沪科版 (2019)选修3一、间接计数法同步练习题

【精编】一、间接计数法-2优选练习

一．单项选择

1．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，如图为实验室的部分操作步骤，相关说法错误的是（    ）

A．本实验的培养基中应加入苯酚作为唯一碳源

B．步骤④中接种环需在每次划线前灼烧处理，接种后的平板需倒置培养

C．灭菌处理后的土壤样品经②③④步骤操作后可获得纯化的苯酚降解菌菌落

D．可以通过逐步提高培养基中苯酚的浓度，获得高效苯酚降解菌

2．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（    ）

A．步骤②中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌

B．步骤④中接种环共需 5 次灼烧处理

C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置

D．①②③步骤操作时都不需要在酒精灯火焰旁进行

3．下列有关消毒和灭菌的说法正确的是（    ）

A．接种环．接种针．镊子等金属用具以及玻璃器皿只能用灼烧灭菌

B．干热灭菌法是利用高温使蛋白质等变性，从而使微生物丧失活性

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用巴氏消毒法

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于物理消毒法

4．下列有关菌种保藏的有关叙述，错误的是（    ）

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏

B．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上

D．需要长期保存的菌种，可采用低温（－4℃）保藏的方法

5．下列常用的无菌操作错误的是（    ）

A．无菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物

B．用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒

C．实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行

D．玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌

6．下列叙述错误的是（    ）

A．灭菌是以能杀死除芽孢和孢子外的所有活细胞为标准的

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数

C．统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果

D．测定亚硝酸盐含量时，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色

7．关于制作果酒．果醋/腐乳的叙述，错误的是(　　)

A．在果酒发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可延长

B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸

C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小

D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需增加盐的用量

8．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（    ）

A．操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌

D．培养基灭菌后，立即在酒精灯火焰附近倒平板

9．果胶酶可从黑曲霉中提取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是

A．蛋白胨和酵母提取物培养基 B．尿素固体培养基

C．MS培养基 D．添加蔗糖的豆芽汁培养基

10．无菌操作技术在生产生活中应用广泛。下列相关叙述正确的是（    ）

A．对培养皿等玻璃器皿宜采用灼烧灭菌

B．对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力未降到零就打开排气阀可能造成污染

C．微生物培养后的废弃物经过简单消毒处理后可直接丢弃

D．在取走培养皿盖的培养皿中倒平板时，需要在火焰旁操作

11．取9个洁净的培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，每组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1 mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数如表统计，以下相关叙述正确的是(　　)

A.Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

D．三组实验所使用的培养基均需62 ℃．30 min消毒

12．在微生物的培养和研究中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。实验室常采用高压蒸汽灭菌．灼烧．干热灭菌．紫外线照射等几种灭菌方法，可分别杀灭哪些部位的杂菌（    ）

A．培养基．接种环．接种室．吸管 B．吸管．接种环．培养皿．接种箱

C．吸管．接种环．培养基．双手 D．培养基．接种环．吸管．接种箱

13．科研人员制备了一种富集沙门菌的培养基，其成分是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质。下表为在营养肉汤培养基中添加有关物质并接种培养后相关菌落的相对数量。下列有关说法错误的是（    ）

A．上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法

C．培养基中的葡萄糖．氨基酸可作为碳源被沙门菌等细菌利用

D．在培养基中加入牛胆盐．亚碲酸钠的目的是维持培养基的pH

14．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是（    ）

A．采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数

B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落

C．为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数

D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果

15．下表是关于对四种微生物的碳源．氮源．新陈代谢类型的描述，正确的是（    ）

A．酵母菌 B．醋酸菌 C．乳酸菌 D．尿素分解菌

16．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒

B．培养基．接种环可用干热灭菌法灭菌

C．消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子

D．高压蒸汽灭菌时间达到后立即打开排气阀排气降温

17．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　)

A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少生长因子

D．该培养基调节合适的pH后就可以接种

18．取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL相同稀释度的大肠杆菌菌液，37℃培养 24小时后，统计菌落数（见下表），下列相关叙述错误的是（    ）

A．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖

B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌的正常生长需要葡萄糖

C．三组实验所使用的培养基均需100℃．30min灭菌

D．三组实验均采用稀释涂布平板法，以便菌落计数

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】

试题分析：

2．【答案】A

【解析】

试题分析：

根据题意和图示分析可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算．称量．溶化．调pH．灭菌．倒平板。

解答：

A．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可，A正确；

B．接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误；

C．划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误；

D．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D错误。

故选A。

3．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法，消毒有煮沸消毒法．巴氏消毒法和化学药剂消毒法；灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具，干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具，高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

解答：

A．接种环．接种针．镊子等金属用具常采用灼烧灭菌，但也可采用干热灭菌，玻璃器皿适用干热灭菌，A错误；

B．干热灭菌法是利用高温使微生物体内的蛋白质等变性，酶失去活性，达到灭菌的目的，B正确；

C．针对某些实验器具．餐具．饮用水可以采用煮沸消毒法，C错误；

D．用酒精擦拭双手．用氯气消毒水源属于化学消毒法，D错误。

故选B。

4．【答案】D

【解析】

试题分析：

有关菌种的保藏方法：①临时保藏法：对于频繁使用的菌种，先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养，然后将试管放入4°C的冰箱中保藏。②甘油管藏法：对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存。

解答：

A．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，A正确；

B．对于频繁使用的菌种，我们可以采用临时保藏的方法，B正确；

C．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上，C正确；

D．需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，充分混匀后放在-20°C的冷冻箱中保存，D错误。

故选D。

5．【答案】D

【解析】

试题分析：

在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面，
①对实验操作的空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的培养器皿．接种用具和培养基等进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

解答：

A．无菌技术是用来防止培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切微生物，A正确；
B．用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒，B正确；
C．实验操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确；
D．对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能灭菌，D错误。
故选D。

6．【答案】A

【解析】

试题分析：

灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。

计数：操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落）。

亚硝酸盐含量的测定原理：与显色剂(N-1-萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合)反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量。

解答：

A．灭菌是杀死全部微生物，包括芽孢和孢子，A错误；

B．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数（SN标准要求为25~250个菌落），B正确；

C．统计菌落数目时，培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，选取菌落数目稳定时的记录数据作为结果，C正确；

D．制作泡菜和测定亚硝酸盐含量时，与显色剂反应生成有色化合物，通过比色可以粗略地检测亚硝酸盐的含量，用于比对的是标准亚硝酸钠显色液的颜色，D正确；

故选A。

7．【答案】D

【解析】：选D　果酒发酵的后期，营养物质减少，酵母菌代谢减慢，产生的CO2量减少，可以间隔较长的时间再拧松瓶盖；糖源和氧气充足时，醋酸菌可以将葡萄糖分解成醋酸，糖源不足时，则将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；果酒发酵过程中，葡萄糖分解会产生水，因此发酵液的密度逐渐减小；制作腐乳时，在摆放豆腐的同时，应逐层加盐，随层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。

8．【答案】D

【解析】

试题分析：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛的细菌培养基，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板。

解答：

A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算．称量．溶化．灭菌．倒平板，A正确；

B．溶化时，将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；

C．加热溶化琼脂时，应不断用玻璃棒对其搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，C正确；

D．培养基灭菌后，待培养基冷却至50°C左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。

故选D。

9．【答案】D

【解析】

试题分析：

黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可，如麦芽汁加琼脂，将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释加琼脂15克，溶化后分装，121℃灭菌30分钟。蔗糖豆芽汁培养基可以用来培养酵母菌和霉菌，使它们与细菌分离开来。

解答：

根据以上分析可知，黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。综上所述，D正确，A．B．C错误。

故选D。

10．【答案】B

【解析】

试题分析：

常用的灭菌方法：干热灭菌法．灼烧灭菌法．高压蒸汽灭菌法。

解答：

A．对玻璃器皿常用干热灭菌法处理，A错误；

B．对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力未降到零就打开排气阀可能造成污染，需要将其中原有的冷空气彻底排除后，B正确；

C．微生物培养后的废弃需要经过彻底灭菌处理才能丢弃，C错误；

D．倒平板时，应该用手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能将培养皿盖取走，D错误。

故选B。

11．【答案】A

【解析】：选A　由表格分析可知，Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长；Ⅱ组和Ⅲ组作对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖；由题意知，每个平板都含有琼脂，属于固体培养基；三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌。

12．【答案】D

【解析】

试题分析：

13．【答案】D

【解析】

试题分析：

分析题干：富集沙门菌的培养基是在营养肉汤培养基的基础上添加了一定浓度的牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，其能抑制金黄色葡萄球菌．大肠杆菌等微生物的生长，而沙门菌能正常生长，属于选择培养基。

解答：

AD．在营养肉汤培养基的基础上添加牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠．葡萄糖．琼脂等物质，这是一种富集沙门菌的培养基。实验结果表明含有牛胆盐．甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制金黄色葡萄球菌，含有甘露醇．亚碲酸钠的培养基能抑制大肠杆菌。因此，上述富集沙门菌的培养基是选择性培养基，A正确．D错误；

B．为便于对活菌进行计数，接种时应采用稀释涂布平板法，B正确；

C．培养基的成分通常包括碳源．氮源．水．无机盐等，上述培养基中的葡萄糖．氨基酸等有机物可作为碳源被细菌利用，C正确。

故选D。

14．【答案】C

【解析】

微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数，A正确；

B．当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，B正确；

C．为了保证结果准确，一般选取菌落数在30-300之间的平板进行计数，C错误；

D．设计实验时，一定要至少用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性；分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时；取平均值作为统计结果，D正确。

故选C。

15．【答案】C

【解析】

试题分析：

酵母菌是异养兼性厌氧型微生物；醋酸菌是异养需氧型微生物；乳酸菌是异养厌氧型微生物；尿素分解菌是异养需氧型微生物，可以以尿素为氮源。

解答：

A．酵母菌是异养兼性厌氧型微生物，A错误；

B．醋酸菌不能固氮，需要提供氮源，不能是N2，B错误；

C．乳酸菌是异养厌氧型微生物，需要提供有机碳源和氮源，C正确；

D．尿素分解菌的碳源不能有尿素提供，要提供有机碳源，D错误。

故选C。

16．【答案】A

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒，A正确；

B．培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，而接种环用灼烧灭菌，B错误；

C．消毒能杀死物体表面或内部的部分微生物，不包芽孢和孢子，C错误；

D．高压蒸汽灭菌时间达到后应等待冷却．降温，然后排气，D错误。

故选A。

17．【答案】B

【解析】：选B　从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基；微生物的营养物质主要包括氮源．碳源．水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨；生长因子主要包括维生素．氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸的组成成分，蛋白胨可以提供生长因子；该培养基调节合适的pH后还需经灭菌后才可以接种使用。

18．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基上大肠杆菌菌落较多，缺少C6H12O6的培养基上大肠杆菌几乎不形成菌落。培养基的营养物质有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，A正确；

B．Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖，B正确；

C．三组实验所使用的培养基均需高压蒸汽灭菌，C错误；

D．该实验的因变量是菌落的数目，数目都采用了稀释涂布平板法，D正确。

故选C。