2022-2023学年四川省成都市阳安中学高二3月月考生物试题含解析

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 简阳市阳安中学高2021级高二下学期3月月考生物试题
第一卷 选择题
一、选择题：下列每个小题只有一个最佳选项
1. 图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列有关叙述中，正确的是（　　）

A. 酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵
B. 使用甲装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀b
C. 甲装置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
D. 过程③和④都需要氧气的参与，都在线粒体内膜与[H]结合生成水
【答案】C
【解析】
【分析】根据题意和图示分析可知：甲是发酵装置，乙是果酒、果醋制作的实验原理，①是葡萄糖酵解形成丙酮酸的阶段，发生的场所是细胞质基质，②是酵母菌无氧呼吸的第二阶段，发生的场所是细胞质基质，③是有氧呼吸的第二、第三阶段，发生的场所是线粒体，④是醋酸菌发酵形成醋酸的过程。
【详解】A、醋酸菌是嗜温菌，所以果醋发酵所需的最适温度高于果酒发酵，A错误；
B、甲装置中，阀a控制进气，阀b控制排气，制作果酒时应关闭阀a以创造缺氧环境，适时打开阀b几秒钟以排出产生CO2，B错误；
C、甲装置中，阀a控制进气，阀b控制排气，所以可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，C正确；
D、过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，该过程的反应场所是线粒体；过程④表示果醋发酵，醋酸菌属于原核生物，原核生物无线粒体，该过程的反应场所是细胞质基质，D错误。
故选C。
2. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ）

A. 去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染
B. 过程③在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C. 在过程④时，榨出的蓝莓汁需经过高压蒸汽灭菌后才能密闭发酵
D. 过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源
【答案】C
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6 2CO2+2C2H5OH+能量。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、榨汁前需将新鲜的蓝莓进行冲洗，然后除去枝梗，以避免除去枝梗时引起蓝莓破损，防止增加被杂菌污染的机会，A正确；
B、过程③是果醋发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B正确；
C、过程④果酒制作的菌种的来源于蓝莓皮上野生的酵母菌，所以蓝莓汁不需经过高压蒸汽灭菌，C错误；
D、在没有糖原的情况下，醋酸菌可以把酒精转化为醋酸，即酒精可作为醋酸菌的碳源和能源，D正确。
故选C。
【点睛】本题结合图解，考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和培养，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。
3. 下列关于相关实验失败的原因分析，错误的是（　　）
A. 制作果酒时，未对发酵装置进行消毒处理，造成发酵失败
B. 制作果醋时，通入氧气不足或温度过低，造成发酵失败
C. 制作腐乳时，装瓶后未将瓶口密封，造成豆腐腐败变质
D. 制作泡菜时，放盐的比例过大，造成泡菜腐烂发霉
【答案】D
【解析】
【分析】传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵、制作食品的技术。
【详解】A、制作果酒时，未对发酵装置进行消毒处理，可能会有杂菌污染，造成发酵失败，A正确；
B、制作果醋时，利用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧微生物，培养的条件为30-35℃，所以通入氧气不足或温度过低，造成发酵失败 ，B正确；
C、制作腐乳时，装瓶后未将瓶口密封，造成杂菌污染，造成豆腐腐败变质，C正确；
D、制作泡菜时，盐具有抑制微生物生长的作用，放盐的比例过小，会造成泡菜腐烂发霉，D错误。
故选D。
4. 下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的叙述，正确的是（ ）
A. 在葡萄酒的制作过程中，应对葡萄进行多次反复冲洗，这样才可以洗得彻底
B. 果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在酒精发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在醋酸发酵时排出二氧化碳
C. 豆腐上长满毛霉以后，需要加盐腌制，加盐可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，同时又能析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬
D. 制作泡菜时泡菜坛子需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制细菌繁殖
【答案】C
【解析】
【分析】
1、果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧。
2、果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
4、泡菜制作的原理是乳酸发酵，乳酸菌是严格厌氧菌，因此发酵过程中要保证无氧环境；泡菜制作过程中，腌制的时间、温度、盐的用量等都会影响泡菜的品质。
【详解】A、在葡萄酒的制作过程中，不能对葡萄进行多次反复冲洗，以防止菌种流失，A错误；
B、果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳，B错误；
C、豆腐上长满毛霉以后，需要加盐腌制8天左右，加盐可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，同时又能析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，C正确；
D、制作泡菜时泡菜坛子需要加水密封，目的是隔绝空气，促进乳酸菌繁殖，D错误。
故选C。
5. 豆腐乳是我国独特的传统发酵食品，是用豆腐发酵制作而成。以下说法正确的是（ ）
A. 豆腐发酵过程中由多种霉菌参与，如毛霉、根霉和曲酶等，没有酵母菌参与发酵
B. 豆腐上长出的白毛是毛霉的直立菌丝，其作用是使腐乳成形，对人体无害
C. 毛霉等微生物中的脂肪酶能将脂肪水解为甘油和氨基酸使豆腐变成独特风味的腐乳
D. 豆腐乳制作过程中加入的盐、酒和香辛料都有防腐杀菌的作用，抑制微生物生长
【答案】D
【解析】
【分析】腐乳的制作原理：利用的菌种有毛霉（主要）、酵母菌、曲霉、青霉等，适宜温度为15℃～18℃，代谢类型为异养需氧型；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸．腐乳制作时，卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，若酒的含量过低，不足以杀菌，若腐乳的含量过高，则会延长腐乳成熟的时间。用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败。
【详解】A、豆腐发酵过程中既有毛霉等霉菌参与也有酵母菌参与，A错误。
B、豆腐上长出的白毛是毛霉的直立菌丝，豆腐外一层的“皮”是由匍匐菌丝形成的，“皮”的作用是使腐乳成形，B错误。
C、脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸使豆腐变成独特风味的腐乳，C错误。
D、腐乳制作过程中加入的盐，制作卤汤时加入的酒和香辛料都具有防腐杀菌的作用，抑制微生物生长，D正确。
故选D。
6. 小明做“微生物的分离与培养”实验时得出如下结论，相关叙述正确的是（　　）
A. 高压蒸汽灭菌加热结束时，立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用
B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
【答案】D
【解析】
【分析】无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
【详解】A、到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降（不需打开放气阀），当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，拿出培养基和工具待用，A错误；
B、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20 mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；
C、接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落，C错误；
D、培养基是倒置培养，标记菌落时应用记号笔标记在皿底上，D正确。
故选D。
7. 腐乳制作过程中要注意防止杂菌污染。措施中不能起抑制杂菌污染作用的是（　　）
A. 加入12%的料酒
B. 逐层增加盐的用量
C. 装瓶时让瓶口通过酒精灯火焰
D. 用含水量约为70%的豆腐制腐乳
【答案】D
【解析】
【分析】腐乳制作过程中，为了防止杂菌污染，主要措施有：腌制中加盐，卤汤中酒、香辛料以及对坛子消毒、装坛密封时用酒精灯火焰处理坛口等，都有抑制微生物生长的作用，据此分析。
【详解】A、在制作腐乳过程中加入酒，可以调制腐乳的风味，另外能抑制和杀灭杂菌，A不符合题意；
B、高浓度的食盐对微生物有抑制作用，所以在腌制放盐时，越靠近瓶口的位置，加入的食盐量越多，B不符合题意；
C、装瓶时让瓶口过火是为了杀灭瓶口周围的杂菌，避免污染，C不符合题意；
D、用含水量约为70%的豆腐作为原料，是为了使制作成的腐乳成形，与抑制杂菌没有关系，D符合题意。
故选D。
8. 下列有关毛霉在腐乳制作中的作用的叙述，正确的是（ ）
①将多糖分解成葡萄糖 ②将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸 ③将脂肪水解成甘油和脂肪酸 ④将核酸分解成核苷酸
A. ①② B. ②③
C. ③④ D. ①④
【答案】B
【解析】
【分析】
【详解】①毛霉不能将多糖分解成葡萄糖，①错误；②毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，②正确；③毛霉等微生物产生的脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，③正确；④毛霉不能将核酸分解成核苷酸，④错误。
故选B
【点睛】
9. 下列关于泡菜和亚硝酸盐的叙述，正确的是
A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成橘黄色染料
B. 绿色食品中不会含有亚硝酸盐
C. 盐水倒入泡菜坛前要煮沸冷却，防止微生物污染
D. 亚硝酸盐是强致癌物质，不能用于食品生产
【答案】C
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为4：1，盐水要加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
【详解】A. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，A错误；
B. 绿色食品中也可能含有亚硝酸盐，只是含量在安全范围内，B错误；
C. 盐水入坛前要煮沸、冷却，以防止污染，C正确；
D. 亚硝酸盐转变成亚硝胺后才是致癌物，亚硝酸盐作为防腐剂可以用于食品的加工，D错误。
10. 下列关于亚硝酸盐含量测定原理的描述正确的是
A. 重氮化→酸化→显色→比色 B. 重氮化→酸化→比色→显色
C. 酸化→重氮化→比色→显色 D. 酸化→重氮化→显色→比色
【答案】D
【解析】
【详解】【分析】本题考查亚硝酸盐含量测定原理。
【详解】盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合，生成玫瑰红色复合物，亚硝酸盐浓度不同，颜色深浅不同，D正确。
【点睛】本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。
11. 下列关于亚硝酸盐含量测定的叙述，不正确的是（ ）
A. 亚硝酸盐经显色反应后呈玫瑰红色，不同浓度的亚硝酸盐显色深浅不同
B. 泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐用量不影响亚硝酸盐含量
C. 用比色法不能精确算出泡菜中亚硝酸盐的含量
D. 配制溶液所用的提取剂为氯化镉和氯化钡溶液，使样品溶液变得无色透明的是氢氧化铝乳液
【答案】B
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】A、亚硝酸盐经显色反应后呈玫瑰红色，不同浓度的亚硝酸盐显色深浅不同，与已知浓度的标准显色液目测比较，可估算泡菜中亚硝酸盐含量，A正确；
B、腌制时间长短、腌制温度和食盐的用量都会影响亚硝酸盐的含量，B错误；
C、测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，可估算出样品中亚硝酸盐的含量，C正确；
D、配制溶液所用的提取剂为氯化镉和氯化钡溶液，使样品溶液变得无色透明的是氢氧化铝乳液，D正确。
故选B。
12. 以下关于泡菜中亚硝酸盐含量测定的操作顺序正确的是( )
①配制溶液 ②制备标准显色液 ③制备样品处理液 ④比色
A. ①②③④ B. ②③④① C. ①③②④ D. ③①②④
【答案】A
【解析】
【详解】亚硝酸盐含量的测定的一般步骤是：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色。
故选A。
13. 下列是测定亚硝酸盐含量的试剂，其中在配制时需加入盐酸的是（　　）
①对氨基苯磺酸溶液 ②N-1-萘基乙二胺溶液 ③亚硝酸钠标准液
A. ①②③ B. ① C. ①③ D. ②③
【答案】B
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的原理是比色法：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。将经过反应显色后的泡菜待测样品与标准液比 色，即可估算出样品中的亚硝酸盐含量。
【详解】①对氨基苯磺酸溶液需将对氨基苯磺酸溶于质量分数为20%的盐酸中，①正确；
②N­-1­萘基乙二胺盐酸盐溶液是将N-­1­-萘基乙二胺盐酸盐直接溶于水中制成的，不需加入盐酸，②错误；
③亚硝酸钠标准液是用水溶解亚硝酸钠，不需要加盐酸，③错误；
综上所述，①正确，ACD错误，B正确。
故选B。
14. 有关检测泡菜中亚硝酸盐含量的叙述，不正确的是（　　）
A. 实验必须设置一组不含亚硝酸盐的比色管作为空白对照组
B. 在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应
C. 重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
D. 对显色反应样品进行目测，可以精确计算出泡菜中亚硝酸盐的含量
【答案】D
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。据此答题。
【详解】A、实验必须设置一组不含亚硝酸盐的比色管作为空白对照组，A正确；
B、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，B正确；
C、重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，C正确；
D、显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，D错误。
故选D。
【点睛】本题考查泡菜的制作，对于此类试题，需要考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型，掌握泡菜的制作的原理及条件，掌握测定亚硝酸盐的方法及原理，能结合所学的知识准确判断各选项。
15. 下列有关膳食中亚硝酸盐的说法，错误的是（ ）
A. 亚硝酸盐在蔬菜中平均含量比咸菜中高
B. 膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康
C. 绝大部分亚硝酸盐以“过客”的形式随尿液排出
D. 亚硝酸盐只有在特定条件下才会转变成致癌物质
【答案】A
【解析】
【分析】亚硝酸盐在体内可以转化呈亚硝胺，对人体有毒害作用。
【详解】A、亚硝酸盐在蔬菜中平均含量比咸菜中低，A错误；
B、膳食中的亚硝酸盐含量较低，一般不会危害人体健康，B正确；
C、绝大部分亚硝酸盐以“过客”的形式随尿液排出，C正确；
D、亚硝酸盐只有在适宜pH、温度和一定的微生物作用下才会转变成致癌物质，D正确。
故选A。
16. 下列有关制作果酒、果醋、腐乳的叙述，正确的是（　　）
A. 发酵过程发挥主要作用的微生物代谢类型都是异养需氧型
B. 发酵过程中所有的相关反应都是在微生物的细胞内进行的
C. 发酵过程中控制好温度既有利于目的菌的生长，也可抑制杂菌的生长
D. 传统发酵的操作过程中都必须进行严格的灭菌处理， 防止杂菌污染
【答案】C
【解析】
【分析】传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵、制作食品的技术。
【详解】A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，参与腐乳制作的微生物是毛霉，其代谢类型是异养需氧型，A错误；
B、腐乳制作的的过程中，蛋白质脂肪的水解反应是发生在微生物细胞外，B错误；
C、不同微生物适合生存的条件不同，因此发酵过程中控制好温度既有利于目的菌的生长，也可抑制杂菌的生长，C正确；
D、传统发酵的操作过程中进行消毒处理，但没有进行灭菌处理，D错误。
故选C。
17. 如表所示为配制1000mL某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是（　　）
成分
NaNO3
K2HPO4
FeSO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
青霉素
琼脂
用量
3g
1g
0．01g
0．5g
30g
0．1万单位
15g

A. 依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基
B. 由培养基成分可知，该培养基所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉
C. 本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D. 若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3并加入尿素
【答案】C
【解析】
【分析】1、培养基的营养构成一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；
2、培养基按照物理性质分为固体培养基和液体培养基；按照用途分为选择培养基和鉴别培养基；
3、选择培养基是在培养基中添加某物质，抑制杂菌生长，促进所需微生物生长，培养分离出特定的微生物；
4、培养基的配制原则：①目的要明确；②营养要协调；③pH要适宜；
5、以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出分解尿素的细菌。
【详解】A、培养基的配方中含琼脂和青霉素，按照培养基的物理性质属于固体培养基，按照用途划分属于选择培养基，青霉素是抗生素，抑制细菌的生长等，A正确；
B、培养基的配方中含有葡萄糖，该培养基所培养的是同化类型为异养型，而细菌不能在含有青霉素的培养基中生存，所以可能培养的是酵母菌或毛霉，B正确；
C、培养基中的青霉素主要起杀菌作用，不是营养物质，不满足微生物生长对特殊营养物质的要求，C错误；
D、以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出分解尿素的细菌，所以要去掉其他氮源和青霉素，D正确。
故选C。
18. 下列有关实验操作中，错误的是（　　）
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③对于不耐高温的液体，如牛奶，用巴氏消毒法消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄都进行灭菌⑤培养基可采用高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌
A. ①③ B. ②④ C. ⑤⑦ D. ④⑥
【答案】D
【解析】
【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；
②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；
③对牛奶这种不耐高温的液体可用巴氏消毒法消毒，③正确；
④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；
⑤培养基通常用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌，⑤正确；
⑥指示剂和染料可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑥错误；
⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌，即用灼烧灭菌法进行灭菌，⑦正确。综上分析④⑥错误，ABC正确 ，D错误。
故选D。
19. 某学者欲研究被石油污染染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是（ ）
A. 利用平板划线法对细菌进行计数
B. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌
C. 采用稀释涂布平板法分离菌种
D. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁
【答案】A
【解析】
【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基，具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。
【详解】A、分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，但对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法，A错误；
B、根据实验目的筛选出能分解石油的细菌可知，培养基的配方应以石油为唯一碳源，B正确；
C、稀释涂布平板法既可以分离微生物也可以进行微生物计数，C正确；
D、称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁，以防止杂菌的污染，D正确。
故选A。
20. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。下列有关无菌技术的叙述，错误的是（　　）
A. 饮用前的鲜牛奶或使用后的液体培养基均可用高压蒸汽灭菌法进行处理
B. 用干热灭菌箱对带棉塞的试管灭菌时，可用报纸包裹严密后再进行灭菌处理
C. 用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，开始阶段需打开排气阀排尽锅内冷空气
D. 用紫外线进行消毒时，适量喷洒石炭酸等消毒液以加强消毒效果
【答案】A
【解析】
【分析】无菌技术：(1 )关键：防止外来杂菌的入侵。(2 )具体操作:①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
【详解】A、为保证营养物质不被破坏，鲜牛奶应用巴氏消毒法，A错误；
B、用干热灭菌箱对带棉塞的试管灭菌时，可用报纸包裹严密后再进行灭菌处理，B正确；
C、用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，开始阶段需打开排气阀排尽锅内冷空气，否则可能灭菌的温度达不到要求，C正确；
D、用紫外线对空气进行消毒时，为加强灭菌效果，可适量喷洒石炭酸等化学抑菌剂，D正确。
故选A。
21. 下列有关微生物培养基制备的叙述，正确的是（　　）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分
B. 在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故实验室培养时需严格无菌操作，对培养基用高压蒸汽灭菌、培养皿用干热灭菌，接种环用灼烧灭菌，实验者的双手用酒精擦拭消毒处理。

【详解】A、培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，琼脂是制作固体培养基所需要凝固剂，A错误；
B、在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底，B正确；
C、在微生物的实验室培养中，培养皿可用干热灭菌法灭菌，C错误；
D、倒平板时需要将培养基冷却到50℃左右时，才能用来倒平板，需要在酒精灯火焰旁进行倒平板的操作，防止杂菌污染，D错误。
故选B。
22. 无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是
A. 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
B. 将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D. 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
【答案】A
【解析】
【分析】实验室中无菌操作的要求一般有：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
【详解】对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒，A错误；为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B正确；酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C正确；周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。
【点睛】注意灭菌和消毒的区别：灭菌是指杀灭或者去处物体上所有微生物，包括抵抗力极强的细菌芽孢在内。消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体，但不一定能杀死细菌芽孢的方法。二者所用的处理水平、方法和对象均不同：
第一，两者要求达到的处理水平不同。消毒只要求杀灭或/和清除致病微生物，使其数量减少到不再能引起人发病。灭菌不仅要求杀灭或/和清除致病微生物，还要求将所有微生物全部杀灭或/和清除掉，包括非致病微生物。
第二，两者选用的处理方法不同。灭菌与消毒相比，要求更高，处理更难。灭菌必须选用能杀灭抵抗力最强的微生物(细菌芽孢)的物理方法或化学灭菌剂，而消毒只需选用具有一定杀菌效力的物理方法、化学消毒剂或生物消毒剂。将灭菌的处理方法用于消毒不仅是杀鸡用牛刀没有必要，而且还会产生本来可以不发生的副作用；而如果将消毒的处理方法用于灭菌，将会导致灭菌失败。
第三，应用的场所与处理的物品也不同。灭菌主要用于处理医院中进入人体无菌组织器官的诊疗用品和需要灭菌的工业产品，消毒用于处理日常生活和工作场所的物品，也用于医院中一般场所与物品的处理。
总之，消毒只要求场所与物品达到无害化水平，而灭菌则要求达到没有一个活菌存在。
23. 在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法错误的是（ ）
A. 不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B. 在微生物生长温度范围内保持固体状态
C. 琼脂凝固点低，利于微生物的生长
D. 琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
【答案】C
【解析】
【分析】琼脂作为一种理想的凝固剂，是其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。
【详解】A、琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强，A正确；
B、琼脂在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态，B正确；
C、琼脂凝固点相对于微生物的生长温度较高，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，C错误；
D、琼脂凝固点为40℃，对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏，透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉，D正确。
故选C。
【点睛】
24. 我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准具体规定如下：细菌总数不超过100个/mL，大肠杆菌数不超过3个/mL。为了检验城市自来水是否达标，某生物兴趣小组进行了相关实验。下列有关叙述正确的是（　　）
A. 实验过程中应使用涂布器、移液管等操作工具，使用前用酒精消毒
B. 取样水龙头应用火焰灼烧，且打开水龙头一段时间后再取样
C. 检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用平板划线法来分离并计数
D. 空白对照组培养基长有6个菌落，则将实验组菌落数减去6填入记录表
【答案】B
【解析】
【分析】间接计数法（活菌计数法）：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
【详解】A、实验过程中应用到涂布器、移液管等操作工具，涂布器应用酒精灯火焰灼烧灭菌，冷却后再使用，A错误；
B、为避免杂菌污染，取样水龙头应用火焰灼烧，打开水龙头一段时间后再取样，是为了防止温度过高杀死目的菌，B正确；
C、检验自来水中大肠杆菌数是否达标，可用稀释涂布平板法来分离并计数，C错误；
D、若空白对照组上有6个菌落，则说明该实验失败，实验数据不能采用，D错误。
故选B。
25. 下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是(   )
A. 培养乳酸杆菌时需要在培养基中加入适量的维生素
B. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落
C. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
D. 利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数
【答案】D
【解析】
【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”，专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖，这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势，如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。
【详解】乳酸杆菌的培养需要在培养基中添加少量的维生素，A正确；接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落，B正确；尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生长，所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌，尿素分解菌可以将尿素分解为氨，进而使酚红指示剂变红，C正确；利用稀释涂布平板法可以对微生物进行分离和计数，D错误。
26. 下列有关发酵技术中防止杂菌污染的措施中，不正确的是（　　）
A. 实验中用到的榨汁机、发酵瓶、玻璃瓶、坛子等物品均需清洗或消毒
B. 腐乳制作在装瓶或取样时，操作一定要迅速，封瓶时，还要将瓶口通过酒精灯的火焰
C. 腐乳制作中，盐的浓度不宜过低或过高，卤汤中的酒的含量一般控制在12%左右
D. 泡菜制作中，加盐水煮沸后直接加入泡菜坛中，腌制时要控制时间、温度和食盐的用量
【答案】D
【解析】
【分析】腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。腐乳制作过程中防止杂菌污染的主要操作有：用来腌制腐乳的玻璃瓶要消毒、加盐腌制、制作卤汤并在配制时加入酒、封瓶时要使瓶口通过酒精灯的火焰等。
【详解】A、实验中用到的榨汁机、发酵瓶、玻璃瓶、坛子等物品均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，或用洗洁精洗涤，A正确；
B、腐乳制作过程中，装瓶时操作一定要迅速；封瓶时，还要将瓶口通过酒精灯的火焰，以防止杂菌污染，B正确；
C、腐乳制作中，盐的浓度不宜过低或过高，卤汤中的酒的含量一般控制在12%左右，这样既能起到调味的作用，也能起到抑菌的作用，C正确；
D、泡菜制作中，加盐水煮沸后需冷却后才能加入泡菜坛中，否则会杀死蔬菜表面的乳酸菌，而且腌制时要控制时间、温度和食盐的用量，D错误。
故选D。
27. 美国科学家布鲁克从热泉中筛选到水生耐热细菌Taq，并从中分离得到了耐高温的TaqDNA聚合酶，解决了体外DNA大量复制的技术问题。下列微生物筛选原理，除哪项外都与之相似（　　）
A. 从加工糖果、蜂蜜的土壤环境中寻找耐渗透压酵母菌
B. 从油田土环境中筛选石油分解菌
C. 到富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌
D. 从中性或偏碱环境中筛选霉菌
【答案】D
【解析】
【分析】根据微生物的特点，在特定环境条件下，寻找目的微生物。例如热泉中筛选到水生耐热细菌Taq；到富含纤维素的环境中可以找到纤维素分解菌等。
【详解】A、酵母菌呼吸作用的底物主要是葡萄，所以富含糖果、蜂蜜的土壤环境中容易找到酵母菌，且这些酵母菌是耐渗透压的酵母菌，A正确；
B、油田土环境中富含石油，容易筛选出石油分解菌，B正确；
C、纤维素分解菌可以降解纤维素，到富含纤维素的环境中可以找到纤维素分解菌，C正确；
D、培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，D错误。
故选D。
28. 关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是（ ）
A. 培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的
B. 土壤取样时应选取表面的土壤
C. 对10g土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10g土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个
D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度
【答案】D
【解析】
【分析】分解尿素的细菌的鉴定原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
【详解】A、分离尿素分解菌时应该用以尿素为唯一氮源培养基，由于该细菌为异养型生物，而硝化细菌为自养型生物，因此它们所利用的碳源是不同的，前者利用的是有机碳源，后者利用的是无机碳源，A错误；
B、绝大多数细菌分布在距地表3～8cm的土壤层，所以土壤取样时应选取距地表约3～8cm的土壤层，B错误；
C、对10g土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，则该10g土样中分解尿素的细菌数为（234+276）÷2×106÷0.1×10=2.55×1010个，C错误；
D、分离微生物时，需要设置不接种的培养基与实验组一起培养做空白对照，以排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度，D正确。
故选D。
29. 下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中，正确的是
A. 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B. 筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质
C. 统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法
D. 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
【答案】A
【解析】
【分析】培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
【详解】A、只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确；
B、筛选分解尿素的细菌的实验中，采用的是以尿素为唯一“氮源”的培养基，B错误；
C、统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法，C错误；
D、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂变红，这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素，D错误。
故选A。
30. 下列有关土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述，正确的是（ ）
A. 实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
B. 分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基
C. 测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法
D. 接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布
【答案】B
【解析】
【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：1、分离菌株的思路：（1）自然界中目的菌株的筛选①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。（2）实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度。pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。2、统计菌落数目的方法：（1）稀释涂布平板法（间接）①当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。（2）利用显微镜直接计数。3、分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
【详解】A、在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，A错误；
B、分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，只能利用尿素的细菌才能生长繁殖，B正确；
C、测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法，显微镜直接计数法将活菌和死菌一同计数，C错误；
D、接种土壤微生物稀释液时，稀释涂布平板法的操作使微生物均匀分布，D错误。
故选B。
【点睛】
31. 如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素的细菌的示意图，下列有关叙述错误的是（ ）

A. 在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌
B. 步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C. 步骤④挑取③中不同的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D. 步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单菌落
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、在配制步骤②、③的培养基时，为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，A正确；
B、要筛选出能高效分解尿素细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B错误；
C、步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，形成相互对照试验，比较细菌分解尿素的能力，C正确；
D、步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落，D正确。
故选B。
32. 如图表示培养和纯化X 细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（　　）

A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
B. 步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速沾取菌液进行平板划线，以免空气中的杂菌污染
C 步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D. 利用步骤④所采用的方法培养和纯化X细菌的同时可对其进行计数
【答案】C
【解析】
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。
【详解】A、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A错误；
B、步骤②接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以沾取菌液后平板划线，B错误；
C、步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C正确；
D、利用步骤④平板划线法不能对X细菌进行计数，D错误。
故选C。
33. 下列有关纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是（ ）
A. 刚果红不能与纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物
B. 在用刚果红染色时既可以先培养微生物再加入刚果红，也可以在倒平板时直接加入
C. 该实验需用到选择培养基和鉴别培养基
D. 在用刚果红染色过程中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，则出现透明圈的菌落一定为所需菌种
【答案】D
【解析】
【分析】1、在纤维素分解菌的分离实验中，刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
2、刚果红染色法有两种：
（1）先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应；
优点：显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；
缺点：操作繁琐，加入的刚果红会使菌落之间发生混杂。
（2）在倒平板时就加入刚果红。
优点：不存在菌落的混杂问题；
缺点：①在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物产生假阳性反应，②有些微生物有降解色素的功能。
【详解】A、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解成纤维二糖或葡萄糖后，红色复合物无法形成，A正确；
B、在用刚果红染色时可以先培养微生物再加入刚果红，也可以在倒平板时加入，B正确；
C、该实验先用到以纤维素为唯一碳源的选择培养基来增加纤维素分解菌的数目，再用鉴别培养基来鉴定纤维素分解菌，C正确；
D、在用刚果红染色过程中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，则出现透明圈的菌落不一定为所需菌种，也可能是能分解刚果红的微生物，D错误。
故选D。
34. 塑料制品具有质轻、防水、耐用、生产技术成熟、成本低的优点，应用广泛，但很难在自然界中被自然分解掉，会对生态平衡产生巨大的破坏。某同学拟分离得到能够分解塑料的细菌，下述做法错误的是（　　）
A. 从垃圾场含有塑料的土壤中更容易筛选出目标细菌
B. 在配制选择培养基的时候，需要以塑料作为唯一碳源，其他成分不变
C. 培养基倒平板后需高压蒸汽灭菌，培养时需将培养皿倒置放于恒温培养箱内
D. 对长出的菌落进行紫外线照射一段时间后，可能会得到分解塑料效率更高的细菌
【答案】C
【解析】
【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、如果想筛选出能够分解塑料的细菌，需要在富含塑料的环境中寻找目标细菌，因为该条件有利于目标细菌的生存，A正确；
B、对样品中的目标细菌进行选择性培养时，需要人为提供有利于目标细菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，所以在配制培养基时，需要以塑料作为唯一碳源，其他成分不变，B正确；
C、制备培养基的顺序是配制培养基→灭菌→倒平板，即对培养基需要先进行高压蒸汽灭菌后再倒平板，培养时为了避免冷凝水造成培养基的污染，需要将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，C错误；
D、利用物理因素（如紫外线、X射线等）或化学因素（如亚硝酸盐等）处理，可使微生物发生基因突变，经过筛选后获得人类需要的生物新品种，D正确。
故选C。
35. 在分离分解纤维素的微生物实验中，下列关于土壤取样的叙述，不正确的是
A. 可选取深层的土壤作为样品
B. 可选取树林中多年落叶的腐殖土作为样品
C. 可选取树林中多年积累的枯枝败叶作为样品
D. 可把滤纸埋在土壤中经过30 d左右，再选取已腐烂的滤纸作为样品
【答案】A
【解析】
【分析】
【详解】A、绝大多数细菌分布在距地表3～8 cm的土壤层，故不可选取深层土壤作样品，否则细菌数目很少，A错误；
BC、纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，因此采样时可选择B、C两项所述的环境，BC正确；
D、也可将富含纤维素的物质如滤纸埋在土壤中经过30天左右，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌，D正确。
故选A
【点睛】
36. 下列有关纤维素分解菌分离实验的说法中，不正确的是（ ）
A. 该实验过程中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度
B. 将分离得到的菌种接种在加入伊红美蓝的鉴别培养基上
C. 当纤维素被纤维素分解菌释放的酶分解后，培养基上会出现透明圈
D. 在用刚果红染色时，既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红
【答案】B
【解析】
【分析】（1）筛选纤维素分解菌，应使用以纤维素作为唯一碳源的培养基进行培养；在该培养基中，产生纤维素酶的微生物能生长，而其他微生物均不能生长。（2）刚果红染色法的原理是：刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红—纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。（3）常用的刚果红染色法有两种：一是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，二是在倒平板时就加入刚果红。
【详解】A、筛选纤维素分解菌，其培养基应以纤维素作为唯一碳源，在该培养基中，只允许能产生纤维素酶的微生物生长，而其他微生物均不能生长，所以该实验过程中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，A正确；
BC、刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红—纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此，从土壤中筛选纤维素分解菌，需要将分离得到的菌种接种在加入刚果红的鉴别培养基上，B错误，C正确；
D、在用刚果红染色时，既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红，D正确。
故选B。
37. 在鉴别纤维素分解菌的培养基中，常常加入水溶性的羧甲基纤维素钠（CMC-Na）。下列叙述错误的是（　　）
A. 鉴别培养基中的酵母膏和土豆汁含有微生物所需要的特殊营养物质
B. 刚果红染液能与培养基中的纤维素形成红色复合物
C. 刚果红可在倒平板时加入，加入前需要将刚果红溶液灭菌
D. 羧甲基纤维素钠（CMC-Na）主要为细菌提供氮源
【答案】D
【解析】
【分析】羧甲基纤维素钠为可溶性纤维素衍生物，在鉴别纤维素分解菌的培养基中作为碳源，可被Cx酶水解。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
【详解】A、鉴别培养基中的酵母膏和土豆汁含有微生物生长所需的生长因子，A正确；
B、纤维素分解菌需要使用刚果红染液进行鉴定，其能够与培养基中的纤维素形成红色复合物，B正确；
C、加入刚果红的方法有两种，其中一种方法可在倒平板时加入，加入前需要将刚果红溶液灭菌，C正确；
D、羧甲基纤维素钠主要为细菌提供碳源，D错误。
故选D。
38. 利用微生物分解纤维素对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是（　　）
A. 选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长
B. 振荡培养可以增加溶解氧量，促进微生物对营养物质的充分接触和利用
C. 鉴别培养基上涂布接种时，将1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀
D. 加入刚果红的鉴别培养基上出现透明圈的菌落，可能是能够分解纤维素的微生物
【答案】C
【解析】
【分析】从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株；筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈。
【详解】A、选择培养的原理是人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长，因此选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长，A正确；
B、振荡培养可以增加溶解氧量，促进微生物对营养物质和氧气的充分接触和利用，B正确；
C、鉴别培养基上涂布接种时，将0.1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀，C错误；
D、加入刚果红的培养基上所出现的有透明圈的菌落，可能是分解纤维素的细菌或依赖刚果红而生存的真菌繁殖而成，D正确。
故选C。
39. 以下关于分离纤维素分解菌的实验操作，错误的是（ ）
A. 经选择培养后直接将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B. 选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少
C. 可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量
D. 分离纤维素分解菌和分离尿素分解菌的流程不完全相同
【答案】A
【解析】
【分析】在纤维素分解菌的分离实验中，刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
【详解】A、经选择培养后，再经梯度稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，A错误；
B、从土壤中分离含量较多的微生物时，进行富集的选择培养可以省略，但培养分离的纤维素分解菌少，B正确；
C、纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定，即可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量，C正确；
D、纤维素分解菌的筛选实验流程为：土壤取样、选择培养、梯度稀释、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产生透明圈的菌落。分离尿素分解菌的流程为：土壤取样、梯度稀释、将样品涂布到以尿素为唯一的氮源的选择培养基上、挑选菌落，因此离纤维素分解菌和分离尿素分解菌的流程不完全相同，D正确。
故选A。
40. 下列有关“分解纤维素的微生物的分离”实验的说法，正确的是（ ）
A. 纤维素酶中C1酶和葡萄糖苷酶都能将纤维素分解成纤维二糖
B. 在选择培养基中直接加入刚果红进行纤维素分解菌的鉴别
C. 应先利用固体选择培养基增加纤维素分解菌的浓度，以保证筛选效果
D. 菌落上的透明圈不一定是能分解纤维素的微生物所形成
【答案】D
【解析】
【分析】分解纤维素的微生物的分离实验的原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。
【详解】A、纤维素酶中的葡萄糖苷酶不能将纤维素分解成纤维二糖，A错误；
B、选择培养纤维素分解菌的培养基与鉴别纤维素分解菌的培养基成分不同，同时选择培养的微生物还需要经过梯度稀释，故不能直接加入刚果红进行鉴别，B错误；
C、应先利用液体选择培养基增加纤维素分解菌的浓度，以保证筛选效果，C错误；
D、如果菌落被杂菌污染，有些微生物能降解色素，也可形成透明圈，D正确。
故选D。
第二卷 非选择题
41. 制作泡菜与酸奶时均采用乳酸菌进行发酵，现有研究人员打算从泡菜中获取可用于酸奶发酵的乳酸菌菌种，回答下列问题：
（1）测定泡菜中亚硝酸盐的含量可以用_____________________法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，只有在特定条件下，才可以转变为致癌物——________。
（2）使用________法将少量泡菜汁接种于培养基上，经厌氧培养后得到菌落。
（3）将上述培养基中各菌落移至MRS-碳酸钙固体培养基（配制方法为当MRS培养基冷却到45~50 ℃时，加入已灭菌的碳酸钙，充分混匀，倒平板，该培养基因含碳酸钙而不透明），厌氧培养48小时后，发现有部分菌落周围出现透明圈，推测其原因是________________。
（4）因为制作泡菜和酸奶的菌种相同，部分研究人员猜测制作酸奶的过程中可能会产生亚硝酸盐，进而测出酸奶中的亚硝酸盐含量为1 mg/kg，于是他们认为制作酸奶的过程中会产生亚硝酸盐，但是另一些研究人员认为这个结论不可靠，他们认为亚硝酸盐可能来自鲜奶。请给出改进实验的思路，进一步确定制作酸奶的过程中会产生亚硝酸盐。方案改进：________________。
预期结果和结论：若________________，则说明酸奶发酵过程中会产生亚硝酸盐。
【答案】 ①. 比色 ②. 亚硝胺 ③. 平板划线（或稀释涂布平板） ④. 乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙 ⑤. 增设一组实验，测定鲜奶中的亚硝酸盐的含量 ⑥. 酸奶中亚硝酸盐含量高于鲜奶中亚硝酸盐的含量
【解析】
【分析】泡菜的制作
1、原理：①菌种：乳酸菌②发酵原理：在无氧条件下，将葡萄糖分解成乳酸③腌制条件：控制腌制的时间、温度和食盐的用量，防止杂菌污染，严格密封。
2、制作流程：

3、测定亚硝酸盐含量
①亚硝酸盐与人体健康：当摄入总量较多时，可引起中毒或死亡；在特定条件下可转化为致癌物—亚硝胺。②原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；观察样品颜色变化，并与标准显色液比较，然后大致估算亚硝酸盐含量。
【详解】（1）因为测定泡菜中亚硝酸盐的含量时，要将显色后的样品与已知浓度的标准显色液进行比色，所以这种方法叫比色法。食物中的亚硝酸盐绝大部分随人体尿液排出，其余的在特定条件下可以转变为致癌物亚硝胺。
（2）若想经厌氧培养后得到菌落，可以使用稀释涂布平板法或平板划线法，将少量泡菜汁（含有乳酸菌）接种于培养基上。
（3）将上述培养基中各菌落移至MRS-碳酸钙固体培养基，厌氧培养48小时后，由于乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，所以可以发现有部分菌落周围出现透明圈。
（4）在酸奶中测出的亚硝酸盐可能是制作酸奶的过程中产生的，也可能来自于原料鲜奶，想要探究这一问题，可以测定鲜奶中的亚硝酸盐的含量，若酸奶中亚硝酸盐含量高于鲜奶中亚硝酸盐含量，则可以说明酸奶发酵过程中会产生亚硝酸盐。
【点睛】本题的难点在第三问，解题时需要注意题目中括号内的提示内容“该培养基因含碳酸钙而不透明”，故出现透明圈说明碳酸钙没有了，再结合乳酸菌的产物乳酸会与碳酸钙进行酸碱中和，从而使碳酸钙消失形成透明圈。
42. 有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。请分析后回答下列问题：

（1）培养基中加入的化合物A是_____，为微生物的生长提供_____，这种培养基属于_____培养基。
（2）在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是______。
（3）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用_______染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于______（用图中标号作答）内。
（4）乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目______。
【答案】（1） ①. 纤维素 ②. 碳源 ③. 选择
（2）及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染实验操作者
（3） ①. 刚果红 ②. ③
（4） ①. 保证无氧环境 ②. 小（低）
【解析】
【分析】微生物实验室培养的关键无菌操作，在筛选纤维素分解菌的过程中，刚果红可与培养基中纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。
【小问1详解】
为筛选出能分解纤维素的微生物，应该以纤维素为唯一的碳源，故培养基中加入的化合物A是纤维素，为微生物提供碳源，这种培养基属于选择培养基。
【小问2详解】
灼烧接种环能杀死接种环上所有的物生物，在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，目的是及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染实验操作者。
【小问3详解】
在筛选纤维素分解菌的过程中，刚果红可与培养基中纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。图中③是纤维素分解菌为中心的透明圈，则纤维素分解菌位于③。
【小问4详解】
乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，牛胃是无氧环境，醋酸菌是好氧微生物，故与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是保证无氧环境，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个菌落生长在一起，平板上只能观察到一个菌落。
43. 某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：
（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________________________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是________________________（答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择____________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2 HPO4，其作用有________________________（答出两点即可）。
【答案】 ①. 脲酶 ②. 分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物 ③. 为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 ④. 尿素 ⑤. 其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用 ⑥. 为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
【解析】
【分析】考查微生物分离，培养，培养基中物质作用相关知识。
【详解】（1）细菌分解尿素是由于细菌体内合成脲酶的结果，尿素是有机物，分解尿素的细菌是分解者，而不是生产者，只有生产者才能利用CO2作为碳源合成有机物，而分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物。进入细菌体内的葡萄糖的主要作用：为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料。
（2）筛选分解尿素的细菌，通常只能用尿素作为唯一氮源，对于“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”均含有无机氮源，不能起到筛选作用。
（3）KH2PO4和Na2 HPO4为微生物提供P元素和无机盐离子如钾离子和钠离子，还可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。
【点睛】本题考查分解尿素的微生物的分离、培养及培养基中物质的作用，要求考生掌握微生物分离须用微生物特定需要的培养基来培养，微生物培养中必须有碳源、氮源、能源、生长因子、水和无机盐等。
44. 回答下列与酵母菌有关的问题：
（1）分离培养酵母菌通常使用_______（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，该培养基应采用________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是________。
（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养，可促进_______（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是______。制作葡萄酒时，用酸性的______ 试剂可以检测产生了酒精，并生成灰绿色。
【答案】（1） ①. 麦芽汁琼脂 ②. 高压蒸汽 ③. 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
（2） ①. 菌体快速增殖 ②. 乙醇产生
（3） ①. 酵母菌分解葡萄糖会产生CO2，CO2使面包松软 ②. 重铬酸钾

【解析】
【分析】酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌，在有氧条件下，进行有氧呼吸产生H2O和CO2，释放能量多，细胞增殖快；在无氧条件下，进行无氧呼吸，产生酒精和CO2，释放能量少，细胞增殖慢；常用的灭菌方法有：灼烧灭菌（主要用于接种工具灭菌）、干热灭菌（用于待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品）、高压蒸汽灭菌（适用于培养基灭菌）；平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落；牛肉膏蛋白胨培养基属于细菌培养基，麦芽汁琼脂培养基适合培养真菌，MS培养基是植物组织培养使用的培养基。
【小问1详解】
麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高，而且含糖量高，更适合酵母菌；该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌；若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。
【小问2详解】
酵母菌液体培养时，若通入氧气，进行有氧呼吸产生H2O和CO2，释放能量多，促进菌体快速增殖；若进行无氧培养，进行无氧呼吸，产生酒精和CO2，释放能量少，增殖慢。
【小问3详解】
制作面包时，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得面包松软多孔。制作葡萄酒时，用酸性的重铬酸钾试剂可以检测产生了酒精，溶液由橙色变为灰绿色。
45. 物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。
【答案】 ①. W ②. 乙 ③. 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W ④. 将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源 ⑤. 缓冲液 ⑥. 缓冲液不能降解W ⑦. 酶E与天然酶降解W的能力相近
【解析】
【分析】筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。
【详解】（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌，而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。
（2）研究小组的目标菌，是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。
（3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源，故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。
（4）①C处作为空白对照，要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同；②培养基中的透明圈表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。
【点睛】本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。