高中第一章 发酵工程利用微生物进行规模化生产第二节 获取纯净的微生物培养物二、培养特定微生物群体随堂练习题

【特供】二、培养特定微生物-1作业练习

一．单项选择

1．菌种保存的依据是(　　)

A．低温   B．干燥

C．隔绝空气   D．以上全对

2．培养基的配制需要运用灭菌技术。下列关于灭菌的叙述中，正确的是（　　）

A．杀死一定环境中所有细菌

B．杀死一定环境中所有的有害细菌

C．杀死一定环境中的所有微生物

D．杀死一定环境中所有微生物的细胞．芽孢和孢子

3．下列有关细菌培养的叙述，正确的是（　　）

A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌

B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长

C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长

D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动

4．下列不能用于菌种选育的是（　　）

A．人工诱变   B．自然选育

C．基因工程育种   D．杂交育种

5．下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是(　　)

A．发酵时需不断通入无菌空气，否则会积累乳酸

B．发酵时常采用的培养基为液体天然培养基

C．从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产

D．当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量

6．关于发酵过程的说法，下列叙述不正确的是（　　）

A．培养基灭菌是发酵生产中的一个很重要的环节

B．随时检测影响发酵过程的各种环境条件，并予以控制，才能保证发酵的正常进行

C．在发酵过程中，要严格控制温度．pH．溶氧．通气量与转速等发酵条件，否则会影响菌种代谢产物的形成

D．发酵产品的提取精制方法是共同的

7．下列关于黄色短杆菌的叙述，不正确的是(　　)

A．黄色短杆菌用于赖氨酸生产时，不能合成高丝氨酸脱氢酶的理想菌株是诱变育种的成果

B．黄色短杆菌在大量合成谷氨酸时，培养基中碳源与氮源的比为3∶1，此时菌体种群处于稳定期

C．由培养基的成分和发酵条件的控制可知，黄色短杆菌是异养需氧型，在自然界属于分解者

D．黄色短杆菌的性状主要由拟核DNA中的基因决定，其基因结构的特点是编码区是连续的，而黄色短杆菌质粒中的基因结构不具有此特点

8．发酵工程的第一个重要工作是从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种，获得纯种的方法不包括(　　)

A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基

B．根据微生物缺乏特殊营养物质的种类，在培养基中增减不同的特殊营养物质

C．利用高温高压消灭不需要的杂菌

D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素

9．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂将（　　）

A．变蓝色   B．变红色

C．变黑色   D．变棕色

10．制药厂引进了能够合成人α-干扰素的某大肠杆菌品系，在适宜的培养基中接入适量菌种，培养3 h后开始取样并在此后每隔3 h取样一次，测定并记录细菌种群密度和培养基pH.下表数值记录无误，但记录顺序不慎弄乱.据此表格的有关分析，不正确的是(　　)

A.通过基因工程才能培育出该品系的大肠杆菌

B．培养基pH的变化与发酵时长直接有关，因此可以根据培养基pH由大到小来恢复记录顺序

C．培养到24 h时测量的数值为：密度2.2×104．pH6.43

D．密度2.0×104．pH6.37的种群处于对数期

11．下表是关于四种生物能源．碳源．氮源．新陈代谢类型的描述。下列描述正确的一组生物是(　　)

A.硝化细菌和乳酸菌   B．乳酸菌与根瘤菌

C．根瘤菌与衣藻   D．硝化细菌与衣藻

12．外科手术器械和罐头食品的消毒，都要以能杀死________为标准。(　　)

A．球菌   B．杆菌

C．螺旋菌   D．芽孢

13．请选出下列正确的操作步骤(　　)

①土壤取样　②称取10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中　③吸取0.1mL进行平板涂布　④依次稀释至101．102．103．104．105．106．107稀释度

A．①②③④   B．①③②④

C．①②④③   D．①④②③

14．对培养基．培养皿．接种环．实验操作者的双手．空气．牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是(　　)

①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线灭菌　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④⑥　　　　 B．①②③④⑤⑥

C．⑥②③④①⑤   D．③④②①⑥⑤

15．下列关于灭菌的叙述正确的是（　　）

A．培养基和发酵设备均需严格灭菌

B．灭菌就是杀死培养基中的一切细菌

C．通入无菌空气可以达到灭菌的目的

D．pH调到2左右灭菌效果最好

16．不同微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养描述中不正确的是(　　)

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

17．下列关于统计菌落数目方法的叙述，不正确的是（　　）

A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数

B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数

D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

18．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是(　　)

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温．高压灭菌后倒平板

B．取104．105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】保存菌种，必须使微生物代谢进入最不活跃状态，才能避免变性及保持活性，因此低温．干燥．绝隔空气是重要手段。

2．【答案】D

【解析】灭菌是杀死一定环境中所有微生物的细胞．芽孢和孢子。

3．【答案】D

【解析】在琼脂固体培养基上长出的单个菌落是由一个细菌增殖而成的，其中只含有一种细菌，A项错误；青霉素能够破坏细菌的细胞壁而抑制细菌的生长繁殖，但对真菌的结构无明显影响，B项错误；破伤风杆菌属于厌氧菌，在通入氧气的条件下其生命活动会受到抑制，C项错误；通常利用半固体培养基培养细菌以观察其运动，D项正确。

4．【答案】D

【解析】菌种选育包括人工诱变．自然选育．基因工程育种等，杂交育种适用于有性生殖的生物。

5．【答案】C

【解析】通过发酵工程利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸，谷氨酸棒状杆菌为好氧性细菌，所以要不断通入无菌空气，A选项正确；其培养基通常用豆饼的水解液．玉米浆．尿素．磷酸氢二钾．硫酸镁．生物素等配制而成的液体天然培养基，B选项正确；当菌体生长进入稳定期时，补充营养有助于延长稳定期，可提高谷氨酸的产量，D选项正确；从自然界分离的野生型菌株产量一般都比较低，不能满足工业生产上的要求，C选项错误.

6．【答案】D

【解析】不同的发酵产品其提取精制方法各不相同，有的需要过滤．沉淀，而有的则需要进行蒸馏．萃取或离子交换。

7．【答案】D.

【解析】黄色短杆菌的拟核和质粒的基因的编码区都是连续的，不间隔的，没有外显子和内含子.

8．【答案】C

【解析】A．B．D三种方法都属于选择培养基的使用，都可选择出目的菌株，而C项高温处理的时候灭菌是没有选择性的。

9．【答案】B

【解析】细菌的脲酶将尿素分解成氨，使培养基pH升高，酚红指示剂将变红色。

10．【答案】D.

【解析】人α-干扰素基因存在于人的细胞中，利用基因工程才能够将该基因转移到大肠杆菌中，选育出能够产生干扰素的菌种.微生物的培养过程中，随着培养时间的延长，不断产生二氧化碳，pH由大到小，培养到24 h，属于第8次取样，测量的数值为：密度2.2×104．pH6.43.密度2.0×104．pH6.37为第9次取样，种群处于衰亡期.

11．【答案】D

【解析】乳酸菌不能直接利用N2，且能量来源为葡萄糖，产生乳酸，根瘤菌进行生命活动所需能量来自糖类等分解。

12．【答案】D

【解析】外科手术器械和罐头食品的消毒，要杀死一切病原体，而芽孢耐热性最强，所以消毒时以能杀死芽孢为标准。

13．【答案】C

【解析】分离分解尿素的细菌的过程是：取样→稀释→培养与观察，故正确顺序为①②④③。

14．【答案】A

【解析】培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法。

15．【答案】A

【解析】灭菌不仅是杀死培养基中的一切微生物，还包括它们的芽孢及孢子。通入无菌空气是为了避免进入杂菌造成污染，并没有灭菌的作用。不同微生物所能适应的pH范围是不相同的，灭菌效果最好的pH不一定是2左右。

16．【答案】B

【解析】自养微生物碳源为无机物，不能作为能源，能源应是光能(如光合细菌)或氧化无机物释放的化学能(如硝化细菌)。

17．【答案】C

【解析】当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。涂布3个平板，作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。

18．【答案】D　

【解析】检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温．高压灭菌后倒平板，取104．105．106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。