2023届高考生物二轮复习高效快速练生物技术与工程作业（不定项）含答案

这是一份2023届高考生物二轮复习高效快速练生物技术与工程作业（不定项）含答案，共13页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。

一、选择题(每题只有一个答案最符合题意。)
1．[2022·山东济南二模]肠道菌群与人体健康存在密切关系，实验室常用硫乙醇酸盐流体培养基培养肠道菌群。硫乙醇酸盐流体培养基的主要成分包括胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、L－胱氨酸、硫乙醇酸钠、琼脂、刃天青等，其中L－胱氨酸、硫乙醇酸钠和葡萄糖均可防止因过氧化物的积累而对厌氧菌产生毒害。培养基的上层、中层、下层部位可以分别提供有氧、弱氧至无氧的梯度环境。下列说法错误的是( )
A．厌氧细菌、兼性厌氧细菌和好氧菌均可在硫乙醇酸盐流体培养基中生长
B．琼脂可以防止液体流动，减少二氧化碳和氧气扩散，有利于厌氧环境的形成
C．胰酪蛋白胨可为厌氧菌提供氮源以及供合成蛋白质必需的各种氨基酸
D．硫乙醇酸盐流体培养基需经高压蒸汽灭菌后使用，接种工作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行
2．[2022·浙江嘉兴二模]果酒制作过程中，发酵液中蔗糖、还原糖、乙醇含量以及酵母菌数量随时间变化如图所示。下列叙述正确的是( )
A．表示蔗糖和还原糖含量的曲线分别是甲和乙
B．t1～t2时段，酵母菌细胞呼吸释放的能量绝大部分储存在ATP中
C．t2～t3时段，酵母菌细胞合成ATP的主要部位是线粒体基质
D．t3～t4时段，酵母菌数量下降的直接原因是蔗糖含量不足
3．[2022·北京西城二模]为筛选高效抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，取直径为3 mm的果树腐烂病菌菌落转移至A处，B处接种芽孢杆菌(图1)。培养若干天，实验组与对照组的结果如图2所示。下列抑菌率的计算公式正确的是( )
图1
图2
A. eq \f(D－d,D) ×100% B． eq \f(D－d,D－3) ×100%
C． eq \f(D－d－3,D) ×100% D． eq \f(D－d－3,D－3) ×100%
4．[2022·北京西城一模]如图是中国科学家首次用体细胞核移植技术克隆出两只猕猴的简单流程，相关叙述错误的是( )
A．培养供体体细胞的培养液中常需添加动物血清
B．卵母细胞去核和体细胞注射常在显微镜下操作
C．克隆猴的诞生利用了体外受精和胚胎移植技术
D．克隆后代的遗传物质与供体体细胞不完全一致
5．[2022·泰州中学月考]CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图所示流程进行了实验。下列叙述错误的是( )
A．多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞
B．经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞
C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱
D．对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测
6．[2022·枣庄二模]科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。有关分析正确的是( )
A.过程①应将叶片上表皮向上，置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中
B．过程②中的原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成
C．④过程可用高Ca2＋—低pH融合法，目的是促进原生质体融合
D．⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的优良性状
7．[2022·泰安二模]用农杆菌侵染水稻(二倍体)细胞，获得1条染色体上R基因被插入T－DNA的个体T0。T－DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1，同时用P1、P2、P3为引物检测T1个体的基因组成情况，如图2所示(图1箭头方向为引物所在子链的延伸方向；R基因被T－DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR)。下列说法错误的是( )
图1
图2
A.该实验中所用的P1、P2、P3三种引物均为单链DNA
B．R基因被T－DNA插入后可能会导致基因无法表达相应蛋白
C．用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体均为R基因纯合子
D．W、H、M个体的比例不为1∶2∶1，可能是因为调查的样本数量较小
8．[2022·济宁二模]OsGLOl、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽(引导合成的蛋白质进入叶绿体)基因连接，构建多基因表达载体(载体中部分序列如图所示)，利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列叙述正确的是( )
A．四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译
B．OsGLOl、EcCAT基因转录时以DNA的同一条单链为模板
C．应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞
D．可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因棉花中的表达情况
二、选择题(在每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确。)
9．[2022·扬州一模]某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果见下表，其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数。下列叙述正确的是( )
A.每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰
B.使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品之间的交叉污染
C．实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏高
D．牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后再调整pH，完全冷却后倒平板
10．[2022·德州二模]紫草宁是从紫草细胞中提取的一种色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。科研人员利用紫草外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下列说法正确的是( )
A．外植体细胞经诱导后基因选择性表达，形成愈伤组织
B．需要将愈伤组织分散成单个细胞后再进行悬浮培养
C．需要在培养液中加入大量蔗糖以提供植物细胞所需的能量
D．悬浮培养可增加细胞与营养物质的接触面积，有利于细胞生长
11．[2022·济宁二模]如图是基因工程育种过程中剔除转基因植物标记基因的一种策略。下列叙述正确的是( )
A．图中的两个质粒，都带有T－DNA序列
B．该方法可以将标记基因和目的基因转移到同源染色体上
C．获得的无筛选标记转基因植株发生了染色体结构变异
D．除去转化植株的标记基因必须经过有性繁殖阶段的基因重组
三、非选择题
12．[2022·江苏新高考基地4月联考]实时荧光RT－PCR技术(RT－qPCR)利用荧光标记探针对扩增产物量进行实时跟踪，再根据扩增曲线计算出起始模板量，即样本病毒载量。如图是利用RT－qPCR进行新型冠状病毒(SARS－CV－2)载量测定的主要过程。请据图回答：
(1)过程①中，RNA提取裂解液可同时灭活病毒，原因是____________________________。采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理，其目的是________________________。RNA酶抑制剂的作用是__________________________。
(2)过程②中，加入的酶N是________。根据图示，保证病毒核酸检测准确的关键是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)在进行新冠病毒核酸检测时，通常以病毒的ORF1ab基因为检测的目标基因，是因为ORF1ab基因具有________________的特点。检测试剂中还加有“阳性对照”和“阴性对照”，阴性对照的主要作用是______________________________________________________________。
(4)下表是SARS－CV－2核酸检测时PCR仪参数设定要求：
①步骤a的反应时间要足够长，其目的是________________________________。
②步骤d主要包括PCR过程的________阶段。
(5)临床上，将症状及影像学结果高度疑似、核酸多次检测为“阴性”的现象称为检测结果“假阴性”，导致“假阴性”结果可能是由于________(填序号)
①检测者处于感染初期 ②检测者感染时间较长 ③样本采集位置不规范 ④样品稀释度不足 ⑤病毒出现变异
高效快速练(十六)
一、选择题(每题只有一个答案最符合题意。)
1．[2022·南京三模]培养基是人们按照培养对象对营养物质的不同需求配制的营养基质。下列有关培养基的配制和使用的叙述，正确的是( )
A．微生物培养基的组成成分必须含有碳源、氮源、水和无机盐
B．用动、植物的体细胞进行细胞培养，均可用固体培养基
C．接种前要了解固体培养基是否被污染，可接种蒸馏水来培养检测
D．使用过的微生物培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃
2．[2022·济宁二模]耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。嗜热菌可以在高温环境中生存，其产生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示，其中Ⅰ号培养基用碘液处理的结果如图2所示。下列叙述正确的是( )
图1
图2
A.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
B．倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌
C．淀粉是图2所示固体培养基的唯一碳源
D．甲、乙试管中均为选择培养基
3．[2022·南京金陵中学调研]植物酵素是指以植物为主要原料，经微生物发酵制得的含有特定生物活性成分的产品。苹果酵素生物发酵的流程中，需将苹果去核、切块，加冰糖，并持续发酵90天。每隔15天测定总酸含量和乙醇含量，结果如图。有关叙述正确的是( )
A.冰糖为微生物发酵提供养分，加入前可用紫外线照射杀灭其表面微生物
B．第一个月的隔天通气的目的是抑制厌氧型和兼性厌氧型微生物的无氧呼吸
C．第二个月总酸含量增加的主要原因可能是乳酸菌等微生物呼吸产生了CO2
D．第三个月总酸含量和乙醇含量发生的变化可能与醋酸菌的发酵作用密切相关
4．[2022·北京海淀二模]科研人员用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵细胞融合，然后将重构胚移植到代孕母羊的体内，最终培育出了克隆羊“多莉”。下表是科学家获得的部分实验数据，下列相关叙述，不合理的是( )
A.两组羔羊性状主要与核供体母羊相同
B．②组比①组成功率高，可能因为胚胎细胞分化程度低
C．本实验涉及细胞培养、核移植和胚胎分割技术
D．克隆技术应用于人类，可能存在一定的伦理风险
5．[2022·北京朝阳一模]PCR引物的3′端为结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是( )
A．该图表示PCR循环中的变性环节
B．dNTP作为扩增的原料会依次连接到5′端
C．Taq酶催化相邻的dNTP间形成磷酸二酯键
D．用图中引物扩增两个循环后可获得目的产物
6．[2022·浙江嘉兴二模]为确定某染色体上是否含有目标基因，进行了如图所示的实验，图中的DNA 片段甲，是利用放射性同位素32P标记的脱氧腺苷三磷酸(dATP, dA－Pα～Pβ～Pγ)等材料制备的单链。下列叙述正确的是( )
A．制备DNA片段甲时，所用dATP的γ位磷酸基团中的磷必须是32P
B．混合时，染色体样品中的DNA分子需始终保持规则的双螺旋结构
C．漂洗是为了去除未和目标基因杂交的DNA片段甲
D．图示检测过程，运用了抗原—抗体杂交技术
7．[2022·山东省青岛4月练习]吴茱萸是一种中药，其主要成分为吴茱萸碱(EVO)，为研究EVO对人胃癌细胞增殖的影响及作用机制，科研人员做了相关实验。研究发现，EVO不仅能通过诱导胃癌细胞中p53蛋白的表达，使其细胞周期阻滞在G2/M期，还能影响细胞凋亡蛋白Caspase­3的表达，最终起到治疗胃癌的作用。下列说法错误的是( )
A．培养胃癌细胞，需将含动物血清的培养基置于恒温培养箱中
B．加入胰蛋白酶制备的胃癌单细胞悬液，会出现接触抑制现象
C.p53可能是一种细胞周期抑制蛋白，EVO能够抑制胃癌细胞的增殖
D．患者服用EVO后，胃癌细胞中Caspase­3的含量会增加
8．[2022·山东省高三学业质量联合检测]我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪(如下图所示)，这项研究的最终目的是在动物体内培养人体器官用于器官移植。下列相关叙述错误的是( )
A．胚胎干细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胰蛋白酶处理后继续培养
B.采集的卵母细胞需培养至减数分裂Ⅰ期才能与获能精子受精，进而获得猪胚胎
C．从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D.该技术有望将人的胚胎干细胞注入猪早期胚胎内，培育出完全由人体细胞组成的器官
二、选择题(在每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确。)
9．[2022·南京三模]下列关于胚胎工程的叙述，错误的是( )
A．进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查
B．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点
C．早期胚胎需要移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育
D．胚胎分割时可以分离内细胞团细胞进行DNA分析，鉴定性别
10．[2022·泰安二模]MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上，进行药敏试验以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验器材，图2为实验结果。下列说法正确的是( )
图1
图2
A.为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①②③
B．图2中抑菌圈越大，说明该测试菌对相应抗生素的抗性越强
C．图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株
D．图2中抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的小，所以抗生素Ⅰ的MIC小于抗生素Ⅲ的MIC
11．[2022·辽宁鞍山二模]CRISPR－Cas9是近年来生物学科研的热门技术，该技术源于细菌的一种防御机制。如图所示，当细菌感知到噬菌体侵入时，会通过gRNA识别噬菌体DNA，并通过Cas9切断目标DNA，从而起到防御作用。下列关于该机制的叙述错误的是( )
A．噬菌体DNA的变化体现了基因突变的不定向性
B．gRNA与目标DNA结合片段中最多含有5种核苷酸
C．Cas9可破坏DNA分子的磷酸二酯键
D．高倍光学显微镜可观察到该现象
三、非选择题
12．[2022·济宁二模]亚洲棉的光籽(突变体无短绒)和毛籽(野生型有短绒)是一对相对性状，中国农业科学院棉花研究所对亚洲棉光籽性状遗传机制进行了研究，发现突变体光籽表型的出现与8号染色体上DNA片段发生突变有关，研究者提取突变体和野生型的8号染色体的DNA进行PCR，产物扩增后电泳结果如图：
(1)据图分析，该PCR过程是根据野生型毛籽棉的__________________________DNA序列设计连续的重叠引物对。电泳结果表明相对分子质量较大的扩增产物与点样处的距离较________(填“大”或“小”)，并推测8号染色体上第________对引物对应的区间(简称M)发生了碱基的________(填“增添”“缺失”或“替换”)是突变体光籽出现的根本原因。
(2)研究者从野生型和突变体中克隆出区间M后，运用基因工程技术分别导入棉花原生质体，检测其下游报告基因的基因表达水平，进而推测区间M的作用，结果如图。
内参基因REN是为了排除转化效率不同对实验结果的干扰，因此图中LUC表达量/REN表达量可用来衡量报告基因的表达水平。实验结果说明：__________________________________________。
(3)研究者发现基因GaFZ的表达会影响毛籽棉花短绒的发育，而且突变体GaFZ蛋白结构与野生型一致。综合上述研究推测突变体光籽表型出现的可能原因是________________________________。
高效快速练（十五）
1．C 培养基的上层、中层、下层部位可以分别提供有氧、弱氧至无氧的梯度环境，故厌氧细菌、兼性厌氧细菌和好氧菌均可在硫乙醇酸盐流体培养基中生长，A正确；培养基中加入琼脂可以防止液体流动，从而减少二氧化碳和氧气扩散，有利于厌氧环境的形成，B正确；胰酪蛋白胨可为厌氧菌提供氮源，但不能提供合成蛋白质必需的各种氨基酸，C错误；培养基需经高压蒸汽灭菌后使用，接种操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行，D正确。
2．A 果酒制作过程中，酵母菌先进行有（需）氧呼吸快速繁殖，再进行酒精（乙醇）发酵，随着酒精增加和有毒物质积累，酵母菌数量会下降，因此丙为酵母菌数量，丁表示酒精含量，甲和乙分别表示蔗糖和还原糖的含量，A正确；t1～t2时段，酵母菌进行有氧呼吸，释放的能量绝大部分转化成热能，B错误；t2～t3时段，酵母菌细胞进行酒精发酵，合成ATP的主要部位是细胞溶胶（细胞质基质），C错误；在t3之前，蔗糖含量已降为0，在t3～t4时段酵母菌数量下降的直接原因可能是还原糖含量不足或酒精浓度过高，D错误。
3．B 由图可知，对照组病菌菌落直径为D，实验组病菌菌落直径为d，D－d为腐烂病菌被芽孢杆菌抑制的部分，计算抑制率需要用被抑制的部分除以对照组扩增的部分（D－3）再乘100%，故选B。
4．C 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，培养供体体细胞的培养液中常需添加动物血清以补充其发育所需的物质，A正确；卵母细胞去核和体细胞注射常在显微镜下操作，B正确；克隆猴培育过程中需要运用核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，是一种无性生殖方式，没有进行体外受精，C错误；克隆后代与供体体细胞的遗传物质不完全一致是因为供体只提供了核基因，细胞质基因来自去核卵母细胞，D正确。
5．D 步骤①是向小鼠体内注射特定的抗原，多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞，A正确；第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生抗CD47抗体的杂交瘤细胞，故经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞，B正确；CO2可维持培养液的pH，实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱，C正确；根据单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系作对照，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，则对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证题述推测，D错误。
6．A ①过程为去除细胞壁以获得原生质体，应将叶片上表皮的一面朝上（能与溶液接触），原生质体没有细胞壁，为避免原生质体吸水破裂，将叶片置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中，A正确；原生质层是由细胞膜、液泡膜以及这两层膜之间的细胞质组成的，而原生质体包括细胞膜、细胞质和细胞核，B错误；诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋—高pH融合法等，C错误；由于杂种细胞基因的表达会相互影响等，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，D错误。
7．C 引物一般为单链DNA分子，A正确；R基因被T－DNA插入后，R基因被破坏，所以可能无法表达相应蛋白，B正确；R基因被T－DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR，用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体不可能是R基因纯合子，C错误；T0为杂合子，自交后代W、H、M个体的比例理论上为1∶2∶1，图中W、H、M个体的比例不为1∶2∶1，可能是因为调查的样本数量较小，误差较大所致，D正确。
8．D 利用农杆菌转化法转化棉花，可使目的基因插入棉花细胞的染色体DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在棉花细胞核内进行转录，在核糖体上进行翻译，之后在叶绿体转运肽的引导下进入叶绿体，A错误；在同一个T－DNA中OsGLOl基因和EcCAT基因的启动子启动转录的方向不同，因此OsGLOl、EcCAT基因转录时不是以DNA的同一条单链为模板的，B错误；只有Ti质粒的T－DNA能转移到受体细胞的染色体DNA上，卡那霉素抗性基因不在T－DNA中，而潮霉素抗性基因在T－DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞，C错误；可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因棉花中的表达情况，D正确。
9．AB 每道菜品用公筷和非公筷夹取的次数属于无关变量，应该保持一致，以排除无关变量对实验结果的干扰，A正确；根据实验数据分析，与使用非公筷相比，使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品间的交叉污染，B正确；实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏低，这是因为当两个或多个细胞连在一起生长时，计数只计为一个菌落，C错误；牛肉膏蛋白胨培养基需先调pH，经高压蒸汽灭菌后再倒平板，且不能等完全冷却后再倒平板，D错误。
10．ABD 外植体经过诱导发生脱分化过程，形成愈伤组织，其实质是基因的选择性表达，A正确；由于需要在液体培养基中培养，因此需要将愈伤组织分散成单个细胞后再进行悬浮培养，B正确；在悬浮培养过程中，蔗糖的作用之一是维持渗透压，所以需加入适量的蔗糖而不是大量的，C错误；悬浮培养可增加细胞与培养液的接触面积，有利于细胞生长，D正确。
11．ABD 图中的两个质粒，均为农杆菌的Ti质粒，都带有T－DNA序列，A正确；T－DNA序列可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上，对Ti质粒进行改造，可以将标记基因和目的基因转移到同源染色体上，B正确；经过杂交过程，获得了无筛选标记的转基因植株，该过程中发生了基因重组（非同源染色体的自由组合），C错误；结合图示可知，经过有性繁殖阶段的基因重组除去了转化植株的标记基因，D正确。
12．（1）蛋白酶K能催化病毒蛋白质水解 提高样本转运和检测阶段的安全性 防止样本RNA水解，影响检测结果的准确性 （2）逆转录酶 设计引物和探针的特异性 （3）特异性强、基因结构相对稳定（变异小） 排除因检测过程、试剂等因素引起的假阳性 （4）①保证样本中病毒RNA均能逆转录形成cDNA ②复性、延伸 （5）①②③⑤
解析：（1）分析题图，过程①中，RNA提取裂解液含有的蛋白酶K可水解病毒蛋白质，起到灭活病毒的作用。采样后迅速进行病毒灭活，可以防止样本在运输和检测阶段造成病毒泄漏，以提高样本转运和检测阶段的安全性。RNA酶能催化RNA水解，RNA提取裂解液中的RNA酶抑制剂可以防止病毒RNA被水解，进而影响检测结果的准确性。（2）过程②为逆转录，需要逆转录酶催化，说明加入的酶N是逆转录酶。采用实时荧光PCR技术检测病毒核酸，其关键是设计新冠病毒基因的特异性引物和依据检测的基因内部特异序列设计特异性探针。（3）在进行新冠病毒核酸检测时，选择检测的目标基因应具有特异性强、基因结构相对稳定（变异小）的特点。设置“阴性对照”的目的是排除因检测过程、检测试剂等因素引起的假阳性。（4）①表格中步骤a为逆转录，该步骤反应时间要足够长，其目的是使病毒RNA均能逆转录形成cDNA。②步骤d是实时荧光PCR中变性后的两个步骤：复性和延伸。（5）检测者处于感染初期，其样本中病毒载量少，由于检测的灵敏度限制，可能使检测结果出现假阴性，①符合题意；检测者感染时间较长，由于自身免疫，可能使样本中病毒载量很低，进而导致检测结果出现假阴性，②符合题意；样本采集位置不规范、样品稀释度过高等可造成样品中病毒载量低，进而导致检测结果出现假阴性，③符合题意，④与题意不符；若病毒发生了变异，可能会使试剂中引物不能与模板结合，不能获得PCR产物，也会使检测结果出现假阴性，⑤符合题意。
高效快速练（十六）
1．D 微生物培养基的组成成分通常含有碳源、氮源、水和无机盐等，对于自养微生物来说，可不加碳源，对于固氮微生物来说可不加氮源，A错误；用动物的体细胞进行细胞培养，需要用液体培养基，B错误；接种前要了解固体培养基是否被污染，可直接培养空白培养基来检测，C错误；使用过的微生物培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃，以防污染环境，D正确。
2．A 淀粉与碘液反应呈现蓝色，能分解淀粉的嗜热菌在培养基上生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，故周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，A正确；倒平板时培养皿和培养基都已灭菌处理，因此倒平板后不需要对培养皿再进行高压蒸汽灭菌，B错误；据图2可知，培养基上出现周围显蓝色的菌落，也出现了周围不显蓝色的菌落，因此淀粉可能不是图2所示固体培养基的唯一碳源，C错误；图1中①过程是梯度稀释，②过程是用稀释涂布平板法进行接种，因此甲、乙试管主要是对嗜热菌样品进行稀释，不具备选择作用，不属于选择培养基，D错误。
3．A 冰糖可以为微生物发酵提供碳源，紫外线照射可以杀死物体表面和空气中的微生物，A正确；从第一个月乙醇含量上升可以推出，隔天通气并没有抑制酵母菌的无氧呼吸，B错误；乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，不产生乙醇和CO2，C错误；第三个月密封发酵，而醋酸菌是好氧微生物，故这段时间醋酸菌发酵作用很弱，总酸量和乙醇量发生的变化与醋酸菌的发酵作用关系不大，D错误。
4．C 题干中的羔羊是利用动物细胞核移植技术培育的，羔羊的遗传物质几乎全部来自核供体母羊，所以性状主要与核供体母羊相同，A正确；组别①为体细胞核移植，②为胚胎细胞核移植，从数据可知胚胎细胞核移植的成功率高，可能因为胚胎细胞分化程度低，表达全能性相对容易，B正确；本实验涉及的技术有动物细胞培养、核移植、胚胎移植等，没有进行胚胎分割，C错误；将克隆技术应用于克隆人类一旦成功，将严重威胁人类社会的稳定，打破原有的人际关系，可能会引发一系列社会伦理、道德和法律问题，D正确。
5．C 图示引物与模板链的配对过程，为PCR循环中的复性环节，A错误；扩增时，dNTP添加到核酸链的3′端，同时形成磷酸二酯键，B错误，C正确；两个引物均不在模板DNA的端点，需在第三轮循环产物中才出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段（目的产物），D错误。
6．C 制备DNA片段甲时，所用dATP的α位磷酸基团中的磷必须是32P，这样才能使DNA片段甲带上32P标记，A错误；混合时，染色体样品中的DNA分子应解旋成单链，才能与DNA片段甲进行杂交，B错误；通过漂洗可去除未和目标基因杂交的DNA片段甲，C正确；题图所示检测过程，运用了核酸分子杂交技术，D错误。
7．B 培养胃癌细胞，需将含动物血清的培养基置于恒温培养箱中，A正确；癌细胞可以无限增殖，培养时不会出现接触抑制现象，B错误；根据题意可知，p53蛋白可以使细胞周期阻滞在G2/M期，说明p53可能是一种细胞周期抑制蛋白，EVO能通过诱导胃癌细胞中p53蛋白的表达抑制胃癌细胞的增殖，C正确；分析题意可知，Caspase­3可以诱导细胞凋亡，EVO能促进Caspase­3的表达，使胃癌细胞中Caspase­3的含量增加，最终起到治疗胃癌的作用，D正确。
8．B “猪猴嵌合体”仔猪培育的基础是动物细胞培养技术，动物细胞培养过程中会因接触抑制而停止分裂增殖，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理后继续培养，A正确；体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂分裂Ⅱ期时，才可以与获能精子完成受精作用，进而获得猪胚胎，B错误；胚胎干细胞具有发育的全能性，故从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能，C正确；据“猪—猴嵌合体”仔猪培育技术推测，将人的胚胎干细胞注入猪体内，可以制造出完全由人体细胞组成的器官，该研究能够解决器官移植的供体不足，避免器官移植中的排斥反应，D正确。
9．ABD 进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查，A错误；胚胎干细胞具有体积小、细胞核大、核仁明显和蛋白质合成旺盛等特点，B错误；胚胎分割时可以分离滋养层细胞进行DNA分析，鉴定性别，不可以分离内细胞团的细胞，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，D错误。
10．AC 为获得长满测试菌的琼脂平板，需要采用稀释涂布平板法，该方法需要使用图1中①酒精灯（操作需要在酒精灯火焰旁进行）、②涂布器（接种工具）和③培养基，A正确；图2中抑菌圈越大，说明该测试菌对相应抗生素的抗性越弱，B错误；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株，C正确；MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度，图2中抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的小，说明该测试菌对抗生素Ⅰ的抗性较抗生素Ⅲ强，所以抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC，D错误。
11．ABD 噬菌体DNA被细菌gRNA识别并被Cas9切割过程属于特定位点的切割，不能体现基因突变的不定向性（不一定是基因突变），A错误；gRNA为RNA，最多由4种核糖核苷酸组成，结合的目标DNA最多由4种脱氧核苷酸组成，故gRNA与目标DNA结合片段中最多含有8种核苷酸，B错误；Cas9切断目标DNA属于分子水平的改变，光学显微镜下观察不到，D错误。
12．（1）8号染色体的880 kb至903 kb区间 小 6 增添 （2）区间M促进下游报告基因的表达，且其作用的发挥与区间M的长度（或M的类型）和方向有关 （3）突变体区间M突变后，促进了GaFZ基因的表达，进而抑制了棉花短绒的发育，导致出现了光籽性状
解析：（1）据图分析，该PCR过程设计了8组连续的重叠引物对，这些引物扩增的片段都在野生型毛籽棉的880 kb至903 kb区间。电泳结果表明相对分子质量较大的扩增产物会更靠近点样处，与点样处的距离较小。观察电泳结果，8号染色体上的第6对引物扩增出来的片段不同，突变体比野生型更靠近点样处，说明突变体这个片段比野生型的相对分子质量大，应该是发生了碱基对的增添。（2）根据柱形图可知，空载体、野生型和突变体的LUC表达量/REN表达量不同，说明LUC表达量/REN表达量可以用来衡量M的表达水平。区间M的长度和方向不同，LUC表达量/REN表达量值不同，说明M可以促进下游基因的表达，其作用的发挥与区间M的长度和方向有关。（3）“基因GaFZ的表达会影响毛籽棉花短绒的发育，而且突变体GaFZ蛋白结构与野生型一致”，说明基因GaFZ可能不在区间M上，突变体区间M突变后，促进了下游基因，如GaFZ基因的表达，进而影响了棉花短绒的发育，导致出现了光籽性状。
步骤
温度
时间
循环
a.病毒cDNA合成
50 ℃
15 min
1
b．预变性
95 ℃
5 min
1
c．变性
95 ℃
5 s
d．？
60 ℃
40 s
45
实验组别序号
①
②
核供体细胞
6岁母羊的乳腺上皮细胞
发育到第9天的早期胚胎细胞
融合成功细胞数
277
385
早期发育成功胚胎数
29
90
移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数
1/13
14/27
出生并成活羔羊数
1(“多莉”)
4