沪科版 (2019)选修3一、间接计数法同步练习题

【精品】一、间接计数法-1作业练习

一．单项选择

1．配制培养自身固氮菌的培养基用的水，配制通用培养基用的水，“抗生素抑菌现象观察实验”中用作对照的滤纸片上应滴加的水，分别是（　　）

A．自来水．蒸馏水．无菌水 B．蒸馏水．自来水．无菌水

C．无菌水．蒸馏水．自来水 D．自来水．无菌水．蒸馏水

2．下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（    ）

①制备红棕    ②在选择培    ③筛选．纯化分  ④细菌分解尿素能

壤浸出液      养基中培养    解尿素的细菌     力的鉴定和比较

A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH再进行高压蒸汽灭菌

B．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落

C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素

D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力

3．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板

B．一般取10３．104．105倍的土壤稀释液和无菌水各0．1mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的实验组平板进行计数

4．下图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程，下列叙述错误的是（    ）

A. 土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种几率很高

B. 为验证尿素固体培养基具有选择作用，可用牛肉膏蛋白胨固体培养基做对照

C. 将实验组和对照组37℃恒温培养24至48h时，需将平板倒置

D. 在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌

5．细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗。当细菌出现耐药性时，疗效下降。金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一。A．B．C．D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎。为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素A．B．C．D四张大小相同的滤纸片a．b．c．d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述不正确的是（    ）

A．可选择牛肉膏蛋白胨培养基，对SAU菌种进行扩增培养

B．对实验使用的培养皿进行灭菌，可以采用干热灭菌的方法

C．A．B．C．D四种抗生素，抑菌效果最佳的是抗生素D

D．滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是该菌落发生了基因突变

6．某杆菌只有在含蛋白胨．牛肉膏．氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长，此时微量维生素对该菌的培养而言属于（    ）

A．碳源 B．氮源 C．激素 D．特殊营养物质

7．某生物研究小组为探究大肠料医抗药性产生与使用抗生素的关系，采用了影印培养法进行了下列实验：

①取空白培养基若下，分别标记为A1．A2．A3.....取加入青霉素的空白培养基若干，分别标记为B1．B2．……

②将待测大肠杆菌培养液接种在A1培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，培养基的表面会出现一些菌落。

③用灭菌后的丝绒包上棉花在A1上轻轻盖一下，再在B上轻轻盖一下，将A1的菌落位置准确“复制”到B1中。培养一段时间后，B1中一定部位出现了少量菌落。

④根据B1中菌落的位置，将A1中对应位置的菌落取出，均匀涂抹在A2的表面，培养元段时间后，培养基表面又会出现许多菌落。

⑤反复重复③④过程。

其过程可简化为如图所示。下列有关叙述错误的是（    ）

A．A系列平板中的大肠杆菌没有接触过青霉素，没有选择作用

B．A系列平板中的大肠杆菌抗药基因的频率会发生定向改变

C．随着重复次数的增多，A与B对应的平板中菌落数量逐渐接近

D．该实验证明了大肠杆菌抗药性的产生与是否接触青霉素无关

8．细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落，下图哪项实验设计最适合用来检验两种抗生素的杀菌效用（　　）

A.  B.

C.  D.

9． “何以解忧？唯有杜康”，中国酒文化源远流长。相传杜康所作的一首酒歌：“三更装糟糟儿香，日出烧酒酒儿旺，午后投料味儿浓，日落拌粮酒味长”，酿酒工艺如下图。下列关于传统酿酒相关叙述，不正确的是

A. 三更装糟糟儿香，目的是接种发酵菌种酵母菌

B. 日出烧酒酒儿旺，目的是淀粉糖化为麦芽糖和葡萄糖

C. 午后投料味儿浓，发酵温度一般控制在18-25℃

D. 日落拌粮酒味长，搅拌利于散热和酒精发酵

10． 下列关于微生物培养的叙述，错误的是

A. 琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一

B. 牛肉膏蛋白胨培养基能够为微生物生长提供维生素

C. 用平板划线法可以在牛肉膏蛋白胨固体培养基上纯化大肠杆菌

D. 纯化培养大肠杆菌时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养

11．土壤中有些细菌可以降解焦化厂淤泥中的污染物S，下图是分离．纯化和筛选高效降解S的优质菌株的过程，下列叙述正确的是（　　）

A．甲是土样经高温灭菌后用无菌水配置的土壤稀释液

B．丙是添加了琼脂的选择性培养基

C．在涂布平板上长出的菌落，可通过划线法进行计数

D．经多次稀释和筛选，形成的单菌落中所有细胞的遗传物质都相同

12．我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准具体规定如下：细菌总数不超过100个/mL，大肠杆菌数不超过3个/mL。为了检验城市自来水是否达标，某生物兴趣小组进行了相关实验。下列有关叙述正确的是（　　）

A．实验过程中应使用涂布器．移液管等操作工具，使用前用酒精消毒

B．取样水龙头应用火焰灼烧，且打开水龙头一段时间后再取样

C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用平板划线法来分离并计数

D．空白对照组培养基长有6个菌落，则将实验组菌落数减去6填入记录表

13．研究小组利用稀释涂布平板法来估测大肠杆菌的数量，每一个浓度涂布四个平板。下列关于操作步骤的叙述正确的是（    ）

A．因为实验前后形成对照，因此本实验不必设置空白对照组

B．涂布前将沾有少量酒精的涂布器引燃，待涂布器冷却后再涂布

C．为避免混淆应在培养皿的皿盖上做标记，并将培养皿倒置培养

D．用此法估测的数值往往偏小，故应以菌落数最多平板计数为准

14．医院检验科从伤口分泌物的细菌培养结果中随机选取312例，分析其中所含有病原体类型和病原体抗菌药物敏感情况，为临床上抗生素的应用提供参考。如表是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对常用抗菌药物敏感性实验结果。有关说法错误的是（   ）

A.从伤口的分泌物中分离细菌时要注意无菌操作

B.培养细菌的培养基需要严格消毒

C.可以利用稀释涂布平板法对细菌进行计数

D.由表中数据可知万古霉素的抗菌性最好

15．某一种细菌要从环境中获取现成的亮氨酸(20种必需氨基酸中的一种)才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出下表中细菌菌株类型。根据实验者的目的，选用的培养基类型是（    ）

注：L：亮氨酸 S：链霉素 “＋”：加入 “－”：不加入

如：L－：不加亮氨酸 S＋：加入链霉素

A．① B．② C．③ D．④

16．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌．放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数(如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）

A. 提供适宜的温度，将培养基的 pH 调至酸性，有利于降解菌的生长繁殖

B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小

C. 配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以提高降解菌的浓度

D. 5 号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为 1.7×109个

17．高压蒸汽．酒精擦拭．火焰灼烧三种处理方法分别适用于哪些材料（或用具）的杀菌处理（　　）

A．接种环．培养基．超净工作台 B．接种环．操作者的双手．培养基

C．培养基．操作者的双手．接种环 D．接种环．超净工作台．培养基

18．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，在培养基中加入青霉素可抑制细菌和放线菌的生长，在培养基中加入10% 酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述这些方法不能从混杂的微生物群体中分离出（    ）

A．大肠杆菌

B．霉菌

C．放线菌

D．固氮细菌

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

2．【答案】C

【解析】

3．【答案】B

【解析】

检测细菌总数，用蒸馏水配置培养基，常用高压蒸汽灭菌法灭菌后，取104．105．106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置适宜条件培养，在确定对照组无菌后，选择菌落在30-300的一组平板为代表进行计数。

解答：

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温．高压灭菌后倒平板，A正确；

B．测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取104．105．106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，B错误；

C．平板倒置后，将实验组和对照组在37℃恒温培养24～48小时，C正确；

D．确定对照组无菌后，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，D正确。

故选B。

4．【答案】D

【解析】A．在含哺乳动物排泄物的土壤中有较多含脲酶的细菌，因此土样从有哺乳动物排泄物的地方取，获得目的菌种几率很高，A正确；

B．取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL，分别涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基．尿素固体培养基上，其中牛肉膏蛋白胨固体培养基是对照，B正确；

C．将实验组和对照组37℃恒温培养24至48h时，需将平板倒置，C正确；

D．在尿素固体培养基上生长的细菌大多数是以尿素为氮源的细菌，还有一些利用空气中氮的微生物等，D错误。

故选D。

5．【答案】C

【解析】

解答：

A．微生物的实验室培养，可选择牛肉膏蛋白胨培养基，A正确；

B．干热灭菌法适用于玻璃器皿．金属工具，B正确；

C．A．B．C．D四种抗生素均可抑制SAU的增殖，所形成的透明圈越大，说明抑制效果越强，因此抑菌效果最佳的是抗生素a，C错误；

D．滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，说明抗生素不能抑制该菌落的生命活动，则可能是该菌落发生了基因突变，D正确。

故选C。

6．【答案】D

【解析】

微生物的营养物质有：水．碳源．氮源．无机盐．生长因子。

7．【答案】A

【解析】

本题以影印培养法 为情境，考查选择对生物进化的影响，旨在考查考生的理解能力和获取信息的能力，以及生命观念．科学思维的核心素养。

解答：

A．A系列平板的大肠杆菌虽然没有接触过青霉素，但由于此法对菌落位置和种类的定性很准确，所以使用该法可以有效地选择出产生抗药性变异的大肠杆菌，也有选择作用，A错误；

B．由于A系列平板中的大肠杆菌选择的都是有抗药性的，故抗药性基因频率定向改变，B正确；

C．随着重复次数的增多，A系列平板中的抗药性越来越强，逐渐与B系列接近，C正确；

D．由于A系列平板上的大肠杆菌没有接触过青霉素，但仍具有抗药性，所以抗药性的产生与是否接触青霉素无关，D正确。

故选A。

8．【答案】C

【解析】该目的是检验两种抗生素的杀菌作用，设计实验时，应遵循对照原则，即设计只有细菌的空白对照组，将来与含有抗生素的实验组进行对比分析；还应遵循单一变量原则，如抗生素的有无或抗生素的种类，综合分析，C符合题意，ABD错误。

故选C。

9．【答案】 D

【解析】日落拌粮酒味长，搅拌利于散热和酵母菌有氧呼吸，增加种群数量，搅拌增加了发酵液中的氧气浓度，不利于酒精发酵，D错误。

10．【答案】 D

【解析】纯化培养大肠杆菌时，所用的培养基均是固体培养基，不需要摇床，D错误。

11．【答案】B

【解析】

平板划线法和稀释涂布平板法是两种常用的接种方法，其中稀释涂布平板法还可用来计数。据图可知，实验采用稀释涂布平板法对菌种进行分离纯化。

解答：

A．土样不能用高温灭菌，这样会杀死土样中的目的菌，A错误；

B．固体培养基中才能形成菌落，故丙是固体培养基，制备时加入了琼脂，B正确；

C．平板划线法是常用的接种方法，但不能用来计数，C错误；

D．菌落往往是由一个细菌繁殖而成的子细胞群体，该实验中筛选出的菌落中的菌种降解能力可能不同，故细胞的遗传物质不一定相同，D错误。

故选B。

12．【答案】B

【解析】

间接计数法（活菌计数法）：

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

解答：

A．实验过程中应用到涂布器．移液管等操作工具，涂布器应用酒精灯火焰灼烧灭菌，冷却后再使用，A错误；

B．为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌，B正确；

C．检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数，C错误；

D．若空白对照组上有6个菌落，则说明该实验失败，实验数据不能采用，D错误。

故选B。

13．【答案】B

【解析】

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度．一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。

解答：

A．需要一个空白的牛肉膏蛋白胨培养基做对照，可以判断出是否被杂菌污染，A错误；

B．涂布器灭菌时，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10s再用，B正确；

C．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底。因为如果把标签写在盖子上，培养皿倒置后标签就看不到了，C错误；

D．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性，D错误。

故选B。

14．【答案】B

【解析】分离细菌时为了防止污染应该进行无菌操作；培养细菌的培养基应该进行高压蒸汽灭菌而不是消毒；可以利用稀释涂布平板法或血细胞计数板法对细菌进行计数；由表中的数据可知，万古霉素无论是在敏感株数还是在敏感率上都是最高的，所以万古霉素的抗菌性最好。

15．【答案】B

【解析】

表中所列均为选择培养基。选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

解答：

根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-．S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+．L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸．抗链霉素的菌株应用的培养基L-．S+。

故选B。

16．【答案】A

【解析】A．培养细菌时，应该将培养基的pH调至中性或弱碱性，A错误；

B．该技术方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故技术结果比显微镜直接计数法偏小，B正确；

C．若乙丙草胺作为唯一氮源，则只有具有降解能力的降解菌能够存活，故可以提高降解菌的浓度，C正确；

D．根据5号试管的数据可知，每克土壤中菌株数为（168+175+167）÷3×105×100=1.7×109个，D正确。

故选A。

17．【答案】C

【解析】

18．【答案】A

【解析】

选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

解答：

A．大肠杆菌属于异养型细菌，不能在缺乏氮源的培养基上生存。根据题意可知，大肠杆菌也不能在加入青霉素和10%酚的培养基上生存，所以不能利用这些方法把大肠杆菌从混杂的微生物群体中分别分离出来，A正确；

B．霉菌属于真菌，可以在添加青霉素的选择培养基上筛选分离霉菌，B错误；

C．在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，可以筛选分离放线菌，C错误；

D．固氮细菌能够固氮，属于固氮微生物，在缺乏氮源的选择培养基上可以筛选分离圆褐固氮菌，D错误。

故选A。