江苏省连云港市赣榆区2022-2023学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)

这是一份江苏省连云港市赣榆区2022-2023学年高二下学期期中考试生物试卷(含答案)，共19页。试卷主要包含了单选题，多选题，读图填空题，实验探究题等内容，欢迎下载使用。


一、单选题
1．下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是( )
A.传统发酵的操作过程都需要经过严格的灭菌处理，防止杂菌污染
B.果酒制作时，葡萄中的葡萄糖可以为微生物的发酵提供碳源和氮源
C.果醋发酵液中，液面处醋酸菌的密度大于瓶底处的密度
D.泡菜制作时只能装八成满，所留空间的氧气可促进主要发酵菌种的增殖
2．下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是( )
A.筛选硝化细菌的选择培养基中需添加碳源
B.稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数
C.巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物且不破坏牛奶的营养成分
D.微生物实验中，使用过的培养基丢弃前需消毒处理，以免污染环境
3．下列关于发酵工程及其应用，叙述正确的是( )
A.发酵工程的中心环节是分离和提纯产物
B.发酵工程所用的菌种都是从自然界中筛选的性状优良的单一菌种
C.可通过过滤发酵液、离心去除固体杂质，采用蒸馏法等进一步纯化目标产品
D.啤酒、味精、赤霉素等的生产属于厌氧发酵产品
4．下列关于天竺葵的组织培养叙述正确的是( )
A.外植体用酒精消毒30min，再用无菌水冲洗2-3次
B.灭过菌的培养基自然冷却后需置于30℃的培养室中观察3d后备用
C.在外植体放入无菌培养基时，一般将天竺葵叶正面接触培养基
D.与分化芽的培养基相比，分化根的培养基中细胞分裂素与生长素的比例更高
5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.选取的幼年动物组织块用胃蛋白酶处理使其分散成单个细胞
B.充入5%的CO2刺激细胞正常呼吸
C.为减少杂菌污染，添加的血清需要经过高压蒸汽灭菌处理
D.定期更换培养液可以补充营养成分并清除代谢废物
6．下图表示通过相关技术获得高产奶牛的流程，下列叙述正确的是( )
A.A表示细胞核，其供体可选用XX或XY性染色体的个体
B.从牛卵巢中采集的卵母细胞需经过获能处理才可用于①过程
C.可利用显微操作的方法将A注射到去核的卵母细胞中
D.进行过程②前必须对受体动物注射适量免疫抑制剂
7．下列关于培养基类型的叙述错误的是( )
A.天然培养基由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成
B.合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较低
C.牛肉膏蛋白胨培养基既是一种天然培养基又是一种基础培养基
D.选择培养基可以将某种或者某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来
8．生物兴趣小组利用苹果进行“DNA粗提取与鉴定”的实验，相关操作正确的是( )
A.苹果组织研磨前经液氮冷冻处理可提高DNA的提取量
B.提取DNA时加入酒精目的是使不溶于酒精的蛋白质等析出
C.研磨液中的洗涤剂SDS能瓦解细胞壁，有利于细胞破裂
D.鉴定时将DNA粗提物溶于二苯胺试剂，沸水浴加热待试管冷却观察颜色变化
9．下列关于高压蒸汽灭菌锅的使用叙述正确的是( )
A.加水是指使用前在灭菌桶内加适量的水，水达到水位标记线即可
B.装锅是指将待灭菌物品装满灭菌桶，盖好锅盖，依此旋紧锅盖四周的螺栓
C.加热后，随着锅内压力逐渐增加，须打开排气阀，排出锅内残留的冷空气
D.出锅是指关闭电源后，旋开固定螺栓，开盖取出灭菌物品
10．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是( )
A.用NaCl处理细菌B使其处于感受态可吸收重组质粒
B.将完成导入的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C.将完成导入的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，含有重组质粒的细菌无法生长
D.可利用PCR技术检测人的生长激素基因是否在工程菌中转录和翻译
11．下图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，相关叙述错误的是( )
A.过程①体外受精过程中精子会发生顶体反应，顶体反应主要发生在精子的头部
B.通过直接培养图中的卵母细胞也可获得小鼠的孤雌单倍体胚胎干细胞
C.过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同阶段表达的基因存在差异
D.“早期胚胎”最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性
12．引物的设计是影响PCR扩增反应的效率和特异性的关键因素，相关叙述正确的是( )
A.DNA聚合酶能够从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸
B.要尽量避免引物内部或引物之间存在碱基互补序列
C.PCR过程中使用的引物一般为单链RNA片段
D.引物的GC含量越高，结合特异性越强，越利于目标DNA的扩增
13．下列关于蛋白质工程及其应用的说法，错误的是( )
A.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子结构，使之更加符合人类需要
B.蛋白质工程首先需要获得和分析目标蛋白质的相关信息
C.蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程
D.蛋白质工程技术中的操作对象是蛋白质或控制蛋白质合成的基因
14．研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是( )
A.马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B.利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C.茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D.马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
二、多选题
15．研究人员拟从土壤样品中分离出高效降解甲醇的酵母并进行大量培养。操作流程如下，据图分析相关叙述正确的是( )
A.过程③是指将50℃左右的培养基倒入含有菌液的培养皿中
B.平板浇注分离法适宜于厌氧型或兼性厌氧型的微生物的分离和计数
C.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
D.扩大培养时，可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
16．下列关于干细胞技术及其应用叙述正确的是( )
A.胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系
B.骨髓多能造血干细胞可分化出多种细胞具有发育成完整个体的潜能
C.上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞属于多能干细胞
D.利用培植皮肤干细胞的技术可以治疗大面积烧伤的患者
17．PGS技术又名“胚胎植入前染色体病筛查”，是在胚胎移植前对发育到一定阶段的胚胎进行染色体检查。胚胎嵌合体中含有两种或两种以上遗传组成的细胞。如下图所示为某胚胎嵌合体，浅色是正常细胞，深色是染色体异常细胞。下列说法正确的是( )
A.PGS技术可降低单基因遗传病患儿出生的概率
B.图示胚胎所有细胞中的染色体数目都相同
C.PGS结果正常的胚胎仍有患某些染色体病的风险
D.PGS技术有效降低了异常胚胎被移植的概率
18．科研人员用PCR扩增某抗虫基因，其研究了不同循环次数对扩增产物的影响，下图是扩增产物的电泳结果图，相关叙述正确的是( )
A.凝胶中DNA分子通过染色，可以在紫外灯下被检测出来
B.在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小有关
C.1、2、3泳道中得到的产物的核苷酸序列都相同
D.实验结果表明最适宜的循环次数为18
19．免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是( )
A.抗体1和抗体2是由同一种浆细胞分泌的两种不同抗体
B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象
C.图示中的DNA是牛乳基因中的DNA片段
D.PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈负相关
三、读图填空题
20．猪流行性腹泻是由腹泻病毒(PEDV) 引起的，PEDV是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，S蛋白是PEDV表面的一种蛋白质，在病毒入侵过程中S蛋白与其特异性受体结合引起膜融合过程。如图1是S基因克隆表达流程，如图2是制备针对S蛋白的单克隆抗体的流程图。请回答下列问题:
(1)图1中PEDV增殖过程用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Ver细胞，选择Ver细胞是因为其表面有_____, 10%胎牛血清的作用是_____。为了使得Ver细胞分散可以在培养液中添加____。第一链 cDNA的合成过程中需要_____酶。
(2)图2中与直接注射灭活的PEDV相比,注射纯化后的S蛋白的优点是_____。经过过程③HAT培养基的培养可以将_____细胞筛选出来。
(3)图2中过程⑤阳性检测的原理是_____, 过程⑥阳性克隆扩大培养的方法有_____。
四、实验探究题
21．酥梨的糖分含量比柚子高，而柚子具有独特的香味，以酥梨柚子发酵而成的复合果醋，在滋味、香气方面二者可互补协调。下图是以新鲜酥梨、柚子为原材料，经过酒精发酵和醋酸发酵酿造酥梨柚子复合果醋的流程图，请回答：
(1)酵母菌进行无氧呼吸的场所在______，产物是______。
(2)实验前要将发酵瓶、榨汁机等器具要体积分数为______的酒精消毒。酒精发酵过程中发酵瓶要留有1/3的空间，原因是______。
(3)酒精发酵结束后，接入醋酸菌，同时加入柠檬酸/碳酸氢钾的目的是______，温度一般控制在______℃，同时进行220r·min-1的摇瓶振荡培养的目的是______。
(4)科研人员还研究了酵母接种量以及V（酥梨汁）：V（柚子汁）的比值对酒精发酵的影响，实验结果如下图：
①图2中V（酥梨汁）：V（柚子汁）比值过大酒精度下降的原因是______。
②根据图1和图2实验结果可以得出最佳的发酵条件是______。
22．豆科牧草二倍体沙打旺（2n=16）具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，同源四倍体紫花苜蓿（4n=32）固氮能力较强，科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如下，请回答：
(1)通过植物体细胞杂交技术可以克服______，获得兼具两者优良性状的豆科牧草，这种牧草属于______倍体。
(2)过程Ⅰ用______处理获得原生质体。已知红色荧光染料能使得植物细胞质呈现红色，绿色荧光染料能使得细胞核呈现绿色，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到______现象时，可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿融合而成的。
(3)过程Ⅳ脱分化形成的愈伤组织的特点为______，过程Ⅴ中的培养基中常添加的植物激素有______。
(4)待幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗，炼苗的目的是______。
(5)科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对沙打旺和紫花苜蓿原生质体融合率的影响，实验结果如下图，异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用：
①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外还有______。
②实验结果表明诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最佳PEG浓度为______，理由是______。
23．目前可溶性磷元素的缺乏已经成为制约植物生长的关键因素。解磷菌可以将土壤中难溶性的无机磷分解成可溶性的无机磷供植物吸收利用，目前的研究主要集中在常温下解磷菌筛选，而在低温环境下这些解磷菌则不能发挥作用。科研人员从南极企鹅岛土壤中尝试筛选耐低温的解磷菌，请回答：
（1）常规微生物实验中，常用______法对培养基进行灭菌。选择从南极企鹅岛土壤分离耐低温的解磷菌的原因是______。
（2）步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4•7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、琼脂粉等，其中做氮源的是______，琼脂粉作为______。
（3）步骤⑤是将具有明显溶磷圈的菌落多次重复______法以得到纯净的单一菌落，该过程使用的接种工具是______。
（4）初步筛选出3种能够在10℃条件下溶解无机磷培养基中难溶性无机磷而产生溶磷圈的低温解磷菌，结果如图1，根据图1可知三株菌株中______的解磷能力最强，判断的理由是______。
（5）将初步筛选出的3株解磷细菌在液体培养基中进行复筛，180r/min的转速培养3d后菌液中的可溶性磷含量即可达到最高值，最高值的结果如图2，复筛的培养温度为______，根据实验结果可知______为最佳目标菌株。
24．科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了该基因真核表达载体，进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下。请回答：
（1）过程①需要在PCR反应体系中添加的物质有______以及引物、DNA模板、缓冲液和Mg2+等，为了使得SLA-2基因能定向插入质粒A中，设计引物时需要在5′端添加______、______（填限制酶的名称）识别序列。
（2）过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______，该过程需要用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，然后将大肠杆菌涂布在含有______（抗生素）的培养基上培养。
（3）过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，单克隆抗体能检测其是否具有正确的______，从而是否具有生物活性。
（4）科研人员将单个突变碱基引入SLA-2基因组cDNA质粒克隆中，流程如下图。已知在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰。
①DpnI识别甲基化的GATC四个碱基序列，因此其能将______水解消化掉。在大肠杆菌细胞内完成缺刻修复需要______酶。
②已知质粒A为n个，经过程①扩增18个循环，需要突变引物______个，将过程②形成的产物全部转入大肠杆菌后复制a轮，得到双链突变的DNA______个。
参考答案
1．答案：C
解析：A、传统发酵的操作过程中进行消毒处理，但没有进行灭菌处理，A错误；
B、果酒制作时，葡萄中的葡萄糖可以为微生物的发酵提供碳源，B错误；
C、醋酸菌属于好氧菌，果醋发酵液中，液面处的醋酸菌更易接触到充足氧气，因此其密度大于瓶底处的密度，C正确；
D、泡菜坛中加入蔬菜时装至半坛，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，避免发酵液溢出坛外，D错误。
故选C。
2．答案：B
解析：A、硝化细菌属于自养型生物，筛选硝化细菌的选择培养基中不需要添加（有机）碳源，A错误；
B、微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数，B正确；
C、巴氏消毒法是较为温和的消毒方法，可以杀死牛奶中的微生物并不破坏牛奶的营养成分，但不能杀死所有的微生物，C错误；
D、微生物实验中，使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，彻底杀死残留微生物，以免污染环境，D错误。
故选B。
3．答案：C
解析：A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误;
B、性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，B错误;
C、单细胞蛋白是微生物菌体，可采用沉淀、过滤等方法分离，而代谢产物则采用蒸馏、萃取、离子交换等方法，C正确;
D、味精是有氧呼吸发酵产品，D错误。
4．答案：B
解析：A、放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次，持续6-7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗，A错误;
B、灭过菌的培养基自然冷却后需置于30°C的培养室中观察3d，确定无污染后备用，B正确;
C、在外植体放入无菌培养基时，一般将天竺葵叶反面接触培养基，C错误;
D、与分化芽的培养基相比，分化根的培养基中细胞分裂素与生长素的比例更低，D错误。
5．答案：D
解析：A、选取的幼年动物组织块用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单个细胞，不能用胃蛋白酶，A错误;
B、充入5%的CO2是维持培养液的pH，B错误;
C、加入血清为动物细胞提供营养，高压蒸汽灭菌会破坏血清中的活性成分，C错误;
D、定期更换培养液以清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害，D正确。
6．答案：C
解析：A、为获得高产奶牛，则选择雌性个体，A为供体体细胞的细胞核，性染色体的组成可为XX，A错误;
B、从牛卵巢中采集的卵母细胞需要在体外经人工培养至减数第二次分裂中期，不可直接用于过程①，B错误;
C、进行动物体细胞核移植时，常用显微操作去核或将供体细胞注入去核的减数第二次分裂中期的卵母细胞中，C正确;
D、②过程是胚胎移植，胚胎移植时，受体对植入胚胎不会产生排斥反应，因此不需要注射免疫抑制剂，D错误。
7．答案：B
解析：A、由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成的培养基是天然培养基，A正确;
B、合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较高，B错误;
C、牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，由于营养丰富，又是一种基础培养基，C正确;
D、选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来，D正确。
8．答案：A
解析：A、苹果组织研磨前经液氨冷冻处理可以充分研磨植物细胞，提高DNA的提取量，A正确;
B、DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，提取DNA时加入酒精目的是使不溶于酒精的DNA析出，B错误;
C、研磨液中的洗涤剂可以溶解细胞膜，有利于细胞破裂，C错误;
D、鉴定时将DNA粗提物溶于2ml/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，沸水浴加热待试管冷却观察颜色变化，D错误。
9．答案：C
解析：A、将灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，A错误;
B、以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，B错误;
C、加热后，打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气，C正确;
D、让锅内温度自然下降，当压力表指针回到零后打开放气阀，开启锅盖，D错误。
10．答案：C
解析：质粒A中含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因,而重组质粒中抗四环素基因被破坏,只含抗氨苄青霉素基因,则在含有氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入质粒A或重组质粒的细菌,能在含有四环素的培养基上生长的是导入了质粒A的细菌,B错误,C正确。
11．答案：B
解析：B、卵母细胞只有在受精之后才能完成减数分裂,所以需要用精子刺激卵母细胞,然后移除雄原核再进行培养,不能直接用卵母细胞培养,B错误。
12．答案：B
解析：A、DNA子链是从5'向3'进行延伸，因此DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，A错误;
B、要尽量避免引物内部或引物之间存在碱基互补序列，防止因引物内部或引物之间碱基互补降低目标DNA扩增效率，B正确;
C、PCR过程中使用的引物一般为单链DNA片段，C错误;
D、引物的GC含量越高，结合特异性越强，但GC含量过高，不利于退火，从而阻碍目标DNA的扩增，D错误。
13．答案：D
解析：蛋白质工程技术中的操作对象是控制蛋白质合成的基因,D错误。
14．答案：D
解析：A、马铃薯茎尖经过灭菌后会死亡，用于脱毒苗培育之前需要经过消毒处理，A错误;B、利用组织培养技术获得的脱毒苗，是脱毒苗，而非能抗病毒，B错误;C、核酸包括DNA和RNA，由于基因的选择性表达，茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类不完全相同，C错误;D、据图可知，实验范围内，在茎尖外植体为0.27mm时成苗率和脱毒率均相对较高，是马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小，D正确。故选D。
15．答案：ABD
解析：C、挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定培养液中甲醇的含量,C错误。
16．答案：AD
解析：A、胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离出来，A正确;
B、骨髓造血干细胞属于一种成体干细胞，能形成特定组织和器官，不能形成完整个体，B错误;
C、上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞属于专能干细胞，C错误;
D、在治疗大面积烧伤病人时，通常是取患者自身细胞，在体外培养获得大量的自体健康皮肤，再移植给患者进行恢复性治疗，D正确。
17．答案：CD
18．答案：ABD
解析：凝胶中的DNA分子通过染色、可以在波长为300nm的紫外线下被检测出来，A正确；在凝胶中DNA 分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关，B正确；123泳道中得到的产物的核苷酸大小是相同的，但是排列顺序不一定相同，因此123泳道中得到的产物的核苷酸序列不一定相同，C错误；从图中可以看出，循环次数为18时，得到的产物最清晰，最明确，大小也合适，因此实验结果表明最适宜的循环次数为18，D正确。
19．答案：ACD
解析：A、每一种浆细胞只分泌一种抗体，则抗体1和抗体2是由不同种的浆细胞分泌的两种不同抗体，A错误；
B、微量抗原抗体反应，利用的是PCR技术扩增“固定抗体1—抗生素—抗体2”上连接的DNA，如果第三次冲洗不充分，可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；
C、免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段），若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，C错误；
D、微量抗原抗体反应，是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，D错误。
故选ACD。
20．答案：（1）特异性受体；满足动物细胞培养的营养需要，补充未知的营养物质；胰蛋白酶；逆转录
（2）小鼠体内产生目标B淋巴细胞的概率更高；杂交瘤
（3）抗原抗体特异性结合；体内培养（注射到小鼠腹腔）或体外动物细胞培养
解析：（1）病毒没有细胞结构，寄生在特定的活细胞中，PEDV入侵过程中S蛋白与其特异性受体结合引起膜融合，因此PEDV增殖过程用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Ver细胞，选择Ver细胞是因为其表面有s蛋白的特异性受体，能与S蛋白特异性结合，从而使该病毒感染。10%胎牛血清的作用是满足动物细胞培养的营养需要，补充未知的营养物质。分散动物细胞使用的酶是胰蛋白酶。cDNA是通过以RNA为模板逆转录形成的，需要逆转录酶。
（2）S蛋白是该病毒能引起机体产生免疫反应的抗原，因此与直接注射灭活的PEDV相比，注射纯化后的S蛋白的优点是使小鼠体内产生目标B淋巴细胞的概率更高。单个的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身的融合体和骨髓瘤细胞的自身融合体都不能在HAT培养基上生长，因此经过过程③HAT培养基的培养可以将杂交瘤细胞筛选出来。
（3）图2中过程⑤阳性检测的原理是抗原抗体特异性结合，过程⑥阳性克隆扩大培养可以在体内培养（注射到小鼠腹腔）或体外动物细胞培养，从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。
21．答案：(1)细胞质基质；酒精和二氧化碳（C2H5OH和CO2）
(2)70%；便于酵母菌有氧呼吸大量增殖，防止发酵旺盛时发酵液的溢出
(3)维持pH呈现酸性（维持pH稳定）；30-35；增加溶解氧（增加溶解氧、增加与营养物质的接触）
(4)酥梨汁较柚子汁的含糖量高，糖度过高产生的高渗会抑制酵母菌的活性；酵母接种量为0.2%，V（酥梨汁）：V（柚子汁）=2：1
22．答案：(1)远缘杂交不亲和的障碍；（异源）六倍体
(2)纤维素酶和果胶酶；发两种荧光
(3)不定型的薄壁组织团（没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞）；细胞分裂素和生长素
(4)让其适应自然环境
(5)物理融合法（电融合法）；35%；该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小
解析：(1) 如图培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，可以克服远缘杂交不亲和的障碍。豆科牧草二倍体沙打旺(2n=16) 和同源四倍体紫花苜蓿(4n=32)融合形成的细胞含有6个染色体组，属于六倍体。
(2)植物体细胞杂交需要先用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记紫花苜蓿和百脉根的原生质体膜上的蛋白质，可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到3种不同的原生质体，即只有红色荧光的原生质体，只有绿色荧光的原生质体，有2种荧光的原生质体，其中两个原生质体融合所形成的细胞，其细胞膜上含有两种颜色的荧光标记，既有红色荧光又有绿色荧光。
(3)经脱分化形成的不定型的薄壁组织团(没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞)是愈伤组织。过程V是再分化过程，需要添加一定比例的细胞分裂素和生长素促进细胞分化。
(4)为了让幼苗能适应野外环境，需要将幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗。
(5)①人工诱导原生质体融合的方法除了PEG诱导融合，还有电刺激、离心等物理方法。
②实验结果显示诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最佳PEG浓度在35%，因为该浓度下总融合率较低，但异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小。
23．答案：（1）湿热灭菌或高压蒸汽灭菌；南极企鹅岛气温较低分离到耐低温的解磷菌的概率较大
（2）（NH4）2SO4；凝固剂
（3）平板划线法；接种环
（4）Pd11；溶磷圈直径与菌落直径的比最大
（5）10℃；Pd12
解析：(1)常规微生物实验中，常用湿热灭菌法(高压蒸汽灭菌法)对培养基进行灭菌。南极企鹅岛天气寒冷气温低，在此生长的微生物具有耐低温的特点，分离到耐低温的解磷菌的概率较大，因此选择从南极企鹅岛土壤分离耐低温的解磷菌。
(2)由培养基的成分可知，可做氨源的是（NH4）2SO4，琼脂粉作为凝固剂，所以该培养基为固体培养基。
(3)据图可知，接种方法为平板划线法，平板划线法将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板，接种划线，在恒温箱里培养，划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少最后可能形成单个菌落，使用的接种工具为接种环。
(4)通过比较溶磷圈直径与菌落直径的比值可判断解磷菌的解磷能力，比值越大说明解磷能力越强，三株菌株中Pd11的溶磷圈直径与菌落直径的比值最大，所以Pd11的解磷能力最强。
(5)初步筛选出3种菌株在10°C条件下溶解无机磷，因此复筛的培养温度应为10°C。根据实验结果可知Pd12菌株对应的可溶性磷含量最高，所以Pd12菌株为最佳目标菌株。
24．答案：（1）热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）、dNTP；NtI；XbaI
（2）让其在大肠杆菌中复制、保存；Ca2+或CaCl2；氨苄青霉素
（3）空间结构
（4）a、b链（模板链）；DNA连接酶；18n；18n·2a-1
限制酶
BclI
NtI
XbaI
Sau3AI
识别序列及切割位点
T↓GATCA
GC↓GGCCGC
T↓CTAGA
↓GATC