江西南昌市第二中学2025-2026学年度下学期高二生物月考（含答案解析）

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这是一份江西南昌市第二中学2025-2026学年度下学期高二生物月考（含答案解析），共20页。
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一、选择题:本大题共16小题，每小题3分，共48分。
1.江西特色发酵食品种类丰富,腐乳、米酒、霉鱼、酸豆角等都是极具地方风味的传统美食。下列有关说法正确的是
A．制作永叔公腐乳时,豆腐上长出白毛是因为来自豆腐中的曲霉大量繁殖
B．制作赣南客家米酒时,糯米蒸熟后需立即加入酵母菌,以减少杂菌污染
C．制作吉安霉鱼时,加酒加盐腌制可以抑制细菌的生长繁殖,以免变质
D．制作赣南酸豆角时,压实后密封发酵的原理主要是醋酸菌发酵产醋酸
2.在实验室进行微生物培养的过程中,无菌技术发挥了重要的作用,下列关于无菌技术的说法错误的是
A．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭,可在常温下长期保存
B．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100kPa、121℃,维持15 30min
C．接种环、接种针可用灼烧灭菌,培养基一般进行湿热灭菌
D．做好灭菌工作后,要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触
3.我国是全球最大的发酵产品生产国,下图为发酵工程的基本环节,其中
①
④代表不同的过程。下列叙述正确的是
A．①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种,是发酵工程的中心环节
B．啤酒发酵和果醋发酵时, ②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养
C．在 ③过程中,发酵罐与配制好的培养基不需要经过严格的灭菌处理
D．④过程可用过滤、沉淀等方法从微生物细胞中提取单细胞蛋白
4.江西省林科院针对稀缺药用植物瓜子金,以带芽茎段为外植体,构建植物组织培养快繁体系。下列关于该过程的叙述正确的是
A．带芽茎段外植体经再分化形成愈伤组织,该细胞没有固定的形态结构
B．愈伤组织培养阶段需给予充足光照,促进叶绿素合成以利于光合作用
C．脱分化过程的关键是细胞恢复未分化状态,失去原有特定的生理功能
D．该技术依据的原理是植物细胞的全能性,培育的试管苗可直接移栽入土
5.三维细胞培养技术,是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比,三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境,能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用(如下图)。下列关于三维细胞培养的叙述正确的是
A．采用与二维相同的胃蛋白酶处理进行传代,以保证细胞充分分散
B．不存在接触抑制,因此三维细胞培养的细胞增殖速率比二维的更快
C．培养过程中需要持续通入95%CO2和5%O2以维持细胞代谢的正常需求
D．培养液需加入糖类、氨基酸、无机盐、维生素等成分,通常还需加入血清
6.我国科研人员利用自体诱导多能干细胞(iPSC)治疗帕金森病,在不改变基因序列的情况下重新激活或抑制相关基因的表达,从而改变细胞分化状态以达到治疗的目的。下列相关叙述错误的是
A．重新激活或抑制相关基因的表达的过程,细胞核内的遗传物质不会发生定向改变
B．直接将特定蛋白导入细胞中或用小分子化合物来诱导都能形成iPSC
C．与核移植技术一样,利用iPSC治疗帕金森病的过程也利用了细胞核的全能性
D．胚胎干细胞疗法比iPSC治疗帕金森病的疗法更具伦理争议,应该严格审查
7.猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰。我国科学家采用一定的技术手段对猴的克隆胚胎进行处理(如图),提高了克隆成功率。下列分析错误的是
A．成纤维细胞应注入去除纺锤体-染色体复合物的食蟹猴MII期卵母细胞
B．克隆猴的性状与杂种雌猴、食蟹猴以及恒河猴的遗传物质均有密切关系
C．Kdm4d的mRNA和酶TSA可通过影响表观遗传促进胚胎细胞正常分化
D．重组囊胚需要移植到健康且繁殖能力正常的代孕母猴体内才能获得后代
8.紫杉醇是全球最重要的抗癌药物之一,某研究机构设计了如下两个路径来提取。有关叙述正确的是
A．紫杉醇属于次生代谢物,是植物基本的生命活动所必需的产物
B．通过途径一获得脱毒苗一般选用茎尖等顶端分生区作为外植体
C．路径二中使用胰蛋白酶能够有效地将细胞分散开,有利于悬浮培养
D．两个路径均通过植物组织培养获得紫杉醇,原理是植物细胞的全能性
9.某小组以香蕉为材料进行“DNA粗提取与鉴定”实验,其步骤为：研磨→过滤→析出→鉴定。下列说法正确的是
A．利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精
B．DNA粗提取时,通过离心研磨液可以加速DNA的沉淀
C．鉴定DNA时,实验组和对照组都要加入二苯胺试剂
D．在“鉴定”操作中观察到蓝色越深,说明DNA纯度越高
10.基因工程的实施需要借助工具才能完成。下列说法错误的是
A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,能识别特定的核苷酸序列
B．用作载体的质粒上常含有抗生素合成基因,便于重组DNA分子的筛选
C．T4 DNA连接酶可以催化磷酸二酯键的形成,从而将两个DNA片段相连
D．限制酶切割DNA一次可断开2个磷酸二酯键,产生2个游离的磷酸基团
11.限制性内切酶EcRI识别并切割双链DNA(5’-GAATTC-3’),用EcRI完全酶切果蝇基因组DNA,理论上得到DNA片段的平均长度(碱基对)约为
A．6
B．250
C．4000
D．24000
12.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a、b的识别序列和切割位点如图表所示。下列有关说法正确的是
A．酶a与酶b产生的末端相同,因此无序列的特异性
B．酶a与酶b切出的末端不能用DNA连接酶连接
C．该DNA分子中酶a与酶b的识别序列的数目相同
D．若该线性DNA仅用酶b完全切割,得到产物有3种
13.莠去津是一种含氮农药,在土壤中不易降解。为修复被其污染的土壤,某科研小组分离到M和N两种莠去津降解菌,将总菌量相同的M、N、M+N(M：N=1：1)分别接种于含有等量莠去津的葡萄糖氯化钠液体培养基中,培养一段时间后测定莠去津的残留率(残留率=剩余量/添加量× 100%),结果如表。下列叙述正确的是
A．从土壤中筛选得到莠去津降解菌应选用以莠去津为唯一氮源的培养基
B．两种降解菌降解莠去津效果接近,联合使用后降解效果优于单独使用
C．可用平板划线法对培养液中的降解菌进行计数,以确定初始接种量一致
D．若要进一步探究两种降解菌的最佳配比,需设置多组M：N比例不同的实验组
14.为解决良种奶牛快速繁殖问题,科研人员计划利用胚胎工程技术进行产业化生产。下列关于胚胎工程的叙述,正确的是
A．胚胎移植前,对供体和受体均需用激素进行超数排卵和同期发情处理
B．体外受精前,需对采集到的卵母细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理
C．若要选择特定性别的胚胎,需选择囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定
D．通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的方式都属于无性生殖
15.限制酶是基因工程中必需的工具之一,下图表示六种限制酶的识别序列及切割位点。下列说法错误的是
限制酶识别序列和切割位点限制酶识别序列和切割位点
BamH I 5"-GGATCC-3" Bgl Ⅱ 5"-AGATCT-3"
Sau3 A I 5"-GATC-3" Kpn I 5"-GGTACC-3"
Acc65 I 5"-GGTACC-3" EcR I 5"-GAATTC-3"
A．限制酶、DNA聚合酶均作用于磷酸二酯键,解旋酶和DNA连接酶均作用于氢键
B．分别用Sau3A Ⅰ和Bgl Ⅱ切割同一种随机序列DNA,前者得到的片段数往往多于后者
C．Acc65 Ⅰ和Kpn Ⅰ切割产生的片段,经DNA连接酶连接后能重新被Kpn Ⅰ切割
D．BamH I和Sau3A I切割产生的片段,经DNA连接酶连接后能重新被Sau3 A I切割
16.某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸,从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖,而其突变株则不能。已知图1色氨酸合成途径中涉及的酶均不能进出细胞,而中间产物积累到一定程度可分泌到细胞外。将突变株TrpB−、TrpC−、TrpE−(仅图1中的某一步受阻)分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域,培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖,继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖,而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是
A．培养短时间内有少量细菌生长增殖可能是因为该培养基中含有少量色氨酸
B．划线接种时需在每次划线后都对接种环进行消毒处理,防止三种细菌混合
C．Ⅱ区域的一端菌株继续生长是由于TrpC−利用TrpB−提供的吲哚合成了色氨酸
D．Ⅲ区域两端的TrpE−菌株都不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶
二、非选择题:本大题共5小题，第17-20小题每小题10分，第21小题12分，共52分。
17.杨梅果醋具有促进消化、抗氧化等功效,其加工工艺流程如图所示,图中A、B表示参与发酵的菌种。回答下列问题：
(1)菌种A和B的最适生长温度分别是_________。
(2)杨梅果醋酿制一般是在酒精发酵后进行醋酸发酵,其中利用酒精作为底物发酵产生醋酸的反应式是___________。
(3)杨梅脱核压榨后,加入蔗糖可改善果酒的口感,同时提高发酵产生酒精量。但研究人员发现若过量加入则会使发酵减慢或停止,其原因可能是______。
(4)欲从果醋培养液中纯化醋酸菌,若用含碳酸钙的固体培养基培养,可通过观察________初步筛选出目标菌落。若采用平板划线法纯化醋酸菌,接种环在培养基上连续划线的目的是___________。
(5)进行纯化培养时通常需要将接种培养基与一个空白培养基同时培养,目的是_______。
18.营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后,代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌的高丝氨酸缺陷型菌作为赖氨酸的发酵菌株,下图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得高丝氨酸缺陷型并进行筛选的示意图。回答下列问题：
(1)过程
①将紫外线照射过的野生谷氨酸棒状杆菌菌液(原菌液),稀释10倍接种在培养基甲上培养,该接种方法称为__________。补充具体的实验步骤：
①取0.1mL稀释后的菌液,添加到培养基表面。
②将涂布器从盛有酒精的烧杯中取出,放在火焰上灼烧,____________,再进行涂布。
③用涂布器将菌液________________。
(2)过程
②向甲中加入的物质是_______,对比甲、乙中菌落的生长状况,可初步检测出,高丝氨酸缺陷型菌种是_____₍填“菌落A”或“菌落B”)。
(3)为了研究菌株的诱变率,需要对平板上的菌落进行计数。甲平板上统计菌落的结果往往比活菌实际数目少,原因是_______。
(4)生长圈法是基于营养缺陷型指示菌与目的菌株共生关系建立的微生物筛选技术。工业上常用大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌,筛选出谷氨酸棒状杆菌高产赖氨酸菌株。下图表示初筛目的菌株时,某一不含赖氨酸的平板上菌落及生长圈的形成情况。图中微生物____₍填序号)最可能是初筛时被选中的目的菌株。
19.不对称体细胞杂交是指利用X射线破坏供体细胞的染色质,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合,培育能产生紫杉醇的柴胡,过程如图所示。回答下列问题：
注：X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位或染色体消除,使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂。
(1)过程
②常用________处理红豆杉和柴胡细胞,从而获得二者的原生质体。图中A处理是________。处理得到的原生质体置于适宜浓度的甘露醇溶液中,以维持渗透压。
(2)植物原生质体融合与动物细胞融合的方法的区别是_________。
(3)过程
④中,再分化阶段所用培养基中当植物激素X多Y少时,未分化细胞群将分化出芽,则植物激素X、Y的名称分别是________。
(4)采用二乙酸荧光素(FDA)法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光,当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质,该荧光物质不能透过活细胞质膜,会留在细胞内发出荧光。为了研究不同浓度的碘乙酰胺对原生质体活力的影响,请以本题中对应的原生质体为材料设计实验,补充实验过程：
①分组：将置于甘露醇溶液中的生理状态相同且良好的_______随机均分为若干组；
②处理：_______________；
③检测：一段时间后,__________。
20.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。某些种类癌细胞表面有高表达的蛋白PSMA,CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于癌细胞与T细胞聚集。图甲为科研人员尝试构建的双特异性抗体PSMA× CD28生产流程图；图乙为双特异性抗体PSMA× CD28的结构及作用机理图。回答下列问题：
(1)据图甲分析可知,制备PSMA× CD28双特异性抗体的过程中,涉及到的动物细胞工程技术主要有______________、______________。
(2)制备双特异性抗体PSMA× CD28时,应先将_______₍填物质X的名称)分别注射到小鼠体内再从______中分离出相应的B淋巴细胞。
(3)将上述B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,接种至含次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)的HAT培养基进行筛选。已知A可阻断DNA的从头合成途径(D途径),但含有HGPRT酶的细胞可利用H和T为原料补救合成DNA(S途径)而存活。HAT培养基中只有杂交瘤细胞能够存活,据此推测具有HGPRT酶的细胞是__________。
(4)将上述的杂交瘤细胞进行_____________,经多次筛选,就可获得足够数量的所需的杂交瘤细胞。得到的杂交瘤细胞进行融合、筛选后,最终获得双杂交瘤细胞A× B.
(5)将双杂交瘤细胞A× B在____________₍条件)培养,可获得大量的双特异性抗体。据图分析,抗体是由两条H链和两条L链组成的4条肽链的对称结构。从抗体结构的角度分析,双杂交瘤细胞会产生多种抗体的可能原因是_________。
21.动物的某种退行性神经疾病由基因A突变为基因a导致,下图1表示基因A、基因a的部分结构及Hind Ⅲ切割位点。图2表示科学家利用基因编辑(CRISPR/Cas9)技术和其他生物技术为治疗该疾病提供新思路的示意图。回答下列问题：
(1)从碱基的角度分析,基因A突变为基因a的突变类型为_______。已知Alu I限制酶识别序列及切割位点为,现用Hind Ⅲ和Alu I分别完全酶切基因a,形成的末端分别称为_______。为了将Alu I切割产生的末端相连,可使用的DNA连接酶是______。
(2)利用CRISPR/Cas9编辑基因时,Cas9蛋白依据sgRNA片段(不同的sgRNA可以识别不同的DNA序列),能精准识别并切割细胞中的致病基因a,从而获得不含致病基因a的动物成纤维细胞。CRISPR/Cas9与限制酶的相同点是________。
(3)过程
①所利用的生物技术是_____________,采集到的卵母细胞需要在体外培养成熟,并通过____________进行去核处理。
(4)利用上述思路治疗退行性神经疾病,理论上不会产生免疫排斥反应的原因是_______。
江西南昌市第二中学2025-2026学年度下学期高二生物月考答案与解析
1. C
解析：A、制作腐乳时豆腐上的白毛是毛霉的直立菌丝,毛霉来自空气中的毛霉孢子,而非豆腐中的曲霉,A错误；
B、糯米蒸熟后需冷却至室温再加入酵母菌,若立即加入,高温会杀死酵母菌,无法完成酒精发酵,B错误；
C、制作霉鱼时加入的酒和盐均可使微生物细胞失水,抑制杂菌的生长繁殖,避免食品变质,C正确；
D、酸豆角的制作利用的是乳酸菌的无氧发酵,发酵产物为乳酸；醋酸菌为好氧菌,密封的无氧环境下无法存活,且醋酸菌用于制作果醋,D错误。
2. A
解析：A、巴氏消毒法属于低温消毒方法,仅能杀灭食品中的绝大多数微生物,无法彻底消灭耐热的芽孢、孢子,因此经巴氏消毒的食物不能在常温下长期保存,A错误；
B、高压蒸汽灭菌的常规操作条件为压力100kPa、温度121℃,维持15 30min,该条件可彻底杀灭所有微生物,包括芽孢和孢子,B正确；
C、接种环、接种针等金属工具常用灼烧灭菌法快速灭菌,培养基一般采用高压蒸汽灭菌,属于湿热灭菌的范畴,C正确；
D、周围物品未经过灭菌处理,已经灭菌的材料用具与其接触会发生二次污染,因此操作中需避免二者接触,D正确。
3. B
解析：A、①过程所需菌种可从自然界分离菌种,也可用基因工程或人工诱变选育菌种,发酵罐内发酵是发酵过程的中心环节,A错误；
B、②过程为扩大培养,酵母菌为兼性厌氧生物,大量增殖时进行有氧呼吸,需要通入无菌空气,醋酸菌为好氧细菌,扩大培养时也要通入无菌空气,B正确；
C、③过程为发酵罐内发酵,该过程所需要的培养基和发酵设备均需进行严格的灭菌处理,C错误；
D、发酵工程中,如果发酵产品是单细胞蛋白(微生物菌体本身),可在发酵结束后,④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品,D错误。
4. C
解析：A、带芽茎段外植体需经脱分化过程才能形成愈伤组织,愈伤组织是高度液泡化、无固定形态的薄壁细胞,A错误；
B、愈伤组织培养属于脱分化阶段,该阶段不需要光照,且愈伤组织细胞未分化出叶绿体,无法进行光合作用,B错误；
C、脱分化的本质是已分化的细胞失去原有特定的结构和生理功能,恢复到未分化的状态,C正确；
D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性,但培育得到的试管苗需要先经过炼苗处理,适应外界环境后才能移栽入土,不能直接移栽,D错误。
5. D
解析：A、二维细胞培养过程中会贴壁,还会粘连,导致细胞停止生长分裂,因此在传代培养过程中用酶处理,让细胞充分分散,常用的酶是胰蛋白酶,不能用胃蛋白酶,传代是在pH7.2-7.3的培养环境下操作,胃蛋白酶(最适pH是1.5-2.5)在弱碱性环境中完全失活,A错误；
B、三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境,能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用,因此,三维细胞培养的细胞增殖速率比二维的更慢,B错误；
C、培养过程中需要持续通入5%CO2和95%空气以维持细胞代谢的正常需求,C错误；
D、培养液需加入糖类、氨基酸、无机盐、维生素等成分,通常还需加入血清,进而维持细胞生长所需要的营养物质,D正确。
6. C
解析：A、题干明确说明该治疗过程不改变基因序列,激活或抑制基因表达属于基因表达层面的调控,不会改变细胞核内的遗传物质(DNA序列),A正确；
B、诱导已分化的体细胞形成iPSC的方法包括导入特定调控蛋白、使用小分子化合物调控相关基因表达等,B正确；
C、细胞核全能性指已分化细胞的细胞核具有发育成完整个体的潜能,核移植技术可发育为完整个体,体现了细胞核全能性；但iPSC治疗帕金森病仅需将iPSC定向分化为特定神经细胞,无需发育为完整个体,并未利用细胞核全能性,C错误；
D、胚胎干细胞的获取需要破坏早期胚胎,存在较大伦理争议,而iPSC来源于自体体细胞诱导,伦理争议小,因此胚胎干细胞疗法需要更严格的伦理审查,D正确。
7. B
解析：A、供体细胞(成纤维细胞)需注入经显微操作去除纺锤体-染色体复合物的MⅡ期卵母细胞,确保重构胚核遗传物质完全来自供体,A正确；
B、克隆猴的核遗传物质完全来自杂种雌猴的成纤维细胞,其线粒体等细胞质遗传物质来自食蟹猴卵母细胞；恒河猴仅参与了杂种雌猴的培育,与克隆猴的遗传物质无直接关联,B错误；
C、DNA甲基化属于表观遗传,kdm4d的mRNA可表达去甲基化酶,酶TSA可调控组蛋白修饰,二者均可通过影响表观遗传,纠正克隆胚胎的异常甲基化,促进胚胎正常分化,C正确；
D、胚胎移植是有性生殖、克隆动物培育的必需环节,重组囊胚需移植到同期发情、健康且繁殖能力正常的代孕母猴子宫内,才能完成后续发育获得后代,D正确。
8. B
解析：A、次生代谢物(如紫杉醇、生物碱、萜类等)主要参与防御、抗逆或信号传递,非维持基本生命活动所必需。初级代谢物(如葡萄糖、氨基酸)才是必需的,A错误；
B、茎尖分生组织细胞分裂活跃,病毒复制滞后或无法侵染,是获取脱毒苗的标准外植体来源,B正确；
C、植物细胞具有纤维素和果胶构成的细胞壁,胰蛋白酶(动物源蛋白酶)无效；应使用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁以获得单细胞或小细胞团,C错误；
D、路径一确实依赖全能性；但路径二仅进行细胞增殖与代谢产物积累,未发育成植株,不体现全能性,D错误。
9. C
解析：A、DNA不溶于酒精,蛋白质等杂质可溶于酒精,利用该原理可初步分离DNA与蛋白质,A错误；
B、离心研磨液的作用是使细胞碎片等不溶性杂质沉淀,此时DNA溶解在上清液中,该操作不能加速DNA沉淀,加入冷却的95%酒精才可使DNA析出沉淀,B错误；
C、鉴定DNA时需设置对照实验,遵循单一变量原则,实验组(溶有DNA的NaCl溶液)和对照组(等量的NaCl溶液)都要加入二苯胺试剂,之后沸水浴加热,C正确；
D、二苯胺与DNA沸水浴共热呈蓝色,蓝色越深说明提取的DNA含量越高,与DNA纯度无直接关联,D错误。
故选C。
10. B
解析：A、限制酶主要是从原核生物中分离纯化得到的,具有专一性,能够识别双链DNA分子特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子,A正确；
B、用作载体的质粒上常含有的是抗生素抗性基因作为标记基因,而非抗生素合成基因,标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选,B错误；
C.T4 DNA连接酶的功能是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,从而将DNA片段相连,既可以连接黏性末端也可以连接平末端,C正确；
D、DNA为双链结构,限制酶切割DNA一次会分别断裂两条单链上的1个磷酸二酯键,共断开2个磷酸二酯键,每个单链切口处产生1个游离的磷酸基团,共产生2个游离的磷酸基团,D正确。
故选B。
11. C
解析：EcR I的识别序列为6个碱基对的特定序列,若基因组DNA碱基随机排列,某特定位点出现该识别序列的概率为1/46,计算得46=4096,即平均约4000个碱基对会出现1个酶切位点,完全酶切后得到的DNA片段平均长度约为4000碱基对,C正确,ABD错误。
12. D
解析：A、酶a与酶b都切开特定部位的磷酸二酯键,且产生的末端相同；但酶a的识别序列为AGATCT,酶b的识别序列为GGATCC,因此这两种酶具有序列的特异性,A错误；
B、酶a与酶b切出的黏性末端相同,均为GATC,能用DNA连接酶连接,B错误；
C、由酶切产物可知,酶a单独切割后会形成4个片段,说明含有3个酶a的酶切位点；酶b再次酶切后,酶a切割得到的2100bp、1400b片段均被切为两段,,说明有2个酶b的酶切位点,C错误；
D、根据C项可知,该DNA片段上有2个酶b的酶切位点,用酶b切割该线性DNA片段得到的切割产物有3种,D正确。
13. ABD
解析：A、从土壤中筛选得到莠去津降解菌应选用以莠去津为唯一氮源的培养基,这样可筛选出能利用莠去津的微生物,A正确；
B、根据表中数据可以看出两种降解菌降解莠去津效果接近,联合使用后降解效果优于单独使用,B正确；
C、可用稀释涂布平板法对培养液中的降解菌进行计数,以确定初始接种量一致,C错误；
D、若要进一步探究两种降解菌的最佳配比,需设置多组M:N比例不同的实验组,通过比对残留率获得最佳配比,D正确。
14. BC
解析：A、超数排卵处理仅针对供体母牛,目的是获得更多卵母细胞；受体母牛仅需进行同期发情处理,无需超数排卵,A错误；
B、在体外受精前,卵母细胞需成熟培养至MⅡ期,精子需获能处理,才能具备受精能力,这是体外受精成功的必要前提,B正确；
C、胚胎性别鉴定通常在囊胚期进行,取滋养层细胞进行基因检测,既不影响胚胎发育,又能准确判断性别,C正确；
D、核移植属于无性生殖,体外受精、转基因技术获得的后代,均经过两性生殖细胞的结合,属于有性生殖,D错误。
15. AC
解析：A、限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶均作用于磷酸二酯键,解旋酶作用于氢键,A错误；
B、Sau3A I识别序列为4个碱基,而Bgl II识别序列为6个碱基,而且Sau3A I也能识别Bgl II识别的序列,因此分别用Sau3A I和Bgl II切割随机序列DNA,前者得到的片段数往往多于后者,B正确；
C、Acc65 I和KpnI切割形成的黏性末端序列无法配对,而且磷酸端(5"端)也不能与磷酸端(5"端)连接,既然不能连接也就不存在重新切割,C错误；
D、BamH I和Sau3A I切割形成的末端,可以相互连接,连接形成的DNA序列中还存在Sau3A I的识别序列和切割位点,故能再被Sau3A I切割,D正确。
16. AD
解析：A、“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”,推断培养基中存在少量色氨酸,培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性,A正确；
B、划线接种时需在每次划线后都对接种环进行灭菌处理,防止三种细菌混合,B错误；
C、题意显示,“突变株TrpB−、TrpC−、TrpE−分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域,培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”,“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；突变株TrpB−,将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻,但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚,并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC−对应Ⅱ区域,将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻,但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸,也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE−对应Ⅲ区域,将吲哚转化为色氨酸受阻,但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸,并进一步转化为吲哚；Ⅱ区域的一端菌株继续生长是由于TrpC−利用TrpE−提供的吲哚合成了色氨酸；TrpE−菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶,导致不能合成吲哚,因此缺乏色氨酸表现为不能生长,C错误；
D、TrpE−菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶,导致不能合成吲哚,因此缺乏色氨酸,D正确。
17. (1)18 30℃(约28℃),30 35℃
(2)
(3)导致酵母菌因失水活性降低或死亡
(4) ①. 透明圈的大小
②. 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
(5)检测培养基灭菌是否合格,排除杂菌污染对实验结果的影响
解析：1、果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧型生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖,在无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵。
2、当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
【小问1详解】
菌种A是酵母菌,酵母菌的最适生长温度是18 30℃,菌种B是醋酸菌,醋酸菌的最适生长温度是30 35℃。
【小问2详解】
杨梅果醋酿制一般是在酒精发酵后进行醋酸发酵,其中利用酒精作为底物发酵产生醋酸的反应式是。
【小问3详解】
杨梅脱核压榨后,加入蔗糖可改善果酒的口感,同时提高发酵产生酒精量。但研究人员发现若过量加入则会使发酵减慢或停止,其原因可能是导致酵母菌因失水活性降低或死亡。
【小问4详解】
欲从果醋培养液中纯化醋酸菌,若用含碳酸钙的固体培养基培养,可通过观察透明圈的大小初步筛选出目标菌落。若采用平板划线法纯化醋酸菌,接种环在培养基上连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
【小问5详解】
进行纯化培养时通常需要将接种培养基与一个空白培养基同时培养,目的是检测培养基灭菌是否合格,排除杂菌污染对实验结果的影响。
18. (1) ①. 稀释涂布平板法
②. 待酒精燃尽、涂布器冷却后
③. 均匀地涂布在培养基表面
(2) ①. 高丝氨酸
②. 菌落B
(3)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落
(4)A
解析：分析题图：图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在缺乏高丝氨酸的培养基上,因此甲中A表示野生型谷氨酸棒状杆菌；②表示向培养基中添加高丝氨酸后继续培养,其中A为野生型谷氨酸棒状杆菌,B为高丝氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌。
【小问1详解】
过程①将紫外线照射过的野生谷氨酸棒状杆菌菌液(原菌液),稀释10倍接种在培养基甲上培养,该接种方法称为稀释涂布平板法。具体步骤为：①取0.1mL稀释后的菌液,添加到培养基表面。
②将涂布器从盛有酒精的烧杯中取出,放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布；③用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
【小问2详解】
根据某种氨基酸缺陷型在缺乏该氨基酸的培养基上会暂停生长,推测甲为选择培养基(缺乏高丝氨酸),上面的菌种为野生型,而加入高丝氨酸后高丝氨酸缺陷型菌株得以生长,因此,高丝氨酸缺陷型菌种是菌落B。
【小问3详解】
甲平板上统计菌落的结果往往比活菌实际数目少,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
【小问4详解】
大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌自身不能合成赖氨酸,需要在含有赖氨酸的培养基中才能生长,图中微生物B、D、F、H形成了生长圈,说明它们依赖目的菌株产生的赖氨酸才能生长,其中微生物B的生长圈直径与微生物A菌落直径的比值最大,说明微生物A最可能是初筛时被选中的目的菌株。
19. (1) ①. 纤维素酶和果胶酶
②. X射线处理
(2)植物原生质体融合可采用高Ca2+-高pH融合法,而动物细胞融合可采用灭活病毒诱导法
(3)细胞分裂素和生长素
(4) ①. 柴胡原生质体
②. 其中一组不作处理,其他组分别加入等量不同浓度的碘乙酰胺
③. 向各组中加入等量的FDA并检测原生质体内的荧光强度
解析：【小问1详解】
过程②去除细胞壁获得原生质体时,常用纤维素酶和果胶酶处理红豆杉和柴胡细胞。 X射线处理能随机破坏染色体结构,使其发生断裂、易位、染色体消除等,使细胞不再持续分裂,碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活,抑制细胞分裂,杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现了互补,使细胞恢复正常分裂,因此只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团,故要培育能产生紫杉醇的柴胡,红豆杉是供体需要X射线照射,柴胡是受体需要碘乙酰胺处理,即图中A处理是X射线处理。
【小问2详解】
植物原生质体融合可采用高Ca2+-高pH 融合法,而动物细胞融合可采用灭活病毒诱导法,这是二者在融合方法上的区别,二者都可以采用PEG(聚乙二醇)融合法和电融合法。
【小问3详解】
再分化阶段,当细胞分裂素含量高、生长素含量低时,未分化细胞群将分化出芽,因此X、Y分别是细胞分裂素和生长素。
【小问4详解】
实验的目的是研究不同浓度的碘乙酰胺对原生质体活力的影响,①分组时,将置于甘露醇溶液中的生理状态相同且良好的柴胡原生质体随机均分为若干组；②处理时,设置对照组和实验组,其中一组不作处理,其他组分别加入等量不同浓度的碘乙酰胺；③检测时,向各组中加入等量的FDA并检测原生质体内的荧光强度,荧光强度越高说明原生质体活力越强。
20. (1) ①. 动物细胞融合
②. 动物细胞培养
(2) ①. PSMA、CD28
②. 脾脏
(3)B淋巴细胞和杂交瘤细胞
(4)克隆化培养和抗体检测
(5) ①. 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内
②. 双杂交瘤细胞会表达产生两种H链和两种L链,H链和L链的结合又是随机的,因而产生多种抗体
解析：【小问1详解】
制备双特异性抗体,核心用到两项技术为动物细胞融合：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、杂交瘤细胞之间融合。动物细胞培养：所有细胞的增殖、筛选都需要培养。
【小问2详解】
要获得能识别PSMA和CD28的抗体,需给小鼠注射PSMA蛋白、CD28蛋白作为抗原。受免疫后,小鼠脾脏中富含能产生特异性抗体的B淋巴细胞,因此从脾脏分离。
【小问3详解】
氨基蝶呤 (A) 阻断DNA从头合成(D途径)。只有含HGPRT酶的细胞,能走补救合成(S途径)存活。骨髓瘤细胞无HGPRT酶,不能存活；B淋巴细胞与杂交瘤细胞有该酶,可以存活。
【小问4详解】
融合筛选后,需对杂交瘤细胞做：克隆化培养(单细胞增殖成细胞株)+抗体检测(确认能分泌目标抗体)。
【小问5详解】
大量获取抗体： ①体外大规模培养双杂交瘤细胞； ②注射到小鼠腹腔内增殖,从腹水中提取。产生多种抗体的原因：双杂交瘤细胞有两种H链、两种L链,H链与L链随机组合,形成不同结构的抗体。
21. (1) ①. 碱基的替换
②. 黏性末端和平末端
③. E.cli DNA连接酶和T4 DNA连接酶
(2)都能识别特定的DNA序列,并断开磷酸二酯键
(3) ①. 细胞核移植技术
②. 显微操作
(4)重组细胞的细胞核来自患者,移植的神经干细胞的遗传物质与患者基本相同,因而不会发生免疫排斥反应
解析：【小问1详解】
对比图1中基因A与基因a的碱基序列,基因A中的一段序列为-AGCTT-,基因a对应位置变为-AGCTG-。这一变化属于碱基对的替换(T//A替换为C//G),未发生碱基的增添或缺失,属于基因突变中的碱基替换。Hind III识别序列为AAGCTT(或互补链),切割后产生黏性末端(5'突出),Alu I识别序列为AGCT(或互补链TCGA),切割位点在中间,产生平末端。
E.cli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都是既能连接黏性末端,也能连接平末端,虽然E.cli DNA连接酶连接平末端效率较低,但都可以使用。
【小问2详解】
限制酶的作用特点是特异性识别双链DNA的特定核苷酸序列,并在特定位点切割磷酸二酯键；CRISPR/Cas9本质是一种基因编辑工具,Cas9蛋白依据sgRNA的引导,也能精准识别并切割特定的DNA序列(断开磷酸二酯键),二者在功能本质上的共同点是识别特定的DNA序列,并断开磷酸二酯键。
【小问3详解】
图2中过程①是将患者的成纤维细胞细胞核移入去核的卵母细胞中,构建重组细胞,该技术是体细胞核移植技术；去除卵母细胞的细胞核操作难度高、体积小,必须借助显微操作仪,通过显微操作技术精准去除。
【小问4详解】
本方案中,重构胚的细胞核直接取自患者自身的成纤维细胞,发育成的神经干细胞表面的组织相容性抗原(HLA)与患者完全一致。因此,将修复后的神经干细胞移植回患者体内时,免疫系统会将其识别为“自我”成分,理论上不会发生免疫排斥反应。酶a切割产物长度(bp)
酶b再次切割产物长度(bp)
2100； 1400； 1000； 500
1900； 200； 800； 600； 1000； 500
未接种
接种M
接种N
接种M+N
残留率(%)
100
74
76
62