高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法测试题

【精品】一、间接计数法-3优质练习

一．单项选择

1．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌 操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是（    ）

A．紫外线不可以杀死微生物的芽孢和孢子

B．家庭制作泡菜时不需要对泡菜进行灭菌

C．实验操作者的双手需要消毒

D．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

2．下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述，正确的是（    ）

A．培养霉菌时需将培养基的 pH 调节到中性或微碱性

B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产

C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．水．无机盐及生长因子

D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH．O2．渗透压等的影响

3．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（    ）

A．微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落

B．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质

C．任何培养基都必须含有碳源．氮源．无机盐．水和琼脂

D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素

4．无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 , 以下说法正确的是 (   )

①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小．抗性差 , 对无菌操作的要求非常严格     ②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 ③对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的消毒效果 , 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力  ④不同药剂．不同植物材料甚至不同器官要区别对待   ⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌  ⑥如果不小心导致污染 , 将可能造成培养工作的前功尽弃

A．①②③④⑤ B．①②③④ C．①②③④⑥ D．①②③④⑤⑥

5．研究人员拟从土壤样品中分离酵母菌并进行扩大培养，下图所示为操作流程。有关叙述错误的是（    ）

A．若需要调节培养基的pH，应在灭菌后进行

B．步骤④所用方法为平板划线法，划线时不能划破培养基表面

C．为了获得甲醇耐受酵母菌，可通过逐步提高培养基中甲醇的浓度

D．步骤③中将温度大约为50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养

6．取9个洁净培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数(见下表)，以下相关叙述正确的是（　　）

A．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是部分细菌死亡

7．下列关于平板划线法纯化大肠杆菌过程中各种“目的”的叙述，错误的是（    ）

A．第一次划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物

B．在火焰旁进行接种的目的是防止低温抑制酶活性而影响大肠杆菌的生命活动

C．最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者

D．在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是获得单菌落

8．关于干热灭菌与高压蒸汽灭菌的操作方法，下列叙述正确的是（    ）

①操作时，均不能将物品摆放太挤

②操作过程中，灭菌物品均不能与筒壁接触

③干热灭菌时，等温度下降到70℃以下后，才能打开箱门

④高压蒸汽灭菌时，打开排气阀使压力表降到零后，才能打开盖

A．①②④ B．②③④ C．①②③ D．①③④

9．下列实验操作不需要在酒精灯火焰附近进行的是（    ）

A．土壤取样 B．称取土壤 C．稀释土壤溶液 D．涂布平板

10．在三个培养皿中分别加入 10mL 不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是（    ）

A．该实验采用的是液体培养基

B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果

C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要特殊营养物质

D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要糖类

11．将相等数量的硝化细菌和大肠杆菌分别接种到含铵盐的无机盐培养液中，在适宜温度下振荡培养。若用虚线表示大肠杆菌的生长趋势，实线表示硝化细菌的生长趋势，则下图中能正确表示两种菌体生长趋势的是（　　）

A． B．

C． D．

12．在培养基中加入牛肉膏的目的是为微生物提供（    ）

A．氢元素氧元素 B．氮源和维生素 C．无机盐 D．碳源．氮源．磷酸盐和维生素

13．可以作为硝化细菌碳源．氮源及能量来源的物质依次是（  ）

A．含碳有机物．氨．光 B．含碳无机物．氮．氮

C．含碳有机物．氨．氨 D．含碳无机物．氨．氨

14．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种 类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲．乙．丙 三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法不正 确的是（    ）

A．倒成平板后直接培养可判断有无污染

B．倒成平板后不需要进行灭菌处理

C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙

D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选

15．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（    ）

①牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源．氮源．磷酸盐．维生素

②等培养基冷却至室温时进行倒平板

③待平板冷却凝固5？10分钟后将平板倒过来放置

④操作顺序为计算．称量．溶化．倒平板．灭菌

⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解

A．①④⑤ B．②③⑤ C．①②④ D．②④⑤

16．下列有关实验的叙述中，正确的是（    ）

A．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产

B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色

C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈无色，在加热后变成砖红色

D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现红色，使RNA呈现绿色

17．某同学成功分离出了土壤中的固氮菌，结果如图所示。该实验使用了（    ）

A．平板划线法 B．液体培养基

C．不含氮源的培养基 D．不含碳源的培养基

18．如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，正确的是（    ）

A．图示接种方法是平板划线法，也可在液体培养基中进行

B．图中每个划线区域均可形成单个菌落

C．除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端

D．该接种方法适用于细菌的计数

参考答案与试题解析

1．【答案】D

【解析】

试题分析：

消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具．干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具．高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

解答：

A．紫外线处理属于消毒，消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物，A正确；

B．家庭制作泡菜时，由于泡菜发酵过程中呈现缺氧和酸性的条件，其余杂菌一般很难生长，因此不需要对泡菜进行灭菌，B正确；

C．为了减少杂菌污染，需要对C实验操作者的双手需要消毒，C正确；

D．加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，D错误；

故选D。

2．【答案】D

【解析】

试题分析：

培养基的概念．种类及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）种类：固体培养基和液体培养基。（3）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。

解答：

A．培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性，A错误；

B．固定培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，B错误；

C．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐，有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外，还需要添加生长因子，有的微生物培养基中可以不加碳源，如自养型的；C错误；

D．培养基一般都含有水．碳源．氮源和无机盐。微生物的生长除了受到以上营养因素的影响外，还受到pH．O2．渗透压等的影响，D正确。

故选D。

3．【答案】B

【解析】

解答：

A．微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，根据菌落的特征可以判断是哪一种菌，A错误；
B．硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量用来合成有机物，因此NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质，B正确；
C．培养基不一定都含有碳源．氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；
D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，而酵母菌不属于细菌，D错误。
故选B。
 

4．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

植物组织培养的植物材料体积小．抗性差，灭菌不好就会导致整个技术的失败，①正确；对于整个操作过程中的凡是和植物组织接触的材料．用具和试剂都要就进行灭菌消毒，培养基及器械用高压蒸汽灭菌，②正确；对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果，另一方面还要考虑植物材料的耐受能力，③正确；培养中不同药剂．不同植物材料，甚至不同器官要区别对待，因为不同材料对药剂耐受力不同，④正确；物组织用消毒液进行灭菌而不能用高压灭菌，⑤错误；如果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃，导致整个技术的失败，⑥正确。C正确

故选C

5．【答案】A

【解析】

试题分析：

菌种的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法在划线时不能划破培养基表面。培养基的制备过程可以分为计算．称量．溶化．灭菌和倒平板，其中灭菌以前需要调节pH。培养基中为了获得甲醇耐受酵母菌，则甲醇起选择作用，可以逐步提高甲醇的浓度来筛选。

解答：

A．调节培养基的pH，应该在灭菌前进行，A错误；

B．通过步骤④中菌落的分布可以发现接种方法为平板划线法，划线时不能划破培养基表面，否则使得菌落生长到培养基的内部，B正确；

C．逐步提高培养基中甲醇的浓度，可以使得甲醇的选择作用逐渐加强，从而筛选出甲醇耐受酵母菌，C正确；

D．倒平板的时候需要将培养基冷却到50℃再倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养，D正确；

故选A。

6．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基，大肠杆菌生长好，缺少C6H12O6大肠杆菌几乎不生长。微生物培养基的成分有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．根据培养基的成可知：每个平板都含有琼脂，属于固体培养基，A错误；
B．Ⅱ组和Ⅲ组的单一变量是葡萄糖的有无，两组实验结果说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质，B错误；
C．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，C正确；
D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是涂布平板是可能出现了两个或两个以上的菌体聚集在一起的情况，D错误。
故选C。

7．【答案】B

【解析】

试题分析：

平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

解答：

A．接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；

B．火焰旁存在无菌带，故在火焰旁进行接种的目的是防止杂菌污染，B错误；

C．最后一次划线结束后灼烧接种环的目的是：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，C正确；

D．在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是使聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。

故选B。

8．【答案】C

【解析】

试题分析：

9．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

酒精灯火焰附近存在一个无菌区，无菌操作时，称取土壤．稀释土壤溶液．涂布平板等操作要在酒精灯火焰附近进行，但土壤取样不需要进行无菌操作，所以不需要在酒精灯火焰附近进行，A正确。

故选A。

10．【答案】B

【解析】

试题分析：

据题表分析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要碳源；Ⅰ与Ⅱ对照说明大肠杆菌的生长需要生长因子。

解答：

A．该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，A错误；

B．该实验中应该选取培养 12 小时时的记录作为实验结果，B正确；

C．Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要特殊营养物质，C错误；

D．Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖，但不能确定葡萄糖是唯一碳源，D错误。

故选B。

11．【答案】C

【解析】

试题分析：

本题考查微生物同化作用的方式，硝化细菌是自养生物，通过化能合成作用合成有机物以维持生命活动；大肠杆菌属于异养生物，必须消耗现成的有机物才能维持正常的生命活动。

解答：

硝化细菌是自养生物，可以利用培养液中的无机盐．水及大气中的CO2，通过化能合成作用合成有机物以维持生命活动，由于空间．营养等条件是有限的，其种群数量呈“S”型增长；大肠杆菌属于异养生物，必须消耗现成的有机物才能维持正常的生命活动，故在只含无机盐的培养液中不能生存，其数量是逐渐减少的，C表示的大肠杆菌和硝化细菌的生长曲线符合实际情况，A．B．D不符合。 故选C。

12．【答案】D

【解析】

试题分析：

培养基的概念及营养构成

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质；

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

解答：

牛肉膏与蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源．磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，维生素属于生长因子。即D正确。

故选D。

13．【答案】D

【解析】

试题分析：

解答：

试题分析：硝化细菌能利用大气当中的二氧化碳，故是含碳无机物，硝化细菌能将氨氧化成亚硝酸，进而将亚硝酸氧化成硝酸，能利用这两个化学反应中释放出的化学能，故氮源是氨，能量来源也是氨，故D正确，其余错误。

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

据图分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌必需营养物质为丙和乙。

解答：

A．倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；

B．在制作培养基的过程中，需要先进行灭菌再倒平板，故倒成平板后不需要进行灭菌处理，B正确；

C．分析题图可知，嗜热菌在添加了乙．丙的区域生长，只有乙或只有丙时无菌落生长，故该菌同时需要乙和丙，C错误；

D．不同的菌种所需的营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，某菌种只会在提供其需要的营养物质区域生长，D正确。

故选C。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。

解答：

①蛋白胨只能提供碳源．氮源．维生素，①错误；

②待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，②错误；

③待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，③正确；

④制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，④错误；

⑤将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，⑤正确。

故选C。

16．【答案】B

【解析】

试题分析：

常用双缩脲试剂检测蛋白质（紫色），斐林试剂检测还原糖（砖红色），碘液检测淀粉（蓝色），苏丹Ⅲ染液检测油脂（橘黄色）等。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂，它是由双缩脲试剂A（氢氧化钠）和双缩脲试剂B（硫酸铜溶液）组成，氢氧化钠可以提供碱性的环境，而溶液中的铜离子会与多肽链中的肽键生成紫色的络合物。

解答：

A．固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，A错误；
B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色，B正确；
C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈蓝色，在加热后变成砖红色，C错误；
D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现绿色，使RNA呈现红色，D错误。
故选B。

17．【答案】C

【解析】

试题分析：

18．【答案】C

【解析】

试题分析：

图示对微生物进行接种采用的是平板划线法。平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。

解答：

A．图示接种方法是平板划线法，该接种方法不能在液体培养基中进行，A错误；

B．图中每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，最后一次划线结束时（图中5区域）可形成单个菌落，B错误；

C．在采用平板划线法对微生物进行接种时，除第一次划线外，以后的每一次划线的起点均是上一次划线的末端，C正确；

D．该接种方法（平板划线法）可以分离出单个菌落，但不需要确定接种量和培养液浓度，因此不适用于细菌的计数，D错误。

故选C。