江西省上饶清源学校2023-2024学年高二下学期生物6月测试卷

这是一份江西省上饶清源学校2023-2024学年高二下学期生物6月测试卷，共19页。试卷主要包含了人绒毛膜促性腺激素，利用基因工程菌等内容，欢迎下载使用。
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．我国酿酒技术历史悠久，《唐书》记载“葡萄酒，西域有之……及破高昌……京中始识其味”。下列叙述正确的是（ ）
A．酵母菌是真核、兼性厌氧型生物，而醋酸菌是原核、厌氧型生物
B．酿酒发酵初期通入氧气可促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖
C．在利用葡萄汁制作葡萄酒的过程中，发酵液的pH逐渐增大
D．当糖源充足时，醋酸菌即将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
2．如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A．在配制步骤②、③的培养基时，都应添加琼脂作凝固剂
B．步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，不可通过溶液pH的变化大小来比较细菌分解尿素的能力
3．乙醇梭菌可利用氧化H2释放的能量，以CO和氨水等为主要原料合成乙醇、蛋白质等有机物。我国科学家利用乙醇梭菌发酵，收集发酵产物和菌体，作为燃料和饲料。以下有关叙述不正确的是（ ）
A．乙醇梭菌属于生态系统组成成分中的生产者
B．利用乙醇梭菌生产燃料和饲料体现了生物多样性的间接价值
C．以乙醇梭菌菌体蛋白作为饲料有助于提高能量利用率
D．使用乙醇梭菌发酵产物作为燃料有助于减少化石燃料导致的污染
4．为获得利福平和链霉素双抗的黄色短杆菌菌株，科研人员用现有的甲、乙两种菌株进行细菌细胞融合（基本过程与植物体细胞杂交一致）。菌株甲抗利福平（Rifr）但对链霉素敏感（StrS），菌株乙抗链霉素（Strr）但对利福平敏感（RifS）。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①中需要用纤维素酶和果胶酶处理细菌甲和细菌乙
B．为避免原生质体失水而影响融合，应将制备好的原生质体置于低渗环境中
C．融合后的两两融合子有3种，可用含利福平和链霉素的固体培养基进行筛选
D．过程②体现了细胞膜的选择透过性，融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁
5．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下列叙述正确的是（ ）
A．反复将HCG注射到小鼠体内，产生的血清抗体即为单克隆抗体
B．灭活病毒是唯一能诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的方法
C．用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能产生抗HCG的抗体
D．杂交瘤细胞分泌的抗HCG单克隆抗体能与HCG发生特异性结合
6．我国科学家利用细胞工程和基因编辑技术成功培育出世界上首例只有双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。下列说法错误的是（ ）
A．用含5%CO2的恒温培养箱培养精子以维持培养液的pH
B．用促性腺激素对雌性小鼠超数排卵处理以获得大量卵细胞
C．对在原肠胚时期的甲进行胚胎分割，可获得多只孤雄小鼠试卷源自 每日更新，更低价下载，欢迎访问。D．不考虑致死，孤雄小鼠的性染色体组成可能为XX、XY、YY
7．下列实验操作，可以达到预期结果或目标的是（ ）
A．用适当浓度蔗糖溶液处理新鲜黑藻叶的装片可以观察到黑藻细胞绿色加深
B．用光学显微镜观察紫色洋葱鳞片叶表皮细胞的临时装片可以观察染色体的形态和数目
C．将蒜置于4℃处理48~72h，待根长出1cm后制片可以观察低温对染色体数目的影响
D．在切碎的洋葱中加入适量研磨液，充分研磨，过滤并弃去滤液可以获得DNA
8．由于PCR扩增出的目的基因末端为平末端，且无合适的限制酶识别序列，需借助中间载体P将目的基因接入载体E。下图为两种载体的结构和相关限制酶的识别序列，下列叙述正确的是（ ）

A．构建重组载体P时，应选择EcRV进行酶切，再用T4DNA连接酶连接
B．为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcRV或SmaI切割载体P
C．载体P不能作为基因表达载体，是因为它不含起始密码子和终止密码子
D．若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞
9．利用基因工程菌（利用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类）生产疫苗是生物技术领域的一项重要应用。这种方法需要将编码目标抗原的基因插入到工程菌，使工程菌能够表达并分泌目标抗原。然后，通过培养这些工程菌，以获取大量的目标抗原，进而制备成疫苗。下列相关叙述错误的是（ ）
A．培养工程菌和培养动物细胞时，都要营造无菌环境
B．将目的基因导入工程菌，所用天然质粒需进行改造
C．工程菌表达“抗原”的过程中涉及了膜的融合
D．制备疫苗阶段，从培养液中提取的抗原需进行灭菌
10．T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，但是它在温度较高时容易失去活性。为了提高T4溶菌酶的耐热性，科学家将其肽链中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，使酶的耐热性得到了提高。下列叙述错误的是（ ）
A．T4溶菌酶是由C、H、O、N四种元素组成的具有催化作用的蛋白质
B．T4溶菌酶在高温下失去活性后仍然能够与双缩脲试剂发生颜色反应
C．T4溶菌酶中氨基酸种类的变化造成其空间结构发生了改变
D．T4溶菌酶耐热性提高的根本原因是编码该酶的基因碱基序列发生了变化
11．某地转基因木瓜市场占有量达九成，其中不少转基因木瓜为非法品种，在没有获得国家农业部授予的安全证书或审批进口的前提下就流向了市场。下列关于转基因技术及其安全性的说法正确的是（ ）
A．转基因食品生产的都是自然界中存在的物质，安全检测是不必要的
B．将α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物可防止转基因花粉的传播
C．食用含抗生素抗性基因的转基因食品，可增强人体抵抗病菌的能力
D．我国政府坚持不赞成、不允许、不支持、不接受任何形式的转基因生物实验
12．生物安全是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康以及生态环境所产生的危害或潜在风险。下列相关叙述错误的是（ ）
A．消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面
B．可允许通过基因组编辑技术对基因进行敲除、插入等，来设计完美试管婴儿
C．我国制定的有关法规最大程度保证了转基因技术和已上市转基因产品的安全性
D．我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人，生殖性克隆可能孕育出有严重生理缺陷的动物
二、选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。
13．白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈，随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（ ）
A．实验中使用的培养基pH呈弱碱性，其中琼脂不是营养物质
B．白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法
C．白地霉不能利用与普切明酸结合后的铁是出现红色抑菌圈的原因
D．补足Fe3+可以使桔梅奇酵母对白地霉的抑制效果逐渐减弱
14．如图为利用玉米（2N=20）芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图，其中细胞X发育形成的植物称为植株X。下列分析不正确的是（ ）
A．幼苗2的形成体现了细胞的全能性，植株X为杂种二倍体
B．植物体细胞杂交是指细胞a和细胞c诱导形成细胞X的过程
C．获得植株B的育种方式为单倍体育种，可明显缩短育种年限
D．植株X的培育属于杂交育种，基本原理是基因重组
15．“DNA粗提取与鉴定”的操作步骤为研磨→去杂→析出→鉴定。某研究组欲探究不同去杂方法对实验结果的影响（如下表）。下列叙述正确的是（ ）
注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度；纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低。
A．猪肝、菜花、草莓均可作为提取DNA的材料
B．对研磨液进行离心的目的是加速DNA的沉淀
C．离心法可以获得更高纯度的DNA
D．析出时的离心转速明显高于去杂质时
16．人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现与日俱增。下列有关叙述错误的是（ ）
A．采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染
B．转基因食品被食用后，基因会进入人体基因组发生转化过程
C．生殖性克隆人可以丰富人类基因的多样性，值得推广
D．为了国家安全，进行生物武器和化学武器的研究是必要的
三、非选择题：本题共5小题，共60分。
17．（12分）动物的羽毛中蛋白质含量丰富，是一种新型优质的蛋白源。但是羽毛蛋白是一种高度交联的二硫键构成的角蛋白，不容易被胃蛋白酶、蛋白酶等一般蛋白酶降解。科研人员从长期堆积腐烂羽毛的土壤中筛选分离出高效降解羽毛角蛋白的嗜热型菌株。回答以下问题：
(1)科研人员从长期堆积腐烂羽毛的土壤中取5g土壤样品分散于50mL的无菌水中，涂布于初筛培养基培养24h。初筛培养基除了含有微生物生长所需要的水、各种无机盐等营养，还必须满足的一个条件是 。为了筛选出符合条件的菌株，其取样点应是右图中的 点，理由是 。
(2)用5ml无菌水冲洗初筛培养基中长出的菌落，接入富集培养基进行富集培养48h。涂布分离，挑取单个菌落平板划线，划线的目的是 。进行平板划线前需要将平板 ，以防止冷凝水滴落平板，造成污染。
(3)科研人员筛选获得了3株降解羽毛效果好的菌株：F2、F3和F4，将它们分别接种在含有完整天然羽毛的发酵液中，一段时间后，测定羽毛的脱毛情况及发酵液中氨基酸增加量，结果如表所示。在筛选获得的3株菌株中，降解羽毛效果最好的是 ，理由是 。
18．（12分）玉米（2n＝20）和水稻（2m＝24）均为二倍体植物，某实验小组拟用体细胞杂交技术培育富含β胡萝卜素的“黄金大米”植株，过程设计如图所示。请回答下列问题：
(1)①为原生质体的制备过程，该过程不能在清水中进行，以防止 。
(2)诱导植物原生质体融合常使用的化学法有 。
(3)图中融合的杂种细胞中含有 个染色体组，该杂种细胞培育形成的植株的精原细胞在减数分裂过程中能产生 个四分体。
(4)图示过程中的原理包括 。
19．（12分）和牛体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎分割移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题：
(1)用 激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行获能处理后才具有与培养到 期的成熟的卵母细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中，常以观察到 作为受精的标志。
(2)为培育子代雌性小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，宜取 细胞进行DNA分析。牛在自然情况下，胚胎虽然最早可在8-16细胞阶段进入子宫，但为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，在实践中通常发育到 阶段的胚胎进行移植。移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是受体雌牛子宫对外来胚胎基本不发生 。
(3)胚胎移植的实质是早期胚胎在 条件下空间位置的转移。为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，图中甲环节是胚胎分割，在分割胚胎时，要注意将 均等分割且分割次数不宜过多，目前仍然以 的分割和移植效率最高。
20．（12分）培育抗草甘膦转基因大豆时，首先需要构建UTR—CTP—EPSPS序列（UTR—前导序列；CTP—叶绿体定位信号肽序列；EPSPS—抗草甘膦基因）和pCAMBIA1300质粒的重组载体，构建过程如图所示。重组载体通过电转化方式导入大肠杆菌DH5R中，经测序验证后导入农杆菌菌株EHA105中形成转化的工程菌株，再转染大豆。回答下列问题：
(1)构建UTR—CTP—EPSPS序列与pCAMBIA1300质粒的重组载体过程中，进行PCR时需要在两种引物的 端连接限制酶 的识别序列，引物序列的确定应依据 ，PCR依据的原理是 。
(2)重组质粒PTWGM1接入的UTR—CTP—EPSPS序列中，EPSPS基因与CTP绑定的目的是 。利用质粒PTWGM1可以大量扩增UTR—CTP—EPSPS片段，是因为其结构中含有 。
(3)质粒PTWGM1通过电转化方式导入大肠杆菌DH5R的关键是利用电脉冲在 处打开通道，使得外源DNA能够顺利进入细胞内。要确定细胞电转化是否成功，需要在培养大肠杆菌的培养基中添加 进行筛选。
(4)若要回收EPSPS片段，可将扩增产物通过电泳进行分离后，割下凝胶以回收扩增的EPSPS基因。在凝胶中DNA分子的迁移速率与 （答出两点）有关。若除目标条带外，还出现了少量的小片段非特异性扩增带，原因可能是 （答出一点）。
21．（12分）某种雄性不育水稻是由野生型水稻的核基因M突变为m所致，科研团队构建转基因智能不育系的思路是：将育性恢复基因OsNP1（在原始生殖细胞中表达）、花粉失活基因ZM-AA（在花粉中表达）两个基因一起构建重组Ti质粒。然后通过农杆菌转化法将目的基因导入愈伤组织细胞，从转基因后代中筛选m位点是纯合的但是两个转基因位点是杂合的可育植株。
(1)图1为已导入ZM-AA基因的重组Ti质粒，图2为OsNP1基因和相应的酶切位点，其中A链为转录模板链。为使OsNP1基因与图1中Ti质粒正确连接来构建基因表达载体，应选择的酶有 ；采用PCR技术扩增图2中的OsNP1基因时，会出现长、中、短三种长度的单链，一个OsNP1基因在第n次循环中新合成的短链数为 。
(2)重组Ti质粒中的新霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因的具体作用分别是 、 。
(3)若使两个基因分别在不同的细胞中表达，需将两个基因分别与 重组在一起。
(4)在不考虑其他变异的情况下，筛选出的杂合体转基因植株自交后代会出现 种基因型。从转基因安全性的角度分析，构建此转基因智能不育系的优点是 。
高二生物测试参考答案
1．B
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、酵母菌属于真核、兼性厌氧型生物，醋酸菌属于原核、需氧型生物，A错误；
B、酿酒发酵初期通入氧气可促进酵母菌进行有氧呼吸，有利于酵母菌大量增殖，B正确；
C、在利用葡萄汁制作葡萄酒的过程中，发酵液中的二氧化碳越来越多，二氧化碳溶于水呈酸性，故发酵液的pH变化是先减小后稳定，C错误；
D、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，D错误。
故选B。
2．B
【分析】（1）液体培养基：不含凝固剂（如琼脂），呈液体状态。 用途：扩大培养获得大量菌种、常用于工业生产。（2）固体培养基：含凝固剂（如琼脂），呈固体状态。 用途：分离、计数、鉴定等。分解尿素的细菌的分离：分解尿素的细菌能合成脲酶，该酶能催化尿素分解产生NH3，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是培养基中除含有细菌必需的碳源、水、无机盐外，只含有尿素一种氮源。
【详解】A、②培养基是液体培养基，不需要添加琼脂，A错误；
B、步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散，获得单细胞菌落，B正确；
C、步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氨源，不能加入牛肉膏蛋白胨（含有氮源），C错误；
D、步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时，挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多NH3，溶液pH更高，所以可通过溶液pH的变化大小来比较细菌分解尿素的能力，D错误。
故选B。
3．B
【分析】生物多样性通常有三个主要的内涵，即生物种类的多样性、基因（遗传）的多样性和生态系统的多样性。其价值主要体现在三个方面：
直接价值：指对人类的社会生活有直接影响和作用的价值，如：药用价值、观赏价值、食用价值和生产使用价值（野外收获进入贸易市场）等。
间接价值：一般表现为涵养水源、净化水质、巩固堤岸、防止土壤侵蚀、降低洪峰、改善地方气候、吸收污染物，调节碳氧平衡，在调节全球气候变化的作用，主要指维持生态系统的平衡的作用等等。
潜在价值：今天还未被利用的哪些物种在将来会有利用的价值，栽培植物的野生亲缘种究竟能提供多少对农林业发展有用的遗传材料，是不可估量的。
【详解】A、乙醇梭菌能以无机物为原料，合成有机物，属于生态系统组成成分中的生产者，A正确；
B、利用乙醇梭菌生产燃料和饲料体现了生物多样性的直接价值，B错误；
C、乙醇梭菌可利用氧化H2释放的能量，利用乙醇梭菌发酵，收集发酵产物和菌体，作为燃料和饲料，有助于提高能量利用率，C正确；
D、化石燃料燃烧会形成污染，乙醇梭菌可利用氧化H2释放的能量，以CO和氨水等为主要原料合成乙醇、蛋白质等有机物，使用乙醇梭菌发酵产物作为燃料有助于减少化石燃料导致的污染，D正确。
故选B。
4．C
【分析】在进行细菌细胞融合之前，先去除细菌细胞的细胞壁，获得原生质体，再借助一定的技术手段实现原生质体间的融合，如聚乙二醇融合法等。
【详解】A、细菌细胞融合与植物体细胞杂交的基本过程一致，首先都是要去除细胞壁，细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，由于酶具有专一性，故不能使用纤维素酶和果胶酶来处理，A错误；
B、失去细胞壁保护的原生质体更容易受到外界环境的影响，在低渗环境中很容易吸水涨破，因此制备好的原生质体应该置于等渗环境中，B错误；
C、形成的两两融合的融合子共有3种，分别是菌株甲互融、菌株乙互融、菌株甲与菌株乙互融，其中只有菌株甲与菌株乙互融形成的融合子才是所需要的双抗菌株，可用含有利福平和链霉素的固体培养基进行筛选，C正确；
D、过程②是原生质体甲、乙相互融合的过程，该过程体现了细胞膜的流动性，D错误。
故选C。
5．D
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、反复将HCG注射到小鼠体内，产生的血清中含有多种抗体，不是单克隆抗体，A错误；
B、诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的方法除灭活病毒外，还有化学方法如PEG等，B错误；
C、用选择培养基筛选出的杂交瘤细胞只是B细胞与杂交瘤细胞的融合细胞，不一定都能产生HCG的抗体，C错误；
D、杂交瘤细胞分泌的抗HCG单克隆抗体能与HCG发生特异性结合，即抗原与抗体发生特异性结合，进而可对早孕做出诊断，D正确。
故选D。
6．C
【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。
【详解】A、在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的 CO2培养箱中进行培养，其中CO2起到维持培养液pH的作用，A正确；
B、利用促性腺激素作用于性腺，促进性激素的分泌，以促进生殖细胞形成的原理，用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理，以增加卵母细胞数量，B正确；
C、图中甲处于囊胚期，C错误；
D、不考虑致死情况，理论上孤雄小鼠是由去核卵细胞、精子（X或Y）、具卵细胞细胞核的ahESC（X或Y）组成，性染色体组成为XX、XY或YY，D正确。
故选C。
7．A
【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理是：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶液酒精。（3）DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。（4）DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、用适当浓度蔗糖溶液处理新鲜黑藻叶的装片，造成黑藻细胞失水，原生质层变小，叶绿体不断向中间集中，所以可以看到绿色加深，A正确；
B、紫色洋葱鳞片叶表皮细胞是高度分化的细胞，不能分裂，染色体以染色质的形式存在，因此不能用光学显微镜观察染色体的形态和数目，B错误；
C、将蒜（或洋葱）在冰箱冷藏室内（4℃）放置一周。取出后，将蒜放在装满清水的容器上方，让蒜的底部接触水面，于室温（约25℃）进行培养。待蒜长出约1cm长的不定根时，将整个装置放入冰箱冷藏室内，诱导培养48～72 h，C错误；
D、提取DNA时，在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐，充分研磨，DNA溶解于氯化钠溶液，过滤并取滤液，D错误。
故选A。
8．A
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：可利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是钙离子处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】AB、由于载体E只有产生黏性末端的酶切位点，要使中间载体P接入载体E，同时防止载体E自身环化，需要用两种限制酶分别切割载体E和中间载体P，据图可知，中间载体P和载体E均含有XhI和PstI酶识别序列，故可选用XhI和PstI酶进行酶切，载体P的这两种酶识别序列中含有EcRV识别位点，并且其切割的为平末端，可以用于连接目的基因，SmaI酶虽然也能切割得到平末端，但是其识别位点没有位于XhI和PstI酶识别位点之间，故不能选择其对中间载体P进行切割，连接平末端只能用T4DNA连接酶，A正确，B错误；
C、由图可知，不直接选择P构建表达载体是因为它不含启动子与终止子，C错误；
D、受体细胞表现出抗性基因的相应性状，可能是导入了重组质粒，也可能只导入了空质粒（不含目的基因的质粒），D错误。
故选A。
9．C
【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。
【详解】A、培养微生物和培养动物细胞都需要营造无菌环境，以免杂菌污染，A正确；
B、在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，B正确；
C、基因表达过程未涉及膜融合现象，C错误；
D、制备疫苗阶段，从培养液提取的目标抗原需灭菌处理，以确保疫苗的安全性，D正确。
故选C。
10．A
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。
【详解】A、T4溶菌酶是具有催化作用的蛋白质，由题意“二硫键”可推知：T4溶菌酶的组成元素除了C、H、O、N四种外，还含有S元素，A错误；
B、T4溶菌酶在高温下失去活性后，其结构中还存在肽键，仍然能够与双缩脲试剂发生颜色反应，B正确；
C、科学家将T4溶菌酶肽链中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，使酶的耐热性得到了提高，说明T4溶菌酶中氨基酸种类的变化造成其空间结构发生了改变，C正确；
D、由题意可知：科学家借助蛋白质工程提高了T4溶菌酶的耐热性，蛋白质工程是通过改造或合成基因来完成的，因此T4溶菌酶耐热性提高的根本原因是编码该酶的基因碱基序列发生了变化，D正确。
故选A。
11．B
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。
【详解】A、转基因食物产品通常导入了外来基因，由于基因间的互作机制等原因，安全检测是必需的，A错误；
B、α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物得以表达可产生α-淀粉酶，该α-淀粉酶可降解花粉粒中的淀粉，造成植物转基因花粉不育，有效避免了转基因作物通过花粉将转基因传播给其它作物品种，B正确；
C、食用含抗生素抗性基因的转基因食品不会在人体内表达，故不会增强人抵抗病菌的能力，C错误；
D、我国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人，并不是不接受任何形式的转基因生物实验，D错误。
故选B。
12．B
【分析】生物安全在农业领域中，指遗传修饰生物（如转基因作物）对人体及生态系统造成的安全性问题；在生态领域中，指外来有害生物的引进和扩散，对人类生产和健康造成不利影响的各种传染病、害虫、真菌、细菌、线虫、病毒和杂草等。除此之外，生物安全还包括生物遗传资源流失、实验室生物安全、微生物耐药性、生物恐怖袭击等。生物安全是人的健康、动植物健康、生态环境健康三者安全统一的概念。
【详解】A、在生物恐怖威胁不断上升、全球传染病疫情频发的情况下，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确；
B、利用基因编辑技术设计试管婴儿，设计完美试管婴儿，已经涉及到新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，B错误；
C、我国针对转基因技术，颁布和实施了一系列法规和政策，既维护了消费者对转基因产品的知情权和选择权，又最大程度地保证了转基因技术和已经上市的转基因产品的安全性，C正确；
D、我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人，由于克隆技术尚不成熟，很可能孕育出有严重生理缺陷的动物，D正确。
故选B。
13．CD
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求；
2、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落;
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、白地霉属于霉菌，实验中使用的培养基pH呈弱酸性，其中琼脂是凝固剂的一种，不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A错误；
B、白地霉的接种采用了涂布平板法，桔梅奇酵母应使用了平板划线法，B错误；
C、由题意可知，随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强，抑菌圈的红色加深，说明白地霉不能利用与普切明酸结合后的铁是出现红色抑菌圈的原因，C正确；
D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，是由于白地霉从培养基中获得了较多的铁离子，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果，D正确。
故选CD。
14．ABD
【分析】图示为利用玉米(2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图，其中先将芽尖细胞组织培养，所得植株A的基因型与亲本相同；幼苗2为花药离体培养形成的单倍体，其经过秋水仙素处理可以得到纯合体植株B，若直接培育可得到单倍体植株C。植株A的体细胞a与纯合体植株B的细胞c的融合为细胞X。
【详解】A、幼苗2的形成体现了生殖细胞的全能性，植株X为四倍体，A错误；
B、植物体细胞杂交是指细胞a和细胞c诱导融合形成细胞X，并进行离体培养，使其再生杂种植株的过程，B错误；
C、先经过花药离体培养得到单倍体，再经秋水仙素处理获得植株B的育种方式为单倍体育种，可明显缩短育种年限，C正确；
D、植株X的培育属于利用植物体细胞杂交培育新品种，其原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D错误。
故选ABD。
15．ACD
【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
【详解】A、DNA粗提取与鉴定的实验中，应选择富含DNA的材料，猪肝、菜花、草莓均可作为提取DNA的材料，A正确；
BC、离心研磨液的目的是加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA，B错误、C正确；
D、据表可知，离心时DNA浓度是81.5，4℃冰箱静置是336.4，说明静置时蛋白质含量较多，沉淀质量离心时是0.068，4℃冰箱静置是0.1028，比较可知DNA的沉淀质量小，故析出时的离心转速明显高于去杂质时，D正确。
故选ACD。
16．BCD
【分析】1、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，即用生殖技术制造完整的克隆人，目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是治疗性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞，不产生可独立生存的个体。
2、中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人。
3、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、转基因植物打破自然物种的原有界限，可能破坏生态系统稳定性，采用一定技术手段使转基因的花粉失活可以防止基因污染，A正确；
B、转基因食品被食用后，基因会在人体肠道中分解为小分子物质被吸收，并不会发生转化过程，B错误；
C、克隆技术还不成熟，与社会伦理有严重冲突，应禁止生殖性克隆人，C错误；
D、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，D错误。
故选BCD。
17．(1) 羽毛角蛋白作为唯一的氮源和碳源 c 本实验的目的是从长期堆积腐烂羽毛的土壤中筛选分离出高效降解羽毛角蛋白的嗜热型菌株
(2) 纯化菌种 倒置
(3) F4 F4菌株表现得脱毛时间最短，且氨基酸增加量最多
18．(1)原生质体吸水涨破
(2)聚乙二醇（PEG）、高Ca2+—高PH
(3) 4/四 22
(4)细胞膜具有一定的流动性和植物细胞全能性
19．(1) 促性腺 MⅡ 两个极体或雌、雄原核
(2) 滋养层 囊胚 免疫排斥反应
(3) 相同生理环境 内细胞团 二分胚胎
20．(1) 5' hpt 目的基因的碱基序列 DNA复制
(2) 将EPSPS基因表达的产物引导到叶绿体 复制原点
(3) 细胞膜 卡那霉素
(4) 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象 引物设计不够优化，如引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体、退火温度偏低、酶的量偏高等
21．(1) BamH Ⅰ、Hind Ⅲ和DNA连接酶 2n-2
(2) 筛选出导入目的基因的愈伤组织细胞 筛选出导入重组Ti质粒的农杆菌
(3)在特定细胞中特异性表达的基因启动子等调控元件
(4) 2/两 防止目的基因通过花粉扩散而出现基因污染成分
MgSO4
NaH2PO4
蛋白胨
FeCl3溶液
水
琼脂
用量
5g
7g
15g
500mL
7g
20g
去杂质方式
沉淀质量（g）
DNA浓度（ng·μL-1）
OD260/OD280
二苯胺鉴定
离心
0.0680
81.50
1.53
蓝色
4℃冰箱静置
0.1028
336.4
1.41
蓝色
菌脱
脱毛时间/d
氨基酸增加量/（mg·mL-1）
F2
5
0.6882
F3
5
0.6198
F4
2
0.8862