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苏教版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第二节 发酵工程的无菌技术课前预习ppt课件
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这是一份苏教版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第二节 发酵工程的无菌技术课前预习ppt课件,共40页。PPT课件主要包含了平板划线法,单个菌落,由点到线,3操作步骤,1酵母菌,单细胞,3实验原理,马铃薯葡萄糖琼脂,5实验步骤,6结果与分析等内容,欢迎下载使用。
教材预习·必备知识全过关
核心要点·能力素养全提升
一、平板划线法分离和纯化微生物
(1) 概念:指把含有多种微生物的______样品,通过在特定的琼脂平板表面___________,从而获得__________的方法。(2) 具体做法:将微生物样品在琼脂平板表面多次做“__________”的稀释划线,经过这样的操作可得到较多独立分布的______微生物。
划线稀释
2. 通过平板划线法获得纯化的酵母菌菌落
(2)实验目的尝试通过平板划线法获得纯化的酵母菌菌落。
① __________________培养基能满足酵母菌生长、繁殖的营养需要。② ____________是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法之一。
(4)实验器材和试剂酵母菌样本(菌种)、接种环、酒精灯、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
(1) 实验操作:将待分离的材料做一系列的__________,再取一定量的某一稀释度的菌液__________,然后用无菌的________将菌液均匀地涂布在整个平板表面,使其中的微生物______分散,培养后在平板培养基表面形成多个单菌落。①系列稀释操作:
将待分离的材料进行10倍系列梯度稀释
(2) 应用范围:既可用于菌种的____________,也可以用于微生物______。
(3) 混合平板法:将稀释的少量菌悬液与______左右的培养基混合均匀后倒入无菌培养皿中,再将培养皿置于合适温度下培养,这样在培养基表面和内部均可长出__________。
单个菌落
(4) 平板划线法的缺点是不能______,而________________则能用于微生物的计数。(5) 计数依据:如果经稀释涂布平板法培养出的都是__________增殖形成的菌落,那么统计这些______数目,即可计算出单位体积样品中的微生物数量。
2. 分离土壤中分解尿素的细菌并进行计数
(1) 实验目的①学会配制选择培养基,以分离出能分解尿素的细菌。
②学会采用________________分离和培养分解尿素的细菌,并进行计数。
① 在实验室中利用______培养基可以筛选和分离某种微生物。② 在__________的条件下,于固体培养基上培养该微生物,形成______菌落。单个菌落即为____________,通过对菌落数量的统计,可以计算出样品中的含菌数。
(3) 实验器材和试剂①土壤样品。②灭菌处理过的各种工具。
(5) 结果与分析:菌落数目在_________的一组平板上一般可以获得单个分解尿素的细菌菌落。
要点一 平板划线法分离和纯化微生物
(3)平板冷却凝固后,要将平板倒置。因为平板凝固后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基中,又可避免培养基中的水分过快蒸发。(4)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,那么这个平板不能用来培养微生物,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
2.平板划线操作的注意事项(1)灼烧接种环之后,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。(2)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(3)多次划线时最后一区域不要与第一区域相连。(4)划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。(5)灼烧接种环的目的
典例1 [2023江苏宿迁沭阳中学高二调研]下列有关倒平板的操作,错误的是( )
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上D.等待平板冷却凝固后,需要倒过来放置
[解析] 整个倒平板过程要防止外来杂菌的污染,因此,灭过菌的培养皿需放在火焰旁的桌面上,A项正确;打开的锥形瓶瓶口需迅速通过火焰,B项正确;培养皿打开一条大于瓶口的缝隙,不能将培养皿盖完全打开,C项错误;等待平板冷却凝固后,需要倒过来放置,D项正确。
对点演练1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中,下列关于倒平板的具体描述,正确的是( )
典例2 [2023江苏镇江丹阳高级中学高二调研]微生物接种的方法很多,平板划线法是常用的一种。下图是平板划线的示意图,划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是( )
A.划线操作时,将挑有菌体的接种环插入培养基中B.平板划线后培养微生物时要倒置培养C.不能将第④次的划线与第①次的划线相连D.在第②~④次划线前都要对接种环进行灭菌
[解析] 划线时不能将接种环插入培养基中,而是在培养基表面划线,A项错误。
对点演练2 [2023江苏宿迁泗洪中学高二质量检测期中]下列有关平板划线操作的叙述,不正确的是( )
A.第一次操作前灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C.在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液D.划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免菌种污染环境或感染操作者
[解析] 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,以形成单个菌落的方法。因此,每次划线时,都应将接种环上原有的菌体杀死,划线时分散的菌体来自上次划线结束时的菌体。
A.操作前不用进行任何处理B.划线操作必须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5次划线的前后都要对接种环灭菌
[解析] 划线之前应对接种环灼烧灭菌,A项错误;划线操作在酒精灯火焰旁进行,B项错误;从第1次划线至第5次划线菌落密度越来越小,因划线所用菌种密度的不同,在第3、4、5次划线中都可能得到所需菌落,C项错误。
要点二 稀释涂布平板法分离和纯化微生物
2.微生物计数常用的两种方法比较
典例3 [2023江苏宿迁高二期末]平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法。下列描述正确的是( )
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D.都会在培养基表面形成单个的菌落
[解析] 平板划线法是将菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,不需要进行梯度稀释,A、B两项错误;稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基表面,C项错误;平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落,D项正确。
对点演练4 [2023江苏常州前黄高级中学高三调研]平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A.平板划线法要求在培养基表面连续划线,且除第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的终点B.除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外,以后的划线可以不用灭菌C.对于稀释涂布平板法来说,如果菌液本来浓度不高,则可以适当降低稀释倍数D.“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单个细胞繁殖而成的菌落
[解析] 将接种环灼烧灭菌并冷却后蘸取菌液进行第一次划线,以后的每一次划线前及最后一次划线后都要将接种环进行灼烧灭菌,B项错误。
取淤泥加入无菌水中,涂布(或稀释涂布)到乙培养基上,培养后计数
对点演练5 [2023江苏南通高二期末]有机农药苯磺隆是一种强效除草剂,长期使用会严重污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某种微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。
(1) 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、氮源、____________四类,此外,培养基还
只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖
要满足微生物生长对____以及氧气的要求。该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一氮源的原因是___________________________________________。
当两个或多个细胞连在一起时,只能观察计数为一个菌落
(3) 图甲中选择培养使用的是______(填“固体”或“液体”)培养基,选择培养的目的是__________________;划线纯化后的某个平板中,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,造成划线无菌落可能的操作失误之一是____________________。
(4) 为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液作图乙所示实验,该实验假设是__________________________________,该实验设计________(填“合理”或“不合理”),因为______________。
目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质
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