C错误；
D、据图分析，清水紫花苜蓿酶解10h，原生质体产量最高和活力最大；里奥百脉根酶解12h时，原生质体产量最高，酶解14h时，原生质体活力较大，故酶解10h对紫花苜蓿原生质体产生最佳，百脉根为12～14h，D错误。故选BCD。
34、答案：AC
解析：A、单倍体胚胎干细胞只含有一套染色体，在体外培养条件下，haESCs不能由成纤维细胞转化而来，A错误；
B、根据题干信息“单倍体胚胎干细胞性染色体只含X染色体”推测，仅携带Y染色体的早期单倍体胚胎可能难以发育到囊胚阶段，B正确；
C、单倍体胚胎干细胞类似于正常胚胎干细胞，具有发育的全能性，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官，而成体干细胞来源于已经分化组织中的未分化细胞，如造血干细胞，其只能分化为所来源的组织和器官的类型的细胞，C错误；
D、单倍体胚胎干细胞中不含等位基因，动物细胞核具有全能性，需要核移植技术才能培育成单倍体动物，为获取遗传操作的动物模型提供了新思路，D正确。
故选AC。
35、答案：BD
解析：A、经①过程采集的卵细胞需要培养到MⅡ期才能与获能的精子受精，经①过程采集的精子需要进行获能处理后，在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程，A错误；
B、②过程是精子与卵细胞的结合，依赖于细胞膜的流动性，体现了细胞膜进行信息交流的功能，B正确；
C、④过程为胚胎移植，需要将胚胎移植到与供体同期发情处理的母牛体内，C错误；
D、③过程为早期胚胎培养，DNA总量增加，但每个细胞中核DNA数量不变，D正确。
故选BD。
36、答案：（1）诱变育种
（2）发酵罐内发酵；微生物数量；产物浓度；温度、pH和溶解氧含量；溶解更多的氧气，同时利于醋酸菌与营养物质充分接触
（3）过滤、沉淀；提取、分离和纯化；蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
（4）不认同；因为青霉素只能杀灭部分杂菌，且某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，因此生产青霉素的过程中也要防止杂菌污染
解析：（1）性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。
（2）发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧与转速等发酵条件。醋酸菌为好氧菌，在醋酸发酵过程中需要对发酵液进行不断地搅拌，溶解更多的氧气，同时有利于醋酸菌与营养物质充分接触。
（3）不同微生物产品分离、提纯方法不同，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。因餐厨垃圾主要成分是蛋白质、淀粉、油脂等，故菌株H能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶从而降解垃圾。
（4）青霉素只能杀灭部分杂菌，且某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，因此生产青霉素的过程中也要防止杂菌污染。
37、答案：（1）不需要
（2）无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境；PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法
（3）单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备；筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
（4）治疗（5）不能；新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同，SARS-CoVS单克隆抗体，只能与SARS-CoVS发生特异性结合
解析：（1）用胰蛋白酶处理组织块，可以分解细胞间的连接物，使组织细胞分散开，因为血液中的细胞本身就是分散的状态，不需要用胰蛋白酶处理，就能从已免疫小鼠血液中获取单个B淋巴细胞。
（2）动物细胞培养需要的条件有无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境等。诱导动物细胞融合的方法有PEG（聚乙二醇）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等。
（3）康复者捐献的血浆中的抗体疗效显著，但是可能因为康复者本身的差异而导致疗效不同，而且来源有限，受赠者也可能因此感染体液传染病。与康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗SARS-CoVS的单克隆抗体的优点是单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。在制备单克隆抗体时，在经过第一次筛选后得到杂交瘤细胞，由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，因此经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞，所以要进行第二次筛选，目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
（4）疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品，注射SARS病毒疫苗，能引起机体产生免疫反应，产生抗体和记忆细胞，记忆细胞可以在机体保留较长的时间，是预防SARS病毒的有效措施，属于免疫预防；给患者输入相应的抗体，抗体与SARS病毒结合后会引起进一步变化，例如，引起SARS病毒被其他免疫细胞吞噬消化，这个过程属于免疫治疗。制备单克隆抗体最重要的目的是对SARS病毒引起的肺炎进行免疫治疗。
（5）抗体能跟抗原发生特异性结合，即一种抗体只能与一种抗原结合。因为新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同，所以SARS-CoVS单克隆抗体只能与SARS-CoVS发生特异性结合，不能对新型冠状病毒发挥作用。
38、答案：（1）动物细胞培养、胚胎移植
（2）MⅡ期；受体进行妊娠；雌性或雄性
（3）显微操作去核法；纺锤体-染色体复合物；保证了正常的二倍体核型
（4）将内细胞团均等分割
（5）相同的生理环境；同期发情率高
解析：（1）试管牛和克隆牛都需要用到的生物工程技术有动物细胞培养，试管牛需要培养精子、卵细胞、受精卵等，克隆牛需要培养卵母细胞、体细胞、早期胚胎等。试管牛和克隆牛都需要进行胚胎移植。
（2）卵子需要培养到MⅡ期，此时期细胞中使细胞核全能性表达的物质含量高。胚胎移植后需要对受体进行妊娠检查，了解胚胎是否正常发育。E牛是精卵结合形成的受精卵发育来的，可能是雌性或雄性。
（3）卵细胞去核的方法普遍使用的是显微操作去核法，即在显微镜下操作去核，此时是减数第二次分裂中期，“去核”实质上是去除纺锤体-染色体复合物。用于核移植的供体细胞一般选择传代10代以内的细胞，原因是传代10代以内的细胞发生变异的概率低，保证了正常的二倍体核型。
（4）胚胎分割时需要将内细胞团均等分割，如果内细胞团分割不均匀，会影响胚胎发育。
（5）①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，使供体和受体的生殖器官的状态相同。表格中②与方法1相比，方法2的优点是同期发情率高。
39、答案：（1）不能；培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物
（2）高压蒸汽灭菌；干热灭菌；培养皿盖上的水珠落入培养基
（3）当样品稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落的数目，就能推测出样品中大约有多少个活菌
（4）2.34×109
（5）去除③中的B细菌，保留培养基；再接种A细菌
解析：（1）据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物，故不能分离尿素分解菌。
（2）培养基常用高压蒸汽灭菌方法灭菌，培养皿常用干热灭菌法灭菌。待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，以免造成污染。
（3）固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法适用干微生物的统计计数，其原理为当样品稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落的数目，就能推测出样品中大约有多少个活菌。
（4）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=234÷0.1×106=2.34×109。
（5）该实验的目的是验证A细菌生长繁殖受到抑制原因是B细菌产生了不利于(抑制)A细菌生存的物质，可以利用培养B细菌的培养基培养A细菌，看A细菌的繁殖是否受到影响，实验过程为：去除③中的B细菌，保留培养基→再接种A细菌→培养一段时间→观察A细菌的生长情况。
40、答案：（1）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
（2）使用种类、浓度、温度和处理时间等；（一定的）渗透压
（3）细胞膜的流动性；质量分数为30%的PEG溶液诱导原生质体融合效果最好，高于或低于30%不利于获得融合的原生质体
（4）
（5）菌株4；长满营养基质的时间短，平均产量高
解析：（1）以原生质体融合技术培育杂种新菌株的典型优势是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。
（2）原生质体放在低渗溶液中，会吸水涨破，放在高渗溶液中会失水皱缩，利用酶解法去除细胞壁时，应严格控制使用种类、浓度、温度和处理时间等条件﹐以提高原生质体产量并降低破损率，以获得存活质量较高的原生质体。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压以维持原生质体的形态和活性。
（3）原生质体融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，已知两个原生质体融合效果较好时会呈现哑铃型细胞。实验结果显示：质量分数30%的PEG溶液诱导原生质体融合效果最好，高于或低于30%不利于获得融合的原生质体。
（4）已知待测菌株的菌丝体接种于同一培养基内，若两菌丝体间长出“拮抗线”，说明二者的遗传关系较远。借助此原理，若要快速筛选出一株与两亲本菌株遗传关系较远的融合菌株X，可接种菌丝如下：
（5）分析表格中长满营养基质的时间和平均产量可知，菌株4的培养时间较短，且平均产量最大，故科研人员最终选择菌株4作为目的菌种。
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