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四川省凉山州安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题（Word版附解析）
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考试时间共75分钟，满分100分
注意事项：
1.答题前，考生务必在答题卡上将自己的学校、姓名、班级、准考证号用0.5毫米黑色签字笔填写清楚，考生考试条码由监考老师粘贴在答题卡上的“条码粘贴处”。
2.选择题使用2B铅笔填涂在答题卡上对应题目标号的位置上，如需改动，用橡皮擦擦干净后再填涂其它答案；非选择题用0.5毫米黑色签字笔在答题卡的对应区域内作答，超出答题区域答题的答案无效；在草稿纸上、试卷上答题无效。
3.考试结束后由监考老师将答题卡收回。
一、选择题：本题共25小题，1~10题，每小题1分；11~25题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 下列关于泡菜制作的叙述错误的是（ ）
A. 盐水煮沸冷却后再入坛
B. 应选择新鲜的蔬菜入坛
C. 泡菜坛应尽量装满蔬菜
D. 泡菜坛应一直保持密封
【答案】C
【解析】
【分析】制作泡菜的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、盐水煮沸冷却后再入坛可以避免杂菌污染，A正确；
B、蔬菜作为发酵的原材料，应新鲜，B正确；
C、泡菜应装八成满，若装满易染杂菌，C错误；
D、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要是为乳酸菌的生长繁殖创造无氧条件，D正确。
故选C。
2. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，下列相关操作叙述错误的是（ ）
A. 涂布器可以采用酒精引燃方式灭菌
B. 煮沸消毒可以杀死物体部分微生物
C. 接种环在使用前后都需要灼烧灭菌
D. 接种前需对实验者的双手进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】1、无菌技术的主要内容：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②特用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免己经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2、实验室常用的消毒方法：煮沸消毒：化学药物消毒：紫外线消毒；实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌。
【详解】A、涂布器使用前放置在70%酒精中，可以采用酒精引燃方式进行灼烧灭菌，A正确；
B、煮沸消毒是利用高温杀死一部分微生物，B正确；
C、接种环在使用前后都需要灼烧灭菌，防止杂菌污染，也易获得单菌落，C正确；
D、接种前需要对培养基、培养皿进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，D错误。
故选D。
3. 关于微生物的选择培养与数量测定，叙述正确的是（ ）
A. 平板划线和稀释涂布平板均可计数微生物
B. 筛选尿素分解菌可以蛋白胨作为唯一氮源
C. 同一稀释度下以30～300范围内的平板计数
D. 显微镜直接计数的统计结果比实际活菌数低
【答案】C
【解析】
【分析】测定培养液中微生物的数目，可采用显微镜直接计数(或血细胞计数板计数)法对培养液中的微生物直接计数，也可用稀释涂布平板法将微生物接种于灭菌后的固体培养基上，培养一段时间后，通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目。由于采用第一种方法计数时不能剔除死菌，因此统计的结果往往偏大；而采用第二种方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以第一种方法统计的数目比实际活菌数目高，第二种方法统计的数目比实际活菌数目低。
【详解】A、平板划线不能计数微生物，稀释涂布平板可计数微生物，A错误；
B、筛选尿素分解菌可以尿素作为唯一氮源，B错误；
C、2个或2个以上平板上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C正确；
D、显微镜直接计数计数时不能剔除死菌，所以统计结果比实际活菌数高，D错误。
故选C。
4. 下列关于ATP叙述错误的是（ ）
A. ATP是由一分子腺苷和三分子磷酸组成
B. 许多放能反应总是与ATP的合成相联系
C. 催化ATP水解和ATP合成的酶不是同种酶
D. 有氧呼吸和无氧呼吸每个阶段都产生ATP
【答案】D
【解析】
【分析】ATP的结构简式中，A代表腺苷，P代表磷酸，-代表普通磷酸键，～代表特殊化学键。ATP中有3个磷酸，2个特殊化学键，且2个特殊化学键为远离腺苷的磷酸之间。
【详解】A、ATP是由一分子腺苷和三分子磷酸组成，A正确；
B、许多放能反应总是与ATP的合成相联系，例如细胞呼吸，B正确；
C、催化ATP水解的酶是ATP水解酶，催化ATP合成的酶是ATP合成酶，两者不是同种酶，C正确；
D、有氧呼吸三个阶段都产生ATP，无氧呼吸第一阶段产生ATP，第二阶段不产生ATP，D错误。
故选D。
5. 顺乌头酸酶和苹果酸脱氢酶是两种参与催化有氧呼吸相关的酶，下列关于两种酶叙述正确的是（ ）
A. 反应结束后均立即失活
B. 合成的场所都是线粒体
C. 都能降低反应的活化能
D. 在不同细胞中的含量相同
【答案】C
【解析】
【分析】酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数是蛋白质，少数是RNA。酶具有专一性、高效性、易受环境因素影响等特点。
【详解】A、酶可以重复利用，反应结束后不会失活，A错误；
B、绝大多数的酶是蛋白质，合成场所是核糖体，少数酶是RNA，可以来源于细胞核等处，B错误；
C、无论是顺乌头酸酶和苹果酸脱氢酶，都具有降低反应的活化能，从而加快化学反应的速度，C正确；
D、酶在不同细胞中含量不相同，D错误。
故选C。
6. 下列关于动物细胞培养过程的顺序是（ ）
①传代培养②胰蛋白酶等处理组织，形成分散细胞③原代培养
A. ①②③B. ③①②C. ②③①D. ①③②
【答案】C
【解析】
【分析】人们常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程常称为传代培养。
【详解】动物细胞培养时，首先从动物机体取出相关的组织，用胰蛋白酶处理制成细胞悬液；再将细胞悬液接入培养瓶中，进行原代培养；贴满瓶壁的细胞再用胰蛋白酶处理，再分瓶进行传代培养。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
7. 下列有关人在剧烈运动和安静状态下的能量供应叙述正确的是（ ）
A. 剧烈运动时，ATP水解加快，ATP合成减慢
B. 两种状态下都是以ATP为主要的储能物质
C. 两种状态下ATP与ADP相互转化都在发生
D. 剧烈运动时，ATP合成所需能量由磷酸提供
【答案】C
【解析】
【分析】ATP的结构简式是A-P～P～P，其中A代表腺苷，T是三的意思，P代表磷酸基团。合成ATP的能量来自呼吸作用或光合作用。
【详解】A、剧烈运动时，由于需要更多的ATP提供能量，因此ATP水解加快，ATP合成也加快，A错误；
B、ATP是直接能源物质，不是储能物质，B错误；
C、两种状态下都需要ATP可供能量，因此ATP与ADP相互转化都在发生，C正确；
D、合成ATP所需的能量来自有机物氧化分解释放的能量，D错误。
故选C。
8. 下列有关传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精不一定越多
B. 传统发酵技术中利用的微生物一般为天然存在的单一菌种
C. 腐乳制作主要利用毛霉代谢来分解豆腐中蛋白质等物质
D. 酸奶制作和泡菜制作均需要利用厌氧型微生物—乳酸菌
【答案】B
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解产生二氧化碳和水，释放能量，酵母菌大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌无氧呼吸，将葡萄糖分解成二氧化碳和酒精。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶将脂肪分解为甘油和脂肪酸。
【详解】A、酒精发酵过程中，随着发酵时间延长，酒精逐渐积累，酵母菌的生命活动被抑制，酒精含量不会一直增多，A正确；
B、传统发酵技术中利用的微生物一般为天然菌种，但大多都含有多种菌种，B错误；
C、腐乳制作主要利用毛霉代谢产生蛋白酶和脂肪酶来分解豆腐中的蛋白质和脂肪等物质，将其分解成氨基酸、小分子肽、甘油和脂肪酸等物质，C正确；
D、酸奶制作和泡菜制作利用的菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型，D正确。
故选B。
9. 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述错误的是（ ）
A. 该技术打破生殖隔离，实现远缘杂交
B. 可用灭活病毒诱导植物体细胞融合
C. 再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志
D. 可用酶解法获得植物细胞的原生质体
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
【详解】A、不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍，A正确；
B、分离出有活性的原生质体后，要用化学法或物理法诱导原生质体的融合，灭活病毒只能诱导动物细胞融合，B错误；
C、杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，C正确；
D、进行植物的体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，D正确。
故选B。
10. 下列有关发酵工程基本环节的叙述正确的是（ ）
A. 发酵过程中不需要向发酵罐中添加营养组分
B. 优良菌种只能通过诱变育种或基因工程得到
C. 菌种、培养基和发酵设备均需要严格的灭菌
D. 通过分离和纯化措施获得代谢物类发酵产品
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、发酵过程中需要向发酵罐中添加营养组分，用于微生物的发酵原料，A错误；
B、优良菌种可以通过诱变育种或基因工程得到，也可以通过从自然界中筛选获得，B错误；
C、菌种不需要严格的灭菌，因为要保证菌种的活性，C错误；
D、微生物发酵后可以通过分离和纯化措施获得代谢物类发酵产品，D正确。
故选D。
11. 关于蛋白质工程应用的说法，错误的是（ ）
A. 对基因结构的定点突变实现玉米赖氨酸合成的关键酶结构的改变属于蛋白质工程
B. 将人胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，大肠杆菌产生胰岛素的技术属于蛋白质工程
C. 通过对基因结构的改造生产出自然界中从来不存在的蛋白质种类目前还很少
D. 依据蛋白质的功能对其结构进行设计改造，最终必须通过改造或合成基因来完成
【答案】B
【解析】
【分析】1、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
2、目前，蛋白质工程成功的例子不多，因为蛋白质的功能必须依赖于正确的高级结构，而科学家对大多数蛋白质的高级结构的了解还很不够，要设计出更加符合人们需要的蛋白质还需要艰辛的探索。
【详解】A、蛋白质工程可通过改造基因来实现对蛋白质分子结构的定向改造，使之更加符合人类需要，故通过对基因结构的定点突变实现玉米赖氨酸合成的关键酶结构的改变属于蛋白质工程，A正确；
B、将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌产生胰岛素的技术属于基因工程，B错误；
C、目前，蛋白质工程成功的例子不多，主要是人们对蛋白质的结构了解的还很不够，所以通过对基因结构的改造生产出自然界中从来不存在的蛋白质种类目前还很少，C正确；
D、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，因此依据蛋白质的功能对其结构进行设计改造，最终必须通过改造或合成基因来完成，D正确。
故选B。
12. 下图是“白菜-甘蓝”培育过程示意图，下列相关叙述中错误的是（ ）
A. 该过程涉及植物细胞融合和植物组织培养技术
B. 整个培育过程中培养基的成分和含量保持不变
C. 白菜-甘蓝植株具有白菜和甘蓝两个物种的遗传物质
D. 白菜-甘蓝植株并不会表达出白菜和甘蓝所有的性状
【答案】B
【解析】
【分析】据图分析，a为原生质体融合，b为原生质体融合后再生细胞壁获得杂种细胞，c是杂种细胞脱分化形成愈伤组织，d是愈伤组织分裂、再分化形成植株。
【详解】A、a为原生质体融合，c、d为植物组织培养，因此图示过程涉及植物细胞融合和植物组织培养技术，A正确；
B、植物组织培养的不同阶段生长素和细胞分裂素的配比不同，其它成分也有一定的差异，B错误；
C、白菜-甘蓝植株是两种植物体细胞融合的结果，因此具有白菜和甘蓝两个物种的遗传物质，C正确；
D、由于细胞融合过程中会有部分染色体丢失，因此白菜-甘蓝植株并不会表达出白菜和甘蓝所有的性状，D正确。
故选B。
13. 下列有关现代生物技术的叙述错误的是（ ）
A. 在动物细胞培养液中添加一定量的抗生素以防止杂菌污染
B. 动物细胞培养过程中分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制
C. 动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持培养液中的pH
D. 转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲合的障碍
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞的生长和增殖需要充足的营养物质。培养动物细胞的培养基通常为液体培养基，其基本成分包括水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。体外培养的动物细胞往往具有贴附生长和接触抑制等特点。
【详解】A、为了防止杂菌的污染，在动物细胞培养液中常添加一定量的抗生素，A正确；
B、动物细胞在培养过程中由于细胞密度过大，因而会发生接触抑制的现象，分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制，B正确；
C、动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持并调节培养液中的pH，C正确；
D、克隆羊多利的培育是无性生殖，不能说明克服了远缘杂交不亲合的障碍，D错误。
故选D。
14. 下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交的叙述错误的是（ ）
A. 均体现出细胞膜具有流动性
B. 融合前均需要用酶解法处理
C. 所用到的技术手段完全相同
D. 诱导融合的方法不完全相同
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：（1）将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程分析：①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。2、动物细胞融合技术：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。
【详解】A、植物体细胞杂交（其中的原生质体融合）和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性，A正确；
B、植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁，然后才能诱导原生质体融合，用胰蛋白酶处理动物组织，使其分散成单个细胞，再进行细胞融合，B正确；
C、植物体细胞杂交用到了原生质体融合和植物组织培养技术，而动物细胞融合只用到了细胞融合技术，C错误；
D、诱导原生质体融合的方法物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法：物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇（PEG））和生物法（灭活的病毒），诱导融合的物理法和化学法相同，D正确。
故选C。
15. 关于动物细胞培养和胚胎工程的叙述错误的是（ ）
A. 动物细胞培养需在培养液中加入动物血清和维生素等
B. 胚胎工程的操作对象也能是生殖细胞或早期胚胎细胞
C. 胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精等技术
D. 桑葚胚和原肠胚是进行胚胎分割最佳时期
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序．胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术。
【详解】A、为尽量模拟体内环境，动物细胞培养需在培养液中加入动物血清和维生素等，以提高动物细胞培养成功率，A正确；
B、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，操作对象也能是生殖细胞或早期胚胎细胞，B正确；
C、胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎体外培养等技术，C正确；
D、胚胎移植的最晚时期是囊胚期，胚胎切割完仍需进行胚胎移植，因此不能选择原肠胚进行胚胎分割，D错误。
故选D。
16. 下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述错误的是（ ）
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也是该微生物的能源物质
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
【答案】B
【解析】
【分析】自养微生物与异养微生物类型的划分主要是依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一的碳源； CO2不能为生物提供能量，不属于能源物质； 微生物的营养：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子、其他条件。
【详解】A、氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；
B、该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；
C、无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，C正确；
D、微生物的营养元素包括碳源、氮源、水和无机盐，其中水是该微生物的营养要素之一，D正确。
故选B。
17. 下列有关利用转基因山羊乳腺生物反应器生产抗凝血酶药剂叙述错误的是（ ）
A. 基因表达载体应包含山羊乳腺特异表达的基因的启动子
B. 通过显微注射法将基因表达载体导入山羊的乳腺细胞
C. 山羊乳腺细胞将肽链加工成一定空间结构的抗凝血酶
D. 通过体细胞克隆技术可将抗凝血酶基因传递给克隆后代
【答案】B
【解析】
【分析】将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合在一起，通过显微注射的方法注入受精卵，将受精卵送入母体，成为转基因动物，动物进入泌乳期后，可通过分泌乳汁来生产药物，称为乳腺生物反应器。
【详解】A、在构建基因表达载体时需要山羊乳腺特异表达的基因的启动子，使目的基因只在乳腺细胞中表达，A正确；
B、通过显微注射法将基因表达载体导入山羊的受精卵，因为受精卵具有全能性，B错误；
C、山羊乳腺细胞中的内质网和高尔基体可以将肽链加工成一定空间结构的抗凝血酶，C正确；
D、通过体细胞克隆技术可以使后代具备抗凝血酶基因，从而将抗凝血酶基因传递给克隆后代，D正确。
故选B。
18. 关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（ ）
A. 正常小鼠注射特定抗原后能产生特定类型的B淋巴细胞
B. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合
C. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞即为杂交瘤细胞
D. 杂交瘤细胞的优点是既能迅速大量增殖又能产生特定抗体
【答案】C
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、应向小鼠体内反复注入特定抗原，使小鼠产生相应的免疫B淋巴细胞，A正确；
B、可用聚乙二醇或灭活的病毒或电刺激诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，B正确；
C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞，也有B细胞与B细胞的融合体，也有骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合体，C错误；
D、B细胞可以产生抗体，骨髓瘤可以无限增殖，融合成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生特定抗体，D正确。
故选C。
19. 一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌，进行了如图所示的实验。下列说法错误的是（ ）
A. 图示所用培养基是以PP作为唯一碳源的选择培养基
B. 图示所用接种方法分别为稀释涂布平板法，需要在酒精灯火焰旁进行
C. 在三个平板滴加0.1ml的稀释液，经适当培养后平板上菌落数分别是75、76、77，则1g土壤中活菌数约为7.6×107
D. 用稀释涂布平板法进行微生物数量统计一般比实际值偏低
【答案】C
【解析】
【分析】1、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
2、计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。计算公式：每克样品中的菌株数＝(c÷V)×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
【详解】A、聚丙烯纤维(PP)是一种含碳有机物，为了从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌，因此图示所用培养基是以PP作为唯一碳源的选择培养基，A正确；
B、据图分析，微生物分离时需要梯度稀释，故图示所用接种方法分别为稀释涂布平板法，需要在酒精灯火焰旁进行，B正确；
C、在三个平板滴加0.1ml的稀释液，经适当培养后平板上菌落数分别是75、76、77，则1g土壤中活菌数[(75+76+77)÷3]÷0.1×105=7.6×107，则1g土壤中能高效降解聚丙烯纤维(PP)活菌数约为约为7.6×107，C错误；
D、由于一个菌落可能是由2个或多个细菌形成的，因此用稀释涂布平板法进行微生物数量统计一般比实际值偏低，D正确。
故选C。
20. 三亲婴儿技术是一种辅助生殖技术，旨在帮助那些有线粒体疾病风险的女性生育健康的孩子。其培育过程如图，下列叙述错误的是（ ）
A. 卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 供体精子需获能后才能与卵母细胞发生受精作用
C. 该技术可避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。
【详解】A、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，A正确；
B、供体精子需经过体外获能处理后才能与卵母细胞发生受精作用，B正确；
C、母亲为“三亲婴儿“提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，C正确；
D、三亲婴儿来源于精子和卵母细胞结合形成的受精卵，属于有性生殖，D错误。
故选D。
21. 某实验小组用如图所示的质粒和目的基因的片段来构建基因表达载体(图中标注了相关限制酶切割位点)，再将其导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。下列步骤描述错误的是（ ）
A. 构建基因表达载体的过程应选用BclⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶
B. 使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组
C. 能在四环素的培养基上生存一定是含有基因表达载体的大肠杆菌
D. 利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙
【答案】C
【解析】
【分析】根据质粒的特点确定限制酶的种类1、所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。2、质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
【详解】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；
B、酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接，构建重组载体，B正确；
C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；
D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。
故选C。
22. 科学家将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合制成了抗体-药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. ADC技术中抗体的主要作用是识别并特异性结合癌细胞表面的抗原
B. ADC技术中的抗体与抗原结合后，药物通过胞吞作用进入细胞
C. ADC技术用于提高药物治疗的选择性和降低药物带来的副作用
D. 肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新蛋白质
【答案】D
【解析】
【分析】识图分析可知，图中抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，利用抗体与抗原的特异性结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。图中ADC的作用机制为：携带药物的抗体与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，然后通过胞吞作用进入到细胞内，抗体被细胞内的溶酶体裂解，释放出药物作用于肿瘤细胞，使肿瘤细胞凋亡。
【详解】A、据图分析，ADC技术中抗体的主要作用是特异性识别并结合癌细胞表面的抗原，从而将药物带进细胞，A正确；
B、据图分析，ADC技术中的抗体与抗原结合后，细胞膜向内凹陷，药物通过胞吞作用进入细胞，B正确；
C、ADC技术可以通过抗体和肿瘤细胞表面的抗原特异性结合，从而将药物精准的带入肿瘤细胞中，提高药物治疗的选择性和降低药物带来的副作用，C正确；
D、肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此会产生新蛋白质，D错误。
故选D。
23. 下图是对基因型AaBb的玉米所做的相关处理的过程图，下列叙述正确的是（ ）
A. 过程a采用的技术手段是花药离体培养
B. 过程c能说明植物体细胞具有全能性
C. c和d过程分别表示再分化和脱分化过程
D. 过程b经染色体加倍后可得到2种基因型植株
【答案】A
【解析】
【分析】细胞全能性是指单个植物细胞发育成完整的个体的能力。
【详解】A、过程a由花粉粒变为单倍体植株，所采取的技术手段是花药离体培养，A正确；
B、细胞全能性是指单个植物细胞发育成完整的个体的能力，过程c是叶肉细胞脱分化形成愈伤组织的过程，没有发育成完整个体，不能体现全能性，B错误；
C、c是叶肉细胞培养成为愈伤组织的过程，是脱分化过程，d是愈伤组织形成胚状体的过程，表示再分化，C错误；
D、、基因型为AaBb的玉米能产生AB、Ab、aB和ab这四种配子，经花药离体培养后可得到四种单倍体幼苗，经秋水仙素处理后，能得到AABB、AAbb、aaBB和aabb4种可育的植株，D错误。
故选A。
24. 细胞呼吸的原理广泛应用于生产生活中，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 过期的酸奶胀袋是由于乳酸菌无氧呼吸产生气体导致的
B. 低温低氧环境中储存蔬菜水果有利于降低有机物的消耗
C. 传统发酵制作果酒的原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精
D. 中耕松土能提高作物根系的呼吸作用，有利于植物的生长
【答案】A
【解析】
【分析】1.有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。2.无氧呼吸的场所是细胞质基质，无氧呼吸的第一阶段和有氧呼吸的第一阶段相同。无氧呼吸由于不同生物体中相关的酶不同，在植物细胞和酵母菌中产生酒精和二氧化碳，在动物细胞和乳酸菌中产生乳酸。
【详解】A、乳酸发酵是厌氧发酵，产物只有乳酸，没有气体产生，A错误；
B、低温、低氧环境储藏果实，能降低酶的活性，进而降低细胞呼吸速率，减少果实、蔬菜中有机物的消耗，B正确；
C、酿造果酒时，酵母菌先进行有氧呼吸产生大量的能量进而可以满足大量繁殖对能量的需求，此后随着密闭容器中氧气的减少进行无氧呼吸产生酒精，所以传统发酵制作果酒的原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，C正确；
D、中耕松土、适时排水能为根系提供更多O2，促进根细胞进行有氧呼吸，有利于根吸收无机盐，D正确。
故选D。
25. 有关不同年龄的福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性的研究如下，下列叙述错误的是（ ）
A. 本实验的自变量有年龄和生物种类
B. 推测田螺具有更强的消化能力
C. 推测福寿螺具有更强的生存能力
D. 结果表明纤维素酶活性与年龄有关
【答案】B
【解析】
【分析】本实验的自变量为年龄和螺的种类，因变量为两种螺体内纤维素酶活性。
【详解】A、本实验探究的是不同年龄的福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性，所以本实验的自变量有年龄和生物种类，A正确；
BC、据图可知，在相同的年龄组，都是福寿螺的胃中纤维素酶活性高，所以可推测福寿螺具有更强的消化能力，推测福寿螺具有更强的生存能力，B错误，C正确；
D、随着年龄的改变，福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性发生改变，所以结果表明纤维素酶活性与年龄有关，D正确。
故选B。
二、非选择题：共60分。
26. 四川省都江堰市盛产猕猴桃，利用酵母菌制作的猕猴桃酒外观晶莹透亮，滋味醇香，营养价值较高。下图是制作猕猴桃酒过程中酵母细胞中发生的一系列反应。其中a、b代表两种生物膜，①~④表示反应过程，A~F表示相关物质。请据图回答下列问题：
（1）图中a表示的生物膜是______________，B代表的物质是_________，其产生的部位是__________。
（2）检测F的试剂是____________，在反应①~④中产生大量能量的是_________。
（3）制作猕猴桃酒时为了适当提高发酵速率， 进气口应______________，图中酒精发酵过程可用_____（填序号）表示。
【答案】（1） ①. 细胞膜 ②. [H]（或NADH或还原型辅酶Ⅰ） ③. 细胞质基质和线粒体基质
（2） ①. （酸性）重铬酸钾（“重铬酸钾”） ②. ③
（3） ①. 先打开后关闭 ②. ①④
【解析】
【分析】有氧呼吸的全过程，可以分为三个阶段：第一个阶段，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，在分解的过程中产生少量的氢(用[H]表示)，同时释放出少量的能量。这个阶段是在细胞质基质中进行的；第二个阶段，丙酮酸经过一系列的反应，分解成二氧化碳和氢，同时释放出少量的能量。这个阶段是在线粒体中进行的；第三个阶段，前两个阶段产生的氢，经过一系列的反应，与氧结合而形成水，同时释放出大量的能量。
【小问1详解】
a是细胞膜，葡萄糖在细胞质基质中被降解成丙酮酸，为有氧呼吸的第一阶段；B代表的物质是[H]，A代表丙酮酸，均是葡萄糖分解的产物，B还能与氧气结合生成水，因此E为氧气，线粒体基质中可以进行有氧呼吸第二阶段（丙酮酸与水生成[H]和CO2），因此B的产生部位有细胞质基质和线粒体基质。
【小问2详解】
④表示无氧呼吸第二阶段，即丙酮酸（A）与[H]（B）反应生产酒精和CO2，由于D在线粒体中也有，因此D代表CO2，因为有氧呼吸第二阶段也能产生CO2，故检测F（酒精）的试剂为酸性重铬酸钾，变成灰绿色；①为有氧呼吸第一阶段，②为有氧呼吸第二阶段，③为有氧呼吸第三阶段，④为无氧呼吸第二阶段，产生大量能量的是③。
【小问3详解】
进气口应先打开后关闭，以使酵母菌先进行有氧呼吸，产生大量能量，有利于其繁殖，形成更多的酵母菌，而后关闭是为了营造无氧条件，使其进行无氧呼吸产生酒精；①④可表示酵母菌无氧呼吸的过程，均在细胞质基质中进行。
27. 淀粉酶在大规模工业生产中有重要作用，但淀粉酶高温下易失活。科学家在热泉中的某嗜热菌中提取了高温淀粉酶。据此回答问题：
（1）淀粉酶在高温下__________遭到破坏，使酶失活。
（2）筛选能产生高温淀粉酶的嗜热菌需要使用________（功能）培养基。该培养基应该以_______为唯一碳源。接种后，细菌若能分解淀粉，培养平板经碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见下表。
在接种和纯化产高温淀粉酶的嗜热菌时，采用的方法是__________。推测，两种细菌中产高温淀粉酶能力更强的是________，理由是___________________。
【答案】（1）空间结构
（2） ①. 选择 ②. 淀粉 ③. 稀释涂布平板法 ④. 细菌Ⅰ ⑤. 细菌Ⅰ的H/C更大，说明每个细菌分解的淀粉越多，可说明该菌产生淀粉酶的能力越强
【解析】
【分析】1、培养基的营养构成：①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、据图示及表格数据分析：图示接种方法为稀释涂布平板法，H/C值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小反映了两种细菌分解淀粉能力的差异，细菌Ⅰ分解淀粉的能力更强。
【小问1详解】
淀粉酶的化学本质是蛋白质，蛋白质在高温下空间结构遭到破坏，使酶失活。
【小问2详解】
为了筛选能产生高温淀粉酶的嗜热菌需要使用选择培养基。该培养基应该以淀粉为唯一碳源，不能以淀粉为碳源的微生物无法在培养基上生存。据图分析，单菌落在培养基上随机均匀分布，推测采用的方法是稀释涂布平板法。H/C值越大，说明每个细菌分解的淀粉越多，可说明该菌产生淀粉酶的能力越强，细菌Ⅰ分解淀粉的能力更强。
28. 长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。
（1）在试管牛E和克隆牛G的培育过程中均用到的现代生物工程技术有______和______。
（2）通过试管动物技术培养发育为早期胚胎后，再经_________产生多个基因型相同的后代．对囊胚进行分割时，要特别注意将___________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
（3）科学家将人体的ɑ-抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，发现克隆牛G的乳汁中含人的ɑ-抗胰蛋白酶，其原因是________________________。
（4）我国禁止生殖性克隆实验，原因是__________________________。（至少写出两点）
【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 胚胎移植
（2） ①. 分割移植/胚胎分割 ②. 内细胞团
（3）克隆牛G的乳腺细胞中含有人的ɑ-抗胰蛋白酶基因，并进行了表达。
（4）克隆人只是某些人出于某种目的制造出的产品，没有父母，可能导致心理上受到伤害；技术问题，可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人；冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理观念等。
【解析】
【分析】分析题图：图示为快速繁殖良种奶牛的两种方法，其中试管牛E的培育采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于无性生殖。
【小问1详解】
试管牛E的培育采用了体外受精、早期胚胎发育和胚胎移植技术，克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎发育和胚胎移植技术，因此试管牛E和克隆牛G的培育过程中都用到了动物细胞培养和胚胎移植技术。
【小问2详解】
来自同一个胚胎的后代具有相同的基因型，因此经胚胎分割移植能产生多个基因型相同的后代．对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
【小问3详解】
将人的α-抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，这样培育形成的克隆牛G的乳腺细胞中含有人的α-抗胰蛋白酶基因，并进行了表达，因此克隆牛G的乳汁中含人的α-抗胰蛋白酶。
【小问4详解】
我国禁止生殖性克隆，主要有以下几个原因：①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的产品，没有父母，严重违反了人类伦理道德；②冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③是在人为地制造心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆技术尚不成熟，可能克隆出有严重生理缺陷的孩子，但利用克隆技术可以用于医疗和弥补器官移植的不足，因此我国并不反对治疗性克隆。
29. 下图是某实验室构建基因表达载体的过程示意图，质粒A0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。据图回答问题：
（1）EcR V酶切位点为，EcR V酶切出来的线性载体A1为______末端。
（2）用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体A1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为________的脱氧核苷酸，形成A2；A2和目的基因片段在________酶作用下，形成基因表达载体A3。
（3）为筛选出含有基因表达载体A3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如表。根据表中结果判断，应选择的菌落是________(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是________________、______________。
注：“＋”代表生长，“－”代表不生长
【答案】（1）平 （2） ①. 胸腺嘧啶(T) ②. DNA连接
（3） ①. B ②. A类菌落含有A0 ③. C类菌落未导入质粒
【解析】
【分析】据图分析：A0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用来检测目的基因是否导入受体细胞；EcRV酶为限制酶，其切割质粒后会破坏了四环素抗性基因（tetr）。
【小问1详解】
限制性核酸内切酶切割DNA可以形成黏性末端或平末端，据EcR V酶切位点分析，EcR V酶切出来的线性载体A1为平末端。
【小问2详解】
分析图1可知，目的基因两侧为黏性末端，且游离出的碱基为A，则在载体A1的两端需要各加一个碱基T，形成具有黏性末端的载体A2，再用DNA连接酶将A2与目的基因连接起来形成重组质粒A3。
【小问3详解】
限制酶切割后破坏了四环素抗性基因，但是没有破坏氨苄青霉素抗性基因，因此含有重组质粒A3的菌落在含有四环素的培养基中不能生长，而在含有氨苄青霉素的培养基中能生长，结合表格分析可知，应该选择C类菌落。根据表格分析，A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长，说明其导入的是A0；B类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长，说明其没有转入任何质粒。
30. PCR可用于扩增并检测DNA，但存在交叉污染或偏差等问题，而新研发的基于CRISPR/Cas12a系统的检测方法，可在低浓度样本中更灵敏，快速识别靶标DNA。该系统利用gRNA介导Cas12a蛋白能准确切割靶标DNA。同时切割荧光底物使其发出荧光，通过检测荧光强度确定靶标DNA含量，利用Cas12a检测靶标DNA的过程如下图所示。回答：
（1）根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时，具有类似_______酶和______________酶的功能；gRNA识别靶标DNA，遵循的是_______原则。
（2）在构建表达Cas12a蛋白的载体时，通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内，使lacZ基因失活，从而失去催化无色底物显色的能力，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。理论上通过含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养，不能筛选到含有Cas12a基因表达载体的工程菌，判断的依据是______________。
（3）荧光检测时，60分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是______________。
（4）实验研究时，增加NTC组作对照的作用是_______；g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA，原因是_______。
【答案】（1） ①. 限制 ②. 解旋 ③. 碱基互补配对
（2）使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落，无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应
（3）Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同
（4） ①. 排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光 ②. g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定；
2、基因工程的三种工具：限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体；
3、标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
【小问1详解】
根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时，可以切割靶标DNA，并能解开靶标DNA，使其与g-3和g-7结合，所以Cas12a具有类似限制酶和解旋酶的功能；gRNA识别靶标DNA，遵循的是碱基互补配对原则。
【小问2详解】
在构建表达Cas12a蛋白的载体时，通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内，使lacZ基因失活，从而失去催化无色底物显色的能力，而使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落，无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应。
【小问3详解】
荧光检测时，60分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同。
【小问4详解】
实验研究时，增加NTC组作对照的作用是排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光；g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA，原因是g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用。菌种
菌落直C(mm)
透明圈直径H(mm)
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
平板类型
菌落类型
无抗生素
四环素
氨苄青霉素
氨苄青霉素＋四环素
A
＋
＋
＋
＋
B
＋
－
＋
－
C
＋
－
－
－
考试时间共75分钟，满分100分
注意事项：
1.答题前，考生务必在答题卡上将自己的学校、姓名、班级、准考证号用0.5毫米黑色签字笔填写清楚，考生考试条码由监考老师粘贴在答题卡上的“条码粘贴处”。
2.选择题使用2B铅笔填涂在答题卡上对应题目标号的位置上，如需改动，用橡皮擦擦干净后再填涂其它答案；非选择题用0.5毫米黑色签字笔在答题卡的对应区域内作答，超出答题区域答题的答案无效；在草稿纸上、试卷上答题无效。
3.考试结束后由监考老师将答题卡收回。
一、选择题：本题共25小题，1~10题，每小题1分；11~25题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1. 下列关于泡菜制作的叙述错误的是（ ）
A. 盐水煮沸冷却后再入坛
B. 应选择新鲜的蔬菜入坛
C. 泡菜坛应尽量装满蔬菜
D. 泡菜坛应一直保持密封
【答案】C
【解析】
【分析】制作泡菜的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、盐水煮沸冷却后再入坛可以避免杂菌污染，A正确；
B、蔬菜作为发酵的原材料，应新鲜，B正确；
C、泡菜应装八成满，若装满易染杂菌，C错误；
D、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要是为乳酸菌的生长繁殖创造无氧条件，D正确。
故选C。
2. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，下列相关操作叙述错误的是（ ）
A. 涂布器可以采用酒精引燃方式灭菌
B. 煮沸消毒可以杀死物体部分微生物
C. 接种环在使用前后都需要灼烧灭菌
D. 接种前需对实验者的双手进行灭菌
【答案】D
【解析】
【分析】1、无菌技术的主要内容：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②特用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免己经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2、实验室常用的消毒方法：煮沸消毒：化学药物消毒：紫外线消毒；实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌。
【详解】A、涂布器使用前放置在70%酒精中，可以采用酒精引燃方式进行灼烧灭菌，A正确；
B、煮沸消毒是利用高温杀死一部分微生物，B正确；
C、接种环在使用前后都需要灼烧灭菌，防止杂菌污染，也易获得单菌落，C正确；
D、接种前需要对培养基、培养皿进行灭菌，对实验操作者的双手进行消毒，D错误。
故选D。
3. 关于微生物的选择培养与数量测定，叙述正确的是（ ）
A. 平板划线和稀释涂布平板均可计数微生物
B. 筛选尿素分解菌可以蛋白胨作为唯一氮源
C. 同一稀释度下以30～300范围内的平板计数
D. 显微镜直接计数的统计结果比实际活菌数低
【答案】C
【解析】
【分析】测定培养液中微生物的数目，可采用显微镜直接计数(或血细胞计数板计数)法对培养液中的微生物直接计数，也可用稀释涂布平板法将微生物接种于灭菌后的固体培养基上，培养一段时间后，通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目。由于采用第一种方法计数时不能剔除死菌，因此统计的结果往往偏大；而采用第二种方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以第一种方法统计的数目比实际活菌数目高，第二种方法统计的数目比实际活菌数目低。
【详解】A、平板划线不能计数微生物，稀释涂布平板可计数微生物，A错误；
B、筛选尿素分解菌可以尿素作为唯一氮源，B错误；
C、2个或2个以上平板上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C正确；
D、显微镜直接计数计数时不能剔除死菌，所以统计结果比实际活菌数高，D错误。
故选C。
4. 下列关于ATP叙述错误的是（ ）
A. ATP是由一分子腺苷和三分子磷酸组成
B. 许多放能反应总是与ATP的合成相联系
C. 催化ATP水解和ATP合成的酶不是同种酶
D. 有氧呼吸和无氧呼吸每个阶段都产生ATP
【答案】D
【解析】
【分析】ATP的结构简式中，A代表腺苷，P代表磷酸，-代表普通磷酸键，～代表特殊化学键。ATP中有3个磷酸，2个特殊化学键，且2个特殊化学键为远离腺苷的磷酸之间。
【详解】A、ATP是由一分子腺苷和三分子磷酸组成，A正确；
B、许多放能反应总是与ATP的合成相联系，例如细胞呼吸，B正确；
C、催化ATP水解的酶是ATP水解酶，催化ATP合成的酶是ATP合成酶，两者不是同种酶，C正确；
D、有氧呼吸三个阶段都产生ATP，无氧呼吸第一阶段产生ATP，第二阶段不产生ATP，D错误。
故选D。
5. 顺乌头酸酶和苹果酸脱氢酶是两种参与催化有氧呼吸相关的酶，下列关于两种酶叙述正确的是（ ）
A. 反应结束后均立即失活
B. 合成的场所都是线粒体
C. 都能降低反应的活化能
D. 在不同细胞中的含量相同
【答案】C
【解析】
【分析】酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数是蛋白质，少数是RNA。酶具有专一性、高效性、易受环境因素影响等特点。
【详解】A、酶可以重复利用，反应结束后不会失活，A错误；
B、绝大多数的酶是蛋白质，合成场所是核糖体，少数酶是RNA，可以来源于细胞核等处，B错误；
C、无论是顺乌头酸酶和苹果酸脱氢酶，都具有降低反应的活化能，从而加快化学反应的速度，C正确；
D、酶在不同细胞中含量不相同，D错误。
故选C。
6. 下列关于动物细胞培养过程的顺序是（ ）
①传代培养②胰蛋白酶等处理组织，形成分散细胞③原代培养
A. ①②③B. ③①②C. ②③①D. ①③②
【答案】C
【解析】
【分析】人们常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程常称为传代培养。
【详解】动物细胞培养时，首先从动物机体取出相关的组织，用胰蛋白酶处理制成细胞悬液；再将细胞悬液接入培养瓶中，进行原代培养；贴满瓶壁的细胞再用胰蛋白酶处理，再分瓶进行传代培养。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
7. 下列有关人在剧烈运动和安静状态下的能量供应叙述正确的是（ ）
A. 剧烈运动时，ATP水解加快，ATP合成减慢
B. 两种状态下都是以ATP为主要的储能物质
C. 两种状态下ATP与ADP相互转化都在发生
D. 剧烈运动时，ATP合成所需能量由磷酸提供
【答案】C
【解析】
【分析】ATP的结构简式是A-P～P～P，其中A代表腺苷，T是三的意思，P代表磷酸基团。合成ATP的能量来自呼吸作用或光合作用。
【详解】A、剧烈运动时，由于需要更多的ATP提供能量，因此ATP水解加快，ATP合成也加快，A错误；
B、ATP是直接能源物质，不是储能物质，B错误；
C、两种状态下都需要ATP可供能量，因此ATP与ADP相互转化都在发生，C正确；
D、合成ATP所需的能量来自有机物氧化分解释放的能量，D错误。
故选C。
8. 下列有关传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A. 酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精不一定越多
B. 传统发酵技术中利用的微生物一般为天然存在的单一菌种
C. 腐乳制作主要利用毛霉代谢来分解豆腐中蛋白质等物质
D. 酸奶制作和泡菜制作均需要利用厌氧型微生物—乳酸菌
【答案】B
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解产生二氧化碳和水，释放能量，酵母菌大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌无氧呼吸，将葡萄糖分解成二氧化碳和酒精。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶将脂肪分解为甘油和脂肪酸。
【详解】A、酒精发酵过程中，随着发酵时间延长，酒精逐渐积累，酵母菌的生命活动被抑制，酒精含量不会一直增多，A正确；
B、传统发酵技术中利用的微生物一般为天然菌种，但大多都含有多种菌种，B错误；
C、腐乳制作主要利用毛霉代谢产生蛋白酶和脂肪酶来分解豆腐中的蛋白质和脂肪等物质，将其分解成氨基酸、小分子肽、甘油和脂肪酸等物质，C正确；
D、酸奶制作和泡菜制作利用的菌种为乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型，D正确。
故选B。
9. 下列关于植物体细胞杂交技术的叙述错误的是（ ）
A. 该技术打破生殖隔离，实现远缘杂交
B. 可用灭活病毒诱导植物体细胞融合
C. 再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志
D. 可用酶解法获得植物细胞的原生质体
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
【详解】A、不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍，A正确；
B、分离出有活性的原生质体后，要用化学法或物理法诱导原生质体的融合，灭活病毒只能诱导动物细胞融合，B错误；
C、杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，C正确；
D、进行植物的体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，D正确。
故选B。
10. 下列有关发酵工程基本环节的叙述正确的是（ ）
A. 发酵过程中不需要向发酵罐中添加营养组分
B. 优良菌种只能通过诱变育种或基因工程得到
C. 菌种、培养基和发酵设备均需要严格的灭菌
D. 通过分离和纯化措施获得代谢物类发酵产品
【答案】D
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、发酵过程中需要向发酵罐中添加营养组分，用于微生物的发酵原料，A错误；
B、优良菌种可以通过诱变育种或基因工程得到，也可以通过从自然界中筛选获得，B错误；
C、菌种不需要严格的灭菌，因为要保证菌种的活性，C错误；
D、微生物发酵后可以通过分离和纯化措施获得代谢物类发酵产品，D正确。
故选D。
11. 关于蛋白质工程应用的说法，错误的是（ ）
A. 对基因结构的定点突变实现玉米赖氨酸合成的关键酶结构的改变属于蛋白质工程
B. 将人胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，大肠杆菌产生胰岛素的技术属于蛋白质工程
C. 通过对基因结构的改造生产出自然界中从来不存在的蛋白质种类目前还很少
D. 依据蛋白质的功能对其结构进行设计改造，最终必须通过改造或合成基因来完成
【答案】B
【解析】
【分析】1、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
2、目前，蛋白质工程成功的例子不多，因为蛋白质的功能必须依赖于正确的高级结构，而科学家对大多数蛋白质的高级结构的了解还很不够，要设计出更加符合人们需要的蛋白质还需要艰辛的探索。
【详解】A、蛋白质工程可通过改造基因来实现对蛋白质分子结构的定向改造，使之更加符合人类需要，故通过对基因结构的定点突变实现玉米赖氨酸合成的关键酶结构的改变属于蛋白质工程，A正确；
B、将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌产生胰岛素的技术属于基因工程，B错误；
C、目前，蛋白质工程成功的例子不多，主要是人们对蛋白质的结构了解的还很不够，所以通过对基因结构的改造生产出自然界中从来不存在的蛋白质种类目前还很少，C正确；
D、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，因此依据蛋白质的功能对其结构进行设计改造，最终必须通过改造或合成基因来完成，D正确。
故选B。
12. 下图是“白菜-甘蓝”培育过程示意图，下列相关叙述中错误的是（ ）
A. 该过程涉及植物细胞融合和植物组织培养技术
B. 整个培育过程中培养基的成分和含量保持不变
C. 白菜-甘蓝植株具有白菜和甘蓝两个物种的遗传物质
D. 白菜-甘蓝植株并不会表达出白菜和甘蓝所有的性状
【答案】B
【解析】
【分析】据图分析，a为原生质体融合，b为原生质体融合后再生细胞壁获得杂种细胞，c是杂种细胞脱分化形成愈伤组织，d是愈伤组织分裂、再分化形成植株。
【详解】A、a为原生质体融合，c、d为植物组织培养，因此图示过程涉及植物细胞融合和植物组织培养技术，A正确；
B、植物组织培养的不同阶段生长素和细胞分裂素的配比不同，其它成分也有一定的差异，B错误；
C、白菜-甘蓝植株是两种植物体细胞融合的结果，因此具有白菜和甘蓝两个物种的遗传物质，C正确；
D、由于细胞融合过程中会有部分染色体丢失，因此白菜-甘蓝植株并不会表达出白菜和甘蓝所有的性状，D正确。
故选B。
13. 下列有关现代生物技术的叙述错误的是（ ）
A. 在动物细胞培养液中添加一定量的抗生素以防止杂菌污染
B. 动物细胞培养过程中分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制
C. 动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持培养液中的pH
D. 转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲合的障碍
【答案】D
【解析】
【分析】动物细胞的生长和增殖需要充足的营养物质。培养动物细胞的培养基通常为液体培养基，其基本成分包括水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。体外培养的动物细胞往往具有贴附生长和接触抑制等特点。
【详解】A、为了防止杂菌的污染，在动物细胞培养液中常添加一定量的抗生素，A正确；
B、动物细胞在培养过程中由于细胞密度过大，因而会发生接触抑制的现象，分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制，B正确；
C、动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持并调节培养液中的pH，C正确；
D、克隆羊多利的培育是无性生殖，不能说明克服了远缘杂交不亲合的障碍，D错误。
故选D。
14. 下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交的叙述错误的是（ ）
A. 均体现出细胞膜具有流动性
B. 融合前均需要用酶解法处理
C. 所用到的技术手段完全相同
D. 诱导融合的方法不完全相同
【答案】C
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：（1）将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程分析：①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。2、动物细胞融合技术：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。
【详解】A、植物体细胞杂交（其中的原生质体融合）和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性，A正确；
B、植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁，然后才能诱导原生质体融合，用胰蛋白酶处理动物组织，使其分散成单个细胞，再进行细胞融合，B正确；
C、植物体细胞杂交用到了原生质体融合和植物组织培养技术，而动物细胞融合只用到了细胞融合技术，C错误；
D、诱导原生质体融合的方法物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法：物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇（PEG））和生物法（灭活的病毒），诱导融合的物理法和化学法相同，D正确。
故选C。
15. 关于动物细胞培养和胚胎工程的叙述错误的是（ ）
A. 动物细胞培养需在培养液中加入动物血清和维生素等
B. 胚胎工程的操作对象也能是生殖细胞或早期胚胎细胞
C. 胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精等技术
D. 桑葚胚和原肠胚是进行胚胎分割最佳时期
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序．胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术。
【详解】A、为尽量模拟体内环境，动物细胞培养需在培养液中加入动物血清和维生素等，以提高动物细胞培养成功率，A正确；
B、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，操作对象也能是生殖细胞或早期胚胎细胞，B正确；
C、胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎体外培养等技术，C正确；
D、胚胎移植的最晚时期是囊胚期，胚胎切割完仍需进行胚胎移植，因此不能选择原肠胚进行胚胎分割，D错误。
故选D。
16. 下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述错误的是（ ）
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也是该微生物的能源物质
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
【答案】B
【解析】
【分析】自养微生物与异养微生物类型的划分主要是依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一的碳源； CO2不能为生物提供能量，不属于能源物质； 微生物的营养：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子、其他条件。
【详解】A、氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；
B、该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；
C、无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，C正确；
D、微生物的营养元素包括碳源、氮源、水和无机盐，其中水是该微生物的营养要素之一，D正确。
故选B。
17. 下列有关利用转基因山羊乳腺生物反应器生产抗凝血酶药剂叙述错误的是（ ）
A. 基因表达载体应包含山羊乳腺特异表达的基因的启动子
B. 通过显微注射法将基因表达载体导入山羊的乳腺细胞
C. 山羊乳腺细胞将肽链加工成一定空间结构的抗凝血酶
D. 通过体细胞克隆技术可将抗凝血酶基因传递给克隆后代
【答案】B
【解析】
【分析】将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合在一起，通过显微注射的方法注入受精卵，将受精卵送入母体，成为转基因动物，动物进入泌乳期后，可通过分泌乳汁来生产药物，称为乳腺生物反应器。
【详解】A、在构建基因表达载体时需要山羊乳腺特异表达的基因的启动子，使目的基因只在乳腺细胞中表达，A正确；
B、通过显微注射法将基因表达载体导入山羊的受精卵，因为受精卵具有全能性，B错误；
C、山羊乳腺细胞中的内质网和高尔基体可以将肽链加工成一定空间结构的抗凝血酶，C正确；
D、通过体细胞克隆技术可以使后代具备抗凝血酶基因，从而将抗凝血酶基因传递给克隆后代，D正确。
故选B。
18. 关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（ ）
A. 正常小鼠注射特定抗原后能产生特定类型的B淋巴细胞
B. 可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合
C. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞即为杂交瘤细胞
D. 杂交瘤细胞的优点是既能迅速大量增殖又能产生特定抗体
【答案】C
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、应向小鼠体内反复注入特定抗原，使小鼠产生相应的免疫B淋巴细胞，A正确；
B、可用聚乙二醇或灭活的病毒或电刺激诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，B正确；
C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞，也有B细胞与B细胞的融合体，也有骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合体，C错误；
D、B细胞可以产生抗体，骨髓瘤可以无限增殖，融合成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生特定抗体，D正确。
故选C。
19. 一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌，进行了如图所示的实验。下列说法错误的是（ ）
A. 图示所用培养基是以PP作为唯一碳源的选择培养基
B. 图示所用接种方法分别为稀释涂布平板法，需要在酒精灯火焰旁进行
C. 在三个平板滴加0.1ml的稀释液，经适当培养后平板上菌落数分别是75、76、77，则1g土壤中活菌数约为7.6×107
D. 用稀释涂布平板法进行微生物数量统计一般比实际值偏低
【答案】C
【解析】
【分析】1、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
2、计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。计算公式：每克样品中的菌株数＝(c÷V)×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
【详解】A、聚丙烯纤维(PP)是一种含碳有机物，为了从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌，因此图示所用培养基是以PP作为唯一碳源的选择培养基，A正确；
B、据图分析，微生物分离时需要梯度稀释，故图示所用接种方法分别为稀释涂布平板法，需要在酒精灯火焰旁进行，B正确；
C、在三个平板滴加0.1ml的稀释液，经适当培养后平板上菌落数分别是75、76、77，则1g土壤中活菌数[(75+76+77)÷3]÷0.1×105=7.6×107，则1g土壤中能高效降解聚丙烯纤维(PP)活菌数约为约为7.6×107，C错误；
D、由于一个菌落可能是由2个或多个细菌形成的，因此用稀释涂布平板法进行微生物数量统计一般比实际值偏低，D正确。
故选C。
20. 三亲婴儿技术是一种辅助生殖技术，旨在帮助那些有线粒体疾病风险的女性生育健康的孩子。其培育过程如图，下列叙述错误的是（ ）
A. 卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 供体精子需获能后才能与卵母细胞发生受精作用
C. 该技术可避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。
【详解】A、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，A正确；
B、供体精子需经过体外获能处理后才能与卵母细胞发生受精作用，B正确；
C、母亲为“三亲婴儿“提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，C正确；
D、三亲婴儿来源于精子和卵母细胞结合形成的受精卵，属于有性生殖，D错误。
故选D。
21. 某实验小组用如图所示的质粒和目的基因的片段来构建基因表达载体(图中标注了相关限制酶切割位点)，再将其导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。下列步骤描述错误的是（ ）
A. 构建基因表达载体的过程应选用BclⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶
B. 使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组
C. 能在四环素的培养基上生存一定是含有基因表达载体的大肠杆菌
D. 利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙
【答案】C
【解析】
【分析】根据质粒的特点确定限制酶的种类1、所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。2、质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
【详解】A、选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；
B、酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接，构建重组载体，B正确；
C、能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；
D、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。
故选C。
22. 科学家将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合制成了抗体-药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. ADC技术中抗体的主要作用是识别并特异性结合癌细胞表面的抗原
B. ADC技术中的抗体与抗原结合后，药物通过胞吞作用进入细胞
C. ADC技术用于提高药物治疗的选择性和降低药物带来的副作用
D. 肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新蛋白质
【答案】D
【解析】
【分析】识图分析可知，图中抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，利用抗体与抗原的特异性结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。图中ADC的作用机制为：携带药物的抗体与肿瘤细胞膜上的特异性受体结合，然后通过胞吞作用进入到细胞内，抗体被细胞内的溶酶体裂解，释放出药物作用于肿瘤细胞，使肿瘤细胞凋亡。
【详解】A、据图分析，ADC技术中抗体的主要作用是特异性识别并结合癌细胞表面的抗原，从而将药物带进细胞，A正确；
B、据图分析，ADC技术中的抗体与抗原结合后，细胞膜向内凹陷，药物通过胞吞作用进入细胞，B正确；
C、ADC技术可以通过抗体和肿瘤细胞表面的抗原特异性结合，从而将药物精准的带入肿瘤细胞中，提高药物治疗的选择性和降低药物带来的副作用，C正确；
D、肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，细胞凋亡过程中基因进行选择性表达，因此会产生新蛋白质，D错误。
故选D。
23. 下图是对基因型AaBb的玉米所做的相关处理的过程图，下列叙述正确的是（ ）
A. 过程a采用的技术手段是花药离体培养
B. 过程c能说明植物体细胞具有全能性
C. c和d过程分别表示再分化和脱分化过程
D. 过程b经染色体加倍后可得到2种基因型植株
【答案】A
【解析】
【分析】细胞全能性是指单个植物细胞发育成完整的个体的能力。
【详解】A、过程a由花粉粒变为单倍体植株，所采取的技术手段是花药离体培养，A正确；
B、细胞全能性是指单个植物细胞发育成完整的个体的能力，过程c是叶肉细胞脱分化形成愈伤组织的过程，没有发育成完整个体，不能体现全能性，B错误；
C、c是叶肉细胞培养成为愈伤组织的过程，是脱分化过程，d是愈伤组织形成胚状体的过程，表示再分化，C错误；
D、、基因型为AaBb的玉米能产生AB、Ab、aB和ab这四种配子，经花药离体培养后可得到四种单倍体幼苗，经秋水仙素处理后，能得到AABB、AAbb、aaBB和aabb4种可育的植株，D错误。
故选A。
24. 细胞呼吸的原理广泛应用于生产生活中，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 过期的酸奶胀袋是由于乳酸菌无氧呼吸产生气体导致的
B. 低温低氧环境中储存蔬菜水果有利于降低有机物的消耗
C. 传统发酵制作果酒的原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精
D. 中耕松土能提高作物根系的呼吸作用，有利于植物的生长
【答案】A
【解析】
【分析】1.有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。2.无氧呼吸的场所是细胞质基质，无氧呼吸的第一阶段和有氧呼吸的第一阶段相同。无氧呼吸由于不同生物体中相关的酶不同，在植物细胞和酵母菌中产生酒精和二氧化碳，在动物细胞和乳酸菌中产生乳酸。
【详解】A、乳酸发酵是厌氧发酵，产物只有乳酸，没有气体产生，A错误；
B、低温、低氧环境储藏果实，能降低酶的活性，进而降低细胞呼吸速率，减少果实、蔬菜中有机物的消耗，B正确；
C、酿造果酒时，酵母菌先进行有氧呼吸产生大量的能量进而可以满足大量繁殖对能量的需求，此后随着密闭容器中氧气的减少进行无氧呼吸产生酒精，所以传统发酵制作果酒的原理是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，C正确；
D、中耕松土、适时排水能为根系提供更多O2，促进根细胞进行有氧呼吸，有利于根吸收无机盐，D正确。
故选D。
25. 有关不同年龄的福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性的研究如下，下列叙述错误的是（ ）
A. 本实验的自变量有年龄和生物种类
B. 推测田螺具有更强的消化能力
C. 推测福寿螺具有更强的生存能力
D. 结果表明纤维素酶活性与年龄有关
【答案】B
【解析】
【分析】本实验的自变量为年龄和螺的种类，因变量为两种螺体内纤维素酶活性。
【详解】A、本实验探究的是不同年龄的福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性，所以本实验的自变量有年龄和生物种类，A正确；
BC、据图可知，在相同的年龄组，都是福寿螺的胃中纤维素酶活性高，所以可推测福寿螺具有更强的消化能力，推测福寿螺具有更强的生存能力，B错误，C正确；
D、随着年龄的改变，福寿螺和田螺胃中纤维素酶活性发生改变，所以结果表明纤维素酶活性与年龄有关，D正确。
故选B。
二、非选择题：共60分。
26. 四川省都江堰市盛产猕猴桃，利用酵母菌制作的猕猴桃酒外观晶莹透亮，滋味醇香，营养价值较高。下图是制作猕猴桃酒过程中酵母细胞中发生的一系列反应。其中a、b代表两种生物膜，①~④表示反应过程，A~F表示相关物质。请据图回答下列问题：
（1）图中a表示的生物膜是______________，B代表的物质是_________，其产生的部位是__________。
（2）检测F的试剂是____________，在反应①~④中产生大量能量的是_________。
（3）制作猕猴桃酒时为了适当提高发酵速率， 进气口应______________，图中酒精发酵过程可用_____（填序号）表示。
【答案】（1） ①. 细胞膜 ②. [H]（或NADH或还原型辅酶Ⅰ） ③. 细胞质基质和线粒体基质
（2） ①. （酸性）重铬酸钾（“重铬酸钾”） ②. ③
（3） ①. 先打开后关闭 ②. ①④
【解析】
【分析】有氧呼吸的全过程，可以分为三个阶段：第一个阶段，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，在分解的过程中产生少量的氢(用[H]表示)，同时释放出少量的能量。这个阶段是在细胞质基质中进行的；第二个阶段，丙酮酸经过一系列的反应，分解成二氧化碳和氢，同时释放出少量的能量。这个阶段是在线粒体中进行的；第三个阶段，前两个阶段产生的氢，经过一系列的反应，与氧结合而形成水，同时释放出大量的能量。
【小问1详解】
a是细胞膜，葡萄糖在细胞质基质中被降解成丙酮酸，为有氧呼吸的第一阶段；B代表的物质是[H]，A代表丙酮酸，均是葡萄糖分解的产物，B还能与氧气结合生成水，因此E为氧气，线粒体基质中可以进行有氧呼吸第二阶段（丙酮酸与水生成[H]和CO2），因此B的产生部位有细胞质基质和线粒体基质。
【小问2详解】
④表示无氧呼吸第二阶段，即丙酮酸（A）与[H]（B）反应生产酒精和CO2，由于D在线粒体中也有，因此D代表CO2，因为有氧呼吸第二阶段也能产生CO2，故检测F（酒精）的试剂为酸性重铬酸钾，变成灰绿色；①为有氧呼吸第一阶段，②为有氧呼吸第二阶段，③为有氧呼吸第三阶段，④为无氧呼吸第二阶段，产生大量能量的是③。
【小问3详解】
进气口应先打开后关闭，以使酵母菌先进行有氧呼吸，产生大量能量，有利于其繁殖，形成更多的酵母菌，而后关闭是为了营造无氧条件，使其进行无氧呼吸产生酒精；①④可表示酵母菌无氧呼吸的过程，均在细胞质基质中进行。
27. 淀粉酶在大规模工业生产中有重要作用，但淀粉酶高温下易失活。科学家在热泉中的某嗜热菌中提取了高温淀粉酶。据此回答问题：
（1）淀粉酶在高温下__________遭到破坏，使酶失活。
（2）筛选能产生高温淀粉酶的嗜热菌需要使用________（功能）培养基。该培养基应该以_______为唯一碳源。接种后，细菌若能分解淀粉，培养平板经碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见下表。
在接种和纯化产高温淀粉酶的嗜热菌时，采用的方法是__________。推测，两种细菌中产高温淀粉酶能力更强的是________，理由是___________________。
【答案】（1）空间结构
（2） ①. 选择 ②. 淀粉 ③. 稀释涂布平板法 ④. 细菌Ⅰ ⑤. 细菌Ⅰ的H/C更大，说明每个细菌分解的淀粉越多，可说明该菌产生淀粉酶的能力越强
【解析】
【分析】1、培养基的营养构成：①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、据图示及表格数据分析：图示接种方法为稀释涂布平板法，H/C值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小反映了两种细菌分解淀粉能力的差异，细菌Ⅰ分解淀粉的能力更强。
【小问1详解】
淀粉酶的化学本质是蛋白质，蛋白质在高温下空间结构遭到破坏，使酶失活。
【小问2详解】
为了筛选能产生高温淀粉酶的嗜热菌需要使用选择培养基。该培养基应该以淀粉为唯一碳源，不能以淀粉为碳源的微生物无法在培养基上生存。据图分析，单菌落在培养基上随机均匀分布，推测采用的方法是稀释涂布平板法。H/C值越大，说明每个细菌分解的淀粉越多，可说明该菌产生淀粉酶的能力越强，细菌Ⅰ分解淀粉的能力更强。
28. 长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。
（1）在试管牛E和克隆牛G的培育过程中均用到的现代生物工程技术有______和______。
（2）通过试管动物技术培养发育为早期胚胎后，再经_________产生多个基因型相同的后代．对囊胚进行分割时，要特别注意将___________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
（3）科学家将人体的ɑ-抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，发现克隆牛G的乳汁中含人的ɑ-抗胰蛋白酶，其原因是________________________。
（4）我国禁止生殖性克隆实验，原因是__________________________。（至少写出两点）
【答案】（1） ①. 动物细胞培养 ②. 胚胎移植
（2） ①. 分割移植/胚胎分割 ②. 内细胞团
（3）克隆牛G的乳腺细胞中含有人的ɑ-抗胰蛋白酶基因，并进行了表达。
（4）克隆人只是某些人出于某种目的制造出的产品，没有父母，可能导致心理上受到伤害；技术问题，可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人；冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理观念等。
【解析】
【分析】分析题图：图示为快速繁殖良种奶牛的两种方法，其中试管牛E的培育采用了体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于无性生殖。
【小问1详解】
试管牛E的培育采用了体外受精、早期胚胎发育和胚胎移植技术，克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎发育和胚胎移植技术，因此试管牛E和克隆牛G的培育过程中都用到了动物细胞培养和胚胎移植技术。
【小问2详解】
来自同一个胚胎的后代具有相同的基因型，因此经胚胎分割移植能产生多个基因型相同的后代．对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
【小问3详解】
将人的α-抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，这样培育形成的克隆牛G的乳腺细胞中含有人的α-抗胰蛋白酶基因，并进行了表达，因此克隆牛G的乳汁中含人的α-抗胰蛋白酶。
【小问4详解】
我国禁止生殖性克隆，主要有以下几个原因：①克隆人只是某些人出于某种目的制造出的产品，没有父母，严重违反了人类伦理道德；②冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③是在人为地制造心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆技术尚不成熟，可能克隆出有严重生理缺陷的孩子，但利用克隆技术可以用于医疗和弥补器官移植的不足，因此我国并不反对治疗性克隆。
29. 下图是某实验室构建基因表达载体的过程示意图，质粒A0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。据图回答问题：
（1）EcR V酶切位点为，EcR V酶切出来的线性载体A1为______末端。
（2）用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体A1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为________的脱氧核苷酸，形成A2；A2和目的基因片段在________酶作用下，形成基因表达载体A3。
（3）为筛选出含有基因表达载体A3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如表。根据表中结果判断，应选择的菌落是________(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是________________、______________。
注：“＋”代表生长，“－”代表不生长
【答案】（1）平 （2） ①. 胸腺嘧啶(T) ②. DNA连接
（3） ①. B ②. A类菌落含有A0 ③. C类菌落未导入质粒
【解析】
【分析】据图分析：A0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用来检测目的基因是否导入受体细胞；EcRV酶为限制酶，其切割质粒后会破坏了四环素抗性基因（tetr）。
【小问1详解】
限制性核酸内切酶切割DNA可以形成黏性末端或平末端，据EcR V酶切位点分析，EcR V酶切出来的线性载体A1为平末端。
【小问2详解】
分析图1可知，目的基因两侧为黏性末端，且游离出的碱基为A，则在载体A1的两端需要各加一个碱基T，形成具有黏性末端的载体A2，再用DNA连接酶将A2与目的基因连接起来形成重组质粒A3。
【小问3详解】
限制酶切割后破坏了四环素抗性基因，但是没有破坏氨苄青霉素抗性基因，因此含有重组质粒A3的菌落在含有四环素的培养基中不能生长，而在含有氨苄青霉素的培养基中能生长，结合表格分析可知，应该选择C类菌落。根据表格分析，A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长，说明其导入的是A0；B类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长，说明其没有转入任何质粒。
30. PCR可用于扩增并检测DNA，但存在交叉污染或偏差等问题，而新研发的基于CRISPR/Cas12a系统的检测方法，可在低浓度样本中更灵敏，快速识别靶标DNA。该系统利用gRNA介导Cas12a蛋白能准确切割靶标DNA。同时切割荧光底物使其发出荧光，通过检测荧光强度确定靶标DNA含量，利用Cas12a检测靶标DNA的过程如下图所示。回答：
（1）根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时，具有类似_______酶和______________酶的功能；gRNA识别靶标DNA，遵循的是_______原则。
（2）在构建表达Cas12a蛋白的载体时，通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内，使lacZ基因失活，从而失去催化无色底物显色的能力，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。理论上通过含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养，不能筛选到含有Cas12a基因表达载体的工程菌，判断的依据是______________。
（3）荧光检测时，60分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是______________。
（4）实验研究时，增加NTC组作对照的作用是_______；g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA，原因是_______。
【答案】（1） ①. 限制 ②. 解旋 ③. 碱基互补配对
（2）使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落，无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应
（3）Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同
（4） ①. 排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光 ②. g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定；
2、基因工程的三种工具：限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体；
3、标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
【小问1详解】
根据图中信息可推测Cas12a作用于靶标DNA时，可以切割靶标DNA，并能解开靶标DNA，使其与g-3和g-7结合，所以Cas12a具有类似限制酶和解旋酶的功能；gRNA识别靶标DNA，遵循的是碱基互补配对原则。
【小问2详解】
在构建表达Cas12a蛋白的载体时，通常是将Cas12a基因插入到lacZ基因内，使lacZ基因失活，从而失去催化无色底物显色的能力，而使用的培养基中不含无色底物，所以在含氨苄青霉素且不含无色底物的对应培养基培养上长出的菌落，无论Cas12a基因是否成功导入都不会出现显色反应。
【小问3详解】
荧光检测时，60分钟后三组荧光信号强度达到一致，原因是Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光的物质含量相同。
【小问4详解】
实验研究时，增加NTC组作对照的作用是排除其他物质介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光；g-3+g-7组可更快检测出靶标DNA，原因是g-3+g-7组在介导Cas12a蛋白切割荧光底物使其发出荧光方面具有协同作用。菌种
菌落直C(mm)
透明圈直径H(mm)
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
平板类型
菌落类型
无抗生素
四环素
氨苄青霉素
氨苄青霉素＋四环素
A
＋
＋
＋
＋
B
＋
－
＋
－
C
＋
－
－
－
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