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【生物】江苏省扬州市扬州中学2018-2019学年高二下学期期中调研试题 （解析版）
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江苏省扬州市扬州中学2018-2019学年高二下学期
期中调研试题
一、单项选择题
1.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是
A. 限制酶的活性受温度的影响 B. 限制酶能识别和切割RNA
C. 限制酶可从原核生物中提取 D. 限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列
【答案】B
【解析】
【分析】
本题考查限制酶相关知识，主要从原核生物中分离纯化出来；特点：具有特异性，即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；作用结果：形成黏性末端和平末端两种。
【详解】酶的活性都受温度的影响，A正确；限制酶只能识别和切割DNA，不能识别和切割RNA，B错误；限制酶主要从原核生物中提取，C正确；一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，D正确。
【点睛】限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条链分别切开时，产生的是黏性末端；限制酶在它识别序列的中心轴线将DNA切开时，产生的是平末端。
2.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是
A. ④过程发生的变化称为复性
B. 催化①过程的酶是RNA聚合酶
C. 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都必须能耐高温
D. 在PCR反应过程中，基因数量以2n-1增加
【答案】A
【解析】
【分析】
分析题图：①是由RNA形成单链DNA的过程，为逆转录过程；②是以单链DNA合成双链DNA的过程，是DNA分子复制过程；③④⑤是多聚酶链式反应扩增DNA片段，③是变性、④是复性、⑤是延伸阶段。
【详解】由以上分析可知，④过程发生的变化称为复性，A正确；①是逆转录过程，需要逆转录酶催化，B错误；催化②过程的酶是DNA聚合酶，催化⑤过程的酶是耐高温DNA聚合酶（Taq酶），催化⑤过程的DNA聚合酶耐高温，而催化②过程的DNA聚合酶不耐高温，C错误；在PCR反应过程中，基因数量以2n增加，D错误。
【点睛】解答此题需要识记DNA分子复制的条件和DNA分子结构的主要特点，掌握碱基互补配对原则的应用，能正确分析题图，再结合图中信息准确答题。
3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述错误的是
A. 基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B. 重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C. 转基因棉花是否具有抗虫特性是通过DNA分子杂交技术来确定的
D. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定：可分为分子水平上的检测与个体水平上的鉴定。
【详解】基因的非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列，如启动子是RNA聚合酶结合位点，对于抗虫棉基因在棉花细胞中的表达不可缺少，A正确；重组DNA分子中增加一个碱基对属于基因突变，而基因突变不一定会导致生物性状发生改变，因此该变异不一定导致毒蛋白的毒性丧失，B正确；转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花细胞中是否产生毒蛋白或鉴定棉花植株是否抗虫来确定的，C错误；因为抗虫基因属于外来基因（指原本不存在该物种中的基因），这种基因在减数分裂后会进入花粉细胞，在传粉受精过程中造成大量传播，从而造成基因污染，D正确。
【点睛】本题以抗虫棉为素材，考查基因工程工具、步骤、安全性以及基因突变等相关知识，另外注意种植抗虫棉时，须同时种植普通的不抗虫棉，减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度。
4.组培苗在移栽前，一般需要炼苗，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。下图横坐标表示不同炼苗方式组合，纵坐标表示白兰地红枫组培苗移栽存活率，以下叙述正确的是
闭盖炼苗：T1＝3天，T2＝6天，T3＝12天
开盖炼苗：t1＝1天，t2＝2天，t3＝3天
A. 炼苗初期应创设与室外环境相同的条件，促使组培苗适应环境
B. 闭盖炼苗期间应控制的环境条件为：无菌、无光，并保持一定的湿度
C. 白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6天后，再开盖炼苗3天
D. 白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低
【答案】D
【解析】
【分析】
组培苗的炼苗，即驯化，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使组培苗健壮，最终达到提高组培苗移栽成活率的目的。驯化应从温度、湿度、光照及有无菌等环境要素进行，驯化开始数天内，应和培养时的环境条件相似；驯化后期，则要与预计的栽培条件相似，从而达到逐步适应的目的。
【详解】炼苗开始数天内，应和培养时的环境条件相似；炼苗后期，则要与预计的栽培条件相似，从而达到逐步适应的目的，A错误；组织培养期间需要无菌操作，长成幼苗后不需要无菌的环境条件了，B错误；分析题图可知，白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6d后，再开盖炼苗2d，C错误；分析题图，白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低，D正确。
【点睛】解答此题的关键是要获取题图信息及把握关键文字信息“炼苗，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性”，然后分析作答。
5.下列哪项不是人工种子的优点
A. 克服季节、气候、地域的限制 B. 节约时间
C. 保持遗传特性不变 D. 得到纯合子
【答案】D
【解析】
【分析】
人工种子的优点：不受季节限制；可以很方便运输和储存；不会造成遗传性状的改变。
【详解】人工种子通过植物组织培养技术获得种子，可克服季节、气候、地域的限制，繁殖速度快，可节约时间和土地，A、B正确；植物组织培养是无性繁殖，可以保持生物体的优良性状，与亲本的基因型相同，但不一定是纯合子，C正确、 D错误。
【点睛】人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，
6.科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。相关叙述错误的是
A. 培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性
B. 培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段
C. 实验结果表明茎尖越小脱毒率越高，成苗率越低
D. 根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27mm
【答案】A
【解析】
马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗，所依据的原理是细胞全能性，A错误；培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段，B正确；由图可知，茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，C正确；在茎尖外植体大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm，D正确。
7.下列有关哺乳动物核移植技术的叙述错误的是
A. 受体细胞常用处于MⅡ的卵母细胞
B. 注入受体细胞的既可以是细胞核，也可以是细胞
C. 核移植技术的成功率很低，仍有很多问题需要研究
D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查核移植的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断和得出正确的结论。
【详解】因减数第二次分裂中期的卵母细胞已经成熟，故常用作核移植的受体细胞，A正确；注入受体细胞的既可以是供体的细胞核，也可以是整个供体细胞，B正确；目前核移植技术的成功率很低，仍有很多问题需要研究，C正确；克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞，因此克隆动物不是对提供体细胞的动物进行了完全复制，D错误。
【点睛】核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。
8. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
【答案】D
【解析】
试题分析：根据概念，经过特定抗原刺激后的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体为单克隆抗体，所以血清抗体不等于单克隆抗体，A项错误；单个效应B细胞无增殖能力，故无法获得大量相应的抗体，B项错误；在细胞融合过程中，可产生三种类型的杂交细胞，要进行筛选，C项错误；利用抗原—抗体反应可以诊断出病毒感染者，D项正确。
考点：本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。
9.胚胎工程技术在生产中的应用不包括
A. 在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体
B. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能
C. 采用机械方法将早期胚胎分割可产生同卵双胎
D. 移植胚胎干细胞可使退化的组织修复并恢复正常功能
【答案】A
【解析】
【分析】
胚胎工程包括胚胎干细胞培养、优良家畜的繁育、胚胎分割移植、体外受精、早期胚胎培养等。
【详解】在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体属于动物细胞融合工程中单克隆抗体，不属于胚胎工程技术，A符合题意；进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能，属于胚胎工程技术，B不符合题意；采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎，属于胚胎工程技术，C不符合题意；移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能，属于胚胎工程技术，D不符合题意；故选A。
【点睛】本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力，胚胎干细胞克隆出的组织或器官，使得血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官都可以更换，这将给白皿病、心脏病和癌在患者带来新的希望。治疗性克隆和克隆人是有严格区别的，若把胚胎干细胞形成的胚胎移植至人的子宫内继续发育，那就是克隆人。中国政府对生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。
10.下图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程。下列有关叙述错误的是( )
A. 将牛组织置于清水中并加入一定量的胰蛋白酶处理可得到单细胞
B. 图中涉及基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等技术
C. 选用未受精的卵细胞作为受体细胞是因为其具有让细胞核全能性得到表达的环境
D. 若要获得同卵双胎或多胎，分割囊胚时需将内细胞团均等分割
【答案】A
【解析】
【分析】
图中，首先把血清蛋白基因导入牛的细胞中，获得转基因的细胞，取该转基因的细胞核移植到去核的卵细胞中，经过早期胚胎培养及胚胎移植获得转基因奶牛。
【详解】动物细胞需要在特定的培养液中培养，用胰蛋白酶可以分离得到单细胞，A错误；图示有转基因技术、动物细胞的培养、核移植、早期胚胎培养及胚胎移植等技术，B正确；未受精的卵母细胞较大，营养物质丰富，含有促进细胞核全能性表达的物质，C正确；可通过胚胎分割获得多个胚胎，从而获得同卵双胎或多胎，D正确。故选A。
11.下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是( )
A. “前面造林，后面砍林”的现象违背了系统整体性原理
B. 设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德
C. 中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可有限制的进行生殖性克隆
D. 由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题
【答案】B
【解析】
【分析】
生态工程的基本原理：
（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用；
（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；
（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；
（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响；
（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。
【详解】进行生态工程设计时，要考虑社会—自然—经济的整体影响，即生态工程设计时要遵循整体性原理，否则容易造成“前面造林，后面砍林”的现象，而系统整体性原理即“1+1＞2”，A错误；设计试管婴儿进行遗传病基因检测有利于预防遗传病的发生，但单纯选择胎儿性别是违法的，会引起性别比例失调，并违背伦理道德，B正确；中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），但是不反对治疗性克隆人，C错误；根据目前的研究，对转基因生物的风险还不完全清楚，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能存在生物安全性问题，D错误。
故选B。
12.下列措施中不符合城市生态工程建设基本原理的是
A. 城市规划中分区建设工业区、居住区、生态绿地等
B. 大力推广“环境友好技术”和低污清洁生产工艺
C. 采用浮床工艺法等手段治理水污染
D. 用法律手段严禁汽车上路，造纸厂酒厂生产，以断绝污染的源头
【答案】D
【解析】
【分析】
城市生态工程建设应本着城市中生态效益、经济效益和社会效益协调发展的原理进行；城市生态工程建设对于环境污染的问题，本着协调与平衡原理、整体性等基本原理，对城市进行城市绿化、污水净化、废弃物处理、合理布局等措施。
【详解】在城市规划和布局方面，要进行城市生态分区，合理分布工业区、居住区、生态绿地等，A正确；推广“环境友好技术”和低污染清洁生产工艺，以减少污染的产出，B正确；采用浮床工艺法等手段治理水污染，在浮床上种植特殊的水生、半水生植物以吸收水中的化学元素，C正确；严禁汽车上路及造纸厂、酒厂生产，一方面会严重阻滞经济发展，另一方面也不能达到“断绝污染源头”的目的，D错误。
【点睛】主要考查生态工程的基本原理的相关内容，对于城市环境的治理要把整个城市作为一个巨大的生态系统来考虑，即用生态工程的方法对城市环境进行综合治理。
13.随着“绿水青山就是金山银山”理念的提出，生态经济的重要性日益增显。下列有关叙述错误的是( )
A. 生态经济所遵循的主要原则是循环经济
B. 生态工程的特点是少消耗、低效益、可持续
C. “无废弃物农业”遵循的基本原理是物质循环再生原理
D. 在湿地的周围建立缓冲带可使湿地依靠自然演替机制恢复其生态功能
【答案】B
【解析】
【分析】
生态经济主要通过实行循环经济的原则，使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化，实现生态经济的主要手段之一是生态工程。
【详解】生态经济的主要原则是循环经济，A正确；生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系，B错误；无废弃物农业主要是变废为宝，基本原理是物质循环再生，C正确；湿地周围的缓冲带有利于其恢复生态功能，D正确。故选B。
14.下列有关实验室果酒、果醋制作过程的叙述，正确的是( )
A. 果酒发酵瓶内留有一定空间有利于酵母菌的繁殖
B. 果酒发酵产生的酒精为醋酸菌提供碳源和氮源
C. 果醋制作时液面形成一层较厚的菌膜
D. 果醋发酵阶段酵母菌仍具有发酵能力
【答案】A
【解析】
【分析】
果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧；腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌，属于真核细胞，条件是15-18℃，一定湿度。
【详解】果酒发酵时，瓶内要留有一定空间，以利于酵母菌的繁殖，A正确；醋酸的组成元素是C、H、O，不能为醋酸菌提供氮源，B错误；用果酒制作果醋的过程中，液面会出现一层较薄的白色菌膜，C错误；果醋发酵阶段酵母菌已经失去了发酵能力，D错误。
15.下列关于“腐乳的制作”的实验，叙述正确的是
A. 控制发酵温度的主要目的是腐乳调味
B. 加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
C. 实验室制作的腐乳不宜直接食用
D. 成品腐乳表面的“皮”主要由细菌产生
【答案】C
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象及结论等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
【详解】控制发酵温度的主要目的是利于毛霉的生长和代谢，A错误；腐乳制作中加料酒主要是为了调节腐乳的风味，同时可以杀菌，避免腐乳变质，B错误；实验室制作的腐乳可能灭菌不彻底，不宜直接食用，C正确；成品腐乳表面的粘性物质主要由毛霉产生，是匍匐菌丝，D错误。
【点睛】腐乳是用豆腐发酵制成，多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉是一种丝状真菌具发达的白色菌丝。毛霉等微生物产生的以蛋白酶为主各种酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
16. 在选泡菜坛时，应选择火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的，其目的是( )
A. 美观 B. 可防止内部液体渗出
C. 耐用 D. 密封好，保证坛内外气体不交换
【答案】D
【解析】
试题分析：泡菜的制作离不开乳酸菌，而乳酸菌是厌氧生物，无O2时才可进行乳酸发酵产生乳酸。故选D
考点：本题考查泡菜的制作原理。
点评：本题意在考查考生的理解能力，属于容易题。
17.现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，它们适于分离的是( )
成分
KHSO4
MgSO4
NaCl
CaSO4
CaCO3
葡萄糖
淀粉
甲培养基含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
0.5%
2%
乙培养基含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
—
—
A. 甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌
B. 甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌
C. 甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌
D. 甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌
【答案】B
【解析】
【分析】
分析表格：甲培养基中含有葡萄糖和淀粉，可以作为微生物的碳源和能源，适于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。
【详解】由表格中所加成分可知，两种培养基均不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有葡萄糖和淀粉，可以作为固氮菌的碳源和能源，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离自养型的自生固氮菌。综上分析，B符合题意，ACD不符合题意。
故选B。
18. 某一种细菌菌株要从环境中提取现成的亮氨酸才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是
注：Ｌ—亮氨酸 Ｓ—链霉素 “＋”—加入 “—”—不加入
如：Ｌ—：不加亮氨酸 Ｓ＋：加入链霉素
【答案】B
【解析】
试题分析：表中所列均为选择培养基。根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L－、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L－、S+，故B正确。
考点：本题主要考查微生物培养和培养基的作用，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
19.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是
A. 细菌个体小，真菌个体大
B. 细菌易稀释，真菌不易稀释
C. 细菌在土壤中数量比真菌多
D. 随机的，没有原因
【答案】C
【解析】
土壤中的微生物大约70%—90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30—300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。综上分析，C项正确，A、B、D三项均错误。
【考点定位】微生物是实验室培养
20. 要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在( 、)
A. 加入指示剂的鉴别培养基上
B. 含有蛋白胨的固体培养基上
C. 只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上
D. 含四大营养要素的培养基上
【答案】C
【解析】
试题分析：分离纤维素分解菌应该使用选择培养基而不是鉴别培养基，A错误；培养细菌的培养基都含有蛋白胨，它没有选择作用，B错误；只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌能够生存，其他微生物不能生存，可以筛选纤维素分解菌，C正确；含四大营养要素的培养基上是基本培养基，没有选择作用，D错误。
考点：培养基对微生物的选择作用
【名师点睛】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使菌落周围出现无色的透明圈。
二、多项选择题
21.大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因，某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ 基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ 基因被破坏，则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程，下列说法正确的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
【答案】ACD
【解析】
【分析】
基因工程操作中，判断重组质粒是否导入，需要依据质粒上的标记基因即本题中氨苄青霉素抗性基因，因此，筛选导入重组质粒的受体细胞，是根据质粒上的氨苄青霉素抗性基因来进行的，需要利用选择培养基进行筛选。
【详解】判断重组质粒是否导入，依据质粒上的氨苄青霉素抗性基因（标记基因），所以受体细胞应不含有氨苄青霉素抗性基因，A正确；若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色，因此如果大肠杆菌的菌落为蓝色，说明lacZ基因没有被破坏，因此pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体，B错误；选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素，这样可以将没有导入目的基因的大肠杆菌淘汰，C正确；白色菌落的大肠杆菌是转入了目的基因的，所以应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养，D正确。
【点睛】准确获取题图信息及图中标记基因的作用及颜色反应原理是解题关键。
22.转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，插入另一位点。转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移，在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动。有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞。下列推测合理的是
A. 转座子不能独立进行DNA复制
B. 转座子可造成染色体变异或基因重组
C. 转座子可用于基因工程的研究
D. 细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变
【答案】BCD
【解析】
【分析】
本题考查DNA复制、生物变异的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
【详解】根据题干中“转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来”，说明转座子可以独立进行DNA复制，A错误；根据题干中“转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移”，说明转座子可造成真核生物染色体变异或基因重组，B正确；根据题干中“转座子可在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动”，说明转座子可用于基因工程的研究，C正确；根据题干中“有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞”，说明细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变，D正确。
【点睛】可遗传的变异有三种基因突变、染色体变异和基因重组：
（1）基因突变是基因结构的改变，包括碱基对的增添、缺失或替换。
（2）基因重组的方式有同源染色体上非姐妹单体之间的交叉互换和非同源染色体上非等位基因之间的自由组合，另外，外源基因的导入也会引起基因重组。
（3）染色体变异是指染色体结构和数目的改变。
23.下图为利用胚胎干细胞培育转基因小鼠的基本流程示意图。下列叙述错误的是
A. 过程①选择胚胎干细胞作受体细胞是因为其具有发育全能性
B. 过程②中必须通过一定方法筛选含有目的基因的胚胎干细胞
C. 过程③中导入囊胚的细胞数不同，子代小鼠的性状一定相同
D. 过程④中为提高成功率，需对代孕母鼠进行超数排卵处理
【答案】CD
【解析】
【分析】
图中涉及转基因技术、早期胚胎培养以及胚胎移植技术，胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，图中囊胚中的内细胞团中可以分离出胚胎干细胞。
【详解】胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，可以作为基因工程的受体细胞，A正确。把目的基因导入受体细胞，要经过筛选看目的基因因是否导入，选择出导入目的基因的重组细胞，B正确。导入到受体囊胚中的含目的基因细胞数不同，子代小鼠的性状可能不同，当导入到囊胚中的转基因干细胞越多，发育成的转基因基因动物中含有目的基因的部分越多，C错误。为了提高胚胎成活率，需对代孕母鼠进行同期发情处理，使之具有与怀孕鼠相同的生理状态，D错误。
24.如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图，下列相关叙述正确的是
A. 改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B. 果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C. 果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关
D. 气体入口与气体出口可以交换使用
【答案】ABC
【解析】
【分析】
根据题意和图示分析可知：图示是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，其中培养基入口能补充营养物质；气体入口能通入气体；气体出口能排出气体。
【详解】改变通入气体种类（氧气或氮气），可以研究呼吸作用类型对发酵的影响，A正确；果酒发酵中期通入氮气，酵母菌因缺氧将从有氧呼吸转变为无氧呼吸，产生酒精，B正确；由于温度能影响微生物酶的活性，所以果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关，C正确；由于气体入口的导管长，能伸到培养液中，而气体出口的导管短，没有伸到培养液中，所以气体入口与气体出口不可以交换使用，D错误。
【点睛】本题结合制作果酒和果醋的装置示意图，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及代谢类型；掌握果酒和果醋制作的装置，尤其是该装置中“三个口”的作用。
25.下列有关微生物培养的叙述，错误的是
A. 涂布接种时，涂布器经火焰灭菌后应趁热使用
B. 纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养
C. 分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离
D. 观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征
【答案】AD
【解析】
【分析】
微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。
【详解】涂布接种时，涂布器应从盛酒精的烧杯中取出，并将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，冷却后再使用，A错误；纯化培养时，培养皿应倒置放入恒温箱内静止培养，B正确；分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离，C正确；为防止空气中杂菌污染培养物，观察菌落时，不能打开培养皿的盖子，D错误。
【点睛】微生物纯化的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
三、非选择题
26.植物基因工程中，往往用光诱导型启动子(PrbcS)使目的基因表达，其结合T基因后能使目的基因更高水平表达。下图中①和②都为基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程并回答下列问题：
注：Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点。
（1）对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________，还需结合__________技术才能获得新性状的植株。
（2）中间载体通常用______________法导入微生物中扩增，含有中间载体②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培养基中生长，________（“能”或“不能”）在含有氨苄青霉素的培养基中生长。
（3）经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，经图示信息分析，Prbcs*T的长度约为____________________。据图分析，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。
（4）在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是：设计包含_________识别序列的引物，然后用PCR技术扩增。
【答案】 (1). 农杆菌转化法 (2). 植物组织培养 (3). 感受态细胞 (4). 能 (5). 不能 (6). 1.7 kb (7). HindⅢ和EcoRⅠ (8). NcoⅠ
【解析】
【分析】
本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。
【详解】（1）将目的基因导入双子叶植物常利用农杆菌转化法；要想获得转基因植物，还需要对导入目的基因的受体细胞进行植物组织培养才能获得新性状的植株；
（2）将中间载体导入微生物时常先用钙离子处理微生物使其成为感受态，易于吸收中间载体，该种方法为感受态细胞法；由图可知，中间载体②上含卡那霉素抗性基因，而不含氨苄青霉素抗性基因，故含有中间载体②PrbcS*T的微生物能在含有卡那霉素的培养基中生长，而不能在含有氨苄青霉素的培养基中生长；
（3）由图可知，中间载体②的长度为2.7kb，经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，设Prbcs*T的长度为y，则2.7-0.4+y=4kb，解得y=1.7kb；根据图示中中间载体①PrbcS*T右侧的酶切位点和中间载体②-2B右侧的酶切位点可知，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶HindⅢ和EcoRⅠ切割；
（4）可设计包含NcoⅠ识别序列的引物，然后用PCR技术扩增，即可在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点。
【点睛】基因工程中目的基因导入的受体细胞不同，选用的方法不同，一般导入双子叶植物常用农杆菌转化法，导入动物细胞常用显微注射法，导入微生物常用感受态法。运载体上常含有标记基因，可用来筛选目的基因是否导入受体细胞。
27.甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是________________________。
（2）若想培育一株新品种，既有此植物的性状还有其他植物的性状，理论上可以采用______________技术，细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的____________，该技术的优点是_______________________________。
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是_________________，A中的愈伤组织是叶肉细胞经__________形成的。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用花药离体培养，原因是__________________________________________________。
【答案】 (1). 植物细胞全能性 (2). 植物体细胞杂交 (3). 细胞壁 (4). 克服远缘杂交不亲和障碍 (5). 细胞分裂素、生长素 (6). 脱分化 (7). 不能 (8). 对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株
【解析】
【分析】
本题考查植物细胞工程的相关知识，要求考生对相关知识在透彻理解的基础上，结合题图信息分析作答，旨在考查考生的综合运用能力与语言表述能力。
【详解】（1）绿色叶片和白色花瓣是细胞分化的结果，遗传物质并没有改变，所以以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性；
（2）若想培育一株新品种，既有此植物的性状还有其他植物的性状，理论上可以采用植物体细胞杂交技术，细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁，该技术的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍；
（3）培养基中细胞分裂素与生长素的用量及使用顺序可造成如图A、B、C所示的不同的培养结果；A中的愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的；
（4）因杂合体植株花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，故用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株，因而若要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，则不能采用花药离体培养。
【点睛】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
28.科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性，进行了下列实验。
（1）将鼠细胞和人细胞在CO2培养箱中培养一段时间，用_____处理，获取实验用的单细胞悬液。
（2）将两种细胞在37℃下混合培养，在培养液中加入_______诱导融合，形成融合细胞，一般两两融合的细胞有____种。
（3）细胞膜的主要成分是______和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养，抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合，其目的是标记膜蛋白，以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和____，开始时，鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，两种颜色不混合；一段时间后，可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计______，结果如下图所示。
（4）科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一：融合细胞合成了新的膜蛋白；
假说二：原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用_______抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，均对嵌合体形成没有显著影响，这个结果否定了假说一。
②在15℃、20℃、26℃的培养温度下重复上述实验，这些实验的结果为________，为假说二提供了证据支持。
【答案】 (1). 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 (2). 灭活的病毒(或PEG) (3). 3 (4). 磷脂 (5). 分布 (6). 嵌合体比例 (7). 蛋白质合成 (8). 随着温度增加，嵌合体比例增加(或随着温度降低，嵌合体比例降低)
【解析】
【分析】
分析柱形图可知，随培养时间延长，嵌合比例明显增多，说明膜上蛋白质分子在不断的运动，具有一定的流动性。
【详解】（1）动物组织间的细胞是以蛋白质连接的，可利用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）将其水解，从而使组织分散成单个细胞；
（2）常用的诱导动物细胞融合的因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等，所以在培养基中加入灭活的病毒（或PEG）即可诱导融合；一般两两融合的细胞有3种，即鼠-鼠型、人-人型和人-鼠型；
（3）细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质；连接了荧光染料的抗体与融合细胞的膜蛋白特异性结合后，可以通过在显微镜下观察荧光染料的颜色和分布来观察膜蛋白；鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，一段时间后，会出现红绿荧光交替分布的“嵌合体”，则说明二者在诱导培养过程中发生一定比例的融合，统计嵌合体的比例，即可代表细胞融合的比例；
（4）①使用蛋白质合成抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，则细胞无法合成新的膜蛋白，而嵌合体形成不受影响，说明融合细胞不合成新的膜蛋白，故结果否定了假设一；
②假说二表示原有膜蛋白在细胞膜平面上运动，随着温度的增加，代谢增加，膜蛋白的运动加快，从而可以使细胞膜的融合速率相应加快。所以实验的结果为随着温度增加，嵌合体比例增加，可以为假说二提供证据支持。
【点睛】动物细胞培养环境是含CO2的恒温培养箱内；分解动物组织细胞间隙物质通常用胰蛋白酶；诱导融合动物细胞常常有三种方法，但用诱导剂处理常使用PEG或者灭活的病毒。
29.亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO2的培养箱中培养22～24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h 更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5% CO2 的作用是_________________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________________________，步骤③中，判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到_____________。
（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_______________________、__________________________。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起________作用。
（5）本实验结果表明，______________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是__________________________________________________。
【答案】 (1). 维持培养液pH的相对稳定 (2). 染色体的着丝点排列在赤道板上 (3). 两个极体 (4). 桑椹胚 (5). 清除有害代谢产物 (6). 补充营养物质 (7). 促进 (8). 50 (9). 核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高
【解析】
【分析】
本题以亚麻酸的作用为背景，结合图表考查动物细胞培养、体外受精及早期胚胎发育的过程和识记等相关知识，旨在考查考生信息获取的能力、实验探究能力与知识的综合运用能力。
【详解】（1）步骤①（动物细胞培养）过程中，细胞培养箱中加5% CO2 的作用是维持培养液pH的相对稳定；
（2）成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期，此时染色体的行为特征是染色体的着丝点排列在赤道板上；判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体；
（3）受精卵经过卵裂期、桑椹胚可发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是清除有害代谢产物及补充营养物质；
（4）对比亚麻酸溶液0和200μmol·L-1时，核成熟卵子数和囊胚数占培养数的比例，可知浓度为200μmol·L-1时对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用；
（5）亚麻酸溶液浓度为50μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，说明50μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利。
【点睛】正确解读图表信息并明确实验设计中对照组的作用是解题关键。
30.下图表示我国南方比较常见的桑基鱼塘农业生态系统。请分析回答下列问题：
（1）在不考虑人工投入的情况下，流经该生态系统的总能量（总初级生产量）是__________________________________________________。人们将蚕沙（蚕的粪便）投入鱼塘，被鱼等水生生物食用，蚕沙中所含的能量主要属于第_____营养级。
（2）鱼等水生生物的排泄物及未被利用的有机物和底泥，其中一部分经过_____________作用后可作为肥料，返回桑基，培育桑树。池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式（上层为食浮游生物的鳙鱼，中层为食草的草鱼，下层为杂食性的鲫鱼等），从群落结构分析，这种养殖模式的优点是_________________________________________________。
（3）建立该人工生态系统的目的是实现对能量的___________，提高能量的利用率。与种植单一作物的农田相比，该生态系统的自我调节能力________。
（4）建立该生态系统遵循的原理主要是______________、________________。
【答案】 (1). 生产者（或桑树）通过光合作用固定的太阳能总量 (2). 一 (3). 分解者（或微生物）的分解 (4). 充分利用了生态系统的空间和食物资源 (5). 多级（或充分）利用 (6). 较强 (7). 物质循环再生原理 (8). 生物多样性原理
【解析】
【分析】
流经该生态系统的总能量是生产者通过光合作用固定的全部太阳能，建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染；与种植单一作物的农田相比，该生态系统生物种类多，自我调节能力强，建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理。
【详解】（1）据图示分析，生产者通过光合作用固定的太阳能总量，是流经此生态系统的总能量；蚕的粪便中的能量是上一个营养级的同化的能量，而蚕的上一个营养级是桑树，桑树属于第一营养级；
（2）鱼等水生生物的排泄物及未被利用的有机物和底泥，其中一部分经过分解者的分解作用后可作为肥料，返回桑基，培育桑树；池塘养鱼时，通常采用上-中-下式的多鱼种混合放养模式，是因为该模式充分利用了生态系统的空间和食物资源；
（3））建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率；与种植单一作物的农田相比，该生态系统生物种类丰富，故生态系统的自我调节能力较强；
（4）建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理。
【点睛】本题考查生态系统的结构和功能等相关知识，意在考查学生运用所需知识对某些生物学问题进行解释、推理作出合理的判断的能力。
31.豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了常用灭菌方法对腐败细菌的灭杀效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①豆浆变质处理 将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下，放置7d后，豆浆发生变质。
②腐败细菌的初步分离和计数 取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表：
细菌序号
菌落特征
菌落直径/mm
菌落数/个
豆浆A
豆浆B
自制豆浆
S1
表面有白色绒毛，圆形边缘不规则
5
5
3
7
S2
白色，表面无绒毛，有白色液滴
1～2
18
11
24
S3
黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑
20～30
11
7
15
③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果 以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图。
请回答下列问题：
（1）步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是__________，步骤②中培养基的常用灭菌方法是______________。
（2）步骤②中适宜采用的接种方法是______。区分菌落种类的依据是_____________。
统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以有效防止___________________________。
（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是__________；为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在___________ mg．kg-1左右。
（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的明显优点是____________________。
【答案】 (1). 干热灭菌 (2). 高压蒸汽灭菌 (3). 稀释涂布平板法 (4). 菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征 (5). 因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目 (6). S1 (7). 250 (8). 食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群
【解析】
【分析】
本题结合题图考查实验室中微生物的培养与分离计数的相关知识，旨在考查考生的识记能力与信息获取能力，结合题意综合分析作答。
【详解】（1）步骤①中常用干热灭菌法对三角瓶进行灭菌； 步骤②中培养基的常用灭菌方法为高压蒸汽灭菌；
（2）步骤②的目的是经培养后统计样品中活菌的数目，所以常采用稀释涂布平板法进行接种；菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征可作为区分菌落种类的依据；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；
（3）步骤③结果表明，随着乳酸链球菌素添加量的增加，S1细菌的数量相对值总是最多的，由此可推知，S1细菌是最能耐受乳酸链球菌素的细菌；据图可知，在乳酸链球菌素添加量较低时，随着添加量的增多，3种细菌的数量相对值相应减少，直到乳酸链球菌素的添加量达到250mg．kg-1时，3种细菌的数量相对值均达到最少，之后，随着乳酸链球菌素添加量的增多，3种细菌数量的相对值不变，由此可推知，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg．kg-1左右，即可有效防止豆浆腐败；
（4）由题干信息可知，乳酸链球菌素是由34个氨基酸组成的多肽，所以与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群。
【点睛】微生物培养的关键是无菌操作技术，无菌操作过程中的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法灭菌：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
32.腐乳是我国独有的发酵食品，是当今国际推崇的高营养食品。某科研机构研究了腐乳生产过程中不同浓度的食盐对腐乳中氨基酸含量和pH的影响，其中部分数据如下。请回答下列问题。
(注：后期发酵阶段是指从腐乳装瓶后直到成熟的过程)
（1）腐乳生产过程有多种微生物的参与，其中起主要作用的是_________。
（2）腐乳制备过程中，加盐可以________________________，使豆腐块变硬。
（3）由图可知，后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将________，蛋白质含量呈________趋势。这是由于前期发酵阶段________将豆腐中的蛋白质分解为小分子的物质。
（4）由表可知，后期发酵到60天时，盐度为________的腐乳已经腐败，原因是____________。
（5）综上研究结果，为了满足口味清淡消费者的需要，同时保证营养丰富、口感鲜美，在生产过程中应该使盐度控制在________左右。
【答案】 (1). 毛霉 (2). 析出豆腐中的水 (3). 上升 (4). 下降 (5). 蛋白酶 (6). 5% (7). 盐浓度过低，不足以抑制微生物的生长，导致腐败变质 (8). 8%
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作过程，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
【详解】（1）腐乳制作时，起主要作用的微生物是毛霉；
（2）腐乳制备过程中，加盐可以析出豆腐中的水，使豆腐块变硬；
（3）分析题图可知：后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将上升，蛋白质含量下降；是由于发酵过程中，毛霉中的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质水解为小分子物质；
（4）发酵到60天时，盐度为5%的腐乳中氨基酸含量开始下降，说明腐乳已经腐败；原因是盐浓度太低，不足以抑制微生物生长，导致腐乳腐败；
（5）综上研究结果可知：盐度太小容易腐败，盐度太大氨基酸含量低，因此最好控制在8%左右。
【点睛】腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。
33.杨梅是浙江省的特色水果之一，为对其进行深加工，某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制，基本工艺流程如下：
请回答：
（1）在制备杨梅醋过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和_________酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是__________________。发酵一段时间后，观察到发酵罐内液面不再有__________________，说明发酵基本完毕。
（2）在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经_____________处理的木材刨花，然后加入含_________菌的培养液，使该菌_________在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的_________来调节。
（3）若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2，的产生量是_________。
A.甲罐的两倍 B.与甲罐的相等
C.甲罐的一半 D.几乎为零
（4）在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如下，该物质是__________________。
【答案】 (1). 果胶 (2). 防止空气进入 (3). 气泡冒出 (4). 灭菌 (5). 醋酸 (6). 附着 (7). 流速 (8). D (9). 酒精
【解析】
试题分析：
（1）为了提高杨梅的出汁率，使杨梅汁变得澄清，可以加入纤维素酶和果胶酶；在甲装置中的弯管中加水可以防止空气进入装置；果酒发酵过程中产物为酒精和二氧化碳，因此液面不再有气泡冒出说明发酵完毕。
（2）制备杨梅醋的过程中，乙罐内先填充经过灭菌处理的木材刨花，防止杂菌污染；然后加入含有醋酸菌的培养液，可以使该菌附着在刨花上；将杨梅酒倒入乙罐中进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可以通过控制杨梅酒的流速来调节。
（3）若甲罐中的杨梅酒全部制成杨梅醋，由于乙醇被氧化生成乙酸的过程中，不产生二氧化碳，因此乙罐中二氧化碳的产生量几乎为零，故ABC错误，D正确。
（4）杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，先进行的是酒精发酵，后代酒精被氧化为果醋，因此曲线表现的物质为酒精。
考点：本题考查果酒和果醋的制作的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
期中调研试题
一、单项选择题
1.下列有关基因工程中限制酶的描述，错误的是
A. 限制酶的活性受温度的影响 B. 限制酶能识别和切割RNA
C. 限制酶可从原核生物中提取 D. 限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列
【答案】B
【解析】
【分析】
本题考查限制酶相关知识，主要从原核生物中分离纯化出来；特点：具有特异性，即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；作用结果：形成黏性末端和平末端两种。
【详解】酶的活性都受温度的影响，A正确；限制酶只能识别和切割DNA，不能识别和切割RNA，B错误；限制酶主要从原核生物中提取，C正确；一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，D正确。
【点睛】限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条链分别切开时，产生的是黏性末端；限制酶在它识别序列的中心轴线将DNA切开时，产生的是平末端。
2.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是
A. ④过程发生的变化称为复性
B. 催化①过程的酶是RNA聚合酶
C. 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都必须能耐高温
D. 在PCR反应过程中，基因数量以2n-1增加
【答案】A
【解析】
【分析】
分析题图：①是由RNA形成单链DNA的过程，为逆转录过程；②是以单链DNA合成双链DNA的过程，是DNA分子复制过程；③④⑤是多聚酶链式反应扩增DNA片段，③是变性、④是复性、⑤是延伸阶段。
【详解】由以上分析可知，④过程发生的变化称为复性，A正确；①是逆转录过程，需要逆转录酶催化，B错误；催化②过程的酶是DNA聚合酶，催化⑤过程的酶是耐高温DNA聚合酶（Taq酶），催化⑤过程的DNA聚合酶耐高温，而催化②过程的DNA聚合酶不耐高温，C错误；在PCR反应过程中，基因数量以2n增加，D错误。
【点睛】解答此题需要识记DNA分子复制的条件和DNA分子结构的主要特点，掌握碱基互补配对原则的应用，能正确分析题图，再结合图中信息准确答题。
3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述错误的是
A. 基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B. 重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C. 转基因棉花是否具有抗虫特性是通过DNA分子杂交技术来确定的
D. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定：可分为分子水平上的检测与个体水平上的鉴定。
【详解】基因的非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列，如启动子是RNA聚合酶结合位点，对于抗虫棉基因在棉花细胞中的表达不可缺少，A正确；重组DNA分子中增加一个碱基对属于基因突变，而基因突变不一定会导致生物性状发生改变，因此该变异不一定导致毒蛋白的毒性丧失，B正确；转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花细胞中是否产生毒蛋白或鉴定棉花植株是否抗虫来确定的，C错误；因为抗虫基因属于外来基因（指原本不存在该物种中的基因），这种基因在减数分裂后会进入花粉细胞，在传粉受精过程中造成大量传播，从而造成基因污染，D正确。
【点睛】本题以抗虫棉为素材，考查基因工程工具、步骤、安全性以及基因突变等相关知识，另外注意种植抗虫棉时，须同时种植普通的不抗虫棉，减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度。
4.组培苗在移栽前，一般需要炼苗，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。下图横坐标表示不同炼苗方式组合，纵坐标表示白兰地红枫组培苗移栽存活率，以下叙述正确的是
闭盖炼苗：T1＝3天，T2＝6天，T3＝12天
开盖炼苗：t1＝1天，t2＝2天，t3＝3天
A. 炼苗初期应创设与室外环境相同的条件，促使组培苗适应环境
B. 闭盖炼苗期间应控制的环境条件为：无菌、无光，并保持一定的湿度
C. 白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6天后，再开盖炼苗3天
D. 白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低
【答案】D
【解析】
【分析】
组培苗的炼苗，即驯化，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使组培苗健壮，最终达到提高组培苗移栽成活率的目的。驯化应从温度、湿度、光照及有无菌等环境要素进行，驯化开始数天内，应和培养时的环境条件相似；驯化后期，则要与预计的栽培条件相似，从而达到逐步适应的目的。
【详解】炼苗开始数天内，应和培养时的环境条件相似；炼苗后期，则要与预计的栽培条件相似，从而达到逐步适应的目的，A错误；组织培养期间需要无菌操作，长成幼苗后不需要无菌的环境条件了，B错误；分析题图可知，白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖锻炼6d后，再开盖炼苗2d，C错误；分析题图，白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖锻炼时间的增加先升高后降低，D正确。
【点睛】解答此题的关键是要获取题图信息及把握关键文字信息“炼苗，目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性”，然后分析作答。
5.下列哪项不是人工种子的优点
A. 克服季节、气候、地域的限制 B. 节约时间
C. 保持遗传特性不变 D. 得到纯合子
【答案】D
【解析】
【分析】
人工种子的优点：不受季节限制；可以很方便运输和储存；不会造成遗传性状的改变。
【详解】人工种子通过植物组织培养技术获得种子，可克服季节、气候、地域的限制，繁殖速度快，可节约时间和土地，A、B正确；植物组织培养是无性繁殖，可以保持生物体的优良性状，与亲本的基因型相同，但不一定是纯合子，C正确、 D错误。
【点睛】人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，
6.科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。相关叙述错误的是
A. 培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性
B. 培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段
C. 实验结果表明茎尖越小脱毒率越高，成苗率越低
D. 根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27mm
【答案】A
【解析】
马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗，所依据的原理是细胞全能性，A错误；培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段，B正确；由图可知，茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，C正确；在茎尖外植体大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm，D正确。
7.下列有关哺乳动物核移植技术的叙述错误的是
A. 受体细胞常用处于MⅡ的卵母细胞
B. 注入受体细胞的既可以是细胞核，也可以是细胞
C. 核移植技术的成功率很低，仍有很多问题需要研究
D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
【答案】D
【解析】
【分析】
本题考查核移植的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断和得出正确的结论。
【详解】因减数第二次分裂中期的卵母细胞已经成熟，故常用作核移植的受体细胞，A正确；注入受体细胞的既可以是供体的细胞核，也可以是整个供体细胞，B正确；目前核移植技术的成功率很低，仍有很多问题需要研究，C正确；克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞，因此克隆动物不是对提供体细胞的动物进行了完全复制，D错误。
【点睛】核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。
8. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
【答案】D
【解析】
试题分析：根据概念，经过特定抗原刺激后的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体为单克隆抗体，所以血清抗体不等于单克隆抗体，A项错误；单个效应B细胞无增殖能力，故无法获得大量相应的抗体，B项错误；在细胞融合过程中，可产生三种类型的杂交细胞，要进行筛选，C项错误；利用抗原—抗体反应可以诊断出病毒感染者，D项正确。
考点：本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。
9.胚胎工程技术在生产中的应用不包括
A. 在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体
B. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能
C. 采用机械方法将早期胚胎分割可产生同卵双胎
D. 移植胚胎干细胞可使退化的组织修复并恢复正常功能
【答案】A
【解析】
【分析】
胚胎工程包括胚胎干细胞培养、优良家畜的繁育、胚胎分割移植、体外受精、早期胚胎培养等。
【详解】在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体属于动物细胞融合工程中单克隆抗体，不属于胚胎工程技术，A符合题意；进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能，属于胚胎工程技术，B不符合题意；采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎，属于胚胎工程技术，C不符合题意；移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能，属于胚胎工程技术，D不符合题意；故选A。
【点睛】本题主要考查学生对知识的记忆和理解能力，胚胎干细胞克隆出的组织或器官，使得血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官都可以更换，这将给白皿病、心脏病和癌在患者带来新的希望。治疗性克隆和克隆人是有严格区别的，若把胚胎干细胞形成的胚胎移植至人的子宫内继续发育，那就是克隆人。中国政府对生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。
10.下图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程。下列有关叙述错误的是( )
A. 将牛组织置于清水中并加入一定量的胰蛋白酶处理可得到单细胞
B. 图中涉及基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等技术
C. 选用未受精的卵细胞作为受体细胞是因为其具有让细胞核全能性得到表达的环境
D. 若要获得同卵双胎或多胎，分割囊胚时需将内细胞团均等分割
【答案】A
【解析】
【分析】
图中，首先把血清蛋白基因导入牛的细胞中，获得转基因的细胞，取该转基因的细胞核移植到去核的卵细胞中，经过早期胚胎培养及胚胎移植获得转基因奶牛。
【详解】动物细胞需要在特定的培养液中培养，用胰蛋白酶可以分离得到单细胞，A错误；图示有转基因技术、动物细胞的培养、核移植、早期胚胎培养及胚胎移植等技术，B正确；未受精的卵母细胞较大，营养物质丰富，含有促进细胞核全能性表达的物质，C正确；可通过胚胎分割获得多个胚胎，从而获得同卵双胎或多胎，D正确。故选A。
11.下列有关现代生物工程技术应用的叙述，正确的是( )
A. “前面造林，后面砍林”的现象违背了系统整体性原理
B. 设计试管婴儿性别会引起性别比例失调，违背伦理道德
C. 中国政府对于克隆技术的态度是不反对治疗性克隆，可有限制的进行生殖性克隆
D. 由于存在生殖隔离，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物不存在生物安全性问题
【答案】B
【解析】
【分析】
生态工程的基本原理：
（1）物质循环再生原理：物质能在生态系统中循环往复，分层分级利用；
（2）物种多样性原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性；
（3）协调与平衡原理：生态系统的生物数量不能超过环境承载力（环境容纳量）的限度；
（4）整体性原理：生态系统建设要考虑自然、经济、社会的整体影响；
（5）系统学和工程学原理：系统的结构决定功能原理：要通过改善和优化系统结构改善功能；系统整体性原理：系统各组分间要有适当的比例关系，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”。
【详解】进行生态工程设计时，要考虑社会—自然—经济的整体影响，即生态工程设计时要遵循整体性原理，否则容易造成“前面造林，后面砍林”的现象，而系统整体性原理即“1+1＞2”，A错误；设计试管婴儿进行遗传病基因检测有利于预防遗传病的发生，但单纯选择胎儿性别是违法的，会引起性别比例失调，并违背伦理道德，B正确；中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），但是不反对治疗性克隆人，C错误；根据目前的研究，对转基因生物的风险还不完全清楚，大田种植转基因抗旱、抗除草剂农作物可能存在生物安全性问题，D错误。
故选B。
12.下列措施中不符合城市生态工程建设基本原理的是
A. 城市规划中分区建设工业区、居住区、生态绿地等
B. 大力推广“环境友好技术”和低污清洁生产工艺
C. 采用浮床工艺法等手段治理水污染
D. 用法律手段严禁汽车上路，造纸厂酒厂生产，以断绝污染的源头
【答案】D
【解析】
【分析】
城市生态工程建设应本着城市中生态效益、经济效益和社会效益协调发展的原理进行；城市生态工程建设对于环境污染的问题，本着协调与平衡原理、整体性等基本原理，对城市进行城市绿化、污水净化、废弃物处理、合理布局等措施。
【详解】在城市规划和布局方面，要进行城市生态分区，合理分布工业区、居住区、生态绿地等，A正确；推广“环境友好技术”和低污染清洁生产工艺，以减少污染的产出，B正确；采用浮床工艺法等手段治理水污染，在浮床上种植特殊的水生、半水生植物以吸收水中的化学元素，C正确；严禁汽车上路及造纸厂、酒厂生产，一方面会严重阻滞经济发展，另一方面也不能达到“断绝污染源头”的目的，D错误。
【点睛】主要考查生态工程的基本原理的相关内容，对于城市环境的治理要把整个城市作为一个巨大的生态系统来考虑，即用生态工程的方法对城市环境进行综合治理。
13.随着“绿水青山就是金山银山”理念的提出，生态经济的重要性日益增显。下列有关叙述错误的是( )
A. 生态经济所遵循的主要原则是循环经济
B. 生态工程的特点是少消耗、低效益、可持续
C. “无废弃物农业”遵循的基本原理是物质循环再生原理
D. 在湿地的周围建立缓冲带可使湿地依靠自然演替机制恢复其生态功能
【答案】B
【解析】
【分析】
生态经济主要通过实行循环经济的原则，使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或另一系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化，实现生态经济的主要手段之一是生态工程。
【详解】生态经济的主要原则是循环经济，A正确；生态工程是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系，B错误；无废弃物农业主要是变废为宝，基本原理是物质循环再生，C正确；湿地周围的缓冲带有利于其恢复生态功能，D正确。故选B。
14.下列有关实验室果酒、果醋制作过程的叙述，正确的是( )
A. 果酒发酵瓶内留有一定空间有利于酵母菌的繁殖
B. 果酒发酵产生的酒精为醋酸菌提供碳源和氮源
C. 果醋制作时液面形成一层较厚的菌膜
D. 果醋发酵阶段酵母菌仍具有发酵能力
【答案】A
【解析】
【分析】
果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧；腐乳制作的菌种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌，属于真核细胞，条件是15-18℃，一定湿度。
【详解】果酒发酵时，瓶内要留有一定空间，以利于酵母菌的繁殖，A正确；醋酸的组成元素是C、H、O，不能为醋酸菌提供氮源，B错误；用果酒制作果醋的过程中，液面会出现一层较薄的白色菌膜，C错误；果醋发酵阶段酵母菌已经失去了发酵能力，D错误。
15.下列关于“腐乳的制作”的实验，叙述正确的是
A. 控制发酵温度的主要目的是腐乳调味
B. 加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质
C. 实验室制作的腐乳不宜直接食用
D. 成品腐乳表面的“皮”主要由细菌产生
【答案】C
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象及结论等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
【详解】控制发酵温度的主要目的是利于毛霉的生长和代谢，A错误；腐乳制作中加料酒主要是为了调节腐乳的风味，同时可以杀菌，避免腐乳变质，B错误；实验室制作的腐乳可能灭菌不彻底，不宜直接食用，C正确；成品腐乳表面的粘性物质主要由毛霉产生，是匍匐菌丝，D错误。
【点睛】腐乳是用豆腐发酵制成，多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉是一种丝状真菌具发达的白色菌丝。毛霉等微生物产生的以蛋白酶为主各种酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
16. 在选泡菜坛时，应选择火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的，其目的是( )
A. 美观 B. 可防止内部液体渗出
C. 耐用 D. 密封好，保证坛内外气体不交换
【答案】D
【解析】
试题分析：泡菜的制作离不开乳酸菌，而乳酸菌是厌氧生物，无O2时才可进行乳酸发酵产生乳酸。故选D
考点：本题考查泡菜的制作原理。
点评：本题意在考查考生的理解能力，属于容易题。
17.现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，它们适于分离的是( )
成分
KHSO4
MgSO4
NaCl
CaSO4
CaCO3
葡萄糖
淀粉
甲培养基含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
0.5%
2%
乙培养基含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
—
—
A. 甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌
B. 甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌
C. 甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌
D. 甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌
【答案】B
【解析】
【分析】
分析表格：甲培养基中含有葡萄糖和淀粉，可以作为微生物的碳源和能源，适于异养微生物生长；乙培养基中不含有机碳源，适用于自养微生物的生长。两种培养基之间的共同点是都不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。
【详解】由表格中所加成分可知，两种培养基均不含氮源，说明这两种培养基只能培养具有固氮能力的细菌。固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有葡萄糖和淀粉，可以作为固氮菌的碳源和能源，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离自养型的自生固氮菌。综上分析，B符合题意，ACD不符合题意。
故选B。
18. 某一种细菌菌株要从环境中提取现成的亮氨酸才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是
注：Ｌ—亮氨酸 Ｓ—链霉素 “＋”—加入 “—”—不加入
如：Ｌ—：不加亮氨酸 Ｓ＋：加入链霉素
【答案】B
【解析】
试题分析：表中所列均为选择培养基。根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L－、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L－、S+，故B正确。
考点：本题主要考查微生物培养和培养基的作用，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
19.测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是
A. 细菌个体小，真菌个体大
B. 细菌易稀释，真菌不易稀释
C. 细菌在土壤中数量比真菌多
D. 随机的，没有原因
【答案】C
【解析】
土壤中的微生物大约70%—90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30—300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。综上分析，C项正确，A、B、D三项均错误。
【考点定位】微生物是实验室培养
20. 要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在( 、)
A. 加入指示剂的鉴别培养基上
B. 含有蛋白胨的固体培养基上
C. 只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上
D. 含四大营养要素的培养基上
【答案】C
【解析】
试题分析：分离纤维素分解菌应该使用选择培养基而不是鉴别培养基，A错误；培养细菌的培养基都含有蛋白胨，它没有选择作用，B错误；只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌能够生存，其他微生物不能生存，可以筛选纤维素分解菌，C正确；含四大营养要素的培养基上是基本培养基，没有选择作用，D错误。
考点：培养基对微生物的选择作用
【名师点睛】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使菌落周围出现无色的透明圈。
二、多项选择题
21.大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因，某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ 基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ 基因被破坏，则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程，下列说法正确的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
【答案】ACD
【解析】
【分析】
基因工程操作中，判断重组质粒是否导入，需要依据质粒上的标记基因即本题中氨苄青霉素抗性基因，因此，筛选导入重组质粒的受体细胞，是根据质粒上的氨苄青霉素抗性基因来进行的，需要利用选择培养基进行筛选。
【详解】判断重组质粒是否导入，依据质粒上的氨苄青霉素抗性基因（标记基因），所以受体细胞应不含有氨苄青霉素抗性基因，A正确；若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色，因此如果大肠杆菌的菌落为蓝色，说明lacZ基因没有被破坏，因此pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体，B错误；选择培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素，这样可以将没有导入目的基因的大肠杆菌淘汰，C正确；白色菌落的大肠杆菌是转入了目的基因的，所以应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养，D正确。
【点睛】准确获取题图信息及图中标记基因的作用及颜色反应原理是解题关键。
22.转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来，插入另一位点。转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移，在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动。有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞。下列推测合理的是
A. 转座子不能独立进行DNA复制
B. 转座子可造成染色体变异或基因重组
C. 转座子可用于基因工程的研究
D. 细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变
【答案】BCD
【解析】
【分析】
本题考查DNA复制、生物变异的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
【详解】根据题干中“转座子是一段可移动的DNA序列，这段DNA序列可以从原位上单独复制或断裂下来”，说明转座子可以独立进行DNA复制，A错误；根据题干中“转座子可在真核细胞染色体内部和染色体间转移”，说明转座子可造成真核生物染色体变异或基因重组，B正确；根据题干中“转座子可在细菌的拟核DNA、质粒或噬菌体之间自行移动”，说明转座子可用于基因工程的研究，C正确；根据题干中“有的转座子中含有抗生素抗性基因，可以很快地传播到其他细菌细胞”，说明细菌的抗药性可来自转座子或者自身的基因突变，D正确。
【点睛】可遗传的变异有三种基因突变、染色体变异和基因重组：
（1）基因突变是基因结构的改变，包括碱基对的增添、缺失或替换。
（2）基因重组的方式有同源染色体上非姐妹单体之间的交叉互换和非同源染色体上非等位基因之间的自由组合，另外，外源基因的导入也会引起基因重组。
（3）染色体变异是指染色体结构和数目的改变。
23.下图为利用胚胎干细胞培育转基因小鼠的基本流程示意图。下列叙述错误的是
A. 过程①选择胚胎干细胞作受体细胞是因为其具有发育全能性
B. 过程②中必须通过一定方法筛选含有目的基因的胚胎干细胞
C. 过程③中导入囊胚的细胞数不同，子代小鼠的性状一定相同
D. 过程④中为提高成功率，需对代孕母鼠进行超数排卵处理
【答案】CD
【解析】
【分析】
图中涉及转基因技术、早期胚胎培养以及胚胎移植技术，胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，图中囊胚中的内细胞团中可以分离出胚胎干细胞。
【详解】胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，可以作为基因工程的受体细胞，A正确。把目的基因导入受体细胞，要经过筛选看目的基因因是否导入，选择出导入目的基因的重组细胞，B正确。导入到受体囊胚中的含目的基因细胞数不同，子代小鼠的性状可能不同，当导入到囊胚中的转基因干细胞越多，发育成的转基因基因动物中含有目的基因的部分越多，C错误。为了提高胚胎成活率，需对代孕母鼠进行同期发情处理，使之具有与怀孕鼠相同的生理状态，D错误。
24.如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图，下列相关叙述正确的是
A. 改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B. 果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C. 果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关
D. 气体入口与气体出口可以交换使用
【答案】ABC
【解析】
【分析】
根据题意和图示分析可知：图示是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，其中培养基入口能补充营养物质；气体入口能通入气体；气体出口能排出气体。
【详解】改变通入气体种类（氧气或氮气），可以研究呼吸作用类型对发酵的影响，A正确；果酒发酵中期通入氮气，酵母菌因缺氧将从有氧呼吸转变为无氧呼吸，产生酒精，B正确；由于温度能影响微生物酶的活性，所以果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关，C正确；由于气体入口的导管长，能伸到培养液中，而气体出口的导管短，没有伸到培养液中，所以气体入口与气体出口不可以交换使用，D错误。
【点睛】本题结合制作果酒和果醋的装置示意图，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及代谢类型；掌握果酒和果醋制作的装置，尤其是该装置中“三个口”的作用。
25.下列有关微生物培养的叙述，错误的是
A. 涂布接种时，涂布器经火焰灭菌后应趁热使用
B. 纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养
C. 分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离
D. 观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征
【答案】AD
【解析】
【分析】
微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。
【详解】涂布接种时，涂布器应从盛酒精的烧杯中取出，并将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，冷却后再使用，A错误；纯化培养时，培养皿应倒置放入恒温箱内静止培养，B正确；分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离，C正确；为防止空气中杂菌污染培养物，观察菌落时，不能打开培养皿的盖子，D错误。
【点睛】微生物纯化的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
三、非选择题
26.植物基因工程中，往往用光诱导型启动子(PrbcS)使目的基因表达，其结合T基因后能使目的基因更高水平表达。下图中①和②都为基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程并回答下列问题：
注：Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点。
（1）对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________，还需结合__________技术才能获得新性状的植株。
（2）中间载体通常用______________法导入微生物中扩增，含有中间载体②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培养基中生长，________（“能”或“不能”）在含有氨苄青霉素的培养基中生长。
（3）经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，经图示信息分析，Prbcs*T的长度约为____________________。据图分析，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。
（4）在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是：设计包含_________识别序列的引物，然后用PCR技术扩增。
【答案】 (1). 农杆菌转化法 (2). 植物组织培养 (3). 感受态细胞 (4). 能 (5). 不能 (6). 1.7 kb (7). HindⅢ和EcoRⅠ (8). NcoⅠ
【解析】
【分析】
本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。
【详解】（1）将目的基因导入双子叶植物常利用农杆菌转化法；要想获得转基因植物，还需要对导入目的基因的受体细胞进行植物组织培养才能获得新性状的植株；
（2）将中间载体导入微生物时常先用钙离子处理微生物使其成为感受态，易于吸收中间载体，该种方法为感受态细胞法；由图可知，中间载体②上含卡那霉素抗性基因，而不含氨苄青霉素抗性基因，故含有中间载体②PrbcS*T的微生物能在含有卡那霉素的培养基中生长，而不能在含有氨苄青霉素的培养基中生长；
（3）由图可知，中间载体②的长度为2.7kb，经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.4kb，设Prbcs*T的长度为y，则2.7-0.4+y=4kb，解得y=1.7kb；根据图示中中间载体①PrbcS*T右侧的酶切位点和中间载体②-2B右侧的酶切位点可知，中间载体②2B形成中间载体②PrbcS*T，需要使用限制酶HindⅢ和EcoRⅠ切割；
（4）可设计包含NcoⅠ识别序列的引物，然后用PCR技术扩增，即可在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点。
【点睛】基因工程中目的基因导入的受体细胞不同，选用的方法不同，一般导入双子叶植物常用农杆菌转化法，导入动物细胞常用显微注射法，导入微生物常用感受态法。运载体上常含有标记基因，可用来筛选目的基因是否导入受体细胞。
27.甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是________________________。
（2）若想培育一株新品种，既有此植物的性状还有其他植物的性状，理论上可以采用______________技术，细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的____________，该技术的优点是_______________________________。
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是_________________，A中的愈伤组织是叶肉细胞经__________形成的。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用花药离体培养，原因是__________________________________________________。
【答案】 (1). 植物细胞全能性 (2). 植物体细胞杂交 (3). 细胞壁 (4). 克服远缘杂交不亲和障碍 (5). 细胞分裂素、生长素 (6). 脱分化 (7). 不能 (8). 对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株
【解析】
【分析】
本题考查植物细胞工程的相关知识，要求考生对相关知识在透彻理解的基础上，结合题图信息分析作答，旨在考查考生的综合运用能力与语言表述能力。
【详解】（1）绿色叶片和白色花瓣是细胞分化的结果，遗传物质并没有改变，所以以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性；
（2）若想培育一株新品种，既有此植物的性状还有其他植物的性状，理论上可以采用植物体细胞杂交技术，细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁，该技术的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍；
（3）培养基中细胞分裂素与生长素的用量及使用顺序可造成如图A、B、C所示的不同的培养结果；A中的愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的；
（4）因杂合体植株花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，故用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株，因而若要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，则不能采用花药离体培养。
【点睛】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
28.科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性，进行了下列实验。
（1）将鼠细胞和人细胞在CO2培养箱中培养一段时间，用_____处理，获取实验用的单细胞悬液。
（2）将两种细胞在37℃下混合培养，在培养液中加入_______诱导融合，形成融合细胞，一般两两融合的细胞有____种。
（3）细胞膜的主要成分是______和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养，抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合，其目的是标记膜蛋白，以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和____，开始时，鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，两种颜色不混合；一段时间后，可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计______，结果如下图所示。
（4）科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一：融合细胞合成了新的膜蛋白；
假说二：原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用_______抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，均对嵌合体形成没有显著影响，这个结果否定了假说一。
②在15℃、20℃、26℃的培养温度下重复上述实验，这些实验的结果为________，为假说二提供了证据支持。
【答案】 (1). 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 (2). 灭活的病毒(或PEG) (3). 3 (4). 磷脂 (5). 分布 (6). 嵌合体比例 (7). 蛋白质合成 (8). 随着温度增加，嵌合体比例增加(或随着温度降低，嵌合体比例降低)
【解析】
【分析】
分析柱形图可知，随培养时间延长，嵌合比例明显增多，说明膜上蛋白质分子在不断的运动，具有一定的流动性。
【详解】（1）动物组织间的细胞是以蛋白质连接的，可利用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）将其水解，从而使组织分散成单个细胞；
（2）常用的诱导动物细胞融合的因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等，所以在培养基中加入灭活的病毒（或PEG）即可诱导融合；一般两两融合的细胞有3种，即鼠-鼠型、人-人型和人-鼠型；
（3）细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质；连接了荧光染料的抗体与融合细胞的膜蛋白特异性结合后，可以通过在显微镜下观察荧光染料的颜色和分布来观察膜蛋白；鼠的细胞为绿色，人的细胞为红色，一段时间后，会出现红绿荧光交替分布的“嵌合体”，则说明二者在诱导培养过程中发生一定比例的融合，统计嵌合体的比例，即可代表细胞融合的比例；
（4）①使用蛋白质合成抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞，则细胞无法合成新的膜蛋白，而嵌合体形成不受影响，说明融合细胞不合成新的膜蛋白，故结果否定了假设一；
②假说二表示原有膜蛋白在细胞膜平面上运动，随着温度的增加，代谢增加，膜蛋白的运动加快，从而可以使细胞膜的融合速率相应加快。所以实验的结果为随着温度增加，嵌合体比例增加，可以为假说二提供证据支持。
【点睛】动物细胞培养环境是含CO2的恒温培养箱内；分解动物组织细胞间隙物质通常用胰蛋白酶；诱导融合动物细胞常常有三种方法，但用诱导剂处理常使用PEG或者灭活的病毒。
29.亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO2的培养箱中培养22～24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h 更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5% CO2 的作用是_________________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________________________，步骤③中，判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到_____________。
（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_______________________、__________________________。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起________作用。
（5）本实验结果表明，______________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是__________________________________________________。
【答案】 (1). 维持培养液pH的相对稳定 (2). 染色体的着丝点排列在赤道板上 (3). 两个极体 (4). 桑椹胚 (5). 清除有害代谢产物 (6). 补充营养物质 (7). 促进 (8). 50 (9). 核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高
【解析】
【分析】
本题以亚麻酸的作用为背景，结合图表考查动物细胞培养、体外受精及早期胚胎发育的过程和识记等相关知识，旨在考查考生信息获取的能力、实验探究能力与知识的综合运用能力。
【详解】（1）步骤①（动物细胞培养）过程中，细胞培养箱中加5% CO2 的作用是维持培养液pH的相对稳定；
（2）成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期，此时染色体的行为特征是染色体的着丝点排列在赤道板上；判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体；
（3）受精卵经过卵裂期、桑椹胚可发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是清除有害代谢产物及补充营养物质；
（4）对比亚麻酸溶液0和200μmol·L-1时，核成熟卵子数和囊胚数占培养数的比例，可知浓度为200μmol·L-1时对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用；
（5）亚麻酸溶液浓度为50μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，说明50μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利。
【点睛】正确解读图表信息并明确实验设计中对照组的作用是解题关键。
30.下图表示我国南方比较常见的桑基鱼塘农业生态系统。请分析回答下列问题：
（1）在不考虑人工投入的情况下，流经该生态系统的总能量（总初级生产量）是__________________________________________________。人们将蚕沙（蚕的粪便）投入鱼塘，被鱼等水生生物食用，蚕沙中所含的能量主要属于第_____营养级。
（2）鱼等水生生物的排泄物及未被利用的有机物和底泥，其中一部分经过_____________作用后可作为肥料，返回桑基，培育桑树。池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式（上层为食浮游生物的鳙鱼，中层为食草的草鱼，下层为杂食性的鲫鱼等），从群落结构分析，这种养殖模式的优点是_________________________________________________。
（3）建立该人工生态系统的目的是实现对能量的___________，提高能量的利用率。与种植单一作物的农田相比，该生态系统的自我调节能力________。
（4）建立该生态系统遵循的原理主要是______________、________________。
【答案】 (1). 生产者（或桑树）通过光合作用固定的太阳能总量 (2). 一 (3). 分解者（或微生物）的分解 (4). 充分利用了生态系统的空间和食物资源 (5). 多级（或充分）利用 (6). 较强 (7). 物质循环再生原理 (8). 生物多样性原理
【解析】
【分析】
流经该生态系统的总能量是生产者通过光合作用固定的全部太阳能，建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染；与种植单一作物的农田相比，该生态系统生物种类多，自我调节能力强，建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理。
【详解】（1）据图示分析，生产者通过光合作用固定的太阳能总量，是流经此生态系统的总能量；蚕的粪便中的能量是上一个营养级的同化的能量，而蚕的上一个营养级是桑树，桑树属于第一营养级；
（2）鱼等水生生物的排泄物及未被利用的有机物和底泥，其中一部分经过分解者的分解作用后可作为肥料，返回桑基，培育桑树；池塘养鱼时，通常采用上-中-下式的多鱼种混合放养模式，是因为该模式充分利用了生态系统的空间和食物资源；
（3））建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率；与种植单一作物的农田相比，该生态系统生物种类丰富，故生态系统的自我调节能力较强；
（4）建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理。
【点睛】本题考查生态系统的结构和功能等相关知识，意在考查学生运用所需知识对某些生物学问题进行解释、推理作出合理的判断的能力。
31.豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了常用灭菌方法对腐败细菌的灭杀效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①豆浆变质处理 将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下，放置7d后，豆浆发生变质。
②腐败细菌的初步分离和计数 取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表：
细菌序号
菌落特征
菌落直径/mm
菌落数/个
豆浆A
豆浆B
自制豆浆
S1
表面有白色绒毛，圆形边缘不规则
5
5
3
7
S2
白色，表面无绒毛，有白色液滴
1～2
18
11
24
S3
黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑
20～30
11
7
15
③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果 以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图。
请回答下列问题：
（1）步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是__________，步骤②中培养基的常用灭菌方法是______________。
（2）步骤②中适宜采用的接种方法是______。区分菌落种类的依据是_____________。
统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以有效防止___________________________。
（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是__________；为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在___________ mg．kg-1左右。
（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的明显优点是____________________。
【答案】 (1). 干热灭菌 (2). 高压蒸汽灭菌 (3). 稀释涂布平板法 (4). 菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征 (5). 因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目 (6). S1 (7). 250 (8). 食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群
【解析】
【分析】
本题结合题图考查实验室中微生物的培养与分离计数的相关知识，旨在考查考生的识记能力与信息获取能力，结合题意综合分析作答。
【详解】（1）步骤①中常用干热灭菌法对三角瓶进行灭菌； 步骤②中培养基的常用灭菌方法为高压蒸汽灭菌；
（2）步骤②的目的是经培养后统计样品中活菌的数目，所以常采用稀释涂布平板法进行接种；菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征可作为区分菌落种类的依据；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；
（3）步骤③结果表明，随着乳酸链球菌素添加量的增加，S1细菌的数量相对值总是最多的，由此可推知，S1细菌是最能耐受乳酸链球菌素的细菌；据图可知，在乳酸链球菌素添加量较低时，随着添加量的增多，3种细菌的数量相对值相应减少，直到乳酸链球菌素的添加量达到250mg．kg-1时，3种细菌的数量相对值均达到最少，之后，随着乳酸链球菌素添加量的增多，3种细菌数量的相对值不变，由此可推知，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg．kg-1左右，即可有效防止豆浆腐败；
（4）由题干信息可知，乳酸链球菌素是由34个氨基酸组成的多肽，所以与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群。
【点睛】微生物培养的关键是无菌操作技术，无菌操作过程中的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法灭菌：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌。
32.腐乳是我国独有的发酵食品，是当今国际推崇的高营养食品。某科研机构研究了腐乳生产过程中不同浓度的食盐对腐乳中氨基酸含量和pH的影响，其中部分数据如下。请回答下列问题。
(注：后期发酵阶段是指从腐乳装瓶后直到成熟的过程)
（1）腐乳生产过程有多种微生物的参与，其中起主要作用的是_________。
（2）腐乳制备过程中，加盐可以________________________，使豆腐块变硬。
（3）由图可知，后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将________，蛋白质含量呈________趋势。这是由于前期发酵阶段________将豆腐中的蛋白质分解为小分子的物质。
（4）由表可知，后期发酵到60天时，盐度为________的腐乳已经腐败，原因是____________。
（5）综上研究结果，为了满足口味清淡消费者的需要，同时保证营养丰富、口感鲜美，在生产过程中应该使盐度控制在________左右。
【答案】 (1). 毛霉 (2). 析出豆腐中的水 (3). 上升 (4). 下降 (5). 蛋白酶 (6). 5% (7). 盐浓度过低，不足以抑制微生物的生长，导致腐败变质 (8). 8%
【解析】
【分析】
本题考查腐乳的制作过程，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
【详解】（1）腐乳制作时，起主要作用的微生物是毛霉；
（2）腐乳制备过程中，加盐可以析出豆腐中的水，使豆腐块变硬；
（3）分析题图可知：后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将上升，蛋白质含量下降；是由于发酵过程中，毛霉中的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质水解为小分子物质；
（4）发酵到60天时，盐度为5%的腐乳中氨基酸含量开始下降，说明腐乳已经腐败；原因是盐浓度太低，不足以抑制微生物生长，导致腐乳腐败；
（5）综上研究结果可知：盐度太小容易腐败，盐度太大氨基酸含量低，因此最好控制在8%左右。
【点睛】腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。
33.杨梅是浙江省的特色水果之一，为对其进行深加工，某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制，基本工艺流程如下：
请回答：
（1）在制备杨梅醋过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和_________酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是__________________。发酵一段时间后，观察到发酵罐内液面不再有__________________，说明发酵基本完毕。
（2）在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经_____________处理的木材刨花，然后加入含_________菌的培养液，使该菌_________在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的_________来调节。
（3）若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2，的产生量是_________。
A.甲罐的两倍 B.与甲罐的相等
C.甲罐的一半 D.几乎为零
（4）在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如下，该物质是__________________。
【答案】 (1). 果胶 (2). 防止空气进入 (3). 气泡冒出 (4). 灭菌 (5). 醋酸 (6). 附着 (7). 流速 (8). D (9). 酒精
【解析】
试题分析：
（1）为了提高杨梅的出汁率，使杨梅汁变得澄清，可以加入纤维素酶和果胶酶；在甲装置中的弯管中加水可以防止空气进入装置；果酒发酵过程中产物为酒精和二氧化碳，因此液面不再有气泡冒出说明发酵完毕。
（2）制备杨梅醋的过程中，乙罐内先填充经过灭菌处理的木材刨花，防止杂菌污染；然后加入含有醋酸菌的培养液，可以使该菌附着在刨花上；将杨梅酒倒入乙罐中进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可以通过控制杨梅酒的流速来调节。
（3）若甲罐中的杨梅酒全部制成杨梅醋，由于乙醇被氧化生成乙酸的过程中，不产生二氧化碳，因此乙罐中二氧化碳的产生量几乎为零，故ABC错误，D正确。
（4）杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，先进行的是酒精发酵，后代酒精被氧化为果醋，因此曲线表现的物质为酒精。
考点：本题考查果酒和果醋的制作的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
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