生物选修3一、间接计数法课时训练

【基础】一、间接计数法-2课时练习

一．单项选择

1．制作腐乳并无严格的灭菌环节，但也能制作出品质优良的腐乳。下列叙述不正确的是(　　)

A．粽叶上有大量毛霉菌繁殖体，使毛霉菌在短期内成为优势菌

B．由于营养物质的消耗和代谢产物的积累，毛霉菌之间的斗争变得激烈

C．发酵过程中要经常揭开覆盖物散热

D．装瓶密封后能继续进行发酵

2．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，如图为实验室的部分操作步骤，相关说法错误的是（    ）

A．本实验的培养基中应加入苯酚作为唯一碳源

B．步骤④中接种环需在每次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养

C．灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后可获得纯化的苯酚降解菌菌落

D．可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，获得高效苯酚降解菌

3．如图是使用某接种方法在适宜的培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述错误的（    ）

A．该图最可能是用平板划线法进行接种

B．接种技术的核心是要防止杂菌的污染

C．该接种方法适用于微生物的分离

D．该接种方法适用于微生物的计数

4．关于灭菌和消毒的说法中，不正确的是（    ）

A．灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物

B．消毒是指使用温和的理化因素杀死物体内外所有的微生物

C．用酒精擦拭双手．用氯气处理饮用水源等操作属于消毒

D．常用灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌等

5．下列是对四种微生物的能源．碳源．氮源．新陈代谢类型的描述，正确的一组是（   ）

A．A B．B C．C D．D

6．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。如：在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。现有①大肠杆菌  ②霉菌  ③放线菌  ④固氮细菌四种微生物混杂在一起，利用上述方法能分别分离出（    ）

A．④②③ B．④①② C．④③② D．①②③

7．培养基是一种人工配制的．适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述错误的是（    ）

A．从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养自养型微生物

B．加入的KH2PO4即可从养分上提供P和K，又可缓冲培养基的pH

C．若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需添加葡萄糖

D．如果再加入指示剂，该培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基

8．某同学将1mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0．1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56．57和58。下列叙述错误的是（    ）

A．可得出土壤样液中活菌数大约为5．7×107个/L

B．此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低

C．一般选择菌落数在30—300的平板进行计数

D．显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数

9．下列关于微生物培养及利用的叙述，正确的是（    ）

A．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

B．尿素固体培养基一般是将尿素涂布到固体平面培养基上制成的

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是维持渗透压

D．倒平板时，应将打开的培养皿盖放在一边，防止培养基溅到皿盖上

10．下列有关制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，正确的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．调pH值和倒平板

B．将称好的牛肉膏放入烧杯前，应将称量纸去除

C．为了方便将灭菌后的培养基倒入培养皿，可将皿盖置于操作台桌面上

D．待平板冷却凝固约5～10 min后，将平板倒过来放置

11．漆酶属于木质素（木质素是一类参与维管植物和一些藻类的支持组织如细胞壁组成的重要结构物质）降解酶类，在环境修复．农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离．纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（    ）

A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B．筛选培养基中需要加入纤维素，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化

D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

12．消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理(    )

①皮肤         ②饮用水       ③牛奶     ④注射器       ⑤培养皿

⑥接种环       ⑦培养基       ⑧果汁     ⑨酱油         ⑩手术刀

A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部

13．平板划线法和稀释涂布平板法是最常用的两种微生物接种方法。其他条件相同且适宜时，使用这两种接种方法接种同种微生物。下列有关叙述正确的是（    ）

A．使用成分相同的液体培养基

B．对接种工具的灭菌操作相同

C．都能进行菌种的纯化和计数

D．得到的菌落的特征不相同

14．下图是草莓酒制作的过程。下列分析中不正确的是(　　)

A．步骤②是对草莓进行灭菌处理

B．步骤⑤为加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠

C．发酵过程中放气量先增加后减少

D．利用重铬酸钾溶液检测酒精的含量

15．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学打算从受原油污染的土壤中筛选高效降解原油的菌株，下列有关做法错误的是（    ）

A．纯化菌种时，为了得到单菌落，只能采用平板划线法

B．无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染

C．在筛选过程中应选用选择培养基，即将土壤样品稀释液接种到以原油为唯一碳源的固体培养基上。

D．通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌

16．总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是

A．总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外

B．总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关

C．相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多

D．接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好

17．关于制作果酒．果醋/腐乳的叙述，错误的是(　　)

A．在果酒发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可延长

B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸

C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小

D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需增加盐的用量

18．制培养基时下列各项可不必考虑的是（    ）

A．大量元素要充足 B．微量元素不可少 C．不能被杂菌污染 D．要有一定光照

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】：选C　在空气中有大量的毛霉，成熟孢子可以在粽叶上萌发菌丝，在高温高湿条件下繁殖迅速，短时间内会成为优势菌种，A正确；随着营养物质的消耗和代谢产物的积累，毛霉菌之间因为资源有限斗争激烈，B正确；发酵过程中为了避免外界微生物的污染不能经常揭开覆盖物，C错误；装瓶密封后能继续发酵，后期发酵利用的是被杀死后的毛霉裂解释放出来的各种分解酶的作用，D正确。

2．【答案】C

【解析】

试题分析：

3．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

解答：

A．微生物常见的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，图示培养基上有明显的划线，且微生物并没有均匀分布，因此其接种方法应该是平板划线法，A正确；

B．不同的微生物接种方法的核心都是防止杂菌污染，B正确；

C．平板划线法可以用于微生物的分离，C正确；

D．平板划线法可以用于微生物的分离，但是不能用于微生物的计数，D错误。

故选D。

4．【答案】B

【解析】

试题分析：

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；消毒是指杀死病原微生物．但不一定能杀死细菌芽孢的方法。

解答：

A．灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，A正确；

B．消毒指用较温和的手段杀死物体表面或内部的部分微生物，B错误；

C．用酒精擦拭双手．用氯气处理饮用水源等操作属于消毒，C正确；

D．常用灭菌方法有灼烧灭菌．干热灭菌．高压蒸汽灭菌等，D正确。

故选B。

5．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

根据题意和图表分析可知：乳酸菌的氮源应该是NH4+；根瘤菌能固氮，但不能自己制造有机物，它的碳源不是CO2，其代谢类型是异养需氧型；衣藻能利用光能进行光合作用，但其氮源应该是NH4+；所以ABD都不正确，选C。

6．【答案】A

【解析】

试题分析：

选择培养基的原理：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同。利用这些特点，我们可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基。例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。

解答：

（1）固氮菌的氮源是氮气，所以在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是④固氮细菌可以生长；
（2）霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌（如大肠杆菌．固氮细菌）和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出②霉菌；
（3）培养基中加入10%酚可以抑制细菌（如大肠杆菌．固氮细菌）和霉菌，所以可以筛选③放线菌。
故选A。

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

各种培养基一般都含有水．碳源．氮源．无机盐，此外还要满足微生物生长对pH．特殊营养物质以及氧气的要求；培养基按其物理状态可分为固体培养基．液体培养基和半固体培养基三类，液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基；培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。

解答：

A．根据表格分析，该培养基中含有氮源．无机盐．水，没有碳源，可以用来培养自养型微生物，A正确；

B．表格中的KH2PO4可以为微生物提供P和K元素，还可以缓冲培养基的pH，B正确；

C．若要观察微生物的菌落特征，需要使用固体培养基，应该加入琼脂，C错误；

D．该培养基中没有碳源，属于选择培养基，若再加入指示剂，还可以作为鉴别培养基，D正确。

故选C。

8．【答案】D

【解析】

试题分析：

稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

解答：

A．将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56．58和57，据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×107个，A正确；

B．由于两个或多个细菌形成一个菌落，所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，B正确；

C．一般选择菌落数在30—300的平板进行计数，C正确；

D．显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目，包括死菌，D错误。

故选D。

9．【答案】A

【解析】

试题分析：

本题主要考察了微生物的实验时培养，使用稀释涂布平板法可以用来对菌种进行计数，但所测量的数值比真实值少。培养基中必须具备的营养成分有水．碳源．氮源和无机盐等。整个过程需要严格的无菌操作。

解答：

A．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法统计的菌落数往往要比活菌的实际数目少，A正确；

B．尿素培养基是在配制培养基的时候就添加进去的，B错误；

C．醋化醋杆菌扩大培养液中甘露醇的主要作用是提供碳源，C错误；

D．倒平板的时候不能把培养皿盖完全打开放到一边，会增加空气中杂菌污染培养基的机会，D错误；

故选A。

10．【答案】D

【解析】

试题分析：

11．【答案】C

【解析】

试题分析：

分析题图：分离．纯化和保存菌株的一般流程为：取样→制成样品悬液→涂布→划线→接种。

解答：

A．根据题文可知，漆酶属于木质素降解酶类，因此要分离产漆酶菌株应该到富含木质素的环境中（如森林的土壤中）取样，A错误；

B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物木质素，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B错误；

C．由题图可知，在涂布平板上长出的菌落，还需要再通过划线进一步纯化，C正确；

D．临时保存菌种时需要将菌种接种到固体斜面培养基上，使用该方法时，菌种容易被污染或产生变异，因此这种保存方法不能用于菌种的长期保存。要想长期保存需要使用甘油管藏法于-20℃保存，D错误。

故选C。

12．【答案】A

【解析】

试题分析：

本题考查微生物的实验室培养及无菌操作的要求，旨在考查考生识记能力与知识的迁移运用能力。

解答：

消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体，如③牛奶．⑧果汁．⑨酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏；对要求不是很严格的①皮肤．②饮用水也用消毒的方法处理；而对于严格要求的④注射器．⑤培养皿．⑥接种环．⑦培养基．⑩手术刀等必须进行灭菌处理。所以，①②③⑧⑨应该用消毒的方法处理，故选A。

13．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

解答：

A．用这两种方法接种同种微生物时应该使用成分相同的固体培养基，A错误；

B．对接种工具的灭菌操作相同，都是灼烧灭菌，B正确；

C．平板划线法和稀释涂布平板法都可以进行菌种的纯化，但其中只有稀释涂布平板法可以计数，C错误；

D．用这两种方法接种同种微生物时得到的菌落的特征相同，D错误。

故选B。

14．【答案】A

【解析】：选A　步骤②是对草莓进行清洗，A错误；步骤⑤为加入菌种酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠，B正确；发酵过程中因为先进行有氧呼吸产生二氧化碳较多，后期进行无氧呼吸产生气体量较少，C正确；是否产生酒精可以用重铬酸钾在酸性条件下进行检测，有酒精会出现灰绿色，D正确。

15．【答案】A

【解析】

试题分析：

16．【答案】C

【解析】

试题分析：

解答：

总状毛霉与米根霉都能将蛋白酶分泌到细胞外，进而将豆腐块中的蛋白质分解产生肽和氨基酸，A错误；据图分析，随着接种量的增加，总状毛霉与米根霉产生的蛋白酶的活性都是先增加后减弱，并不是一直呈现正相关，B错误；相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉的蛋白酶活性更高，因此使豆腐块中的蛋白质减少更多，C正确；图示只能证明接种量为5CFU/mL时，蛋白酶的活性最好，但是不能说明发酵制作的腐乳品质最好，D错误。

17．【答案】D

【解析】：选D　果酒发酵的后期，营养物质减少，酵母菌代谢减慢，产生的CO2量减少，可以间隔较长的时间再拧松瓶盖；糖源和氧气充足时，醋酸菌可以将葡萄糖分解成醋酸，糖源不足时，则将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；果酒发酵过程中，葡萄糖分解会产生水，因此发酵液的密度逐渐减小；制作腐乳时，在摆放豆腐的同时，应逐层加盐，随层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。

18．【答案】D

【解析】

试题分析：

培养基的基本组成：水．无机盐．碳源和氮源。

解答：

水．无机盐．碳源和氮源中含有足量的大量元素和微量元素，另外防止杂菌污染是制备培养基必须的，光照不是必须的，故选D。