2021学年2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体课后作业题

这是一份2021学年2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体课后作业题，共9页。

A．电刺激或聚乙二醇均可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可形成杂交瘤细胞
D．某种植物甲、乙两品种的体细胞杂交后代与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同
【解析】 电刺激或聚乙二醇均可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，A正确；去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理，前者需要用纤维素酶和果胶酶处理，后者需要用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理，B正确；小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可形成杂交瘤细胞，C正确；某种植物甲、乙两品种的体细胞杂交后代与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目不同，前者是后者的两倍，D错误。
【答案】 D
2．下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是
( ) 【导学号：72240026】
A．制备过程中不需要动物细胞培养技术
B．杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点
C．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产
D．单克隆抗体制备过程中的细胞两两融合可得到三种融合细胞
【解析】 单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞结合，得到杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体。杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交获得三种细胞：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合形成的融合细胞、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合形成的融合细胞。
【答案】 D
3．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是( )
A．特异性强、灵敏度高
B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”
C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体
D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
【解析】 抗体是由B淋巴细胞分泌的，每一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体。要想获得大量单一抗体，需要将某一种B淋巴细胞大量克隆，但是在体外培养的条件下，B淋巴细胞不能无限增殖。由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞，能在体外培养的条件下大量增殖，并分泌单克隆抗体。单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强、灵敏度高，与抗癌药物结合可制成“生物导弹”，直接作用于癌细胞。
【答案】 C
4．要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是 ( )
A．在体外培养条件下，B淋巴细胞可以无限增殖
B．在动物体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的抗体
C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
【解析】 B淋巴细胞的免疫具有特异性，即每一个B淋巴细胞只能产生一种与特定抗原结合的抗体。
【答案】 D
5．用动物细胞工程获得单克隆抗体，下列实验步骤错误的是( )
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
【解析】 单克隆抗体的制备过程是：将一种抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞，然后将B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞同时培养，在聚乙二醇的诱导下，促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到杂交瘤细胞。从中选出能产生特定抗体的细胞群，即可得到单克隆抗体。因为动物细胞无细胞壁，所以用不到纤维素酶。
【答案】 B
6．下列有关单克隆抗体制备的叙述，正确的是( )
A．先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞
B．体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和一些抗生素
C．为避免病毒感染，需用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合
D．单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理
【解析】 本题考查单克隆抗体制备的相关内容。先利用特定的抗原蛋白注射小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞，蛋白质饲喂小鼠，水解失去活性，A错误；由于培养液中缺乏天然培养基中某些无法替代的成分，则体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清，添加抗生素进行消毒，B正确；诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合的方法有离心、电刺激，聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，C错误；细胞的全能性是指最后能获得完整个体，而单克隆抗体制备用到了动物细胞融合的原理，D错误。
【答案】 B
7． 2011年3月2日《科技日报》报道，英国一研究小组开发出一种单克隆抗体，经实验模型验证，该抗体与干扰素结合使用，可有效对抗肺结核感染。研究人员认为，这一成果有助于科学家开发出新的结核病治疗手段。下列关于单克隆抗体的叙述，不正确的是( )
A．利用单克隆抗体制成诊断盒，可用于疾病的诊断
B．该单克隆抗体只能在体内生产，不能在体外生产
C．工业化大量制备该抗体，需用到动物细胞融合技术
D．该抗体与干扰素结合可制成杀死结核杆菌的“生物导弹”
【解析】 单克隆抗体是经细胞融合后的杂交瘤细胞产生的，在体内、体外培养均可获得该产物。
【答案】 B
8．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A．①②③④ B．①③⑤
C．②④D．②③
【解析】 单克隆抗体的制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合时，发生了以下三种情况：未发生融合的细胞(B淋巴细胞，小鼠骨髓瘤细胞)；自身融合的细胞(B淋巴细胞自身融合，小鼠骨髓瘤细胞自身融合)；骨髓瘤细胞与单个B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞是制备单克隆抗体必需的，因此在特定的培养基上只有杂交瘤细胞才能存活增殖。
【答案】 A
9．关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是( )
A．对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞
B．融合并筛选特定的杂交瘤细胞，原代培养产生遗传物质改变后才能进行传代培养
C．特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染
D．治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞
【解析】 单克隆抗体的制备是用骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合后得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，又具有B淋巴细胞产生抗体的特点，所以不需经过遗传物质的改变便能无限增殖；单克隆抗体最广泛的应用是作为诊断试剂；把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，将癌细胞杀死。
【答案】 B
10．近年来，我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA，机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗，已取得良好效果。
请根据上述材料，回答下列问题：
(1)狂犬病病毒的毒株可发生变异。从自然感染动物体内分离的病毒株称为野毒株，其致病力强。将野毒株在家兔脑________内连续传50代后，变成固定毒株。固定毒株能使人及动物致病。
(2)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中，应用的动物细胞工程技术是______________________________________。
(3)下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
①图中A过程，从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是______________细胞，该细胞能够产生___________________________________________________。
从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射的特定的物质是________。
②图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的________、聚乙二醇或电激等诱导。
③特异性抗体的获取方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有_________________________________________________________等
特点。
(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有_________________________
_______________________________________________________________。
(5)单克隆抗体技术还有哪些用途？__________________________________
_______________________________________________________________。
【解析】 (1)病毒是非细胞结构的生物，专营寄生生活，狂犬病病毒野毒株寄生在家兔脑活细胞内。(2)制备单克隆抗体过程，利用了动物细胞融合技术和动物细胞的培养技术。(3)单克隆抗体制备过程中，从小鼠体内提取的是经抗原免疫的B淋巴细胞，该细胞能产生特异性抗体。图中B过程是细胞融合过程，常用的诱导因素是灭活的病毒。
【答案】 (1)活细胞 (2)动物细胞融合技术、动物细胞培养技术 (3)①免疫过的B淋巴 特异性抗体 抗原(或狂犬病病毒) ②病毒(或仙台病毒) ③特异性强、灵敏度高，并可以大量制备 (4)无菌、无毒，适宜的温度和pH，气体，营养物质等 (5)作为诊断试剂；运载药物(或“生物导弹”)等
[能力提升]
11．下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤：
①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞
②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞
③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养
④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞
⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
⑥从腹水中提取抗体
⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合
其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是( )
A．实验顺序应当是①②⑦⑤④③⑥
B．③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆
C．⑦过程获得的细胞均可无限增殖
D．利用细胞融合生产单克隆抗体通常要经过两次筛选
【解析】 骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合时能出现三种融合的细胞，分别是两个B淋巴细胞融合产生的细胞、两个骨髓瘤细胞融合产生的细胞、淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的细胞。其中，两个B淋巴细胞融合产生的细胞不能无限增殖。
【答案】 C
12．如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是( )
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
【解析】 明确单克隆抗体制备过程的几个关键环节是准确解答本题的关键。①是从小鼠脾脏中获得的能产生抗体的浆细胞，A项错误；②中应该使用能促进细胞融合的促融剂，如聚乙二醇等，B项错误；③同时具有从脾脏中分离出的浆细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；④是经筛选培养获得的能产生特异性抗体的细胞群，D项正确。
【答案】 D
13．某实验小组做了下图所示的实验研究。下列相关叙述，正确的是( )
A．与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低
B．过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程
C．每个Y细胞只产生一种抗体，故过程③不需用选择性培养基进行筛选
D．过程④产生的单抗，不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外
【解析】 小鼠的纤维母细胞经过诱导基因的作用形成诱导干细胞，其全能性显著提高；肝细胞等体细胞的形成是细胞分化的结果，遗传物质没有改变，但基因进行了选择性表达；X细胞与Y细胞诱导融合后，可能会形成多种融合细胞，必须用选择性培养基进行筛选，获得能分泌单抗的Z细胞；抗体属于分泌蛋白，可以通过胞吐方式排出细胞，不需要细胞膜上载体蛋白的协助。
【答案】 D
14．请回答以下与抗X单克隆抗体的制备相关的问题：
(1)首先将________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得免疫细胞，其中至少有一种________(填细胞名称)能分泌抗该抗原的抗体。
(2)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_______________________________________________________________。
(3)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基相比，二者的区别是____________________________________
________________________________________________________________。
(4)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用______________或____________处理离体组织细胞使之分散开。
(5)____________技术是单克隆抗体技术的基础。
(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是________________。
【解析】 (1)抗X单克隆抗体，指的是针对特定抗原X制备的单克隆抗体。将抗原X注入小鼠体内后，刺激B淋巴细胞增殖分化为特定细胞，此细胞产生和分泌针对抗原X的特定的抗体。(2)动物细胞融合具有特有的诱导方法：用灭活的病毒来诱导融合。(3)动物细胞培养基和植物组织培养基的不同是：前者要加入促生长因子、动物血清，后者要加入植物激素。(4)因为动物细胞生长和增殖存在接触抑制现象，要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶来处理动物组织，使之分散成单个细胞，才能实现细胞增殖，也才能保证细胞与细胞之间的融合。(5)整个单克隆抗体的制备过程，需要培养各类细胞，如骨髓瘤细胞的培养、杂交瘤细胞的培养(包括筛选过程中的培养以及最后的体内和体外培养)等，可以说动物细胞培养贯穿始终，是单克隆技术的基础。(6)细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，它们是通过主动运输的方式进入细胞内的。
【答案】 (1)抗原X B淋巴细胞
(2)灭活的病毒
(3)动物细胞培养基要加入促生长因子、动物血清，植物组织培养基要加入植物激素
(4)胰蛋白酶 胶原蛋白酶
(5)动物细胞培养 (6)主动运输
15．某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题：
(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，则小鼠最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠，理由是___________________________________________________________。
(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是____________________________________________________。
(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。
(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是___________________________________________________________________。
【解析】 (1)据图分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价几乎都达到16 000以上，小鼠Y的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和B淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核中的染色体数目为40＋60＝100条。(4)正常细胞的分裂次数是有限的，且经过免疫的B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。
【答案】 (1)4 Y Y小鼠的血清抗体效价最高
(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞 细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
(3)1 100 (4)不能无限增殖