2023版新教材高中生物第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用课时作业新人教版选择性必修3

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第2节　微生物的培养技术及应用一　微生物的基本培养技术1.对微生物所需营养物质的描述，正确的是(　　)A．氮源只作为合成蛋白质的原料B．碳源只作为能源物质C．无机盐可有可无D．水是重要的营养要素之一2．下面是牛肉膏蛋白胨培养基的成分表，其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供(　　)A.碳源B．氮源C.维生素D．包括A、B、C三项3．对微生物所需营养物质的描述，正确的是(　　)A.蛋白质通常是作为碳源B.葡萄糖可作为氮源C.维生素可通过组织提取液提供D.必须添加琼脂后营养物质才能被利用4．关于培养基的配制，下列叙述错误的是(　　)A.在配制培养乳酸菌的培养基时，需加入维生素B.微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC.在液体培养基中加入琼脂可以制成固体培养基D.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例5．[2023·浙江高二校联考期中]凡是微生物生长、繁殖等各种生理活动所需的物质统称为微生物营养物质。下列叙述正确的是(　　)A.所有的碳源都能提供能量B.无机物不能作为碳源或氮源C.同一物质可能既作为碳源又作为氮源D.任何培养基都必须含有水、无机盐、碳源和氮源6．[2023·四川绵阳高二统考期末]人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养物质——培养基，下列有关培养基的叙述，错误的是(　　)A.液体培养基要制成固体培养基，可在培养基中加入琼脂B.细菌在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落C.每种培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质D.培养基还需满足微生物对pH、特殊营养物质及O2的需求7.[2023·江苏淮安高二校考]无菌技术是发酵工程的重要技术。使用的接种针、接种环，最好采用的灭菌方法是(　　)A．紫外线等射线灭菌法B．干热空气灭菌法C．湿热灭菌法D．火焰灼烧灭菌法8．高压蒸汽灭菌锅是一种常用的灭菌设备，其灭菌原理是利用高温高压条件导致(　　)A．菌体和芽孢都存活B．菌体死亡但芽孢存活C．菌体和芽孢都死亡D．菌体存活但芽孢死亡9．[2023·河南商丘一中校考]微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的有几项(　　)①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢　②接种操作要在酒精灯火焰附近进行　③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌　④培养基要进行湿热灭菌　⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌A．一项B．二项C．三项D．四项10.[2023·江苏淮安高二校考]将微生物接入培养基的操作过程称为接种。下列是关于接种方法的叙述，错误的是(　　)A．用涂布器可进行平板稀释涂布接种B．用接种针可进行穿刺接种C．用接种环在平板培养基上划线接种D．用接种针在试管里做斜面接种11．[2023·山东济宁高二校考]下列有关平板划线法操作的叙述，错误的是(　　)A．将接种环放在酒精灯火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C．蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行D．接种环划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连12．[2023·江苏淮安高二校考]下图是采用平板划线法划线后的示意图。下列有关说法错误的是(　　)A．划线前，应在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号B．在培养基表面连续划线，除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端开始C．接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行D．该实验中，接种环的灼烧次数有3次13．酵母菌品质的好坏是影响葡萄酒产量和质量的重要因素。某酒业集团针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点，分离出了适合山葡萄发酵的最佳酵母菌种——长白山1号酵母。下列有关酵母菌发酵与培养的说法错误的是(　　)A．长白山1号酵母相较于其他酵母品种更适应酸性环境B．为增加葡萄酒的甜度与酒精度，可适当补加一定量糖源C.山葡萄汁中的糖分为酵母菌生长繁殖提供了碳源和氮源D．实验室培养酵母菌时可加入适量抗生素以防杂菌污染14．[2023·河南洛阳高二校联考]如图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤。下列叙述错误的是(　　)A．①倒平板时，培养皿倒入培养基后要立即倒放于超净实验台上B．②步骤接种环经灼烧灭菌冷却后蘸取菌液C．③步骤应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D．接种结束待菌液被培养基吸收后，将④倒置培养，皿底上标注菌种及接种日期等信息15．(不定项)酵母菌的纯化培养过程中，完成稀释涂布平板后，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温箱中培养。下列叙述正确的是(　　)A．用未接种的平板共同培养，其目的是检验培养过程中是否有杂菌污染B．完成稀释涂布平板接种后，需立即将平板倒置，以免表面干燥，影响菌的生长C．倒置培养有利于减少水分蒸发，减少杂菌污染，方便观察计数D．上述培养结束后，若出现了不同形态、大小的菌落，可能的原因是接种环未灼烧1．培养基需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。下列叙述错误的是(　　)A．培养霉菌时，培养液调至酸性B．培养细菌时，培养基调至强碱性C．培养厌氧微生物时，提供无氧的条件D．培养乳酸菌时，培养基中添加维生素2．[2023·山西太原师范学院附属中学校联考]下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是(　　)A．对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等B．若需要调节pH，则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节C．家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母菌等的培养基D．实验用过的带菌培养基必须经消毒后才能倒掉3．[2023·山西晋中高二校考]下列与微生物实验室培养有关的描述，正确的是(　　)A．培养霉菌和细菌时需将pH调至中性或弱碱性B．平板划线法可以对微生物进行分离和纯化C．干热灭菌应在160～170℃的热空气中维持1～2h，培养基可采用这种方法进行灭菌D．接种环、接种针、涂布器等用具，可以在酒精灯火焰的内焰部分灼烧灭菌4．[2023·山西太原师范学院附属中学校联考]消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是(　　)A．微生物接种技术的方法不同，但核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度B．在100℃条件下煮沸5～6min属于灭菌方法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢C．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌D．高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子5．[2023·河南南阳高二校联考]如图是微生物纯培养中平板划线分散单个微生物示意图。下列有关叙述正确的是(　　)A．划线前培养基都必须使用湿热灭菌法灭菌B．划线前后都要将接种环放在酒精灯的火焰旁灭菌C．划线区都有菌落，但一般在5区域得到纯培养物D．划线时要注意将第5次的末端与第1次的划线相连6．微生物培养时常用到无菌技术避免杂菌污染，相关叙述正确的是(　　)A．无菌技术包括对操作者的衣着和手进行灭菌B．倒平板时应该把培养皿盖完全打开，以免培养基溅到培养皿盖上C．配制好的培养基应放入干热灭菌箱中进行灭菌D．接种前后接种环都必须灼烧灭菌7．关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，下列说法正确的是(　　)A．培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影响酵母菌生长D．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线8．[2023·江苏淮安模拟](不定项)下列是关于“酵母菌的纯培养”实验操作的叙述，正确的是(　　)A．将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次，以达到彻底灭菌的目的B．灼烧的接种环在酒精灯火焰旁冷却后，伸入菌种管轻挑少许菌体C．从菌种管抽出接种环时，不能让其带菌部位触及管壁D．接种环在斜面接种后，需多次灼烧以保证无菌，冷却后放回原处9.[2023·陕西宝鸡一模]微生物的实验室培养，既需要为微生物提供适宜的生存条件，还要防止其他微生物的混入。回答下列有关问题：(1)配制培养基是培养微生物的第一步。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、________、N源；而培养基的种类也各不相同，如果按物理性质分，包括固体培养基和________。(2)实验室常使用牛肉膏蛋白胨培养基，其在加入琼脂后，呈现的物理状态为________，若用该培养基来培养细菌，还需要将培养基的pH调至________________。(3)培养微生物时应做好消毒和灭菌工作。倒平板的整个过程都需要在酒精灯火焰附近操作，以防杂菌污染，这一操作属于________(填“消毒”或“灭菌”)手段。(4)平板划线时要连续划线操作，其目的是将菌种不断稀释，直至成为由一个细胞繁殖而来的群体，称为________。划线时应注意，第一区的划线与最后一区的划线______(填“应该”或“不应”)相连。10．[2023·江苏淮安高二校考]下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题：(1)为防止杂菌污染，常用________________法对培养基灭菌。(2)培养基的配方是根据微生物的营养需求而设定的，从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是________(填“自养型”或“异养型”)。利用该培养基培养微生物时，微生物所需要的碳源来自________(填“培养基”或“空气”)。(3)微生物从培养基中以________(填“分子”“原子”或“离子”)形式吸收物质①。物质①吸收后可用来合成______________等生物大分子。(4)若要观察培养基表面菌落的特点，培养基中还应添加的成分是________。鉴定菌种时，可根据菌落的__________________________(至少答两点)等方面的特征进行鉴定。(5)培养基中添加一定量物质②和④，请分析所起的作用__________________________________________________________________(至少说出两点)。11．琼脂是一种多糖类物质，由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一。某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现，几乎全部培养基上的微生物都已死亡，但在其中一个培养基上存在一个正常生长的菌落。对此，研究人员做出了以下假说：①此培养基内的营养未被消耗殆尽；②形成此菌落的为自养型微生物；③形成此菌落的微生物能利用琼脂。(1)从研究人员所作的假说可以推测①所说的“营养”指的最可能是________________(填“碳源”“氮源”或“无机盐”)。(2)制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括：________、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是________________和________________。(3)为了检验上述假说①是否正确，研究人员分别使用两种培养基对上述微生物进行培养，其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基a，则另一培养基b中不能加入下列的________。A.牛肉膏B．蛋白胨C.氯化钠D．琼脂(4)若上述a、b培养足够长时间，菌落生长情况为____________________________________时，则排除了假说②③，证明假说①正确。(5)若上述实验否定了假说①，为进一步检验假说②和③，研究人员想要配制一种新的培养基c，并通过b与c上是否出现菌落作为观察指标，则与b相比，c的成分需要做出的变化是________________________________________________________________________。二　微生物的选择培养和计数1.美国科学家布鲁克从热泉中筛选到水生耐热细菌Taq，并从中分离得到了耐高温的TaqDNA聚合酶，解决了体外DNA大量复制的技术问题。下列微生物筛选原理，除哪项外都与之相似(　　)A．从加工糖果、蜂蜜的土壤环境中寻找耐渗透压酵母菌B．从油田土环境中筛选石油分解菌C．从富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌D．从中性或偏碱环境中筛选霉菌2．为了筛选能产生阿拉伯胶(一种多糖)降解酶的菌株SM01，应选用以下表中哪种培养基(　　)(单位：g/L)A.甲B．乙C.丙D．丁3．下列关于选择培养基的叙述，错误的是(　　)A.选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长B.制备选择培养基时，应根据所选微生物的特点确定培养基的配方C.筛选能分解尿素的细菌时，应以尿素作为唯一的氮源D.与普通培养基相比，选择培养基上生长的微生物的数量一般较多4.[2023·山西太原五中校考]分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)①加尿素　②不加尿素　③加琼脂　④不加琼脂⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐　⑨加青霉素　⑩不加青霉素A．①③⑤⑧⑨B．②④⑤⑧⑩C．①③⑤⑧⑩D．①④⑤⑧⑩5．下列操作需要在火焰旁进行的一组是(　　)①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液④涂布平板　⑤微生物的培养A．①②③④⑤B．②③④⑤C．③④⑤D．②③④6．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(　　)A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素，琼脂、蒸馏水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水7．某种土壤细菌可将尿素(CH4N2O)分解为CO2和NH3，但分解产物CO2不能为该菌提供营养。若欲筛选出该种土壤细菌，仅考虑碳源和氮源，下列培养基设置合理的是(　　)A．仅尿素就可以，既是碳源也是氮源B．仅葡萄糖就可以，可以从空气中固氮C．尿素为氮源，需要葡萄糖作为碳源D．牛肉膏蛋白胨含C和N，可以满足该培养基的碳源和氮源8．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是(　　)A．都只能用于固体培养基接种B．都需要对菌液进行梯度稀释C．接种培养后均可获得单菌落D．接种工具使用后均需要灭菌9．在农业生产中，为了提高农作物的产量，人们会向农田中施用大量的化学肥料。农田中化肥残留过多会影响土壤的理化性质。利用微生物分解残留化肥的效果较好，为了筛选并保存高效分解尿素的微生物，研究人员配制了两份培养基，如下表所示。下列相关叙述不正确的是(　　)A.尿素分解菌可直接以尿素作为氮源B.尿素分解菌可用乙培养基进行筛选C.可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量D.平板划线法时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线10.下列不能测定样品微生物数的方法是(　　)A．稀释涂布平板法B．显微镜直接计数法C．滤膜法　　D．平板划线法11．某同学测得每克土壤样品中分解尿素菌落数是2×108个，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，且每个平板上的菌落数分别为190、200、210个，则土壤样品的稀释倍数为(　　)A．103　　B．104C．105　　D．10612．[2023·湖南长沙长郡中学校考]用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是(　　)A．菌落中的细菌数目是固定的B．平板上的一个菌落就是一个细菌C．通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌13．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(　　)A．采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果14．下图为某同学进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验过程示意图。据此推算出每克土壤样品中的该种细菌的数量是(　　)A．1.7×107B．1.7×108C．1.7×109D．1.7×101015．某兴趣小组从校园土壤取样，进行“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验。小明取10g土壤进行稀释，并从稀释度为106的培养基中筛选出约120个菌落，而其他同学只筛选出约40个菌落。下列叙述错误的是(　　)A．小明出现这种结果的可能原因之一是和其他同学取样的土壤不相同B．要证明培养基是否受到污染，可将小明配制的空白培养基进行培养C．当稀释倍数太小时，可能由于菌落发生重叠进而导致计数结果偏小D．其他同学10g土样的细菌悬液中分解尿素的细菌数量约为4×108个1．[2023·山西运城高二校联考]下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是(　　)A．可以在长期使用尿素肥料的农田土壤中采集土样B.分离菌种所采用的培养基需添加尿素为唯一氮源C.利用稀释涂布平板法纯化菌种时常用菌落数作为统计结果D．实施本实验时所用平板和试管的数目不多而且耗时也较短2．如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变成红色。下列有关叙述错误的是(　　)A．④过程采用稀释涂布平板法进行接种，接种工具是接种环B．图中所用培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌C．①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源D．可用酚红染料鉴定，观察菌落周围是否出现红色圈3．[2023·四川雅安中学校考]下列有关分解尿素的细菌，说法正确的是(　　)A．以尿素为唯一氮源的固体培养基平板上可以分离出根瘤菌B．筛选分解尿素的细菌时，培养基中唯一的营养物质是尿素C．加有酚红的以尿素为唯一氮源的培养基，兼有选择与鉴别目标菌种的功能D．脲酶需要经过内质网和高尔基体的加工后才具有生物学活性4．[2023·广东潮州统考期末]下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的流程图，有关叙述不正确的是(　　)A.配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌B．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D．步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落5．在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践中，要规范地进行无菌操作。下列与无菌操作相关的说法，正确的是(　　)A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行湿热灭菌B．将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释C．将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作D．待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数6．如图是某小组培养从土壤中分离出能够分解尿素的细菌的结果示意图，以下相关说法正确的是(　　)A．运用图1所示的接种方法统计所得的活菌数比实际值偏高B．运用图2所示的接种方法需把接种环插入到培养基中操作C．若所得菌落的形状、大小、颜色不一说明土壤中含多种分解尿素细菌D．分离尿素分解菌时需往完全培养基中额外加入尿素制成选择培养基7．[2023·江苏淮安高二校考](不定项)下列相关叙述中正确的是(　　)A．可用平板划线法对微生物进行分离、纯化和计数B．使用过的微生物培养基应进行湿热灭菌处理后再丢弃C．将未接种的平板培养并观察有无菌落，以判断平板是否合格D．可用血球计数板和显微镜对细菌直接观察计数8．[2023·辽宁模拟预测](不定项)进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是(　　)A.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pHB.尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用C.琼脂既可为尿素分解菌提供碳源，又起到凝固剂的作用D.蒸馏水既可进行定容，又可对培养液进行稀释以便于计数9.[2023·河南新乡二模]产脲酶微生物是能分泌脲酶的一类微生物的统称。实验人员筛选获得了一株能耐受酸性环境的产脲酶菌株，该菌株在pH为4.5～5.5的酒中具有活性，可以消除酒中的尿素，以抑制致癌物质——氨基甲酸乙酯的形成。回答下列问题：(1)产脲酶菌株分泌的脲酶能催化尿素分解生成____________________。配制用于筛选产脲酶菌株的培养基时，对培养基灭菌常用的方法是________________，尿素需要在灭菌后加入，原因是______________________。(2)某同学设计的两种培养基的部分配方如下表所示：其中能用于筛选纯化产脲酶细菌的是培养基________(填“A”或“B”)，判断依据是________________________________________________________________________。10．[2023·浙江舟山统考模拟预测]下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：(1)土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中产生的__________________催化尿素分解成NH3和CO2。某同学配制以下的培养基成分：葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O(定容至1000mL)。分析培养基的成分可知，上述培养基________(填“能”或“不能”)用于分离出能分解尿素的细菌，理由是__________________________________________________________________________。(2)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是________________________________________________________________________。11．生物降解法是常用的降解农药的方法，某研究小组为分离出能降解敌敌畏(一种有毒的有机农药)的细菌，进行了以下相关操作。回答下列问题：(1)分离原理：土壤中的某种细菌能合成____________，这种物质在把敌敌畏分解成无机物的过程中发挥重要作用。(2)实验流程：①从富含敌敌畏的环境中采集土样配制成土壤菌液。从稀释10倍的菌液中取1mL菌液，加入______中，获得稀释100倍的菌悬液，如此操作直到稀释1000倍。②配制以________为唯一碳源的培养基，并将pH调至中性或弱________性，之后灭菌，倒平板，冷却后需将平板________。③用________法接种细菌，该方法能成功统计菌落数目的关键是选择恰当的________，统计的菌落数通常比实际数目____(填“高”或“低”)。一　微生物的基本培养技术必备知识基础练1．答案：D解析：氮源除了用于合成蛋白质以外，还要参与合成核酸、ATP等物质，A错误；碳源主要用于构成微生物体细胞的物质和一些代谢物，B错误；无机盐对微生物的生长是必需的，C错误；水是微生物生命活动必需的一种重要物质，D正确。2．答案：D解析：牛肉膏和蛋白胨含有蛋白质、脂质等有机物，还含有维生素，D正确。3．答案：C解析：蛋白质通常是作为氮源，用于合成蛋白质和参与合成核酸、ATP等物质，A错误；葡萄糖作为碳源，可以给微生物的生长提供能源，B错误；维生素可通过组织提取液提供，C正确；培养基有固体培养基和液体培养基，其中液体培养基不需要添加琼脂，D错误。4．答案：B解析：乳酸菌自身不能合成维生素，而维生素又是维持其生命活动不可缺少的，故需在培养基中添加，A正确；pH影响微生物的生长和代谢，配制培养基时pH一定要适宜，B错误；琼脂在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈固态，在液体培养基中加入琼脂可以制成固体培养基，C正确；微生物也是由C、H、O、N、P、S等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物，可归纳为碳源、氮源、水、无机盐等，但配制时要注意各种养分的浓度和比例，D正确。5．答案：C解析：无机碳源如CO2不能提供能量，A错误；无机物能作为碳源或氮源，如CO2或N2，B错误；同一物质可能既作为碳源又作为氮源，如牛肉膏、蛋白胨，C正确；自养型微生物培养基中可不加入碳源，固氮微生物培养基中可不加入氮源，D错误。6．答案：C解析：琼脂是凝固剂，所以液体培养基要制成固体培养基，可在培养基中加入琼脂，A正确；细菌在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落，B正确；不同微生物生长习性不同，所以不是每种微生物的培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，例如培养硝化细菌的培养基不需要加入碳源，C错误；培养基还需满足微生物对pH、特殊营养物质及O2的需求，D正确。7．答案：D解析：紫外线等射线灭菌法适用于接种室、接种箱或超净工作台，A项不符合题意；干热空气灭菌法适用于耐高温的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿等)、金属用具等，B项不符合题意；湿热灭菌法是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽灭菌的方法，一般培养基的灭菌常用该方法，C项不符合题意；灼烧灭菌法是指将微生物的接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底的灭菌，D项符合题意。8．答案：C解析：湿热灭菌可以杀死包括芽孢在内的所有微生物，因此利用高温高压条件导致菌体和芽孢都死亡。9．答案：B解析：煮沸消毒法，即利用煮沸100℃经5～6min，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，①正确；酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的野生型酵母菌，故不能对葡萄进行灭菌，③错误；培养基灭菌常用湿热灭菌法，④正确；需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等，⑤错误。综上所述，B正确。10．答案：D解析：涂布器是常用的接种工具，平板稀释涂布接种采用的是玻璃涂布器，A正确；穿刺接种采用的是接种针，B正确；平板划线法用接种环在平板培养基上划线接种，C正确；斜面接种采用的是接种环，D错误。11．答案：D解析：接种环应该采用灼烧灭菌法进行灭菌，即将接种环放在火焰上灼烧，A正确；将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，防止高温杀死菌种，B正确；为防止杂菌污染，蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确；划线时，在进行第二次以及其后的划线操作时要从上一次划线的末端开始划线，且不能将最后一次的划线与第一次的划线相连，D错误。12．答案：D解析：实验过程中使用的平板较多，为避免混淆，使用前做好标记，应在划线前，在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号，A正确；在培养基表面连续划线，除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端开始，目的是使微生物数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个细胞，B正确；微生物实验操作要防止杂菌污染，因此接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确；每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，该实验划线3次，因此灼烧次数为4次，D错误。13．答案：C解析：根据题意可知，长白山1号酵母是针对山葡萄酸高、糖低、浸出物高等特点而分离出的酵母菌种，故其耐酸性更好，A正确；山葡萄中糖低，可适当补加一定量糖源来增加葡萄酒的甜度与酒精度，B正确；山葡萄汁中的糖分只能为酵母菌生长繁殖提供碳源，C错误；抗生素可抑制细菌的生长、繁殖，真菌则不受影响，因此培养酵母菌时加入适量抗生素可防止杂菌污染，D正确。14．答案：A解析：①将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，冷却后，倒放于超净实验台上，如果不冷却就倒置会使培养基流到皿盖皿底之间，造成污染，A错误；②中接种环经灼烧灭菌后应冷却后再挑取菌液，以防高温杀死酵母菌，B正确；③步骤应多个方向划线，可使接种物逐渐稀释，得到单个酵母菌培养后出现的单个菌落，C正确；图中操作结束后，为了防止培养皿盖上的水珠滴落到培养基造成污染，需要将培养皿倒置培养，且同时在皿底标注菌种及接种日期等信息，D正确。15．答案：AC解析：用未接种的平板共同培养，可以检验培养过程中是否有杂菌污染，若有污染，则未接种的平板上会有微生物生长，A正确；完成稀释涂布平板接种后，需静置后再将平板倒置，否则菌液滑落，导致接种失败，B错误；将培养皿倒置培养有利于减少水分蒸发，防止冷凝水滴落冲散单菌落，减少杂菌污染，方便观察计数，C正确；上述培养结束后若出现了不同形态、大小的菌落可能的原因是酵母菌的种类不同，D错误。能力素养综合练1．答案：B解析：培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，A正确；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，B错误；培养厌氧微生物时，提供无氧的条件，C正确；培养乳酸杆菌时，培养基中添加维生素，D正确。2．答案：C解析：对培养基常用的灭菌方法是湿热灭菌，A错误；若需要调节pH，则应该在对培养基灭菌前进行调节，B错误；家庭制作腐乳时，毛霉、曲霉、酵母菌等所需营养物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培养基，C正确；实验用过的带菌培养基必须经灭菌后才能倒掉，D错误。3．答案：B解析：用于培养细菌的培养基应将pH调至中性或弱碱性，而用于培养真菌的培养基应将pH调至酸性，A错误；平板划线法可以对微生物进行分离和纯化，B正确；培养基常用湿热灭菌法进行灭菌，C错误；接种环、接种针、涂布器等用具，可以在酒精灯火焰的外焰部分灼烧灭菌，外焰的温度最高，D错误。4．答案：A解析：微生物接种技术包括稀释涂布平板法和平板划线法等，虽然接种方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培养物，A正确；在100℃条件下煮沸5～6min属于煮沸消毒法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，但不属于灭菌方法，B错误；无菌技术中，若处理对象为液体，则可以采用灭菌的方法，如培养液可以利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，C错误；使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时，只有当压力表的压力降到零时，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。5．答案：C解析：培养基灭菌一般采用湿热灭菌法，但是对于含有遇高温易分解的营养物质的培养基，不能采用湿热灭菌法进行灭菌，A错误；划线前后要将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧灭菌，B错误；所有的划线区都有可能得到菌落，只是5区域中菌落相对较纯，易分离得到纯培养物，C正确；在平板划线时不要将最后一次的划线与第一次的划线相连，避免已分离开的菌种再次聚集，最终无法获得单菌落，D错误。6．答案：D解析：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒，A错误；为防止空气中的杂菌落入培养皿中，倒平板时不能把培养皿盖完全打开，正确的操作是将培养皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，B错误；配制好的培养基应放入高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌，C错误；接种前灼烧是为了保证接种时不会污染培养物，接种后再灼烧是防止菌种污染接种室或者超净台，D正确。7．答案：D解析：接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而配制培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，因为培养基最后还需要灭菌，B错误；倒好的平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，C错误；平板划线转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，主要目的是杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，D正确。8．答案：ACD解析：为避免杂菌污染，可将接种环的环端和可能伸入试管的部分在火焰上来回灼烧多次，A正确；将灭过菌的接种环伸入菌种管，先将环部接触培养基斜面顶端或其他无菌体的培养基部位使其冷却，再轻轻挑取少许菌体，在抽出接种环时，注意其带菌部位不要触及管壁或通过火焰，B错误，C正确；接种后灼烧是为了杀死残留的菌体，接种环在斜面接种后，需多次灼烧以保证无菌，冷却后放回原处，D正确。9．答案：(1)碳源(或C源)　液体培养基(2)固态　中性或弱碱性(3)灭菌(4)菌落　不应解析：(1)培养基的主要成分有：水、碳源、氮源、无机盐，培养基按其物理性质可分为固体培养基和液体培养基。(2)固体培养基通常加入琼脂作为凝固剂，培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性。(3)在酒精灯火焰附近进行倒平板，这一操作属于灭菌手段。(4)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，平板划线法接种微生物时，第二次划线后每次划线的菌种都来自于上次划线的末端，故注意不要将最后一区的划线与第一区相连。10．答案：(1)湿热灭菌(2)自养型　空气(3)离子　蛋白质、核酸(4)琼脂(或凝固剂)　形状、大小、颜色、隆起程度(5)为微生物提供无机盐，维持培养基的pH稳定(酸碱平衡)解析：(1)对培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌法。(2)培养基的成分都是无机物，因此培养的微生物的同化类型是自养型；微生物所需的碳源由空气中的CO2提供。(3)微生物吸收无机盐以离子的形式进行；含N无机物吸收后用于形成含N有机物，其中含N的生物大分子是蛋白质和核酸。(4)菌落需要在固体培养基的表面生长，因此培养基中需要添加琼脂，使液体培养基凝固成固体培养基。依据菌落特征鉴定，菌落特征有形状、大小、颜色、隆起程度等。(5)②④既是无机盐又是缓冲物质，作用是为微生物提供无机盐，维持培养基的pH稳定(酸碱平衡)。11．答案：(1)碳源　(2)配制培养基　干热灭菌　湿热灭菌　(3)AB　(4)a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落　(5)将琼脂换用其他凝固剂解析：(1)从三个假说所指向的微生物来看，其差别主要在于所需碳源不同。(2)制备培养基的基本步骤是配制培养基→灭菌→倒平板。培养皿等玻璃器皿一般采用干热灭菌，而培养基往往采用湿热灭菌。(3)A、B可以为绝大多数微生物提供碳源，而从实验目的分析，b培养基应该要排除依靠此类碳源生活的微生物，故选AB。(4)a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落说明该微生物只能利用常规碳源生活，也就说明假说①更可靠。(5)要出现菌落，需要用固体培养基，题干提示，琼脂是配制固体培养基常用的凝固剂之一，因此将琼脂换用其它凝固剂，这样就可以通过b和c的对比来确定该微生物能否利用琼脂作为碳源。二　微生物的选择培养和计数必备知识基础练1．答案：D解析：酵母菌呼吸作用的底物主要是葡萄糖，所以富含糖果、蜂蜜的土壤环境中容易找到酵母菌，且这些酵母菌是耐渗透压的酵母菌，A正确；油田土环境中富含石油，容易筛选出石油分解菌，B正确；纤维素分解菌可以降解纤维素，到富含纤维素的环境中可以找到纤维素分解菌，C正确；培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或弱碱性，D错误。2．答案：D解析：根据题意可知，需要“筛选能产生阿拉伯胶(一种多糖)降解酶的菌株SM01”，需要以阿拉伯胶作为唯一碳源，甲中牛肉膏也属于碳源，因此排除甲培养基，A不符合题意；由于该菌株能够产生阿拉伯胶的降解酶，因此培养基中不能添加阿拉伯胶酶，故排除乙培养基，B不符合题意；丙培养基无阿拉伯胶做碳源，选择牛肉膏做碳源，C不符合题意；丁培养基以阿拉伯胶作为唯一碳源符合要求，即利用培养基丁培养可以筛选该菌株，D符合题意。3．答案：D解析：普通培养基可满足多数微生物的生长需求，选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长，A正确；制备选择培养基时，应根据所选微生物的特点确定培养基的配方，如微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性，B正确；分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶可分解尿素，因此筛选能分解尿素的细菌时，应以尿素作为唯一的氮源，C正确；普通培养基可满足多数微生物的生长需求，选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长，因此与普通培养基相比，选择培养基上生长的微生物的数量一般较少，D错误。4．答案：C解析：分解尿素的细菌是异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如⑤加葡萄糖；培养基中应该以尿素作为唯一氮源制成选择培养基，从物理性质上看分解尿素的微生物的分离用的是固体培养基，因此应加入凝固剂琼脂，且培养基中不能加入青霉素，因为青霉素能抑制分解尿素的细菌的生长，即分离分解尿素的细菌需要在培养基中加入的物质依次为①加尿素、③加琼脂、⑤加葡萄糖、⑧不加硝酸盐，⑩不加青霉素，即C正确。5．答案：D解析：①土壤是微生物的培养基，土壤取样不需要在火焰旁进行，否则会杀死目的菌株，①错误；②称取土壤，为避免杂菌的污染，需要在酒精灯火焰旁进行，②正确；③稀释土壤溶液，为避免杂菌的污染，需要在酒精灯火焰旁进行，③正确；④涂布平板，为避免杂菌的污染，需要在酒精灯火焰旁进行，④正确；⑤微生物的培养，需在一定温度的恒温箱中进行，⑤错误。6．答案：A解析：分解尿素的细菌是异养微生物，因此培养基中应该加入有机碳源，如葡萄糖；分离分解尿素的细菌的培养基从功能上分属于选择培养基，应该以尿素为唯一氮源，而B选项中无氮源，C选项中无碳源，D选项中牛肉膏、蛋白胨都可以作为氮源，故A正确；B、C、D错误。7．答案：C解析：尿素中虽然含有碳和氮，但是碳元素不能被该细菌利用，所以不能作为土壤细菌的碳源，只能作为氮源，A错误；分离纯化的土壤细菌只能利用土壤中的氮源，不能从空气中固氮，B错误；尿素为氮源，需要葡萄糖作为碳源，C正确；牛肉膏蛋白胨虽然含有碳和氮，但是不能用作筛选该种土壤细菌的培养基的碳源和氮源，D错误。8．答案：B解析：将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；平板划线法常用来分离微生物，不能用来进行微生物的计数，不需要对菌液进行梯度稀释，B错误；两种接种方法均可在培养基中形成单个菌落，C正确；接种工具使用后均需要灭菌，以免菌种对环境造成污染，D正确。9．答案：B解析：尿素分解菌能合成脲酶，把尿素分解成氨，可直接以尿素作为氮源，A正确；乙培养基中含有牛肉膏、蛋白胨等氮源，不能用于筛选尿素分解菌，B错误；稀释涂布平板法可对活菌进行计数，所以统计土壤样品中分解尿素的活菌数量可用稀释涂布平板法，C正确；平板划线法时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。10．答案：D解析：稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，A正确；显微镜直接计数法可测定样品微生物数目，缺点是不能区分死菌与活菌，B正确；滤膜法能测定样品微生物数，例如用滤膜法测定自来水中大肠杆菌的数目，C正确；平板划线法可用于分离微生物，但不能测定样品微生物数目，D错误。11．答案：C解析：根据该同学测得每克土壤样品中分解尿素菌落数是2×108个，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，且每个平板上的菌落数分别为190、200、210个，平均菌落数为200个，则土壤样品的稀释倍数为：2×108÷(200÷0.1) ＝1×105，综上所述，A、B、D错误，C正确。12．答案：D解析：用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，D正确，A、B、C错误。13．答案：C解析：采用稀释涂布平板法计数时获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；设计实验时，至少要用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性；分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时，取平均值作为统计结果，D正确。14．答案：C解析：由样品稀释示意图分析可知，5号试管的稀释倍数为106倍，则5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)÷3×106÷0.1＝1.7×109个。15．答案：D解析：小明筛选出的菌落数明显比其他同学多，出现这种结果的原因可能是和其他同学取样的土壤不同，也有可能是培养基混入其他氮源或培养基被污染，A正确；要证明培养基是否受到污染，可将小明配制的培养基不加土样进行培养，即进行空白对照，B正确；当稀释倍数太小时，两个或两个以上细菌连在一起时，培养基上看到的是一个菌落，可能会出现菌落重叠而导致计数结果偏小，C正确；其他同学选出约40个菌落，根据公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，取10g土壤进行稀释，所以土样的细菌悬液中分解尿素的细菌数量约为40×106＝4×107个，D错误。能力素养综合练1．答案：D解析：在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，要得到分解尿素的细菌，可以在长期使用尿素肥料的农田土壤中采集土样，A正确；分离能分解尿素的细菌，需要加入尿素为唯一氮源，这种加入尿素的培养基在功能上属于选择培养基，B正确；菌落是由单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的有一定形态结构的子细胞的群落，利用稀释涂布平板法纯化菌种时常用菌落数作为统计结果，C正确；本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，应在使用前就做好标记，标记时要注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等，D错误。2．答案：A解析：据图可知，④过程采用的是平板划线法进行接种，接种工具是接种环，A错误；为避免杂菌污染，对培养基常用湿热灭菌法进行灭菌，B正确；尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，而其它微生物不能，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，C正确；分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定，以菌落周围是否出现红色圈来鉴定，D正确。3．答案：C解析：根瘤菌为共生固氮菌，无氮源的培养基上可以分离出根瘤菌，A错误；筛选分解尿素的细菌时，培养基中唯一的氮源是尿素，但培养基中还含有其他营养物质，例如水和无机盐，B错误；分解尿素的细菌的鉴定原理是：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，故加有酚红的尿素培养基，兼有选择与鉴别目标菌种的功能，C正确；分解尿素的细菌属于原核生物，细胞内无内质网、高尔基体，D错误。4．答案：C解析：配制步骤②、③的培养基时，为防止杂菌污染，应进行湿热灭菌，A正确；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，形成相互对照实验，比较细菌分解尿素的能力，B正确；要筛选出能高效分解尿素的细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，C错误；步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞菌落，D正确。5．答案：C解析：配制好的选择培养基应先灭菌，再在无菌环境中分装到培养皿中，A错误；将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中依次等比稀释，B错误；将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作，防止高温杀死菌种，C正确；待长成的菌落稳定后，可直接观察，无需在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数，D错误。6．答案：C解析：图1菌落均匀分布，可知所示接种方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，故统计的活菌数比实际值偏低，A错误；划线分离时，不能把接种环深入到培养基中进行接种，只能在培养基表面进行划线操作，B错误；不同菌体形成的菌落特征存在差异，因此若所得菌落的形状、大小、颜色不一说明土壤中含多种分解尿素的细菌，C正确；对尿素分解菌进行分离时，需要在选择培养基中加入尿素作为唯一的氮源，在鉴定培养基中加入酚红指示剂，D错误。7．答案：BC解析：可用平板划线法对微生物进行分离、纯化，但不能计数，稀释涂布平板法可对微生物进行分离、纯化和计数，A错误；使用过的微生物培养基应进行湿热灭菌处理后再丢弃，以免对环境造成污染，B正确；将未接种的平板培养并观察有无菌落，以判断平板是否合格，若无菌落，则说明平板灭菌合格，C正确；可用特定细菌计数板和显微镜对细菌直接观察计数，血球计数板用于酵母菌等的计数，D错误。8．答案：CD解析：KH2PO4和Na2HPO4可为尿素分解菌提供无机盐，H2PO eq \o\al(\s\up1(－),\s\do1(4)) 和HPO eq \o\al(\s\up1(2－),\s\do1(4)) 又是一种调节pH的缓冲对，A正确；培养基中除了尿素无其他含氮物质，只有尿素分解菌能通过分解尿素进行生长繁殖，故尿素既能为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用，B正确；琼脂不能被微生物利用，只能充当凝固剂，C错误；表中的H2O为蒸馏水，起定容作用，蒸馏水不能对培养液进行稀释，稀释所用的溶剂应该是无菌水，D错误。9．答案：(1) CO2和NH3　湿热灭菌法　避免高温灭菌导致尿素分解(2)A　B中无琼脂不能制备固体培养基，在液体培养基中微生物不能形成单菌落解析：(1)尿素在脲酶的催化作用下可分解为CO2和NH3；对于培养基需要进行严格灭菌，常用的灭菌方法为湿热灭菌法；而尿素作为氮源需要在灭菌之后加入，防止其在高温灭菌的过程中分解，无法对细菌起到选择作用。(2)分析表格：A培养基加入了琼脂，为固体培养基，B培养基未加琼脂，为液体培养基，其中能用于筛选纯化产脲酶细菌的是培养基A，因为B中无琼脂不能制备固体培养基，在液体培养基中微生物不能形成单菌落。10．答案：(1)脲酶　不能　蛋白胨也能够提供氮源，尿素不是唯一的氮源(2)3.4×107　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落解析：(1)尿素分解菌中的脲酶催化尿素分解成NH3和CO2。该培养基中含有蛋白胨，蛋白胨也能够提供氮源，尿素不是唯一的氮源，所以该培养基不能分离出分解尿素的细菌。(2)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，可推测每克土壤样品中的细菌数为(35＋33＋34)÷3×105÷0.1＝3.4×107个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。11．答案：(1)酶(分解敌敌畏的酶)(2)9mL无菌水　敌敌畏　碱　倒置　稀释涂布平板　稀释度　低解析：(1)土壤中的细菌能将敌敌畏分解成无机物，说明该细菌能合成(分解敌敌畏的)酶。(2)①从稀释10倍的菌液中取1mL菌液，加入9mL无菌水，就可以将菌液稀释到100倍。②要将能分解敌敌畏的细菌分离出来，则培养基中要配制以敌敌畏为唯一碳源的培养基，将pH调至中性或弱碱性，为防止皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染，灭菌倒平板冷却后需将平板倒置。③接种该细菌应采用稀释涂布平板法，该方法能成功统计菌落数目的关键是选择恰当的稀释度，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计的菌落数通常比实际数目低。必备知识基础练进阶训练第一层知识点1培养基的配制成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL知识点2无菌技术知识点3微生物的纯培养能力素养综合练进阶训练第二层编号①②③④⑤⑥成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4Na2HPO4CaCl2H2O含量0.4g4.0g0.5g1.2g0.5g100mL必备知识基础练进阶训练第一层知识点1选择培养基 eq \o(\s\up7(培养),\s\do5(基))  eq \o(\s\up7(阿拉),\s\do5(伯胶))  eq \o(\s\up7(阿拉伯),\s\do5(胶酶)) NaNO3牛肉膏MgSO4KClFeSO4甲25－－310.50.01乙2510－6－－10.50.01丙－－3310.50.01丁25－3－10.50.01知识点2微生物的选择培养编号成分甲KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水知识点3微生物的数量测定能力素养综合练进阶训练第二层组分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0gH2O定容至1000mL培养基葡萄糖无机盐尿素琼脂水A＋＋＋＋＋B＋＋＋－＋