高考生物一轮复习考点规范练39《微生物的培养与应用》（含详解）

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考点规范练39　微生物的培养与应用 　考点规范练+高频考向练第86页　 1.(河南鹤壁期末,31)金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量人的血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。(1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于　　　　生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行　　　　呼吸。 (2)质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)操作中在血平板上的接种方法是　　　　　　　　,接种操作前后需要对接种工具进行　　　　　　灭菌。 (4)在制备血平板时需将pH调节至　　　　　(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基　　　　后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于　　　　培养基。 (5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现　　　　　　　　　　　　　　　的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 答案(1)原核　有氧(2)碳源、氮源、水和无机盐　增加金黄色葡萄球菌的数量(3)平板划线法　灼烧(4)微碱性　冷却　鉴别(5)周围存在透明圈　设置不加鲜牛奶,其他操作均相同的对照组解析(1)金黄色葡萄球菌是一种细菌,属于原核生物。培养过程无密闭处理,故它进行有氧呼吸。(2)质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基可为微生物提供生长所需要的碳源、氮源、水和无机盐。用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养是为了增加高度耐盐性的金黄色葡萄球菌的数量。(3)图示用的接种工具是接种环,说明在血平板上接种的方法是平板划线法。接种工具在接种前后都要进行灼烧灭菌处理。(4)金黄色葡萄球菌能在血平板(培养基中添加适量人的血液)生长,人的血浆pH为7.35~7.45,为微碱性,所以金黄色葡萄球菌的生长环境为弱碱性。培养基在灭菌前要先调节pH,因金黄色葡萄球菌能破坏红细胞,使其褪色,血平板上出现周围存在透明圈的菌落,说明有金黄色葡萄球菌,故血平板是鉴别培养基。(5)为增强实验结论的严谨性,应增加空白对照组。2.(全国丙卷,39)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题。(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用　　　　　　对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有　　　　　　　　　　和　　　　　　　　　　　　　　。分离纯化时应挑选出　　　　　　　　　　　　　的菌落作为候选菌。 (3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的　　　　　　　　(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。 答案(1)无菌水　泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌　中和产生的乳酸(或酸)　具有透明圈(3)甘油解析本题考查微生物的培养及分离。(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,原因是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌被分散,培养后能在培养基表面形成单个的菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸;乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙,故分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的甘油。3.(河南郑州、长葛质检三,39)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。成　　分含量成分含量蛋白胨10.0 g 乳糖5.0 g蔗糖5.0 g K2HPO22.0 g 显色剂(伊红美蓝)0.2 g 琼脂12.0 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL  (1)大肠杆菌的同化类型为　　　　　,大肠杆菌能在培养基上生长繁殖,从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于　　　　　。 (2)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,因此需对培养基和培养皿进行　　　　(填“消毒”或“灭菌”),操作者的双手需要进行清洗和　　　　。空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使　　　　　　　　　　　,还能破坏DNA的结构。 (3)根据用途划分,该培养基属于　　　　(填“选择”或“鉴别”)培养基,若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中　　　　　　　换成　　　　,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成　　　　　　　　　　。 (4)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是　　　　　　　　　　和　　　　　　　　　　　　。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,称为　　　　。 (5)使用以下微生物发酵生产特定产物时,所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是　　　　　。 A.制作果酒 　　　　　　　　B.由果酒制作果醋C.制作泡菜 　　 D.制作腐乳答案(1)异养型　分解者(2)防止外来杂菌的入侵　灭菌　消毒　蛋白质变性(3)鉴别　蛋白胨　尿素　酚红指示剂(4)平板划线法　稀释涂布平板法　菌落(5)B、C解析该培养基含有显色剂(伊红美蓝),可使大肠杆菌菌落呈现金属光泽,因此属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌,应以尿素为唯一氮源,因此应将蛋白胨换成尿素。若要鉴别尿素分解菌,应在培养基中加入酚红指示剂。制作果酒、果醋、泡菜和腐乳利用的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌和毛霉,其中醋酸菌、乳酸菌与大肠杆菌都属于原核生物,酵母菌和毛霉都属于真核生物。4.(吉林省实验中学八模,39)有机化工原料氯苯不易降解,会污染环境,现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。回答下列问题。(1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种,可在被氯苯污染的土壤中取样,并应选用以　　　　为碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外,培养液还应含有　　　　、无机盐和水等。 (2)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg氯苯的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时,则应选择微生物　　　　作为菌种进行后续培养。 (3)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可用　　　　　直接计数,也可选用　　　　　　　　　　　法统计活菌数目,一般前者得到的结果　　　(填“>”“=”或“<”)后者。 (4)对选定的菌种进行细胞学检测,发现它没有具膜细胞器如线粒体等,则该菌种属于　　　　生物,其产生的降解氯苯的酶蛋白在　　　　　上合成。 答案(1)氯苯　氮源　(2)乙　(3)显微镜　稀释涂布平板　>(4)原核　核糖体解析(1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种应选用以氯苯为碳源的培养液进行选择培养,在该培养液中,只有能降解氯苯的微生物才能生长,而其他微生物则不能生长。培养液中除含有碳源外,还应含有氮源、无机盐和水等。(2)微生物乙在含有氯苯的培养液中从实验开始到停止生长所用的时间较微生物甲、丙短,说明微生物分解氯苯的能力比甲、丙更强,所以应选择微生物乙作为菌种进行后续培养。(3)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数,也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以一般前者得到的结果大于后者。(4)选定的菌种没有具膜细胞器如线粒体等,则该菌种属于原核生物。组成原核生物的原核细胞有核糖体,而核糖体是蛋白质合成的场所,所以该菌种产生的降解氯苯的蛋白酶在核糖体上合成。5.(河北石家庄期末调研,4)请回答以下有关微生物培养和分离的问题。(1)微生物培养基的配方中,一般都含有水、　　　　　、氮源和无机盐。对微生物培养基进行灭菌的常用方法是　　　　　　　　　　　。 (2)纯化微生物培养的接种方法主要有　　　　　　　　　　和　　　　　　　　　　　　两种。如图所示,该接种方法统计的菌落数常比实际活菌数量　　　　。 (3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入　　　　　　,即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。 (4)从土壤中筛选纤维素分解菌,需配制加入特殊染料的鉴别培养基。当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生　　　　　　来筛选纤维素分解菌,这种筛选方法被称为　　　　　　　　　　法。 答案(1)碳源(C源)　高压蒸汽(灭菌法)(2)平板划线(法)　稀释涂布平板(法)(顺序可颠倒)　少(3)酚红(指示剂)(4)透明圈　刚果红染色解析(1)微生物培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。微生物培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法。(2)纯化微生物培养的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法,图中所示方法为稀释涂布平板法,统计的菌落数常比实际活菌数量少。因为两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。(3)初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素,在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。(4)当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌,这种方法为刚果红染色法。6.要从土壤中筛选出相应的分解菌,其实验流程如下,请回答下列问题。配制土
壤溶液系列稀释涂布平板与培养菌落计数(1)采用　　　　　　　　　　　　法时需要将样液进行一系列梯度稀释,然后接种培养,计数菌落。通常统计的菌落数比活菌的实际数目　　　　。在稀释土壤的过程中,每一步都要在　　　　　　　　　　　旁操作。 (2)对培养基灭菌常用的方法是　　　　　　　　　　　　　。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染。方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)若要筛选出尿素分解菌,配制土壤溶液的土样应从　　　　　　　　　　的土壤　　　　层取样,培养用的培养基应为以　　　　为唯一氮源的选择培养基。 (4)向培养基中加入酚红指示剂,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现　　　　,这是尿素被分解生成的　　　　　　使酚红指示剂显色的结果。 答案(1)稀释涂布平板　少　酒精灯火焰(2)高压蒸汽灭菌法　将未接种的培养基在适宜温度恒温箱中倒置培养一段时间,观察是否有菌落生成(3)有机物丰富　表　尿素(4)红色　氨(或NH3)解析(1)将样液进行一系列梯度稀释后进行的接种方法是涂布平板法,该方法可以对微生物进行计数,由于当两个或多个细菌连在一起时,培养基上观察到的只是一个菌落,因此通常统计的菌落数比活菌的实际数目少。稀释涂布平板法的各步操作均应在酒精灯的火焰旁进行。(2)对培养基的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法,若要检测使用的培养基是否被污染,通常需要设置空白对照,即将未接种的培养基在适宜温度恒温箱中倒置培养一段时间,观察是否有菌落生成,若无菌落生成,则说明培养基制作是合格的。(3)土壤中分解尿素的细菌生活在有机物丰富的土壤表层中,因此若要筛选出尿素分解菌,配制土壤溶液的土样应从有机物丰富的土壤表层取样,培养用的培养基应为以尿素为唯一氮源的选择培养基。(4)分解尿素的细菌的鉴定法是在培养基中添加酚红指示剂,由于分解尿素的细菌能够合成脲酶,脲酶能将培养基中的尿素分解产生氨(NH3),使pH升高,酚红指示剂变红色。7.(全国Ⅰ卷,39)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题。(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用　　　　　　染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用　　　　　　　　　(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。 (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以　　　　　　　为碳源的固体培养基进行培养。 (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用　　　　　　　　　　　直接计数;若要测定其活菌数量,可选用　　　　　　　　　　法进行计数。 (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g 油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,　　　　 ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕　　　　℃设计后续实验。              〚导学号93420255〛 答案(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)　萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板　稀释涂布平板(4)45　40解析本题通过微生物的培养与计数、生物体内有效成分的提取、酶的活性等知识考查实验与探究能力。(1)显微观察时,用苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)可将微生物A菌体中的油脂染成橘黄色(或红色),易于观察。微生物A菌体中的油脂不易挥发,宜选用萃取法提取。(2)微生物B可产生脂肪酶,故应选用以油脂为碳源的固体培养基进行培养,以获得该菌的单菌落。(3)若要测定微生物B的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数;若要测定其活菌数量,可选用稀释涂布平板法进行计数。(4)三种不同温度下分解相同的油脂所需酶量45 ℃最多,40 ℃最少,说明三个温度中45 ℃条件下该酶活力最小,40 ℃条件下该酶活力最大。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕40 ℃设计后续实验。8.(2014全国Ⅱ卷,39)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为　　　　　　　。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过　　　　灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)示意图A和B中,　　　表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中　　　　　　　　的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高　　　　　　　　的利用率。 答案(1)检测培养基平板灭菌是否合格　3.8×107(2)灼烧　将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧　营养物质解析为了检测培养基灭菌平板是否合格,应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×100×1 000=3.8×107(个)。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果,B表示的是用稀释涂布平板法接种后得到的结果。