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精品解析：山东省菏泽市2022 - 2023 学年高二下学期期末教学质量检测生物试题（解析版）
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这是一份精品解析：山东省菏泽市2022 - 2023 学年高二下学期期末教学质量检测生物试题（解析版），共25页。试卷主要包含了 用密闭的培养瓶培养等量的绿藻等内容，欢迎下载使用。
2022—2023学年高二下学期教学质量检测
生物试题2023.7
注意事项：
1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，考生务必将姓名、班级等个人信息填写在答题卡指定位置。
3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答。超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合要求。
1. 从活体珊瑚虫中，发现一种绿硫细菌，专性厌氧，能进行不产氧的光合作用和固氮作用。下列有关这种绿硫细菌说法错误的是（ ）
A. 具有核糖体，能合成蛋白质
B. 没有核膜包围的细胞核，有DNA
C. 没有叶绿体和线粒体，能进行光合作用和有氧呼吸
D. 培养绿硫细菌时不需要提供有机碳源和有机氮源
【答案】C
【解析】
【分析】1、绿硫细菌是原核细胞生物，无叶绿体，但能够进行光合作用，是自养生物。
2、光合作用的实质是利用光能把二氧化碳和水合成有机物，产生氧气。
【详解】A、绿硫细菌是原核生物，有核糖体这一唯一的细胞器，能合成蛋白质，A正确；
B、绿硫细菌是原核生物，没有核膜包围的细胞核，但有DNA和RNA，B正确；
C、绿硫细菌是原核生物，没有叶绿体和线粒体，专性厌氧，能进行不产氧的光合作用，不能进行有氧呼吸，C错误；
D、绿硫细菌为自养生物，具有固氮作用，因此培养绿硫细菌时不需要提供有机碳源和有机碳源，D正确。
故选C。
2. 蛋白质与核酸一直是科学家研究的热点领域之一。下列说法错误的是（ ）
A. 蛋白质与核酸都属于生物大分子
B. 真核生物和原核生物的遗传物质是DNA，病毒的遗传物质是DNA或RNA
C. 细胞质基质、线粒体、叶绿体和细胞核中均有蛋白质和核酸
D. 水通道蛋白与水分子结合、tRNA与氨基酸结合，进行有关物质的运输
【答案】D
【解析】
【分析】核酸是遗传信息的携带者，其基本构成单位是核苷酸。核酸根据所含五碳糖的不同分为DNA和RNA，核酸对于生物的遗传变异和蛋白质在的生物合成中具有重要作用，不同生物的核酸中的遗传信息不同。
【详解】A、蛋白质是由氨基酸经脱水缩合形成的，核酸是由核苷酸经脱水缩合形成的，两者都属于生物大分子，A正确；
B、真核生物和原核生物都是细胞生物，遗传物质都是DNA；病毒的遗传物质是RNA或者DNA，B正确；
C、线粒体和叶绿体是半自主性细胞器，都含有DNA、RNA、蛋白质；染色体主要由DNA和蛋白质组成；细胞核中的DNA转录形成的RNA可以进入细胞质基质，因此细胞质基质、线粒体、叶绿体和细胞核中均有蛋白质和核酸，C正确；
D、通道蛋白只容许与自身通道的直径和形状相适配、大小和电荷相适宜的分子或离子通过。分子或离子通过通道蛋白时，不需要与通道蛋白结合；tRNA与氨基酸结合，参与遗传信息的翻译过程，D错误。
故选D。
3. 真核生物的生物膜将细胞内分隔成不同的“区室”，有利于细胞代谢高效、有序地进行，下列关于细胞内的不同“区室”说法正确的是（ ）
A. 植物细胞的色素分子只储存于双层膜包围成的区域中
B. 由双层膜包围而成的区域均既可产生ATP，也可消耗ATP
C. 产生水的反应既可发生在双层膜包围的区域，也可发生在无膜包围的区域
D. 与胰岛B细胞相比，口腔上皮细胞由单层膜包围的区域面积较大
【答案】C
【解析】
【分析】生物膜系统是指在真核细胞中，细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等由膜围绕而成的细胞器，在结构和功能上是紧密联系的统一整体，生物膜系统在成分和结构上相似，在结构和功能上相互联系。细胞中，双层膜的结构有细胞核、线粒体、叶绿体，无膜结构的有中心体和核糖体。
【详解】A、植物细胞的色素除了分布在双层膜的叶绿体中，还分布在单层膜的液泡中，A错误；
B、由双层膜包围而成的区域，可以是线粒体、叶绿体 、细胞核，其中细胞核只消耗ATP，不产生ATP，B错误；
C、线粒体中有氧呼吸第三阶段可以产生水，叶绿体中进行的光合作用也可以产生水，细胞核中合成DNA也产生水，核糖体无膜包围，在核糖体中氨基酸脱水缩合可形成多肽，C正确；
D、胰岛B细胞分泌胰岛素，新陈代谢比口腔上皮细胞旺盛，故胰岛B细胞中内质网、高尔基体膜面积更大，D错误。
故选C。
4. 生物膜上能运输H+的载体蛋白统称为质子泵，常见的质子泵有3类：V型质子泵，可利用ATP水解的能量，将H+逆浓度梯度泵入细胞器：②F型质子泵，可利用H+顺浓度梯度的势能合成ATP：③P型质子泵，在水解ATP的同时发生磷酸化，将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，该质子泵能被药物W特异性抑制。下列说法错误的是（ ）
A. 溶酶体膜上常见V型质子泵，利于维持溶酶体内的酸性环境
B. F型质子泵常见于叶绿体内膜和线粒体内膜
C. P型质子泵具有酶的功能，可以催化特殊化学键断裂
D. 药物W可有效缓解胃酸过多导致的胃溃疡
【答案】B
【解析】
【分析】主动运输是需要消耗能量的过程，而且是逆浓度梯度运输物质的过程。V型质子泵可将H+逆浓度梯度泵入细胞器，属于主动运输。
【详解】A、V型质子泵可利用ATP水解的能量，将H+逆浓度梯度泵入细胞器，溶酶体内的pH小于细胞质基质，因此溶酶体膜上常见V型质子泵，利于维持溶酶体内的酸性环境，A正确；
B、F型质子泵，可利用H+顺浓度梯度的势能合成ATP，线粒体内膜和叶绿体类囊体薄膜上可合成ATP，分布有F型质子泵，叶绿体内膜不能合成ATP，不含F型质子泵，B错误；
C、P型质子泵，在水解ATP的同时发生磷酸化，将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，说明P型质子泵能作为酶催化ATP水解，使远离A的特殊化学键断裂，C正确；
D、P型质子泵能将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，药物W能特异性的抑制P型质子泵，使H+不能泵出细胞，因此药物W可有效缓解胃酸过多导致的胃溃疡，D正确。
故选B。
5. 新鲜菠萝肉中的菠萝蛋白酶使人在直接食用时会“蜇嘴”，某生物兴趣小组进行实验探究温度及NaCl浓度对菠萝蛋白酶活性的影响，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 菠萝蛋白酶会“蜇嘴”，与其分解口腔黏膜细胞的蛋白质有关
B. 不同温度下菠萝蛋白酶活性可能相同
C. 沸水处理后的菠萝蛋白酶不会与双缩脲试剂发生紫色反应
D. 该实验中不同浓度的NaCl溶液对菠萝蛋白酶活性都是抑制作用
【答案】C
【解析】
【分析】如图可以看出在不同温度下菠萝蛋白酶的活性不同，从0℃到40℃逐渐增强，从40℃到100℃逐渐渐弱，甚至失活。随着NaCl浓度升高，菠萝蛋白酶的活性减弱。
【详解】A、酶具有专一性，菠萝中的蛋白酶能分解口腔黏膜细胞的蛋白质分子，所以直接食用时会“蜇嘴”，A正确；
B、在最适温度的两侧，存在催化活性相同的两个不同温度，所以不同温度下菠萝蛋白酶活性可能相同，B正确；
C、沸水处理后的菠萝蛋白酶会变性失活，空间结构改变，但肽键没有断裂，因此仍会与双缩脲试剂发生紫色反应，C错误；
D、与NaCl溶液为0时比较可知，随着NaCl浓度升高，菠萝蛋白酶的活性逐渐减弱，说明不同浓度的NaCl溶液对菠萝蛋白酶活性都是抑制作用，D正确。
故选C。
6. 北欧鲫鱼在寒冷条件下，通过向体外排出酒精来延缓周围水体结冰，其细胞呼吸过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 过程①能产生CO2
B 过程①②③均能生成ATP
C. 过程①③均发生在线粒体中
D. 北欧鲫鱼体内会发生丙酮酸和乳酸的相互转化
【答案】D
【解析】
【分析】无氧呼吸分为两个阶段，第一阶段与有氧呼吸完全相同；第二阶段发生于细胞质基质，丙酮酸分解为酒精和二氧化碳或产生乳酸，不产生能量。
【详解】A、过程①为无氧呼吸产生乳酸的过程，该过程没有CO2产生，A错误；
B、过程①为产生乳酸的无氧呼吸过程，该过程有ATP产生；过程②为细胞呼吸的第一阶段，该过程有ATP产生；过程③为产酒精的无氧呼吸的第二阶段，该过程不产生ATP，B错误；
C、过程①②③均发生在细胞质基质中，C错误；
D、由图可知，丙酮酸可通过无氧呼吸第二阶段转化为乳酸，乳酸也可转化为丙酮酸，说明北欧鲫鱼体内会发生丙酮酸和乳酸相互转化，D正确。
故选D。
7. 下图表示植物叶肉细胞中光合作用、有氧呼吸的过程及两者之间的联系。①~⑤表示过程，甲~丁表示物质。下列说法正确的是（ ）
A. 乙、丙代表的物质分别是CO2、丙酮酸
B. 发生在生物膜上的过程有①③⑤
C. 过程①产生的物质中，能为过程②提供能量的是NADH和ATP
D. 用18O同时标记H2O和CO2，可探究光合产物O2中O元素的来源
【答案】A
【解析】
【分析】分析图示可知，①为光反应，②为暗反应，④是有氧呼吸第一阶段，③是有氧呼吸第二阶段，⑤是有氧呼吸第三阶段。
【详解】A、①过程能吸收光能，表示光反应，②过程可形成葡萄糖，为暗反应，④利用葡萄糖，生成丙和还原氢，是有氧呼吸第一阶段，丙代表丙酮酸，③过程利用丙和水生成乙和还原氢，为有氧呼吸第二阶段，则乙是CO2，A正确；
B、①为光反应，②为暗反应，④是有氧呼吸第一阶段，③是有氧呼吸第二阶段，⑤是有氧呼吸第三阶段。光反应在类囊体薄膜上进行，有氧呼吸第三阶段在线粒体内膜上进行，因此发生在生物膜上的过程有①⑤，B错误；
C、过程①光反应产生的物质中，能为过程②暗反应提供能量的是NADPH和ATP，C错误；
D、用18O同时标记H2O和CO2，不能探究光合产物O2中O元素的来源，应用18O分别标记H2O和CO2，才可探究光合产物O2中O元素的来源，D错误。
故选A。
8. 用密闭的培养瓶培养等量的绿藻（单细胞藻类），得到4组培养液，将培养液置于4种不同温度下（t1
A. t1黑暗条件下，绿藻细胞产生ATP场所为细胞质基质和线粒体
B. t2光照条件下绿藻细胞群体光合作用每小时产生的氧气量为6mg
C. t3条件下的光下O2增加值比t4高，这与t3温度下的呼吸速率比t4低有关
D. t4条件下绿藻细胞群体的净光合速率与呼吸速率相等
【答案】B
【解析】
【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和NADH，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和NADH，合成少量ATP；第三阶段是氧气和NADH反应生成水，合成大量ATP。
【详解】A、t1黑暗条件下，绿藻细胞只进行呼吸作用，产生ATP的场所为细胞质基质和线粒体，A正确；
B、图中光下O2增加值表示净光合速率，黑暗中O2消耗值表示呼吸速率，光合速率=净光合速率+呼吸速率，故t2光照条件下绿藻细胞群体光合作用每小时产生的氧气量为6+4=10mg，B错误；
C、光下O2增加值表示净光合速率，且净光合速率=光合速率-呼吸速率，再结合图可知，t3条件下的光下O2增加值比t4高，这与t3温度下的呼吸速率比t4低有关，C正确；
D、图中光下O2增加值表示净光合速率，黑暗中O2消耗值表示呼吸速率，再结合图可知，t4条件下绿藻细胞群体的净光合速率与呼吸速率相等，D正确。
故选B。
9. 下列有关生物学实验材料与方法的说法，错误的是（ ）
A. 观察质壁分离和复原现象能用成熟的叶肉细胞代替洋葱外表皮细胞
B. “绿叶中色素的提取与分离”和“菊花的组织培养”两个实验中，酒精作用不同
C. 在“探究酶专一性”实验中，可以使用斐林试剂来检测淀粉与蔗糖是否被水解
D. DNA粗提取过程中玻璃棒上未出现明显的DNA丝状物，因为DNA溶解在酒精中
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞质壁分离和复原的条件有：①必须是活细胞；②细胞液与外界溶液必须有浓度差；③植物细胞必须有大的液泡（成熟的植物细胞），且液泡最好有颜色便于观察。
【详解】A、观察质壁分离和复原现象能用成熟的叶肉细胞代替洋葱外表皮细胞，原因是成熟的叶肉细胞含有大液泡，且含有的叶绿体可作为液泡大小的参照物，A正确；
B、“绿叶中色素的提取与分离”的实验中需用无水酒精来提取色素，“菊花的组织培养”的实验中需用体积分数70%的酒精对外植体进行消毒，B正确；
C、在“探究酶的专一性”实验中，淀粉酶可以催化淀粉水解为葡萄糖，但不能催化蔗糖水解，因此可用斐林试剂检测还原糖的存在，C正确；
D、DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，D错误。
故选D。
10. 为宣传正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，菏泽某中学的同学们进行了相关实验。将牛肉膏蛋白胨培养基置于距正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，再进行微生物培养和计数，下列说法错误的是（ ）
A. 接种前要判断固体培养基是否被污染，不用接种无菌水培养检测
B. 实验中还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照
C. 实验者对培养基进行处理后，放入37℃恒温培养箱中培养1~2天
D. 培养结束后可根据菌落的形状、大小、颜色等特征确定微生物的数量
【答案】D
【解析】
【分析】菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
【详解】A、要验证培养基是否被污染，应将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察是否有菌落产生，A正确；
B、该实验中的实验组是正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，为了确保实验的准确性，还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照，B正确；
C、本实验是为了确定正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，而人体的温度约为37℃，因此应设置与人体相同的温度，即在37℃恒温培养箱中培养1～2天，C正确；
D、由于不同微生物的菌落特征不同，因此培养结束后可根据菌落的形状、大小、色泽等特征确定微生物种类，但不能确定微生物数量，D错误。
故选D。
11. 下列关于传统发酵技术、发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 缺乏糖源时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛之后再氧化为乙酸
B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为微生物饲料
C. 灭菌是发酵工程的中心环节，发酵罐内要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件
D. 微生物的纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，在该过程中要及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
【详解】A、氧气充足、糖源不足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛之后再氧化为乙酸，A正确；
B、单细胞蛋白是微生物菌体，并不是通过发酵工程从微生物细胞中提取获得的蛋白质，B错误；
C、发酵罐内发酵是发酵的中心环节，C错误；
D、微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，D错误。
故选A。
12. 科研人员利用植物体细胞杂交技术，获得了番茄和茄子的杂种植株，培育过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. ①过程可用纤维素酶和胰蛋白酶处理，②过程可用聚乙二醇诱导
B. ②过程中细胞融合后，需要在筛选杂种细胞的培养基中添加卡那霉素
C. ③过程包括脱分化和再分化，前者要光照处理，后者要遮光处理
D. 在组织培养的操作中，要对生物材料和培养基进行严格灭菌处理
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特的优势。
植物组织培养是指将离体的植物器管、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【详解】A、①过程可使用纤维素酶和果胶酶处理来除去细胞壁，以获得原生质体，②过程可用聚乙二醇诱导，A错误；
B、茄子原生质体不能在含有卡那霉素的培养基上生长，番茄原生质体经辐射钝化后失去增殖能力，只有二者融合后的原生质体才能在含有卡那霉素的培养基上增殖，因此筛选杂种细胞的培养基要添加适量的卡那霉素，B正确；
C、③过程包括脱分化和再分化，脱分化要遮光，再分化要光照，C错误；
D、在组织培养的操作中，不能对生物材料进行灭菌处理，D错误。
故选B。
13. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法错误的是（ ）
A. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞
B. ②过程应选用处于减数分裂II中期的卵母细胞
C. ③过程中可使用具有感染能力的病毒来诱导细胞融合
D. ④过程需经过胚胎移植才能获得克隆鼠
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞（简称iPS），①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞，A正确；
B、②过程为获取去核的卵母细胞，该过程应选用处于减数分裂II中期的卵母细胞，B正确；
C、③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞发生融合所用的是灭活的病毒，C错误；
D、胚胎移植技术是胚胎工程的最后一道工序，④过程需经过胚胎移植才能获得克隆鼠，D正确。
故选C。
14. DNA测序时，先将待测单链DNA模板、引物、有关酶、4种脱氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G）均加入4个试管中，再分别加入ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP。ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸，从而形成不同长度的DNA片段。分离4支试管中所有DNA片段，分泳道进行电泳（其分离原理仅依据分子量大小），结果如图所示，则新合成的子链序列为（ ）
A. 5'-GATCCGAAT-3' B. 3'-GATCCGAAT-5'
C. 5'-GGAAACCTT-3' D. 3'-GGAAACCTT-5'
【答案】B
【解析】
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。
【详解】ddNTP的2、3号碳上都脱氧，ddNTP的3号碳上没羟基，参与聚合反应后无法与游离脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，因此ddNTP一旦参与聚合反应，则DNA单链延伸即终止，因此可知左上角的第一个G所在位置为3'端（第一位），依据图中碱基的排序可知，新合成的子链序列为3'-GATCCGAAT-5'。
故选B。
15. 红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列说法错误的是（ ）
A. 用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中，可得到乳腺生物反应器
B. 构建基因表达载体时，需将EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起
C. 该转基因羊中的EPO基因可在羊的乳腺细胞中表达
D. 可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组
【答案】A
【解析】
【分析】转基因动物生产药物：
(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理: 基因的选择性表达)；
(2) 成果：乳腺生物反应器；
(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。
【详解】A、用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中，可得到乳腺生物反应器，A错误；
B、在构建基因表达载体时，需要将EPO基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这样才能使目的基因只在乳腺组织中表达，B正确；
C、EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，可以在羊的乳腺细胞中表达，其他细胞中不表达，C正确；
D、目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组，D正确。
故选A。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有错选得0分。
16. 柑橘中含有较多的黄酮类化合物，具有降血糖、降血脂、抗氧化等作用。为探究Cl-和柑橘中的黄酮对胰淀粉酶活性的影响，科研人员进行了相关实验，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 胰淀粉酶的活性可用单位时间内麦芽糖的产生量表示
B. 该实验的自变量是Cl-的有无和反应时间
C. 实验结果表明Cl-可提高胰淀粉酶降低反应活化能的能力
D. 实验结果表明黄酮可降低Cl-对胰淀粉酶活性的促进作用
【答案】AC
【解析】
【分析】由图示可知，对照组为无Cl-和无黄酮处理；其余为实验组，据图可知，无Cl-处理组的还原性糖的产量小于有Cl-处理组。
【详解】A、胰淀粉酶可将淀粉分解为麦芽糖，胰淀粉酶的活性可用单位时间内麦芽糖的产生量表示，A正确；
B、根据处理方式可知，该实验的自变量是Cl-的有无和黄酮的有无，B错误；
C、据图可知，无Cl-处理组的还原性糖的产量小于有Cl-处理组，有Cl-处理组，反应速率更快，说明Cl-可提高胰淀粉酶降低反应活化能的能力，C正确；
D、无Cl-处理的条件下，无论是否有黄酮处理，还原性糖的产量几乎相同（有Cl-处理的条件下，无论是否有黄酮处理，还原性糖的产量也几乎相同），说明黄酮对Cl-对胰淀粉酶活性的促进作用没有影响，D错误。
故选AC。
17. 为研究环境因素对某植物光合作用强度的影响，利用图甲实验装置若干组（密闭小室内的CO2充足，光照不影响温度变化），在相同温度下进行一段时间后测量每个小室中的气体释放量，绘制曲线图乙。下列说法错误的是（ ）
A. 该实验中植物释放的气体始终是O2
B. 当距离小于a时，限制光合作用的主要因素是光照强度
C. 当距离为c时，该植物叶肉细胞的光合速率大于呼吸速率
D. 当距离由b突然变为d时，短时间内叶绿体中C5的含量增多
【答案】ABD
【解析】
【分析】影响光合作用的环境因素：
1、温度对光合作用的影响：在最适温度下酶的活性最强，光合作用强度最大，当温度低于最适温度，光合作用强度随温度的增加而加强，当温度高于最适温度，光合作用强度随温度的增加而减弱。
2、二氧化碳浓度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随二氧化碳浓度的增加而增强．当二氧化碳浓度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。
3、光照强度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随光照强度的增加而增强．当光照强度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。
【详解】A、当光源与密闭小室距离大于c时，呼吸速率大于光合速率，植物释放的气体是CO2，在距离小于c时，光合速率大于呼吸速率，植物释放的气体是O2，A错误；
B、由曲线可知，当距离小于a时，随着距离增大，光照强度减弱，但气体释放量不变，因此限制光合作用的因素不是光照强度，B错误；
C、实验测的是整个植株气体释放速率，当距离为c时，整个植株的光合速率等于呼吸速率，此时，叶肉细胞的光合速率大于叶肉细胞的呼吸速率，C正确；
D、当距离由b突然变为d时，光照强度减弱，光反应产生的ATP和NADPH减少，C3的还原减少，C5生成量减少，短时间内叶绿体中C5的含量减少，D错误。
故选ABD。
18. 《诗经》中“十月获稻，为此春酒，以介眉寿”记录了古人用新鲜稻米酿酒，以求延年益寿的习俗。米酒酿造主要包括蒸米、拌酒曲、发酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉转化成葡萄糖）。下列说法错误的是（ ）
A. 酿造米酒的过程中，酵母菌可进行有氧呼吸和无氧呼吸
B. 蒸米后通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物
C. 米酒发酵初期，霉菌可以通过糖化作用，为酵母菌的呼吸作用提供底物
D. 腐乳发酵过程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用
【答案】D
【解析】
【分析】葡萄酒制作过程中，将装配好的发酵瓶进行发酵，当发酵瓶中停止出现气泡，表示发酵完毕。若发酵过程温度高于30℃，则需及时采取降温措施，主要为了防止影响酒的风味。
【详解】A、参与果酒制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，所以米酒发酵过程中，酵母菌进行细胞呼吸的类型是有氧呼吸和无氧呼吸，A正确；
B、蒸米后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物，B正确；
C、酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉转化成葡萄糖，葡萄糖能为醇母菌的呼吸作用提供底物，C正确；
D、腐乳发酵过程中，起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D错误。
故选D。
19. 下列有关PCR技术与体内DNA复制比较的叙述，错误的是（ ）
A. 都需要在温和且相对稳定的条件下进行
B. 都需要解旋酶破坏氢键来实现解旋
C. 都具有边解旋边复制和半保留复制的特点
D. 子链的延伸方向都相同，均为5'端→3'端
【答案】ABC
【解析】
【分析】体内DNA复制需要的基本条件：
（1）模板：解旋后的两条DNA单链；
（2）原料：四种脱氧核苷酸；
（3）能量：ATP；
（4）酶：解旋酶、DNA聚合酶等。
【详解】A、PCR技术包括高温变性，低温复性和中温延伸三个过程，即PCR不是在温和且相对稳定的条件下进行的，A错误；
B、在细胞内进行DNA复制时，需要解旋酶打开双链之间的氢键，在体外进行PCR扩增时，利用高温即加热至90-95℃通过变性破坏双链之间的氢键，B错误；
C、细胞内进行DNA复制时是边解旋边复制的，在体外进行利用PCR技术扩增DNA时是先解链后复制的，即先将亲代DNA受热变性后解链为单链，再降低温度使引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，C错误；
D、DNA体内复制与利用PCR扩增DNA时，子链的延伸方向相同，均为5'端→3'端，D正确。
故选ABC。
20. 人体内6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因
B. 用胃蛋白酶处理皮肤组织使其分散成单个细胞，进行培养
C. 原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D. 单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
【答案】BD
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养的原理是细胞增殖。
【详解】A、由题意可知，原代培养的细胞是基因型为XFXS的女性皮肤组织用酶处理得到的，都含有XF和XS，A正确；
B、因为胃蛋白酶的最适pH为1.5左右，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以不能用胃蛋白酶处理，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，B错误；
C、结合题干，基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶，电泳后只显示一个条带，原代培养的细胞电泳有2个条带，说明同时检测了多个细胞，C正确；
D、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同，表达的基因不一定相同，D错误。
故选BD。
三、非选择题：本题包括5小题，共55分
21. 盐地碱蓬能生活在靠近海滩或者海水与淡水汇合的河口地区，它能在盐胁迫逆境中正常生长，与其根细胞独特的转运机制有关。下图是盐地碱蓬根细胞参与抵抗盐胁迫的示意图（HKT1、AKT1、SOS1和NHX均为转运蛋白）。请回答问题：
（1）液泡中能储存较高浓度的某些特定物质，这体现了液泡膜____________的特点，液泡膜的基本骨架是____________。
（2）据图分析，图示各结构中H+浓度分布存在差异，该差异主要由位于____________上的H+-ATP泵转运H+来维持的。为减少Na+对胞内代谢的影响，这种H+分布特点可使根细胞将Na+转运到细胞膜外、液泡内，该过程中转运Na+所需的能量来自于____________。
（3）在高盐胁迫下，当盐浸入到根周围的环境时，Na+借助通道蛋白HKT1以____________方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能，进而调节细胞中Na+、K+的比例。由此推测，细胞质基质中的Ca2+对HKT1和AKT1的作用依次为____________、____________（填“激活”或“抑制”），使细胞内的蛋白质合成恢复正常。
（4）为验证Ca2+在高盐胁迫下对盐地碱蓬吸收Na+、K+的调节作用，科研小组进行实验：
①实验材料：盐地碱蓬幼苗、一定浓度的高盐培养液M（含NaCl和KCl）、Ca2+转运蛋白抑制剂溶液等。
②实验步骤：
a．取生长发育基本相同的盐地碱蓬幼苗分成甲、乙两组，加入等量一定浓度的高盐培养液M进行培养：
b．甲组加入2mL蒸馏水，乙组加入____________；
c．一段时间后，测定高盐培养液中Na+、K+浓度。
③预期实验结果及结论：与甲组相比，乙组培养液中____________，说明Ca2+在一定程度上能调节细胞中Na+、K+的比例。
【答案】（1） ①. 选择透过性 ②. 磷脂双分子层
（2） ①. 细胞膜和液泡膜 ②. 细胞膜、液泡膜两侧的H+浓度差（H+势能）
（3） ①. 协助扩散 ②. 抑制 ③. 激活
（4） ①. 2mLCa2+转运蛋白抑制剂溶液（或等量的Ca2+转运蛋白抑制剂溶液） ②. Na+浓度较低，K+浓度较高
【解析】
【分析】分析题文、描述题图：在高盐胁迫下，位于细胞膜和液泡膜上的H+-ATP泵，通过主动运输的方式，将细胞质基质中的H+分别转运至细胞外和液泡内，从而细胞和液泡内外的H+浓度分布的差异。H+顺浓度梯度进入细胞和从液泡中出来产生的势能分别将Na+运出根细胞和将Na+运入液泡内。
【小问1详解】
液泡中能储存较高浓度的某些特定物质，这些特定物质（如Na+）是通过主动运输的方式进入液泡中的，这体现了液泡膜具有选择透过性的特点。液泡膜属于生物膜，生物膜的基本骨架是磷脂双分子层。
【小问2详解】
题图显示：位于细胞膜和液泡膜上的H+-ATP泵，通过主动运输的方式，将细胞质基质中的H+分别转运至细胞外和液泡内，从而维持图示各结构中H+浓度分布的差异。H+顺浓度梯度进入细胞产生的势能将Na+运出根细胞，H+顺浓度梯度从液泡中出来产生的势能将Na+运入液泡内。可见，这种H+分布特点可使根细胞将Na+转运到细胞膜外、液泡内，该过程中转运Na+所需的能量来自于细胞膜、液泡膜两侧的H+浓度差（H+势能），进而减少Na+对胞内代谢的影响。
【小问3详解】
在高盐胁迫下，当盐浸入到根周围的环境时，Na+从高浓度的土壤溶液进入低浓度的细胞内，借助通道蛋白HKT1以协助扩散方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能，进而调节细胞中Na+、K+的比例，使细胞内的蛋白质合成恢复正常，说明细胞质基质中的Ca2+通过抑制HKT1的作用来阻止Na+进入细胞、通过激活AKT1的作用来促进K+进入细胞。
【小问4详解】
验证Ca2+在高盐胁迫下对盐地碱蓬吸收Na+、K+的调节作用，自变量是Ca2+转运蛋白抑制剂的有无，因变量是高盐培养液中Na+、K+浓度，而对实验结果有影响的无关变量应控制相同且适宜。据此结合实验设计应遵循的对照原则分析实验步骤可推知：乙组应加入2mLCa2+转运蛋白抑制剂溶液（或等量的Ca2+转运蛋白抑制剂溶液）。由于该实验是验证性实验，其结论是已知的，即在高盐胁迫下，细胞质基质中的Ca2+对HKT1和AKT1的作用依次为抑制、激活，但Ca2+转运蛋白抑制剂能够抑制Ca2+转运蛋白的作用，进而使乙组根细胞借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能受到抑制。所以预期的实验结果及结论是：与甲组相比，乙组培养液中Na+浓度较低，K+浓度较高，说明Ca2+在一定程度上能调节细胞中Na+、K+的比例。
22. 植物细胞能将胞内的ATP通过膜泡运输释放到胞外，形成胞外ATP（eATP）。eATP可通过与相应受体结合，调节植物细胞的生长发育、抗病反应等生理活动。为探究eATP对光合速率的影响，科研小组用去离子水配制了适宜浓度的eATP溶液，并用其处理豌豆叶片。一段时间后，测定叶片净光合速率（μmolm-2·s-1）和胞间CO2浓度（μmolmo-1）等变化，结果如图所示。回答下列问题：
（1）该实验对照组的处理方式为____________。
（2）测定净光合速率是以单位时间、单位叶面积的CO2量____________为指标，测定的数据____________（填“需要”或“不需要”）加上遮光处理的数据。
（3）根据题意可知，植物细胞释放ATP的方式是____________；AMP-PCP作为一种eATP抑制剂，能有效抑制eATP对细胞的调节作用，但却不改变细胞外的eATP浓度，推测其可能的作用是____________。
（4）活性氧（ROS）能促进植物气孔的开放，NADPH氧化酶是ROS产生的关键酶。科研人员用eATP处理NADPH氧化酶基因缺失突变体，发现净光合速率与对照组基本一致。结合图示实验结果，试推测eATP调节植物光合速率的机制：____________。
【答案】（1）用等量的去离子水处理豌豆的叶片
（2） ①. 吸收 ②. 不需要
（3） ①. 胞吐 ②. AMP-PCP阻止eATP与受体结合，使eATP不能发挥信息调节作用
（4）eATP通过调节NADPH氧化酶基因的表达，促进活性氧（ROS）的合成来促进气孔的开放，从而提高光合速率
【解析】
【分析】光合作用的光反应阶段（场所是叶绿体的类囊体膜上）：水的光解产生NADPH与氧气，以及ATP的形成。光合作用的暗反应阶段（场所是叶绿体的基质中）CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP和NADPH的作用下还原生成有机物。
【小问1详解】
实验组用去离子水配制了适宜浓度的eATP溶液，并用其处理菜豆叶片；故对照组可以用等量的去离子水处理菜豆的叶片。
【小问2详解】
净光合速率是指植物单位时间、单位叶面积所吸收的二氧化碳量或释放的氧气量，是总光合速率减去呼吸速率的值，遮光处理的数据为呼吸速率的值，故测定净光合速率的数据不需要加上遮光处理的数据。
【小问3详解】
题中信息显示，植物细胞能将胞内的ATP通过膜泡运输释放到胞外，显然植物细胞是通过胞吐方式释放ATP的。eATP调节作用的发挥需要与相应的受体发生特异性结合，但却不改变细胞外的eATP浓度，而AMP-PCP作为一种eATP抑制剂，能有效抑制eATP对细胞的调节作用，却不改变细胞外的eATP浓度，说明该抑制剂发挥作用是通过减少eATP的受体，或减弱eATP的受体的活性实现的，也可能是与eATP竞争受体结合，进而抑制了eATP与受体的结合，使eATP不能发挥信息调节作用。
【小问4详解】
活性氧（ROS）能促进植物叶肉细胞气孔的开放，NADPH氧化酶是ROS产生的关键酶，一般而言，酶的化学本质绝大多数是蛋白质，蛋白质是在细胞质基质中的核糖体上合成的，因此，该酶是在细胞中的核糖体上合成的。题(2)实验表明cATP可通过调节气孔导度来调节植物光合速率，而活性氧(ROS）也能促进植物叶肉细胞气孔的开放，活性氧(ROS)的合成需要NADPH氧化酶的催化，当NADPH氧化酶缺失，则活性氧（ROS）无法合成，植物叶肉细胞气孔的开放无法增加，科研人员用eATP处理NADPH氧化酶基因缺失突变体，发现净光合速率与对照组基本一致。综合分析可知： eATP通过调节NADPH氧化酶基因的表达，促进活性氧（ROS）的合成，进而促进植物叶肉细胞气孔的开放，提升了叶肉细胞的气孔导度，进而实现了对光合速率的提高。
23. 请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题：
（1）某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是________________________。
（2）通过如图乙所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器____________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为60个、55个、56个、57个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为____________个，该数据往往比活菌的实际数目____________（填“多”或“少”），理由是________________________。
（3）小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，发酵产物酒精可用____________检验，检验的原理是____________。
（4）发酵过程中由于密封不严，果酒放置一段时间后会变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是____________。
【答案】（1）摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快
（2） ①. 灼烧冷却 ②. 5.7×107 ③. 少 ④. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3） ①. 重铬酸钾溶液 ②. 橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色
（4）醋酸菌在液面大量繁殖而形成的
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
根据题意可知，摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快，因此繁殖的速度和总量越高，种群密度最大。
【小问2详解】
在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧（杀死杂菌）冷却后（以免杀死菌种）才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了105倍（M），同时选择菌落数目在30~300的进行计数，所以每毫升含菌数为（60+55+56+57）÷4÷0.1×105=5.7×107个。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法进行计数时，统计的数量往往比活菌的实际数目少。
【小问3详解】
橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色，因此葡萄酒制作是否成功，发酵后需用重铬酸钾溶液进行检测。
【小问4详解】
在变酸的酒的表面可观察到一层菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。
24. 埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，威胁人类健康。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如下图所示。回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体涉及的细胞工程技术有____________（答出2点）。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加____________以补充细胞生长所需的未知营养物质。
（2）使用特定的选择培养基经筛选1获得杂交瘤细胞时，通过该培养基可以淘汰____________细胞。筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是____________。两次筛选后的所需细胞群应具备的特点是____________。
（3）抗EBOV单克隆抗体可用于检测血浆中EBOV的含量，检测原理如下图所示。
①检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），目的是让待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体____________结合。
②保温一段时间后洗涤，再向检测体系中加入一定量的白色底物，若检测体系蓝色越深，则说明血浆中EBOV的含量____________。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养、动物细胞融合 ②. 血清
（2） ①. 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（B细胞、骨髓瘤细胞和自身融合细胞） ②. 抗原与抗体特异性结合 ③. 既能无限增殖，又能产生所需抗体
（3） ①. 竞争性 ②. 越少
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
单克隆抗体制备过程中需要将免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，涉及动物细胞融合技术，还需要培养骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞等，因此还涉及动物细胞培养技术。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加动物血清等天然成分以补充细胞生长所需的未知营养物质。
【小问2详解】
筛选1目的是选择杂交瘤细胞，因此该培养基可以淘汰未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（B细胞、骨髓瘤细胞和自身融合细胞）细胞。筛选2的目的是获得所需的细胞群，即获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，检测方法是抗原抗体杂交法，故筛选所依据的基本原理是抗原与抗体特异性结合。两次筛选后的所需细胞群应具备既能无限增殖，又能产生所需抗体的特点。
【小问3详解】
①根据图示反应原理，酶标记抗原和待测抗原都能与抗EBOV单克隆抗体特异性结合，即让待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合抗EBOV单克隆抗体。
②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅，反之若检测体系蓝色越深，则说明待测抗原中目标抗原越少，即血浆中NP蛋白（或EBOV）含量越少。
25. 如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使大肠杆菌的菌落呈蓝色，否则菌落为白色。EcoRI、PvuI为两种限制酶，质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请回答：
（1）利用PCR技术对一个目的基因扩增n次，需要____________对引物，热稳定DNA聚合酶能从引物的____________端开始连接脱氧核苷酸，从而获得大量目的基因D。
（2）据图分析，质粒A、C不能作为目的基因D的载体，理由分别是________________________。将目的基因D与质粒B进行重组，应该选用的酶有____________。
（3）在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因D是否重组到质粒中，使用EcoRI处理重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.6kb和3.1kb，或者____________kb和____________kb的片段，则可判断质粒B已与目的基因D重组成功。
（4）利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中，筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是：在含有________________________的培养基上培养，形成____________色菌落的为导入重组质粒的受体细胞。
（5）下列关于基因工程常用运载体——质粒的说法正确的是____________。
A. 使用质粒作为运载体可避免目的基因被分解
B. 质粒只有与目的基因重组后才能进入细胞
C. 质粒上具有1个至多个限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接
D. 质粒的复制和表达也遵循中心法则
【答案】（1） ①. 2n -1 ②. 3’
（2） ①. （质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割 ②. PvuⅠ和DNA连接酶
（3） ①. 0.6 ②. 4.1
（4） ①. 氨苄青霉素和X-gal ②. 白 （5）ACD
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，利用PCR技术对一个目的基因扩增n次，则消耗2n–1对引物。耐高温的DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
【小问2详解】
由题图可知，质粒A缺乏标记基因，质粒C复制原点会被限制酶切割，故一般不能选择质粒A、C作为载体。由于目的基因的两端都有PvuⅠ的切割位点，而EcoRⅠ会破坏目的基因，故要获取目的基因，应该选用PvuⅠ切割，再用DNA连接酶将目的基因D与质粒B的粘性末端进行连接。
【小问3详解】
将图中的目的基因与质粒B进行重组，构建基因表达载体后，要检查目的基因是否重组到质粒中，可以使用EcoRⅠ酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。由于目的基因和载体用一种酶进行切割，重组质粒（含2个EcoRⅠ酶位点）会出现正向连接和反向连接两种类型，质粒B中EcoRⅠ酶切位点与PvuⅠ酶切位点之间的距离为0,1Kb，重组质粒中2个EcoRⅠ酶切点之间的最短距离可能是0.1+0.5=0.6Kb或0.1+1.5=1.6Kb，重组质粒长度为：2.7+2=4.7Kb，故EcoRⅠ酶切后，电泳图谱中出现长度4.1kb和0.6kb片段或者3.1kb和1.6kb的片段，说明重组质粒构建成功。
【小问4详解】
由题意可知，重组质粒中的lacZ基因会被破坏，但保留氨苄青霉素抗性基因，故若选择自身不含lacZ基因并对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，则未成功导入重组质粒的大肠杆菌无法存活，而成功导入重组质粒的可以存活，能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌。
【小问5详解】
A、质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子，使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解，A正确；
B、质粒运载体自身也能进入细胞，B错误；
C、质粒上具有1个至多个限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接，没有限制酶就无法使用质粒运载体，C正确；
D、质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则，D正确。
故选ACD。
2022—2023学年高二下学期教学质量检测
生物试题2023.7
注意事项：
1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，考生务必将姓名、班级等个人信息填写在答题卡指定位置。
3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答。超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合要求。
1. 从活体珊瑚虫中，发现一种绿硫细菌，专性厌氧，能进行不产氧的光合作用和固氮作用。下列有关这种绿硫细菌说法错误的是（ ）
A. 具有核糖体，能合成蛋白质
B. 没有核膜包围的细胞核，有DNA
C. 没有叶绿体和线粒体，能进行光合作用和有氧呼吸
D. 培养绿硫细菌时不需要提供有机碳源和有机氮源
【答案】C
【解析】
【分析】1、绿硫细菌是原核细胞生物，无叶绿体，但能够进行光合作用，是自养生物。
2、光合作用的实质是利用光能把二氧化碳和水合成有机物，产生氧气。
【详解】A、绿硫细菌是原核生物，有核糖体这一唯一的细胞器，能合成蛋白质，A正确；
B、绿硫细菌是原核生物，没有核膜包围的细胞核，但有DNA和RNA，B正确；
C、绿硫细菌是原核生物，没有叶绿体和线粒体，专性厌氧，能进行不产氧的光合作用，不能进行有氧呼吸，C错误；
D、绿硫细菌为自养生物，具有固氮作用，因此培养绿硫细菌时不需要提供有机碳源和有机碳源，D正确。
故选C。
2. 蛋白质与核酸一直是科学家研究的热点领域之一。下列说法错误的是（ ）
A. 蛋白质与核酸都属于生物大分子
B. 真核生物和原核生物的遗传物质是DNA，病毒的遗传物质是DNA或RNA
C. 细胞质基质、线粒体、叶绿体和细胞核中均有蛋白质和核酸
D. 水通道蛋白与水分子结合、tRNA与氨基酸结合，进行有关物质的运输
【答案】D
【解析】
【分析】核酸是遗传信息的携带者，其基本构成单位是核苷酸。核酸根据所含五碳糖的不同分为DNA和RNA，核酸对于生物的遗传变异和蛋白质在的生物合成中具有重要作用，不同生物的核酸中的遗传信息不同。
【详解】A、蛋白质是由氨基酸经脱水缩合形成的，核酸是由核苷酸经脱水缩合形成的，两者都属于生物大分子，A正确；
B、真核生物和原核生物都是细胞生物，遗传物质都是DNA；病毒的遗传物质是RNA或者DNA，B正确；
C、线粒体和叶绿体是半自主性细胞器，都含有DNA、RNA、蛋白质；染色体主要由DNA和蛋白质组成；细胞核中的DNA转录形成的RNA可以进入细胞质基质，因此细胞质基质、线粒体、叶绿体和细胞核中均有蛋白质和核酸，C正确；
D、通道蛋白只容许与自身通道的直径和形状相适配、大小和电荷相适宜的分子或离子通过。分子或离子通过通道蛋白时，不需要与通道蛋白结合；tRNA与氨基酸结合，参与遗传信息的翻译过程，D错误。
故选D。
3. 真核生物的生物膜将细胞内分隔成不同的“区室”，有利于细胞代谢高效、有序地进行，下列关于细胞内的不同“区室”说法正确的是（ ）
A. 植物细胞的色素分子只储存于双层膜包围成的区域中
B. 由双层膜包围而成的区域均既可产生ATP，也可消耗ATP
C. 产生水的反应既可发生在双层膜包围的区域，也可发生在无膜包围的区域
D. 与胰岛B细胞相比，口腔上皮细胞由单层膜包围的区域面积较大
【答案】C
【解析】
【分析】生物膜系统是指在真核细胞中，细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等由膜围绕而成的细胞器，在结构和功能上是紧密联系的统一整体，生物膜系统在成分和结构上相似，在结构和功能上相互联系。细胞中，双层膜的结构有细胞核、线粒体、叶绿体，无膜结构的有中心体和核糖体。
【详解】A、植物细胞的色素除了分布在双层膜的叶绿体中，还分布在单层膜的液泡中，A错误；
B、由双层膜包围而成的区域，可以是线粒体、叶绿体 、细胞核，其中细胞核只消耗ATP，不产生ATP，B错误；
C、线粒体中有氧呼吸第三阶段可以产生水，叶绿体中进行的光合作用也可以产生水，细胞核中合成DNA也产生水，核糖体无膜包围，在核糖体中氨基酸脱水缩合可形成多肽，C正确；
D、胰岛B细胞分泌胰岛素，新陈代谢比口腔上皮细胞旺盛，故胰岛B细胞中内质网、高尔基体膜面积更大，D错误。
故选C。
4. 生物膜上能运输H+的载体蛋白统称为质子泵，常见的质子泵有3类：V型质子泵，可利用ATP水解的能量，将H+逆浓度梯度泵入细胞器：②F型质子泵，可利用H+顺浓度梯度的势能合成ATP：③P型质子泵，在水解ATP的同时发生磷酸化，将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，该质子泵能被药物W特异性抑制。下列说法错误的是（ ）
A. 溶酶体膜上常见V型质子泵，利于维持溶酶体内的酸性环境
B. F型质子泵常见于叶绿体内膜和线粒体内膜
C. P型质子泵具有酶的功能，可以催化特殊化学键断裂
D. 药物W可有效缓解胃酸过多导致的胃溃疡
【答案】B
【解析】
【分析】主动运输是需要消耗能量的过程，而且是逆浓度梯度运输物质的过程。V型质子泵可将H+逆浓度梯度泵入细胞器，属于主动运输。
【详解】A、V型质子泵可利用ATP水解的能量，将H+逆浓度梯度泵入细胞器，溶酶体内的pH小于细胞质基质，因此溶酶体膜上常见V型质子泵，利于维持溶酶体内的酸性环境，A正确；
B、F型质子泵，可利用H+顺浓度梯度的势能合成ATP，线粒体内膜和叶绿体类囊体薄膜上可合成ATP，分布有F型质子泵，叶绿体内膜不能合成ATP，不含F型质子泵，B错误；
C、P型质子泵，在水解ATP的同时发生磷酸化，将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，说明P型质子泵能作为酶催化ATP水解，使远离A的特殊化学键断裂，C正确；
D、P型质子泵能将H+泵出细胞并维持稳定的H+梯度，药物W能特异性的抑制P型质子泵，使H+不能泵出细胞，因此药物W可有效缓解胃酸过多导致的胃溃疡，D正确。
故选B。
5. 新鲜菠萝肉中的菠萝蛋白酶使人在直接食用时会“蜇嘴”，某生物兴趣小组进行实验探究温度及NaCl浓度对菠萝蛋白酶活性的影响，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 菠萝蛋白酶会“蜇嘴”，与其分解口腔黏膜细胞的蛋白质有关
B. 不同温度下菠萝蛋白酶活性可能相同
C. 沸水处理后的菠萝蛋白酶不会与双缩脲试剂发生紫色反应
D. 该实验中不同浓度的NaCl溶液对菠萝蛋白酶活性都是抑制作用
【答案】C
【解析】
【分析】如图可以看出在不同温度下菠萝蛋白酶的活性不同，从0℃到40℃逐渐增强，从40℃到100℃逐渐渐弱，甚至失活。随着NaCl浓度升高，菠萝蛋白酶的活性减弱。
【详解】A、酶具有专一性，菠萝中的蛋白酶能分解口腔黏膜细胞的蛋白质分子，所以直接食用时会“蜇嘴”，A正确；
B、在最适温度的两侧，存在催化活性相同的两个不同温度，所以不同温度下菠萝蛋白酶活性可能相同，B正确；
C、沸水处理后的菠萝蛋白酶会变性失活，空间结构改变，但肽键没有断裂，因此仍会与双缩脲试剂发生紫色反应，C错误；
D、与NaCl溶液为0时比较可知，随着NaCl浓度升高，菠萝蛋白酶的活性逐渐减弱，说明不同浓度的NaCl溶液对菠萝蛋白酶活性都是抑制作用，D正确。
故选C。
6. 北欧鲫鱼在寒冷条件下，通过向体外排出酒精来延缓周围水体结冰，其细胞呼吸过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 过程①能产生CO2
B 过程①②③均能生成ATP
C. 过程①③均发生在线粒体中
D. 北欧鲫鱼体内会发生丙酮酸和乳酸的相互转化
【答案】D
【解析】
【分析】无氧呼吸分为两个阶段，第一阶段与有氧呼吸完全相同；第二阶段发生于细胞质基质，丙酮酸分解为酒精和二氧化碳或产生乳酸，不产生能量。
【详解】A、过程①为无氧呼吸产生乳酸的过程，该过程没有CO2产生，A错误；
B、过程①为产生乳酸的无氧呼吸过程，该过程有ATP产生；过程②为细胞呼吸的第一阶段，该过程有ATP产生；过程③为产酒精的无氧呼吸的第二阶段，该过程不产生ATP，B错误；
C、过程①②③均发生在细胞质基质中，C错误；
D、由图可知，丙酮酸可通过无氧呼吸第二阶段转化为乳酸，乳酸也可转化为丙酮酸，说明北欧鲫鱼体内会发生丙酮酸和乳酸相互转化，D正确。
故选D。
7. 下图表示植物叶肉细胞中光合作用、有氧呼吸的过程及两者之间的联系。①~⑤表示过程，甲~丁表示物质。下列说法正确的是（ ）
A. 乙、丙代表的物质分别是CO2、丙酮酸
B. 发生在生物膜上的过程有①③⑤
C. 过程①产生的物质中，能为过程②提供能量的是NADH和ATP
D. 用18O同时标记H2O和CO2，可探究光合产物O2中O元素的来源
【答案】A
【解析】
【分析】分析图示可知，①为光反应，②为暗反应，④是有氧呼吸第一阶段，③是有氧呼吸第二阶段，⑤是有氧呼吸第三阶段。
【详解】A、①过程能吸收光能，表示光反应，②过程可形成葡萄糖，为暗反应，④利用葡萄糖，生成丙和还原氢，是有氧呼吸第一阶段，丙代表丙酮酸，③过程利用丙和水生成乙和还原氢，为有氧呼吸第二阶段，则乙是CO2，A正确；
B、①为光反应，②为暗反应，④是有氧呼吸第一阶段，③是有氧呼吸第二阶段，⑤是有氧呼吸第三阶段。光反应在类囊体薄膜上进行，有氧呼吸第三阶段在线粒体内膜上进行，因此发生在生物膜上的过程有①⑤，B错误；
C、过程①光反应产生的物质中，能为过程②暗反应提供能量的是NADPH和ATP，C错误；
D、用18O同时标记H2O和CO2，不能探究光合产物O2中O元素的来源，应用18O分别标记H2O和CO2，才可探究光合产物O2中O元素的来源，D错误。
故选A。
8. 用密闭的培养瓶培养等量的绿藻（单细胞藻类），得到4组培养液，将培养液置于4种不同温度下（t1
A. t1黑暗条件下，绿藻细胞产生ATP场所为细胞质基质和线粒体
B. t2光照条件下绿藻细胞群体光合作用每小时产生的氧气量为6mg
C. t3条件下的光下O2增加值比t4高，这与t3温度下的呼吸速率比t4低有关
D. t4条件下绿藻细胞群体的净光合速率与呼吸速率相等
【答案】B
【解析】
【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和NADH，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和NADH，合成少量ATP；第三阶段是氧气和NADH反应生成水，合成大量ATP。
【详解】A、t1黑暗条件下，绿藻细胞只进行呼吸作用，产生ATP的场所为细胞质基质和线粒体，A正确；
B、图中光下O2增加值表示净光合速率，黑暗中O2消耗值表示呼吸速率，光合速率=净光合速率+呼吸速率，故t2光照条件下绿藻细胞群体光合作用每小时产生的氧气量为6+4=10mg，B错误；
C、光下O2增加值表示净光合速率，且净光合速率=光合速率-呼吸速率，再结合图可知，t3条件下的光下O2增加值比t4高，这与t3温度下的呼吸速率比t4低有关，C正确；
D、图中光下O2增加值表示净光合速率，黑暗中O2消耗值表示呼吸速率，再结合图可知，t4条件下绿藻细胞群体的净光合速率与呼吸速率相等，D正确。
故选B。
9. 下列有关生物学实验材料与方法的说法，错误的是（ ）
A. 观察质壁分离和复原现象能用成熟的叶肉细胞代替洋葱外表皮细胞
B. “绿叶中色素的提取与分离”和“菊花的组织培养”两个实验中，酒精作用不同
C. 在“探究酶专一性”实验中，可以使用斐林试剂来检测淀粉与蔗糖是否被水解
D. DNA粗提取过程中玻璃棒上未出现明显的DNA丝状物，因为DNA溶解在酒精中
【答案】D
【解析】
【分析】植物细胞质壁分离和复原的条件有：①必须是活细胞；②细胞液与外界溶液必须有浓度差；③植物细胞必须有大的液泡（成熟的植物细胞），且液泡最好有颜色便于观察。
【详解】A、观察质壁分离和复原现象能用成熟的叶肉细胞代替洋葱外表皮细胞，原因是成熟的叶肉细胞含有大液泡，且含有的叶绿体可作为液泡大小的参照物，A正确；
B、“绿叶中色素的提取与分离”的实验中需用无水酒精来提取色素，“菊花的组织培养”的实验中需用体积分数70%的酒精对外植体进行消毒，B正确；
C、在“探究酶的专一性”实验中，淀粉酶可以催化淀粉水解为葡萄糖，但不能催化蔗糖水解，因此可用斐林试剂检测还原糖的存在，C正确；
D、DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，D错误。
故选D。
10. 为宣传正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，菏泽某中学的同学们进行了相关实验。将牛肉膏蛋白胨培养基置于距正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，再进行微生物培养和计数，下列说法错误的是（ ）
A. 接种前要判断固体培养基是否被污染，不用接种无菌水培养检测
B. 实验中还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照
C. 实验者对培养基进行处理后，放入37℃恒温培养箱中培养1~2天
D. 培养结束后可根据菌落的形状、大小、颜色等特征确定微生物的数量
【答案】D
【解析】
【分析】菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的。这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
【详解】A、要验证培养基是否被污染，应将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察是否有菌落产生，A正确；
B、该实验中的实验组是正确佩戴口罩的实验者口部前方50cm处，然后对着培养基讲话1min或咳嗽2次，为了确保实验的准确性，还应设置不戴口罩直接讲话或咳嗽进行实验对照，B正确；
C、本实验是为了确定正确佩戴口罩可降低呼吸道传染疾病的风险，而人体的温度约为37℃，因此应设置与人体相同的温度，即在37℃恒温培养箱中培养1～2天，C正确；
D、由于不同微生物的菌落特征不同，因此培养结束后可根据菌落的形状、大小、色泽等特征确定微生物种类，但不能确定微生物数量，D错误。
故选D。
11. 下列关于传统发酵技术、发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A. 缺乏糖源时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛之后再氧化为乙酸
B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为微生物饲料
C. 灭菌是发酵工程的中心环节，发酵罐内要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件
D. 微生物的纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，在该过程中要及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
【详解】A、氧气充足、糖源不足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛之后再氧化为乙酸，A正确；
B、单细胞蛋白是微生物菌体，并不是通过发酵工程从微生物细胞中提取获得的蛋白质，B错误；
C、发酵罐内发酵是发酵的中心环节，C错误；
D、微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，D错误。
故选A。
12. 科研人员利用植物体细胞杂交技术，获得了番茄和茄子的杂种植株，培育过程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. ①过程可用纤维素酶和胰蛋白酶处理，②过程可用聚乙二醇诱导
B. ②过程中细胞融合后，需要在筛选杂种细胞的培养基中添加卡那霉素
C. ③过程包括脱分化和再分化，前者要光照处理，后者要遮光处理
D. 在组织培养的操作中，要对生物材料和培养基进行严格灭菌处理
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特的优势。
植物组织培养是指将离体的植物器管、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【详解】A、①过程可使用纤维素酶和果胶酶处理来除去细胞壁，以获得原生质体，②过程可用聚乙二醇诱导，A错误；
B、茄子原生质体不能在含有卡那霉素的培养基上生长，番茄原生质体经辐射钝化后失去增殖能力，只有二者融合后的原生质体才能在含有卡那霉素的培养基上增殖，因此筛选杂种细胞的培养基要添加适量的卡那霉素，B正确；
C、③过程包括脱分化和再分化，脱分化要遮光，再分化要光照，C错误；
D、在组织培养的操作中，不能对生物材料进行灭菌处理，D错误。
故选B。
13. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法错误的是（ ）
A. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞
B. ②过程应选用处于减数分裂II中期的卵母细胞
C. ③过程中可使用具有感染能力的病毒来诱导细胞融合
D. ④过程需经过胚胎移植才能获得克隆鼠
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞（简称iPS），①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞转化为iPS细胞，A正确；
B、②过程为获取去核的卵母细胞，该过程应选用处于减数分裂II中期的卵母细胞，B正确；
C、③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞发生融合所用的是灭活的病毒，C错误；
D、胚胎移植技术是胚胎工程的最后一道工序，④过程需经过胚胎移植才能获得克隆鼠，D正确。
故选C。
14. DNA测序时，先将待测单链DNA模板、引物、有关酶、4种脱氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G）均加入4个试管中，再分别加入ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP。ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸，从而形成不同长度的DNA片段。分离4支试管中所有DNA片段，分泳道进行电泳（其分离原理仅依据分子量大小），结果如图所示，则新合成的子链序列为（ ）
A. 5'-GATCCGAAT-3' B. 3'-GATCCGAAT-5'
C. 5'-GGAAACCTT-3' D. 3'-GGAAACCTT-5'
【答案】B
【解析】
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。
【详解】ddNTP的2、3号碳上都脱氧，ddNTP的3号碳上没羟基，参与聚合反应后无法与游离脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，因此ddNTP一旦参与聚合反应，则DNA单链延伸即终止，因此可知左上角的第一个G所在位置为3'端（第一位），依据图中碱基的排序可知，新合成的子链序列为3'-GATCCGAAT-5'。
故选B。
15. 红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列说法错误的是（ ）
A. 用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中，可得到乳腺生物反应器
B. 构建基因表达载体时，需将EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起
C. 该转基因羊中的EPO基因可在羊的乳腺细胞中表达
D. 可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组
【答案】A
【解析】
【分析】转基因动物生产药物：
(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理: 基因的选择性表达)；
(2) 成果：乳腺生物反应器；
(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。
【详解】A、用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中，可得到乳腺生物反应器，A错误；
B、在构建基因表达载体时，需要将EPO基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这样才能使目的基因只在乳腺组织中表达，B正确；
C、EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，可以在羊的乳腺细胞中表达，其他细胞中不表达，C正确；
D、目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组，D正确。
故选A。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有错选得0分。
16. 柑橘中含有较多的黄酮类化合物，具有降血糖、降血脂、抗氧化等作用。为探究Cl-和柑橘中的黄酮对胰淀粉酶活性的影响，科研人员进行了相关实验，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 胰淀粉酶的活性可用单位时间内麦芽糖的产生量表示
B. 该实验的自变量是Cl-的有无和反应时间
C. 实验结果表明Cl-可提高胰淀粉酶降低反应活化能的能力
D. 实验结果表明黄酮可降低Cl-对胰淀粉酶活性的促进作用
【答案】AC
【解析】
【分析】由图示可知，对照组为无Cl-和无黄酮处理；其余为实验组，据图可知，无Cl-处理组的还原性糖的产量小于有Cl-处理组。
【详解】A、胰淀粉酶可将淀粉分解为麦芽糖，胰淀粉酶的活性可用单位时间内麦芽糖的产生量表示，A正确；
B、根据处理方式可知，该实验的自变量是Cl-的有无和黄酮的有无，B错误；
C、据图可知，无Cl-处理组的还原性糖的产量小于有Cl-处理组，有Cl-处理组，反应速率更快，说明Cl-可提高胰淀粉酶降低反应活化能的能力，C正确；
D、无Cl-处理的条件下，无论是否有黄酮处理，还原性糖的产量几乎相同（有Cl-处理的条件下，无论是否有黄酮处理，还原性糖的产量也几乎相同），说明黄酮对Cl-对胰淀粉酶活性的促进作用没有影响，D错误。
故选AC。
17. 为研究环境因素对某植物光合作用强度的影响，利用图甲实验装置若干组（密闭小室内的CO2充足，光照不影响温度变化），在相同温度下进行一段时间后测量每个小室中的气体释放量，绘制曲线图乙。下列说法错误的是（ ）
A. 该实验中植物释放的气体始终是O2
B. 当距离小于a时，限制光合作用的主要因素是光照强度
C. 当距离为c时，该植物叶肉细胞的光合速率大于呼吸速率
D. 当距离由b突然变为d时，短时间内叶绿体中C5的含量增多
【答案】ABD
【解析】
【分析】影响光合作用的环境因素：
1、温度对光合作用的影响：在最适温度下酶的活性最强，光合作用强度最大，当温度低于最适温度，光合作用强度随温度的增加而加强，当温度高于最适温度，光合作用强度随温度的增加而减弱。
2、二氧化碳浓度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随二氧化碳浓度的增加而增强．当二氧化碳浓度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。
3、光照强度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随光照强度的增加而增强．当光照强度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。
【详解】A、当光源与密闭小室距离大于c时，呼吸速率大于光合速率，植物释放的气体是CO2，在距离小于c时，光合速率大于呼吸速率，植物释放的气体是O2，A错误；
B、由曲线可知，当距离小于a时，随着距离增大，光照强度减弱，但气体释放量不变，因此限制光合作用的因素不是光照强度，B错误；
C、实验测的是整个植株气体释放速率，当距离为c时，整个植株的光合速率等于呼吸速率，此时，叶肉细胞的光合速率大于叶肉细胞的呼吸速率，C正确；
D、当距离由b突然变为d时，光照强度减弱，光反应产生的ATP和NADPH减少，C3的还原减少，C5生成量减少，短时间内叶绿体中C5的含量减少，D错误。
故选ABD。
18. 《诗经》中“十月获稻，为此春酒，以介眉寿”记录了古人用新鲜稻米酿酒，以求延年益寿的习俗。米酒酿造主要包括蒸米、拌酒曲、发酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉转化成葡萄糖）。下列说法错误的是（ ）
A. 酿造米酒的过程中，酵母菌可进行有氧呼吸和无氧呼吸
B. 蒸米后通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物
C. 米酒发酵初期，霉菌可以通过糖化作用，为酵母菌的呼吸作用提供底物
D. 腐乳发酵过程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用
【答案】D
【解析】
【分析】葡萄酒制作过程中，将装配好的发酵瓶进行发酵，当发酵瓶中停止出现气泡，表示发酵完毕。若发酵过程温度高于30℃，则需及时采取降温措施，主要为了防止影响酒的风味。
【详解】A、参与果酒制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，所以米酒发酵过程中，酵母菌进行细胞呼吸的类型是有氧呼吸和无氧呼吸，A正确；
B、蒸米后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物，B正确；
C、酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉转化成葡萄糖，葡萄糖能为醇母菌的呼吸作用提供底物，C正确；
D、腐乳发酵过程中，起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D错误。
故选D。
19. 下列有关PCR技术与体内DNA复制比较的叙述，错误的是（ ）
A. 都需要在温和且相对稳定的条件下进行
B. 都需要解旋酶破坏氢键来实现解旋
C. 都具有边解旋边复制和半保留复制的特点
D. 子链的延伸方向都相同，均为5'端→3'端
【答案】ABC
【解析】
【分析】体内DNA复制需要的基本条件：
（1）模板：解旋后的两条DNA单链；
（2）原料：四种脱氧核苷酸；
（3）能量：ATP；
（4）酶：解旋酶、DNA聚合酶等。
【详解】A、PCR技术包括高温变性，低温复性和中温延伸三个过程，即PCR不是在温和且相对稳定的条件下进行的，A错误；
B、在细胞内进行DNA复制时，需要解旋酶打开双链之间的氢键，在体外进行PCR扩增时，利用高温即加热至90-95℃通过变性破坏双链之间的氢键，B错误；
C、细胞内进行DNA复制时是边解旋边复制的，在体外进行利用PCR技术扩增DNA时是先解链后复制的，即先将亲代DNA受热变性后解链为单链，再降低温度使引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，C错误；
D、DNA体内复制与利用PCR扩增DNA时，子链的延伸方向相同，均为5'端→3'端，D正确。
故选ABC。
20. 人体内6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如下图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因
B. 用胃蛋白酶处理皮肤组织使其分散成单个细胞，进行培养
C. 原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D. 单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
【答案】BD
【解析】
【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养的原理是细胞增殖。
【详解】A、由题意可知，原代培养的细胞是基因型为XFXS的女性皮肤组织用酶处理得到的，都含有XF和XS，A正确；
B、因为胃蛋白酶的最适pH为1.5左右，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以不能用胃蛋白酶处理，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，B错误；
C、结合题干，基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体会有一个随机失活，故一个细胞中6-磷酸葡萄糖脱氢酶，电泳后只显示一个条带，原代培养的细胞电泳有2个条带，说明同时检测了多个细胞，C正确；
D、单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂得到的增殖的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同，表达的基因不一定相同，D错误。
故选BD。
三、非选择题：本题包括5小题，共55分
21. 盐地碱蓬能生活在靠近海滩或者海水与淡水汇合的河口地区，它能在盐胁迫逆境中正常生长，与其根细胞独特的转运机制有关。下图是盐地碱蓬根细胞参与抵抗盐胁迫的示意图（HKT1、AKT1、SOS1和NHX均为转运蛋白）。请回答问题：
（1）液泡中能储存较高浓度的某些特定物质，这体现了液泡膜____________的特点，液泡膜的基本骨架是____________。
（2）据图分析，图示各结构中H+浓度分布存在差异，该差异主要由位于____________上的H+-ATP泵转运H+来维持的。为减少Na+对胞内代谢的影响，这种H+分布特点可使根细胞将Na+转运到细胞膜外、液泡内，该过程中转运Na+所需的能量来自于____________。
（3）在高盐胁迫下，当盐浸入到根周围的环境时，Na+借助通道蛋白HKT1以____________方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能，进而调节细胞中Na+、K+的比例。由此推测，细胞质基质中的Ca2+对HKT1和AKT1的作用依次为____________、____________（填“激活”或“抑制”），使细胞内的蛋白质合成恢复正常。
（4）为验证Ca2+在高盐胁迫下对盐地碱蓬吸收Na+、K+的调节作用，科研小组进行实验：
①实验材料：盐地碱蓬幼苗、一定浓度的高盐培养液M（含NaCl和KCl）、Ca2+转运蛋白抑制剂溶液等。
②实验步骤：
a．取生长发育基本相同的盐地碱蓬幼苗分成甲、乙两组，加入等量一定浓度的高盐培养液M进行培养：
b．甲组加入2mL蒸馏水，乙组加入____________；
c．一段时间后，测定高盐培养液中Na+、K+浓度。
③预期实验结果及结论：与甲组相比，乙组培养液中____________，说明Ca2+在一定程度上能调节细胞中Na+、K+的比例。
【答案】（1） ①. 选择透过性 ②. 磷脂双分子层
（2） ①. 细胞膜和液泡膜 ②. 细胞膜、液泡膜两侧的H+浓度差（H+势能）
（3） ①. 协助扩散 ②. 抑制 ③. 激活
（4） ①. 2mLCa2+转运蛋白抑制剂溶液（或等量的Ca2+转运蛋白抑制剂溶液） ②. Na+浓度较低，K+浓度较高
【解析】
【分析】分析题文、描述题图：在高盐胁迫下，位于细胞膜和液泡膜上的H+-ATP泵，通过主动运输的方式，将细胞质基质中的H+分别转运至细胞外和液泡内，从而细胞和液泡内外的H+浓度分布的差异。H+顺浓度梯度进入细胞和从液泡中出来产生的势能分别将Na+运出根细胞和将Na+运入液泡内。
【小问1详解】
液泡中能储存较高浓度的某些特定物质，这些特定物质（如Na+）是通过主动运输的方式进入液泡中的，这体现了液泡膜具有选择透过性的特点。液泡膜属于生物膜，生物膜的基本骨架是磷脂双分子层。
【小问2详解】
题图显示：位于细胞膜和液泡膜上的H+-ATP泵，通过主动运输的方式，将细胞质基质中的H+分别转运至细胞外和液泡内，从而维持图示各结构中H+浓度分布的差异。H+顺浓度梯度进入细胞产生的势能将Na+运出根细胞，H+顺浓度梯度从液泡中出来产生的势能将Na+运入液泡内。可见，这种H+分布特点可使根细胞将Na+转运到细胞膜外、液泡内，该过程中转运Na+所需的能量来自于细胞膜、液泡膜两侧的H+浓度差（H+势能），进而减少Na+对胞内代谢的影响。
【小问3详解】
在高盐胁迫下，当盐浸入到根周围的环境时，Na+从高浓度的土壤溶液进入低浓度的细胞内，借助通道蛋白HKT1以协助扩散方式大量进入根部细胞，同时抑制了K+进入细胞，导致细胞中Na+、K+的比例异常，使细胞内的酶失活，影响蛋白质的正常合成。盐地碱蓬的根细胞会借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能，进而调节细胞中Na+、K+的比例，使细胞内的蛋白质合成恢复正常，说明细胞质基质中的Ca2+通过抑制HKT1的作用来阻止Na+进入细胞、通过激活AKT1的作用来促进K+进入细胞。
【小问4详解】
验证Ca2+在高盐胁迫下对盐地碱蓬吸收Na+、K+的调节作用，自变量是Ca2+转运蛋白抑制剂的有无，因变量是高盐培养液中Na+、K+浓度，而对实验结果有影响的无关变量应控制相同且适宜。据此结合实验设计应遵循的对照原则分析实验步骤可推知：乙组应加入2mLCa2+转运蛋白抑制剂溶液（或等量的Ca2+转运蛋白抑制剂溶液）。由于该实验是验证性实验，其结论是已知的，即在高盐胁迫下，细胞质基质中的Ca2+对HKT1和AKT1的作用依次为抑制、激活，但Ca2+转运蛋白抑制剂能够抑制Ca2+转运蛋白的作用，进而使乙组根细胞借助Ca2+调节Na+、 K+转运蛋白的功能受到抑制。所以预期的实验结果及结论是：与甲组相比，乙组培养液中Na+浓度较低，K+浓度较高，说明Ca2+在一定程度上能调节细胞中Na+、K+的比例。
22. 植物细胞能将胞内的ATP通过膜泡运输释放到胞外，形成胞外ATP（eATP）。eATP可通过与相应受体结合，调节植物细胞的生长发育、抗病反应等生理活动。为探究eATP对光合速率的影响，科研小组用去离子水配制了适宜浓度的eATP溶液，并用其处理豌豆叶片。一段时间后，测定叶片净光合速率（μmolm-2·s-1）和胞间CO2浓度（μmolmo-1）等变化，结果如图所示。回答下列问题：
（1）该实验对照组的处理方式为____________。
（2）测定净光合速率是以单位时间、单位叶面积的CO2量____________为指标，测定的数据____________（填“需要”或“不需要”）加上遮光处理的数据。
（3）根据题意可知，植物细胞释放ATP的方式是____________；AMP-PCP作为一种eATP抑制剂，能有效抑制eATP对细胞的调节作用，但却不改变细胞外的eATP浓度，推测其可能的作用是____________。
（4）活性氧（ROS）能促进植物气孔的开放，NADPH氧化酶是ROS产生的关键酶。科研人员用eATP处理NADPH氧化酶基因缺失突变体，发现净光合速率与对照组基本一致。结合图示实验结果，试推测eATP调节植物光合速率的机制：____________。
【答案】（1）用等量的去离子水处理豌豆的叶片
（2） ①. 吸收 ②. 不需要
（3） ①. 胞吐 ②. AMP-PCP阻止eATP与受体结合，使eATP不能发挥信息调节作用
（4）eATP通过调节NADPH氧化酶基因的表达，促进活性氧（ROS）的合成来促进气孔的开放，从而提高光合速率
【解析】
【分析】光合作用的光反应阶段（场所是叶绿体的类囊体膜上）：水的光解产生NADPH与氧气，以及ATP的形成。光合作用的暗反应阶段（场所是叶绿体的基质中）CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP和NADPH的作用下还原生成有机物。
【小问1详解】
实验组用去离子水配制了适宜浓度的eATP溶液，并用其处理菜豆叶片；故对照组可以用等量的去离子水处理菜豆的叶片。
【小问2详解】
净光合速率是指植物单位时间、单位叶面积所吸收的二氧化碳量或释放的氧气量，是总光合速率减去呼吸速率的值，遮光处理的数据为呼吸速率的值，故测定净光合速率的数据不需要加上遮光处理的数据。
【小问3详解】
题中信息显示，植物细胞能将胞内的ATP通过膜泡运输释放到胞外，显然植物细胞是通过胞吐方式释放ATP的。eATP调节作用的发挥需要与相应的受体发生特异性结合，但却不改变细胞外的eATP浓度，而AMP-PCP作为一种eATP抑制剂，能有效抑制eATP对细胞的调节作用，却不改变细胞外的eATP浓度，说明该抑制剂发挥作用是通过减少eATP的受体，或减弱eATP的受体的活性实现的，也可能是与eATP竞争受体结合，进而抑制了eATP与受体的结合，使eATP不能发挥信息调节作用。
【小问4详解】
活性氧（ROS）能促进植物叶肉细胞气孔的开放，NADPH氧化酶是ROS产生的关键酶，一般而言，酶的化学本质绝大多数是蛋白质，蛋白质是在细胞质基质中的核糖体上合成的，因此，该酶是在细胞中的核糖体上合成的。题(2)实验表明cATP可通过调节气孔导度来调节植物光合速率，而活性氧(ROS）也能促进植物叶肉细胞气孔的开放，活性氧(ROS)的合成需要NADPH氧化酶的催化，当NADPH氧化酶缺失，则活性氧（ROS）无法合成，植物叶肉细胞气孔的开放无法增加，科研人员用eATP处理NADPH氧化酶基因缺失突变体，发现净光合速率与对照组基本一致。综合分析可知： eATP通过调节NADPH氧化酶基因的表达，促进活性氧（ROS）的合成，进而促进植物叶肉细胞气孔的开放，提升了叶肉细胞的气孔导度，进而实现了对光合速率的提高。
23. 请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题：
（1）某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是________________________。
（2）通过如图乙所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器____________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为60个、55个、56个、57个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为____________个，该数据往往比活菌的实际数目____________（填“多”或“少”），理由是________________________。
（3）小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，发酵产物酒精可用____________检验，检验的原理是____________。
（4）发酵过程中由于密封不严，果酒放置一段时间后会变酸，在变酸的酒表面观察到白色菌膜，其形成原因是____________。
【答案】（1）摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快
（2） ①. 灼烧冷却 ②. 5.7×107 ③. 少 ④. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3） ①. 重铬酸钾溶液 ②. 橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色
（4）醋酸菌在液面大量繁殖而形成的
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
根据题意可知，摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快，因此繁殖的速度和总量越高，种群密度最大。
【小问2详解】
在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧（杀死杂菌）冷却后（以免杀死菌种）才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了105倍（M），同时选择菌落数目在30~300的进行计数，所以每毫升含菌数为（60+55+56+57）÷4÷0.1×105=5.7×107个。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法进行计数时，统计的数量往往比活菌的实际数目少。
【小问3详解】
橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色，因此葡萄酒制作是否成功，发酵后需用重铬酸钾溶液进行检测。
【小问4详解】
在变酸的酒的表面可观察到一层菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。
24. 埃博拉病毒（EBOV）是一种能导致人类出血热的致死性病毒，威胁人类健康。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。实验人员用NP蛋白免疫小鼠来制备抗EBOV单克隆抗体，过程如下图所示。回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体涉及的细胞工程技术有____________（答出2点）。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加____________以补充细胞生长所需的未知营养物质。
（2）使用特定的选择培养基经筛选1获得杂交瘤细胞时，通过该培养基可以淘汰____________细胞。筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是____________。两次筛选后的所需细胞群应具备的特点是____________。
（3）抗EBOV单克隆抗体可用于检测血浆中EBOV的含量，检测原理如下图所示。
①检测前，先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，然后向检测体系中加入一定量含有EBOV的血浆（其NP蛋白称为待测抗原）和等量酶标记的NP蛋白（酶标记抗原），目的是让待测抗原、酶标记抗原与抗EBOV单克隆抗体____________结合。
②保温一段时间后洗涤，再向检测体系中加入一定量的白色底物，若检测体系蓝色越深，则说明血浆中EBOV的含量____________。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养、动物细胞融合 ②. 血清
（2） ①. 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（B细胞、骨髓瘤细胞和自身融合细胞） ②. 抗原与抗体特异性结合 ③. 既能无限增殖，又能产生所需抗体
（3） ①. 竞争性 ②. 越少
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
单克隆抗体制备过程中需要将免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，涉及动物细胞融合技术，还需要培养骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞等，因此还涉及动物细胞培养技术。体外培养骨髓瘤细胞时，应该在合成培养基的基础上添加动物血清等天然成分以补充细胞生长所需的未知营养物质。
【小问2详解】
筛选1目的是选择杂交瘤细胞，因此该培养基可以淘汰未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的（B细胞、骨髓瘤细胞和自身融合细胞）细胞。筛选2的目的是获得所需的细胞群，即获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，检测方法是抗原抗体杂交法，故筛选所依据的基本原理是抗原与抗体特异性结合。两次筛选后的所需细胞群应具备既能无限增殖，又能产生所需抗体的特点。
【小问3详解】
①根据图示反应原理，酶标记抗原和待测抗原都能与抗EBOV单克隆抗体特异性结合，即让待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合抗EBOV单克隆抗体。
②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅，反之若检测体系蓝色越深，则说明待测抗原中目标抗原越少，即血浆中NP蛋白（或EBOV）含量越少。
25. 如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使大肠杆菌的菌落呈蓝色，否则菌落为白色。EcoRI、PvuI为两种限制酶，质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请回答：
（1）利用PCR技术对一个目的基因扩增n次，需要____________对引物，热稳定DNA聚合酶能从引物的____________端开始连接脱氧核苷酸，从而获得大量目的基因D。
（2）据图分析，质粒A、C不能作为目的基因D的载体，理由分别是________________________。将目的基因D与质粒B进行重组，应该选用的酶有____________。
（3）在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因D是否重组到质粒中，使用EcoRI处理重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.6kb和3.1kb，或者____________kb和____________kb的片段，则可判断质粒B已与目的基因D重组成功。
（4）利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中，筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是：在含有________________________的培养基上培养，形成____________色菌落的为导入重组质粒的受体细胞。
（5）下列关于基因工程常用运载体——质粒的说法正确的是____________。
A. 使用质粒作为运载体可避免目的基因被分解
B. 质粒只有与目的基因重组后才能进入细胞
C. 质粒上具有1个至多个限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接
D. 质粒的复制和表达也遵循中心法则
【答案】（1） ①. 2n -1 ②. 3’
（2） ①. （质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割 ②. PvuⅠ和DNA连接酶
（3） ①. 0.6 ②. 4.1
（4） ①. 氨苄青霉素和X-gal ②. 白 （5）ACD
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，利用PCR技术对一个目的基因扩增n次，则消耗2n–1对引物。耐高温的DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
【小问2详解】
由题图可知，质粒A缺乏标记基因，质粒C复制原点会被限制酶切割，故一般不能选择质粒A、C作为载体。由于目的基因的两端都有PvuⅠ的切割位点，而EcoRⅠ会破坏目的基因，故要获取目的基因，应该选用PvuⅠ切割，再用DNA连接酶将目的基因D与质粒B的粘性末端进行连接。
【小问3详解】
将图中的目的基因与质粒B进行重组，构建基因表达载体后，要检查目的基因是否重组到质粒中，可以使用EcoRⅠ酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。由于目的基因和载体用一种酶进行切割，重组质粒（含2个EcoRⅠ酶位点）会出现正向连接和反向连接两种类型，质粒B中EcoRⅠ酶切位点与PvuⅠ酶切位点之间的距离为0,1Kb，重组质粒中2个EcoRⅠ酶切点之间的最短距离可能是0.1+0.5=0.6Kb或0.1+1.5=1.6Kb，重组质粒长度为：2.7+2=4.7Kb，故EcoRⅠ酶切后，电泳图谱中出现长度4.1kb和0.6kb片段或者3.1kb和1.6kb的片段，说明重组质粒构建成功。
【小问4详解】
由题意可知，重组质粒中的lacZ基因会被破坏，但保留氨苄青霉素抗性基因，故若选择自身不含lacZ基因并对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，则未成功导入重组质粒的大肠杆菌无法存活，而成功导入重组质粒的可以存活，能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌。
【小问5详解】
A、质粒通常是来自于细菌的环状DNA分子，使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解，A正确；
B、质粒运载体自身也能进入细胞，B错误；
C、质粒上具有1个至多个限制酶切点，以便于切割后与目的基因连接，没有限制酶就无法使用质粒运载体，C正确；
D、质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则，D正确。
故选ACD。
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