广东省九校联考2025-2026学年高二下学期4月学情调研试卷 生物（含解析）

这是一份广东省九校联考2025-2026学年高二下学期4月学情调研试卷 生物（含解析），共8页。试卷主要包含了选择题的作答，非选择题的作答等内容，欢迎下载使用。
本试卷共 8 页，21 题。全卷满分 100 分。考试用时 75 分钟。
注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题
卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。写
在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接写在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和
答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。
一、选择题：本题共 16 小题，1～12 题每小题 2 分，13～16 题每小题 4 分，共 40 分。在每
小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．高要金渡镇铁岗村运用生态修复工程技术，将废弃的旧村片区建设成为中国最美的乡村之一，开设了屋
顶咖啡等网红打卡点，吸引了大批游客前来观光打卡。下列相关叙述错误的是（ ）
A．应先从非生物因素入手，改善地貌条件、治理生活污水污染、修建引水工程
B．保留原有的古树，引种适应当地环境的园林植物，可提高生产者的生物量
C．生态修复工程调整了该农村生态系统的营养结构
D．通过旧村改造建设特色景观，其直接价值远大于间接价值
2．孑遗植物杪椤在肇庆鼎湖山自然保护区数量多、分布面积大。调查发现，常有害虫啃食杪椤嫩叶，影响
杪椤的生长、发育和繁殖。下列叙述正确的是（ ）
A．杪椤与害虫的种间关系不属于生态位的研究范畴
B．建立孑遗植物杪椤的自然保护区属于易地保护
C．人类活动对杪椤生存环境的破坏是杪椤种群数量减少的主要原因之一
D．鼎湖山自然保护区的生物多样性就是指生态系统多样性
3．无菌技术在微生物培养实验中十分关键。下列关于无菌技术的叙述，正确的是（ ）
A．对于操作者的双手可用紫外线进行消毒
B．不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
C．对于玻璃器皿如涂布器、培养皿等可用灼烧灭菌法进行灭菌
D．可用巴氏消毒法杀死牛奶中绝大部分微生物
4．航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述错误的是（ ）
A．体外培养心肌细胞的培养液需要定期更换以便清除代谢物
B．培养心肌细胞时既需要空气也需要适量的二氧化碳
C．正常情况下，心肌细胞在培养容器中可以不断增殖
D．心肌细胞之所以能跳动是因为心肌细胞能节律性收缩
5．如图是菊花茎段的组织培养周期，图中①～③表示相应过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．所用的外植体要先用酒精再用次氯酸钠溶液消毒处理
B．过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞
C．过程①②③所用的培养基中植物激素的比例不同，都必须给予光照
D．试管苗移栽前，应先移栽至消过毒的蛭石或珍珠岩中，有利于试管苗适应环境
6．我国对奶类的总需求量很大，奶牛品种是影响产奶量的主要因素之一，引进高产的荷斯坦奶牛价格高昂，
通过现代生物技术快速繁育良种荷斯坦奶牛是我国畜牧业的迫切需求。下图是利用体细胞核移植技术克隆
优质荷斯坦奶牛的简易流程。下列有关叙述正确的是（ ）
A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B．甲牛是遗传性状优良、生产能力强的荷斯坦奶牛
C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③将激活后的重构胚培养至原肠胚后再移植到代孕丙牛体内
7．反刍动物的瘤胃是降解纤维素的场所。现要从牛的瘤胃中分离出能够分解纤维素的微生物。下列有关叙
述正确的是（ ）
A．选择培养基中应添加大量葡萄糖，有利于培养和分离纤维素分解菌
B．完成接种后，应在无氧条件下培养，才能获得目标菌株
C．培养基中添加伊红—亚甲蓝，可用来鉴别纤维素分解菌
D．筛选出纤维素分解菌后，应使用固体培养基扩大培养
8．苹果醋因其营养丰富，具有理气消食等功效而广受人们喜爱。某同学利用苹果制作果醋，其操作的简易
流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒、果醋发酵所需菌种的细胞结构相同，所需的发酵条件不同
B．酿制过程所用的榨汁机和发酵瓶都需要用洗洁精清洗干净并用体积分数为 70%的酒精消毒
C．过程②为使菌种充分吸收营养物质，需经常开盖通气
D．过程③发酵时会有大量气泡产生，需拧松瓶盖放气
9．下图可表示细胞工程操作的一些过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．若 a、b 为白菜、甘蓝细胞的原生质体，则通过植物组织培养技术形成 c
B．若 a、b 为白菜、甘蓝细胞的原生质体，则杂种植株 d 不可育
C．若 a、b 分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，在进行体外受精时一般要把 a 细胞培养到 MⅡ期
D．若该图表示动物细胞融合过程，则最终可以培养成杂种动物 d
10．下列关于 PCR 技术的相关叙述，正确的是（ ）
A．PCR 反应体系需加入 4 种核糖核苷酸作为原料
B．利用添加核酸染料的凝胶对 PCR 产物进行电泳后，将凝胶置于 300nm 紫外灯下可观察扩增结果
C．PCR 利用了 DNA 的热变性原理，在反应体系中需添加耐高温的 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶
D．一般加入的引物有 2 种，分别与两条模板链的 5′端结合
11．某同学用新鲜洋葱作为实验材料进行 DNA 的粗提取与鉴定实验，下列关于实验的叙述错误的是（ ）
选项 试剂 操作 作用
A 研磨液 与切碎的洋葱混合研磨 溶解并提取 DNA
B 预冷的体积分数为 95%的酒精 加入离心后的上清液中 析出 DNA
C 2ml/L 的 NaCl 溶液 加入丝状物 溶解丝状物以便用于 DNA 的鉴定
D 二苯胺试剂 加入含 DNA 的 NaCl 溶液中 常温下遇 DNA 产生特定的颜色反应
12．农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛
的运用。如图为农杆菌转化法的示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A．含重组 Ti 质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组 Ti 质粒整合到植物细胞的染色体上
B．构建重组 Ti 质粒时，需用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含外源基因的 DNA 和 Ti 质粒上
的 T-DNA
C．在自然条件下，农杆菌可以侵染所有植物，并降解受体细胞的染色体 DNA
D．若在植物细胞中检测出目的基因，说明转基因植物培育成功
13．我国学者研究发现，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体（anti-GCGR-mAb），可以促
进胰岛 A 细胞增殖，诱导少数胰岛 A 细胞向胰岛 B 细胞转化，促进功能性胰岛 B 细胞再生，进而有效治疗
糖尿病。根据上述实验结果，下列叙述错误的是（ ）
A．anti-GCGR-mAb 的制备涉及动物细胞培养技术和动物细胞融合技术
B．给小鼠注射 anti-GCGR-mAb 可降低其体内胰高血糖素的含量
C．anti-GCGR-mAb 和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合
D．注射 anti-GCGR-mAb 有利于胰岛 A 细胞向胰岛 B 细胞转化
14．克隆猴“中中”和“华华”的成功培育标志着我国非人灵长类疾病动物模型研究处于国际领先水平。“中中”
和“华华”的克隆流程如图甲所示。科研人员发现：对灵长类动物供体细胞核进行表观遗传修饰，激活重构胚
的分化潜能，调控基因 A 的表达是克隆成功的关键。研究表明染色体组蛋白 H3 可被修饰酶进行动态可逆地
修饰，从而调控基因 A 的表达，如图乙所示。为了激活基因 A 的表达，研究人员将组蛋白 H3 去甲基化酶
Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理重构胚。下列相关叙述错误的是（ ）
A．研究人员用灭活的仙台病毒短暂处理，目的是使体细胞与去核细胞快速融合
B．给重构胚注入 Kdm4d 的 mRNA，可降低 H₃甲基化水平，进而促进基因 A 表达
C．TSA 可以抑制组蛋白脱乙酰酶的活性，降低组蛋白的乙酰化水平
D．克隆猴的培育过程运用了动物细胞核移植技术和胚胎移植技术
15．链霉菌 A 能产生一种抗生素 M，可用于防治植物病害，但产量很低。为提高 M 的产量，科研人员用紫
外线和亚硝酸对野生型链霉菌 A 的孢子悬液进行诱变处理，筛选 M 产量提高的突变体（M+株），以应用于
农业生产。下列有关叙述错误的是（ ）
A．M+株在全部突变体中的占比低，若要获得高产 M+株，需进行筛选
B．紫外线和亚硝酸对链霉菌 A 的孢子悬液进行诱变处理可以使其发生基因突变
C．要筛选产量高的 M+株需要检测各培养液中的 M 浓度并进行比较
D．在培养链霉菌 A 时，一般需要将培养基的 pH 调至中性或弱碱性
16．为了培育抗病毒的优良玉米，研究人员利用基因工程技术进行了相关实验，其中抗病毒基因、P 载体及
相关限制酶的切割位点如图所示。已知 P 载体上含有绿色荧光蛋白基因（GFP）和抗性基因（Kanr/Ner），
一般情况下，抗性基因在真核细胞中表达时，细胞具有新霉素抗性，在原核细胞中表达时，细胞具有卡那
霉素抗性。下列叙述错误的是（ ）
A．利用 PCR 技术扩增抗病毒基因时，应选择的引物是引物 1 和引物 4
B．构建基因表达载体应该选择 HindⅢ和 EcRI 限制酶
C．若检测到绿色荧光，则说明重组 DNA 分子成功导入受体细胞
D．在筛选转化成功的玉米细胞时，应在培养基中添加新霉素
二、非选择题：共 5 小题，共 60 分。
17．（10 分）
尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分
解，就不能更好地被植物利用。某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，回
答下列相关问题：
（1）尿素分解菌能分解尿素，是因为其能产生_________。
（2）科研小组为了从土壤中分离尿素分解菌，配制了如下培养基：
成分 葡萄糖 蛋白胨 KH2PO4 Na2HPO4 尿素 琼脂 H2O
含量 10.0g 5.0g 1.4g 2.1g 1.0g 15.0g 定容至 1L
分析培养基的成分可知，上述培养基_________（填“能”或“不能”）用于分离尿素分解菌，理由是
_____________________________________________。
（3）科研小组对尿素分解菌进行选择培养时，需要设置对照组。除空白对照，另一对照组的处理是将等量
的土壤悬浮液接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基，其目的是__________________。
（4）科研小组为测定 10g 土壤中尿素分解菌的数量，采取下列图示方法进行计数。已知步骤④获得的三个
平板的菌落数分别为 90、95、100，则每克土壤中尿素分解菌的数量约为_________个。
18．（10 分）
草莓常用匍匐茎进行营养繁殖，植株若感染病毒易传给后代，病毒在作物体内积累，会导致产量降低，品
质变差。科研人员通过一系列方法步骤，建立了草莓脱毒快速繁殖体系。回答下列问题：
（1）若培育脱毒苗，通常选取植株茎尖或根尖作为外植体的主要原因是__________________。
（2）如图是不同浓度的两种植物激素与细胞群形成芽、根、愈伤组织的关系，其中植物激素 Y 属于
__________________（选填“生长素类”或“细胞分裂素类”）激素。据图分析，激素 X 和 Y 浓度比为 1 时，
细胞__________________（选填“能”或“不能”）分化。
（3）科研人员进一步用不同浓度和比例的植物激素处理外植体，一段时间后观察结果如下表（6-BA 是细
胞分裂素类植物生长调节剂，IBA 是生长素类植物生长调节剂）：
处理组 6-BA（mg/L） IBA（mg/L） 接种数（个） 萌芽率（%） 增殖系数
1 0.5 0 12 33.3 5.4
2 0.5 0.1 12 83.3 6.6
3 0.5 0.2 12 58.3 4.3
4 1.0 0 12 50.0 3.9
5 1.0 0.1 12 41.0 3.8
6 1.0 0.2 12 33.3 3.0
萌芽率（%）=草莓外植体萌芽数/草莓外植体总接种数×100%
增殖系数=草莓组培苗增殖腋芽数/草莓组培苗总接种数
从表中可以看出，处理组_________草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组，该组激素配比可用于草莓的
快速繁殖。若上述脱毒苗需移植到大田中种植，则还需要转接到新的培养基上以诱导__________________。
19．（15 分）
单克隆抗体在临床中常用于肿瘤的治疗。长春新碱（VCR）可以抑制微管蛋白的聚合从而抑制纺锤体形成，
阻断细胞分裂。将 VCR 与单克隆抗体通过接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对癌细胞的特
异性杀伤，ADC 的作用机制如图 1 所示。回答下列问题：
（1）ADC 中接头的作用是连接药物分子。据图 1 分析，理论上接头和药物的结合在血浆中的稳定性
__________________（填“偏高”或“偏低”），在溶酶体中的稳定性_________（填“偏高”或“偏低”）。
（2）某些种类癌细胞表面会过量表达膜蛋白 PSMA。CD28 是 T 细胞表面受体，可有效激活 T 细胞。科研
人员尝试构建既能结合 PSMA，又能结合 CD28 的双特异性抗体（（PSMA×CD28），如图 2 所示。制备时，
应先将__________________分别注射到小鼠体内，分离出相应的 B 淋巴细胞。诱导 B 淋巴细胞与骨髓瘤细
胞融合，然后利用___________________________初筛出杂交瘤细胞，然后对其进行
___________________________，经多次筛选，就可以获得足够数量的两种杂交瘤细胞。再用
___________________________（方法）诱导两种杂交瘤细胞融合，筛选后置于二氧化碳培养箱中培养，以
获得更多双杂交瘤细胞。通过进一步筛选，最终成功获得双特异性抗体（PSMA×CD28）。
（3）请据图 2 分析，双特异性抗体（PSMA×CD28）能有效杀伤该类癌细胞的原因是
_____________________________________________。
20．（12 分）
科研团队想通过基因工程构建一种大肠杆菌工程菌，作为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报
警器”。其监测原理如图 1 所示，天然大肠杆菌不具备图 1 中所示基因。回答下列问题：
（1）在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有_________（选填序号）。
①四环素合成相关基因 ②GFP 基因
③TetR 基因
④RNA 聚合酶基因
（2）据图 1 分析，环境中四环素水平升高时，该种大肠杆菌工程菌的荧光_________（填“增强”“减弱”或“不
变”）。试概述该种四环素检测方法的原理：___________________________。
（3）图 2 是两个 DNA 片段、质粒及其上的限制酶的识别序列分布情况；其中质粒上的 Ampr 代表青霉素抗
性基因，ri 表示复制原点。下表是相关限制酶的识别序列与切割位点。
限制酶 EcRI XbaI SpeI BamHI
识别序列及切 5′-G↓AATTC-3′ 5′-T↓CTAGA-3′ 5′-A↓CTAGT-3′ 5′-G↓GATCC-3′
割位点 3′-CTTAA↑G-5′ 3′-AGATC↑T-5′ 3′-TGATC↑A-5′ 3′-CCTAG↑A-5′
研究人员设计了一个含 DNA 片段 1 和 2 拼接的重组质粒的拼接方案。结合图表信息，你认为最终建构成功
的重组质粒示意图最合理的是_________。
（4）从个体水平，可通过____________________________________来鉴定大肠杆菌工程菌是否构建成功。
（5）为提高对环境中四环素水平监测的有效性，研究人员将 GFP 的第 65 位丝氨酸变成苏氨酸后，增强了
绿色荧光稳定性和强度。该项技术属于__________________（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。
21．（13 分）
人诱导多能干细胞（hiPSCs）是通过将特定转录因子导入成熟细胞中，使其重新编程为类似 ES 细胞的多能
性干细胞。将 hiPSCs 诱导分化为内皮细胞的三个阶段如图所示，其中 CHIR、BMP4、FGF2、VEGF 为定向
诱导分化因子。回答下列问题：
（1）在诱导 hiPSCs 细胞分裂分化的过程中，需在培养液中加入_________等一些天然成分，同时需提供一
定的气体环境，其中 CO2 的主要作用是____________________________________。
（2）与使用外源 ES 细胞相比，利用患者体细胞诱导得到的 hiPSCs 细胞治疗某些疾病时具有的优势有
___________________________（写出两点）。
（3）内皮细胞的形成过程受细胞中 Wnt 信号通路的调控。研究发现，组蛋白去乙酰化酶 5（HDAC5）的表
达情况在内皮细胞形成中有显著变化。为研究 Wnt 信号通路与 HDAC5 表达情况的关系，研究者利用 CHIR
（Wnt 信号通路激活剂）和 IWP2（Wnt 信号通路抑制剂）进行了相关实验，将各组表达的 HDAC5 进行电
泳，结果如下图。据此分析，Wnt 信号通路与 HDAC5 表达的关系是：Wnt 信号通路_________（填“抑制”
或“促进”）HDAC5 的表达。
（4）为进一步确定 HDAC5 在内皮细胞形成三个阶段中的作用，研究者将 HDAC5 抑制剂 BML210 分别加
入三个阶段的培养基中，检测三个阶段分化的标志物 BraT、CD31、CD144 的表达量，结果如下图。据此分
析，HDAC5 对内皮细胞分化的三个阶段的作用分别是_____________________________________________。
（5）根据 HDAC5 的作用分析，其对三个阶段的调控作用机理可能是通过___________________________，
从而在不同阶段对分化所需的关键基因表达起到调控的作用。
高二年级 4 月份学情调研
生物学参考答案及解析
一、选择题
1.D【解析】生态修复需优先改善非生物环境（如地貌、水体），为生物群落恢复奠定基础，A 正确；构建
本地植被体系可提高生产者生物量，增强生态系统稳定性，B 正确；生态修复通过调整物种组成，改变食物
链和食物网结构，即调整营养结构，C 正确；生物多样性的间接价值明显大于直接价值，D 错误。
2.C【解析】研究某种植物的生态位，通常要研究它在研究区域内的出现频率、种群密度、植株高度等特征，
以及它与其他物种的关系等，A 错误；生物多样性的保护分为就地保护和易地保护两大类，建立自然保护
区属于就地保护，B 错误；人类活动对桫椤生存环境的破坏是桫椤种群数量减少的主要原因之一，C 正确；
鼎湖山自然保护区保护的生物多样性包括遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性，D 错误。
3.D【解析】操作者的双手不能用紫外线消毒，可用酒精擦拭消毒，A 错误；一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋
白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，B 错误；不是所有的玻璃器皿都用灼烧灭菌，培养皿用干热灭菌法
进行灭菌，C 错误；牛奶不耐高温，可用巴氏消毒法杀死牛奶中绝大部分的微生物，并且基本不会破坏牛奶
的营养成分，D 正确。
4.C【解析】培养心肌细胞必须保证环境是无毒无菌的，培养液需要定期更换以便清除代谢物，防止细胞代
谢物积累对细胞自身造成危害，A 正确；培养心肌细胞时既需要空气（有助于进行有氧呼吸）也需要二氧
化碳（有助于维持培养液的 pH），B 正确；正常情况下心肌细胞在培养容器中不可以不断增殖，C 错误；心
肌细胞具有节律性收缩的特征，D 正确。
5.C【解析】菊花茎段接种前，外植体要进行消毒处理，先用酒精消毒后再用次氯酸钠溶液处理，A 正确；
过程②是愈伤组织经再分化形成胚状体的过程，故经过再分化能形成不同种类的细胞，B 正确；过程①②③
所用培养基的成分、浓度不完全相同，如细胞分裂素和生长素的浓度和比例不同，过程①一般不需要在光
照条件下进行，C 错误；把试管苗移栽到土壤中，先要把幼苗移栽到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其
长壮后再移栽到土壤中，以利于菊花适应环境，D 正确。
6.B【解析】后代丁的细胞核遗传物质来自甲，细胞质遗传物质来自于乙牛，丁的遗传性状是由甲和乙的遗
传物质共同决定，A 错误；甲牛是供体，是遗传性状优良、生产能力强的荷斯坦奶牛，B 正确；过程②常使
用显微操作去核法对 MⅡ期的卵母细胞进行处理，C 错误；过程③将激活后的重构胚一般培养至桑葚胚或
囊胚阶段后移植，D 错误。
7.B【解析】筛选纤维素分解菌的选择培养基一般以纤维素为唯一碳源，如果加入了较多的葡萄糖作为碳源，
则无法达到筛选目的，A 错误；瘤胃为厌氧环境，其中的纤维素分解菌为厌氧菌，需在无氧条件下培养才
能获得目标菌株，B 正确；伊红—亚甲蓝培养基用于鉴别大肠杆菌，纤维素分解菌的鉴别需用刚果红染色法，
C 错误；扩大培养的目的是提高菌体数量，应使用液体培养基，固体培养基主要用于分离单菌落，D 错误。
8.B【解析】果酒发酵的菌种是酵母菌，是真核生物，条件是 18~30℃，初期需氧，后期不需氧；果醋发酵
的菌种是醋酸菌，是原核生物，适宜温度为 30~35℃，需要持续通入氧气。两者的细胞结构不同，发酵条件
也不同，A 错误；酿制过程所用的榨汁机和发酵瓶都需要用洗洁精清洗干净并用体积分数为 70%的酒精消
毒，晾干备用，B 正确；过程②为果酒发酶，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，若多次开盖会引入氧气抑
制无氧呼吸并增加杂菌污染风险，C 错误；醋酸菌为好氧微生物，发酵过程中要保证通气，不能盖盖，同时
也没有大量的气泡产生，因此不存在拧松瓶盖的操作，D 错误。
9.C【解析】如果 a、b 分别表示白菜和甘蓝细胞的原生质体，则通过植物体细胞杂交技术形成 c，A 错误；
杂种植株白菜—甘蓝体细胞中存在两种生物的染色体组，一种是白菜的体细胞染色体组，一种是甘蓝的体
细胞染色体组，存在同源染色体。减数分裂时能两两配对，产生正常配子，故可育，B 错误；如果 a、b 分
别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，在进行体外受精前一般要把卵母细胞培养到 MⅡ期，C 正确；如果
图中表示动物细胞融合过程，则 d 最终可以培养成杂交细胞群，不能培养出动物个体，D 错误。
10.B【解析】PCR 的原理是 DNA 复制，DNA 的单体是脱氧核糖核苷酸，故需要四种脱氧核苷酸为扩增原
料，A 错误；琼脂糖凝胶制备过程中加入的核酸染料能与 DNA 分子结合，凝胶中的 DNA 分子通过染色，
可以在波长为 300nm 的紫外灯下被检测出来，B 正确；PCR 利用了 DNA 的热变性原理，通过调节温度来
控制 DNA 双链的解聚与结合，PCR 扩增的只是两个引物之间一小段特定区域，每个循环都是从引物开始完
整合成，没有断点需要连接。故在反应体系中需添加耐高温的 DNA 聚合酶，但不需要添加 DNA 连接酶，
C 错误；一般加入的引物有 2 种，分别与两条模板链的 3′端结合，D 错误。
11.D【解析】研磨液与切碎洋葱混合研磨的作用是溶解并提取 DNA，A 正确；预冷体积分数为 95%的酒精
的作用为析出 DNA，使 DNA 与杂质分开，B 正确；浓度为 2ml/L 的 NaCl 溶液的作用为溶解丝状物以便
用于 DNA 的鉴定，C 正确；将二苯胺试剂加入含 DNA 的 NaCl 溶液中，需在沸水中加热 5 分钟，待试管冷
却后，才能看到颜色变化，D 错误。
12.B【解析】含重组 Ti 质粒的农杆菌侵染植物细胞后，T-DNA 整合到植物细胞的染色体 DNA 上，A 错误；
在构建重组质粒时需要同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有外源基因的 DNA 与 Ti 质粒上的
T-DNA，再利用 DNA 连接酶将目的基因片段与质粒拼接起来形成重组质粒，B 正确；农杆菌在自然条件下
侵染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有侵染能力，不可以侵染所有植物。Ti 质粒上的 T-DNA
转移到被侵染的细胞，整合到该细胞的染色体 DNA 上，并不能降解受体细胞的染色体 DNA，C 错误；植
物细胞中检测到目的基因并不能说明转基因植物培育成功，还需要进一步检测与鉴定，D 错误。
13.B【解析】anti-GCGR-mAb 属于单克隆抗体，其制备涉及动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，A 正
确；anti-GCGR-mAb 可以促进胰岛 A 细胞增殖；胰岛 A 细胞可能分泌胰高血糖素，可见给小鼠注射
anti-GCGR-mAb 可能提高其体内胰高血糖素的量，B 错误；结合题干信息可知，anti-GCGR-mAb 和胰高血
糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合，C 正确；结合题干信息可知，胰高血糖素单克隆抗体可能诱导少数
胰岛 A 细胞向胰岛 B 细胞转化，D 正确。
14.C【解析】诱导动物细胞融合的方法有 PEG 融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，研究人员用灭活的
仙台病毒短暂处理的目的是使体细胞与去核细胞快速融合，从而实现核移植，A 正确；给重构胚注入 Kdm4d
的 mRNA，表达组蛋白 H3 去甲基化酶。根据图乙，该酶可降低组蛋白 H3 甲基化水平，进而促进基因 A 表
达，B 正确；TSA 是组蛋白脱乙酰酶抑制剂，可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，从而提高组蛋白的乙酰化
水平，C 错误；克隆猴的培育过程运用了动物细胞核移植技术和胚胎移植技术，D 正确。
15.D【解析】因为基因突变频率低，所以孢子悬液中突变体占比很低；因为基因突变的随机性、不定向性，
所以 M+株在全部突变体中的占比低，要获得 M+株，需进行筛选，A 正确；紫外线和亚硝酸对链霉菌 A 的
孢子悬液进行诱变处理可以使其 DNA 的碱基序列改变从而诱发基因突变，B 正确；因为基因突变具有不定
向性，所以即使发生了基因突变，也不一定是产量高的 M+株，要筛选产量高的 M+株需要检测培养液中的
M 浓度进行比较，C 正确；在培养链霉菌 A 时，一般需要将培养基的 pH 调至酸性，D 错误。
16.C【解析】PCR 技术扩增目的基因时，引物要分别与目的基因两条链的 3′端结合，子链从 5′→3′延
伸。结合图中抗病毒基因的结构和引物位置，应选择引物 1（与 A 链 3′端结合）和引物 4（与 B 链 3′端
结合），A 正确；由于 XhI 会切断抗病毒基因，且 EcRI 可破坏 GFP 基因（可根据 GFP 基因是否表达判断
是否插入目的基因），如果选择的限制酶是 HindⅢ和 SmaⅠ，则不利于区分重组 DNA 分子和空载质粒，如
果选择的限制酶是 HindⅢ和 EcRI，则便于重组 DNA 分子的筛选，B 正确；由于 EcRI 可破坏 GFP 基因，
则含有重组 DNA 分子的受体细胞不会发绿色荧光，C 错误；由题意可知，抗性基因 Kanr/Ner 在真核细胞
中表达时，细胞具有新霉素抗性，在原核细胞中表达时，细胞具有卡那霉素抗性。玉米细胞是真核细胞，
抗性基因表达后具有新霉素抗性，故在筛选转化成功的玉米细胞时，应在培养基中添加新霉素，D 正确。
二、非选择题
17.（10 分）
（1）脲酶（2 分）
（2）不能（2 分） 培养基中的尿素和蛋白胨均可以作为氮源，能以尿素作为氮源与不能以尿素作为氮源
的微生物均能生长，无法达到筛选的目的（2 分）
（3）确定该选择培养基有选择作用（2 分）
（4）9.5×106（2 分）
【解析】（1）尿素分解菌可以产生脲酶，因此可以分解尿素。
（2）分析该培养基成分可知，培养基中蛋白胨、尿素都可以作为氮源，尿素不是唯一氮源，因此该培养基
不能用于筛选尿素分解菌。
（3）若与选择培养基相比，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落较多，则说明培养基有选择作用。若两者的菌落
数无明显差异，则说明培养基无选择作用。
（4）微生物计数时应选择菌落数在 30~300 的平板进行计数，图示过程稀释了 104 倍，则 1g 土壤中尿素分
解菌数量约为（90+95+100）÷3÷0.1×104=9.5×106 个。
18.（10 分）
（1）茎尖或根尖分生区附近的病毒极少，甚至无病毒（2 分）
（2）生长素类（2 分） 不能（2 分）
（3）2（2 分） 生根（2 分）
【解析】（1）若培育脱毒苗，由于分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此通常选取植株分生组织（如
茎尖或根尖）作为外植体。
（2）据题图可知，生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时（大于 1），有利于根的分化、抑制芽的形成；
比值低时（小于 1），有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时（等于 1），促进愈伤组织的形成。所以
图中激素 Y 是生长素，激素 X 是细胞分裂素。比值适中时（等于 1），促进愈伤组织的形成，不会分化。
（3）从表中可以看出，处理组 2 草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组，该组激素配比可用于草莓的快
速繁殖。若将上述脱毒苗移植到大田中种植，还需要诱导生根。
19.（15 分）
（1）偏高（2 分） 偏低（2 分）
（2）PSMA、CD28（2 分） 选择培养基（2 分） 克隆化培养和抗体检测（2 分） 灭活病毒融合法（PEG
融合法、电融合法）（写出一种方法即可）（2 分）
（3）双特异性抗体（PSMA×CD28）可同时结合癌细胞表面抗原 PSMA 和 T 细胞表面受体 CD28（1 分），
前者可使双特异性抗体准确地和癌细胞结合（1 分），后者可有效激活 T 细胞，增强 T 细胞对癌细胞的杀伤
能力（1 分）（共 3 分）
【解析】（1）为了药物能准确的在肿瘤细胞中释放，就需要接头和药物在血浆中运输时稳定结合，即理论
上接头和药物的结合在血浆中的稳定性偏高，在肿瘤细胞的溶酶体中接头和药物结合的稳定性偏低，将药
物释放出来。
（2）科学家的目的是构建既能结合 PSMA，又能结合 CD28 的双特异性抗体（PSMA×CD28），所以 PSMA
和 CD28 相当于抗原，需要先注入小鼠体内，获得两种 B 淋巴细胞，将两种 B 淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细
胞融合后经过筛选得到既能产生所需抗体又能无限增殖的两种杂交瘤细胞。两种杂交瘤细胞可在 PEG 或灭
活病毒等条件下融合，融合后双杂交瘤细胞还需进行抗体检测和克隆化培养才能获得能产生足够数量所需
的双特异性抗体（PSMA×CD28）的双杂交瘤细胞。
（3）双特异性抗体（PSMA×CD28）可同时结合癌细胞表面抗原 PSMA 和 T 细胞表面受体 CD28，前者可
使双特异性抗体准确地和癌细胞结合，后者可有效激活 T 细胞，促进 T 细胞增殖分化，增强 T 细胞对癌细
胞的杀伤能力。
20.（12 分）
（1）②③（2 分）
（2）增强（2 分） 四环素可解除 TetR 蛋白对 GFP 基因表达的抑制作用（1 分），并使大肠杆菌工程菌的
GFP 蛋白表达量随四环素水平的增加而增加（1 分）（共 2 分）
（3）D（2 分）
（4）观察环境中四环素浓度变化是否能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变（2 分）
（5）蛋白质工程（2 分）
【解析】（1）据图 1 分析可知，TetR 基因表达 TetR 蛋白，TetR 蛋白抑制 RNA 聚合酶与启动子 2 的结合，
抑制 GFP 基因表达绿色荧光蛋白。四环素可以
抑制 TetR 蛋白的作用，因此当环境中没有四环素时，GFP 基因不表达；当环境中有四环素时，四环素能够
解除 TetR 蛋白对启动子 2 的抑制作用，最终使菌体发出绿色荧光。因此可以通过检测荧光强弱来判定环境
中的四环素浓度，需导入天然大肠杆菌的目的基因有②③。
（2）据（1）分析可知，环境中四环素水平越高，抑制 TetR 蛋白作用越强，解除 TetR 蛋白对启动子 2 的抑
制作用的能力越强，GFP 基因表达能力越强，荧光就会增强。因此，该种四环素检测方法的原理：四环素
可以打破（解除）TetR 蛋白对 GFP 基因表达的抑制作用，并使大肠杆菌工程菌的 GFP 蛋白表达量随四环素
水平的增加而增加。
（3）据图 2 分析可知，DNA 片段 1 两端的限制酶识别序列分别对应 XbaⅠ和 EcRⅠ，而 DNA 片段 2 两
端的限制酶识别序列对应 SpeⅠ和 BamHⅠ，若要让两个 DNA 片段连接在一起，需要经酶切后获得相同的
黏性末端。据表格分析，XbaⅠ和 SpeⅠ酶切能获得相同的黏性末端，拼接后启动子 1 和启动子 2 是反向连
接的，如图 CD 所示，两个片段经连接后的序列既不能被 SpeⅠ酶切，也不能被 XbaⅠ酶切，综上所述，ABC
错误，D 正确。故选 D。
（4）大肠杆菌工程菌建构的目的是监测残留在生物组织或环境中的四环素水平，因此构建成功的标志就是
四环素浓度变化能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变。
（5）该项技术最终改变的是 GFP（蛋白质）的结构，属于蛋白质工程。
21.（13 分）
（1）血清/动物血清（2 分） 维持培养基 pH 相对稳定（2 分）
（2）避免伦理争议和不发生免疫排斥反应（2 分）
（3）抑制（2 分）
（4）HDAC5 在第一、三阶段抑制内皮细胞分化（即分别抑制中胚层细胞、内皮细胞的形成），在第二阶段
促进内皮细胞分化（即促进血管前体细胞的形成）（3 分，每个阶段的作用 1 分）
（5）改变相关组蛋白的乙酰化水平（2 分）
【解析】（1）动物细胞培养过程中，需要在培养基中添加血清等一些天然成分，同时需要提供 95%的空气+
5%CO2 的气体环境，其中 CO2 的主要作用是维持培养基的 pH 相对稳定。
（2）ES 细胞即胚胎干细胞，使用 ES 细胞治疗会面临伦理争议，且使用外源细胞会发生免疫排斥，所以与
使用外源 ES 细胞相比，利用患者体细胞诱导得到的 hiPSCs 细胞治疗某些疾病时具有避免伦理争议和不发
生免疫排斥反应等优点。
（3）由图可知，在同时使用 CHIR 和 IWP2 时 HDAC5 的量与不使用 CHIR 和 IWP2 时 HDAC5 的量相差不
大，在单独使用 CHIR 处理时，HDAC5 的量显著减少，说明该过程中 CHIR 激活 Wnt 信号通路，抑制 HDAC5
的表达。
（4）由图可知，第一阶段加入 HDAC5 抑制剂 BML210 后，BraT 含量增多，会促进内皮细胞的分化，第二
阶段加入 HDAC5 抑制剂 BML210 后，CD31 减少，会抑制内皮细胞的分化，第三阶段加入 HDAC5 抑制剂
BML210 后，CD144 含量增多，会促进内皮细胞分化。可推知 HDAC5 在第一、三阶段抑制内皮细胞分化（即
分别抑制中胚层细胞、内皮细胞的形成），在第二阶段促进内皮细胞分化（即促进血管前体细胞的形成）。
（5）由于 HDAC5 是一种组蛋白去乙酰化酶，其对三个阶段的调控机理可能是通过改变相关组蛋白的乙酰
化水平，从而在不同阶段对分化所需的关键基因起到调控的作用。