高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第三节 传统发酵技术课时练习

【特供】第三节传统发酵技术-2练习

一．单项选择

1．取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL相同稀释度的大肠杆菌菌液，37℃培养 24小时后，统计菌落数（见下表），下列相关叙述错误的是（    ）

A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖

B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌的正常生长需要葡萄糖

C．三组实验所使用的培养基均需100℃．30min灭菌

D．三组实验均采用稀释涂布平板法，以便菌落计数

2．下列有关菌种保藏的有关叙述，错误的是（    ）

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏

B．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

D．需要长期保存的菌种，可采用低温（－4℃）保藏的方法

3．研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量。每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（    ）

A．涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后还要冷却8～10s

B．涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养

C．计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均

D．若空白对照组上有5个菌落，则实验组数据基础上减去5，以获得最准确数据

4．下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（    ）

A．接种环．接种针．镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌

B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用巴氏消毒法

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于物理消毒法

5．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　)

A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少生长因子

D．该培养基调节合适的pH后就可以接种

6．下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（    ）

A．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

B．尿素固体培养基一般是将尿素涂布到固体平面培养基上制成的

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是维持渗透压

D．倒平板时，应将打开的培养皿盖放在一边，防止培养基溅到皿盖上

7．培养基是一种人工配制的．适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述错误的是（    ）

A．从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养自养型微生物

B．加入的KH2PO4即可从养分上提供P和K，又可缓冲培养基的pH

C．若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需添加葡萄糖

D．如果再加入指示剂，该培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基

8．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，如图为实验室的部分操作步骤，相关说法错误的是（    ）

A．本实验的培养基中应加入苯酚作为唯一碳源

B．步骤④中接种环需在每次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养

C．灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后可获得纯化的苯酚降解菌菌落

D．可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，获得高效苯酚降解菌

9．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢．孢子

B．培养皿．培养基可用干热灭菌法灭菌

C．牛奶．熟啤．葡萄酒都可用巴氏消毒法消毒

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温

10．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学打算从受原油污染的土壤中筛选高效降解原油的菌株，下列有关做法错误的是（    ）

A．纯化菌种时，为了得到单菌落，只能采用平板划线法

B．无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染

C．在筛选过程中应选用选择培养基，即将土壤样品稀释液接种到以原油为唯一碳源的固体培养基上。

D．通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌

11．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌

D．培养基灭菌后，立即在酒精灯火焰附近倒平板

12．下列有关菌种保藏的叙述，错误的是（    ）

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

B．需长期保存的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，所以不能保存太久

D．对于需要长期保存的菌种，可以采用-20℃低温保藏的方法

13．下列关于物品进行消毒或灭菌方法的选择，错误的是（    ）

A．接种环——酒精消毒 B．培养基——高压蒸汽灭菌

C．牛奶——巴氏消毒 D．玻璃器皿——干热灭菌

14．果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是

A．蛋白胨和酵母提取物培养基 B．尿素固体培养基

C．MS培养基 D．添加蔗糖的豆芽汁培养基

15．下列属于涂布分离法和划线分离法共同点的是（    ）

A．接种工具需保存在70%酒精中 B．接种前需对菌液进行不同浓度稀释

C．可用于单菌落的分离 D．可以对样液中的细菌进行计数

16．下列常用的无菌操作错误的是（    ）

A．无菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物

B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒

C．实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行

D．玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌

17．下图是草莓酒制作的过程。下列分析中不正确的是(　　)

A．步骤②是对草莓进行灭菌处理

B．步骤⑤为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠

C．发酵过程中放气量先增加后减少

D．利用重铬酸钾溶液检测酒精的含量

18．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是(    )

A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基上大肠杆菌菌落较多，缺少C6H12O6的培养基上大肠杆菌几乎不形成菌落。培养基的营养物质有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，A正确；

B．Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖，B正确；

C．三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌，C错误；

D．该实验的因变量是菌落的数目，数目都采用了稀释涂布平板法，D正确。

故选C。

2．【答案】D

【解析】

试题分析：

有关菌种的保藏方法：①临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后将试管放入4°C的冰箱中保藏。②甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存。

解答：

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，A正确；

B．对于频繁使用的菌种，我们可以采用临时保藏的方法，B正确；

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上，C正确；

D．需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存，D错误。

故选D。

3．【答案】A

【解析】

试题分析：

常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，目的是让聚集在一起的微生物分散成单个细胞，然后得到由这个细胞繁殖而来的肉眼可见的单个群落。稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

解答：

A．使用涂布器在酒精灯下涂布时，要先将涂布器沾有少量酒精进行灼烧灭菌，燃尽后还要冷却8~10s再进行涂布，A正确；

B．涂布完成后，在培养皿的皿底上做标记，B错误；

C．计算平板上的菌落数时，应选择菌落数在30~300的平板进行计数，C错误；

D．若空白对照组上有5个菌落，说明培养基灭菌不彻底，需要重新进行实验，D错误。

故选A。

4．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

解答：

A．接种环．接种针．镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；

B．干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。

故选B。

5．【答案】B

【解析】：选B　从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基；微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨；生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸的组成成分，蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后还需经灭菌后才可以接种使用。

6．【答案】A

【解析】

试题分析：

本题主要考察了微生物的实验时培养，使用稀释涂布平板法可以用来对菌种进行计数，但所测量的数值比真实值少。培养基中必须具备的营养成分有水．碳源．氮源和无机盐等。整个过程需要严格的无菌操作。

解答：

A．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法统计的菌落数往往要比活菌的实际数目少，A正确；

B．尿素培养基是在配制培养基的时候就添加进去的，B错误；

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是提供碳源，C错误；

D．倒平板的时候不能把培养皿盖完全打开放到一边，会增加空气中杂菌污染培养基的机会，D错误；

故选A。

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求；培养基按其物理状态可分为固体培养基．液体培养基和半固体培养基三类，液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基；培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。

解答：

A．根据表格分析，该培养基中含有氮源．无机盐．水，没有碳源，可以用来培养自养型微生物，A正确；

B．表格中的KH2PO4可以为微生物提供P和K元素，还可以缓冲培养基的pH，B正确；

C．若要观察微生物的菌落特征，需要使用固体培养基，应该加入琼脂，C错误；

D．该培养基中没有碳源，属于选择培养基，若再加入指示剂，还可以作为鉴别培养基，D正确。

故选C。

8．【答案】C

【解析】

试题分析：

9．【答案】C

【解析】

试题分析：

10．【答案】A

【解析】

试题分析：

11．【答案】D

【解析】

试题分析：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。

解答：

A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A正确；

B．溶化时，将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，C正确；

D．培养基灭菌后，待培养基冷却至50°C左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。

故选D。

12．【答案】B

【解析】

试题分析：

对于频繁使用的菌种，可采用临时保藏的方法；首先，将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养；当菌落长出后，将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月，都要重新将菌种从旧的培养基转移到新鲜的培养基上，但是这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏的方法，将菌液与灭菌的甘油充分混匀后，放入﹣20℃的冷冻箱中保存。

解答：

A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，A正确；

B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏，长期保存的菌种用甘油管藏的方法，B错误；

C．临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，C正确；

D．对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏的方法，放入-20 ℃低温保藏的方法，D正确；

故选B。

13．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒是较为温和的物理或化学方法，能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌是采用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

解答：

A．接种工具采用灼烧灭菌法，A错误；

B．培养基及容器采用高压蒸汽灭菌法，B正确；

C．不耐高温的液体，如牛奶，采用巴氏消毒法，C正确；

D．玻璃器皿．金属用具采用干热灭菌法，D正确。

故选A。

14．【答案】D

【解析】

试题分析：

黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可，如麦芽汁加琼脂，将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释加琼脂15克，溶化后分装，121℃灭菌30分钟。蔗糖豆芽汁培养基可以用来培养酵母菌和霉菌，使它们与细菌分离开来。

解答：

根据以上分析可知，黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。综上所述，D正确，A．B．C错误。

故选D。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法包括划线分离法和涂布分离法：（1）划线分离法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后，可以分离到单个菌落；（2）涂布分离法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将其分别涂布到固体培养基表面，在适当的稀释度下，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。

解答：

A．涂布分离法中使用的接种工具为玻璃刮刀，需保存在70%酒精中，使用前在酒精灯火焰上引燃后冷却；划线分离法中使用接种环，接种环属于金属器具，直接用酒精灯火焰灼烧灭菌，不需用酒精，A错误；

B．涂布分离法接种前需对菌液进行梯度稀释，而划线分离法不用稀释菌液，B错误；

C．涂布分离法和划线分离法是分离菌种的常用方法，均可用于单菌落的分离，C正确；

D．利用涂布分离法可以对样液中的细菌进行计数，而划线分离法不能用于计数，D错误。

故选C。

16．【答案】D

【解析】

试题分析：

在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面，
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的培养器皿．接种用具和培养基等进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

解答：

A．无菌技术是用来防止培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切微生物，A正确；
B．用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒，B正确；
C．实验操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确；
D．对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能灭菌，D错误。
故选D。

17．【答案】A

【解析】：选A　步骤②是对草莓进行清洗，A错误；步骤⑤为加入菌种酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠，B正确；发酵过程中因为先进行有氧呼吸产生二氧化碳较多，后期进行无氧呼吸产生气体量较少，C正确；是否产生酒精可以用重铬酸钾在酸性条件下进行检测，有酒精会出现灰绿色，D正确。

18．【答案】A

【解析】

试题分析：

解答：

自养型微生物与异养型微生物的主要差别在于自养型微生物可以利用无机碳合成自身的有机物，用于各项生命活动；而异养型微生物只能以有机碳作为碳源，所以两种培养基的主要差别在于碳源，A正确。

故选A。