高中生物《第38讲细胞工程》课件

这是一份高中生物《第38讲细胞工程》课件，共60页。PPT课件主要包含了细胞水平或细胞器水平，知识梳理，诊断与思考，解题探究，植物组织培养，植物细胞的全能性，生长素，愈伤组织，胚状体，农杆菌转化等内容，欢迎下载使用。
考纲要求 植物的组织培养(Ⅱ)。
1.细胞工程(1)操作水平：_____________________。(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的__________或获得__________。2.植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部__________的任何一个细胞，都具有发育成___________的潜能。(2)原理：细胞内含有本物种的_____________。(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的___________和其他适宜外界条件。
3.植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有_______。(2)过程
4.植物体细胞杂交技术(1)概念：将_______的植物体细胞，在一定条件下融合成_________，并把杂种细胞培育成___________的技术。(2)过程
5.植物细胞工程的应用(1)微型繁殖：优点是能够___________________。(2)作物脱毒：利用___________等无毒组织进行微型繁殖。(3)培育_________：可以解决某些植物结实率低、繁殖困难的问题。(4)作物新品种的培育：单倍体育种和_______的利用。(5)细胞产物的工厂化生产：即利用_____________技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。
1.判断下列说法的正误(1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞的全能性(　　)(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性(　　)(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化(　　)(4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的(　　)
细胞发育成个体体现了全能性
只有离体细胞才能表现全能性
植物组织培养过程包括脱分化和再分化
脱分化产物是愈伤组织，再分化产物为胚状体
(5)利用物理法或化学法，可以直接将两个植物细胞进行诱导融合(　　)(6)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性(　　)(7)再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志(　　)
植物细胞外面细胞壁阻碍了细胞的融合，应该先去掉细胞壁
纤维素酶和果胶酶只是水解细胞壁，不影响原生质体特性
2.如图表示的是植物体细胞杂交流程示意图。请据图思考下列问题：(1)a表示什么过程？该过程为什么使用纤维素酶和果胶酶？(2)b表示什么过程？该过程的原理是什么？
提示　a表示去除细胞壁获得具有活力的原生质体，由于细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
提示　b表示原生质体的融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性。
提示　物理法和化学法。物理法包括离心、振动、电激等；化学法一般用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
提示　可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
2.如图表示的是植物体细胞杂交流程示意图。请据图思考下列问题：(3)诱导b融合的方法有哪些？(4)植物体细胞杂交技术用于作物育种有何优点？
题组一　植物组织培养过程分析1.下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确的是(　　)A.该途径依据的原理是植物细胞具有全能性B.过程①需控制好培养基中植物激素的比例C.经过程①细胞的形态和结构发生了变化D.过程③需使用液体培养基，有利于细胞增殖
该过程只是为了得到细胞群及细胞产物
为脱分化，在培养基中应加入适量的生长素和细胞分裂素
愈伤组织是无定形的薄壁细胞
2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：(1)培育胚状体利用了______________这一项生物技术，胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了_________________。培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有___________________等植物激素，还需要对培养基进行严格的_____。
其成分包括水、无机盐、维生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生长素和细胞分裂素等)等
2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的，若为了获得三七的细胞产物，则只需要培养到_________；若为了获得三七的人工种子，则需要培养到_______。如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的，通过基因工程要获取抗虫棉，目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是___________法。
2.植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示：(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，必须要经过_______。①无丝分裂　②有丝分裂　③减数分裂　④原代培养　⑤传代培养　⑥植物体细胞杂交　⑦细胞融合　⑧脱分化　⑨再分化
3.野生黑芥(染色体数为2A)具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜(染色体数为2B)易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技术获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，操作流程如图。请据图回答下列问题：(1)图中涉及到的生物工程技术有________________。过程①PEG的作用是_________________，此时培养液需要保持一定渗透压的目的是___________________。(2)经过①操作后，筛选出融合的杂种细胞，进而脱分化形成_________，经过②_______形成杂种植株。
维持原生质体的形态
3.野生黑芥(染色体数为2A)具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜(染色体数为2B)易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技术获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，操作流程如图。请据图回答下列问题：(3)若要分析杂种植株的染色体变异类型，应剪取该植株根尖和双亲植株的根尖，制成临时装片，然后在显微镜下观察比较有丝分裂中期染色体的___________。(4)用上述方法培养的该杂种植株含有的染色体数目是________；用黑腐病菌感染杂种植株，筛选出具有_________的杂种植株。
题组二　植物体细胞杂交过程分析4.“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是(　　)A.除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B.通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导C.杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D.愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程
诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒
5.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：(1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_________________________________。(2)过程①常用的酶是_________________，细胞融合完成的标志是__________________。
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
5.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：(3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂________________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到___种不同的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况)，当观察到_________________________________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。
融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光
番茄—番茄、马铃薯—番茄、马铃薯—马铃薯
5.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：(4)过程③和过程④依次为_______________，过程④中的培养基常添加的植物激素是___________________。(5)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含________条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_______植株。
1.植物组织培养和植物体细胞杂交的比较
2.植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法(1)诱导产物(假设用于杂交的两种植物细胞分别为A、B)：①未融合的细胞：A和B。②两两融合的细胞：AA、BB和AB。③多细胞融合体。(2)检测方法：对诱导产物中的细胞进行植物组织培养，然后根据得到的植物性状进行判断。①若只表现出一种植物的性状，说明是未融合细胞。②若得到的是具有两种亲本性状的植物，说明是杂种植株。③若得到的是具有两种亲本性状的植物，且一种植物的性状得到加强，则是多细胞融合体。④若只表现出一种植物的性状且效果得到加强，则是同种细胞融合的结果。
考纲要求 动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。
1.动物细胞培养(1)动物细胞的培养过程
(2)培养条件①无菌、无毒的环境：对________和所有培养用具进行无菌处理，添加_______，定期更换培养液以清除__________。②营养：除正常的有机和无机营养外，需加入____________等一些天然成分。③适宜的温度和pH：温度为 ___________(哺乳动物)，pH为________。④气体环境：含95%空气加________的混合气体，其中后者的作用是_________________。(3)应用：生物制品的生产、检测__________、医学研究。
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)动物体细胞核移植技术的过程(2)原理：_______________________。(3)结果：___________。(4)应用：①加速家畜_________进程，促进优良畜群繁育；②保护_________；③生产医用蛋白；④作为异种移植的_____；⑤用于组织器官的_____。
动物体细胞核具有全能性
1.判断下列说法的正误(1)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型(　　)(2)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理(　　)(3)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸(　　)(4)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移植(　　)
已发生癌变，不具备正常二倍体核型
偏酸性，应该用胰蛋白酶
(5)植物原生质体融合和动物细胞融合原理是相同的(　　)(6)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用相同(　　)
第一次：使组织细胞分散开；第二次：使组织细胞从瓶壁上脱落下来
2.请思考下列与动物细胞培养及体细胞核移植相关的问题。(1)动物细胞培养过程中，也需要将动物细胞分散开来，这与观察植物细胞的有丝分裂中的解离作用类似。两种处理方法的结果最大的区别是什么？(2)通过动物体细胞核移植技术获得的克隆动物，其遗传物质是否和供核细胞的遗传物质完全一样？
提示　动物细胞培养过程中的处理，动物细胞还保持活性；但在植物细胞的解离过程中，细胞被解离液杀死，已经失去活性。
提示　不完全一样。细胞核遗传物质一样，但细胞质遗传物质和提供去核卵母细胞的个体几乎完全一样(分析遗传物质来源时，一定要注意细胞核遗传物质和细胞质遗传物质的区别)。
题组一　动物细胞培养与动物体细胞核移植的过程分析
1.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述正确的是(　　)A.制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸C.为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素D.本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小
常用胰蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存
CO2的作用是维持培养液的pH
抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的
对照为：用添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞，统计变异细胞占培养细胞的比例
2.如图所示为哺乳动物生殖的过程。其中b为卵细胞，c为体细胞。下列叙述不正确的是(　　)A.形成动物①②的过程分别属于有性生殖和无性生殖B.产生动物②的过程中可发生基因突变、基因重组等C.动物②的产生表明动物细胞的细胞核具有全能性D.a、b、c细胞的形成过程，仅c细胞为有丝分裂
①通过受精作用形成，属有性生殖，动物②通过细胞核移植技术形成，属无性生殖
a、b细胞分别由精原细胞和卵原细胞通过减数分裂形成，c细胞是体细胞，通过有丝分裂形成
细胞核移植原理是动物细胞的细胞核具有全能性
动物细胞培养与动物体细胞核移植的比较
考纲要求 细胞融合与单克隆抗体 (Ⅱ)。
1.动物细胞融合(1)原理：_______________。(2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、___________、电激等。(3)意义：突破了_____________的局限，使_________成为可能，也为制造___________开辟了新途径。2.单克隆抗体(1)制备过程(2)优点：特异性强、_________，可大量制备。(3)用途：作为_________；用于治疗疾病和_________。
1.判断下列说法的正误(1)可以用灭活的病毒促进动物细胞融合，而不能促进植物细胞融合(　　)(2)小鼠骨髓瘤细胞的染色体数为40，B淋巴细胞的染色体数为46，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86(　　)(3)杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎(　　)(4)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(　　)(5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况)(　　)
杂交瘤细胞染色体数为86
体内培养是为了获得大量细胞，从而获得大量抗体
B淋巴细胞+B淋巴细胞融合；骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞融合；杂交瘤细胞
2.如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。请据图思考：(1)单克隆抗体相比多克隆抗体，其优点有哪些？(2)图中第一次筛选和第二次筛选的目的有何不同？
提示　第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是筛选出能产生所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。
提示　单克隆抗体的优点是：特异性强、灵敏度高，可大量制备。
题组　单克隆抗体的制备过程分析1.关于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是(　　)A.①表示已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导C.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的D.⑤可以无限增殖
融合细胞具有双亲的特点，既能无限增殖又能产生单一抗体
还可以用物理方法——离心、振动、电激，生物方法——灭活的病毒等
如果有反应说明产生了抗体
2.单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：(1)过程③常用的方法是_____________。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生_____免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是_____________________________________，细胞Ⅱ应具有的特点是_________________________________。
B淋巴细胞(浆细胞或已免疫的B淋巴细胞)
既能无限增殖，又能产生特异性抗体
2.单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：(3)体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于___________的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是________________。(4)对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和___________检测。(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的_________作为疫苗。
制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的
知识网络 答题语句
1.植物组织培养的过程主要包括脱分化和再分化两个阶段，脱分化的结果是形成愈伤组织，再分化的结果是形成根和芽。2.植物体细胞杂交需要用酶解法制备原生质体，所用的酶包括纤维素酶和果胶酶。3.无论是植物体细胞杂交还是动物细胞融合，都需要诱导。4.植物组织培养需要各种营养成分和植物激素，动物细胞培养也需要各种营养成分及血清。5.植物体细胞杂交可用于作物育种，动物细胞融合可用于单克隆抗体的制备。6.产生单克隆抗体的细胞是杂交瘤细胞，它既能产生单克隆抗体又能无限增殖。
探究高考 明确考向
1.(2015•江苏，20)如图为制备人工种子部分流程示意图，下列叙述正确的是(　　)A.胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织B.该过程以海藻酸钠作为营养成分，以CaCl2溶液作为凝固剂C.可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖，为胚状体提供碳源D.包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气，有利于人工种子的储藏
胚状体是愈伤组织再分化得到的
海藻酸钠作为包埋的材料，不提供营养成分
凝胶珠具有空间网状结构，不隔绝空气
不仅为胚状体提供能量，而且是培养物渗透压的主要调节物
2.(2014•广东，29节选)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下：(1)选用新生营养芽为外植体的原因是___________________________________，诱导外植体形成PLBs的过程称________。
营养芽细胞分裂能力强，几乎不含病毒
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：(2)与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在__________________，_________________，_________________。
3.(2014•新课标Ⅰ，40)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目为40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过___次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是__小鼠，理由是___________________________。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，还含有__________________________________________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是______________________________________。(3)杂交瘤细胞中有__个细胞核，染色体数目最多是____条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_____________。
B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞
细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
1.关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是(　　)A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
2.下图为细胞融合示意图(只考虑细胞两两融合)，若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，两对基因独立遗传，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时，都不能生长。下列叙述正确的是(　　) ①诱导细胞融合的方法是用灭活病毒处理，原理是细胞膜的流动性　②实验开始时必须用纤维素酶(或果胶酶)除去不利于原生质体融合的结构　③在大于800 lx光照下培养，可淘汰5种融合细胞，筛选出基因型为HhRr的杂种细胞　④利用植物组织培养技术可将融合细胞培养成杂种烟草植株，原理是细胞具有全能性A.①②③④ B.①②③ C.②④ D.②③④
诱导植物原生质体融合的方法没有灭活的病毒
细胞壁不利于原生质体融合
融合细胞共有6种基因型，即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr，只有同时具备了H和R基因才能够生长
A基因型为Hr、hr B基因型为hR、hr
3.右图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是(　　)A.利用此过程获得的试管苗可能为杂合子B.①②过程中都会发生细胞的增殖和分化C.多倍体植株的培育必须经过如图所示过程D.此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性
试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子
①是脱分化过程，没有发生细胞分化
多倍体植株的培育不需要采用植物组织培养技术
4.下面为番茄植物组织培养过程的流程图解。以下相关叙述不正确的是(　　)A.脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用B.再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程C.从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性D.人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题
由体细胞形成完整的植株
人工种子是一种人工制造的代替天然种子的颗粒体，可以直接播种于田间。特点是周期短，易储存和运输，完全保持优良品种的遗传特性，不受气候和地域的限制
5.用动、植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是(　　)A.都需用CO2培养箱B.都必须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性
植物细胞培养不需要用CO2培养箱
植物组织培养需要用固体培养基
而动物细胞培养的原理是细胞增殖，不能体现全能性
6.某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是(　　)A.过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变B.丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体C.过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养D.过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇
外源基因的导入过程属于基因重组
丙细胞能产生单克隆抗体
③是诱导细胞融合的过程，需聚乙二醇，而④过程不用聚乙二醇
7.如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是(　　)A.B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养B.接触抑制现象主要发生在AB段和DE段C.分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆D.E点后的细胞大多数具有异倍体核型，可连续传代
B点之后细胞继续生长，可见B点之后进行了传代培养
在AB段和DE段细胞几乎生长停滞
已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系，无限细胞系大多已发生异倍化，具异倍体核型
细胞克隆的最基本要求是必须保证分离出来的是一个细胞而不是多个细胞
8.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解。请根据图分析下列四个选项中不正确的是(　　)A.单克隆抗体制备过程的顺序是： B.在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有在体外大量繁殖、产生特异性抗体的特性C.由图中可看出，此过程运用的技术手段有动物细胞融合和动物组织培养D.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并且可以大量制备的优点，所以可以制成“生物导弹”
9.下图为转基因烟草培育过程流程图，请回答：(1)携带外源基因的质粒除了含有外源基因外，还包括_______、______、复制原点和标记基因，其中标记基因的作用是_________________________________________________________________，构建携带外源基因的质粒时，需要使用的工具酶是___________________。(2)图中目的基因导入烟草细胞的方法是_____________，感染过程是利用农杆菌中Ti质粒上的_______，使外源基因进入并整合到烟草细胞染色体DNA上。此外另一十分简便经济的导入方法是_____________。
鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
9.下图为转基因烟草培育过程流程图，请回答：(3)将含有目的基因的受体细胞培养成烟草植株的技术叫做____________，其理论基础是__________________，图中的生根、长芽过程属于_______过程。(4)在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加_________，同时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的另一关键是_________。
植物细胞具有全能性
10.自然界中有一种含有叶绿体的原生动物——眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。
结合实验方案回答下列问题：实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下：(1)①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是_______。(2)③过程所用的酶是_________________。(3)④过程除了用电激之外，还可以用___________、____________________等作为诱导因素。(4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是__________________、__________、________________、_________。
聚乙二醇(振动、离心)
(5)在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和_______争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量____________________，导致培养物迅速死亡。(6)在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是_______________________________________________________________________________________________________。
人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时通常要加入血清、血浆等一些天然成分
11.人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有___________________________。
动物细胞培养、动物细胞融合
(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体，可通过______________________等过程制成装片，然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是_______________，在HAT培养基上存活的细胞可能包括_______(填下列序号)。①无抗体分泌的细胞　②抗HPV抗体的分泌细胞 ③其他无关抗体的分泌细胞(3)对于抗体检测呈___性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/mL，每孔加入细胞稀释液_____mL，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
解离、漂洗、染色和制片
设加入细胞稀释液的最大量是X，则10个/mL×X＝1个，X＝0.1 mL
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是_______________________________________________。(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。______________________________________________________________________________________________。
小鼠形成的抗体对人体来说是抗原，存在着排异反应
通过基因工程向浆细胞中导入prG；或：利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中