1.2 微生物的培养技术及应用 练习 高中生物新人教版选择性必修3（2022年）

第2节  微生物的培养技术及应用

一、选择题

1. 下列常用的无菌操作中，错误的是（   ）

A.无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌

B.用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒

C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行

D.玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭

【答案】D 

【解析】无菌技术是用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切细菌；对操作者应用较温和的法进行消毒，如酒精擦拭；实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止杂菌污染；对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。

2.下列关于培养基的说法正确的是（ ）

A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B.培养基只有两类：液体培养基和固体培养基

C.除水以外的无机物只能提供无机盐

D.无机氮源不可能提供能量

【答案】A 

【解析】根据培养基的物理性质，可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基，在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体培养基；除水以外的无机物如NH4HCO3，既可是碳源，也可以是氮源，不仅仅提供无机盐；无机氮源有时也能提供能量，如NH3可以为硝化细菌提供能量。

3. 下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（  ）

【答案】D 

【解析】倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养四，左手立即盖上培养四的四盖，防止空气中的杂菌污染；接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内；划线时要从上一次划线的末端开始进行，让菌种来源于上一次划线末端。

4.菌种鉴定的重要依据是（   ）

A.细菌的大小、形状和颜色     B.菌落的大小、形状和颜色

C.有无鞭毛                   D.培养基的不同

【答案】B 

【解析】不同种类的微生物所形成的菌落在大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等方面具有一定的差异。所以，在一定条件下所成的菌落，可以作为微生物鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。

5.用涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在加入10-5g/mL土壤悬液的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（  ）

A.涂布了一个平板，统计的菌落数是230

B.涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238

C.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163

D.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233

【答案】D

【解析】在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验结果的说服力与准确性。C项虽涂布了三个平板，但是其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误。因此，不能简单地将三个平板的计数值用来求平均值。

6.下列关于灭菌和消毒的叙述中，不正确的是（    ）

A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子

B.消毒和灭菌实质上是相同的

C.接种环用灼烧法灭菌

D.常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法

【答案】B

【解析】消毒是指用较为温和的物理方法、化学或生物方法杀灭物体表面或内部一部分微生物灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用的方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。

7.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃温箱的目的是（    ）

A.对比观察培养基有没有被微生物利用

B.对比分析培养基上是否生有杂菌

C.没必要放入未接种的培养基

D.为了下次接种时再使用

【答案】B 

【解析】设计对照实验的目的是为了检测培养基制备是否成功，即否生有杂菌。

8.在平板划线操作中，错误的是（    ）

A.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红

B.将烧红的接种环在火焰旁边冷却

C.接种环在平板上的划线位置是随机的

D.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰

【答案】C 

【解析】接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰，其目的是为止杂菌污染，将接种环先冷却再接种可以避免高温烫死菌和此A、B、D都是正确的；在平板上划线时，要划三至五条平行线，而不是随机划线，因此C项错误。   

9.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是（    ）

A.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

B.步骤①中，待倒入的培养基冷却后盖上培养Ⅲ的Ⅲ盖

C.步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理

D.划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养

【答案】B 

【解析】培养与纯化大肠杆菌的过程需要在酒精灯的火焰旁进行；步骤①中倒入培养基后应立即盖上培养血的血盖；步骤③接种时，每次划线前后都要对接种环进行灼烧处理，划线结束后，将平板倒置后放入培养箱培养，防止冷凝水污染培养基。

10.接种是微生物培养和微生物选择的必要步骤之一。下列关于接种的叙述中，不正确的是（    ）

A.接种通常在酒精灯火焰附近进行

B.接种之前要对接种环进行灼烧灭菌

C.接种指无菌条件下将微生物接入培养基的操作

D.接种时接种环要将培养基的表面划破

【答案】D 

【解析】接种时接种环不能划破培养基的表面，故D错误。

11.做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（    ）

A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D.用记号笔标记培养中的菌落时，应标记在皿底

【答案】D  

【解析】高压灭菌加热结束时，应切断电源，让灭菌锅内温度自然一降，当压力表的指针指向0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子取出灭菌物品；倒平板时应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙再缓慢倒入培养基；高温的接种环会杀死细菌，应等接种环冷却后再挑取菌落；培养血一般倒置放在培养箱中，且用记号笔标记在皿底便于取出时分类。

12.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（  ）

①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐

⑧不加硝酸盐

A.①③⑤⑦   B.②④⑥⑧      C.①③⑤⑧   D.①④⑥⑦

【答案】C 

【解析】土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，从而为微生物提供氮源。培养基中只加尿素一种氮源，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长，分离微生物要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。

13.用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是（  ）

A.未接种的选择培养基

B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D.接种了的选择培养基

【答案】C  

【解析】将菌液稀释相同的倍数，分别接种于选择培养基和牛肉膏白胨培养基，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此，需设置牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则，所以与选择培养基一样接种、培养。 

14.某混合样品中微生物R的含量极少，要得到大量的R比较理想的方法是采用（  ）

A.天然培养基

B.涂布平板法

C.利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的选择培养基

D.用显微镜直接观察、寻找，再培养

【答案】C 

【解析】在微生物的培养过程中可以通过利用适合该微生物生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖。

15.下列有关“以尿素为唯一氮源的土壤微生物的分离、培养与数量测定实验”的叙述，正确的是（   ）

A.分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液

B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同

C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法

D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布

【答案】B 

【解析】分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌；土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围也不同；测定土壤样品中的活菌数目，常用涂布平板法，一般不用显微镜直接计数法；接种土壤微生物稀释液时，可借助平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，但并不是使微生物均匀分布。 

16.血球计数板是对细胞进行计数的重要工具，下列叙正确的是（   ）

A.每块血球计数板的正中央有1个计数室

B.计数室的容积为1mm×1mm×0.1mm

C.盖盖玻片之前，应用吸管直接向计数室滴加样液

D.计数时，不应统计压在小方格角上的细胞

【答案】B  

【解析】每块血球计数板的正中央有2个计数室，每个计数室的容积都是1mm×1mm×0.1mm；血球计数板使用时，先在计数室上加盖盖玻片，后沿盖玻片边缘滴加样液使其慢慢渗入计数室；计数时统计相邻两条边线及其顶角上的细胞数量。

二、非选择题

17.下表是某种微生物培养基的配方表，请据表回答下面的问题：

（1）此培养基的营养成分有五类，其中蛋白胨提供的营养物质是_________________。（2）在培养基制备过程中，各种成分溶化后分装前，必须的操作是         。

（3）在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。如下图是利用      法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步      分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：                                    （至少答两项）。

【答案】 （1）碳源、氮源、维生素（2）调质于取出时分类，D项正确。

①每次划线前要灼烧接种环；②冷却后从上一区划线末端开始划；③首尾区不重叠（任选两项）

【解析】微生物培养基含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，培养基制备过程中各种成分溶化后分装前，必须调节pH。

18.在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。请回答下列相关问题：

（1）培养基能为培养的微生物提供营养。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有      、         、         、       ；另外，培养基还需要满足微生物对       、      、      的要求。

（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵对实验操作的空间、操作者的衣着和手，需进行清洁和       （填“消毒”或“灭菌”）;对用于微生       （填“消毒”或“灭菌”）。

（3）微生物接种的方法很多，其核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。微生物接种最常用的方法      和      。  

19.下表为土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题使用的培养基，分析培养基配方，回答下面的问题：

（1）在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是       。

（2）按物理性质划分该培养基属于       培养基，理由是培养基中含有_____;该类培养基常用于微生物的       等。

（3）由于                                 ，所以该培养基只能用于能够合成______的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出       的细菌。

（4）在微生物学中，将       的培养基，称作选择培养基。

【答案】 （1）葡萄糖和尿素  （2）固体  琼脂  纯化、分离、计数  （3）培养基中只有尿素一种氮源  脲酶分解尿素   （4）允许特定种类的微生物生长，并能抑制或阻止其他种类的微生物生长

【解析】根据培养基的成分，可以推断培养基的类型以及适于培养的微生物的代谢类型。含有琼脂、明胶等凝固剂的培养基为固体培养基；不含凝固剂的为液体培养基。不含碳源的培养基适于自养微生物的培养，不含氮源的培养基适于固氮微生物的培养等。

固体培养基常用于菌种的纯化、分离、计数等；液体培养基常用于菌种的扩大培养和工业化生产。