河北省张家口市尚义县第一中学等校2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份河北省张家口市尚义县第一中学等校2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版），共32页。
1．考试时间为75分钟，满分100分。
2．全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 桑葚被卫生部列为“既是食品又是药品”的农产品之一，具有很高的食用和药用价值，下图是对桑葚果实的加工流程，相关叙述错误的是（ ）

A. a过程可用果胶酶处理，提高出汁率
B. b过程需要接种酵母菌，并提供无菌、无氧的环境
C. 可以使用酸性重铬酸钾溶液检测b过程的产物
D. c过程所需的微生物是异养厌氧型，且发酵温度高于b过程
2. 某小组自制果酒果醋，将制作过程分为两个阶段。第一阶段：选用新鲜葡萄洗净后榨汁，装入下图所示装置，加入适量蔗糖和酵母，在适宜条件下发酵成果酒。第二阶段：加入另一菌种，在适宜条件下进行发酵成果醋。下列叙述正确的是（ ）

A. 榨汁机可用体积分数为50%的酒精消毒
B. 加入蔗糖的目的是为了补充糖源，为酒精发酵提供充足底物
C. 第一阶段应保持进气口、出气口均关闭
D. 第二阶段的主要过程是醋酸菌将乙醇、氧气直接转变为醋酸
3. 腐乳，又称臭豆腐、霉豆腐等，是以大豆为原料，经加工磨浆、制坯、培菌、发酵而制成的调味、佐餐制品，富含蛋白质及其分解产物如多肽、二肽等多种营养成分，是中国传统民间美食。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的毛霉是一种真核生物
B. 微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
C. 与豆腐相比，腐乳更易消化、吸收，主要是利用微生物合成的蛋白酶、脂肪酶等胞内酶
D. 制作腐乳时加入食盐、香辛料、酒等，目的是调味和抑制杂菌生长
4. 泡菜是一种在低浓度食盐水中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品，常用的原料有黄瓜、大白菜、芹菜、萝卜等，下列有关泡菜制作的叙述正确的是（ ）
A. 制作过程中，要将新鲜蔬菜清洗晾干后，与煮沸的盐水混匀装瓶
B. 高浓度盐水可抑制细菌大量繁殖，因此配制盐水时应注意多加盐
C. 泡菜发酵主要是由乳酸菌无氧呼吸生成大量乳酸，泡菜坛表面常会有一层白膜正是乳酸菌菌落
D. 发酵过程要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水（如图）
5. 酸菜制作常采用盐渍蔬菜，发酵过程中会产生亚硝酸盐，大量的亚硝酸盐会转变为有毒物质，对人体健康产生危害。自然发酵条件下，杂菌多，酸菜品质不稳定。研究小组在自然发酵条件下添加一定量的干酪乳酸菌进行人工发酵，下图是两种发酵方法产生的亚硝酸盐的含量曲线图，相关叙述错误的是（ ）
A. 自然发酵利用的主要菌种是蔬菜表面附着的乳酸菌
B. 泡菜坛中，酸菜液的pH逐渐降低
C. 自然发酵过程中，酸菜中的亚硝酸含量先升高后降低，合理延长发酵时间的酸菜更宜食用
D. 人工发酵的酸菜中的亚硝酸含量一直很低，发酵初期食用会有“咸而不酸”的口感
6. 下列传统发酵产品与主要的微生物特征匹配正确的是（ ）
A. AB. BC. CD. D
7. 下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 该培养基属于液体培养基，无法进行菌种的分离
B. 该培养基中的氮源是NaNO3，高浓度NaNO3可抑制细菌的生长
C. 该培养基中的碳源是（CH2O），如将（CH2O）替换为纤维素，可用于初步筛选纤维素分解菌
D 使用培养基培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或酸性
8. 下列消毒、灭菌方式全部匹配正确的是（ ）
①牛奶、啤酒——煮沸消毒法
②培养皿——灼烧灭菌
③接种环、接种针——灼烧灭菌
④培养基——酒精消毒
⑤超净工作台、接种箱——喷洒石碳酸等消毒液，使用紫外线照射消毒
⑥操作者的衣着和手——酒精擦拭
⑦毛巾、手帕——巴氏消毒法
A. ①③⑥B. ③⑤⑥C. ③⑤⑦D. ②③④
9. 在固体培养基表面连续划线可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，图1是某研究小组利用接种环接种菌种的划线示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 划线操作前，需要灼烧接种环进行灭菌，图示接种过程需要灼烧灭菌4次
B. 划线时，④区域的划线要从③区域的末端开始，不可与第①区域相连
C. 图1所示方法为平板划线法，对①②③④四个区域的菌落分别计数，再取平均值获得菌落数
D. 完成划线后，恒温培养获得的菌落分布图如图2所示
10. 某研究小组要纯化培养纤维素分解菌。已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。下图是小组成员的实验流程，下列有关说法错误的是（ ）
A. “？”可以是农田、草食动物的瘤胃等富含纤维素的环境提取物
B. 甲、乙、丙培养基都应以纤维素为唯一的碳源
C. 甲、丙培养基可以促进菌种快速繁殖，培养过程中需通入氧气振荡培养
D. 向乙和丁培养基中加入刚果红，可通过菌落周围是否有透明圈进行鉴定
11. 发酵工程与农业、医药工业、食品工业生产有着密切联系，以生产食品添加剂为例：柠檬酸可以通过黑曲霉的发酵制得；谷氨酸棒状杆菌发酵可以得到谷氨酸，谷氨酸经一系列处理可制成味精。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 发酵工程中心环节是选育菌种和配制培养基
B. 发酵产品可以是微生物细胞本身，即单细胞蛋白
C. 为大规模生产发酵柠檬酸，在选育菌种环节要筛选产酸量高的黑曲霉
D. 发酵生产谷氨酸的过程中，需要严格控制溶解氧、温度、pH等条件
12. 植物组织培养是植物细胞工程的基本技术，该技术可在短时间内获得大量性状一致的甜叶菊种苗，用于医药和食品行业，下列叙述错误的是（ ）
A. 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性
B. 可以选择成熟的甜叶菊叶片作为外植体，消毒后进行接种
C. 诱导愈伤组织期间一般不需要光照
D. 诱导愈伤组织生芽和生根的过程需要更换培养基，二者区别主要在于激素的种类
13. 如图是取甲、乙两种植物的叶肉细胞杂交的流程示意图，下列叙述错误的是（ ）
A. 获得原生质体A、B的操作是去除细胞壁
B. 可以采用电激、PEG或灭活的病毒诱导原生质体A、B融合
C. 由D杂种细胞获得杂种植株的过程是植物组织培养技术
D. 移栽后的植株的细胞中含有的染色体数是甲细胞和乙细胞染色体数目的总和
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14. 下图是酱油制作的部分流程，在米曲霉发酵过程中，米曲霉充分生长繁殖，大量分泌蛋白酶、脂肪酶等，该过程需通入无菌空气，下列说法正确的是（ ）
A. 米曲霉是真菌，合成分泌的酶将蛋白质和脂肪分解成单体
B. 米曲霉发酵过程中，添加小麦主要为米曲霉的生长繁殖提供氮源
C. 加入乳酸菌和酵母菌可以使发酵池中的产物种类更丰富
D. 向发酵池中添加食盐有利于防止杂菌污染
15. 大多数大肠杆菌的菌株是无害的，是动物肠道中正常寄生菌；部分有害的大肠杆菌随粪便排放散布到环境中，会在新鲜的粪便且氧气充足的环境中大量繁殖约3天，之后菌数就会下降。某同学使用3款消毒剂A、B、C分别杀灭大肠杆菌，处理效果曲线如图1，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 大肠杆菌是兼性厌氧型细菌，扩大培养时应提供充足氧气
B. 若采用显微镜直接计数法测定样品的大肠杆菌数量结果如图2，该中方格中的大肠杆菌数目为12
C. 根据曲线图可知，A消毒剂杀菌效果最好
D. 实验过程中应注意无菌操作，防止菌种污染干扰计数或影响研究者健康
16. 野生型菌株M能在基本培养基上正常生长，但其突变株M1无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。研究小组应用影印培养法纯化M1菌株（亮氨酸缺陷型突变株），部分流程如下图，1～5为菌落，相关叙述正确的是（ ）
注：影印培养法可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。
A. 培养基A是基本培养基；培养基B是完全培养基，含有亮氨酸
B. 该实验不宜用平板划线法把菌液接种到培养基A上
C. 影印平板的操作需要注意在酒精灯火焰周围，防止杂菌污染
D. 从培养基A、B中挑取菌落1、2、4进行纯化培养，可获得目的菌株
17. 番茄红素广泛存在于成熟的红色植物果实中，可在食品加工中用作色素，也常用作抗氧化保健食品的原料。研究小组利用植物细胞悬浮培养技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 发生脱分化的前提条件之一是植物细胞处于离体状态
B. 番茄红素是胡萝卜生长和生存必需的初生代谢产物
C. 愈伤组织是一类未分化、不定形的薄壁组织团块
D. 该实验流程中缺乏从愈伤组织获得胚状体和完整植株的过程，设计有误
18. 甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，乙植物的细胞质中含有抗除草剂基因，下图是将乙细胞的抗性基因引入甲细胞的体细胞杂交流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 若甲、乙两种植株存在生殖隔离，该实验无法成功
B. 过程B体现了细胞膜的流动性，细胞膜是植物细胞的边界
C. 两两融合的细胞有三种，同种融合的细胞无法存活可以达到筛选目的
D. 杂种植株抗除草剂基因的遗传遵循孟德尔遗传规律
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19. 猕猴桃果实富含维生素C，营养丰富，被称为“水果之王”。以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程如图。请回答下列问题：
（1）酿制果酒时，一般要先通气的目的是_____。若果酒保存不善，表现出现一层白膜，且有酸味，此时主要引起污染的微生物是_____。
（2）酿制果醋时需要“盖透气纱布”的原因是______，若糖源不充足，该菌也可以______为底物，经一系列反应其转变为醋酸，请写出此过程果醋发酵的反应式______。
（3）用下图装置进行发酵，发酵过程中d连接长而弯曲的胶管的目的是_____。若利用已制备的猕猴桃酒，继续使用此装置制醋，需改变的条件是：①______；②_____。
20. 生物社团利用微生物制造酸奶（已知发酵的最适温度为38～44℃）。活动过程记录如下：
实验材料：甲品牌酸奶20mL、乙品牌酸奶20mL、纯牛奶1.5L、无菌水
实验步骤：
①消毒：取3个已消毒的广口瓶，打上标签“A”“B”“C”；加热牛奶至85℃，立即均分至三个广口瓶中；
②加入菌种：向A广口瓶中加入20mL甲品牌酸奶，向B广口瓶中加入____，向C广口瓶中加入______，搅拌均匀后立即封口；
③发酵：将3只广口瓶放到已加热至38～44℃的保温箱内，恒温保存2h。
④观察：2h后，每隔30min对瓶中情况观测一次，如果A、B瓶中奶制品已凝固呈果冻状，说明酸奶已做好。
请回答下列问题：
（1）该活动利用的主要微生物是_____，其遗传物质是______。
（2）加入菌种步骤中，应向B广口瓶中加入______，向C广口瓶中加入______。
（3）某小组同学按上述操作，一段时间后，A、B瓶中始终均未得到果冻状酸奶，C瓶与刚放入保温箱时一致。请分析A、B瓶制酸奶失败的原因：______。
21. 研究小组为筛选能高效分解厨余垃圾的微生物进行了相关实验，请回答下列问题：
（1）培养基应满足微生物对营养物质的需求，其主要成分包含______（至少写出三点），若计划观察培养菌种的菌落形态并进行计数，培养基成分中还需加______；若欲筛选产耐高温淀粉酶的微生物，除正确配制培养基外，还要在______条件下培养。
（2）配制培养基时，各种成分溶化装瓶后要进行______（灭菌方式）；待平板凝固后，进行平板划线和纯培养，下列操作正确的是______。
22. 某研究团队从树林土壤中筛选得到了能分解玉米秸秆中纤维素的野生毕赤酵母，欲通过多次筛选获得优良菌株，进行富集培养。请结合图文，请回答下列问题：
（1）研究团队采集树林土壤样品后，对土壤菌液进行系列梯度稀释，目的是_____。
（2）稀释后将菌液通过_____（方法）接种到培养基，接种使用的器具是______，对该器具的灭菌方法是______。
（3）接种后经适当培养，平板上菌落数如图所示，则1g土壤中的活菌数约为_____个。若某小组统计的菌落数为14、8、22，则这组数据______（填“能”或“不能”）作为统计数据。若对照组的平板中有3个菌落，则研究人员应采取的措施是______。

（4）研究人员在富集培养过程中，从液体培养基中定期取样，并用_____法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。多次实验后获得了4种优良菌株，接种到含刚果红的鉴别培养基中培养一段时间，结果如下图，菌株_____（填图中的字母）最宜作为目标菌株进行发酵生产，原因是_____。

23. 下图中亲本植株的基因型为Aa（染色体数为2n），A、B、C、D是以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，请回答下列问题：
（1）通过A途径获得的植株的基因型是_____。植物细胞具有全能性的根本原因是_______。
（2）图中①过程依次包括______两个步骤，第二个步骤_____（填“需要”或“不需要”）光照，原因是______。
（3）D过程获得原生质体用到的酶是______。②过程常用化学试剂______（中文名称）进行诱导；细胞融合成功的标志是______；两两融合获得的杂种细胞经过______（技术名称）发育成完整植株，该植物细胞有丝分裂后期含有______个染色体组。
（4）C途径中先分化产生芽的培养基中，激素的用量情况是_____。
A. 生长素用量与细胞分裂素用量比例为1
B. 生长素用量与细胞分裂素用量比例大于1
C. 生长素用量与细胞分裂素用量比例小于1
2024—2025学年第二学期高二年级3月阶段测试卷
生物
注意事项：
1．考试时间为75分钟，满分100分。
2．全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 桑葚被卫生部列为“既是食品又是药品”的农产品之一，具有很高的食用和药用价值，下图是对桑葚果实的加工流程，相关叙述错误的是（ ）

A a过程可用果胶酶处理，提高出汁率
B. b过程需要接种酵母菌，并提供无菌、无氧的环境
C. 可以使用酸性重铬酸钾溶液检测b过程的产物
D. c过程所需的微生物是异养厌氧型，且发酵温度高于b过程
【答案】D
【解析】
【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。 (2)灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。 (3)榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。 (4)发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约13的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，果胶酶能破坏细胞壁，提高出汁率，A正确；
B、b过程酒精发酵需要接种酵母菌，发酵在无菌、无氧环境下进行，B正确；
C、b过程产物为酒精，酸性重铬酸钾遇酒精变灰绿色，可用于检测酒精，C正确；
D、c过程所需微生物醋酸杆菌，是异养好氧细菌，D错误。
故选D。
2. 某小组自制果酒果醋，将制作过程分为两个阶段。第一阶段：选用新鲜葡萄洗净后榨汁，装入下图所示装置，加入适量蔗糖和酵母，在适宜条件下发酵成果酒。第二阶段：加入另一菌种，在适宜条件下进行发酵成果醋。下列叙述正确的是（ ）

A. 榨汁机可用体积分数为50%的酒精消毒
B. 加入蔗糖的目的是为了补充糖源，为酒精发酵提供充足底物
C. 第一阶段应保持进气口、出气口均关闭
D. 第二阶段的主要过程是醋酸菌将乙醇、氧气直接转变为醋酸
【答案】B
【解析】
【分析】 酵母菌是兼性厌氧菌，在无氧条件下进行酒精发酵；醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时，能将糖分分解成醋酸，当缺少糖源时，则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变成醋酸。
【详解】A、消毒使用70%的酒精，A错误；
B、加入蔗糖的目的是为了补充糖源，为酵母菌酒精发酵提供充足底物，B正确；
C、第一阶段进行酒精发酵，应创造无氧环境，应保持进气口关闭，但因为酒精发酵会产生二氧化碳，还需要把出气口打开排气，C错误；
D、醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源都充足时，能将糖分分解成醋酸，当缺少糖源时，则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变成醋酸，D错误。
故选B。
3. 腐乳，又称臭豆腐、霉豆腐等，是以大豆为原料，经加工磨浆、制坯、培菌、发酵而制成的调味、佐餐制品，富含蛋白质及其分解产物如多肽、二肽等多种营养成分，是中国传统民间美食。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的毛霉是一种真核生物
B. 微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
C. 与豆腐相比，腐乳更易消化、吸收，主要是利用微生物合成的蛋白酶、脂肪酶等胞内酶
D. 制作腐乳时加入食盐、香辛料、酒等，目的是调味和抑制杂菌生长
【答案】C
【解析】
【分析】毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。毛霉、曲霉、根霉、酵母菌等均参与腐乳发酵，其中起主要作用的是毛霉。腐乳制作过程中，盐、酒以及香辛料都可以抑制杂菌生长，具有防腐杀菌的作用。
【详解】A、参与了豆腐的发酵过程的微生物有毛霉、曲霉、根霉、酵母菌等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉是一种真核生物，A正确；
BC、毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶可以将脂肪水解为脂肪酸等物质，因此相比豆腐，腐乳易于吸收，但蛋白酶和脂肪酶不是胞内酶，B正确，C错误；
D、腐乳制作过程中，盐、酒以及香辛料都可以抑制杂菌生长，具有防腐杀菌的作用，同时具有调味的作用，D正确。
故选C。
4. 泡菜是一种在低浓度食盐水中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品，常用的原料有黄瓜、大白菜、芹菜、萝卜等，下列有关泡菜制作的叙述正确的是（ ）
A. 制作过程中，要将新鲜蔬菜清洗晾干后，与煮沸的盐水混匀装瓶
B. 高浓度盐水可抑制细菌大量繁殖，因此配制盐水时应注意多加盐
C. 泡菜发酵主要是由乳酸菌无氧呼吸生成大量乳酸，泡菜坛表面常会有一层白膜正是乳酸菌菌落
D. 发酵过程要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水（如图）
【答案】D
【解析】
【分析】泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、制作过程中，要将新鲜蔬菜清洗晾干后，与冷却后的煮沸盐水混匀装瓶，若煮沸的盐水直接和蔬菜混匀会杀死蔬菜表面的乳酸菌，影响发酵，A错误；
B、高浓度盐水可抑制细菌大量繁殖，但也会抑制乳酸菌的增殖，影响发酵，因此配制盐水时应注意加适量的盐，B错误；
C、在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，成膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜，C错误；
D、乳酸菌进行的是无氧呼吸，因此发酵过程要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水，D正确。
故选D。
5. 酸菜制作常采用盐渍蔬菜，发酵过程中会产生亚硝酸盐，大量的亚硝酸盐会转变为有毒物质，对人体健康产生危害。自然发酵条件下，杂菌多，酸菜品质不稳定。研究小组在自然发酵条件下添加一定量的干酪乳酸菌进行人工发酵，下图是两种发酵方法产生的亚硝酸盐的含量曲线图，相关叙述错误的是（ ）
A. 自然发酵利用的主要菌种是蔬菜表面附着的乳酸菌
B. 泡菜坛中，酸菜液的pH逐渐降低
C. 自然发酵过程中，酸菜中的亚硝酸含量先升高后降低，合理延长发酵时间的酸菜更宜食用
D. 人工发酵的酸菜中的亚硝酸含量一直很低，发酵初期食用会有“咸而不酸”的口感
【答案】D
【解析】
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜具有特殊的风味，乳酸菌是厌氧菌，分解有机物是不需要氧气的，因此泡菜坛要加盖并用一圈水来封口，以避免外界空气的进入，否则如果有空气进入， 就会抑制乳酸菌的活动，影响泡菜的质量。
【详解】A、在泡菜制作过程中，蔬菜表面本身就附着有乳酸菌等微生物，在自然发酵条件下，这些乳酸菌能够利用蔬菜中的糖类等物质进行发酵，产生乳酸等物质，使泡菜具有独特的风味，A正确；
B、在泡菜制作过程中，乳酸菌发酵产生乳酸，随着发酵的进行，乳酸不断积累，使得泡菜坛中酸液的pH逐渐降低，B正确；
C、从图中可以看出，自然发酵过程中，酸菜中的亚硝酸盐含量先升高后降低。在发酵初期，由于杂菌等的作用，亚硝酸盐含量会逐渐上升；随着发酵的进行，乳酸菌大量繁殖，产生的乳酸等物质会抑制杂菌的生长，同时一些微生物会将亚硝酸盐分解，使得亚硝酸盐含量逐渐降低。因此，合理延长发酵时间，当亚硝酸盐含量降低到较低水平时，酸菜更宜食用，C正确；
D、从图中可知，人工发酵的酸菜中亚硝酸盐含量在初期也有一定的上升，并不是一直很低。而且发酵初期，乳酸含量较少，此时食用会有“咸而不酸”的口感，D错误。
故选D。
6. 下列传统发酵产品与主要的微生物特征匹配正确的是（ ）
A. AB. BC. CD. D
【答案】C
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、参与果酒发酵的微生物主要是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧的真核生物，A错误；
B、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，B错误；
C、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，毛霉是真核生物，其新陈代谢类型是异养需氧型，C正确；
D、乳酸菌一种原核生物，其代谢类型为异养厌氧型，可用于制作泡菜，D错误。
故选C。
7. 下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 该培养基属于液体培养基，无法进行菌种的分离
B. 该培养基中的氮源是NaNO3，高浓度NaNO3可抑制细菌的生长
C. 该培养基中的碳源是（CH2O），如将（CH2O）替换为纤维素，可用于初步筛选纤维素分解菌
D. 使用培养基培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或酸性
【答案】D
【解析】
【分析】1、微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等。有些微生物还需要特殊的营养物质，如维生素、生长因子等。
2、培养基中含有琼脂的一般为固体培养基。
3、选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。例如利用细菌对青霉素的敏感性，用含青霉素的培养基抑制细菌生长繁殖，筛选出真菌。
【详解】A、该培养基配方中没有凝固剂（如琼脂），所以属于液体培养基。液体培养基通常不利于菌种的分离，因为菌种在液体中分散，难以形成单个菌落，而分离菌种常用的方法如平板划线法和稀释涂布平板法一般是在固体培养基上进行，A正确；
B、在该培养基成分中，NaNO3 能为微生物提供氮元素，是氮源。高浓度的NaNO3 会使培养基的渗透压升高，可能导致细菌细胞失水，从而抑制细菌的生长，B正确；
C、(CH2O) 可以为微生物生长提供碳元素，是碳源，当把(CH2O) 替换为纤维素时，只有能够分解纤维素的微生物才能利用纤维素作为碳源生长，这样就可以初步筛选出纤维素分解菌，C正确；
D、不同细菌对培养基的酸碱度要求不同，一般来说，培养细菌时，通常需要将培养基调至中性或弱碱性，D错误。
故选D。
8. 下列消毒、灭菌方式全部匹配正确的是（ ）
①牛奶、啤酒——煮沸消毒法
②培养皿——灼烧灭菌
③接种环、接种针——灼烧灭菌
④培养基——酒精消毒
⑤超净工作台、接种箱——喷洒石碳酸等消毒液，使用紫外线照射消毒
⑥操作者的衣着和手——酒精擦拭
⑦毛巾、手帕——巴氏消毒法
A. ①③⑥B. ③⑤⑥C. ③⑤⑦D. ②③④
【答案】B
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)。
【详解】①牛奶、啤酒宜采用巴氏消毒法，①错误；
②玻璃器皿（如吸管、培养皿等）采用干热灭菌，②错误；
③涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，③正确；
④培养基常采用湿热灭菌，④错误；
⑤超净工作台、接种箱采用喷洒石碳酸等消毒液，和使用紫外线照射消毒，⑤正确；
⑥操作者的衣着和手一般采用酒精消毒，⑥正确；
⑦毛巾、手帕可以采用煮沸消毒法，⑦错误。
综上所述，③⑤⑥匹配正确，B正确。
故选B。
9. 在固体培养基表面连续划线可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，图1是某研究小组利用接种环接种菌种的划线示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 划线操作前，需要灼烧接种环进行灭菌，图示接种过程需要灼烧灭菌4次
B. 划线时，④区域的划线要从③区域的末端开始，不可与第①区域相连
C. 图1所示方法为平板划线法，对①②③④四个区域的菌落分别计数，再取平均值获得菌落数
D. 完成划线后，恒温培养获得的菌落分布图如图2所示
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开 始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个 菌落。
【详解】A、划线操作前，需要灼烧接种环进行灭菌，而且在每次划线结束后也要灼烧接种环，以杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者。图中共有4次划线，那么划线前灼烧1次，每次划线后灼烧1次，总共需要灼烧灭菌5次，A错误；
B、划线时，为了将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，④区域的划线要从③区域的末端开始，且不可与①区域相连，这样才能保证在最后划线区域得到单菌落，B正确；
C、图1所示方法为平板划线法，平板划线法的目的主要是分离菌种，而不是计数。对菌落进行计数一般采用稀释涂布平板法，C错误；
D、完成划线后，恒温培养获得的菌落分布图应是沿着划线的方向，菌落由密到疏分布，而图2所示的菌落是均匀分布的，这是稀释涂布平板法培养后可能出现的结果，不是平板划线法的结果，D错误。
故选B。
10. 某研究小组要纯化培养纤维素分解菌。已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。下图是小组成员的实验流程，下列有关说法错误的是（ ）
A. “？”可以是农田、草食动物的瘤胃等富含纤维素的环境提取物
B. 甲、乙、丙培养基都应以纤维素为唯一的碳源
C. 甲、丙培养基可以促进菌种快速繁殖，培养过程中需通入氧气振荡培养
D. 向乙和丁培养基中加入刚果红，可通过菌落周围是否有透明圈进行鉴定
【答案】C
【解析】
【分析】在筛选和分离降解纤维素的微生物时，确保能够分离得到目的微生物，一般先将样液进行选择培养，以增大样液中目的微生物的数量。然后用固体培养基培养，分离得到单个菌落。刚果红是一种染色剂，可与纤维素等多糖形成红色复合物。如果培养基中唯一的碳源纤维素被降解了，那么菌落周边就会出现没有红色的透明圈。且透明圈越大，说明微生物降解纤维素的能力越强。
【详解】A、获取微生物应从富含该生物的环境中筛选，要纯化培养纤维素分解菌，“？”可以是农田、草食动物的瘤胃等富含纤维素的环境提取物，A正确；
B、纤维素分解菌能够分解纤维素作为碳源，因此甲、乙、丙培养基中应以纤维素为唯一碳源，以筛选出能够分解纤维素的菌株，B正确；
C、草食动物的瘤胃生活的是厌氧生物，若培养过程中通入氧气会抑制目的菌的生长，C错误；
D、已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，向乙和丁培养基中加入刚果红，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D正确。
故选C。
11. 发酵工程与农业、医药工业、食品工业生产有着密切联系，以生产食品添加剂为例：柠檬酸可以通过黑曲霉的发酵制得；谷氨酸棒状杆菌发酵可以得到谷氨酸，谷氨酸经一系列处理可制成味精。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 发酵工程的中心环节是选育菌种和配制培养基
B. 发酵产品可以是微生物细胞本身，即单细胞蛋白
C. 为大规模生产发酵柠檬酸，在选育菌种环节要筛选产酸量高的黑曲霉
D. 发酵生产谷氨酸的过程中，需要严格控制溶解氧、温度、pH等条件
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误；
B、单细胞蛋白是指微生物菌体，发酵产品可以是微生物细胞本身，B正确；
C、为大规模生产发酵柠檬酸，在选育菌种环节要筛选产酸量高的黑曲霉，从而提高柠檬酸的产量，C正确；
D、在发酵罐内发酵需要严格控制溶解氧、温度和pH等条件，以利于发酵全过程处于最佳状态，D正确。
故选A。
12. 植物组织培养是植物细胞工程的基本技术，该技术可在短时间内获得大量性状一致的甜叶菊种苗，用于医药和食品行业，下列叙述错误的是（ ）
A. 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性
B. 可以选择成熟的甜叶菊叶片作为外植体，消毒后进行接种
C. 诱导愈伤组织期间一般不需要光照
D. 诱导愈伤组织生芽和生根的过程需要更换培养基，二者区别主要在于激素的种类
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，即每个植物细胞具有发育成完整植株的潜力，A正确；
B、在植物组织培养中，外植体可以是植物的任何部分，包括叶片、茎段、根段等，且植物组织培养应注意无菌操作，故可以选择成熟的甜叶菊叶片作为外植体，消毒后进行接种，B正确；
C、光照可能会影响细胞的脱分化和愈伤组织的形成，故诱导愈伤组织期间一般不需要光照，C正确；
D、植物组织培养过程中主要的激素是生长素和细胞分裂素，诱导愈伤组织生芽和生根的过程需要更换培养基，二者区别主要在于激素的比例，D错误。
故选D。
13. 如图是取甲、乙两种植物的叶肉细胞杂交的流程示意图，下列叙述错误的是（ ）
A. 获得原生质体A、B的操作是去除细胞壁
B. 可以采用电激、PEG或灭活的病毒诱导原生质体A、B融合
C. 由D杂种细胞获得杂种植株的过程是植物组织培养技术
D. 移栽后的植株的细胞中含有的染色体数是甲细胞和乙细胞染色体数目的总和
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技 术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术），其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性，杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系，植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
【详解】A、植物细胞最外层是细胞壁，细胞壁会阻碍细胞间的融合，所以要获得原生质体A、B，需要去除细胞壁，A正确；
B、诱导植物原生质体融合的方法有物理法（如电激）和化学法（如PEG融合法），而灭活的病毒通常用于诱导动物细胞融合，不能用于诱导植物原生质体融合，B错误；
C、由D杂种细胞获得杂种植株，需要经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成根、芽等器官，最终发育成完整植株，这个过程利用的是植物组织培养技术，C正确；
D、杂种植株是由甲乙两种植物的体细胞融合形成的杂种细胞发育而来的，所以移栽后的植株的细胞中含有的染色体数是甲细胞和乙细胞染色体数目的总和，D正确。
故选B。
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14. 下图是酱油制作的部分流程，在米曲霉发酵过程中，米曲霉充分生长繁殖，大量分泌蛋白酶、脂肪酶等，该过程需通入无菌空气，下列说法正确的是（ ）
A. 米曲霉是真菌，合成分泌的酶将蛋白质和脂肪分解成单体
B. 米曲霉发酵过程中，添加小麦主要为米曲霉的生长繁殖提供氮源
C. 加入乳酸菌和酵母菌可以使发酵池中的产物种类更丰富
D 向发酵池中添加食盐有利于防止杂菌污染
【答案】CD
【解析】
【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳原、氨原、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、脂肪是小分子物质，不存在单体，A错误；
B、小麦种子中富含淀粉等多糖，添加小麦主要是为米曲霉的生长提供碳源，B错误；
C、乳酸菌可进行乳酸发酵产生乳酸，酵母菌可进行酒精发酵产生酒精等，加入乳酸菌和酵母菌后，它们会进行不同的发酵过程，从而使发酵池中的产物种类更丰富，C正确；
D、发酵池发酵阶段，添加食盐是抑制发酵过程杂菌污染和繁殖重要措施，食盐可增大环境的渗透压，使微生物发生渗透失水而死亡，D正确。
故选CD。
15. 大多数大肠杆菌的菌株是无害的，是动物肠道中正常寄生菌；部分有害的大肠杆菌随粪便排放散布到环境中，会在新鲜的粪便且氧气充足的环境中大量繁殖约3天，之后菌数就会下降。某同学使用3款消毒剂A、B、C分别杀灭大肠杆菌，处理效果曲线如图1，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 大肠杆菌是兼性厌氧型细菌，扩大培养时应提供充足氧气
B. 若采用显微镜直接计数法测定样品的大肠杆菌数量结果如图2，该中方格中的大肠杆菌数目为12
C. 根据曲线图可知，A消毒剂杀菌效果最好
D. 实验过程中应注意无菌操作，防止菌种污染干扰计数或影响研究者健康
【答案】ACD
【解析】
【分析】血细胞计数法是一种用于计算血液中各类血细胞数量的方法，主要包括红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞和血小板的计数。
【详解】A、氧气可以促进微生物有氧呼吸，为其繁殖提供大量的能量，大肠杆菌是兼性厌氧型细菌，扩大培养时应提供充足氧气，A正确；
B、为了避免重复计数，方格内只计左、上线和格子内的数目，若采用显微镜直接计数法测定样品的大肠杆菌数量结果如图2，该中方格中的大肠杆菌数目为10，B错误；
C、A消毒剂作用下，活细菌减少量最大，说明其效果最好，C正确；
D、部分有害的大肠杆菌随粪便排放散布到环境中，对人体造成危害，实验过程中应注意无菌操作，防止菌种污染干扰计数或影响研究者健康，D正确。
故选ACD。
16. 野生型菌株M能在基本培养基上正常生长，但其突变株M1无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。研究小组应用影印培养法纯化M1菌株（亮氨酸缺陷型突变株），部分流程如下图，1～5为菌落，相关叙述正确的是（ ）
注：影印培养法可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。
A. 培养基A是基本培养基；培养基B是完全培养基，含有亮氨酸
B. 该实验不宜用平板划线法把菌液接种到培养基A上
C. 影印平板的操作需要注意在酒精灯火焰周围，防止杂菌污染
D. 从培养基A、B中挑取菌落1、2、4进行纯化培养，可获得目的菌株
【答案】BC
【解析】
【分析】图中可以看出，培养基B中缺少了3、5两个菌落，说明培养基B中缺乏了亮氨酸导致3和5两个菌落微生物 无法生长，因此B是基本培养基。
【详解】A、由题干可知，亮氨酸缺陷型突变株无法在基本培养基上生长，但是可以在完全培养基上生长，与A相 比，B中缺少了3、5两个菌落，说明3、5菌落即是亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，A为完全培养基，B 为基本培养基，A错误；
B、培养基A上菌落均匀分布，因此该实验通过稀释涂布平板法把菌液接种到培养基A上，B正确；
C、影印平板操作需要在无菌条件下进行，酒精灯火焰周围存在无菌区域，在酒精灯火焰周围操作可以防止杂菌污染，保证实验结果的准确性，C正确；
D、由前面分析可知，培养基A是完全培养基，培养基B是基本培养基，菌落1、2、4在培养基A和培养基B上都能生长，说明它们不是亮氨酸缺陷型突变株（M1），说明3、5菌落即是亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，从培养基A中挑取菌落3、5进行纯化培养，可获得目的菌株，D错误。
故选BC。
17. 番茄红素广泛存在于成熟的红色植物果实中，可在食品加工中用作色素，也常用作抗氧化保健食品的原料。研究小组利用植物细胞悬浮培养技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 发生脱分化的前提条件之一是植物细胞处于离体状态
B. 番茄红素是胡萝卜生长和生存必需的初生代谢产物
C. 愈伤组织是一类未分化、不定形的薄壁组织团块
D. 该实验流程中缺乏从愈伤组织获得胚状体和完整植株的过程，设计有误
【答案】BD
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形 成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体)。
【详解】A、植物组织培养中，细胞发生脱分化的前提条件之一就是植物细胞处于离体状态。只有在离体的情况下，细胞才有可能在一定的激素和营养等条件下，失去原有的分化状态，形成愈伤组织，A正确；
B、初生代谢产物是指生物生长和生存所必需的物质，如糖类、蛋白质、脂肪等。而番茄红素是植物细胞中的一种次生代谢产物，它不是胡萝卜生长和生存所必需的物质，次生代谢产物一般具有特殊的功能，如色素、抗生素等，B错误；
C、愈伤组织是植物细胞脱分化后形成的一类未分化、不定形的薄壁组织团块，具有很强的分裂能力，在植物组织培养中起着重要的中间过渡作用，C正确；
D、该实验的目的是利用植物细胞悬浮培养技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，重点在于细胞培养和产物获取，而不是获得胚状体和完整植株，所以实验流程中没有从愈伤组织获得胚状体和完整植株的过程，设计并无错误，D错误。
故选BD。
18. 甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，乙植物的细胞质中含有抗除草剂基因，下图是将乙细胞的抗性基因引入甲细胞的体细胞杂交流程，相关叙述错误的是（ ）
A. 若甲、乙两种植株存在生殖隔离，该实验无法成功
B. 过程B体现了细胞膜的流动性，细胞膜是植物细胞的边界
C. 两两融合的细胞有三种，同种融合的细胞无法存活可以达到筛选目的
D. 杂种植株抗除草剂基因的遗传遵循孟德尔遗传规律
【答案】AD
【解析】
【分析】植物体细胞杂交过程： 先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，借助物理或化学方法诱导原生质体融合，得到的杂种细胞再经过诱导形成愈伤组织，并进一步发育成完整植株。
【详解】A、植物体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和，A错误；
B、原生质体的融合体现了细胞膜的流动性，细胞壁具有全透性，因此细胞膜是植物细胞的边界，B正确；
C、甲原生质体的细胞质失去活性，乙原生质体的细胞核失去活性，细胞核和细胞质对于细胞完成生命活动缺一不可，两两融合的细胞有三种（甲与甲融合、乙与乙融合，甲与乙融合），只有甲乙融合的细胞能够存活，同种融合的细胞无法存活可以达到筛选目的，C正确；
D、抗除草剂基因存在于细胞质，该基因不遵循孟德尔遗传规律，D错误。
故选AD。
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19. 猕猴桃果实富含维生素C，营养丰富，被称为“水果之王”。以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程如图。请回答下列问题：
（1）酿制果酒时，一般要先通气的目的是_____。若果酒保存不善，表现出现一层白膜，且有酸味，此时主要引起污染的微生物是_____。
（2）酿制果醋时需要“盖透气纱布”的原因是______，若糖源不充足，该菌也可以______为底物，经一系列反应其转变为醋酸，请写出此过程果醋发酵的反应式______。
（3）用下图装置进行发酵，发酵过程中d连接长而弯曲的胶管的目的是_____。若利用已制备的猕猴桃酒，继续使用此装置制醋，需改变的条件是：①______；②_____。
【答案】（1） ①. 让酵母菌在有氧条件下大量繁殖 ②. 醋酸菌
（2） ①. 防止外界的杂菌和灰尘进入发酵液，影响果醋的质量和卫生安全；能够保证发酵液与外界环境有一定的气体交换，有利于醋酸菌的生长和代谢活动 ②. 乙醇##酒精 ③. C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量
（3） ①. 在排出气体的同时可以防止杂菌污染 ②. 将发酵温度提高到30～35℃ ③. 通入无菌空气
【解析】
【分析】果酒的制作，选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。酒精发酵是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，需要隔绝空气营造无氧环境，发酵温度是18～30℃。果醋的制作，需将培养温度控制在30～35℃范围内，使用的醋酸菌是一种好氧菌，当氧气、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【小问1详解】
酿制果酒选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。酿制果酒时，先通气的目的是让酵母菌在有氧条件下大量繁殖。果酒制作过程中，如果果酒接触到空气，醋酸菌就会增殖，将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，进而在果酒表面形成一层菌膜。可见，若果酒保存不善，表现出现一层白膜，且有酸味，此时主要引起污染的微生物是醋酸菌。
【小问2详解】
酿制果醋时，醋酸菌需要在有氧条件下将糖或乙醇（酒精）转化成醋酸。因此，在发酵过程中，需要定期打开瓶盖，让新鲜空气进入，以满足醋酸菌对氧气的需求。同时，为了防止外界的杂菌和灰尘进入发酵液，影响果醋的质量和卫生安全，通常会在瓶口盖上一层纱布。这样既可以过滤空气中的杂质，又能够保证发酵液与外界环境有一定的气体交换，有利于醋酸菌的生长和代谢活动。若糖源不充足，该菌也可以乙醇（酒精）为底物，经一系列反应将乙醇转变为醋酸，此过程果醋发酵的反应式如下：
C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量。
【小问3详解】
在用下图装置进行发酵的过程中，排气口（d）通过长且弯曲的胶管与瓶身相连，其目的是：在排出气体的同时可以防止杂菌污染。果酒的制作，是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，需要隔绝空气营造无氧环境，发酵温度是18～30℃。果醋的制作，需将培养温度控制在30～35℃范围内，使用的醋酸菌是一种好氧菌。若利用已制备的猕猴桃酒，继续使用此装置制醋，需改变的条件是：将发酵温度提高到30～35℃；通入无菌空气。
20. 生物社团利用微生物制造酸奶（已知发酵的最适温度为38～44℃）。活动过程记录如下：
实验材料：甲品牌酸奶20mL、乙品牌酸奶20mL、纯牛奶1.5L、无菌水。
实验步骤：
①消毒：取3个已消毒的广口瓶，打上标签“A”“B”“C”；加热牛奶至85℃，立即均分至三个广口瓶中；
②加入菌种：向A广口瓶中加入20mL甲品牌酸奶，向B广口瓶中加入____，向C广口瓶中加入______，搅拌均匀后立即封口；
③发酵：将3只广口瓶放到已加热至38～44℃的保温箱内，恒温保存2h。
④观察：2h后，每隔30min对瓶中情况观测一次，如果A、B瓶中的奶制品已凝固呈果冻状，说明酸奶已做好。
请回答下列问题：
（1）该活动利用的主要微生物是_____，其遗传物质是______。
（2）加入菌种步骤中，应向B广口瓶中加入______，向C广口瓶中加入______。
（3）某小组同学按上述操作，一段时间后，A、B瓶中始终均未得到果冻状的酸奶，C瓶与刚放入保温箱时一致。请分析A、B瓶制酸奶失败的原因：______。
【答案】（1） ①. 乳酸菌 ②. DNA
（2） ①. 20mL乙品牌酸奶 ②. 20mL纯牛奶
（3）A、B瓶牛奶未冷却即加入菌种，可能使乳酸菌死亡
【解析】
【分析】乳酸菌是原核生物，代谢类型是异养厌氧型。乳酸菌能够将牛奶中的葡萄糖在无氧条件下转变为乳酸，可用来制作酸奶。制作酸奶时，接种时要防止杂菌污染和温度过高烫死乳酸菌。
【小问1详解】
乳酸菌能够将牛奶中的葡萄糖在无氧条件下转变为乳酸，所以制酸奶利用的主要微生物是乳酸菌，乳酸菌属于细胞生物，其遗传物质是DNA。
【小问2详解】
本实验利用微生物制造酸奶，实验设计应遵循对照与单一变量原则，向A广口瓶中加入20mL甲品牌酸奶，向B广口瓶中加入20mL乙品牌酸奶，而向C广口瓶中加入20mL纯牛奶。
【小问3详解】
A、B瓶中始终均未得到果冻状的酸奶，是由于在加菌种时未冷却，高温杀死了两种不同品牌酸奶中的乳酸菌，所以A、B瓶中并无乳酸菌的发酵过程，牛奶并未变成酸奶。
21. 研究小组为筛选能高效分解厨余垃圾的微生物进行了相关实验，请回答下列问题：
（1）培养基应满足微生物对营养物质的需求，其主要成分包含______（至少写出三点），若计划观察培养菌种的菌落形态并进行计数，培养基成分中还需加______；若欲筛选产耐高温淀粉酶的微生物，除正确配制培养基外，还要在______条件下培养。
（2）配制培养基时，各种成分溶化装瓶后要进行______（灭菌方式）；待平板凝固后，进行平板划线和纯培养，下列操作正确的是______。
【答案】（1） ①. 水、碳源、氮源和无机盐 ②. 凝固剂##琼脂 ③. 高温
（2） ①. 湿热灭菌##高压蒸汽灭菌 ②. ①③④⑤⑥
【解析】
【分析】1、各种微生物培养基的配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质；在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
2、微生物的筛选原理是：人为提供有利于目的菌的生长条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
3、纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
【小问1详解】
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质，各种微生物培养基的配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。若计划观察培养菌种的菌落形态并进行计数，则需要使用固体培养基，因此培养基成分中还需加凝固剂，如琼脂。若欲筛选产耐高温淀粉酶的微生物，除正确配制培养基外，还要在高温条件下培养。
【小问2详解】
对配制好的培养基，常采用湿热灭菌（其中高压蒸汽灭菌的效果最好）法进行灭菌。采用平板划线法对微生物进行接种，在下列操作步骤中：
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至接种环的金属丝烧红，①正确；
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，另一只手拿起装有菌液的试管，用持有接种环的手拔出试管口的棉塞，但不能完全握住棉塞，而应握住棉塞上部，②错误；
③将试管口通过火焰，③正确；
④在火焰附近将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液，用持有接种环的手握住棉塞上部，④正确；
⑤将试管口通过火焰，塞上棉塞，⑤正确；
⑥⑦左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3～5条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连，⑥正确，⑦错误；
⑧完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入恒温培养箱中培养，⑧错误。
综上分析，①③④⑤⑥正确。
22. 某研究团队从树林土壤中筛选得到了能分解玉米秸秆中纤维素的野生毕赤酵母，欲通过多次筛选获得优良菌株，进行富集培养。请结合图文，请回答下列问题：
（1）研究团队采集树林土壤样品后，对土壤菌液进行系列梯度稀释，目的是_____。
（2）稀释后将菌液通过_____（方法）接种到培养基，接种使用的器具是______，对该器具的灭菌方法是______。
（3）接种后经适当培养，平板上菌落数如图所示，则1g土壤中的活菌数约为_____个。若某小组统计的菌落数为14、8、22，则这组数据______（填“能”或“不能”）作为统计数据。若对照组的平板中有3个菌落，则研究人员应采取的措施是______。

（4）研究人员在富集培养过程中，从液体培养基中定期取样，并用_____法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。多次实验后获得了4种优良菌株，接种到含刚果红的鉴别培养基中培养一段时间，结果如下图，菌株_____（填图中的字母）最宜作为目标菌株进行发酵生产，原因是_____。

【答案】（1）（便于涂布平板后）得到单菌落
（2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 涂布器 ③. 灼烧灭菌法
（3） ①. 8.0×108 ②. 不能 ③. 舍弃后重新实验
（4） ①. 稀释涂布平板 ②. B ③. 菌落直径与透明圈直径比值最小
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
研究团队采集树林土壤样品后，对土壤菌液进行系列梯度稀释，稀释的目的是保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来，以保证计数的准确性。
【小问2详解】
由题意可知，该操作后还需要进行计数，故稀释后接种到培养基的方法通常是稀释涂布平板法，该接种方法中使用的工具是涂布器，灭菌方法是灼烧灭菌。
【小问3详解】
若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上菌落数分别是75、80、85，且对照的空白平板上无菌落或者菌落数为0（说明培养基制备合格，未被污染），图中将10g土样加入到90ml无菌水中，稀释了10倍，此后又经过稀释，稀释倍数是106倍，则可以推测1g土壤中的活菌数约为（75+80+85）÷3÷0.1×106=8.0×108个；稀释涂布平板法统计数目时，应选择30-300之间的进行统计，故若某小组统计的菌落数为14、8、22，不能作为统计数据；若对照组的平板中有3个菌落，说明培养基已被污染，应舍弃后重新实验。
【小问4详解】
对菌落进行计数，常用稀释涂布平板法；由图可知，B的菌落最小，透明圈最大，菌落直径与透明圈直径比值最小，说明其分解纤维素的能力最强，所以可选择菌株B作为标菌株进行发酵生产。
23. 下图中亲本植株的基因型为Aa（染色体数为2n），A、B、C、D是以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，请回答下列问题：
（1）通过A途径获得的植株的基因型是_____。植物细胞具有全能性的根本原因是_______。
（2）图中①过程依次包括______两个步骤，第二个步骤_____（填“需要”或“不需要”）光照，原因是______。
（3）D过程获得原生质体用到的酶是______。②过程常用化学试剂______（中文名称）进行诱导；细胞融合成功的标志是______；两两融合获得的杂种细胞经过______（技术名称）发育成完整植株，该植物细胞有丝分裂后期含有______个染色体组。
（4）C途径中先分化产生芽培养基中，激素的用量情况是_____。
A. 生长素用量与细胞分裂素用量比例为1
B. 生长素用量与细胞分裂素用量比例大于1
C. 生长素用量与细胞分裂素用量比例小于1
【答案】（1） ①. AA或aa ②. 细胞具有该物种全套的遗传信息
（2） ①. 脱分化、再分化 ②. 需要 ③. 再分化过程中形成叶等器官，叶片中的叶绿素在光下才能合成，且植物需要利用光能进行光合作用制造有机物
（3） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 聚乙二醇##PEG ③. 杂种细胞再生出细胞壁 ④. 植物组织培养 ⑤. 8 （4）C
【解析】
【分析】题图分析：A表示利用生殖细胞得到单倍体植株；B表示通过胚状体进行无性繁殖，其中①为脱分化、再 分化；C为植物组织培养；D表示植物体细胞杂交，其中②是诱导原生质体融合。
【小问1详解】
A途径是单倍体育种，亲本植株的基因型为Aa，经花药离体培养获得单倍体植株，其基因型为A或a，再经秋水仙素处理使染色体加倍，最终获得的植株的基因型是AA或aa。 植物细胞具有该物种全套的遗传信息，使得细胞在适宜条件下能够发育成完整的个体，这是植物细胞具有全能性的根本原因。 （2）
【小问2详解】
图中①过程是植物组织培养，依次包括脱分化和再分化两个步骤。 再分化过程需要光照，因为在再分化过程中会形成叶等器官，叶片中的叶绿素在光下才能合成，并且植物需要利用光能进行光合作用制造有机物，为自身生长发育提供能量。
【小问3详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此D过程获得原生质体用到的酶是纤维素酶和果胶酶，以去除细胞壁。 ②过程是诱导原生质体融合，常用化学试剂聚乙二醇（PEG）进行诱导。 细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，形成新的植物细胞。 两融合获得的杂种细胞经过植物组织培养技术发育成完整植株。亲本植株的染色体数为2n，含有2个染色体组，融合后的杂种细胞含有4个染色体组，在有丝分裂后期，着丝粒分裂，染色体数目加倍，所以含有8个染色体组。
【小问4详解】
在植物组织培养中，生长素用量与细胞分裂素用量比例会影响植物细胞的分化方向。当生长素用量与细胞分裂素用量比例小于1时，有利于芽的分化；当生长素用量与细胞分裂素用量比例大于1时，有利于根的分化；当生长素用量与细胞分裂素用量比例为1时，有利于愈伤组织的形成。C途径中先分化产生芽，所以培养基中激素的用量情况是生长素用量与细胞分裂素用量比例小于1，C符合题意。
故选C。
选项
A
B
C
D
传统发酵产品
果酒
果醋
腐乳
酸奶
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
乳酸菌
生物学分类
原核生物
原核生物
真核生物
真核生物
代谢类型
异养厌氧型
异养兼性厌氧型
异养需氧型
异养厌氧型
成分
NaNO3
K2HPO4
KCl
MgSO4.7H2O
FeSO4
（CH2O）
H2O
含量
3g
1g
0.5g
0.5g
0.01g
30g
1L
选项
A
B
C
D
传统发酵产品
果酒
果醋
腐乳
酸奶
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
乳酸菌
生物学分类
原核生物
原核生物
真核生物
真核生物
代谢类型
异养厌氧型
异养兼性厌氧型
异养需氧型
异养厌氧型
成分
NaNO3
K2HPO4
KCl
MgSO4.7H2O
FeSO4
（CH2O）
H2O
含量
3g
1g
0.5g
0.5g
0.01g
30g
1L