高中二 微生物的选择培养和计数教案配套ppt课件
展开思考:如何从自然界中分离出生产所需要的特定微生物?
1、科学实例:寻找耐高温的DNA聚合酶
1973年,热泉中发现了耐热的水生栖热菌
2、实验室中微生物的筛选:
人为提供____________________的条件(包括_____、_____和_____等),同时___________________________。
抑制或阻止其他微生物的生长
允许 生长,同时 或 其他种类微生物生长的培养基。
能消除石油污染的微生物
设计以尿素作为唯一氮源的选择培养基。
配方②:培养分解尿素的细菌
(1)从物理性质看此培养基属于哪类?从用途上属于哪类培养基?
配方②是以尿素作唯一氮源的选择培养基
(2)此培养基中共有哪些成分?在此培养基中哪些作为碳源、氮源?
碳源、氮源、水、无机盐
稀释度足够高时,能在培养基表面形成单个菌落。对土样充分稀释后,将菌液涂布到制备好的选择培养基上。
1g土壤中有多少能分解尿素的细菌?
②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。
①铲取图样,将样品装入纸袋中
取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
稀释涂布平板法的步骤:
③取0.1mL 菌液滴加到培养基表面
④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
⑤将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却。
⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀
待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d,在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。
当样品的稀释度足够___时,培养基表面生长的一个 ,来源于__________中的一个____;通过计数平板上的____数,就能推测出样品中大约含有多少_____。
①一般选择菌落数为_______的平板计数。
②选用一定稀释范围的样品进行培养,在同一稀释度下,应至少对 个平板进行重复计数,然后求出平均值。
当两个或多个细胞连接在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。
每g样品中的菌落数=(C÷V)×M
C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)
1.某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每g样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) ( )A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 2.34×106
2.(科学探究)某同学在三种稀释度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板,统计菌落数,得到以下数据,则1 g样品的活菌数为________________个。
利用特定的___________ 或_____________ 在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量;
①统计的结果是活菌数和死菌数的总和
②个体小的细菌在显微镜下难以观察。
1.最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,下列关于二者的比较,正确的是( )A . ③④ B.②④ C.①④ D.②③
2.用涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是( )A.涂布了一个平板,统计的菌落数是230B.涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163D.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233
通过连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散
将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面,进行培养,以得到单菌落
稀释度合适,整个平板上都可找到单菌落
分离纯化菌种,获得单菌落
①分离纯化菌种,获得单菌落②用于计数
①都能分离纯化菌种;②都是在固体培养基上进行的。
以尿素为唯一氮源的选择培养基
实践·探究:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(用以判断选择培养基是否具有选择作用)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
未涂布培养基上无菌落生长
未涂布培养基上有菌落生长
牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显多于选择培养基上的菌落数目
选择培养基具有选择作用
①结合对照组,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。②你是否获得了某一稀释度下菌落数为30~300的平板?在这一稀释度下,是否至少有2个平板的菌落数接近?③你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学统计的结果接近吗?如果差异很大,可能是什么原因引起的?
如果没有接种的培养基上没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数,说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌。
得到两个或多个菌落为30~300的平板,说明稀释度合适,操作较成功,能够进行菌落的计数。
如果用同一土样进行的操作,数据应该接近。如果差异很大,就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素。
3.用来判断选择培养基是否起到了选择作用,需要设置的对照是( )A.未接种的选择培养基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D.接种了的选择培养基
1.研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。(1)这种培养基是一种选择培养基。( )(2)利用这种石油降解菌可以降解石油。修复土壤。( )(3)相对于未被污染的土壤,从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌( )
2.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数,原因是( ) A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
1.反刍动物,如牛和羊具有特殊的器官一瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。请你设计一个实验从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物。
由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基,还应该参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。
2.(1)现在要从土壤中分离纤堆素分解菌,请你给出详细的实验方案。(2)你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌?为什么?(3)有同学说,可以把滤纸埋在土壤中,经过一段时间后,再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。请你评价这一做法。
(1)可以参考本节“探究·实践”中的设计思路进行设计。
(2)纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,采集土样时,可以选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土等。
(3)这是人工设置适合纤维素分解菌生存的环境,腐烂的滤纸上很可能有纤维素分解菌。
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