山东省青岛第十九中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)

这是一份山东省青岛第十九中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)，共23页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题等内容，欢迎下载使用。


一、单选题
1．冷休克蛋白（CSP）对细胞在低温时恢复生长和发挥细胞各种功能有重要作用。如大肠杆菌从37℃转到10℃培养时，出现4h左右的生长停滞，此时绝大多数蛋白质合成受阻，仅有24种CSP蛋白被合成。冷休克时，在大肠杆菌CSP家族中，CspA表达量非常高，易与mRNA结合，从而有效阻止mRNA二级结构的形成，使mRNA保持线性存在形式，易化了其翻译过程。下列说法正确的是( )
A.CSP家族的合成需要核糖体、内质网和高尔基体的参与
B.大肠杆菌低温培养时，核糖体功能停止，细胞内酶活性减弱
C.大肠杆菌低温培养时合成的CSP能够提高细胞抵抗寒冷的能力
D.冷休克时，mRNA链保持二级结构有助于与核糖体的结合并翻译
2．《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程以糯米或粳米等蒸熟，酿瓮中七日，……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”，“凡酸败之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是( )
A.为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封
B.“儒米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源
C.在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的
D.发酵过程中密封不严，醋酸杆菌将酒精转化为醋酸使酒“酸败”
3．我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐冷细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15℃条件下振荡培养3h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15℃条件下培养7d；③挑取生长菌落，进行划线，15℃条件下培养；④选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保藏。下列叙述错误的是( )
A.过程①中的振荡培养可以提高培养液中的溶氧量
B.过程②中的TYS培养基灭菌前需将pH调至酸性
C.过程②③使用的接种器具均需灼烧并冷却后接种
D.涂布后再次划线培养的目的是进一步纯化所得菌种
4．海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料，且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列说法错误的是( )
A.需将杂种细胞在黑暗的条件下诱导形成愈伤组织后大量养殖
B.用聚乙二醇处理可诱导两种原生质体融合
C.用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行
D.在高盐培养基中添加青霉素可选择出所需的杂种细胞
5．野生型菌株在基本培养基和完全培养基上均可繁殖，而营养缺陷型菌株只能在完全培养基上繁殖。筛选营养缺陷型菌株时，可将含菌株的一层基本培养基置于两层基本培养基中先进行培养，待出现菌落后，再向上层倾倒一层完全培养基继续培养，该方法称为夹层平板法，如图1所示。研究人员对大肠杆菌的菌种进行诱变后，利用该方法筛选其中的营养缺陷型菌株，结果如图2所示。下列说法正确的是( )
A.完全培养基应在灭菌后立即倒入夹层平板中
B.该实验无需设置未接种的夹层平板作为对照
C.经培养后，对首次出现的菌落用记号笔标在皿盖
D.图2中的小型菌落可能为营养缺陷型菌株形成的新生菌落
6．中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，其以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室通过发酵生产出PHA等新型高附加值可降解材料，从而提高了甘蔗的整体利用价值。具体的工艺流程如下图所示。下列说法正确的是( )
A.为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，应在液体培养基中添加包含蔗糖在内的多种有机物作为碳源，并不断提高蔗糖的浓度
B.为统计培养液中H菌的数目，可在培养过程中定期取样并采用平板划线法进行菌落计数
C.若菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，则发酵系统不需要进行灭菌处理
D.若在适宜营养物浓度、温度和pH条件下发酵，菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期且产生了少量的乙醇，则说明氧气是高密度培养的限制因素
7．紫罗兰和油菜均为二倍体植物，紫罗兰具有改变油菜花色，提高油菜抗虫性，改善油菜品质等优良基因资源。实验小组利用紫罗兰和油菜通过体细胞杂交技术培育新品种，下图表示不同浓度的PEG作用下原生质体两两融合和多（三个或三个以上）原生质体融合的比率。下列说法中错误的是( )
A.图中诱导原生质体两两融合的最佳PEG浓度为40％左右
B.两两融合的细胞有三种类型，均含有四个染色体组
C.不同原生质体细胞膜完全融合是植物杂种细胞形成的标志
D.植物体细胞杂交技术的突出优点是可克服远缘杂交不亲和的障碍
8．目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是( )
A.①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理
B.将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C.②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合
D.精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
9．某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是( )
A.制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织
B.CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸
C.本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小
D.为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作
10．我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2这两种蛋白质，这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合。下列叙述正确的是( )
A.精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的选择透过性有关
B.受精过程中，精子和卵细胞的随机结合会导致基因重组
C.多精入卵会导致产生双胞胎甚至多胞胎
D.BF1和BF2有利于维持受精卵中染色体数目的稳定
11．下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法错误的是( )
（注：Y=T或C,R=A或G）
A.HincⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端
B.限制酶Sau3AⅠ的切割位点在识别序列的外部
C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端
D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列R技术与电泳
12．实时荧光RT－PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT－PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.做RT－PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B.RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增
C.若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒
D.病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原—抗体杂交
13．胰岛素可用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是( )
A.新的胰岛素的预期功能是构建新胰岛素模型的主要依据
B.新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则
C.若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用处理大肠杆菌
D.新的胰岛素功能的发挥必须依赖于蛋白质正确的高级结构
14．海南作为中国唯一的热带岛屿省份，其种业发展在气候、资源、科技等方面均有明显优势。在海南，从常见的杂交水稻、高产玉米，到转基因抗虫棉花、耐热菊花，诸多优质新品种在这里被评议审定、种植推广。下列有关叙述错误的是( )
A.转基因产品需要经过一系列的安全性评价，符合相应标准后才能上市
B.我国对转基因技术的方针是研究上要大胆、推广上要慎重、管理上要严格
C.我国制定的有关法规最大程度保证了转基因技术和已上市转基因产品的安全性
D.对植物的基因改造是基因工程中研究最广泛和取得实际应用成果最多的领域
15．研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列有关该技术的说法，正确的是( )
A.对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础
B.对纤维素酶的改造是通过直接改造RNA实现的
C.改造后的纤维素酶和原纤维素酶是同一种酶
D.改造前后纤维素酶在细胞内合成过程中遗传信息的流向不同
16．2023年1月，宁夏首批体细胞克隆高产长寿超级奶牛诞生，科研人员选择高产长寿和抗逆性能优异的明星奶牛，采集其耳缘组织，培养皮肤成纤维细胞，再通过核移植生产克隆胚胎，进行胚胎移植及妊娠。下列说法错误的是( )
A.为获得更多的超级奶牛，可在胚胎移植前对囊胚或者原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割
B.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
D.体细胞核移植的成功率非常低，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决
17．斑点杂交是将待测DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素膜上，用已标记的探针进行杂交，洗膜（除去未接合的探针），放射自显影，判断是否有杂交及其杂交强度。下列说法错误的是( )
A.可用放射性同位素标记的目的基因片段做斑点杂交的探针
B.通过放射性自显影可以检测出整合有目的基因的受体细胞
C.斑点杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达
D.待测片段和探针杂交形成的双链区有氢键的形成
18．“黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是( )
A.在构建基因表达载体时，要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子
B.通过显微注射的方法将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”
C.“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”会造成环境污染
D.乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点
19．通过乳腺生物反应器生产药物时，需要对移植前的胚胎进行性别鉴定。目前最有效的方法是SRY-PCR法，操作程序是：从被测的囊胚中取出几个滋养层细胞提取DNA，然后用Y染色体上性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作引物，在Taq酶作用下，以胚胎细胞中的DNA为模板进行PCR扩增，再用SRY特异性探针检测产物。下列说法错误的是( )
A.从滋养层细胞提取DNA的原因是滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，对胎儿的影响很小
B.为获得更多的胚胎，可挑选出现阳性反应者在囊胚期进行胚胎分割
C.该过程可能因为样品污染或引物设计不合理等原因而出现假阳性
D.将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因启动子等重组在一起可制备乳腺生物反应器
20．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是( )
A.DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质
B.将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质
C.将析出的丝状物或沉淀物溶于2ml/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA
D.实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放
21．第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植。检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是( )
A.采集的卵子需培养至MⅡ期才能与获能的精子进行受精
B.PGS和PGD技术可分别用于筛选唐氏综合征和红绿色盲
C.进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查
D.获得的胚胎需培养至原肠胚期才能植入子宫
22．Cre-lxP系统能实现特定基因的敲除（如图1）。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，构建表达载体T（如图2）。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个lxP1之间或两个lxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法错误的是( )
A.Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键
B.若小鼠细胞含一个表达载体T（不含Cre酶），其肌肉组织细胞呈红色
C.若小鼠细胞含一个表达载体T（含Cre酶），其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色
D.若小鼠细胞含两个表达载体T（含Cre酶），其一个细胞内可能随机出现两种颜色
二、多选题
23．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，正确的是( )
A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
24．下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述正确的是( )
A.每个脾B淋巴细胞可产生一种抗体
B.细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在
C.细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上相同
D.克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
25．融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是( )
A.上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对
B.设计引物的目的是为了能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸
C.融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物
D.若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物
三、读图填空题
26．对生活垃圾进行分类处理，是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。
（1）科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以____________为唯一碳源。接种微生物常用的方法是______________________。
（2）获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株_____进行后续相关研究，理由______________________。
（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择_____菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是______________________。
27．如图为科学家采用不同方法培育良种生的过程，请据图回答有关问题：
（1）与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是_______。为提高良种奶生的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用__________对奶生进行处理，目的是超数排卵。
（2）“转基因牛D”培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是________。
（3）图中数字标号①代表的结构为______，①将来发育为_______，c→d过程需对其均等分割的原因是_________。
（4）在培育良种生的过程中，都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中，需要定期更换培养液，原因是_______。
28．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_________。
（2）步骤①常用方法包括_________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，_________，细胞发生融合。
（3）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行______培养的方式进行扩大培养。
（4）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。
①单克隆抗体除可以运载药物外，还有_________等作用。（答出2点即可）
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_________。
（5）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是_________。
29．人感染乳头瘤病毒（HPV）可诱发宫颈癌等恶性肿瘤，疫苗是预防宫颈癌的主要手段，科研人员针对HPV疫苗的研发做了如下研究。
（1）为构建重组疫苗，如图1所示，科研人员将含有HPV病毒衣壳蛋白L1基因的DNA片段用_________酶和_________酶酶切后，构建重组质粒，导入大肠杆菌。用添加_________的培养基筛选，对长出的单菌落提取质粒，利用_________技术鉴定导入的质粒是否含有L1基因。
（2）大肠杆菌表达产物衣壳蛋白L1经纯化，加佐剂SA04吸附后，二者共同被免疫系统识别加工，发挥免疫作用，吸附后制成疫苗用于预防HPV，与传统灭活疫苗相比，这样的重组疫苗更安全又有效，其主要原因是_________。
（3）为评价SA04疫苗佐剂能否提高疫苗的免疫效果，科研人员将L1及L1经SA04佐剂吸附后分别注射于小鼠体内，然后在第7、14、21、28天测定相应抗体的相对含量，结果如图2所示。
①实验结果表明_________。
②请指出本实验方案存在的缺陷并改进实验方案：_________。
30．人血清白蛋白（HSA）是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA.请结合相关知识回答下列问题。
（图甲为获取含HSA基因的DNA片段及酶切位点；图乙是三种限制酶的识别序列；图丙为质粒结构示意图）
（1）科研人员利用人肝细胞中的_________构建出cDNA文库，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列（5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'），应选择_________作为PCR的引物。
A.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'
D.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶_________切割目的基因。
（2）PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有_________条，且与DNAMarker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。
（3）目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中，可用CaCl2处理大肠杆菌，有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少_________等细胞器，不能对表达产物进行加工，可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞，如小鼠细胞中，则可避免上述问题的产生。现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白，可将重组质粒通过_________法导入小鼠的_________细胞中，然后将转化的细胞进行培养，由于无法进行全体外胚胎培养，成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用_________技术检测小鼠乳腺分泌物，可以判断目的基因是否表达。
参考答案
1．答案：C
解析：A、分析题意,CSP家族可存在于大肠杆菌内,大肠杆菌属于原核生物,原核生物不含内质网和高尔基体,A错误;B、核糖体是蛋白质的合成车间,结合题干信息“大肠杆菌从37℃转到10℃培养时,出现4h左右的生长停滞,此时绝大多数蛋白质合成受阻,仅有24种CSP蛋白被合成”可知,核糖体仍可发挥合成蛋白质的功能,B错误;CD、mRNA是翻译的模板,冷休克时,在大肠杆菌CSP家族中,CspA表达量非常高,易与mRNA结合,从而有效阻止mRNA二级结构的形成(而非保持二级结构),大肠杆菌低温培养时合成的CSP能够提高细胞抵抗寒冷的能力,易化了其翻译过程,C正确,D错误。故选C。
2．答案：D
解析：酿酒时，“翁”应装满23的糯米或粳米，剩余1/3空间内的氧气，有利于酵母菌的快速增殖；“糯米或粳米作为酵母菌的培养基，为其提供了碳源、氮源、生长因子、水和无机盐；酵母菌先进行需氧呼吸产生CO2和H2O再进行厌氧呼吸产生CO2和乙醇，不能同时产生水和酒精；发酵过程中密封不严，能够导致醋酸杆菌的污染，同时醋酸杆菌在氧气的作用下，会将酒精转化为醋酸，从而使酒酸败”；故选D。
3．答案：B
解析：A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误;B、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，CO2浓度维持在5%左右，CO2的作用是维持培养液的pH,B错误;C、本实验应设置对照实验，用添加甲药物、乙药物的培养液分别培养细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，C正确;D、为防止细胞培养过程中细菌的污染，需在培养液中适量添加抗生素，D错误。故选C。
4．答案：A
解析：由于海洋杜氏藻和紫球藻都是单细胞藻类,所以不需 要将杂种细胞在黑暗的条件下诱导形成愈伤组织,A错误; 聚乙二醇是化学诱导剂,用聚乙二醇处理可诱导两种原生质 体融合,B正确;用酶解法去除细胞壁时,为防止形成的原生 质体吸水涨破,应在等渗或略高渗溶液中进行,C正确;海洋 杜氏藻具有耐盐特性,紫球藻对青霉素有抗性,所以在高盐 培养基中添加青霉素可选择出所需的杂种细胞,D正确。
5．答案：D
解析：D、营养缺陷型菌株只能在完全培养基上生长,而野生型菌株在基本培养基和完全培养基上均可繁殖,小型菌落的形成是由于繁殖速度慢造成的,所以可能为营养缺陷型菌株形成的新生菌落,D正确。
6．答案：D
解析：A、由题干信息分析可知,为提高甘蔗的整体利用价值,需提高嗜盐单胞菌H对蔗糖的耐受能力和利用效率,故在液体培养基中将蔗糖作为唯一碳源,并不断提高其浓度,A错误;B、平板划线法只能分离菌种,不能进行计数,可采用血球计数板计数的方法进行菌落计数,B错误;C、若菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,在高盐、强碱条件下,也可能有杂菌生长,故该系统仍需要灭菌,C错误;D、若在适宜营养物浓度、温度和pH条件下发酵,菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期且产生了少量的乙醇,这说明发酵条件中氧气不足,使菌种进行无氧呼吸产生了乙醇。据此推测可知,氧气(O2或溶解氧)是限制高密度培养的重要因素,D正确。
7．答案：C
解析：A、从图上看，图中诱导原生质体两两融合的最佳PEG浓度为40%左右，融合率达到18%，A正确;B、两两融合的细胞有三种类型:紫罗兰-紫罗兰型，油菜-油菜型，紫罗兰-油菜型，由于紫罗兰和油菜均为二倍体植物，所以两两融合后的原生质体均含有四个染色体组，B正确;C、原生质体再生出新的细胞壁是植物杂种细胞形成的标志，C错误;D、植物体细胞杂交技术的突出优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。故选C。
8．答案：A
解析：A、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体溶液中,用化学药物诱导精子获能,A错误;B、受精卵中几乎不含精子的细胞质,将外源基因整合到精子的染色体上,是保证外源基因稳定遗传的关键,B正确;C、②采用体外受精技术,受精完成的标志是雌雄原核融合,C正确;D、与显微注射法相比,精子载体法对受精卵中核的影响会更小,理由是不需要穿过核膜,雌雄原核自动融合(通过受精作用完成整合),D正确。故选:A。
9．答案：B
解析：A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误;B、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，CO2浓度维持在5%左右，CO2的作用是维持培养液的pH,B错误;C、本实验应设置对照实验，用添加甲药物、乙药物的培养液分别培养细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，C正确;D、为防止细胞培养过程中细菌的污染，需在培养液中适量添加抗生素，D错误。故选C。
10．答案：D
解析：A、细胞膜上有特异性受体,精卵结合与细胞膜的信息交流功能有关,A错误;B、基因重组发生在减数分裂过程中,不会发生在精子和卵细胞结合的受精作用过程中,B错误;C、当卵细胞与精子融合后,卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2,这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合,C错误;D、BF1和BF2能避免受精卵再度与精子融合,有利于维持受精卵中染色体数目的稳定,D正确。
故选:D。
11．答案：D
解析：HincⅡ、SmaⅠ两种限制酶沿着识别序列的中心轴线切开，切割后形成平末端，A正确；Sau3AⅠ限制酶识别序列和切割位，点为↓GATC，切割位点在识别序列的外部，B正确；BamHⅠ限制酶识别序列和切割位点为G↓GATCC序列，Sau3AⅠ限制酶识别序列和切割位点为↓GATC序列，二者切割后形成相同的黏性末端，C正确；分析题表可知，HincⅡ的识别序列中，Y可以是T或C,R可以是A或G，识别序列不唯一，D错误。
12．答案：C
解析：A、PCR需要根据目的基因的核苷酸序列合成引物,同时RT-PCR还需要探针与待测样本DNA混合,A正确:B、PCR扩增必须以DNA为模板,RNA不能作为PCR扩增的模板,所以需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增,B正确;C、若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者极有可能感染了病毒,D正确。故选C。D、RNA病毒的检测方法有:①RNA检测,即检测病毒的遗传物质RNA;②特异性抗原蛋白检测,即检测病毒表面的一种糖蛋白;③特异性抗体检测,即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体。后两种方法的原理是抗原-抗体杂交,D错误.
13．答案：B
解析：由以上分析可知,新的胰岛素的预期功能是设计新的胰岛素结构的主要依据,A正确;蛋白质的合成过程是按照中心法则进行的,B错误;若要利用大肠杆菌生产新的胰岛素,常用Ca2+处理大肠杆菌细胞,再将含有新胰岛素基因的基因表达载体导入其中,C正确;根据结构与功能相适应的原理,新的胰岛素功能的发挥必须依赖于蛋白质正确的高级结构,D正确。
14．答案：D
解析：A、转基因作为一项技术本身是中性的，由这项技术研发出来的产品需要经过一系列的安全性评价，符合相应标准后才能上市，A正确;B、针对转基因技术的应用，各个国家都制定了符合本国利益的法规和政策。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新;推广上要慎重，做到确保安全;管理上要严格，坚持依法监管，B正确;C、国家有关部门制定实施了《农业转基因生物安全评价管理办法》《农业转基因生物进口安全管理办法》，这些法规的制定既维护了消费者对转基因产品的知情权和选择权，又最大程度地保证了转基因技术和已经上市的转基因产品的安全性，C正确;D、对微生物的基因改造是基因工程中研究最广泛和取得实际应用成果最多的领域，D错误。故选D。
15．答案：A
解析：对纤维素酶的改造属于蛋白质工程，需要以基因工程为基础，蛋白质工程是在基因水平上改造基因，A正确；对纤维素酶的改造是通过直接改造纤维素酶的基因实现的，B错误；改造后的纤维素酶氨基酸序列发生了改变，和原纤维素酶不是同一种酶，C错误；改造前后纤维素酶在细胞内合成过程中遗传信息的流向相同，都是DNA→RNA→蛋白质，D错误
16．答案：A
解析：A、胚胎移植一般选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，A错误;
B、胚胎移植是指早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确;
C、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，较短时间内得到更多的后代，C正确;
D、体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此体细胞核移植的成功率非常低，体细胞核移植技术的研究仍在继续，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。
17．答案：C
解析：A、根据杂交原理，作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:一应是单链;二应带有容易被检测的标记，例如放射性和荧光标记，因此可用放射性同位素标记的目的基因片段做斑点杂交的探针，A正确;
B、可用含有目的基因的DNA探针检测目的基因是否转入受体细胞，通过放射性自显影可以检测出整合有目的基因的受体细胞，B正确;
C、基因探针可以和DNA或RNA上的碱基互补配对，所以既可以检测DNA，也可以检测RNA，但无法检测蛋白质，C错误;
D、待测片段和探针杂交形成的双链区，即形成杂交带，遵循碱基互补配对原则，碱基间有氢键的形成，D正确。
18．答案：C
解析：A、启动子具有特异性，在构建基因表达载体时，要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子，A正确;
B、受精卵的全能性较高，通过显微注射的方法将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”，B正确;
C、“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”，可以被生物降解，不会造成环境污染，C错误;
D、乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点，D正确。
19．答案：B
解析：A、囊胚的内细胞团发育为胎儿的各种组织,滋养层发育为胎膜和胎盘,从滋养层细胞提取DNA的原因是滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘,对胎儿的影响很小,A正确;B、通过乳腺生物反应器生产药物需要雌性动物,为获得更多的胚胎,可挑选出现阴性反应者在囊胚期进行胚胎分割,B错误;C、DNA分子杂交是利用基因探针和SRY基因特异性结合,该过程可能因为样品污染或引物设计不合理等原因而出现假阳性,C正确;D、为了使药用蛋白基因在乳腺细胞中表达,将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因启动子等重组在一起可制备乳腺生物反应器,D正确。故选B。
20．答案：A
解析：A、DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离，A错误;B、DNA提取的实验中，要将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，取上清液，所以上清液中含有DNA和蛋白质，低温可以防止DNA被分解，B正确;C、DNA鉴定时，将提取到的丝状物溶解在2ml/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，在水浴加热下呈现蓝色，C正确;D、如果出现实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放，提取的DNA分子减少，D正确。
21．答案：A
解析：A、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养MI期，才可以与精子完成受精作用，A正确;B、PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛选红绿色盲:PGS是指胚胎植入前的染色休数目和结构检测，PGS可用于筛选唐氏综合征，B错误;C、受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫反应，因此进行胚胎移植前不需要对夫妻双方进行免疫检查，C错误;D、“理想胚胎”雷培养至桑棋或粪胚:才能植入子宫，D错误。故选A。
22．答案：B
解析：A、DNA单链上相邻的两个脱氧核苷酸之间通过磷酸二酯键相连,DNA由两条单链螺旋缠绕形成,Cre酶切下一个待敲除基因的过程中,需要切断基因前后两端,因此需要破坏四个磷酸二酯键,A正确;B、据图可知,小鼠有编码红、黄、蓝荧光蛋白的基因,前端有脑组织特异性表达的启动子,肌肉细胞不会表达颜色基因,故若小鼠细胞含一个表达载体T(不含Cre酶),其肌肉组织细胞呈无色,B错误;C、1xP1、1xP2位置如图2黑白三角符号所示,两个lxP1和两个lxP2之间的基因最多会被Cre酶敲除一次,将含Cre酶的病毒注入小鼠体内,Cre酶表达情况不同,识别的lxP不同,则有可能未敲除荧光蛋白基因,此时为红色(不含Cre酶时),也有可能敲除两个lxP1之间的红色荧光蛋白基因,此时为黄色,也有可能敲除两个1xP2之间的红色和黄色荧光蛋白基因,此时为蓝色,因而不同脑细胞会差异表达红色、黄色或蓝色荧光蛋白基因,C正确;D、小鼠脑组织细胞内有2个相同表达载体T(含Cre酶),Cre酶对每个DNA片段随机剪切,因而细胞的颜色由细胞内两种荧光蛋白的颜色叠加而成,故其脑组织细胞可能出现两种颜色,D正确。故选B。
23．答案：ABD
解析：微生物的培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等,A项正确;筛选分解淀粉的细菌时,实验流程为取样→梯度稀释→样品涂布到鉴别分解淀粉的细菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落,B项正确;由题意可知,淀粉被分解后经稀碘液处理才能出现透明圈,淀粉分解需要淀粉酶的催化,题图中两种细菌都出现了以菌落为中心的透明圈,说明两种细菌均能将淀粉酶分泌到细胞外来发挥作用,C项错误;透明圈是细菌分解淀粉得到的,H表示透明圈直径,C表示菌落直径,因此H/C值可以反映两种细菌分解淀粉能力的差异,即H/C值越大,细菌分解淀粉的能力越强,D项正确。
24．答案：AB
解析：A、牌脾B淋巴细胞只能产生针对相应抗原的抗体，每个脾B淋巴细胞只能产生一种抗体，A错误;B、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酵能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，故灭活病毒的抗原结构依然存在，B正确;C、细胞筛选时获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选，细胞融合时所用的培养液需要再加入诱导剂，两者的成分上有差异，C错误;D、杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，无接触抑制现象，因此该细胞克隆化培养过程中不会出现接触抑制，D错误。故选B。
25．答案：BCD
解析：A、上述过程中使用的引物P2和P3的碱基不需要完全互补配对,只需要与DNA的两条模板链的两端互补配对即可,A错误;B、引物为一段核苷酸,引物与DNA模板链结合后,能够从其3’端开始连接脱氧核苷酸,开始子链的合成,B正确;C、结合图示可知,融合PCR的第一步两条链重叠部位即互补配对,可互为另一条链的引物,C正确;D、若融合PCR的第二步获得了128个融合基因,引物数目和新合成的子链数目相同,即该过程消耗了128×2-2=254个引物,D正确。故选:BCD。
26．答案：（1）脂肪；稀释涂布平板法和平板划线法
（2）B；该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强
（3）B；硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈
解析：(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时,配制的培养基需要以脂肪为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。接种微生物最常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法。
(2)获得产脂肪酶的菌株后,在处理含油垃圾的同时,可获得单细胞蛋白,实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株,并进行了培养研究,由图1分析可知,与菌株A相比,菌株B增殖速度快,单细胞蛋白产量高,且脂肪剩余比例小,降解脂肪能力强,故应选择菌株B进行后续相关研究。
(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时,加碘液染色后,选择培养基上出现了A、B和C三种菌落,淀粉遇碘液会变蓝,而淀粉酶能够分解淀粉,则不同产酶活力的菌株周围会形成不同直径的透明圈,若要得到淀粉酶活力最高的菌株,应选择B菌落进一步纯化,这是因为B菌株的透明圈直径与菌落直径比值最大。经检测A菌落为硝化细菌,A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是硝化细菌为自养细菌,能够利用空气中的二氧化碳合成有机物,但硝化细菌不能产生淀粉酶,所以无透明圈。
27．答案：（1）可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；促性腺激素
（2）受精卵的全能性易于表达
（3）内细胞团；胎儿的各种组织；有利于胚胎的恢复和进一步发育
（4）清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
解析：(1)与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，大量繁殖优良品种。对良种母牛注射促性腺激素可促使其超数排卵。
(2)由于受精卵的全能性易于表达，因此良种牛培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞。
(3)由分析可知，图中①为内细胞团，将来发育为胎儿的各种组织;c-d过程需对①内细胞团均等分割，这样有利于胚胎的恢复和进一步发育。
(4)在培育良种生的过程中，都运用了动物细胞培养技术。在动物细胞培养过程中，需要定期更换培养液，原因是清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
28．答案：（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG；细胞膜上的糖蛋白；细胞膜打开
（3）抗体检测；既能大量增殖，又能产生特定抗体；体外
（4）作诊断试剂、治疗疾病；癌细胞凋亡
（5）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤
解析：(1)要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。
(2)①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG处理，诱导细胞融合;病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
(3)②表示筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培养和抗体检测;杂交瘤细胞具有无限增殖，且能产生特定抗体的特点;杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔内培养。
(4)①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应，可以有效地治疗疾病;单克隆抗体还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无。②由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。
(5)因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤(靶点清楚，毒副作用小)，故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体药物偶联物(ADC),对人体的副作用更小。
29．答案：（（1）BamHI；HindⅢ；氨苄青霉素；PCR
（2）衣壳蛋白L1无核酸，无侵染能力，但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞
（3）SA04疫苗佐剂能提高抗体含量从而提高疫苗免疫效果；缺少对照组；增加单独SA04佐剂处理的对照组
解析：(1)L1基因能表达出HPV病毒衣壳蛋白,BelI酶会破坏质粒上的氨苄青霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，所以不能使用BclI酶切割目的基因,L1基因两侧和质粒上都含有BamHI酶和HindIII酶的切割位点，但质粒上不含有Sau3AI酶的切割位点，故为构建重组疫苗，需要用BamHI酶和HindI酶同时去切割L1基因与质粒，然后将HPV病毒衣壳蛋白L1基因与质粒构建重组质粒,导入大肠杆菌。BamHI酶和HindI酶会破坏质粒上的卡那霉素抗性基因,但氨苄青霉素抗性基因没有破坏,重组质粒具有氨苄青霉素抗性基因，可以用添加氨苄青霉素的培养基筛选含有重组质粒大肠杆菌，对长出的单菌落提取质粒(导入的可能是重组质粒也可能是空白质粒),可以利用PCR(或核酸分子杂交或核酸分子测序)技术鉴定导入的质粒是否含有L1基因。
(2)重组疫苗含有L1基因,能表达衣壳蛋白L1,加佐剂SA04吸附后，二者共同被免疫系统识别加工，发挥免疫作用,由于衣壳蛋白L1无核酸，无侵染能力,但有抗原特性，可刺激机体产生抗体和记忆细胞,因此与传统灭活疫苗相比,这样的重组疫苗更安全又有效。
(3)①结果如图2所示,相同时间时，相比L1组以及无L1、SA04组(空白对照组),L1+SA04组的抗体含量都更多，说明SA04疫苗佐剂能提高抗体含量从而提高疫苗免疫效果。②由题干和图可知，本实验只做了加Ll,无L1.SA04,L1+SA04三组实验，由于L1+SA04组是两者的混合，缺少单独SA04佐剂处理的对照组，实验不严谨，故本实验需要改进的是增加单独SA04佐剂处理的对照组，然后在第7、14、21、28天测定相应抗体的相对含量。
30．答案：（（1）mRNA；A；EcRI和BamHI
（2）1
（3）内质网、高尔基体；显微注射；受精卵；抗原—抗体杂交
解析：
限制酶
识别序列和切割位点
限制酶
识别序列和切割位点
BamHⅠ
G↓GATCC
KpnⅠ
GGTAC↓C
EcRⅠ
G↓AATTC
Sau3AⅠ
↓GATC
HincⅡ
GTY↓RAC
SmaⅠ
CCC↓GGG
菌种
菌落直径：C（mm）
透明圈直径：H（mm）
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6