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【生物】安徽省阜阳市第三中学2018-2019学年高二下学期期中考试试题（解析版）
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安徽省阜阳市第三中学2018-2019学年高二下学期
期中考试试题
考生注意：本试题分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷，共10页，41题。满分100分，考试时间为90分钟。
第Ⅰ卷（54分）
一、单选题（下列各题的备选答案中只有一个选项是正确的。共36小题，每题1.5分，共54分）
1．制作果酒、果醋两个实验的共同点是（ ）
A．菌种为异养原核生物
B．将原料灭菌后再发酵
C．保证无氧环境下发酵
D．发酵液最终呈现酸性
2．下列有关生物技术的叙述，不正确的是( )
A．制作果醋时，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长
B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长
C．醋酸杆菌在细胞质基质中产生醋酸
D．用传统的发酵技术制葡萄酒必须添加酵母菌菌种
3．利用葡萄汁发酵生产葡萄酒，当酒精含量达到12%～16%时，发酵就停止了。下列有关解释错误的是（ ）
A．高浓度酒精对酵母菌有抑制作用
B．葡萄汁中的营养物质不足
C．发酵液中pH逐渐降低影响酶活性
D．氧气过少导致酵母菌无法进行细胞呼吸
4．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（ ）
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品的可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
5．为获得优良的发酵食品，实验室在三支试管中培养了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。下图中甲、乙、丙三支试管的菌种及其发酵食品对应正确的是（ ）
A．甲试管：酵母菌—果酒、乙试管：醋酸菌—果醋、丙试管：乳酸菌—泡菜
B．甲试管：醋酸菌—泡菜、乙试管：酵母菌—果酒、丙试管：乳酸菌—果醋
C．甲试管：乳酸菌—果酒、乙试管：酵母菌—泡菜、丙试管：醋酸菌—果醋
D．甲试管：醋酸菌—果醋、乙试管：乳酸菌—泡菜、丙试管：酵母菌—果酒
6．如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（ ）
A．过程①和②都发生在细胞质基质，过程③和④都发生在线粒体中
B．只有过程①能产生还原氢，过程②③能消耗还原氢
C．过程③和④都需要氧气的参与
D．过程①～④所需的最适温度基本相同
7．下列有关于发酵技术叙述不正确的是( )
A．腐乳最外部有一层致密的皮，这层皮就是由毛霉的直立菌丝构成的
B．在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
C．长期放置的酒表面会出现一层膜，这层膜是醋酸菌在液体表面繁殖形成的
D．泡菜腌制过程中，泡菜坛表面会长出一层白膜，这层白膜是产膜酵母大量增殖形成的
8．人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是( )
A
B
C
D
食品
果酒
果醋
腐乳
泡菜
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
醋酸菌
制作装置或操
作步骤
9．某实验室用两种方式进行酵母菌发酵葡萄糖生产酒精。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜。实验过程中每小时测定一次两发酵罐中氧气和酒精的物质的量，记录数据并绘成如图所示的曲线。据图分析下列说法中正确的是（ ）
A．在实验结束时甲、乙两发酵罐中产生的CO2量之比为6∶5
B．甲、乙两发酵罐分别在约第5小时和第3小时无氧呼吸速率最快
C．甲发酵罐的实验结果表明在有O2存在时酵母菌无法进行无氧呼吸
D．该实验证明向葡萄糖溶液中通入的O2越多，则酒精的产量越高
10．膳食中含有少量的亚硝酸盐，其主要危害是（ ）
A．杀死细胞 B．形成致癌物，诱发基因突变
C．影响营养物质的吸收 D．在肾脏中积累
11．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是( )
①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条缝隙
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
⑥等待平板冷却 5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A．①②③④ B．④⑤⑥ C．③④⑤ D．①②④⑥
12．下列关于四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述，其中正确的一组是（ ）
硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
能源
氧化NH3
分解乳酸
固定N2
利用光能
C源
CO2
糖类
糖类
CO2
N源
NH3
N2
N2
代谢类型
自养需氧型
异养需氧型
异养需氧型
自养需氧型
A．硝化细菌、乳酸菌 B．乳酸菌、根瘤菌
C．根瘤菌、衣藻 D．硝化细菌、衣藻
13．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是（ ）
A．除活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法
B．在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点
C．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸
D．不能用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目
14．下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ）
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B．依用途划分，该培养基属于选择培养基
C．培养基中的唯一碳源是（CH2O)，唯一氮源是NaNO3
D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH2O),再添加纤维素
15．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据
B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
16．下列关于微生物的培养和应用的叙述正确的是（ ）
A．配制培养基时应先调PH后灭菌
B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C．培养基中加入伊红—美蓝试剂，长出的菌落为大肠杆菌菌落
D．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
17．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是（ ）
1组
2组
3组
4组
土壤处理
灭菌
不灭菌
灭菌
不灭菌
湿润
湿润
较干燥
较干燥
A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是 1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理
18．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有若广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B. 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C. 在涂布平板上通过划线获得单菌落
D. 斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株
19．在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10﹣6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．下列有关叙述不正确的是（ ）
A．A同学出现这种结果的原因可能是土样不同
B．可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C．让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误
D．B选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，而C选项的没有
20．刚果红染色时，加入刚果红应在( )
①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时
A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤
21．突变型面包霉常需要在通用培养基上添加适当的氨基酸才能生长．现用两个氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b分别接种到下面的6种培养基上,两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长,a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长．培养基成分如下表,关于两种突变株a和b对A～J中氨基酸需求的说法正确的是（ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A．两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B．两种突变株都需有G氨基酸才能生长
C．两种突变株都必须同时供应4种氨基酸才能生长
D．两种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长
22．将从种植烟草的土壤里分离得到的尼古丁（C10H14N2）降解菌株SC接种到尼古丁培养基中，30℃摇床培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如下图所示。下列分析错误的是（ ）
A．分离SC时可用稀释涂布平板法或平板划线法
B．培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量
C．影响SC种群密度变化的主要因素是O2浓度和PH
D．发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源
23．下列关于“酵母细胞的同定化技术”实验的叙述，正确的是（ ）
A.活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B.配制CaCl2溶液时，需要边小火加热边搅拌
C.将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出
D.以海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
24．下图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果，下列有关叙述中，错误的是（ ）
A．本研究的自变量有温度和洗衣粉是否加酶
B．本研究的因变量可能是污渍残留量
C．两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1
D．温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活
25．目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是（ ）
A．洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用
B．加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境
C．固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性
D．酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用
26．下列关于酶技术应用的叙述，正确的是（ ）
A．用包埋法将果胶酶固定化后，其活性明显增强
B．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
C．较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下
D．高温易使酶失活，因此冷水洗涤去污效果应该比温水好
27．煮练酶是一种生物复合酶，它由淀粉酶、果胶酶、脂肪酶和木质素酶等多种蛋白酶组成，能高效、彻底地分解存在于纤维中的共生物和其他杂质，常用来处理织物，而且处理后织物手感光滑柔软。下列叙述正确的是（ ）
A．低温下煮练酶的活性降低是因为酶的空间结构遭到了破坏
B．向煮练酶中加入双缩脲试剂水浴加热后会产生砖红色沉淀
C．煮练酶中的淀粉酶会将纤维共生物中的淀粉分解成葡萄糖
D．煮练酶在织物处理上的应用利用了生物酶的专一性和高效性
28．下列关于酶制剂和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 从酶的固定方式看，吸附法比交联法对酶活性影响大
B. 可以用包埋法将各种消化酶固定化形成多酶片，并口服使用
C. 探究不同加酶洗衣粉洗涤效果的实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量
D. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂不能以口服方式给药
29．下列广告语中，在科学性上有明显错误的是（ ）
①某儿童酱油专为健康研制，不仅可以起到调味作用，还可以补充能量
②某高浓度果汁饮料美味可口，可大量补充体内水分，非常解渴
③某加酶洗衣粉能有效去除奶渍、血渍等污渍，让家庭主妇的洗衣烦恼一扫光
④某嫩肉粉内含蛋白酶，可对肉中蛋白质进行部分水解，使肉制品嫩而不韧、味美鲜香
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
30．下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验操作的说法中，有误的是（ ）
A．该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNA
B．该实验操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌
C．该实验中有多次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关
D．实验中有3次加入NaCl溶液，均是为了溶解DNA
31．DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤：①过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞溶液；②过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液；③过滤含DNA的2mol/L的NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得 （ ）
A．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、含DNA的滤液
B．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、纱布上的黏稠物
C．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
D．含较纯的DNA的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
32．下列有关果酒、果醋和腐乳制作实验的叙述，错误的是（ ）
A. 通过控制发酵温度，可抑制其它微生物的生长繁殖
B. 都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品
C. 果酒、果醋发酵的培养基呈液态而腐乳发酵培养基呈固态
D. 都可以通过人工接种菌种提高产品质量
33．下列有关NaCl在生物技术实践中的应用，正确的是（ ）
A．在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需加入琼脂，不需要添加NaCl
B．蛋白质在NaCl溶液中析出时，其结构未发生改变
C．在腐乳制作过程中，装瓶时需逐层等量加入NaCl，以防杂菌污染
D．将哺乳动物的成熟红细胞浸泡于0.9%的NaCl溶液中，用以制备纯净的细胞膜
34．细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖．下列与此有关的说法正确的是（ ）
A. 乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B. 氮源不可能作为细菌的能源物质
C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌
D. 琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质
35．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列说法中正确的是（ ）
A. 操作前要将接种环放在酒精灯旁灼烧灭菌
B. 划线操作须在火焰上方进行
C. 只有在5区才可以得到所需菌落
D. 在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
36．下列说法不正确的是（ ）
A. 在探究温度、pH和果胶酶用量的实验中，虽然实验的变量发生了变化，但通过设置梯度来确定最适值的思想方法是不变的
B. 植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶
C. 通过测定滤出的苹果汁的体积大小无法来判断果胶酶活性的高低
D. 人们可以使用果胶酶、纤维素酶等来解决制作果汁面临的出汁率低、浑浊等问题
第Ⅱ卷（非选择题 共46分）
二、填空题（共5题，各题的每空均为2分，共46分）
37．（每空2分，共8分）银杏养生酒以高粱和银杏叶提取的杏黄酮为主要原料，加上锁阳、肉苁蓉等中药材酿制而成，具有抗癌、防衰老等多种性能，非常适宜中老年人和有心脑血管疾病的人群饮用。请回答下列问题：
（1）在酿制银杏酒的初期时一般要先通气，其目的是_______________________。
（2）在酿制银杏养生酒时，一般不需要对高粱、银杏叶等进行严格的消毒处理，这是因为_________________________________________________________________。
（3）制作成功的银杏酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此。分析其原因是_____________。写出该过程发生的反应式_________________。
38.（每空2分，共6分）乳酸菌和我们的生活紧密相连，现欲从泡菜滤液中分离乳酸菌。请回答下列相关问题。
（1）要纯化培养乳酸菌，在配制固体培养基时，除了要加入各种营养物质外，一般还要加入琼脂。培养基中的(NH4)2CO3______（能/不能）为乳酸菌提供碳源 ，原因是______________。
（2）为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，原因是___________________。
39.（每空2分，共12分）烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
（1）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用____________法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_________；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明________________；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是_____________，二是______________。
（2） 根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素____________。
40.（每空2分，共10分）在20世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了20世纪70年代，人们又发明了固定化酶和固定化细胞技术。请回答下列有关固定化酶和固定化细胞方面的问题：
（1）在实际生产中，固定化酶技术的优点是____________________________________；与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是_____________。
（2）制备固定化酵母细胞常用的包埋材料是__________，使用了如图所示的方法[ ]______（填图号及名称）。
（3）为什么一般不能用加酶洗衣粉洗涤丝绸及羊毛衣物？____________________________。
41．（每空2分，共10分）自然界中的微生物往往是混杂生长的．人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定．下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题．
（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_____________________的培养基进行分离，这种培养基属于选择培养基培养基（按功能分类）．也可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别．
（2）若取土样5g，应加入______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液．将103～107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板．这种接种方法称为稀释涂布平板法．
（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中105倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为______________．这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_____________________________
稀释倍数
103
104
105
106
107
平均菌落数（个）
＞500
367
248
26
15
参考答案
第Ⅰ卷（54分）
一、单选题（下列各题的备选答案中只有一个选项是正确的。共36小题，每题1.5分，共54分）
1．D
考查制作果酒、果醋的原理及过程。
【详解】
A、制作果酒、果醋的实验所用菌种分别为酵母菌、醋酸菌，其中醋酸菌属于细菌，为原核生物，而酵母菌属于真菌，为真核生物，错误；
B、这两个实验都利用了自然界中的菌种（即原料上携带的菌种），不能将原料灭菌，否则将无法实现发酵，错误；
C、制作果醋时所用的醋酸菌属好氧细菌，即制作果醋需在有氧环境下发酵；酒精发酵和乳酸发酵在无氧的环境下发酵，错误；
D项，利用酵母菌发酵制作果酒时会产生，会使发酵液呈酸性；果醋制作时，生产出的果醋呈酸性，导致发酵液最终呈酸性，正确。
2．D
【解析】醋酸菌是好氧菌，因此在果醋发酵过程中，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长，A正确；制作腐乳时，盐的作用是使豆腐块变硬，防止酥烂，同时抑制杂菌生长，B正确；醋酸杆菌是一种细菌，属于原核细胞，没有线粒体等多种复杂的细胞器，其在细胞质基质中产生醋酸，C正确；用传统的发酵技术制葡萄酒时，利用的是果皮上的野生酵母菌，不需要添加酵母菌菌种，D错误。
3．D
参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
在有氧的条件下，其反应式：C6H12O6（葡萄糖）+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量
在无氧的条件下，其反应式：C6H12O6（葡萄糖）2CO2+ 2C2H6O+能量
【详解】
高浓度酒精可使酵母菌的相关蛋白质变性，对酵母菌产生毒害作用，A正确；果酒发酵的底物是葡萄糖，葡萄汁中的营养物质不断被消耗，不足以维持反应继续进行，B正确；酒精发酵产物CO2不断积累，CO2溶于水呈酸性，造成pH值下降，使酵母菌体内的酶活性降低，C正确；酒精发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸，不需要氧气参与，D错误。故选D。
【点睛】
本题考查果酒的制作，掌握参与果酒制作的微生物及其代谢类型是准确判断各选项的关键。
4．A
酒精与酸性重铬酸钾溶液反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测酒精；分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红；萃取法提取出的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行分离和鉴定，利用的原理是色素在层析液中的溶解度不同，彼此分离的扩散速度不同，胡萝卜素扩散速度最快。
【详解】
在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入3mol/L的硫酸3滴，混匀后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察到橙色的重铬酸钾变成灰绿色，A错误；在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养，B正确；检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功，C正确；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带），D正确。
【点睛】
易错点：酒精的检测方法是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入3mol/L的硫酸3滴，混匀后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察到橙色的重铬酸钾变成灰绿色。
5．D
【解析】醋酸菌是好氧菌,分布在试管上层,用于制醋，为试管甲；乳酸菌是厌氧菌,分布于试管下层,用于泡菜发酵，为试管乙；酵母菌是兼性厌氧型,有氧无氧都能生存,在试管中分布均匀,用于果酒制作，为试管丙。
6．C
据图分析，过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，过程④是果醋制作。果醋发酵的微生物是醋酸菌，条件是30-35℃，持续通入无菌空气，代谢类型是异养需氧型；果酒发酵的微生物是酵母菌，条件是18-25℃，初期通入无菌空气，进行有氧呼吸大量繁殖，后期密封，无氧呼吸产生酒精，代谢类型是异养兼性厌氧型。
【详解】
据图分析，过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，场所都是细胞质基质；过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，场所在酵母菌的线粒体；过程④是果醋制作，场所在醋酸菌的细胞质中，A错误；过程①是细胞呼吸的第一阶段，会产生[H]；过程②是无氧呼吸的第二阶段，会消耗[H]；过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，其中第二阶段产生大量的[H]，而第三阶段消耗[H]，B错误；过程③是酵母菌的有氧呼吸，过程④是醋酸菌的有氧呼吸，都需要氧气的参与，C正确；过程①②③是酵母菌的呼吸作用，所需的最适温度基本相同（18～25℃），过程④是醋酸菌的酿醋过程，所需的最适温度在30～35℃，D错误。
【点睛】
正确分析题图中①-细胞呼吸第一阶段、②-有氧呼吸二三阶段、③-无氧呼吸二阶段、④-醋酸发酵等四个过程是分析判断本题的关键。
7．A
【解析】腐乳外部有一层致密的“皮”是前期发酵时毛霉在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害．它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形，A错误；在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B正确；长期放置的酒表面会出现一层膜，这层膜是醋酸菌在液体表面繁殖形成的，C正确；泡菜腌制过程中，泡菜坛表面会长出一层白膜，这白膜是产膜酵母大量增殖形成的，D正确。
8．B
【解析】该装置中液体太满，发酵液会从导管溢出发酵瓶中不需要插入温度计，A错误；醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，B正确；腐乳制作过程先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，C错误；制作泡菜的原理是乳酸菌发酵，而不是醋酸菌，D错误。
【点睛】解答本题的关键是了解在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，这样才可以提高产量。
9．B
【解析】
试题分析：当酵母菌进行需氧呼吸时，根据需氧呼吸的反应式可知，消耗1molO2可产生1molCO2；当酵母菌进行厌氧呼吸时，根据反应式可知，生成1mol酒精的同时产生1molCO2；再结合曲线图可以计算出，实验结束时甲发酵罐中的CO2量为6＋18＝24 （mol），乙发酵罐中的CO2量为15mol，因此实验结束时甲、乙两发酵罐中产生的CO2量之比为8∶5，故A错误。酵母菌厌氧呼吸的速率最快，即产生酒精的速率最快，结合图示可知曲线的斜率最大时酒精产生的速率最快，甲、乙两发酵罐中产生酒精的速率最快时分别约为第5小时和第3小时，故B正确。从图中曲线可知，甲发酵罐中约在第2小时开始产生酒精，而O2约在第4小时才被消耗完，故C错误。当O2达到一定浓度时，酵母菌不再进行厌氧呼吸，而酵母菌只有进行厌氧呼吸才能产生酒精，故D错误。
考点：光合作用与细胞呼吸综合辨析
10．B
【解析】
试题分析：亚硝酸盐的危害：当摄入总量较多时，可引起中毒或死亡。在特定条件（适宜pH、温度和微生物作用）下，亚硝酸盐可以转变成致癌物质——亚硝胺；所以选B。
考点：泡菜的制作
【名师点睛】亚硝酸盐与人体健康的关系
①微生物在特定条件下可把食物中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，食用后导致人体红细胞内的亚铁血红蛋白被氧化成高价铁血红蛋白，使血红蛋白失去携带氧气的能力，导致缺氧性中毒症状。
②膳食中绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出，但当摄入总量较多时，可引起中毒或死亡。
③亚硝酸盐在一定条件下可转化为致癌、致畸和致突变的物质——亚硝胺。
11．C
【解析】①培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温防止杂菌污染，③正确；④用左手的拇指和食指打开皿盖，④正确；⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误；综上所述，选C。
12．D
【解析】试题分析：硝化细菌属于细菌，能氧化NH3，属于自养需氧型生物，正确。乳酸菌能源应是有机碳源，错误。根瘤菌能源应是糖类等有机物，错误。衣藻属于真核生物，能进行光合作用，正确。D正确。
考点：微生物的培养
13．D
【解析】本题考查培养基对微生物的筛选与微生物的分离计数，要求考生明确利用选择培养基可对微生物进行筛选，利用平板划线法或稀释涂布平板法可进行微生物分离，利用稀释涂布平板法可测定土壤溶液中某活菌数目。
除活菌计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，A正确；在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点，B正确；在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸，C正确；可用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目，D错误。
14．D
【解析】分析表格信息可知，因配方中没有凝固剂琼脂，所以依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A项正确；因配方中有青霉素，所以依用途划分，该培养基属于选择培养基，B项正确；培养基中的唯一碳源是（CH2O)，唯一氮源是NaNO3，C项正确；若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH2O)和青霉素，再添加纤维素，D项错误。
【点睛】本题以“微生物的培养基配方”为情境，综合考查学生对微生物的营养、培养基的分类和应用等相关知识的识记和理解能力。正确解答此题，需以“培养基的成分”为切入点，从中抽提出有效信息：该配方中有青霉素、但没有凝固剂琼脂、含碳元素的物质只有（CH2O)、含氮元素的物质只有NaNO3、将其与“所学相关知识”有效地联系起来，进行知识的整合和迁移，并与分离纤维素分解菌的知识建立联系。
15．A
【解析】菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据，但是有无荚膜通过肉眼无法观察，A错误； 鉴别培养基属于固体培养基，可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型，B正确； 当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，C正确； 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌，D正确。
【点睛】注意：菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征；不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的；这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
16．A
本题考查培养基配置的步骤，选择培养基与鉴别培养基的区别等。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板六个步骤。选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐）。鉴别培养基：是加入一些化学物质，微生物的代谢产物等可以和这种物质发生反应，产生明显的变化，以便鉴别和筛选某种微生物。
【详解】
配制培养基应先调pH再进行灭菌，否则会被再次污染，A正确；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，在培养基中加入青霉素可抑制细菌而促进真菌生长，B错误；伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，利用伊红—美蓝固体培养基可以鉴定大肠杆菌是否存在，C错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，D错误；故选A。
17．D
根据题意和图表分析可知：该实验的自变量是土壤湿润条件和是否灭菌，4个实验组相互对照；落叶上面也有微生物，也可以分解落叶，所以也应该进行灭菌处理；因为1、3组土壤灭菌后，土壤中微生物被杀灭，无法分解落叶，2、4组没有灭菌，存在微生物，因其土壤的湿润条件不同，分解的落叶量也不相同。
【详解】
实验组2组合4组可以形成对照，变量是土壤的湿润程度，来研究土壤微生物对落叶的分解作用，A正确；1组和3组由于没有微生物，落叶不被分解，2组和4组由于有微生物，落叶不同程度的被分解，B正确；为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理，消除微生物的影响，C正确；该实验的变量有两个，一个是灭菌、不灭菌，一个是湿润、不湿润．自变量是灭菌、不灭菌，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条件下3、4形成对照，所以1、3分别是两组对照实验的对照组，D错误。
【点睛】
注意：本题实验中涉及两个自变量（土壤湿润条件和是否灭菌），因变量是土壤微生物对落叶的分解作用。
18． B
A、生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A错误；
B、筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B正确；
C、在涂布平板上长出的菌落，可以通过连续划线或稀释涂布平板法进一步纯化，C错误；
D、斜面培养基中含有大量营养物，可在低温下长期保存菌株，D错误。
故选：B。
19．D
【解析】甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，A正确；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B正确；如果是A同学实验操作过程中污染造成的，让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而C选项的也有对照实验，D错误。
【点睛】本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化学生微生物实验操作遵循的原则及其运用，生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。
20．C
【解析】常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行染色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。所以选C。
【考点定位】培养基对微生物的选择利用
21．D
【解析】根据题意知，a突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但可以在2、4培养基上生长，说明a生长需要E、F两种氨基酸；b突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但可以在2、6培养基上生长，说明b生长需要E、G 两种氨基酸，所以两种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长。综上分析，A、B、C三项均错误，D项正确。
【点睛】解答此题的关键是抓住“两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长,a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长”这一解题的切入点，采取对比法，找出各培养基中添加的氨基酸种类的异同，以此进行知识的整合和迁移。
22．C
【解析】
【分析】
微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
分析曲线可知，曲线中SC菌体的种群数量呈S型曲线增长，培养36h时SC的数量达到K值。
【详解】
微生物分离可使用稀释涂布平板法或平板划线法，A正确；曲线中SC菌体的种群数量呈S型曲线增长，培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量，B正确；培养过程中“30℃摇床培养”，因此氧气浓度不是限制因素，影响SC种群密度变化的主要因素尼古丁含量，C错误；根据尼古丁的分子式可知，发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源，D正确。
【点睛】
分析关键：要善于抓主题干中有效信息进行分析，如摇床培养，说明培养液中不缺乏氧气；从曲线中可得，培养36h时SC的数量达到K值；从尼古丁的分子式中得知它能提供糖原和氮源。
23．A。
A、活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合可使干酵母吸水，代谢加快，恢复活性，A正确；
B、配制CaCl2溶液时，不需进行加热，B错误；
C、溶液使酵母细胞可以形成稳定的结构，固定在凝胶珠中，需要一段时间，时间不宜过短或过长，C错误；
D、CaCl2如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠颜色过浅，所包埋的酵母细胞数目较少；如果海藻酸钠浓度过高，凝胶珠不易成形，D错误。
24．C
【解析】据图分析，本研究的自变量有温度和洗衣粉的种类（洗衣粉是否加酶），A正确；从曲线的变化趋势可以判断，本研究的因变量可能是污渍残留量，B正确；据图分析，加酶洗衣粉的最佳使用温度是t1，普通洗衣粉的增加使用温度是t2，C错误；温度超过t2后加酶洗衣粉的洗涤效果与普通洗衣粉相同，可能是其中的酶可能失活，D正确
25．C
【解析】因为绝大多数酶是蛋白质,对表面活性剂、高温、强酸、强碱条件非常敏感,甚至会失去活性，A错误；为减少对环境的污染,用加酶洗衣粉取代普通洗衣粉,从而减少P对环境的污染，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上,实现酶的反复利用,但固定时可能使酶的结构产生变化,从而改变酶的催化活性，所以C选项是正确的；绝大多数酶是蛋白质,不需要供给任何营养物质,只要条件适宜,就能发挥催化功能，D错误。
26．C
【解析】用包埋法将果胶酶固定化后，果胶酶可以多次重复利用，其活性并未增强，A错误；尿糖试纸是用来鉴定尿液中是否含有葡萄糖，只能使用一次，B错误；低温能降低酶的活性，而酶的空间结构保持稳定，因此，较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下，C正确；度过高酶容易失去活性，但是温度过低酶的活性降低，冷水洗涤去污效果应该比温水差，D错误。
27．D
【解析】低温条件下酶的活性降低，但是空间结构不变，A错误；双缩脲试剂能与蛋白质发生紫色反应，反应条件为常温下，B错误；淀粉酶能将淀粉分解成麦芽糖，而不能分解成葡萄糖，C错误；煮练酶中的各种酶催化分解的底物不同，具有专一性和高效性，D正确。
28．C
A、酶的固定方法通常有化学结合和物理吸附，前者可能引起酶分子结构发生改变而改变酶的活性，后者则不会，A错误；
B、酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，因此不一般不用包埋法固定化酶，B错误；
C、探究加酶洗衣粉洗涤效果时实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量，C正确；
D、消化酶在消化道内起作用，则蛋白酶制剂以口服方式给药D错误．
29．A
【解析】
【分析】
本题结合广告语，考查了与日常生活密切相关的生物学常识，意在考查学生运用所学的生物学知识解决相关的生物学问题的能力。
【详解】
酱油的主要成分是谷氨酸钠及氯离子、钠离子，只能起到调味作用，不能补充能量，①错误；饮用高浓度果汁饮料后，可使体内细胞外液的渗透压升高，刺激下丘脑渗透压感受器，进而引起大脑皮层的渴感中枢兴奋，产生渴感，②错误；加酶洗衣粉主要含有脂肪酶、蛋白酶，能有效去除奶渍、血渍等污渍，让家庭主妇的洗衣烦恼一扫光，③正确；某嫩肉粉内含蛋白酶，可对肉中蛋白质进行部分水解，使肉制品嫩而不韧、味美鲜香，④正确。
故选A。
30．A
【解析】实验中两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质（DNA），第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA，A错误；该实验操作中多次用到搅拌，最后一步搅拌是在DNA鉴定时，未强调搅拌方向，其余均要求单向搅拌，B正确；该实验中有多次过滤，第一次是用1～2层纱布过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，收集含有DNA的滤液，第二次是用3～4层纱布过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液，获得含DNA的黏稠物，第三次是在DNA初步提纯时用2层纱布过滤得到含有DNA的滤液，C正确；DNA在质量浓度为2mol/L的NaCl溶液中的溶解度较高，实验中有3次加入2 mol/L的NaCl溶液，均是为了溶解DNA，D正确。
31．C
【解析】DNA的粗提取过程中，第一次用1～2层纱布过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞溶液，其目的是得到含核物质（DNA）的滤液；DNA在质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶解度中的最低，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出，因此第二次用3～4层纱布过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液，其目的是得到纱布上的黏稠物；纱布上的黏稠物用2 mol/L的氯化钠溶液溶解后再进行第三次过滤，其目的是初步提纯DNA，得到含DNA的滤液。综上所述， A、B、D三项均错误，C项正确。
32．B
A、通过控制发酵温度，可抑制其它微生物的生长繁殖，A正确；
B、果酒和果醋是利用的胞内酶，而腐乳主要是利用的毛霉的胞外酶，B错误；
C、果酒、果醋发酵的培养基呈液态而腐乳发酵培养基呈固态，C正确；
D、一般工业上是采用人工接种优良菌株而提高产品质量的，D正确．
33．B
【解析】在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要添加NaCl，以提供无机盐，A项错误；盐析不改变蛋白质的空间结构，B项正确；在腐乳制作过程中，装瓶时需逐层加入NaCl，且随层数的增高增加盐量，C项错误；哺乳动物的成熟红细胞在0.9%的NaCl溶液可以保持正常形态，不会破裂，D项错误。
34． C
A、乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质不同的，硝化细菌利用的碳源是二氧化碳，A错误；
B、氮源可以作为细菌的能源物质，B错误；
C、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，也可能是不用氮源的自生固氮菌，C正确；
D、琼脂是凝固剂，加入液体培养基后，制成固体培养基，有利于微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，D错误．
35 D
A、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，A错误；
B、接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；
C、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确．
36．C
A、在探究果胶酶的用量实验中，参照研究温度和pH对酶活性的影响实验，采用梯度测定法，只是将原实验中的pH梯度和温度梯度改成酶的用量梯度而已，基本实验思路不变，A正确；
B、植物、霉菌、酵母菌和细菌在其生活过程中，都会发生分解果胶的过程，因此，它们都可产生果胶酶，B正确；
C、在使用梯度测定酶的用量及活性时，可以通过榨出的苹果汁的体积大小来判断，C错误；
D、在制作果汁过程中，由于果胶、纤维素的存在，影响榨出的果汁量及果汁的透明度，加入纤维素酶和果胶酶后，果汁榨出量及透明度均有提高，D正确．
第Ⅱ卷（非选择题 共46分）
二、填空题（共5题，各题的每空均为2分，共46分）
37． （每空2分，共8分）
（1）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖
（2） 缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而受抑制
（3） 空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30〜35℃ C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O
【解析】试题分析：参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
（1）酿酒初期通气的目的是让其进行有氧呼吸，产生更多的酵母菌。
（2）在酿制银杏养生酒时，不需要对蓝莓进行严格的消毒以除去杂菌，这是因为在缺氧、呈酸性条件下，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。
（3）由于空气中含有醋酸菌，在有氧条件和高温下能够利用果酒产生果醋，所以银杏酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，果酒产生果醋的方程式为：C2H5OH+O2→CH3COOH+ H2O。
38．（每空2分，共6分）
（1）不能 乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物
（2）乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈
【分析】
制作泡菜时需要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得泡菜呈现特殊的风味。乳酸菌的代谢类型为异养厌氧性，因此培养乳酸菌时需要提供有机碳源并且隔绝氧气；乳酸菌经过发酵可产生乳酸，乳酸会与碳酸钙反应而使加入碳酸钙的培养基出现透明圈反应。
【详解】
（1）由于乳酸菌为异养生物，只能利用含碳有机物，因此培养基中的(NH4)2CO3不能为乳酸菌提供碳源。
（2）纯化培养乳酸菌时，可采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。由于乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，因此为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙。
39.（每空2分，共12分）
（1）涂布法 敏感 绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱（合理给分） 杂菌污染 抗比阿培南的绿脓杆菌（或绿脓杆菌产生耐药性突变）形成的菌落
（2）美罗培南
【分析】
（1）取单菌落稀释后，可用涂布法将菌均匀地涂布在培养基表面。抗生素对绿脓杆菌有抑制作用，由题干可知，含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，说明绿脓杆菌对上述抗生素均敏感，被抑制后产生透明圈。透明圈的大小可以衡量抑制作用的强弱。含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性相对于美罗培南来讲更弱，因此抑制效果也较弱。含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，表明上述两种抗生素对于绿脓杆菌的抑制性很弱。原因可能是该菌落为抗比阿培南的绿脓杆菌，或绿脓杆菌产生了抗药性突变，也可能是被杂菌污染，该杂菌对比阿培南不敏感。
（2）根据上述结果可知，美罗培南对于绿脓杆菌的抑制能力最强，因此可作为感染绿脓杆菌患者治疗的首选抗生素。
40.（每空2分，共10分）
（1） 酶即能与反应物接触，又容易与产物分离，且能反复利用 多酶系统（一系列、多种酶）
（2）海藻酸钠 C包埋法
（3）洗衣粉中的蛋白酶会将丝绸及羊毛衣物中的蛋白质成分水解，损坏衣物
【解析】试题分析：固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
（1）在实际生产中，固定化酶技术的优点是酶既容易与反应物接触，又容易与产物分离，固定在载体上的酶能反复利用；与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是多酶系统（或一系列酶、多种酶）。
（2）制备固定化酵母细胞，由于细胞体积大，难以被吸附或结合，多采用包埋法，即图中C方法，常用的载体是海藻酸钠。
（3）洗衣粉中的蛋白酶会将丝绸及羊毛衣物中的蛋白质成分水解，损坏衣物，所以一般不能用加酶洗衣粉洗涤丝绸及羊毛衣物。
41．（每空2分，共10分）
（1）尿素作为唯一的氮源 酚红
（2）45
（3） 4.96×107 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
解答 解：（1）分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用尿素作为唯一氮源的选择培养基，尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定．
（2）若取土样5g，应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上．
（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30 到300之间的平板，分析表格是数据可知，105的稀释度平板菌落数在这一范围．每克土壤中的菌落数为248×10×105÷5=4.96×107．
纯化菌种和统计某活菌的数目时，计数方法一般有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少．
期中考试试题
考生注意：本试题分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷，共10页，41题。满分100分，考试时间为90分钟。
第Ⅰ卷（54分）
一、单选题（下列各题的备选答案中只有一个选项是正确的。共36小题，每题1.5分，共54分）
1．制作果酒、果醋两个实验的共同点是（ ）
A．菌种为异养原核生物
B．将原料灭菌后再发酵
C．保证无氧环境下发酵
D．发酵液最终呈现酸性
2．下列有关生物技术的叙述，不正确的是( )
A．制作果醋时，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长
B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长
C．醋酸杆菌在细胞质基质中产生醋酸
D．用传统的发酵技术制葡萄酒必须添加酵母菌菌种
3．利用葡萄汁发酵生产葡萄酒，当酒精含量达到12%～16%时，发酵就停止了。下列有关解释错误的是（ ）
A．高浓度酒精对酵母菌有抑制作用
B．葡萄汁中的营养物质不足
C．发酵液中pH逐渐降低影响酶活性
D．氧气过少导致酵母菌无法进行细胞呼吸
4．关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（ ）
A．在果酒制作实验中，检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养
C．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素
D．鉴定胡萝卜素粗品的可用纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同；若样品中有杂质，则会出现不同的色素点
5．为获得优良的发酵食品，实验室在三支试管中培养了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。下图中甲、乙、丙三支试管的菌种及其发酵食品对应正确的是（ ）
A．甲试管：酵母菌—果酒、乙试管：醋酸菌—果醋、丙试管：乳酸菌—泡菜
B．甲试管：醋酸菌—泡菜、乙试管：酵母菌—果酒、丙试管：乳酸菌—果醋
C．甲试管：乳酸菌—果酒、乙试管：酵母菌—泡菜、丙试管：醋酸菌—果醋
D．甲试管：醋酸菌—果醋、乙试管：乳酸菌—泡菜、丙试管：酵母菌—果酒
6．如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（ ）
A．过程①和②都发生在细胞质基质，过程③和④都发生在线粒体中
B．只有过程①能产生还原氢，过程②③能消耗还原氢
C．过程③和④都需要氧气的参与
D．过程①～④所需的最适温度基本相同
7．下列有关于发酵技术叙述不正确的是( )
A．腐乳最外部有一层致密的皮，这层皮就是由毛霉的直立菌丝构成的
B．在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
C．长期放置的酒表面会出现一层膜，这层膜是醋酸菌在液体表面繁殖形成的
D．泡菜腌制过程中，泡菜坛表面会长出一层白膜，这层白膜是产膜酵母大量增殖形成的
8．人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是( )
A
B
C
D
食品
果酒
果醋
腐乳
泡菜
主要微生物
酵母菌
醋酸菌
毛霉
醋酸菌
制作装置或操
作步骤
9．某实验室用两种方式进行酵母菌发酵葡萄糖生产酒精。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜。实验过程中每小时测定一次两发酵罐中氧气和酒精的物质的量，记录数据并绘成如图所示的曲线。据图分析下列说法中正确的是（ ）
A．在实验结束时甲、乙两发酵罐中产生的CO2量之比为6∶5
B．甲、乙两发酵罐分别在约第5小时和第3小时无氧呼吸速率最快
C．甲发酵罐的实验结果表明在有O2存在时酵母菌无法进行无氧呼吸
D．该实验证明向葡萄糖溶液中通入的O2越多，则酒精的产量越高
10．膳食中含有少量的亚硝酸盐，其主要危害是（ ）
A．杀死细胞 B．形成致癌物，诱发基因突变
C．影响营养物质的吸收 D．在肾脏中积累
11．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是( )
①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条缝隙
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
⑥等待平板冷却 5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上
A．①②③④ B．④⑤⑥ C．③④⑤ D．①②④⑥
12．下列关于四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述，其中正确的一组是（ ）
硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
能源
氧化NH3
分解乳酸
固定N2
利用光能
C源
CO2
糖类
糖类
CO2
N源
NH3
N2
N2
代谢类型
自养需氧型
异养需氧型
异养需氧型
自养需氧型
A．硝化细菌、乳酸菌 B．乳酸菌、根瘤菌
C．根瘤菌、衣藻 D．硝化细菌、衣藻
13．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是（ ）
A．除活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法
B．在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点
C．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸
D．不能用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目
14．下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是（ ）
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B．依用途划分，该培养基属于选择培养基
C．培养基中的唯一碳源是（CH2O)，唯一氮源是NaNO3
D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH2O),再添加纤维素
15．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据
B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
16．下列关于微生物的培养和应用的叙述正确的是（ ）
A．配制培养基时应先调PH后灭菌
B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C．培养基中加入伊红—美蓝试剂，长出的菌落为大肠杆菌菌落
D．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
17．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤(深5cm左右)为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表，与此有关的叙述不正确的是（ ）
1组
2组
3组
4组
土壤处理
灭菌
不灭菌
灭菌
不灭菌
湿润
湿润
较干燥
较干燥
A．探究的问题可以是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用
B．预期结果是 1、3 组的落叶不被分解，2、4 组中的落叶被不同程度的分解
C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理
D．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理
18．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有若广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B. 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C. 在涂布平板上通过划线获得单菌落
D. 斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株
19．在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10﹣6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．下列有关叙述不正确的是（ ）
A．A同学出现这种结果的原因可能是土样不同
B．可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C．让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误
D．B选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，而C选项的没有
20．刚果红染色时，加入刚果红应在( )
①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时
A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤
21．突变型面包霉常需要在通用培养基上添加适当的氨基酸才能生长．现用两个氨基酸依赖型红色面包霉突变株a和b分别接种到下面的6种培养基上,两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长,a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长．培养基成分如下表,关于两种突变株a和b对A～J中氨基酸需求的说法正确的是（ ）
培养基
1
2
3
4
5
6
添加氨基酸
BCDE
BEFG
CFHI
DEFI
GHIJ
EHGJ
A．两种突变株对氨基酸的需求是相同的
B．两种突变株都需有G氨基酸才能生长
C．两种突变株都必须同时供应4种氨基酸才能生长
D．两种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长
22．将从种植烟草的土壤里分离得到的尼古丁（C10H14N2）降解菌株SC接种到尼古丁培养基中，30℃摇床培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如下图所示。下列分析错误的是（ ）
A．分离SC时可用稀释涂布平板法或平板划线法
B．培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量
C．影响SC种群密度变化的主要因素是O2浓度和PH
D．发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源
23．下列关于“酵母细胞的同定化技术”实验的叙述，正确的是（ ）
A.活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B.配制CaCl2溶液时，需要边小火加热边搅拌
C.将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出
D.以海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
24．下图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果，下列有关叙述中，错误的是（ ）
A．本研究的自变量有温度和洗衣粉是否加酶
B．本研究的因变量可能是污渍残留量
C．两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1
D．温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活
25．目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是（ ）
A．洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用
B．加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境
C．固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性
D．酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用
26．下列关于酶技术应用的叙述，正确的是（ ）
A．用包埋法将果胶酶固定化后，其活性明显增强
B．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
C．较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下
D．高温易使酶失活，因此冷水洗涤去污效果应该比温水好
27．煮练酶是一种生物复合酶，它由淀粉酶、果胶酶、脂肪酶和木质素酶等多种蛋白酶组成，能高效、彻底地分解存在于纤维中的共生物和其他杂质，常用来处理织物，而且处理后织物手感光滑柔软。下列叙述正确的是（ ）
A．低温下煮练酶的活性降低是因为酶的空间结构遭到了破坏
B．向煮练酶中加入双缩脲试剂水浴加热后会产生砖红色沉淀
C．煮练酶中的淀粉酶会将纤维共生物中的淀粉分解成葡萄糖
D．煮练酶在织物处理上的应用利用了生物酶的专一性和高效性
28．下列关于酶制剂和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，正确的是（ ）
A. 从酶的固定方式看，吸附法比交联法对酶活性影响大
B. 可以用包埋法将各种消化酶固定化形成多酶片，并口服使用
C. 探究不同加酶洗衣粉洗涤效果的实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量
D. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂不能以口服方式给药
29．下列广告语中，在科学性上有明显错误的是（ ）
①某儿童酱油专为健康研制，不仅可以起到调味作用，还可以补充能量
②某高浓度果汁饮料美味可口，可大量补充体内水分，非常解渴
③某加酶洗衣粉能有效去除奶渍、血渍等污渍，让家庭主妇的洗衣烦恼一扫光
④某嫩肉粉内含蛋白酶，可对肉中蛋白质进行部分水解，使肉制品嫩而不韧、味美鲜香
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
30．下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验操作的说法中，有误的是（ ）
A．该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNA
B．该实验操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌
C．该实验中有多次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关
D．实验中有3次加入NaCl溶液，均是为了溶解DNA
31．DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤：①过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞溶液；②过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液；③过滤含DNA的2mol/L的NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得 （ ）
A．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、含DNA的滤液
B．含核物质的滤液、滤液中的黏稠物、纱布上的黏稠物
C．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
D．含较纯的DNA的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
32．下列有关果酒、果醋和腐乳制作实验的叙述，错误的是（ ）
A. 通过控制发酵温度，可抑制其它微生物的生长繁殖
B. 都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品
C. 果酒、果醋发酵的培养基呈液态而腐乳发酵培养基呈固态
D. 都可以通过人工接种菌种提高产品质量
33．下列有关NaCl在生物技术实践中的应用，正确的是（ ）
A．在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需加入琼脂，不需要添加NaCl
B．蛋白质在NaCl溶液中析出时，其结构未发生改变
C．在腐乳制作过程中，装瓶时需逐层等量加入NaCl，以防杂菌污染
D．将哺乳动物的成熟红细胞浸泡于0.9%的NaCl溶液中，用以制备纯净的细胞膜
34．细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖．下列与此有关的说法正确的是（ ）
A. 乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B. 氮源不可能作为细菌的能源物质
C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌
D. 琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质
35．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345，下列说法中正确的是（ ）
A. 操作前要将接种环放在酒精灯旁灼烧灭菌
B. 划线操作须在火焰上方进行
C. 只有在5区才可以得到所需菌落
D. 在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
36．下列说法不正确的是（ ）
A. 在探究温度、pH和果胶酶用量的实验中，虽然实验的变量发生了变化，但通过设置梯度来确定最适值的思想方法是不变的
B. 植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶
C. 通过测定滤出的苹果汁的体积大小无法来判断果胶酶活性的高低
D. 人们可以使用果胶酶、纤维素酶等来解决制作果汁面临的出汁率低、浑浊等问题
第Ⅱ卷（非选择题 共46分）
二、填空题（共5题，各题的每空均为2分，共46分）
37．（每空2分，共8分）银杏养生酒以高粱和银杏叶提取的杏黄酮为主要原料，加上锁阳、肉苁蓉等中药材酿制而成，具有抗癌、防衰老等多种性能，非常适宜中老年人和有心脑血管疾病的人群饮用。请回答下列问题：
（1）在酿制银杏酒的初期时一般要先通气，其目的是_______________________。
（2）在酿制银杏养生酒时，一般不需要对高粱、银杏叶等进行严格的消毒处理，这是因为_________________________________________________________________。
（3）制作成功的银杏酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此。分析其原因是_____________。写出该过程发生的反应式_________________。
38.（每空2分，共6分）乳酸菌和我们的生活紧密相连，现欲从泡菜滤液中分离乳酸菌。请回答下列相关问题。
（1）要纯化培养乳酸菌，在配制固体培养基时，除了要加入各种营养物质外，一般还要加入琼脂。培养基中的(NH4)2CO3______（能/不能）为乳酸菌提供碳源 ，原因是______________。
（2）为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，原因是___________________。
39.（每空2分，共12分）烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
（1）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用____________法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_________；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明________________；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是_____________，二是______________。
（2） 根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素____________。
40.（每空2分，共10分）在20世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了20世纪70年代，人们又发明了固定化酶和固定化细胞技术。请回答下列有关固定化酶和固定化细胞方面的问题：
（1）在实际生产中，固定化酶技术的优点是____________________________________；与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是_____________。
（2）制备固定化酵母细胞常用的包埋材料是__________，使用了如图所示的方法[ ]______（填图号及名称）。
（3）为什么一般不能用加酶洗衣粉洗涤丝绸及羊毛衣物？____________________________。
41．（每空2分，共10分）自然界中的微生物往往是混杂生长的．人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定．下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题．
（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_____________________的培养基进行分离，这种培养基属于选择培养基培养基（按功能分类）．也可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别．
（2）若取土样5g，应加入______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液．将103～107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板．这种接种方法称为稀释涂布平板法．
（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中105倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为______________．这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_____________________________
稀释倍数
103
104
105
106
107
平均菌落数（个）
＞500
367
248
26
15
参考答案
第Ⅰ卷（54分）
一、单选题（下列各题的备选答案中只有一个选项是正确的。共36小题，每题1.5分，共54分）
1．D
考查制作果酒、果醋的原理及过程。
【详解】
A、制作果酒、果醋的实验所用菌种分别为酵母菌、醋酸菌，其中醋酸菌属于细菌，为原核生物，而酵母菌属于真菌，为真核生物，错误；
B、这两个实验都利用了自然界中的菌种（即原料上携带的菌种），不能将原料灭菌，否则将无法实现发酵，错误；
C、制作果醋时所用的醋酸菌属好氧细菌，即制作果醋需在有氧环境下发酵；酒精发酵和乳酸发酵在无氧的环境下发酵，错误；
D项，利用酵母菌发酵制作果酒时会产生，会使发酵液呈酸性；果醋制作时，生产出的果醋呈酸性，导致发酵液最终呈酸性，正确。
2．D
【解析】醋酸菌是好氧菌，因此在果醋发酵过程中，必须向发酵装置不断地补充无菌空气，以保证醋酸菌的生长，A正确；制作腐乳时，盐的作用是使豆腐块变硬，防止酥烂，同时抑制杂菌生长，B正确；醋酸杆菌是一种细菌，属于原核细胞，没有线粒体等多种复杂的细胞器，其在细胞质基质中产生醋酸，C正确；用传统的发酵技术制葡萄酒时，利用的是果皮上的野生酵母菌，不需要添加酵母菌菌种，D错误。
3．D
参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：
在有氧的条件下，其反应式：C6H12O6（葡萄糖）+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量
在无氧的条件下，其反应式：C6H12O6（葡萄糖）2CO2+ 2C2H6O+能量
【详解】
高浓度酒精可使酵母菌的相关蛋白质变性，对酵母菌产生毒害作用，A正确；果酒发酵的底物是葡萄糖，葡萄汁中的营养物质不断被消耗，不足以维持反应继续进行，B正确；酒精发酵产物CO2不断积累，CO2溶于水呈酸性，造成pH值下降，使酵母菌体内的酶活性降低，C正确；酒精发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸，不需要氧气参与，D错误。故选D。
【点睛】
本题考查果酒的制作，掌握参与果酒制作的微生物及其代谢类型是准确判断各选项的关键。
4．A
酒精与酸性重铬酸钾溶液反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测酒精；分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红；萃取法提取出的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行分离和鉴定，利用的原理是色素在层析液中的溶解度不同，彼此分离的扩散速度不同，胡萝卜素扩散速度最快。
【详解】
在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入3mol/L的硫酸3滴，混匀后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察到橙色的重铬酸钾变成灰绿色，A错误；在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养，B正确；检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功，C正确；检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带），D正确。
【点睛】
易错点：酒精的检测方法是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入3mol/L的硫酸3滴，混匀后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察到橙色的重铬酸钾变成灰绿色。
5．D
【解析】醋酸菌是好氧菌,分布在试管上层,用于制醋，为试管甲；乳酸菌是厌氧菌,分布于试管下层,用于泡菜发酵，为试管乙；酵母菌是兼性厌氧型,有氧无氧都能生存,在试管中分布均匀,用于果酒制作，为试管丙。
6．C
据图分析，过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，过程④是果醋制作。果醋发酵的微生物是醋酸菌，条件是30-35℃，持续通入无菌空气，代谢类型是异养需氧型；果酒发酵的微生物是酵母菌，条件是18-25℃，初期通入无菌空气，进行有氧呼吸大量繁殖，后期密封，无氧呼吸产生酒精，代谢类型是异养兼性厌氧型。
【详解】
据图分析，过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，场所都是细胞质基质；过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，场所在酵母菌的线粒体；过程④是果醋制作，场所在醋酸菌的细胞质中，A错误；过程①是细胞呼吸的第一阶段，会产生[H]；过程②是无氧呼吸的第二阶段，会消耗[H]；过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，其中第二阶段产生大量的[H]，而第三阶段消耗[H]，B错误；过程③是酵母菌的有氧呼吸，过程④是醋酸菌的有氧呼吸，都需要氧气的参与，C正确；过程①②③是酵母菌的呼吸作用，所需的最适温度基本相同（18～25℃），过程④是醋酸菌的酿醋过程，所需的最适温度在30～35℃，D错误。
【点睛】
正确分析题图中①-细胞呼吸第一阶段、②-有氧呼吸二三阶段、③-无氧呼吸二阶段、④-醋酸发酵等四个过程是分析判断本题的关键。
7．A
【解析】腐乳外部有一层致密的“皮”是前期发酵时毛霉在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害．它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形，A错误；在氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B正确；长期放置的酒表面会出现一层膜，这层膜是醋酸菌在液体表面繁殖形成的，C正确；泡菜腌制过程中，泡菜坛表面会长出一层白膜，这白膜是产膜酵母大量增殖形成的，D正确。
8．B
【解析】该装置中液体太满，发酵液会从导管溢出发酵瓶中不需要插入温度计，A错误；醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，B正确；腐乳制作过程先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，C错误；制作泡菜的原理是乳酸菌发酵，而不是醋酸菌，D错误。
【点睛】解答本题的关键是了解在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，这样才可以提高产量。
9．B
【解析】
试题分析：当酵母菌进行需氧呼吸时，根据需氧呼吸的反应式可知，消耗1molO2可产生1molCO2；当酵母菌进行厌氧呼吸时，根据反应式可知，生成1mol酒精的同时产生1molCO2；再结合曲线图可以计算出，实验结束时甲发酵罐中的CO2量为6＋18＝24 （mol），乙发酵罐中的CO2量为15mol，因此实验结束时甲、乙两发酵罐中产生的CO2量之比为8∶5，故A错误。酵母菌厌氧呼吸的速率最快，即产生酒精的速率最快，结合图示可知曲线的斜率最大时酒精产生的速率最快，甲、乙两发酵罐中产生酒精的速率最快时分别约为第5小时和第3小时，故B正确。从图中曲线可知，甲发酵罐中约在第2小时开始产生酒精，而O2约在第4小时才被消耗完，故C错误。当O2达到一定浓度时，酵母菌不再进行厌氧呼吸，而酵母菌只有进行厌氧呼吸才能产生酒精，故D错误。
考点：光合作用与细胞呼吸综合辨析
10．B
【解析】
试题分析：亚硝酸盐的危害：当摄入总量较多时，可引起中毒或死亡。在特定条件（适宜pH、温度和微生物作用）下，亚硝酸盐可以转变成致癌物质——亚硝胺；所以选B。
考点：泡菜的制作
【名师点睛】亚硝酸盐与人体健康的关系
①微生物在特定条件下可把食物中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，食用后导致人体红细胞内的亚铁血红蛋白被氧化成高价铁血红蛋白，使血红蛋白失去携带氧气的能力，导致缺氧性中毒症状。
②膳食中绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出，但当摄入总量较多时，可引起中毒或死亡。
③亚硝酸盐在一定条件下可转化为致癌、致畸和致突变的物质——亚硝胺。
11．C
【解析】①培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温防止杂菌污染，③正确；④用左手的拇指和食指打开皿盖，④正确；⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误；综上所述，选C。
12．D
【解析】试题分析：硝化细菌属于细菌，能氧化NH3，属于自养需氧型生物，正确。乳酸菌能源应是有机碳源，错误。根瘤菌能源应是糖类等有机物，错误。衣藻属于真核生物，能进行光合作用，正确。D正确。
考点：微生物的培养
13．D
【解析】本题考查培养基对微生物的筛选与微生物的分离计数，要求考生明确利用选择培养基可对微生物进行筛选，利用平板划线法或稀释涂布平板法可进行微生物分离，利用稀释涂布平板法可测定土壤溶液中某活菌数目。
除活菌计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，A正确；在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点，B正确；在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸，C正确；可用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目，D错误。
14．D
【解析】分析表格信息可知，因配方中没有凝固剂琼脂，所以依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A项正确；因配方中有青霉素，所以依用途划分，该培养基属于选择培养基，B项正确；培养基中的唯一碳源是（CH2O)，唯一氮源是NaNO3，C项正确；若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH2O)和青霉素，再添加纤维素，D项错误。
【点睛】本题以“微生物的培养基配方”为情境，综合考查学生对微生物的营养、培养基的分类和应用等相关知识的识记和理解能力。正确解答此题，需以“培养基的成分”为切入点，从中抽提出有效信息：该配方中有青霉素、但没有凝固剂琼脂、含碳元素的物质只有（CH2O)、含氮元素的物质只有NaNO3、将其与“所学相关知识”有效地联系起来，进行知识的整合和迁移，并与分离纤维素分解菌的知识建立联系。
15．A
【解析】菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据，但是有无荚膜通过肉眼无法观察，A错误； 鉴别培养基属于固体培养基，可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型，B正确； 当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，C正确； 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌，D正确。
【点睛】注意：菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征；不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的；这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。
16．A
本题考查培养基配置的步骤，选择培养基与鉴别培养基的区别等。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板六个步骤。选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐）。鉴别培养基：是加入一些化学物质，微生物的代谢产物等可以和这种物质发生反应，产生明显的变化，以便鉴别和筛选某种微生物。
【详解】
配制培养基应先调pH再进行灭菌，否则会被再次污染，A正确；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，在培养基中加入青霉素可抑制细菌而促进真菌生长，B错误；伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，利用伊红—美蓝固体培养基可以鉴定大肠杆菌是否存在，C错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，D错误；故选A。
17．D
根据题意和图表分析可知：该实验的自变量是土壤湿润条件和是否灭菌，4个实验组相互对照；落叶上面也有微生物，也可以分解落叶，所以也应该进行灭菌处理；因为1、3组土壤灭菌后，土壤中微生物被杀灭，无法分解落叶，2、4组没有灭菌，存在微生物，因其土壤的湿润条件不同，分解的落叶量也不相同。
【详解】
实验组2组合4组可以形成对照，变量是土壤的湿润程度，来研究土壤微生物对落叶的分解作用，A正确；1组和3组由于没有微生物，落叶不被分解，2组和4组由于有微生物，落叶不同程度的被分解，B正确；为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理，消除微生物的影响，C正确；该实验的变量有两个，一个是灭菌、不灭菌，一个是湿润、不湿润．自变量是灭菌、不灭菌，在湿润条件下1、2形成对照，在干燥条件下3、4形成对照，所以1、3分别是两组对照实验的对照组，D错误。
【点睛】
注意：本题实验中涉及两个自变量（土壤湿润条件和是否灭菌），因变量是土壤微生物对落叶的分解作用。
18． B
A、生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A错误；
B、筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，B正确；
C、在涂布平板上长出的菌落，可以通过连续划线或稀释涂布平板法进一步纯化，C错误；
D、斜面培养基中含有大量营养物，可在低温下长期保存菌株，D错误。
故选：B。
19．D
【解析】甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，A正确；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B正确；如果是A同学实验操作过程中污染造成的，让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而C选项的也有对照实验，D错误。
【点睛】本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化学生微生物实验操作遵循的原则及其运用，生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。
20．C
【解析】常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行染色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。所以选C。
【考点定位】培养基对微生物的选择利用
21．D
【解析】根据题意知，a突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但可以在2、4培养基上生长，说明a生长需要E、F两种氨基酸；b突变株不能在1、3、5号培养基上生长，但可以在2、6培养基上生长，说明b生长需要E、G 两种氨基酸，所以两种突变株都能在由4、5号的混合培养基中生长。综上分析，A、B、C三项均错误，D项正确。
【点睛】解答此题的关键是抓住“两种突变株都不能在1、3、5号培养基上生长,a、b可以分别在2、4和2、6号培养基上生长”这一解题的切入点，采取对比法，找出各培养基中添加的氨基酸种类的异同，以此进行知识的整合和迁移。
22．C
【解析】
【分析】
微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
分析曲线可知，曲线中SC菌体的种群数量呈S型曲线增长，培养36h时SC的数量达到K值。
【详解】
微生物分离可使用稀释涂布平板法或平板划线法，A正确；曲线中SC菌体的种群数量呈S型曲线增长，培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量，B正确；培养过程中“30℃摇床培养”，因此氧气浓度不是限制因素，影响SC种群密度变化的主要因素尼古丁含量，C错误；根据尼古丁的分子式可知，发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源，D正确。
【点睛】
分析关键：要善于抓主题干中有效信息进行分析，如摇床培养，说明培养液中不缺乏氧气；从曲线中可得，培养36h时SC的数量达到K值；从尼古丁的分子式中得知它能提供糖原和氮源。
23．A。
A、活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合可使干酵母吸水，代谢加快，恢复活性，A正确；
B、配制CaCl2溶液时，不需进行加热，B错误；
C、溶液使酵母细胞可以形成稳定的结构，固定在凝胶珠中，需要一段时间，时间不宜过短或过长，C错误；
D、CaCl2如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠颜色过浅，所包埋的酵母细胞数目较少；如果海藻酸钠浓度过高，凝胶珠不易成形，D错误。
24．C
【解析】据图分析，本研究的自变量有温度和洗衣粉的种类（洗衣粉是否加酶），A正确；从曲线的变化趋势可以判断，本研究的因变量可能是污渍残留量，B正确；据图分析，加酶洗衣粉的最佳使用温度是t1，普通洗衣粉的增加使用温度是t2，C错误；温度超过t2后加酶洗衣粉的洗涤效果与普通洗衣粉相同，可能是其中的酶可能失活，D正确
25．C
【解析】因为绝大多数酶是蛋白质,对表面活性剂、高温、强酸、强碱条件非常敏感,甚至会失去活性，A错误；为减少对环境的污染,用加酶洗衣粉取代普通洗衣粉,从而减少P对环境的污染，B错误；固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上,实现酶的反复利用,但固定时可能使酶的结构产生变化,从而改变酶的催化活性，所以C选项是正确的；绝大多数酶是蛋白质,不需要供给任何营养物质,只要条件适宜,就能发挥催化功能，D错误。
26．C
【解析】用包埋法将果胶酶固定化后，果胶酶可以多次重复利用，其活性并未增强，A错误；尿糖试纸是用来鉴定尿液中是否含有葡萄糖，只能使用一次，B错误；低温能降低酶的活性，而酶的空间结构保持稳定，因此，较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下，C正确；度过高酶容易失去活性，但是温度过低酶的活性降低，冷水洗涤去污效果应该比温水差，D错误。
27．D
【解析】低温条件下酶的活性降低，但是空间结构不变，A错误；双缩脲试剂能与蛋白质发生紫色反应，反应条件为常温下，B错误；淀粉酶能将淀粉分解成麦芽糖，而不能分解成葡萄糖，C错误；煮练酶中的各种酶催化分解的底物不同，具有专一性和高效性，D正确。
28．C
A、酶的固定方法通常有化学结合和物理吸附，前者可能引起酶分子结构发生改变而改变酶的活性，后者则不会，A错误；
B、酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，因此不一般不用包埋法固定化酶，B错误；
C、探究加酶洗衣粉洗涤效果时实验中，洗涤方式、水温、浸泡时间等都属无关变量，C正确；
D、消化酶在消化道内起作用，则蛋白酶制剂以口服方式给药D错误．
29．A
【解析】
【分析】
本题结合广告语，考查了与日常生活密切相关的生物学常识，意在考查学生运用所学的生物学知识解决相关的生物学问题的能力。
【详解】
酱油的主要成分是谷氨酸钠及氯离子、钠离子，只能起到调味作用，不能补充能量，①错误；饮用高浓度果汁饮料后，可使体内细胞外液的渗透压升高，刺激下丘脑渗透压感受器，进而引起大脑皮层的渴感中枢兴奋，产生渴感，②错误；加酶洗衣粉主要含有脂肪酶、蛋白酶，能有效去除奶渍、血渍等污渍，让家庭主妇的洗衣烦恼一扫光，③正确；某嫩肉粉内含蛋白酶，可对肉中蛋白质进行部分水解，使肉制品嫩而不韧、味美鲜香，④正确。
故选A。
30．A
【解析】实验中两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质（DNA），第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA，A错误；该实验操作中多次用到搅拌，最后一步搅拌是在DNA鉴定时，未强调搅拌方向，其余均要求单向搅拌，B正确；该实验中有多次过滤，第一次是用1～2层纱布过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，收集含有DNA的滤液，第二次是用3～4层纱布过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液，获得含DNA的黏稠物，第三次是在DNA初步提纯时用2层纱布过滤得到含有DNA的滤液，C正确；DNA在质量浓度为2mol/L的NaCl溶液中的溶解度较高，实验中有3次加入2 mol/L的NaCl溶液，均是为了溶解DNA，D正确。
31．C
【解析】DNA的粗提取过程中，第一次用1～2层纱布过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞溶液，其目的是得到含核物质（DNA）的滤液；DNA在质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶解度中的最低，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出，因此第二次用3～4层纱布过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液，其目的是得到纱布上的黏稠物；纱布上的黏稠物用2 mol/L的氯化钠溶液溶解后再进行第三次过滤，其目的是初步提纯DNA，得到含DNA的滤液。综上所述， A、B、D三项均错误，C项正确。
32．B
A、通过控制发酵温度，可抑制其它微生物的生长繁殖，A正确；
B、果酒和果醋是利用的胞内酶，而腐乳主要是利用的毛霉的胞外酶，B错误；
C、果酒、果醋发酵的培养基呈液态而腐乳发酵培养基呈固态，C正确；
D、一般工业上是采用人工接种优良菌株而提高产品质量的，D正确．
33．B
【解析】在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需要添加NaCl，以提供无机盐，A项错误；盐析不改变蛋白质的空间结构，B项正确；在腐乳制作过程中，装瓶时需逐层加入NaCl，且随层数的增高增加盐量，C项错误；哺乳动物的成熟红细胞在0.9%的NaCl溶液可以保持正常形态，不会破裂，D项错误。
34． C
A、乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质不同的，硝化细菌利用的碳源是二氧化碳，A错误；
B、氮源可以作为细菌的能源物质，B错误；
C、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，也可能是不用氮源的自生固氮菌，C正确；
D、琼脂是凝固剂，加入液体培养基后，制成固体培养基，有利于微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，D错误．
35 D
A、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，A错误；
B、接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；
C、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确．
36．C
A、在探究果胶酶的用量实验中，参照研究温度和pH对酶活性的影响实验，采用梯度测定法，只是将原实验中的pH梯度和温度梯度改成酶的用量梯度而已，基本实验思路不变，A正确；
B、植物、霉菌、酵母菌和细菌在其生活过程中，都会发生分解果胶的过程，因此，它们都可产生果胶酶，B正确；
C、在使用梯度测定酶的用量及活性时，可以通过榨出的苹果汁的体积大小来判断，C错误；
D、在制作果汁过程中，由于果胶、纤维素的存在，影响榨出的果汁量及果汁的透明度，加入纤维素酶和果胶酶后，果汁榨出量及透明度均有提高，D正确．
第Ⅱ卷（非选择题 共46分）
二、填空题（共5题，各题的每空均为2分，共46分）
37． （每空2分，共8分）
（1）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖
（2） 缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而受抑制
（3） 空气中含有醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30〜35℃ C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O
【解析】试题分析：参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
（1）酿酒初期通气的目的是让其进行有氧呼吸，产生更多的酵母菌。
（2）在酿制银杏养生酒时，不需要对蓝莓进行严格的消毒以除去杂菌，这是因为在缺氧、呈酸性条件下，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。
（3）由于空气中含有醋酸菌，在有氧条件和高温下能够利用果酒产生果醋，所以银杏酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，果酒产生果醋的方程式为：C2H5OH+O2→CH3COOH+ H2O。
38．（每空2分，共6分）
（1）不能 乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物
（2）乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈
【分析】
制作泡菜时需要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得泡菜呈现特殊的风味。乳酸菌的代谢类型为异养厌氧性，因此培养乳酸菌时需要提供有机碳源并且隔绝氧气；乳酸菌经过发酵可产生乳酸，乳酸会与碳酸钙反应而使加入碳酸钙的培养基出现透明圈反应。
【详解】
（1）由于乳酸菌为异养生物，只能利用含碳有机物，因此培养基中的(NH4)2CO3不能为乳酸菌提供碳源。
（2）纯化培养乳酸菌时，可采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。由于乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，因此为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙。
39.（每空2分，共12分）
（1）涂布法 敏感 绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱（合理给分） 杂菌污染 抗比阿培南的绿脓杆菌（或绿脓杆菌产生耐药性突变）形成的菌落
（2）美罗培南
【分析】
（1）取单菌落稀释后，可用涂布法将菌均匀地涂布在培养基表面。抗生素对绿脓杆菌有抑制作用，由题干可知，含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，说明绿脓杆菌对上述抗生素均敏感，被抑制后产生透明圈。透明圈的大小可以衡量抑制作用的强弱。含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性相对于美罗培南来讲更弱，因此抑制效果也较弱。含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，表明上述两种抗生素对于绿脓杆菌的抑制性很弱。原因可能是该菌落为抗比阿培南的绿脓杆菌，或绿脓杆菌产生了抗药性突变，也可能是被杂菌污染，该杂菌对比阿培南不敏感。
（2）根据上述结果可知，美罗培南对于绿脓杆菌的抑制能力最强，因此可作为感染绿脓杆菌患者治疗的首选抗生素。
40.（每空2分，共10分）
（1） 酶即能与反应物接触，又容易与产物分离，且能反复利用 多酶系统（一系列、多种酶）
（2）海藻酸钠 C包埋法
（3）洗衣粉中的蛋白酶会将丝绸及羊毛衣物中的蛋白质成分水解，损坏衣物
【解析】试题分析：固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
（1）在实际生产中，固定化酶技术的优点是酶既容易与反应物接触，又容易与产物分离，固定在载体上的酶能反复利用；与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是多酶系统（或一系列酶、多种酶）。
（2）制备固定化酵母细胞，由于细胞体积大，难以被吸附或结合，多采用包埋法，即图中C方法，常用的载体是海藻酸钠。
（3）洗衣粉中的蛋白酶会将丝绸及羊毛衣物中的蛋白质成分水解，损坏衣物，所以一般不能用加酶洗衣粉洗涤丝绸及羊毛衣物。
41．（每空2分，共10分）
（1）尿素作为唯一的氮源 酚红
（2）45
（3） 4.96×107 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
解答 解：（1）分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用尿素作为唯一氮源的选择培养基，尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定．
（2）若取土样5g，应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上．
（3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30 到300之间的平板，分析表格是数据可知，105的稀释度平板菌落数在这一范围．每克土壤中的菌落数为248×10×105÷5=4.96×107．
纯化菌种和统计某活菌的数目时，计数方法一般有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏少．
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