高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》土壤中分解尿素的细菌的分离与计数多媒体教学ppt课件

这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》土壤中分解尿素的细菌的分离与计数多媒体教学ppt课件，共28页。PPT课件主要包含了尿素分子的立体结构，研究思路，一筛选菌株，选择培养基，显微镜直接计数法，二统计菌落数目，实验设计，一土壤取样，二样品的稀释，三取样涂布等内容，欢迎下载使用。
CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3
尿素是一种重要的农业氮肥，但是尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。
1．通过学习选择培养基的应用原理，能够根据各种微生物的代谢特征，配制选择培养基；2．通过进行土壤中分解尿素的细菌的分离与计数过程，能够列举其中涉及的相关技术并会用这些技术解决生产生活中的相关问题。3．通过实际实验操作，能够运用无菌技术完成微生物的分离、培养和技术各个环节。
1、实验室微生物的筛选原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
加入青霉素的培养基 ——细菌不生长，酵母菌、霉菌等真菌能生长不加含碳有机物的无碳培养基 ——分离自养型微生物
1.在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质？
碳源是葡萄糖和尿素，氮源是尿素
2.分析该配方的培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，又是如何进行选择的？
有筛选作用。尿素是培养基中的唯一氮源，因此，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数是多少?1ml菌液中的总菌数?(1ml=1cm3=1000mm3） 　　
缺点：不能区分死菌与活菌
2、统计菌落数目——稀释涂布平板法
平板菌落数统计注意事项
1、几个菌落粘连一起，只要肉眼能区分，就算几个；2、不管菌落大小，只要肉眼看得见，就应该计数；
1、为什么测平板上的菌落数可以推测样品中的活菌的数目？
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌。为了保证结果准确，一般选用菌落数在30~300的平板进行计数。
2、统计的菌落数往往比活菌的实际数目高还是低，为什么？
低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。
　　测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释液；测定真菌的数量，一般选用102、103和104倍稀释液。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行◆分离不同的微生物采用不同的稀释度
实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。
◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。
（四）微生物的培养与观察
不同类型的微生物形成的菌落往往有差别---微生物分类依据
（一）无菌操作1、取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。
3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。（二）做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。（三）规划时间

2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。
土壤中分解尿素的分离与计数
1.某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL）（ ）×108　　　　　　×109C.234　　　　　　　　　D.23.4
解析：稀释倍数为106，0.1 mL稀释液的菌落数的平均值为234，则每毫升样品中菌落数就为234/0.1×106=2.34×109。
每mL样品中的菌株数=（C÷V）×M
C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V：涂布平板时所用的稀释液的体积M：稀释倍数
2.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触)，将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是(　 　)A．链霉素能阻止结核菌的生长B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D．链霉素可以用于治疗伤寒病人