甘肃省兰州第一中学2022-2023学年高二下学期7月期末考试生物试卷（含答案）

这是一份甘肃省兰州第一中学2022-2023学年高二下学期7月期末考试生物试卷（含答案），共18页。试卷主要包含了单选题，读图填空题等内容，欢迎下载使用。

甘肃省兰州第一中学2022-2023学年高二下学期7月期末考试生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1、生活中我们经常会接触到发酵食品,如果酒、果醋、泡菜等，下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是( )
A.酿制果醋和制作果酒所利用的主要微生物的代谢类型不相同
B.制作果醋时发酵液中的醋酸菌通过无丝分裂增殖，繁殖速度快
C.泡菜坛内的白色菌膜、变酸的果酒表面的菌膜所含菌种完全相同
D.制成的果醋和泡菜都需要经高压蒸汽灭菌，目的是延长产品保质期
2、下列关于发酵工程应用的说法，正确的是( )
A.食品添加剂由于可以增加食品营养，改善食品的色、香、味，还可以延长保存期，使用时应尽量多添加
B.利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是化学防治的有效手段
C.在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力
D.从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成动物饲料
3、平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是(   )
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D.都会在培养基表面形成单个的菌落
4、下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中部分操作步骤，下列说法不正确的是( )

A.①步骤使用的培养基是已经灭菌的培养基
B.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C.③到④的过程中，接种环共灼烧了5次
D.④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连
5、产脂肪酶细菌可用于处理含油废水。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产脂肪酶能力强的菌株，具体流程如图。相关叙述正确的是( )

A.步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液
B.步骤②的固体平板可以是以脂肪为唯一碳源的培养基
C.步骤②射线照射可引起细菌基因突变或染色体变异
D.步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高
6、据统计，不孕不育患病率目前已经高达18%。体外受精技术是胚胎工程的技术之一，下列有关胚胎工程的说法错误的是( )
A.试管婴儿技术繁殖后代属于无性繁殖，为某些不孕夫妇提供生育机会
B.判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志
C.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D.胚胎移植时可选取囊胚的滋养层细胞进行遗传病基因检测
7、人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等都离不开动物细胞培养。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.动物细胞培养所需的气体条件是95%氧气加5%二氧化碳
B.动物细胞培养基中加入血清主要目的是补充细胞所需的未知成分
C.动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同
D.为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理
8、6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图所示。下列说法正确的是( )

A.CO2培养箱中加入5%的CO2的主要目的是刺激动物细胞进行细胞呼吸
B.用胃蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C.单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
D.原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
9、随着电视剧《狂飙》热播，干眼症被搬上银屏。诱发干眼症最常见的原因就是泪液分泌不足，或者睑板腺分泌的油脂不足，泪液蒸发太快。科学家用诱导多能干细胞（iPS细胞）制成与泪腺相似的立体组织，该成果有望带动对重症干眼症治疗方法和药物的研究。下列说法正确的是( )
A.由于泪腺功能受损，内环境中的泪液分泌不足会导致干眼症
B.诱导iPS细胞形成泪腺相似的组织的过程体现iPS细胞的全能性
C.iPS细胞与胚胎干细胞相比，其优点之一是可以在不需要人类胚胎的情况下获得
D.健康用眼习惯及佩戴隐形眼镜能有效预防干眼症
10、研究人员欲用新冠病毒的刺突蛋白（S蛋白）免疫小鼠来制备抗新冠病毒的单克隆抗体，该过程如下图所示。下列有关说法正确的是( )

A.制备抗新冠病毒的单克隆抗体的动物细胞工程技术有动物细胞核移植、动物细胞培养和动物细胞融合
B.从已免疫处理的小鼠脾脏中提取的B淋巴细胞群能合成并分泌多种抗体
C.②过程所用的培养基是选择培养基，只有融合细胞才能生长
D.④过程在含5%CO2的空气的恒温箱中培养，为防止杂菌污染要添加干扰素
11、精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”——ADC（抗体偶联药物）能对肿瘤细胞进行选择性杀伤，该物质由抗体（导弹体）、药物（核弹头）和接头三部分组成，ADC的作用机制如图。下列相关叙述错误的是( )

A.ADC的制备过程运用了细胞培养和细胞融合技术
B.制备ADC中的抗体需要经过两次筛选
C.ADC能精准地识别肿瘤细胞，进入癌细胞需要消耗ATP
D.癌细胞的凋亡是由于溶酶体中水解酶的水解作用
12、下列关于植物体细胞杂交与动物细胞融合比较的叙述，正确的是( )
A.过程中都涉及细胞膜流动性，都需要用酶将细胞分散成单个细胞
B.都可以用PEG融合法或高Ca2+-高pH融合法诱导融合
C.两种杂交细胞都能获得杂交前2个细胞的全部优势
D.前者主要是为了获得杂种植株，后者主要是为了获得杂交细胞
13、利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )
A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
14、下图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列叙述错误的是( )

A.甲、乙、丙都属于黏性末端
B.甲、乙片段可形成重组DNA分子，但甲、丙不能
C.DNA连接酶的作用位点在乙图中b处
D.切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
15、下列关于基因工程技术中涉及的酶的说法，正确的是( )
A.E·coliDNA连接酶能催化平末端和黏性末端的连接
B.切割质粒的限制酶均特异性地识别6个核苷酸序列
C.用限制酶处理目的基因和Ti质粒，涉及氢键和磷酸二酯键的断裂
D.质粒被限制酶切割一次后，会产生4个游离的磷酸基团
16、科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜中，培育出转基因抗病毒番木瓜，Ti质粒结构模式图如图所示。下列叙述正确的是( )

A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒过程中需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜具有卡那霉素抗性
17、下图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作的示意图，下列叙述错误的是( )

A.图①需要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出
B.图①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白质可溶于酒精
C.实验的操作顺序是③②①④
D.图④操作后加入二苯胺试剂振荡，可观察颜色变蓝
18、以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是( )

A．催化①过程的酶是RNA聚合酶
B．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温
C．③过程需要解旋酶的作用
D．④过程需要冷却至50℃左右
19、拟利用番茄表达人类凝血因子Ⅸ，操作步骤排序正确的是( )
①制备工程农杆菌
②构建植物表达载体
③获取人类凝血因子Ⅸ基因
④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的检测
⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选
⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性
A. ③①②⑤⑥④ B. ⑥③①②⑤④
C. ④③②①⑤⑥ D. ③②①⑤④⑥
20、下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是( )

A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
21、下列关于利用乳腺生物反应器生产药用蛋白的叙述，正确的是( )
A.需要将编码药用蛋白的基因与能在乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起
B.需要将目的基因导入乳腺细胞中
C.需要借助于核移植技术和胚胎移植技术培育出转基因动物
D.药物的生产不会受到转基因动物性别和年龄的限制
22、转基因抗虫棉花含有Bt蛋白，该蛋白对人体无毒，但是鳞翅目昆虫幼虫的肠道细胞含有Bt蛋白的受体，Bt蛋白与受体结合会导致幼虫肠道壁穿孔，使其死亡。下列叙述正确的是( )
A.促进Bt蛋白的合成有助于提高棉花的抗逆性
B.通过DNA分子杂交技术可以检测Bt蛋白基因是否表达
C.将Bt蛋白基因导入棉花细胞可以使用显微注射法或农杆菌转化法
D.将棉花材料和农杆菌共同培养之前，需要对棉花材料进行灭菌处理
23、基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到了飞速的发展。下列关于基因工程应用的叙述，正确的是( )
A.为增加器官的来源，可对猪的器官进行改造以促进抗原决定基因的表达
B.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，可降低乳汁中乳糖含量
C.作为乳腺生物反应器的动物体内只有乳腺细胞含目的基因
D.将牛凝乳酶导入黑曲霉中，再通过工业发酵可生产凝乳酶
24、如图为蛋白质工程操作的基本思路，下列叙述不正确的是( )

A.图中①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表DNA合成
B.代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，代表中心法则内容的是①②
C.蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计
D.从图中可以看出蛋白质工程的基本途径与中心法则是相反的
25、葡萄糖异构酶能将葡萄糖转化为果糖，其最适温度约为60℃，生产上常用于高果糖浆的生产。科学家将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，结果它的最适温度提高了约10℃。下列有关说法正确的是( )
A.蛋白质工程只能改造或制造自然界已有的蛋白质
B.编码葡萄糖异构酶的基因的核糖核苷酸序列会有相应的改变
C.经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传
D.改造后的葡萄糖异构酶在60℃时生产高果糖浆的效率可能低于70℃时的
二、读图填空题
26、有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示，回答问题。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、氮源、_______和_______四类，图甲中所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_____________。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________________。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是_____________________。纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是__________________________
（3）将1mL土壤溶液稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为_______个。该方法计数结果往往比实际值偏低，原因是____________________。
27、科学家用植物体细胞杂交技术，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株，培育过程如图所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：

（1）在植物体细胞杂交技术中，过程①常用________处理植物细胞以除去细胞壁。
（2）②过程表示________________。依据的生物学原理是__________。
（3）植物体细胞融合完成的标志是______________。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为___________。d形成后，常用__________技术得到杂种植株。
（4）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，依据的原理是___________________。
（5）若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞内含n条染色体，则“番茄-马铃薯”杂种植株的体细胞内含_______条染色体；若由杂种细胞培育成的“番茄-马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？__________。
28、EPO
是促红细胞生成素的英文简称，是一种激素样物质，可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达系统来获取产物，其过程如下。请回答下列问题：

（1）从人体组织中提取EPO的mRNA，在_______________酶的作用下合成EPO基因的cDNA，再通过PCR技术获得大量EPO基因，PCR的产物一般通过________________来鉴定。进行扩增时需先加热至90～95℃，后冷却至55～60℃，以上调控温度操作的目的分别是________、_______。
（2）供体母鼠通常情况下每次排卵8～12枚，为使其超数排卵，需注射______________激素以排出更多的卵子，培养到___________期与获能的精子相遇，精子穿越透明带，完成体外受精。
（3）①过程构建了基因表达载体，内部包括不可缺少的组成部分，其中___________能驱动基因的转录。切割含EPO基因的DNA与载体时通常用两种不同限制酶的原因是___________。
（4）采用______________技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入发育培养液中继续培养。当胚胎发育至____________时期，向受体移植。
（5）若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可以采用______________技术对血液来进行检测。
29、干扰素（W）是一种具有特定功能的人体蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。1982年，我国科学家通过基因工程等技术开发研制出我国首个基因工程药物-重组人干扰素。已知限制性核酸内切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ的识别序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图1，图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

（1）利用PCR技术扩增W基因时，可以从图2的A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_________作为引物。
（2）对W基因和质粒都分别用两种不同的限制酶切割然后拼接，应选用两种限制酶__________切割质粒，选用两种限制酶_________________切割含W基因的DNA片段。
（3）增强子是可增强基因转录的一小段特殊DNA序列，将其插入W基因的启动子中可提高W基因的表达量。但有人认为这样会引起基因突变，导致基因W表达的蛋白质氨基酸序列改变，你__________（填“认同”或“不认同”）这种观点，理由是_____________________________。
（4）某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如下图所示。

步骤①中需要选择的启动子是膀胱上皮细胞蛋白基因的启动子，选择该启动子的目的是____________，进而W分泌到尿液中，随尿液排出体外。与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物__________（答出两点）的限制。一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传物质_____（填“相同”或“不同”），原因是___________________________________________。
参考答案
1、答案：A
解析： A.酿制果醋的微生物是醋酸菌,其代谢类型是异养需氧型，制作果酒的微生物是酵母菌，其代谢类型也是异养兼性厌氧型,两者的代谢类型不相同，A正确;
B、醋酸菌属于原核生物，原核生物通过无性繁殖的二分裂方式增殖,而无丝分裂是真核生物特有的增殖方式，B错误;
C、尽管制作泡菜的主要菌种为乳酸菌，但由于材料本身带有一些酵母菌等其他菌，在泡菜的制作过程中会有酵母菌等菌的生长,尤其是泡菜坛密封不严,致使泡菜坛内出现白色菌膜(酵母菌密度增大以后可能会出现灰色菌膜),而变酸的果酒表面菌膜的主体为醋酸菌，故所含菌种不同，C错误;
D、制成的果醋和泡菜不能使用高压蒸汽灭菌，高压蒸汽灭菌会杀死菌种，从而会影响产品的口感和品质，D错误。故选A。
2、答案：C
解析：A、食品添加剂过量使用会对人体健康造成影响，甚至危及生命，不能过量使用，A错误； B、利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这种治理不会对环境造成影响，属于生物防治，B错误； C、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可以提高饲料品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力，C正确； D、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。
故选：C。
3、答案：D
解析：平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
4、答案：C
解析：A、①步骤表示倒平板，在倒平板之前，培养基已经调节过pH并灭过菌，A正确； B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染，B正确； C、接种环在每次划线前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以③到④的过程中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，③到④的过程中共需灼烧接种环6次，C错误； D、④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连，否则就达不到稀释的目的，不能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。
故选C。
5、答案：B
解析：土壤样品中包含目的菌株，进行灭菌会杀死所有微生物，包括要培养的目的菌株，A错误；要筛选产脂肪醇的细菌，需要用以脂肪为唯一碳源的固体培养基，B正确；细菌是原核生物，没有成形的细胞核和染色体，因此用射线照射不会引起细菌染色体变异，C错误；透明圈大的菌落，酶活性不一定大，因此对初筛的透明圈大的菌落要进行发酵培养，进一步对发酵液进行酶活性检测，D错误。
6、答案：A
解析：A、试管婴儿属于有性生殖，A错误； B、多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，因而不会形成两个第二极体，在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雄、雄原核作为受精的标志，B正确； C、胚胎移植是将胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C正确； D、在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则影响胚胎的发育，可以对滋养层细胞做DNA分析、遗传病基因检测等， D正确。
故选：A。
7、答案：B
解析：
8、答案：D
解析：A、CO2培养箱中加入5%的CO2的主要目的是维持培养液的pH,A错误； B、由于pH的原因，应该用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织使其分散成单个细胞，而不能用胃蛋白酶，B错误； C、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同，表达的基因不一定相同，C错误； D、结合题干，基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶电泳后应该只显示一个条带，而原代培养的细胞电泳后有2个条带，说明同时检测了多个细胞，D正确。
故选：D。
9、答案：C
解析：A、泪腺分泌的泪液不属于内环境的成分A错误； B、iPS可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，如可诱导iPS细胞形成泪腺相似的组织，该过程没有体现iPS细胞的全能性，B错误； C、iPS技术不使用胚胎细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，没有伦理学的问题，还可以避免免疫排斥，iPS细胞可以在不需要人类胚胎的情况下获得，这是其典型优点之一，C正确； D、健康用眼习惯能有效预防干眼症，但佩戴隐形眼镜则不能预防干眼症，D错误。
故选C。
10、答案：B
解析：A.由图可知，制备抗新冠病毒的单克隆抗体的动物细胞工程技术有动物细胞融合、动物细胞培养，不需要进行动物细胞核移植技术，故A错误； B.对小鼠进行免疫处理，小鼠的脾脏中提取的B淋巴细胞群中包括许多B淋巴细胞，而1个浆细胞只能合成并分泌一种抗体，所以小鼠的脾脏中提取的B淋巴细胞群能合成并分泌多种抗体，故B正确； C②过程所用的培养基为选择培养基，只有杂交瘤细胞才能生长，不是所有融合都能生长的，故C错误； D.在含5%CO2的空气恒温箱中培养动物细胞，干扰素属于细胞因子，不能防止杂菌污染，添加抗生素可防止杂菌感染，故D错误。
11、答案：D
解析：
12、答案：D
解析：A、动物细胞融合前需用胰蛋白酶处理使细胞分散开，而植物体细胞杂交前需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，无需分散为单个细胞， A错误； B、都可以用PEG融合法诱导融合，高Ca2+-高pH只用于诱导植物原生质体融合，B错误； C、由于不同来源的遗传物质会相互影响，则两种杂交细胞不一定获得杂交前2个细胞的全部优势，C错误； D、动物细胞融合技术主要是为了获得细胞产品，即为了获得杂交细胞，而植物体细胞杂交技术主要是为了获得杂种植株，D正确。
故选：D。
13、答案：D
解析：血清抗体为常规抗体，单克隆抗体是由单个的杂交瘤细胞克隆形成的细胞群产生的大量的抗体；单个效应B细胞在体外不能大量增殖；经PEG诱导融合后的细胞有杂交瘤细胞、效应B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞这三种类型。
14、答案：C
解析：A、由图可知：甲、乙、丙都属于黏性末端，A正确； B、甲、乙的黏性末端相同，因此可在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子，但甲、丙的黏性未端不同，它们之间不能形成重组DNA分子，B正确； C、DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，C错误； D、切割甲的限制酶的识别序列为：GAATTC//CTTAAG，而甲、乙片段形成的重组DNA分子序列为：GAATTG//CTTAAC，因此切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，D正确。故选：C。
15、答案：C
16、答案：A
解析：
17、答案：D
解析：
18、答案：D
解析：
19、答案：D
解析：利用番茄表达人类凝血因子Ⅸ，首先需要③获取人类凝血因子Ⅸ基因，获得目的基因后，②构建植物表达载体，①制备工程农杆菌，通过农杆菌转化法对受体细胞进行转化，即⑤，转化后需要对番茄植株中凝血因子Ⅸ基因进行检测，即④，最终⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性，故本题正确答案为D。
20、答案：D
解析：重组质粒的构建要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与，DNA聚合酶一般用于DNA复制过程，A错误；③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到植物细胞的染色体上，B错误；如果受体细胞的染色体上含抗虫基因，只能说明抗虫基因成功整合到受体细胞的染色体上，不代表该基因就一定能表达成功，因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状，C错误；⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异，D正确。
21、答案：A
解析：A、要使目的基因在乳腺组织中特异性表达，需要将编码药用蛋白的基因与能在乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，A正确； B、需要将目的基因导入受精卵中，受精卵的全能性最高，B错误； C、培育出转基因动物需要借助于胚胎移植技术，但不需要借助核移植技术，C错误； D、由于只有雌性动物在哺乳期才会分泌乳汁，因此药物的生产会受到转基因动物性别和年龄的限制，D错误。
故选：A。
22、答案：A
解析：A、Bt蛋白与受体结合导致肠道壁穿孔，使幼虫死亡，因此促进Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗虫效果，A正确； B、可通过DNA分子杂交技术检测Bt蛋白基因是否插入受体细胞染色体DNA上，而检测目的基因是否表达应该采用抗原-抗体杂交技术，B错误； C、将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法可使用花粉管通道法或农杆菌转化法，C错误； D、将植物材料和农杆菌共同培养之前，植物材料需要消毒处理，D错误。
故选：A。
23、答案：B
解析：
24、答案：C
解析：A、①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表 DNA合成，Ａ正确；
B、代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤，代表中心法则内容的是①②，Ｂ正确；
C、蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或修饰实现，Ｃ错误；
D、蛋白质工程是根据具有相应功能的蛋白质结构推测氨基酸序列，进而推测出脱氧核苷酸序列，因此蛋白质工程的基本途径与中心法则是相反的，D正确。
故选C。
25、答案：D
解析：A、基因工程只能改造或制造自然界已有的蛋白质，蛋白质工程可以创造新的蛋白质，A错误；
B、编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核糖核苷酸序列会有相应的改变，B错误； C、蛋白质工程对编码蛋白质的基因进行了改造，遗传物质已经改变，属于可以遗传的变异，C错误；
D、改造后的葡萄糖异构酶最适温度从60℃变为70℃，活性降低，在60℃时生产高果糖浆的效率可能低于70℃时的，D正确。
故选D。
26、答案：（1）水；无机盐；只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖
（2）高压蒸汽灭菌；检测培养基平板灭菌是否合格；接种环；将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）3.8×107；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
27、答案：（1）纤维素酶和果胶酶
（2）诱导原生质体融合；细胞膜具有（一定的）流动性
（3）再生出细胞壁；高尔基体；植物组织培养
（4）植物细胞的全能性
（5）m+n；单倍体
解析：（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，过程①可使用纤维素酶和果胶酶处理细胞以除去细胞壁，得到原生质体。
（2）过程②表示诱导原生质体融合，依据细胞膜具有一定的流动性。
（3）过程③是再生细胞壁形成杂种细胞，而细胞壁的形成与高尔基体有关。将杂种细胞d培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术。
（4）杂种细胞经过植物组织培养培育成杂种植株，依据的原理是植物细胞的全能性。
（5）若番茄细胞内含条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞内染色体数为两细胞染色体数之和，即m+n条染色体；利用马铃薯和番茄的花药离体培养得到的是单倍体植株。
28、答案：（1）逆转录；琼脂糖凝胶电泳；使DNA双链打开解为单链；使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合
（2）促性腺；MⅡ中
（3）启动子；防止质粒和目的基因自身环化和反向连接
（4）显微注射；桑葚胚或囊胚
（5）抗原-抗体杂交
解析：（I）从人体组织中提取EPO的mRNA,mRNA可以在逆转录酶的作用形成cDNA；PCR是体外进行DNA复制，可以扩大DNA数量；PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。90~95℃可以破坏氢键，使DNA解旋，进而使DNA双链打开解为单链，55~60℃复性，可以使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
（2）为使供体母鼠超数排卵，需注射促性腺激素以排出更多的卵子，卵子需培养到减数第二次分裂中期时才能与获能的精子相遇时，精子穿越透明带，完成体外受精。
（3）启动子能与RNA聚合酶结合，启动转录；两种不同限制酶切割含EPO基因的DNA与载体，可以形成不同的黏性末端，防止质粒和目的基因自身环化和反向连接。
（4）显微注射法是将重组质粒导入动物细胞常用的方法；当胚胎发育至桑葚胚或囊胚时移植到子宫中成功率较高，所以当胚胎发育至桑葚胚或囊胚时期，向受体移植。
（5）抗原-抗体杂交主要是检测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法，若目的基因成功表达出蛋白质，则能检测到相应的杂交条带。
29、答案：（1）B和C
（2）HindⅢ和BamHⅠ；HindⅢ和Sau3AⅠ
（3）不认同；插入位点在启动子，启动子不编码mRNA，所以不改变氨基酸序列
（4）使W基因在膀胱上皮细胞中表达；性别、年龄；相同；两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵