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【生物】湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期期中考试试卷（B） （解析版）
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湖北省孝感市2018-2019学年高二下学期期中考试试卷（B）
一、选择题
1.在制果酒、果醋、泡菜时,发酵过程中对氧气的需求分别是（ ）
A. 无氧、有氧、无氧 B. 有氧、无氧、无氧
C. 无氧、有氧、有氧 D. 兼氧、无氧、有氧
【答案】A
【解析】
果酒制作的原理是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气、糖源都充足时，将果汁中的糖分分解成醋酸，在氧气充足、缺少糖源时，先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。综上分析， A项正确，B、C、D三项均错误。
2.下图是制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是( )
A. 挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗
B. 家庭酿酒中，要将葡萄汁装满整个发酵瓶
C. A过程后仅需提高一定的环境温度就能产生果醋
D. 为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种
【答案】D
【解析】
【分析】
本题主要考查果酒和果醋的制作，A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度。
【详解】A、实验过程中为防止杂菌污染，应该在冲洗之前去除腐烂的籽粒，冲洗之后再去除枝梗，错误。
B、参与果酒制作的微生物是酵母菌，前期为了使酵母菌快速生长繁殖，发酵瓶内需要留有充足的空间来进行有氧呼吸，错误。
C、A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度，错误。
D、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，正确。
故选D。
3.下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是（ ）
A. 多种微生物参与发酵，主要是乳酸杆菌
B. 加盐是为了调节水分，利于微生物生长
C. 加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
D. 封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作，要求考生识记参与腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握腐乳制作的原理及条件，能结合所学的知识准确答题．
【详解】腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵，主要是毛霉，A错误。
加盐是为了析出水分和抑制微生物生长，B错误；
加料酒主要是为了调节腐乳的风味，其次也能抑菌，C错误；
封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D正确．
【点睛】腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型．
腐乳发酵中杂菌的控制是制作流程的重要内容。
4.下列关于亚硝酸盐含量测定原理的描述正确的是
A. 重氮化→酸化→显色→比色 B. 重氮化→酸化→比色→显色
C. 酸化→重氮化→比色→显色 D. 酸化→重氮化→显色→比色
【答案】D
【解析】
【分析】本题考查亚硝酸盐含量测定原理。
【详解】盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同，D正确。
【点睛】本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。
5.豆腐“毛坯”装瓶时的操作，不正确的是（ ）
A. 动作要迅速小心
B. 加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封
C. 加人卤汤后，瓶口不用密封，因为其内有盐,不会再滋生其他微生物
D. 封瓶时, 最好将瓶口通过酒精灯火焰
【答案】C
【解析】
豆腐“毛坯”装瓶时，应迅速小心，以免豆腐块破碎或污染，A项正确；加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封，且最好将瓶口通过酒精灯火焰，以免污染，B项正确，C项错误，D项正确。
6.关于腐乳发酵的原理的叙述，不正确的是
A. 多种微生物参与了腐乳发酵
B. 装瓶后豆腐上的毛霉继续生长繁殖
C. 发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
D. 料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间
【答案】B
【解析】
多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等参与了腐乳发酵，其中起主要作用的是毛霉，A项正确；装瓶后豆腐上的毛霉受高浓度盐分、酒精抑制，不能继续生长繁殖，B项错误；发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，C项正确；料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间，D项正确。
7.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( )
A. 腐乳制作所需要的适宜温度最高
B. 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C. 使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D. 使用的菌种都具有细胞膜、核糖体、DNA和RNA
【答案】D
【解析】
【分析】
制作果酒的发酵过程需利用酵母菌的代谢活动，酵母菌是兼性厌氧菌，其在无氧条件下通过分解葡萄糖产生酒精和二氧化碳。此过程中，要将温度严格控制在18~25℃。
制作果醋的发酵过程需利用醋酸菌的代谢活动，醋酸菌是好氧菌，其在氧气和糖源均充足的情况下可将葡萄汁中的糖分解为醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌也可通过将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸的过程产生果醋。此过程中，要将温度严格控制在30~35℃。
制作腐乳的发酵过程需利用毛霉的代谢活动，毛霉是一种丝状真菌，其产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐即可转变成为风味独特的腐乳。毛霉的生长温度需控制在15~18℃。
【详解】A、制作果醋的过程所需温度最高，错误。
B、果醋的发酵仅涉及有氧发酵，故转入醋酸发酵后，要持续通气，错误。
C、参与果酒、果醋和腐乳制作相关的菌种分别为酵母菌、醋酸菌、毛霉，错误。
D、酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，正确。
故选D。
8. 下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A. 将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水（盐和清水的质量比为4：1）混匀装瓶
B. 发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水
C. 在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀
D. 随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
【答案】B
【解析】
试题分析：阅读题干可知，本题是泡菜在制作过程，先梳理相关知识点，然后结合选项描述分析判断．
解：A、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，且盐与水比例为1：4；A错误．
B、由于乳酸菌的严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水；B正确．
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；C错误．
D、随发酵进行，亚硝酸盐含量先逐渐增加，后又逐渐降低，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定；D错误．
故应选B．
考点：制作泡莱；用比色法测定亚硝酸盐含量的变化．
9. 制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是( )。
A. 先减少后增加 B. 先增加后减少
C. 逐渐增加 D. 逐渐减少
【答案】B
【解析】
试题分析：泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐被还原为亚硝酸盐，但随腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，使亚硝酸盐含量逐渐下降，所以B正确；A、C、D错误。
考点：制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量变化
【名师点睛】泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化情况分析
发酵时期
乳酸菌
乳酸
亚硝酸盐
发酵初期
少（有氧气，乳酸菌活动受到抑制）
少
增加（硝酸盐还原菌作用）
发酵中期
最多（乳酸抑制其他菌活动）
积累增多，pH下降
下降（硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解）
发酵后期
减少（乳酸积累，pH下降，抑制其活动）
继续增多，pH继续下降
下降至相对稳定（硝酸盐还原菌被完全抑制）
10.在用乳酸菌制作泡菜中泡菜腐烂，下列原因中不正确的是（ ）
A. 罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖
B. 罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
C. 罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖
D. 罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖
【答案】A
【解析】
【分析】
泡菜坛盖后用水封口，其目的是不让空气进入坛内而保持坛内的缺氧环境。因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，才能把蔬菜中的有机物分解为乳酸。罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂。
【详解】A、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口密闭缺氧，有利于乳酸菌的生长繁殖，错误。
B、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口封闭不严，氧气会抑制乳酸菌的生长繁殖，正确。
C、罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖，是泡菜发酵所需要的条件，正确。
D、罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂，正确。
故选A。
11.取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
组别
培养基
各平板的菌落数
1
2
3
Ⅰ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素
169
178
193
Ⅲ
琼脂、NH4NO3、维生素
0
0
1
A. Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B. Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C. 三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D. 三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】
考点是微生物的培养，涉及灭菌方法、接种方法和实验结果的分析，属于基本知识和基本方法的考查，
【详解】Ⅰ组和Ⅱ组培养基成分的差异是有无维生素，结果可以说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖，A正确.
Ⅱ组和Ⅲ组的差异是有无葡萄糖，结果说明没有葡萄糖大肠杆菌不能正常生长，B正确.
稀释涂布平板法培养大肠杆菌便于菌落计数，C正确.
对培养基加热到62℃不能彻底灭菌，应采用高压蒸汽灭菌，D错误.
12.在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ）
A. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长
B. 可以充分利用培养基中的营养物质
C. 可以增加纤维素分解菌的浓度
D. 可获得高纯度的纤维素分解菌
【答案】C
【解析】
【分析】
对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基，其中的纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌可以很好地生存，其他微生物不能生存，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用，获得大量的菌体。
【详解】A、纤维素分解菌在液体和固体培养基上都可以生长，错误。
B、使用液体培养基是为了使纤维素分解菌快速生长繁殖，增加纤维素分解菌的浓度，错误。
C、固体培养基的容量有限，而使用液体培养基空间大，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，因此可以增加纤维素分解菌的浓度，正确。
D、筛选需要用固体培养基，错误。
故选C。
【点睛】考查筛选可以降解某种物质的菌种时，有以下考点：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；
实验步骤：土壤取样、梯度稀释、梯度稀释、涂布平板、挑选产生中心透明圈的菌落。
13.灭菌的标准是（ ）
A. 杀死所有的微生物
B. 杀死所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
C. 杀死所有的病原微生物
D. 使病原菌不生长
【答案】B
【解析】
本题考查灭菌的概念，要求考生理解灭菌与消毒的区别，明确微生物培养时的灭菌操作。
微生物培养中，灭菌是指实验强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，所以B正确，ACD错误。
14.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是
A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
【答案】A
【解析】
试题分析：能合成脲酶的细菌才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。筛选出能够分解尿素的细菌，就必须是在以尿素为唯一氮源的培养基上，而且需要有碳源，故A项正确；B和D的配方中没有尿素，当然不能筛选出能够分解尿素的细菌，B、D项错误；C中有尿素，且为唯一氮源，但配方中缺少碳源，细菌不能生长（细菌不能利用尿素中的碳），故C项错误。
考点：本题考查微生物的分离和培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
15.在恒温箱培养微生物时，平板要倒罝的主要原因是
A. 利于通气 B. 利用微生物的快速繁殖
C. 防止菌落粘连影响观察 D. 防止皿盖内的冷凝水滴入培养基
【答案】D
【解析】
本题考查微生物培养，要求考生掌握倒平板的操作技巧，明确倒平板时要防止杂菌污染。
恒温箱培养微生物时，为了防止皿盖内的冷凝水滴入培养基造成杂菌污染，平板要倒罝放入，D正确；而不是利于通气或利用微生物的快速繁殖或防止菌落粘连影响观察，A、B、C错误。
16.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是
A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D. 平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作
【答案】D
【解析】
实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A项正确；接种环、接种针等金属用具，可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B项正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C项正确；平板划线接种时，应在酒精灯火焰旁接种，D项错误。
17.在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是
A. 酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
B. 酒精消毒、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
C. 紫外线消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
D. 酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、干热灭菌、酒精消毒
【答案】A
【解析】
消毒是使用较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），适用于实验操作的空间、操作者的衣服和手、食品等；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，适用于微生物的培养器皿、接种用具和培养基等。据此可知：在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒，A项正确，B、C、D三项均错误。
18. 在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A. 乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B. 分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C. 分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D. 固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
【答案】C
【解析】
在以尿素作为唯一氮源的培养基上分解尿素的细菌可以生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，但不会抑制霉菌生长；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，但不会抑制放线菌生长。
【考点定位】本题主要考查微生物的分离。
19.含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是（ ）
A. 抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
B. 抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C. 抗生素能够抑制酵母菌的生长
D. 抗生素在酸性环境中会被分解破坏
【答案】B
【解析】
【分析】
抗生素是指微生物在代谢过程中产生的，能抑制或杀灭其他种类微生物的化学物质。抗生素的作用机制是通过干扰细菌等病原微生物的代谢过程而影响其结构和生理功能，从而达到抑制和杀灭的目的。抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质。
【详解】A、抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质，不会与乳酸发生中和反应，错误。
B、乳酸菌属于细菌，对抗生素敏感，抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长，所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，正确。
C、细菌对抗生素敏感，真菌对抗生素不敏感，且酸奶的制作与酵母菌无关，错误。
D、含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏，错误。
故选B。
20.下列环境中，纤维素分解菌含量最高的是（ ）
A. 热带雨林中的土壤 B. 寒带雨林中的土壤
C. 花盆中的土壤 D. 荒漠地区的土壤
【答案】A
【解析】
【分析】
纤维素分解菌大都生活在富含纤维素的环境中，因此采集土壤时，可以选择富含纤维素的环境。
【详解】生物与环境是相互依存的，纤维素含量高的地区，土壤中纤维素分解菌含量就多。相比较而言，在这四种环境中，热带雨林中残枝败叶最丰富，其土壤中富含纤维素。
故选A。
21. 下列关于植物组织培养的表述，错误的是
A. 外植体可以来自于植物的任何细胞
B. 培养应在无菌条件下进行
C. 以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D. 不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
【答案】A
【解析】
A．体细胞保持亲本的遗传性状，如花药形成的是单倍体，最好用分生区细胞形成脱毒苗；错误。
B．培养应在无菌条件下进行，防止微生物消耗营养物质，产生有毒物质危害培养物的生长；正确。
C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株；正确。
D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化；正确。
22. 植物组织培养是指（ ）
A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织
B. 愈伤组织培育成植株
C. 离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体
D. 愈伤组织形成高度液泡化组织
【答案】C
【解析】
试题分析：植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体的过程，C正确，A、B、D错误。
考点：植物组织培养概念
23. 下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B. 在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照
C. 接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给适宜的温度和光照即可
D. 移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
【答案】C
【解析】
试题分析：A．容易无性繁殖的植物其细胞全能性较高，容易组织培养，A正确；B．在初期，菊花组织培养过程每天要用日光灯照射12小时；月季初期培养不需要光照，幼小植株形成后才需要光照，B正确；C．一般情况下，接种后应暗培养，有利脱分化产生愈伤组织，光照下会分化产生维管组织，不利愈伤组织的产生，C错误；D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日，目的是提高适应能力，D正确。
考点：植物的组织培养
24.植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成？（ ）
A. 先使用生长素，后使用细胞分裂素 B. 同时使用
C. 先使用细胞分裂素，后使用生长素 D. 都不使用
【答案】B
【解析】
【分析】
生长素与细胞分裂素的作用和使用顺序：
【详解】胚状体的胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，已经出现了细胞分化，在植物组织培养过程中，同时使用生长素和细胞分裂素可以使分化频率提高，因此更有利于胚状体的形成。
故选B。
25.植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致。下列叙述正确的是 （ ）
A. 菊花茎段组织培养中，需对外植体进行灭菌处理
B. 菊花茎段组织培养中，必须添加植物激素
C. 月季花药培养中，一般从略微开放的花中选择单核期花药
D. 选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期
【答案】D
【解析】
植物组织培养时需要对外植体进行消毒处理，A错误；植物组织培养中可以添加人工合成的化学物质，B错误；月季花药的培养，一般选择单核靠边期的花药进行培养，其成功率最高，C错误；选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，D正确。
二、非选择题
26.请根据腐乳制作流程图回答相关问题：
（1）制腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是__________；豆腐含水量______最适，含水量不能过高的原因是______________________________。
（2）图中A是______，该步骤中温度应控制在______℃；B是______。
（3）腐乳制作过程中，能够抑制微生物生长的物质有__________________等。
（4）若你完成了腐乳制作，则可以从______________等方面评价乳腐的质量。
【答案】 (1). 消毒 (2). 70% (3). 不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形 (4). 让豆腐上长出毛霉 (5). 15-18 (6). 加卤汤装瓶 (7). 食盐、卤汤中的酒、香辛料等 (8). 色泽、口味、块形等
【解析】
【分析】
（1）参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
（3）用盐腌制的目的：（1）盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；（2）加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；（3）有调味作用，酒精能抑制微生物的生长，同时使得腐乳具有独特的香味。香辛料能调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
【详解】（1）制作腐乳时，为防止杂菌污染，需要用沸水消毒；控制发酵豆腐的含水量在70%左右，这个含水量既能满足毛毒对水的需求量，又能使豆腐透气，满足毛霉对氧的需求，若含水量过高，不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形。
（2）腐乳制作的流程为：制腐乳坯→让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，故图中A为让豆腐上长出毛霉，该步骤中温度应控制在16℃（15-18℃）左右，并保持一定的湿度以利于毛霉生长；B是加卤汤装瓶。
（3））在腐乳制作过程中，抑制微生物生长的物质有盐、酒、香辛料等。
（4）若完成了腐乳制作，可从色泽、口味、块形等方面评价腐乳的质量。
【点睛】本题考查了腐乳的制作流程，其中的制作原理、制作流程和注意事项需要考生识记，牢记发酵所需的菌种、发酵条件、培养液的成分及作用。
27.某酒厂由于操作不当生产了一批酸败的果酒。如何利用它来酿制果醋，把它变废为宝？
（1）酿制前用60-70℃温度杀菌20min，目的是_______________。
（2）接种醋酸菌，在发酵过程中，需对发酵液补充足够的空气，原因是__________
（3）发酵过程中温度控制在________℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是______________________________。
【答案】 (1). 杀灭杂菌 (2). 醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动 (3). 30-35 (4). 营养物质的消耗，代谢产物的积累
【解析】
【分析】
1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】（1）酿制前为防止杂菌污染，需要用60-70℃温度杀菌20min。
（2）接种醋酸菌后需对发酵液补充足够的空气，是因为醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动。
（3）果醋的发酵温度较高，发酵过程中温度控制在30-35℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是营养物质的消耗，代谢产物的积累。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸为酸性、呼吸作用产生的CO2也使pH降低。
【点睛】本题考查了果酒和果醋制作过程的区别和联系，考生需要识记其中的制作流程、制作原理、制作流程和注意事项需要考生识记，牢记发酵所需的菌种、发酵条件、培养液的成分及作用。尤其需要注意发酵是否需要持续通氧，掌握发酵温度。
28.研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就“如何从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题：
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和_____________ 酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是__________，对该接种工具采用_________灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与______和______发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。______(填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂。
（4）如果观察到产生________的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行______________________的实验。
【答案】 (1). 葡萄糖苷 (2). 接种环 (3). 灼烧 (4). 纤维二糖 (5). 葡萄糖 (6). 第一种 (7). 透明圈 (8). 发酵产纤维素酶
【解析】
【分析】
土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；
纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用；
在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。
【详解】（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。第二种方法：产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，故两种方法各有缺点。
（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
【点睛】本题考查微生物的培养、分离和鉴定的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。考查筛选可以降解某种物质的菌种时，有以下考点：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；
实验步骤：土壤取样、梯度稀释、梯度稀释、涂布平板、挑选产生中心透明圈的菌落。
29.大肠杆菌是一种兼性厌氧菌。在无氧条件下发酵，能将葡萄糖转换成多种有机酸并生成二氧化碳。某研究机构利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。
回答下列相关问题：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为____________________。
（2）图乙滤膜的孔径应______（“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。
（3）制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是______________，待培养基冷却至_______℃左右时进行倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入______________染料，该研究机构通过统计_______色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值____________（“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是_____________________。
【答案】（选修一，15分）
（1）蓝色→绿色→黄色
（2）小于（1分）
（3）高压蒸汽灭菌 50
（4）伊红美蓝 黑色 偏低 两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
【解析】
（1）大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
（2）图乙滤膜的孔径应小于大肠杆菌，否则大肠杆菌会漏掉。
（3）牛肉膏蛋白胨固体培养基一般采取高压蒸汽灭菌法，灭菌后一定要等冷却到50℃左右时才能倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝染料，可以将大肠杆菌菌落染成黑色。由于多个菌落连在一起时会出现重叠现象，只计算一个，所以统计值比真实值要小。
【考点定位】微生物的培养、计数
30.基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如下：
小麦的花粉细胞①—→愈伤组织②—→丛芽③—→植株④
（1）发育成的植株④称为_______________，基因型有___________________。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是______________，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是______________。
（3）若得到可育的植株，需要用_________（化学试剂）对③进行处理，所获得的基因型可能是______________________________________。
（4）①→②过程需要的条件有（ ）（多选）
A.营养 B.激素 C.光照 D.pH
【答案】 (1). 单倍体 (2). AB、Ab、aB、ab (3). 减数分裂 (4). 有丝分裂 (5). 秋水仙素 (6). AABB、AAbb、aaBB、aabb (7). ABD
【解析】
【分析】
分析图示，表示植物组织培养过程，其中小麦的花粉细胞①→愈伤组织②的过程称为脱分化，愈伤组织②→丛芽③的程称为再分化，丛芽③→植株④的程称为丛芽进一步生长发育为植株的过程。
【详解】（1）花药细胞直接发育的个体叫单倍体，故植株④叫做单倍体，基因型有Ab、aB、AB、ab，4种。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是减数分裂，经四分体时期，依次又经历单核居中期、单核靠边期，最终发育成花粉粒（双核期）。花粉发育成为植物体，只有有丝分裂过程。
（3）单倍体植物不育，若要得到可育植株，需要用秋水仙素对③进行处理，使染色体加倍可以进行正常的减数分裂，所得的植株基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb。
（4）分析图示，月季的花药细胞①→愈伤组织②的程称为脱分化，不需要光照，需要的条件有A营养、B激素、D pH，再分化过程中才需要光。
【点睛】本题的考点是植物的组织培养，通过花粉培养产生花粉植株的途径一般有两种：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另外一种是花粉在诱导基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株；这两种途径之间没有绝对界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度比。
一、选择题
1.在制果酒、果醋、泡菜时,发酵过程中对氧气的需求分别是（ ）
A. 无氧、有氧、无氧 B. 有氧、无氧、无氧
C. 无氧、有氧、有氧 D. 兼氧、无氧、有氧
【答案】A
【解析】
果酒制作的原理是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精；果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气、糖源都充足时，将果汁中的糖分分解成醋酸，在氧气充足、缺少糖源时，先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；泡菜发酵的实验原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。综上分析， A项正确，B、C、D三项均错误。
2.下图是制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是( )
A. 挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗
B. 家庭酿酒中，要将葡萄汁装满整个发酵瓶
C. A过程后仅需提高一定的环境温度就能产生果醋
D. 为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种
【答案】D
【解析】
【分析】
本题主要考查果酒和果醋的制作，A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度。
【详解】A、实验过程中为防止杂菌污染，应该在冲洗之前去除腐烂的籽粒，冲洗之后再去除枝梗，错误。
B、参与果酒制作的微生物是酵母菌，前期为了使酵母菌快速生长繁殖，发酵瓶内需要留有充足的空间来进行有氧呼吸，错误。
C、A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度，错误。
D、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，正确。
故选D。
3.下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是（ ）
A. 多种微生物参与发酵，主要是乳酸杆菌
B. 加盐是为了调节水分，利于微生物生长
C. 加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
D. 封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作，要求考生识记参与腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握腐乳制作的原理及条件，能结合所学的知识准确答题．
【详解】腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵，主要是毛霉，A错误。
加盐是为了析出水分和抑制微生物生长，B错误；
加料酒主要是为了调节腐乳的风味，其次也能抑菌，C错误；
封瓶时，需要将瓶口通过酒精灯的火焰，这样可以防止杂菌污染，D正确．
【点睛】腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型．
腐乳发酵中杂菌的控制是制作流程的重要内容。
4.下列关于亚硝酸盐含量测定原理的描述正确的是
A. 重氮化→酸化→显色→比色 B. 重氮化→酸化→比色→显色
C. 酸化→重氮化→比色→显色 D. 酸化→重氮化→显色→比色
【答案】D
【解析】
【分析】本题考查亚硝酸盐含量测定原理。
【详解】盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同，D正确。
【点睛】本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。
5.豆腐“毛坯”装瓶时的操作，不正确的是（ ）
A. 动作要迅速小心
B. 加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封
C. 加人卤汤后，瓶口不用密封，因为其内有盐,不会再滋生其他微生物
D. 封瓶时, 最好将瓶口通过酒精灯火焰
【答案】C
【解析】
豆腐“毛坯”装瓶时，应迅速小心，以免豆腐块破碎或污染，A项正确；加人卤汤后，要用胶条将瓶口密封，且最好将瓶口通过酒精灯火焰，以免污染，B项正确，C项错误，D项正确。
6.关于腐乳发酵的原理的叙述，不正确的是
A. 多种微生物参与了腐乳发酵
B. 装瓶后豆腐上的毛霉继续生长繁殖
C. 发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
D. 料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间
【答案】B
【解析】
多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等参与了腐乳发酵，其中起主要作用的是毛霉，A项正确；装瓶后豆腐上的毛霉受高浓度盐分、酒精抑制，不能继续生长繁殖，B项错误；发酵过程中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，C项正确；料酒可以影响腐乳的风味和成熟的时间，D项正确。
7.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( )
A. 腐乳制作所需要的适宜温度最高
B. 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C. 使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D. 使用的菌种都具有细胞膜、核糖体、DNA和RNA
【答案】D
【解析】
【分析】
制作果酒的发酵过程需利用酵母菌的代谢活动，酵母菌是兼性厌氧菌，其在无氧条件下通过分解葡萄糖产生酒精和二氧化碳。此过程中，要将温度严格控制在18~25℃。
制作果醋的发酵过程需利用醋酸菌的代谢活动，醋酸菌是好氧菌，其在氧气和糖源均充足的情况下可将葡萄汁中的糖分解为醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌也可通过将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸的过程产生果醋。此过程中，要将温度严格控制在30~35℃。
制作腐乳的发酵过程需利用毛霉的代谢活动，毛霉是一种丝状真菌，其产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐即可转变成为风味独特的腐乳。毛霉的生长温度需控制在15~18℃。
【详解】A、制作果醋的过程所需温度最高，错误。
B、果醋的发酵仅涉及有氧发酵，故转入醋酸发酵后，要持续通气，错误。
C、参与果酒、果醋和腐乳制作相关的菌种分别为酵母菌、醋酸菌、毛霉，错误。
D、酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，正确。
故选D。
8. 下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中，正确的是（ ）
A. 将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水（盐和清水的质量比为4：1）混匀装瓶
B. 发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水
C. 在酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀
D. 随发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
【答案】B
【解析】
试题分析：阅读题干可知，本题是泡菜在制作过程，先梳理相关知识点，然后结合选项描述分析判断．
解：A、泡菜制作中应先加蔬菜，再加盐水，且盐与水比例为1：4；A错误．
B、由于乳酸菌的严格厌氧的，因此发酵过程始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水；B正确．
C、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；C错误．
D、随发酵进行，亚硝酸盐含量先逐渐增加，后又逐渐降低，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定；D错误．
故应选B．
考点：制作泡莱；用比色法测定亚硝酸盐含量的变化．
9. 制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是( )。
A. 先减少后增加 B. 先增加后减少
C. 逐渐增加 D. 逐渐减少
【答案】B
【解析】
试题分析：泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐被还原为亚硝酸盐，但随腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，使亚硝酸盐含量逐渐下降，所以B正确；A、C、D错误。
考点：制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量变化
【名师点睛】泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化情况分析
发酵时期
乳酸菌
乳酸
亚硝酸盐
发酵初期
少（有氧气，乳酸菌活动受到抑制）
少
增加（硝酸盐还原菌作用）
发酵中期
最多（乳酸抑制其他菌活动）
积累增多，pH下降
下降（硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解）
发酵后期
减少（乳酸积累，pH下降，抑制其活动）
继续增多，pH继续下降
下降至相对稳定（硝酸盐还原菌被完全抑制）
10.在用乳酸菌制作泡菜中泡菜腐烂，下列原因中不正确的是（ ）
A. 罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖
B. 罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
C. 罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖
D. 罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖
【答案】A
【解析】
【分析】
泡菜坛盖后用水封口，其目的是不让空气进入坛内而保持坛内的缺氧环境。因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，才能把蔬菜中的有机物分解为乳酸。罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂。
【详解】A、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口密闭缺氧，有利于乳酸菌的生长繁殖，错误。
B、因为乳酸菌只有在缺氧或无氧的环境下生存，罐口封闭不严，氧气会抑制乳酸菌的生长繁殖，正确。
C、罐口封闭缺氧，抑制了其他好氧菌的生长和繁殖，是泡菜发酵所需要的条件，正确。
D、罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖，而使泡菜腐烂，正确。
故选A。
11.取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是（ ）
组别
培养基
各平板的菌落数
1
2
3
Ⅰ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6、NH4NO3、维生素
169
178
193
Ⅲ
琼脂、NH4NO3、维生素
0
0
1
A. Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B. Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C. 三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D. 三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】
考点是微生物的培养，涉及灭菌方法、接种方法和实验结果的分析，属于基本知识和基本方法的考查，
【详解】Ⅰ组和Ⅱ组培养基成分的差异是有无维生素，结果可以说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖，A正确.
Ⅱ组和Ⅲ组的差异是有无葡萄糖，结果说明没有葡萄糖大肠杆菌不能正常生长，B正确.
稀释涂布平板法培养大肠杆菌便于菌落计数，C正确.
对培养基加热到62℃不能彻底灭菌，应采用高压蒸汽灭菌，D错误.
12.在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（ ）
A. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长
B. 可以充分利用培养基中的营养物质
C. 可以增加纤维素分解菌的浓度
D. 可获得高纯度的纤维素分解菌
【答案】C
【解析】
【分析】
对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基，其中的纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌可以很好地生存，其他微生物不能生存，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用，获得大量的菌体。
【详解】A、纤维素分解菌在液体和固体培养基上都可以生长，错误。
B、使用液体培养基是为了使纤维素分解菌快速生长繁殖，增加纤维素分解菌的浓度，错误。
C、固体培养基的容量有限，而使用液体培养基空间大，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，因此可以增加纤维素分解菌的浓度，正确。
D、筛选需要用固体培养基，错误。
故选C。
【点睛】考查筛选可以降解某种物质的菌种时，有以下考点：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；
实验步骤：土壤取样、梯度稀释、梯度稀释、涂布平板、挑选产生中心透明圈的菌落。
13.灭菌的标准是（ ）
A. 杀死所有的微生物
B. 杀死所有的微生物的细胞、芽孢和孢子
C. 杀死所有的病原微生物
D. 使病原菌不生长
【答案】B
【解析】
本题考查灭菌的概念，要求考生理解灭菌与消毒的区别，明确微生物培养时的灭菌操作。
微生物培养中，灭菌是指实验强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，所以B正确，ACD错误。
14.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是
A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
【答案】A
【解析】
试题分析：能合成脲酶的细菌才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。筛选出能够分解尿素的细菌，就必须是在以尿素为唯一氮源的培养基上，而且需要有碳源，故A项正确；B和D的配方中没有尿素，当然不能筛选出能够分解尿素的细菌，B、D项错误；C中有尿素，且为唯一氮源，但配方中缺少碳源，细菌不能生长（细菌不能利用尿素中的碳），故C项错误。
考点：本题考查微生物的分离和培养的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
15.在恒温箱培养微生物时，平板要倒罝的主要原因是
A. 利于通气 B. 利用微生物的快速繁殖
C. 防止菌落粘连影响观察 D. 防止皿盖内的冷凝水滴入培养基
【答案】D
【解析】
本题考查微生物培养，要求考生掌握倒平板的操作技巧，明确倒平板时要防止杂菌污染。
恒温箱培养微生物时，为了防止皿盖内的冷凝水滴入培养基造成杂菌污染，平板要倒罝放入，D正确；而不是利于通气或利用微生物的快速繁殖或防止菌落粘连影响观察，A、B、C错误。
16.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是
A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌
C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D. 平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作
【答案】D
【解析】
实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A项正确；接种环、接种针等金属用具，可直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B项正确；在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C项正确；平板划线接种时，应在酒精灯火焰旁接种，D项错误。
17.在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是
A. 酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
B. 酒精消毒、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
C. 紫外线消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒
D. 酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、干热灭菌、酒精消毒
【答案】A
【解析】
消毒是使用较为温和的理化方法，杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），适用于实验操作的空间、操作者的衣服和手、食品等；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，适用于微生物的培养器皿、接种用具和培养基等。据此可知：在微生物的培养过程中对操作者的双手、培养基、培养皿、接种环、超净工作台的处理方法依次是酒精消毒、高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、紫外线消毒，A项正确，B、C、D三项均错误。
18. 在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A. 乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B. 分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C. 分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D. 固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
【答案】C
【解析】
在以尿素作为唯一氮源的培养基上分解尿素的细菌可以生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，但不会抑制霉菌生长；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，但不会抑制放线菌生长。
【考点定位】本题主要考查微生物的分离。
19.含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是（ ）
A. 抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应
B. 抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长
C. 抗生素能够抑制酵母菌的生长
D. 抗生素在酸性环境中会被分解破坏
【答案】B
【解析】
【分析】
抗生素是指微生物在代谢过程中产生的，能抑制或杀灭其他种类微生物的化学物质。抗生素的作用机制是通过干扰细菌等病原微生物的代谢过程而影响其结构和生理功能，从而达到抑制和杀灭的目的。抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质。
【详解】A、抗生素多是一些带有环状碳链的化学物质，不会与乳酸发生中和反应，错误。
B、乳酸菌属于细菌，对抗生素敏感，抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长，所以含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，正确。
C、细菌对抗生素敏感，真菌对抗生素不敏感，且酸奶的制作与酵母菌无关，错误。
D、含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶不是因为抗生素在酸性环境中会被分解破坏，错误。
故选B。
20.下列环境中，纤维素分解菌含量最高的是（ ）
A. 热带雨林中的土壤 B. 寒带雨林中的土壤
C. 花盆中的土壤 D. 荒漠地区的土壤
【答案】A
【解析】
【分析】
纤维素分解菌大都生活在富含纤维素的环境中，因此采集土壤时，可以选择富含纤维素的环境。
【详解】生物与环境是相互依存的，纤维素含量高的地区，土壤中纤维素分解菌含量就多。相比较而言，在这四种环境中，热带雨林中残枝败叶最丰富，其土壤中富含纤维素。
故选A。
21. 下列关于植物组织培养的表述，错误的是
A. 外植体可以来自于植物的任何细胞
B. 培养应在无菌条件下进行
C. 以花粉作为外植体可得到单倍体植株
D. 不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
【答案】A
【解析】
A．体细胞保持亲本的遗传性状，如花药形成的是单倍体，最好用分生区细胞形成脱毒苗；错误。
B．培养应在无菌条件下进行，防止微生物消耗营养物质，产生有毒物质危害培养物的生长；正确。
C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株；正确。
D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化；正确。
22. 植物组织培养是指（ ）
A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织
B. 愈伤组织培育成植株
C. 离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体
D. 愈伤组织形成高度液泡化组织
【答案】C
【解析】
试题分析：植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体的过程，C正确，A、B、D错误。
考点：植物组织培养概念
23. 下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养
B. 在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照
C. 接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给适宜的温度和光照即可
D. 移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日
【答案】C
【解析】
试题分析：A．容易无性繁殖的植物其细胞全能性较高，容易组织培养，A正确；B．在初期，菊花组织培养过程每天要用日光灯照射12小时；月季初期培养不需要光照，幼小植株形成后才需要光照，B正确；C．一般情况下，接种后应暗培养，有利脱分化产生愈伤组织，光照下会分化产生维管组织，不利愈伤组织的产生，C错误；D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日，目的是提高适应能力，D正确。
考点：植物的组织培养
24.植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成？（ ）
A. 先使用生长素，后使用细胞分裂素 B. 同时使用
C. 先使用细胞分裂素，后使用生长素 D. 都不使用
【答案】B
【解析】
【分析】
生长素与细胞分裂素的作用和使用顺序：
【详解】胚状体的胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，已经出现了细胞分化，在植物组织培养过程中，同时使用生长素和细胞分裂素可以使分化频率提高，因此更有利于胚状体的形成。
故选B。
25.植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致。下列叙述正确的是 （ ）
A. 菊花茎段组织培养中，需对外植体进行灭菌处理
B. 菊花茎段组织培养中，必须添加植物激素
C. 月季花药培养中，一般从略微开放的花中选择单核期花药
D. 选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期
【答案】D
【解析】
植物组织培养时需要对外植体进行消毒处理，A错误；植物组织培养中可以添加人工合成的化学物质，B错误；月季花药的培养，一般选择单核靠边期的花药进行培养，其成功率最高，C错误；选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，D正确。
二、非选择题
26.请根据腐乳制作流程图回答相关问题：
（1）制腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是__________；豆腐含水量______最适，含水量不能过高的原因是______________________________。
（2）图中A是______，该步骤中温度应控制在______℃；B是______。
（3）腐乳制作过程中，能够抑制微生物生长的物质有__________________等。
（4）若你完成了腐乳制作，则可以从______________等方面评价乳腐的质量。
【答案】 (1). 消毒 (2). 70% (3). 不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形 (4). 让豆腐上长出毛霉 (5). 15-18 (6). 加卤汤装瓶 (7). 食盐、卤汤中的酒、香辛料等 (8). 色泽、口味、块形等
【解析】
【分析】
（1）参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。
（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
（3）用盐腌制的目的：（1）盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；（2）加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；（3）有调味作用，酒精能抑制微生物的生长，同时使得腐乳具有独特的香味。香辛料能调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。
【详解】（1）制作腐乳时，为防止杂菌污染，需要用沸水消毒；控制发酵豆腐的含水量在70%左右，这个含水量既能满足毛毒对水的需求量，又能使豆腐透气，满足毛霉对氧的需求，若含水量过高，不利于毛霉的生长，制作的腐乳也不易成形。
（2）腐乳制作的流程为：制腐乳坯→让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，故图中A为让豆腐上长出毛霉，该步骤中温度应控制在16℃（15-18℃）左右，并保持一定的湿度以利于毛霉生长；B是加卤汤装瓶。
（3））在腐乳制作过程中，抑制微生物生长的物质有盐、酒、香辛料等。
（4）若完成了腐乳制作，可从色泽、口味、块形等方面评价腐乳的质量。
【点睛】本题考查了腐乳的制作流程，其中的制作原理、制作流程和注意事项需要考生识记，牢记发酵所需的菌种、发酵条件、培养液的成分及作用。
27.某酒厂由于操作不当生产了一批酸败的果酒。如何利用它来酿制果醋，把它变废为宝？
（1）酿制前用60-70℃温度杀菌20min，目的是_______________。
（2）接种醋酸菌，在发酵过程中，需对发酵液补充足够的空气，原因是__________
（3）发酵过程中温度控制在________℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是______________________________。
【答案】 (1). 杀灭杂菌 (2). 醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动 (3). 30-35 (4). 营养物质的消耗，代谢产物的积累
【解析】
【分析】
1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】（1）酿制前为防止杂菌污染，需要用60-70℃温度杀菌20min。
（2）接种醋酸菌后需对发酵液补充足够的空气，是因为醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动。
（3）果醋的发酵温度较高，发酵过程中温度控制在30-35℃。
（4）发酵过程中，pH变化的原因是营养物质的消耗，代谢产物的积累。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸为酸性、呼吸作用产生的CO2也使pH降低。
【点睛】本题考查了果酒和果醋制作过程的区别和联系，考生需要识记其中的制作流程、制作原理、制作流程和注意事项需要考生识记，牢记发酵所需的菌种、发酵条件、培养液的成分及作用。尤其需要注意发酵是否需要持续通氧，掌握发酵温度。
28.研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就“如何从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题：
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和_____________ 酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是__________，对该接种工具采用_________灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与______和______发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。______(填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混杂。
（4）如果观察到产生________的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行______________________的实验。
【答案】 (1). 葡萄糖苷 (2). 接种环 (3). 灼烧 (4). 纤维二糖 (5). 葡萄糖 (6). 第一种 (7). 透明圈 (8). 发酵产纤维素酶
【解析】
【分析】
土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；
纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用；
在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。
【详解】（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法会使菌落之间发生混杂。第二种方法：产生淀粉酶的微生物也产生模糊的透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，故两种方法各有缺点。
（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
【点睛】本题考查微生物的培养、分离和鉴定的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。考查筛选可以降解某种物质的菌种时，有以下考点：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；
实验步骤：土壤取样、梯度稀释、梯度稀释、涂布平板、挑选产生中心透明圈的菌落。
29.大肠杆菌是一种兼性厌氧菌。在无氧条件下发酵，能将葡萄糖转换成多种有机酸并生成二氧化碳。某研究机构利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。
回答下列相关问题：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装入图甲所示的试管中，再将污水水样滴加进去震荡摇匀，适宜条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为____________________。
（2）图乙滤膜的孔径应______（“大于”、“小于”、“等于”）大肠杆菌。
（3）制备图乙中牛肉膏蛋白胨固体培养基时，对培养基的灭菌方法是______________，待培养基冷却至_______℃左右时进行倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入______________染料，该研究机构通过统计_______色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际值____________（“偏高”、“偏低”或“相等”），理由是_____________________。
【答案】（选修一，15分）
（1）蓝色→绿色→黄色
（2）小于（1分）
（3）高压蒸汽灭菌 50
（4）伊红美蓝 黑色 偏低 两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
【解析】
（1）大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
（2）图乙滤膜的孔径应小于大肠杆菌，否则大肠杆菌会漏掉。
（3）牛肉膏蛋白胨固体培养基一般采取高压蒸汽灭菌法，灭菌后一定要等冷却到50℃左右时才能倒平板。
（4）为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美蓝染料，可以将大肠杆菌菌落染成黑色。由于多个菌落连在一起时会出现重叠现象，只计算一个，所以统计值比真实值要小。
【考点定位】微生物的培养、计数
30.基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如下：
小麦的花粉细胞①—→愈伤组织②—→丛芽③—→植株④
（1）发育成的植株④称为_______________，基因型有___________________。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是______________，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是______________。
（3）若得到可育的植株，需要用_________（化学试剂）对③进行处理，所获得的基因型可能是______________________________________。
（4）①→②过程需要的条件有（ ）（多选）
A.营养 B.激素 C.光照 D.pH
【答案】 (1). 单倍体 (2). AB、Ab、aB、ab (3). 减数分裂 (4). 有丝分裂 (5). 秋水仙素 (6). AABB、AAbb、aaBB、aabb (7). ABD
【解析】
【分析】
分析图示，表示植物组织培养过程，其中小麦的花粉细胞①→愈伤组织②的过程称为脱分化，愈伤组织②→丛芽③的程称为再分化，丛芽③→植株④的程称为丛芽进一步生长发育为植株的过程。
【详解】（1）花药细胞直接发育的个体叫单倍体，故植株④叫做单倍体，基因型有Ab、aB、AB、ab，4种。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是减数分裂，经四分体时期，依次又经历单核居中期、单核靠边期，最终发育成花粉粒（双核期）。花粉发育成为植物体，只有有丝分裂过程。
（3）单倍体植物不育，若要得到可育植株，需要用秋水仙素对③进行处理，使染色体加倍可以进行正常的减数分裂，所得的植株基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb。
（4）分析图示，月季的花药细胞①→愈伤组织②的程称为脱分化，不需要光照，需要的条件有A营养、B激素、D pH，再分化过程中才需要光。
【点睛】本题的考点是植物的组织培养，通过花粉培养产生花粉植株的途径一般有两种：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另外一种是花粉在诱导基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株；这两种途径之间没有绝对界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度比。
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