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安徽省芜湖市繁昌皖江中学2021-2022学年高二下学期期末检测生物试题 Word版含解析
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这是一份安徽省芜湖市繁昌皖江中学2021-2022学年高二下学期期末检测生物试题 Word版含解析，共23页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
皖江中学2021～2022学年第二学期高二期末检测
生物
一、选择题：本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。
1. 《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是发酵罐中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 酿酒过程中酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质
B. 酿酒过程中起泡是酵母菌细胞呼吸产生CO2所致
C. 可用溴麝香草酚蓝水溶液检测酿酒产生的酒精含量
D. 酿酒过程中pH逐渐降低可能导致酵母菌数量减少
【答案】C
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。
【详解】A、酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质，A正确；
B、酿酒过程中起泡的气体是酵母菌呼吸产生CO2，B正确；
C、溴麝香草酚蓝水溶液用于检测CO2，检测酒精的试剂是酸性重铬酸钾，C错误；
D、酿酒过程中产生的酸性气体二氧化碳使pH逐渐降低，可能导致酵母菌数量减少，D正确。
故选C。
2. 苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的醋，再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。其制作流程大致为：在灭菌的苹果果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌和醋酸杆菌的代谢方式相同
B. 可利用干热灭菌的方法将果肉匀浆灭菌
C. 酿制苹果醋时产生的气泡量多于酿制苹果酒时
D. 酿制苹果醋时的温度高于酿制苹果酒时的温度
【答案】D
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是28℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、酵母菌的代谢方式是异养兼性厌氧型，醋酸杆菌的代谢方式是异养需氧型，A错误；
B、对苹果匀浆灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，B错误；
C、由苹果酒发酵形成苹果醋，无气体释放，因此由糖类发酵形成苹果醋产生的气泡与苹果酒发酵时基本相同，C错误；
D、酵母菌的最适温度为28℃左右，醋酸菌的发酵温度为30-35℃，D正确。
故选D。
3. 《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中，……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列有关叙述错误的是（ ）
A. 泡菜制作过程中清水与盐的质量比为4：1
B. 泡菜制作过程需严格保持坛内无氧环境
C. 泡菜水中加烧酒少许的目的是消毒杀菌
D. 为防止杂菌污染，泡菜水煮沸后应立即添加乳酸菌
【答案】D
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、在制作泡菜过程中，加入清水和食盐的比例为4：1，A正确；
B、在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境，B正确；
C、加烧酒少许的目的是利用盐和白酒抑制杂菌生长和调味，C正确；
D、泡菜水煮沸后需冷却后再添加乳酸菌，以免杀死乳酸菌，D错误。
故选D。
4. 酸奶是以牛奶为原料，经巴氏杀菌后再添加双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等有益菌，再经发酵后冷却灌装的一种牛奶制品。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 将牛奶巴氏灭菌后导致营养成分被破坏
B. 发酵时温度的变化会影响有益菌的含量
C. 为防止杂菌污染，可向牛奶中添加抗生素
D. 酸奶制作时透气会使有益菌含量增多
【答案】B
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、巴氏消毒法是指在62~65℃消毒30min或在80~90℃消毒30s~1min，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且牛奶的营养成分不被破坏，A错误；
B、随着发酵时间的延长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的数量会增加，所以发酵时温度的变化会影响有益菌的含量，B正确；
C、抗生素可杀死乳酸菌，故制作酸奶时不能添加抗生素，C错误；
D、乳酸菌属于厌氧菌，制作时如果透气会杀死乳酸菌，D错误。
故选B。
5. 下列有关微生物培养的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基中NH4+可作为培养硝化细菌的氮源
B. 接种针和涂布器均可采取灼烧的方法灭菌
C. 接种后的培养皿要倒置，以免受到污染
D. 倒平板时应将皿盖打开后放到一边，以免培养基溅到皿盖上
【答案】D
【解析】
【分析】微生物实验的无菌技术主要内容：
（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、硝化细菌可以利用NH4+中的N元素，所以培养基中NH4+可作为培养硝化细菌的氮源，A正确；
B、在接种过程中，接种针和涂布器均可采取灼烧的方法灭菌，B正确；
C、接种后的培养皿要倒置，这样能够防止培养皿上凝结的冷凝水污染培养基，且便于观察，C正确；
D、倒平板时，用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖，这样可能导致培养皿被杂菌污染，D错误。
故选D。
6. 大量的磷酸盐排入水体会导致藻类植物大量疯长，造成水体富营养化。某科研人员拟从某条被污染的河流中筛选出磷酸盐降解率高的菌株。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 磷酸盐为该菌株的生长繁殖提供无机盐
B. 平板划线法可用于菌种的纯化和计数
C. 培养时反复振荡可提高菌株的繁殖率
D. 从藻类植物少的污染河流中取样，能提高筛选的成功率
【答案】B
【解析】
【分析】水体富营养化指的是水体中N、P等营养盐含量过多而引起的水质污染现象。其实质是由于营养盐的输入输出失去平衡性，从而导致水生态系统物种分布失衡，单一物种疯长，破坏了系统的物质与能量的流动，使整个水生态系统逐渐走向灭亡。
【详解】A、磷酸盐中含有P等元素，为该菌株的生长繁殖提供无机盐，A正确；
B、稀释涂布平板法可用于菌种的纯化和计数，B错误；
C、将菌株接种于液体培养基中采用振荡培养，可溶氧量增加，营养物质混匀，提高菌株的繁殖率，C正确；
D、为了筛选出磷酸盐降解率高的菌株，从藻类植物少的污染河流中取样，能提高筛选的成功率，D正确。
故选B。
7. 稀释涂布平板法和细菌计数板计数法是计数微生物的两种方法，某同学通过这两种方法对某样品中的活菌进行计数，比较两种方法的异同点。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 两种方法对活菌进行计数均用到显微镜
B. 两种方法计数时，统计结果均大于实际值
C. 两种方法计数时，均利用固体培养基培养微生物
D. 稀释涂布平板法统计活菌时应选择菌落数为30~300的平板进行计数
【答案】D
【解析】
【分析】微生物的计数方法主要有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。用稀释涂布平板法统计时，由于两个或多个细胞连在一起可以形成一个菌落，所以统计的结果比实际值往往偏小。由于显微镜下统计的微生物细胞包括死亡的细胞在内，所以用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数。
【详解】A、稀释涂布平板法通过菌落计数，不需要显微镜，细菌计数板计数法要用到显微镜，A错误；
B、由于两个或多个微生物连在一起形成一个菌落，故稀释涂布平板法计数的结果往往偏低，细菌计数板计数可能将死菌一起计数，统计结果往往大于实际值，B错误；
C、稀释涂布平板法计数用到固体培养基，细菌计数板计数利用液体培养基，C错误；
D、稀释涂布平板法可以将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，选择菌落数为30~300的平板进行活菌计数，D正确。
故选D。
8. 金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一。细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗，当细菌出现耐药性时疗效下降。A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎。为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂最抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 该平板中培养基属于固体培养基
B. 配制培养基时应将培养基pH调至酸性
C. 滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，是污染所致
D. 滤纸片周围出现透明圈是抗生素诱导细菌出现耐药性的结果
【答案】A
【解析】
【分析】实验原理：若金黄色葡萄球菌对各种抗生素敏感，该抗生素周围会出现透明圈，透明圈越大，越敏感，若金黄色葡萄球菌对各种抗生素不敏感，则不会出现透明圈。
【详解】A、平板中培养基属于固体培养基，A正确；
B、培养细菌时应将培养基的pH调至中性或弱碱性，B错误；
C、滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是基因突变产生了抗抗生素的细菌，C错误；
D、抗生素对细菌起选择作用，变异具有不定向性，D错误。
故选A。
9. 谷氨酸棒状杆菌属于需氧型微生物，通过发酵生成谷氨酸，谷氨酸用于制作味精。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 谷氨酸发酵属于需氧发酵，需监控发酵液中溶解氧
B. 谷氨酸呈酸性，应在酸性条件下进行谷氨酸的发酵
C. 发酵前，发酵罐和培养基需进行严格消毒和灭菌
D. 发酵结束后应对发酵液进行分离和纯化，获得纯净谷氨酸
【答案】B
【解析】
【分析】发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
【详解】A、常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件，以保证谷氨酸棒状杆菌代谢正常进行，A正确；
B、谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺，B错误；
C、发酵前，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，C正确；
D、发酵结束后，要想获得纯净谷氨酸，应对发酵液进行分离和纯化，D正确。
故选B。
10. 某科研人员选择兰花根尖细胞，利用植物组织培养技术培养兰花。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 根尖细胞培养形成的兰花植株无叶绿体
B. 兰花根尖细胞脱分化时应提供有机碳源
C. 根尖细胞脱分化和再分化时均存在基因的选择性表达
D. 根尖细胞脱分化和再分化时对光照的要求不同
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、由于植物细胞具有全能性，所以根尖细胞培养形成的兰花植株有叶绿体，A错误；
B、兰花根尖细胞不能光合作用，所以兰花根尖细胞脱分化时应提供有机碳源，B正确；
C、根尖细胞脱分化和再分化都是受基因控制的，都存在基因的选择性表达，C正确；
D、根尖细胞脱分化不需要光照、再分化时需要光照，D正确。
故选A。
11. 人工种子又称体细胞种子，是指通过组织培养技术将植物的体细胞诱导成在形态上和生理上均与胚相似的胚状体，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 胚状体具有全能性，可发育成完整植株
B. 与天然种子相比，人工种子的变异概率高
C. 包裹胚状体的介质中含有植物生长调节剂等营养物质
D. 胚状体由愈伤组织通过再分化形成，遗传物质发生变化
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、胚状体含有本物种的全部遗传信息，具有全能性，可发育成完整植株，A正确；
B、天然种子形成时，存在减数分裂和有丝分裂，人工种子形成时无减数分裂，存在有丝分裂，前者变异概率高，B错误；
C、植物生长调节剂不属于营养物质，C错误；
D、再分化过程中遗传物质没有改变，D错误。
故选A。
12. 如图表示利用高秆抗锈病玉米（基因型为AaBb，两对基因独立遗传）的花粉细胞生产人工种子的过程。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 花粉细胞融合前需用酶处理形成原生质体
B. ①过程获得的融合细胞中纯合子占1/4
C. ②过程获得的愈伤组织的全能性高于融合细胞
D. ③过程改变植物激素的添加顺序不影响结果
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：①表示诱导花粉细胞融合的过程；②③表示植物组织培养过程，其原理是植物体细胞具有全能性，其中②表示脱分化过程，③表示再分化过程，这两个过程培养基中的植物激素的种类和比例不同；④表示在胚状体外包裹人工种皮形成人工种子的过程。
【详解】A、花粉细胞具有细胞壁，融合前需用纤维素酶和果胶酶处理形成原生质体，A正确；
B、高秆抗锈病玉米的基因型为AaBb，产生的花粉细胞的基因型为1/4AB、1/4Ab、1/4aB、1/4ab，因此①过程获得的融合细胞中纯合子（基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb）占1/4×1/4+1/4×1/4+1/4×1/4+1/4×1/4=1/4，B正确；
C、②过程通过脱分化获得愈伤组织，分化程度越低，全能性越高，故愈伤组织的全能性高于融合细胞，C正确；
D、③表示再分化过程，当生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成，因此③过程改变植物激素的浓度和比例会影响结果，D错误。
故选D。
13. 利用单克隆抗体研制而成的“生物导弹”可定点作用于病灶，减少用药剂量，降低副作用。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 单克隆抗体只能与一种抗原结合
B. 制备单克隆抗体时的两次筛选目的不同
C. “生物导弹”可选择性地杀伤癌细胞
D. “生物导弹”中单克隆抗体可杀死癌细胞
【答案】D
【解析】
【分析】1.效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。
2.该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
3.单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【详解】A、单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，大量培养经过两次筛选获得的杂交瘤细胞即可获得单克隆抗体，因此，单克隆抗体只能与一种抗原结合，A正确；
B、单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确；
C、“生物导弹”中包含单克隆抗体，而单克隆抗体能与相应的抗原发生特异性结合，因此生物导弹可选择性地杀伤癌细胞，C正确；
D、“生物导弹”中药物能杀死癌细胞，单克隆抗体不能杀死癌细胞，D错误。
故选D。
14. 为保护濒危动物金丝猴，某科研人员尝试利用克隆技术大量繁殖金丝猴。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞
B. 重组胚胎需移植到代孕猴体内才能发育成克隆猴
C. 克隆猴的性别与供体猴相同，其他性状与受体猴相近
D. 克隆猴的形成属于无性生殖，能保持亲本的优良性状
【答案】C
【解析】
【分析】克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的后代的过程。
【详解】A、由于10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型，因此在核移植的过程中通常选用10代以内的细胞作为供体细胞，A正确；
B、重组并发育成新胚胎，利用胚胎移植技术将胚胎移入代孕猴体内，B正确；
C、克隆猴的产生是体细胞移植技术，其细胞核中遗传物质与供体猴相同，但由于细胞质中还存在基因，所以克隆猴与供体猴的遗传物质基本相同，与受体猴不同，C错误；
D、克隆猴没有经过生殖细胞的结合，所以克隆猴的形成属于无性生殖，能保持亲本的优良性状，D正确。
故选C。
15. 小明同学因意外造成皮肤大面积烫伤，医生利用动物细胞培养技术制备人造皮肤，对其进行皮肤移植。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 自身皮肤移植可避免免疫排斥现象
B. 皮肤细胞在传代培养过程中遗传物质不会发生变化
C. 皮肤细胞在传代培养过程中会出现接触抑制现象
D. 皮肤细胞应置于95%空气和5%CO2的培养箱中进行培养
【答案】B
【解析】
【分析】①器官移植的成败主要取决于供者与受者的HLA是否一致或相近，供者与受者的HLA越相近，免疫排斥越弱。②动物细胞培养，需要满足的条件之一是气体环境。人们通常将分瓶之前的细胞培养称为原代培养，将分瓶后的细胞培养称为传代培养。在细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点。
【详解】A、自身皮肤移植，供者与受者的HLA一致，可避免免疫排斥现象，A正确；
B、皮肤细胞在传代培养过程中，受培养条件等因素的影响，随着传代次数的增加，部分细胞的遗传物质可能会发生变化，B 错误；
C、皮肤细胞在传代培养过程中，贴壁细胞在生长增殖时会出现接触抑制现象，C正确；
D、皮肤细胞在培养过程中，需要提供气体环境，即将皮肤细胞置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，D正确；
故选B。
16. 如图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 精子和卵细胞形成后可直接结合形成受精卵
B. ②过程的分裂方式是有丝分裂，细胞体积逐渐减小
C. a表示囊胚，其中内细胞团可用于制备胚胎干细胞
D. b表示原肠胚，原肠胚的三个胚层将逐渐分化形成各种组织、器官
【答案】A
【解析】
【分析】1、分析题图：图为受精作用和胚胎发育过程，图中①为受精作用，②③④为早期胚胎发育过程，a为囊胚，b为原肠胚，受精作用就是精子和卵细胞相互识别并结合形成受精卵的过程。
2、受精卵发育为桑椹胚的过程称为卵裂，卵裂就是有丝分裂，在卵裂过程中，细胞的总体积基本不变，单个细胞的体积不断减小。
【详解】A、母体产生的卵细胞成熟后，由卵巢排出进入输卵管，在这里如果遇到精子，就会与精子相融合，形成受精卵；如果是体外受精，体外受精前需要对精子进行获能处理，A错误；
B、②过程为早期胚胎发育阶段，细胞通过有丝分裂增殖，在此过程中胚胎的总体积基本不变，单个细胞体积会逐渐减小，B正确；
C、a时期为囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性，因此可分离得到胚胎干细胞，C正确；
D、b为原肠胚，分成外胚层、中胚层和内胚层三个胚层，原肠胚的外胚层发育成神经系统、感觉器官、表皮及其附属结构；中胚层发育成骨骼、肌肉、循环、排泄、生殖系统等；内胚层发育成肝、胰等腺体、呼吸道、消化道的上皮等；故原肠胚的三个胚层将逐渐分化形成各种组织、器官，D正确。
故选A。
17. 如图表示利用二倍体小鼠所做的实验，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 16细胞胚中部分细胞同时有白鼠和黑鼠的遗传物质
B. 过程①中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 囊胚期的滋养层细胞可用于进行性别鉴定
D. 嵌合体幼鼠属于四倍体，有丝分裂后期有8个染色体组
【答案】C
【解析】
【分析】图中将发育成白鼠和黑鼠的8细胞胚融合形成16细胞胚，形成囊胚后植入代孕母鼠，形成黑白相间的嵌合体幼鼠。
【详解】A、该实验没有细胞融合，不可能有细胞同时有白鼠和黑鼠的遗传物质，A错误；
B、过程①表示胚胎发育，细胞数目增加，但有机物总量在减少，B错误；
C、滋养层将来发育为胎膜和胎盘，对胚胎进行性别鉴定时选用滋养层细胞，不会对胚胎造成伤害，C正确；
D、由于不存细胞融合，嵌合体幼鼠属于二倍体，有丝分裂后期有4个染色体组，D错误。
故选C。
18. 为解决人口老龄化程度加深的问题，党中央进一步优化生育政策，实施一对夫妻可以生育三个子女政策。一些高龄妇女希望通过试管婴儿技术再生一个孩子。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 高龄妇女都通过注射性激素的方法增加排卵数量
B. 从卵巢中采集的卵母细胞培养至MⅡ期达到成熟
C. 在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入
D. 人体通过体外受精获得试管胚胎，试管婴儿属于有性生殖
【答案】A
【解析】
【分析】超数排卵是手段是注射促性腺激素。体外受精的卵母细胞需要培养至MⅡ期达到成熟，才能具备受精能力。透明带反应：在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入。卵细胞膜反应：精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。
【详解】A、一般通过注射促性腺激素增加排卵数量，A错误；
B、从卵巢中采集卵母细胞培养至MⅡ期达到成熟，才能具备受精能力，B正确；
C、透明带反应：在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入，C正确；
D、人体通过体外受精获得试管胚胎，涉及到减数分裂形成配子的过程，所以试管婴儿属于有性生殖，D正确。
故选A。
19. 基因工程需要多种酶的参与。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 限制酶主要存在于原核细胞中，可识别DNA或RNA上的碱基序列
B. DNA连接酶不能识别DNA上碱基序列，但可识别黏性末端或平末端
C. 解旋酶可破坏磷酸二酯键和氢键，用于DNA复制过程中解开DNA双螺旋
D. 成熟mRNA经逆转录酶催化形成的DNA分子能直接转录翻译合成蛋白质
【答案】B
【解析】
【分析】1、关于限制酶（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端，注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键；
2、DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低；（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
【详解】A、限制酶主要存在于原核细胞中，只能识别双链DNA分子上的碱基序列，A错误；
B、DNA连接酶不能识别DNA上碱基序列，但可识别黏性末端或平末端，DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，B正确；
C、在DNA复制过程中，解旋酶破坏氢键，使DNA双链解开，成为DNA复制的模板，C错误；
D、成熟mRNA经逆转录酶催化形成的DNA分子缺少启动子和终止子，不能直接转录翻译合成蛋白质，D错误。
故选B。
20. 生长激素具有促进人体生长的作用，可用于治疗侏儒症儿童患者。某科研人员采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成生长激素且只存在于乳汁中。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 培育乳腺生物反应器常选用乳腺细胞作为受体细胞
B. 常选用显微注射法将含有生长激素基因的表达载体导入受体细胞
C. 人的生长激素基因在乳腺细胞通过转录和翻译表达
D. 乳腺生物反应器的体细胞含有人的生长激素基因
【答案】A
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2、基因表达载体的构建是基因工程的核心。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。将基因的表达载体通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵（雌性个体）中，由这个受精卵发育成的转基因动物即为乳腺生物反应器。
【详解】A、培育乳腺生物反应器常选受精卵作为受体细胞，A错误；
B、将表达载体导入动物细胞的常用方法是显微注射法，B正确；
C、基因的表达包括转录和翻译，所以人的生长激素基因在乳腺细胞通过转录和翻译表达，C正确；
D、将人生长激素基因表达载体导入受精卵后，发育为转基因羊，其产生的细胞都是由受精卵经有丝分裂发育而来的，则乳腺生物反应器的体细胞含有人的生长激素基因，D正确。
故选A。
21. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A. DNA对高温的耐受性低于蛋白质
B. DNA溶于酒精，也溶于2mol/L的NaCl溶液
C. 猪血取材方便，适宜用于提取和鉴定DNA
D. 从菜花细胞中提取DNA需先研磨破坏细胞
【答案】D
【解析】
【分析】利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，选择适当的盐浓度能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
【详解】A、DNA在80℃以上变性，蛋白质在60℃以上变性，DNA对高温的耐受性高于蛋白质。A错误；
B、DNA不溶于酒精，在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较高，B错误；
C、猪（哺乳动物）成熟红细胞中不含DNA，不能用于提取和鉴定DNA。C错误；
D、菜花细胞有细胞壁保护，通过研磨破坏细胞壁、细胞膜等结构，使DNA释放出来。D正确。
故选D。
22. 下图表示获得抗虫水稻的部分操作步骤。下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与
B. ②过程常用农杆菌转化法，③过程常用植物组织培养技术
C. 抗虫水稻所有体细胞中都有抗虫基因，且都能表达
D. 细胞Ⅲ不能含有四环素抗性基因
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤，其中①是基因表达载体的构建过程；②是将目的基因导入农杆菌细胞；③是采用农杆菌转化法将目的基因导入植株；④为肽链；⑤为tRNA；⑥为mRNA。
【详解】A、①是基因表达载体的构建过程，该过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与，A正确；
B、Ⅲ是农杆菌，②过程常用农杆菌转化法，步骤③过程常用植物组织培养技术获取完整植株，B正确；
C、若抗虫基因导入成功，抗虫水稻所有体细胞中都有抗虫基因，但是由于基因的选择性表达抗虫水稻中只有某些细胞中的抗虫基因能表达，C错误；
D、四环素抗性基因作为筛选重组质粒的标记基因，那么受体细胞中不能存在四环素抗性基因，不然不能筛选是否存在重组质粒，所以细胞Ⅲ不能含有四环素抗性基因，D正确。
故选C。
23. CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点对特定的DNA序列进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，Cas9蛋白可人为选择DNA上的目标位点进行切割。下列相关叙述错误的是（ ）
A. Cas9蛋白与限制酶的功能相近
B. Cas9蛋白切割DNA分子上的磷酸二酯键
C. 向导RNA的碱基数量是目标位点基因的碱基数量的一半
D. 向导RNA可能识别DNA上非目标位点基因，并引起Cas9蛋白切割
【答案】C
【解析】
【分析】结合题意可知：基因编辑又称基因组编辑或基因组工程，是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程，通过向导RNA中20个碱基的识别序列与剪切点附近序列互补配对，引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。
【详解】A、结合题意可知，Cas9蛋白可对特定的DNA序列进行切割，具有限制酶的特性，A正确；
B、Cas9蛋白相当于限制酶，其切割的位点是磷酸二酯键，B正确；
C、向导RNA只需与目的位点上部分碱基序列互补即可，其碱基数量少于目标位点基因的碱基数量的一半，C错误；
D、RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点对特定的DNA序列进行切割，不同的目的基因中可能含有相同的碱基序列能被该复合物识别，故向导RNA可能识别DNA上非目标位点基因，并引起Cas9蛋白切割，D正确。
故选C。
24. 下列有关转基因生物安全性问题的叙述，正确的是（ ）
A. 转基因技术可提高农作物产量，不存在负面影响
B. 转基因技术可能制造新的过敏原，有一定的风险
C. 转基因技术可能被恐怖分子利用，应停止研究
D. 转基因技术可能造成新的基因污染，应停止研究
【答案】B
【解析】
【分析】转基因生物的安全性问题包括：
（1）食物安全：滞后效应、出现过敏源、食物的营养成分改变等。
（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁。
（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。
【详解】A、转基因技术可能影响到食品安全、环境安全等，存在负面影响，A错误；
B、转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险，B正确；
CD、转基因技术有有利的一面，也有不利的一面，应采取一定的措施遏制其不利的一面，积极发挥其有利的一面，而不是停止研究，CD错误。
故选B。
25. 下列有关克隆人和设计试管婴儿的叙述，正确的是（ ）
A. 克隆人和试管婴儿均是有性生殖的产物
B. 设计试管婴儿可有目的地生出所需的孩子，应大力推广
C. 治疗性克隆可为一些患者提供器官，用于器官移植
D. 生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都会面临伦理问题
【答案】C
【解析】
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
2、克隆技术：
（1）治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。
（2）生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。
3、生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、克隆人属于无性生殖，试管婴儿属于有性生殖，A错误；
B、设计试管婴儿可能造成性别比例失调，应根据目的进行规范，而不是大力推广，B错误；
C、治疗性克隆指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植，C正确；
D、生殖性克隆的目的是克隆出个体，治疗性克隆是克隆出组织、器官，前者会面临伦理问题，后者不会面临伦理问题，D错误。
故选C。
二、非选择题：本题包括5小题，共50分。
26. 枸杞酒是以枸杞子、生地黄汁为主料制作的药酒，具有滋补虚弱、益精气，去冷风、壮阳道、止泪和健腰脚等功能。下图为枸杞酒生产工艺流程简图，回答下列问题：
选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→枸杞酒
（1）制作枸杞酒的菌种是___________，发酵过程的温度应该控制在___________。
（2）枸杞酒制作过程中，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，然后密封，先通气、后密封的目的分别是____________、___________。
（3）家庭制作枸杞酒时，___________的条件可抑制其他微生物的生长繁殖，故该过程不需严格灭菌，但需定期排气，原因是____________。
（4）枸杞酒制作是否成功，可用___________（填试剂）鉴定，该物质与酒精反应呈现___________色。
【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 18~30℃
（2） ①. 通入无菌空气，有利于酵母菌有氧呼吸释放大量能量，进行繁殖 ②. 密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精
（3） ①. 酸性、缺氧 ②. 酵母菌发酵过程中产生CO2
（4） ①. 酸性重铬酸钾溶液##重铬酸钾溶液 ②. 灰绿
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【小问1详解】
果酒的制作离不开酵母菌，所以制作枸杞酒的菌种是酵母菌。酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，所以发酵过程的温度应该控制在18～30℃。
【小问2详解】
枸杞酒制作过程中，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，有利于酵母菌有氧呼吸释放大量能量，进行繁殖，然后密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。
【小问3详解】
家庭制作枸杞酒时，在没有严格灭菌的条件下，通过控制温度和通入氧气措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种，由于酵母菌能在缺氧、酸性的发酵液生长繁殖，而其它微生物不能，所以果酒制作过程不需严格灭菌。由于酵母菌发酵过程中产生CO2，所以需要定期排气。
【小问4详解】
果酒制作是否成功，需发酵后用酸性重铬酸钾溶液来鉴定，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【点睛】本题考查果酒的制作，考生识记果酒的制作原理，掌握果酒制作的过程，根据题干信息结合所学知识解决问题是解答本题的关键。
27. 幽门螺杆菌（Hp）是引起胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等疾病的“罪魁祸首”。某研究性学习小组在培养该菌过程中，发现了在某种细菌M的周围，幽门螺杆菌的生长繁殖受到抑制。他们把M菌接种在专门的培养基上培养，一段时间后，除去M菌，在此培养基上再培养幽门螺杆菌，结果幽门螺杆菌仍然不能正常生长繁殖。回答下列问题：
（1）细菌M周围的幽门螺杆菌生长繁殖受到抑制，原因可能是___________。
（2）该研究性学习小组欲验证上述原因，进行了如下实验：
①实验步骤：
第一步：取两个培养皿，按相同的营养成分配制成甲、乙两个培养基，并用___________法进行灭菌。培养基的基本成分有_____。
第二步：在甲培养基中接种M菌，在乙培养基中___________，相同条件下培养一段时间后，除去甲培养基上的M菌。
第三步：在甲、乙两培养基上分别接种相同且等量的幽门螺杆菌。
第四步：在恒温培养箱中培养甲、乙两个培养基上的幽门螺杆菌。培养时对pH的要求是____________。
②结果：
甲组培养基表面___________，乙组培养基表面___________。
③实验过程中常将一空白培养基置于同一培养箱中一起培养，目的是____________。
【答案】（1）M菌产生了不利于幽门螺杆菌生存的物质
（2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 碳源、氮源、水、无机盐 ③. 接种等量无菌水 ④. 中性或弱碱性 ⑤. 不出现菌落 ⑥. 出现菌落 ⑦. 检测培养基灭菌是否彻底
【解析】
【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在化线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、幽门螺杆菌是原核生物。
【小问1详解】
根据题干信息已知，M菌周围的幽门螺杆菌不能生长繁殖，且除去M菌后再接种幽门螺杆菌仍然不能正常生长繁殖，说明M菌可能产生了不利于幽门螺杆菌生存的物质。
【小问2详解】
①第一步：一般用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。培养基为微生物的提供碳源、氮源、水、无机盐。
第二步：实验应该遵循单一变量和对照原则，所以在甲培养基中接种M菌，在乙培养基中接种等量无菌水，相同条件下培养一段时间后，除去甲培养基上的M菌。
第四步：细菌的培养一般pH控制在中性或弱碱性。
②结果：由于甲组接种了M菌乙组没有接种M菌，所以甲组培养基表面不出现菌落，乙组培养基表面出现菌落。
③检测培养基灭菌是否彻底的方法是将一空白培养基置于同一培养箱中一起培养。
【点睛】本题考查微生物培养，考生识记微生物培养的方法是解答本题的关键。
28. 细胞融合技术有着广泛应用。回答下列有关问题：
（1）细胞融合的原理是___________，两两融合后的细胞有___________个细胞核。
（2）获得杂种植株是植物体细胞杂交的目的。在“番茄-马铃薯”的培育过程中，诱导细胞融合前需用___________处理，细胞融合成功的标志是___________。
（3）制备单克隆抗体是动物细胞融合的重要用途。与植物体细胞杂交相比，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的特有方法是____________，杂交瘤细胞的特点是___________，单克隆抗体的特点是___________。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是___________。
【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性 ②. 1##一
（2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 杂种细胞再生出细胞壁
（3） ①. 用灭活的病毒诱导 ②. 既能大量增殖，又能产生特异性抗体 ③. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ④. B淋巴细胞不能无限增殖
【解析】
【分析】单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
【小问1详解】
细胞融合是指在一定条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程，应用的原理是细胞膜的流动性。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞，即两两融合后的细胞有1个细胞核。
【小问2详解】
植物细胞有细胞壁，在诱导植物细胞融合时，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再进行原生质体间的融合。植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁。
【小问3详解】
动物细胞融合与植物细胞融合的原理都是细胞膜的流动性，诱导融合的方法都有物理法和化学法，诱导动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导。杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和B淋细胞融合而来，其同时具备两者的特点，所以杂交瘤细胞的特点是：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。单克隆抗体与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点。B淋巴细胞不能无限增殖，因此生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体，需要将B淋细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，使其具有体外大量繁殖并产生特异性抗体的特性。
29. 自然条件下牛的繁殖率过低，严重制约养牛业的发展。目前人们利用胚胎工程来提高牛的繁殖率，常采用试管动物技术使普通雌性黄牛产下良种小牛。回答下列问题：
（1）试管动物技术选择的供体母牛和受体母牛的要求分别是_____、_____。
（2）实验操作过程中，常用激素对供体和受体母牛进行_____处理，使胚胎能正常着床。大量研究已经证明，受体对移入宫的外来胚胎基本上不发生_____反应，这为胚胎的存活提供了可能。
（3）体外受精时，从输卵管中冲取得到的成熟的卵子与_____精子在体外受精，形成受精卵，受精卵发育形成早期胚胎时，为补充合成培养基缺乏的物质，应在培养液中加入_____。
（4）最终产下的良种小牛的遗传物质与受体母牛的遗传物质_____（填“相同”或“不相同”），原因是_____。
【答案】（1） ①. 遗传性状优良和生产能力强 ②. 有健康的体质和正常繁殖能力
（2） ①. 同期发情 ②. 免疫排斥
（3） ①. 获能 ②. 动物血清
（4） ①. 不相同 ②. 良种小牛的遗传物质来自供体母牛和公牛，且供体胚胎的遗传特性在孕育过程中一般不受受体母牛的影响
【解析】
【分析】1、 体外受精主要包括:卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、试管动物技术包括体外受精、早期胚胎的培养和胚胎移植技术，属于有性生殖。
【小问1详解】
在试管动物技术中，应选择遗传性状优良和生产能力强的供体母牛和有健康的体质和正常繁殖能力的受体母牛。
【小问2详解】
该过程中需要用促性腺激素对供受体母牛进行同期发情处理，再用促性腺激素对供体母牛进行超数排卵处理；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎的存活提供了可能。
【小问3详解】
体外受精时，从输卵管中冲取得到的成熟的卵子与获能精子在体外受精，形成受精卵；胚胎早期培养时，通常在发育培养液中加入适量的血清，补充合成培养基中缺乏的物质。
【小问4详解】
由于良种小牛的遗传物质来自供体母牛和公牛，且供体胚胎的遗传特性在孕育过程中一般不受受体母牛的影响，因此最终产下的良种小牛的遗传物质与受体母牛的遗传物质是不同的。
30. 某科研人员从苏云金芽孢杆菌中获取BT毒蛋白基因，并将其导入大豆叶肉细胞，培育出抗虫的转基因大豆，主要过程如下。回答下列问题：
（1）质粒上存在潮霉素抗性基因的目的是___________。
（2）过程①表示利用PCR获取BT毒蛋白基因，其前提是___________；在BT毒蛋白基因两侧分别添加HindⅢ和BamHI限制酶序列，其目的是____________。
（3）过程①中BT毒蛋白基因连续扩增5次，形成____________个BT毒蛋白基因片段，需要_____________个引物。
（4）过程②构建重组质粒时，将BT毒蛋白基因插入启动子和终止子之间的原因是_____________。
（5）将重组质粒导入农杆菌时，需要用____________处理农杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。过程③筛选具有抗虫能力的大豆，从分子水平上检测BT毒蛋白基因是否表达的方法是_____________。
【答案】（1）检测目的基因是否导入受体细胞，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
（2） ①. 根据BT毒蛋白基因两端的核苷酸序列合成引物 ②. 让BT毒蛋白基因与质粒定向连接
（3） ①. 32 ②. 62
（4）保证BT毒蛋白基因能够在大豆细胞中表达
（5） ①. Ca2+ ②. 抗原—抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
潮霉素抗性基因作为质粒上的标记基因，可以检测目的基因是否导入受体细胞，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
【小问2详解】
利用PCR获取BT毒蛋白基因（目的基因），前提是要有一段已知BT毒蛋白基因的核苷酸序列，以便合成引物。质粒采用限制酶HindⅢ和BamHI切割，为了让BT毒蛋白基因和质粒定向拼接，所以需要在BT毒蛋白基因两侧分别添加HindⅢ和BamHI限制酶序列。
【小问3详解】
PCR扩增的原理是DNA复制，所以连续扩增5次，形成25=32个BT毒蛋白基因片段，共有32×2=64个单链，其中只有母链的两条链不需要引物，所以共需要引物64-2=62个。
【小问4详解】
启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，从而驱动转录，终止子的作用是终止转录，为保证BT毒蛋白基因能够在大豆细胞中表达，故应该将目的基因插入启动子和终止子之间。
【小问5详解】
将目的基因导入微生物细胞最常用的转化方法是用Ca2+处理细胞，使细胞处于感受态，农杆菌属于微生物，故将重组质粒导入农杆菌时，需要用Ca2+处理农杆菌。检测BT毒蛋白基因在受体细胞是否成功表达，在分子水平上的检测方法是抗原-抗体杂交，原理是抗原和抗体的特异性结合。
皖江中学2021～2022学年第二学期高二期末检测
生物
一、选择题：本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一个选项符合题目要求。
1. 《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是发酵罐中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 酿酒过程中酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质
B. 酿酒过程中起泡是酵母菌细胞呼吸产生CO2所致
C. 可用溴麝香草酚蓝水溶液检测酿酒产生的酒精含量
D. 酿酒过程中pH逐渐降低可能导致酵母菌数量减少
【答案】C
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。
【详解】A、酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质，A正确；
B、酿酒过程中起泡的气体是酵母菌呼吸产生CO2，B正确；
C、溴麝香草酚蓝水溶液用于检测CO2，检测酒精的试剂是酸性重铬酸钾，C错误；
D、酿酒过程中产生的酸性气体二氧化碳使pH逐渐降低，可能导致酵母菌数量减少，D正确。
故选C。
2. 苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的醋，再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。其制作流程大致为：在灭菌的苹果果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌和醋酸杆菌的代谢方式相同
B. 可利用干热灭菌的方法将果肉匀浆灭菌
C. 酿制苹果醋时产生的气泡量多于酿制苹果酒时
D. 酿制苹果醋时的温度高于酿制苹果酒时的温度
【答案】D
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是28℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、酵母菌的代谢方式是异养兼性厌氧型，醋酸杆菌的代谢方式是异养需氧型，A错误；
B、对苹果匀浆灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，B错误；
C、由苹果酒发酵形成苹果醋，无气体释放，因此由糖类发酵形成苹果醋产生的气泡与苹果酒发酵时基本相同，C错误；
D、酵母菌的最适温度为28℃左右，醋酸菌的发酵温度为30-35℃，D正确。
故选D。
3. 《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中，……则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列有关叙述错误的是（ ）
A. 泡菜制作过程中清水与盐的质量比为4：1
B. 泡菜制作过程需严格保持坛内无氧环境
C. 泡菜水中加烧酒少许的目的是消毒杀菌
D. 为防止杂菌污染，泡菜水煮沸后应立即添加乳酸菌
【答案】D
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、在制作泡菜过程中，加入清水和食盐的比例为4：1，A正确；
B、在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸，在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内的无氧环境，B正确；
C、加烧酒少许的目的是利用盐和白酒抑制杂菌生长和调味，C正确；
D、泡菜水煮沸后需冷却后再添加乳酸菌，以免杀死乳酸菌，D错误。
故选D。
4. 酸奶是以牛奶为原料，经巴氏杀菌后再添加双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等有益菌，再经发酵后冷却灌装的一种牛奶制品。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 将牛奶巴氏灭菌后导致营养成分被破坏
B. 发酵时温度的变化会影响有益菌的含量
C. 为防止杂菌污染，可向牛奶中添加抗生素
D. 酸奶制作时透气会使有益菌含量增多
【答案】B
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、巴氏消毒法是指在62~65℃消毒30min或在80~90℃消毒30s~1min，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且牛奶的营养成分不被破坏，A错误；
B、随着发酵时间的延长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌的数量会增加，所以发酵时温度的变化会影响有益菌的含量，B正确；
C、抗生素可杀死乳酸菌，故制作酸奶时不能添加抗生素，C错误；
D、乳酸菌属于厌氧菌，制作时如果透气会杀死乳酸菌，D错误。
故选B。
5. 下列有关微生物培养的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基中NH4+可作为培养硝化细菌的氮源
B. 接种针和涂布器均可采取灼烧的方法灭菌
C. 接种后的培养皿要倒置，以免受到污染
D. 倒平板时应将皿盖打开后放到一边，以免培养基溅到皿盖上
【答案】D
【解析】
【分析】微生物实验的无菌技术主要内容：
（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、硝化细菌可以利用NH4+中的N元素，所以培养基中NH4+可作为培养硝化细菌的氮源，A正确；
B、在接种过程中，接种针和涂布器均可采取灼烧的方法灭菌，B正确；
C、接种后的培养皿要倒置，这样能够防止培养皿上凝结的冷凝水污染培养基，且便于观察，C正确；
D、倒平板时，用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，而不能打开皿盖，这样可能导致培养皿被杂菌污染，D错误。
故选D。
6. 大量的磷酸盐排入水体会导致藻类植物大量疯长，造成水体富营养化。某科研人员拟从某条被污染的河流中筛选出磷酸盐降解率高的菌株。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 磷酸盐为该菌株的生长繁殖提供无机盐
B. 平板划线法可用于菌种的纯化和计数
C. 培养时反复振荡可提高菌株的繁殖率
D. 从藻类植物少的污染河流中取样，能提高筛选的成功率
【答案】B
【解析】
【分析】水体富营养化指的是水体中N、P等营养盐含量过多而引起的水质污染现象。其实质是由于营养盐的输入输出失去平衡性，从而导致水生态系统物种分布失衡，单一物种疯长，破坏了系统的物质与能量的流动，使整个水生态系统逐渐走向灭亡。
【详解】A、磷酸盐中含有P等元素，为该菌株的生长繁殖提供无机盐，A正确；
B、稀释涂布平板法可用于菌种的纯化和计数，B错误；
C、将菌株接种于液体培养基中采用振荡培养，可溶氧量增加，营养物质混匀，提高菌株的繁殖率，C正确；
D、为了筛选出磷酸盐降解率高的菌株，从藻类植物少的污染河流中取样，能提高筛选的成功率，D正确。
故选B。
7. 稀释涂布平板法和细菌计数板计数法是计数微生物的两种方法，某同学通过这两种方法对某样品中的活菌进行计数，比较两种方法的异同点。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 两种方法对活菌进行计数均用到显微镜
B. 两种方法计数时，统计结果均大于实际值
C. 两种方法计数时，均利用固体培养基培养微生物
D. 稀释涂布平板法统计活菌时应选择菌落数为30~300的平板进行计数
【答案】D
【解析】
【分析】微生物的计数方法主要有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。用稀释涂布平板法统计时，由于两个或多个细胞连在一起可以形成一个菌落，所以统计的结果比实际值往往偏小。由于显微镜下统计的微生物细胞包括死亡的细胞在内，所以用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数。
【详解】A、稀释涂布平板法通过菌落计数，不需要显微镜，细菌计数板计数法要用到显微镜，A错误；
B、由于两个或多个微生物连在一起形成一个菌落，故稀释涂布平板法计数的结果往往偏低，细菌计数板计数可能将死菌一起计数，统计结果往往大于实际值，B错误；
C、稀释涂布平板法计数用到固体培养基，细菌计数板计数利用液体培养基，C错误；
D、稀释涂布平板法可以将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，选择菌落数为30~300的平板进行活菌计数，D正确。
故选D。
8. 金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一。细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗，当细菌出现耐药性时疗效下降。A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎。为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂最抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 该平板中培养基属于固体培养基
B. 配制培养基时应将培养基pH调至酸性
C. 滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，是污染所致
D. 滤纸片周围出现透明圈是抗生素诱导细菌出现耐药性的结果
【答案】A
【解析】
【分析】实验原理：若金黄色葡萄球菌对各种抗生素敏感，该抗生素周围会出现透明圈，透明圈越大，越敏感，若金黄色葡萄球菌对各种抗生素不敏感，则不会出现透明圈。
【详解】A、平板中培养基属于固体培养基，A正确；
B、培养细菌时应将培养基的pH调至中性或弱碱性，B错误；
C、滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是基因突变产生了抗抗生素的细菌，C错误；
D、抗生素对细菌起选择作用，变异具有不定向性，D错误。
故选A。
9. 谷氨酸棒状杆菌属于需氧型微生物，通过发酵生成谷氨酸，谷氨酸用于制作味精。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 谷氨酸发酵属于需氧发酵，需监控发酵液中溶解氧
B. 谷氨酸呈酸性，应在酸性条件下进行谷氨酸的发酵
C. 发酵前，发酵罐和培养基需进行严格消毒和灭菌
D. 发酵结束后应对发酵液进行分离和纯化，获得纯净谷氨酸
【答案】B
【解析】
【分析】发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
【详解】A、常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件，以保证谷氨酸棒状杆菌代谢正常进行，A正确；
B、谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要严格控制发酵液的pH。在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸；在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N乙酰谷氨酰胺，B错误；
C、发酵前，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，C正确；
D、发酵结束后，要想获得纯净谷氨酸，应对发酵液进行分离和纯化，D正确。
故选B。
10. 某科研人员选择兰花根尖细胞，利用植物组织培养技术培养兰花。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 根尖细胞培养形成的兰花植株无叶绿体
B. 兰花根尖细胞脱分化时应提供有机碳源
C. 根尖细胞脱分化和再分化时均存在基因的选择性表达
D. 根尖细胞脱分化和再分化时对光照的要求不同
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、由于植物细胞具有全能性，所以根尖细胞培养形成的兰花植株有叶绿体，A错误；
B、兰花根尖细胞不能光合作用，所以兰花根尖细胞脱分化时应提供有机碳源，B正确；
C、根尖细胞脱分化和再分化都是受基因控制的，都存在基因的选择性表达，C正确；
D、根尖细胞脱分化不需要光照、再分化时需要光照，D正确。
故选A。
11. 人工种子又称体细胞种子，是指通过组织培养技术将植物的体细胞诱导成在形态上和生理上均与胚相似的胚状体，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 胚状体具有全能性，可发育成完整植株
B. 与天然种子相比，人工种子的变异概率高
C. 包裹胚状体的介质中含有植物生长调节剂等营养物质
D. 胚状体由愈伤组织通过再分化形成，遗传物质发生变化
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、胚状体含有本物种的全部遗传信息，具有全能性，可发育成完整植株，A正确；
B、天然种子形成时，存在减数分裂和有丝分裂，人工种子形成时无减数分裂，存在有丝分裂，前者变异概率高，B错误；
C、植物生长调节剂不属于营养物质，C错误；
D、再分化过程中遗传物质没有改变，D错误。
故选A。
12. 如图表示利用高秆抗锈病玉米（基因型为AaBb，两对基因独立遗传）的花粉细胞生产人工种子的过程。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 花粉细胞融合前需用酶处理形成原生质体
B. ①过程获得的融合细胞中纯合子占1/4
C. ②过程获得的愈伤组织的全能性高于融合细胞
D. ③过程改变植物激素的添加顺序不影响结果
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：①表示诱导花粉细胞融合的过程；②③表示植物组织培养过程，其原理是植物体细胞具有全能性，其中②表示脱分化过程，③表示再分化过程，这两个过程培养基中的植物激素的种类和比例不同；④表示在胚状体外包裹人工种皮形成人工种子的过程。
【详解】A、花粉细胞具有细胞壁，融合前需用纤维素酶和果胶酶处理形成原生质体，A正确；
B、高秆抗锈病玉米的基因型为AaBb，产生的花粉细胞的基因型为1/4AB、1/4Ab、1/4aB、1/4ab，因此①过程获得的融合细胞中纯合子（基因型为AABB、AAbb、aaBB、aabb）占1/4×1/4+1/4×1/4+1/4×1/4+1/4×1/4=1/4，B正确；
C、②过程通过脱分化获得愈伤组织，分化程度越低，全能性越高，故愈伤组织的全能性高于融合细胞，C正确；
D、③表示再分化过程，当生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成，因此③过程改变植物激素的浓度和比例会影响结果，D错误。
故选D。
13. 利用单克隆抗体研制而成的“生物导弹”可定点作用于病灶，减少用药剂量，降低副作用。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 单克隆抗体只能与一种抗原结合
B. 制备单克隆抗体时的两次筛选目的不同
C. “生物导弹”可选择性地杀伤癌细胞
D. “生物导弹”中单克隆抗体可杀死癌细胞
【答案】D
【解析】
【分析】1.效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。
2.该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
3.单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【详解】A、单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，大量培养经过两次筛选获得的杂交瘤细胞即可获得单克隆抗体，因此，单克隆抗体只能与一种抗原结合，A正确；
B、单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确；
C、“生物导弹”中包含单克隆抗体，而单克隆抗体能与相应的抗原发生特异性结合，因此生物导弹可选择性地杀伤癌细胞，C正确；
D、“生物导弹”中药物能杀死癌细胞，单克隆抗体不能杀死癌细胞，D错误。
故选D。
14. 为保护濒危动物金丝猴，某科研人员尝试利用克隆技术大量繁殖金丝猴。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞
B. 重组胚胎需移植到代孕猴体内才能发育成克隆猴
C. 克隆猴的性别与供体猴相同，其他性状与受体猴相近
D. 克隆猴的形成属于无性生殖，能保持亲本的优良性状
【答案】C
【解析】
【分析】克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的后代的过程。
【详解】A、由于10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型，因此在核移植的过程中通常选用10代以内的细胞作为供体细胞，A正确；
B、重组并发育成新胚胎，利用胚胎移植技术将胚胎移入代孕猴体内，B正确；
C、克隆猴的产生是体细胞移植技术，其细胞核中遗传物质与供体猴相同，但由于细胞质中还存在基因，所以克隆猴与供体猴的遗传物质基本相同，与受体猴不同，C错误；
D、克隆猴没有经过生殖细胞的结合，所以克隆猴的形成属于无性生殖，能保持亲本的优良性状，D正确。
故选C。
15. 小明同学因意外造成皮肤大面积烫伤，医生利用动物细胞培养技术制备人造皮肤，对其进行皮肤移植。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 自身皮肤移植可避免免疫排斥现象
B. 皮肤细胞在传代培养过程中遗传物质不会发生变化
C. 皮肤细胞在传代培养过程中会出现接触抑制现象
D. 皮肤细胞应置于95%空气和5%CO2的培养箱中进行培养
【答案】B
【解析】
【分析】①器官移植的成败主要取决于供者与受者的HLA是否一致或相近，供者与受者的HLA越相近，免疫排斥越弱。②动物细胞培养，需要满足的条件之一是气体环境。人们通常将分瓶之前的细胞培养称为原代培养，将分瓶后的细胞培养称为传代培养。在细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点。
【详解】A、自身皮肤移植，供者与受者的HLA一致，可避免免疫排斥现象，A正确；
B、皮肤细胞在传代培养过程中，受培养条件等因素的影响，随着传代次数的增加，部分细胞的遗传物质可能会发生变化，B 错误；
C、皮肤细胞在传代培养过程中，贴壁细胞在生长增殖时会出现接触抑制现象，C正确；
D、皮肤细胞在培养过程中，需要提供气体环境，即将皮肤细胞置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，D正确；
故选B。
16. 如图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 精子和卵细胞形成后可直接结合形成受精卵
B. ②过程的分裂方式是有丝分裂，细胞体积逐渐减小
C. a表示囊胚，其中内细胞团可用于制备胚胎干细胞
D. b表示原肠胚，原肠胚的三个胚层将逐渐分化形成各种组织、器官
【答案】A
【解析】
【分析】1、分析题图：图为受精作用和胚胎发育过程，图中①为受精作用，②③④为早期胚胎发育过程，a为囊胚，b为原肠胚，受精作用就是精子和卵细胞相互识别并结合形成受精卵的过程。
2、受精卵发育为桑椹胚的过程称为卵裂，卵裂就是有丝分裂，在卵裂过程中，细胞的总体积基本不变，单个细胞的体积不断减小。
【详解】A、母体产生的卵细胞成熟后，由卵巢排出进入输卵管，在这里如果遇到精子，就会与精子相融合，形成受精卵；如果是体外受精，体外受精前需要对精子进行获能处理，A错误；
B、②过程为早期胚胎发育阶段，细胞通过有丝分裂增殖，在此过程中胚胎的总体积基本不变，单个细胞体积会逐渐减小，B正确；
C、a时期为囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性，因此可分离得到胚胎干细胞，C正确；
D、b为原肠胚，分成外胚层、中胚层和内胚层三个胚层，原肠胚的外胚层发育成神经系统、感觉器官、表皮及其附属结构；中胚层发育成骨骼、肌肉、循环、排泄、生殖系统等；内胚层发育成肝、胰等腺体、呼吸道、消化道的上皮等；故原肠胚的三个胚层将逐渐分化形成各种组织、器官，D正确。
故选A。
17. 如图表示利用二倍体小鼠所做的实验，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 16细胞胚中部分细胞同时有白鼠和黑鼠的遗传物质
B. 过程①中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 囊胚期的滋养层细胞可用于进行性别鉴定
D. 嵌合体幼鼠属于四倍体，有丝分裂后期有8个染色体组
【答案】C
【解析】
【分析】图中将发育成白鼠和黑鼠的8细胞胚融合形成16细胞胚，形成囊胚后植入代孕母鼠，形成黑白相间的嵌合体幼鼠。
【详解】A、该实验没有细胞融合，不可能有细胞同时有白鼠和黑鼠的遗传物质，A错误；
B、过程①表示胚胎发育，细胞数目增加，但有机物总量在减少，B错误；
C、滋养层将来发育为胎膜和胎盘，对胚胎进行性别鉴定时选用滋养层细胞，不会对胚胎造成伤害，C正确；
D、由于不存细胞融合，嵌合体幼鼠属于二倍体，有丝分裂后期有4个染色体组，D错误。
故选C。
18. 为解决人口老龄化程度加深的问题，党中央进一步优化生育政策，实施一对夫妻可以生育三个子女政策。一些高龄妇女希望通过试管婴儿技术再生一个孩子。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 高龄妇女都通过注射性激素的方法增加排卵数量
B. 从卵巢中采集的卵母细胞培养至MⅡ期达到成熟
C. 在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入
D. 人体通过体外受精获得试管胚胎，试管婴儿属于有性生殖
【答案】A
【解析】
【分析】超数排卵是手段是注射促性腺激素。体外受精的卵母细胞需要培养至MⅡ期达到成熟，才能具备受精能力。透明带反应：在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入。卵细胞膜反应：精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。
【详解】A、一般通过注射促性腺激素增加排卵数量，A错误；
B、从卵巢中采集卵母细胞培养至MⅡ期达到成熟，才能具备受精能力，B正确；
C、透明带反应：在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入，C正确；
D、人体通过体外受精获得试管胚胎，涉及到减数分裂形成配子的过程，所以试管婴儿属于有性生殖，D正确。
故选A。
19. 基因工程需要多种酶的参与。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 限制酶主要存在于原核细胞中，可识别DNA或RNA上的碱基序列
B. DNA连接酶不能识别DNA上碱基序列，但可识别黏性末端或平末端
C. 解旋酶可破坏磷酸二酯键和氢键，用于DNA复制过程中解开DNA双螺旋
D. 成熟mRNA经逆转录酶催化形成的DNA分子能直接转录翻译合成蛋白质
【答案】B
【解析】
【分析】1、关于限制酶（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端，注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键；
2、DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低；（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
【详解】A、限制酶主要存在于原核细胞中，只能识别双链DNA分子上的碱基序列，A错误；
B、DNA连接酶不能识别DNA上碱基序列，但可识别黏性末端或平末端，DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，B正确；
C、在DNA复制过程中，解旋酶破坏氢键，使DNA双链解开，成为DNA复制的模板，C错误；
D、成熟mRNA经逆转录酶催化形成的DNA分子缺少启动子和终止子，不能直接转录翻译合成蛋白质，D错误。
故选B。
20. 生长激素具有促进人体生长的作用，可用于治疗侏儒症儿童患者。某科研人员采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成生长激素且只存在于乳汁中。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 培育乳腺生物反应器常选用乳腺细胞作为受体细胞
B. 常选用显微注射法将含有生长激素基因的表达载体导入受体细胞
C. 人的生长激素基因在乳腺细胞通过转录和翻译表达
D. 乳腺生物反应器的体细胞含有人的生长激素基因
【答案】A
【解析】
【分析】1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2、基因表达载体的构建是基因工程的核心。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。将基因的表达载体通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵（雌性个体）中，由这个受精卵发育成的转基因动物即为乳腺生物反应器。
【详解】A、培育乳腺生物反应器常选受精卵作为受体细胞，A错误；
B、将表达载体导入动物细胞的常用方法是显微注射法，B正确；
C、基因的表达包括转录和翻译，所以人的生长激素基因在乳腺细胞通过转录和翻译表达，C正确；
D、将人生长激素基因表达载体导入受精卵后，发育为转基因羊，其产生的细胞都是由受精卵经有丝分裂发育而来的，则乳腺生物反应器的体细胞含有人的生长激素基因，D正确。
故选A。
21. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A. DNA对高温的耐受性低于蛋白质
B. DNA溶于酒精，也溶于2mol/L的NaCl溶液
C. 猪血取材方便，适宜用于提取和鉴定DNA
D. 从菜花细胞中提取DNA需先研磨破坏细胞
【答案】D
【解析】
【分析】利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，选择适当的盐浓度能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
【详解】A、DNA在80℃以上变性，蛋白质在60℃以上变性，DNA对高温的耐受性高于蛋白质。A错误；
B、DNA不溶于酒精，在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较高，B错误；
C、猪（哺乳动物）成熟红细胞中不含DNA，不能用于提取和鉴定DNA。C错误；
D、菜花细胞有细胞壁保护，通过研磨破坏细胞壁、细胞膜等结构，使DNA释放出来。D正确。
故选D。
22. 下图表示获得抗虫水稻的部分操作步骤。下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与
B. ②过程常用农杆菌转化法，③过程常用植物组织培养技术
C. 抗虫水稻所有体细胞中都有抗虫基因，且都能表达
D. 细胞Ⅲ不能含有四环素抗性基因
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤，其中①是基因表达载体的构建过程；②是将目的基因导入农杆菌细胞；③是采用农杆菌转化法将目的基因导入植株；④为肽链；⑤为tRNA；⑥为mRNA。
【详解】A、①是基因表达载体的构建过程，该过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与，A正确；
B、Ⅲ是农杆菌，②过程常用农杆菌转化法，步骤③过程常用植物组织培养技术获取完整植株，B正确；
C、若抗虫基因导入成功，抗虫水稻所有体细胞中都有抗虫基因，但是由于基因的选择性表达抗虫水稻中只有某些细胞中的抗虫基因能表达，C错误；
D、四环素抗性基因作为筛选重组质粒的标记基因，那么受体细胞中不能存在四环素抗性基因，不然不能筛选是否存在重组质粒，所以细胞Ⅲ不能含有四环素抗性基因，D正确。
故选C。
23. CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点对特定的DNA序列进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，Cas9蛋白可人为选择DNA上的目标位点进行切割。下列相关叙述错误的是（ ）
A. Cas9蛋白与限制酶的功能相近
B. Cas9蛋白切割DNA分子上的磷酸二酯键
C. 向导RNA的碱基数量是目标位点基因的碱基数量的一半
D. 向导RNA可能识别DNA上非目标位点基因，并引起Cas9蛋白切割
【答案】C
【解析】
【分析】结合题意可知：基因编辑又称基因组编辑或基因组工程，是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程，通过向导RNA中20个碱基的识别序列与剪切点附近序列互补配对，引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。
【详解】A、结合题意可知，Cas9蛋白可对特定的DNA序列进行切割，具有限制酶的特性，A正确；
B、Cas9蛋白相当于限制酶，其切割的位点是磷酸二酯键，B正确；
C、向导RNA只需与目的位点上部分碱基序列互补即可，其碱基数量少于目标位点基因的碱基数量的一半，C错误；
D、RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点对特定的DNA序列进行切割，不同的目的基因中可能含有相同的碱基序列能被该复合物识别，故向导RNA可能识别DNA上非目标位点基因，并引起Cas9蛋白切割，D正确。
故选C。
24. 下列有关转基因生物安全性问题的叙述，正确的是（ ）
A. 转基因技术可提高农作物产量，不存在负面影响
B. 转基因技术可能制造新的过敏原，有一定的风险
C. 转基因技术可能被恐怖分子利用，应停止研究
D. 转基因技术可能造成新的基因污染，应停止研究
【答案】B
【解析】
【分析】转基因生物的安全性问题包括：
（1）食物安全：滞后效应、出现过敏源、食物的营养成分改变等。
（2）生物安全：基因扩散导致对生物多样性的威胁。
（3）环境安全：对生态系统稳定性及环境的影响。
【详解】A、转基因技术可能影响到食品安全、环境安全等，存在负面影响，A错误；
B、转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险，B正确；
CD、转基因技术有有利的一面，也有不利的一面，应采取一定的措施遏制其不利的一面，积极发挥其有利的一面，而不是停止研究，CD错误。
故选B。
25. 下列有关克隆人和设计试管婴儿的叙述，正确的是（ ）
A. 克隆人和试管婴儿均是有性生殖的产物
B. 设计试管婴儿可有目的地生出所需的孩子，应大力推广
C. 治疗性克隆可为一些患者提供器官，用于器官移植
D. 生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都会面临伦理问题
【答案】C
【解析】
【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
2、克隆技术：
（1）治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。
（2）生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。
3、生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
【详解】A、克隆人属于无性生殖，试管婴儿属于有性生殖，A错误；
B、设计试管婴儿可能造成性别比例失调，应根据目的进行规范，而不是大力推广，B错误；
C、治疗性克隆指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植，C正确；
D、生殖性克隆的目的是克隆出个体，治疗性克隆是克隆出组织、器官，前者会面临伦理问题，后者不会面临伦理问题，D错误。
故选C。
二、非选择题：本题包括5小题，共50分。
26. 枸杞酒是以枸杞子、生地黄汁为主料制作的药酒，具有滋补虚弱、益精气，去冷风、壮阳道、止泪和健腰脚等功能。下图为枸杞酒生产工艺流程简图，回答下列问题：
选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→枸杞酒
（1）制作枸杞酒的菌种是___________，发酵过程的温度应该控制在___________。
（2）枸杞酒制作过程中，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，然后密封，先通气、后密封的目的分别是____________、___________。
（3）家庭制作枸杞酒时，___________的条件可抑制其他微生物的生长繁殖，故该过程不需严格灭菌，但需定期排气，原因是____________。
（4）枸杞酒制作是否成功，可用___________（填试剂）鉴定，该物质与酒精反应呈现___________色。
【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 18~30℃
（2） ①. 通入无菌空气，有利于酵母菌有氧呼吸释放大量能量，进行繁殖 ②. 密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精
（3） ①. 酸性、缺氧 ②. 酵母菌发酵过程中产生CO2
（4） ①. 酸性重铬酸钾溶液##重铬酸钾溶液 ②. 灰绿
【解析】
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【小问1详解】
果酒的制作离不开酵母菌，所以制作枸杞酒的菌种是酵母菌。酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，所以发酵过程的温度应该控制在18～30℃。
【小问2详解】
枸杞酒制作过程中，先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，有利于酵母菌有氧呼吸释放大量能量，进行繁殖，然后密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。
【小问3详解】
家庭制作枸杞酒时，在没有严格灭菌的条件下，通过控制温度和通入氧气措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种，由于酵母菌能在缺氧、酸性的发酵液生长繁殖，而其它微生物不能，所以果酒制作过程不需严格灭菌。由于酵母菌发酵过程中产生CO2，所以需要定期排气。
【小问4详解】
果酒制作是否成功，需发酵后用酸性重铬酸钾溶液来鉴定，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【点睛】本题考查果酒的制作，考生识记果酒的制作原理，掌握果酒制作的过程，根据题干信息结合所学知识解决问题是解答本题的关键。
27. 幽门螺杆菌（Hp）是引起胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等疾病的“罪魁祸首”。某研究性学习小组在培养该菌过程中，发现了在某种细菌M的周围，幽门螺杆菌的生长繁殖受到抑制。他们把M菌接种在专门的培养基上培养，一段时间后，除去M菌，在此培养基上再培养幽门螺杆菌，结果幽门螺杆菌仍然不能正常生长繁殖。回答下列问题：
（1）细菌M周围的幽门螺杆菌生长繁殖受到抑制，原因可能是___________。
（2）该研究性学习小组欲验证上述原因，进行了如下实验：
①实验步骤：
第一步：取两个培养皿，按相同的营养成分配制成甲、乙两个培养基，并用___________法进行灭菌。培养基的基本成分有_____。
第二步：在甲培养基中接种M菌，在乙培养基中___________，相同条件下培养一段时间后，除去甲培养基上的M菌。
第三步：在甲、乙两培养基上分别接种相同且等量的幽门螺杆菌。
第四步：在恒温培养箱中培养甲、乙两个培养基上的幽门螺杆菌。培养时对pH的要求是____________。
②结果：
甲组培养基表面___________，乙组培养基表面___________。
③实验过程中常将一空白培养基置于同一培养箱中一起培养，目的是____________。
【答案】（1）M菌产生了不利于幽门螺杆菌生存的物质
（2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 碳源、氮源、水、无机盐 ③. 接种等量无菌水 ④. 中性或弱碱性 ⑤. 不出现菌落 ⑥. 出现菌落 ⑦. 检测培养基灭菌是否彻底
【解析】
【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在化线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、幽门螺杆菌是原核生物。
【小问1详解】
根据题干信息已知，M菌周围的幽门螺杆菌不能生长繁殖，且除去M菌后再接种幽门螺杆菌仍然不能正常生长繁殖，说明M菌可能产生了不利于幽门螺杆菌生存的物质。
【小问2详解】
①第一步：一般用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。培养基为微生物的提供碳源、氮源、水、无机盐。
第二步：实验应该遵循单一变量和对照原则，所以在甲培养基中接种M菌，在乙培养基中接种等量无菌水，相同条件下培养一段时间后，除去甲培养基上的M菌。
第四步：细菌的培养一般pH控制在中性或弱碱性。
②结果：由于甲组接种了M菌乙组没有接种M菌，所以甲组培养基表面不出现菌落，乙组培养基表面出现菌落。
③检测培养基灭菌是否彻底的方法是将一空白培养基置于同一培养箱中一起培养。
【点睛】本题考查微生物培养，考生识记微生物培养的方法是解答本题的关键。
28. 细胞融合技术有着广泛应用。回答下列有关问题：
（1）细胞融合的原理是___________，两两融合后的细胞有___________个细胞核。
（2）获得杂种植株是植物体细胞杂交的目的。在“番茄-马铃薯”的培育过程中，诱导细胞融合前需用___________处理，细胞融合成功的标志是___________。
（3）制备单克隆抗体是动物细胞融合的重要用途。与植物体细胞杂交相比，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的特有方法是____________，杂交瘤细胞的特点是___________，单克隆抗体的特点是___________。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是___________。
【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性 ②. 1##一
（2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 杂种细胞再生出细胞壁
（3） ①. 用灭活的病毒诱导 ②. 既能大量增殖，又能产生特异性抗体 ③. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ④. B淋巴细胞不能无限增殖
【解析】
【分析】单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
【小问1详解】
细胞融合是指在一定条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程，应用的原理是细胞膜的流动性。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞，即两两融合后的细胞有1个细胞核。
【小问2详解】
植物细胞有细胞壁，在诱导植物细胞融合时，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再进行原生质体间的融合。植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁。
【小问3详解】
动物细胞融合与植物细胞融合的原理都是细胞膜的流动性，诱导融合的方法都有物理法和化学法，诱导动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导。杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和B淋细胞融合而来，其同时具备两者的特点，所以杂交瘤细胞的特点是：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。单克隆抗体与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点。B淋巴细胞不能无限增殖，因此生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体，需要将B淋细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，使其具有体外大量繁殖并产生特异性抗体的特性。
29. 自然条件下牛的繁殖率过低，严重制约养牛业的发展。目前人们利用胚胎工程来提高牛的繁殖率，常采用试管动物技术使普通雌性黄牛产下良种小牛。回答下列问题：
（1）试管动物技术选择的供体母牛和受体母牛的要求分别是_____、_____。
（2）实验操作过程中，常用激素对供体和受体母牛进行_____处理，使胚胎能正常着床。大量研究已经证明，受体对移入宫的外来胚胎基本上不发生_____反应，这为胚胎的存活提供了可能。
（3）体外受精时，从输卵管中冲取得到的成熟的卵子与_____精子在体外受精，形成受精卵，受精卵发育形成早期胚胎时，为补充合成培养基缺乏的物质，应在培养液中加入_____。
（4）最终产下的良种小牛的遗传物质与受体母牛的遗传物质_____（填“相同”或“不相同”），原因是_____。
【答案】（1） ①. 遗传性状优良和生产能力强 ②. 有健康的体质和正常繁殖能力
（2） ①. 同期发情 ②. 免疫排斥
（3） ①. 获能 ②. 动物血清
（4） ①. 不相同 ②. 良种小牛的遗传物质来自供体母牛和公牛，且供体胚胎的遗传特性在孕育过程中一般不受受体母牛的影响
【解析】
【分析】1、 体外受精主要包括:卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
2、试管动物技术包括体外受精、早期胚胎的培养和胚胎移植技术，属于有性生殖。
【小问1详解】
在试管动物技术中，应选择遗传性状优良和生产能力强的供体母牛和有健康的体质和正常繁殖能力的受体母牛。
【小问2详解】
该过程中需要用促性腺激素对供受体母牛进行同期发情处理，再用促性腺激素对供体母牛进行超数排卵处理；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎的存活提供了可能。
【小问3详解】
体外受精时，从输卵管中冲取得到的成熟的卵子与获能精子在体外受精，形成受精卵；胚胎早期培养时，通常在发育培养液中加入适量的血清，补充合成培养基中缺乏的物质。
【小问4详解】
由于良种小牛的遗传物质来自供体母牛和公牛，且供体胚胎的遗传特性在孕育过程中一般不受受体母牛的影响，因此最终产下的良种小牛的遗传物质与受体母牛的遗传物质是不同的。
30. 某科研人员从苏云金芽孢杆菌中获取BT毒蛋白基因，并将其导入大豆叶肉细胞，培育出抗虫的转基因大豆，主要过程如下。回答下列问题：
（1）质粒上存在潮霉素抗性基因的目的是___________。
（2）过程①表示利用PCR获取BT毒蛋白基因，其前提是___________；在BT毒蛋白基因两侧分别添加HindⅢ和BamHI限制酶序列，其目的是____________。
（3）过程①中BT毒蛋白基因连续扩增5次，形成____________个BT毒蛋白基因片段，需要_____________个引物。
（4）过程②构建重组质粒时，将BT毒蛋白基因插入启动子和终止子之间的原因是_____________。
（5）将重组质粒导入农杆菌时，需要用____________处理农杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。过程③筛选具有抗虫能力的大豆，从分子水平上检测BT毒蛋白基因是否表达的方法是_____________。
【答案】（1）检测目的基因是否导入受体细胞，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
（2） ①. 根据BT毒蛋白基因两端的核苷酸序列合成引物 ②. 让BT毒蛋白基因与质粒定向连接
（3） ①. 32 ②. 62
（4）保证BT毒蛋白基因能够在大豆细胞中表达
（5） ①. Ca2+ ②. 抗原—抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
潮霉素抗性基因作为质粒上的标记基因，可以检测目的基因是否导入受体细胞，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
【小问2详解】
利用PCR获取BT毒蛋白基因（目的基因），前提是要有一段已知BT毒蛋白基因的核苷酸序列，以便合成引物。质粒采用限制酶HindⅢ和BamHI切割，为了让BT毒蛋白基因和质粒定向拼接，所以需要在BT毒蛋白基因两侧分别添加HindⅢ和BamHI限制酶序列。
【小问3详解】
PCR扩增的原理是DNA复制，所以连续扩增5次，形成25=32个BT毒蛋白基因片段，共有32×2=64个单链，其中只有母链的两条链不需要引物，所以共需要引物64-2=62个。
【小问4详解】
启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，从而驱动转录，终止子的作用是终止转录，为保证BT毒蛋白基因能够在大豆细胞中表达，故应该将目的基因插入启动子和终止子之间。
【小问5详解】
将目的基因导入微生物细胞最常用的转化方法是用Ca2+处理细胞，使细胞处于感受态，农杆菌属于微生物，故将重组质粒导入农杆菌时，需要用Ca2+处理农杆菌。检测BT毒蛋白基因在受体细胞是否成功表达，在分子水平上的检测方法是抗原-抗体杂交，原理是抗原和抗体的特异性结合。
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