备战2025年高考二轮复习生物（广东专版）大单元8 生物技术与工程 层级三核心素养突破练（Word版附解析）

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图1
图2
A.引物1和引物4
B.引物2和引物6
C.引物2和引物4
D.引物3和引物5
答案B
解析由题图可知,利用重叠延伸PCR技术对DNA分子进行定点突变的过程中,通过PCR2获得产物CD时所用的引物组合为引物c、d。引物d与转录模板链的3'端结合,因此引物d的序列为5'-GTCACGTG,引物2符合该序列。现要利用重叠延伸PCR技术对抗菌肽基因进行改造以获得抑菌性更强的抗菌肽,则需要将第52位的脯氨酸替换成苏氨酸。根据两种氨基酸的密码子可知,需要将mRNA上的第154号碱基由C替换为A,则需要将DNA非转录模板链上对应部分的碱基由C替换为A。因此引物c的碱基序列为5'-CCTGTTAT,引物6符合该序列。综上所述,B项符合题意。
2.(2024·福建厦门二模)不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法。加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物,含量较多的被称为非限制性引物。PCR最初的若干次循环中,其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),但当限制性引物消耗完后,就会产生大量的ssDNA。不对称PCR的简单过程如图所示。假设模板DNA分子初始数量为a个,6次循环后开始扩增产生ssDNA。下列叙述错误的是( )
A.限制性引物和非限制性引物均需要依据模板DNA的碱基序列来设计
B.据图可知,最后大量获得的ssDNA与图中甲链的碱基序列相同
C.上述过程中子链分别沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸
D.该不对称PCR过程中需要(26-1)×a个限制性引物
答案C
解析PCR扩增时需要根据已知目的基因两侧的碱基序列来设计引物,因此限制性引物和非限制性引物均需要依据模板DNA的碱基序列来设计,A项正确;当限制性引物的浓度降低,甚至基本耗尽,双链DNA的合成速率显著下降,此时非限制性引物将继续引导单链DNA的合成,非限制性引物与乙链结合,故反应的最后阶段只产生初始DNA中一条链的拷贝(非限制性引物引导合成的单链),最后大量获得的ssDNA与图中甲链的碱基序列一致,B项正确;扩增时耐高温的DNA聚合酶将4种脱氧核苷酸连接至引物的3'端,C项错误;PCR扩增时引物是新子链的一部分,假设模板DNA分子初始数量为a个,6次循环后产生26个DNA分子,因此该不对称PCR过程中需要(26-1)×a个限制性引物,D项正确。