【生物】广东省潮州市2018-2019学年高二下学期期末考试试题(解析版)
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一、选择题
1.下列有关细胞的物质与结构的说法不正确的是
A. 内质网是细胞内脂质合成的“车间”
B. 细胞骨架是由蛋白质组成的网架结构
C. 硝化细菌产生CO2的场所是细胞质基质和线粒体
D. 胆固醇是人体细胞的正常成分,但摄入过多时也可导致疾病
【答案】C
【解析】
【分析】
细胞器之间的功能
名称 | 功能 | |
双层膜细胞器 | 线粒体 | 有氧呼吸的主要场所 |
叶绿体 | 光合作用的场所 | |
单层膜 细胞器 | 内质网 | 内质网是蛋白质合成和加工的场所;也是脂质合成的车间 |
高尔基体 | 对来自内质网的蛋白质进行加工、分类、包装和发送;在动物细胞中,高尔基体与分泌物的形成有关;在植物细胞中,高尔基体与有丝分裂中细胞壁的形成有关 | |
液泡 | 液泡内含有细胞液,可以调节植物细胞内的环境;充盈的液泡还可以使植物坚挺 | |
溶酶体 | 溶酶体内含多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器,吞噬并杀死入侵细胞的病毒或病菌 | |
无膜细胞器 | 核糖体 | 蛋白质的合成场所 |
中心体 | 一般认为中心体与细胞分裂时纺锤体的形成有关 |
【详解】A、内质网是细胞内蛋白质合成和加工,以及脂质合成的“车间”,A正确;
B、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构,B正确;
C、硝化细菌属于原核生物,无线粒体,C错误;
D、胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分,在人体内还参与血液中脂质的运输,但摄入过多时也可导致血管堵塞,D正确。
故选C。
2.下列有关生物体内的物质运输的叙述,正确的是
A. 细胞内囊泡的运输过程中存在囊泡膜与靶膜的识别,这可能与囊泡膜上的蛋白质有关
B. 氨基酸的跨膜运输和被转运到核糖体上都离不开载体蛋白
C. 蛋白质可通过核孔自由进出细胞核
D. 人体内的细胞都是通过协助扩散的方式吸收葡萄糖的
【答案】A
【解析】
【分析】
细胞膜控制小分子物质进出细胞的方式有自由扩散、协助扩散和主动运输,大分子物质可以通过胞吞和胞吐发方式进出细胞;大分子物质可以通过核孔进出细胞;高尔基体在囊泡的运输过程中起重要的交通枢纽作用。
【详解】细胞内囊泡的运输过程中存在囊泡膜与靶膜的识别,这可能与囊泡膜上的蛋白质有关,A正确;核糖体没有膜结构,氨基酸由tRNA携带进入核糖体,不需要载体蛋白的协助,B错误;大分子物质通过核孔进出细胞核是有选择性的,蛋白质并不能自由的进出细胞核,C错误;葡萄糖进入人体成熟的红细胞的方式是协助扩散,而进入小肠上皮细胞等的方式都是主动运输,D错误。
3.黑藻是一种水生植物,叶片小而薄。某同学利用黑藻进行下列生物学实验,其中错误的选项是
| 实验目的 | 所用试剂 |
A | 观察叶绿体 | 蒸馏水 |
B | 提取叶绿体色素 | 无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅 |
C | 观察质壁分离及复原 | 30%蔗糖溶液、清水 |
D | 探究CO2浓度对光合速率的影响 | 1%的 NaHCO3溶液 |
A. A B. B C. C D. D
【答案】D
【解析】
【分析】
1、叶绿体呈绿色,可在显微镜下直接观察其形态和分布。
2、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以,可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
3、细胞壁和原生质层具有一定的伸缩性,但原生质层的伸缩性大于细胞壁。当细胞液浓度<外界溶液的浓度时,细胞失水,发生质壁分离现象。当质壁分离细胞的细胞液浓度>外界溶液的浓度时,细胞吸水,发生质壁分离复原现象。
【详解】A、黒藻的叶肉细胞中含有叶绿体,叶绿体呈绿色,观察时无需染色,用蒸馏水制片即可,A正确;
B、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。提取绿叶中的色素时,加入二氧化硅有助于研磨充分,加入碳酸钙可防止色素被破坏,B正确;
C、30%蔗糖溶液可使植物细胞发生质壁分离,用清水处理观察质壁分离复原,C正确;
D、探究CO2浓度对光合速率的影响,应设置不同浓度的NaHCO3溶液,只用1%的NaHCO3不能满足梯度要求,D错误。
故选D。
【点睛】解答本题的关键是熟记相关实验的实验材料、试剂、步骤、现象、结论等。
4.非洲猪瘟病毒(ASFV)基因组为双股线状DNA,下列有关说法正确的是
A. ASFV基因组DNA两条链之间的碱基通过氢键相连构成其基本骨架
B. 若DNA分子一条链中A+T占36%,则该分子中G占32%
C. ASFV与HIV的核酸彻底水解可得到5种相同产物
D. ASFV可遗传变异的来源有基因突变、基因重组和染色体变异
【答案】B
【解析】
【分析】
据题文和选项的描述可知:该题考查学生对病毒的结构、核酸的种类与化学组成及DNA分子的结构特点、可遗传变异的来源等相关知识的识记和理解能力。
【详解】ASFV基因组DNA中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排列在外侧,构成基本骨架,A错误;若DNA分子一条链中A+T占36%,则根据碱基互补配对原则可推知:该DNA中A+T占全部碱基的36%,G+C占全部碱基的64%,且A=T、G=C,进而推知该分子中G占32%,B正确;ASFV的核酸为DNA,彻底水解的产物为磷酸、脱氧核糖和碱基A、T、C、G,HIV的核酸为RNA,彻底水解的产物为磷酸、核糖和碱基A、U、C、G,可见,ASFV与HIV的核酸彻底水解可得到4种相同产物,C错误;ASFV没有细胞结构,其可遗传变异的来源只有基因突变,D错误。
5.下列与人体生命活动调节有关的叙述,错误的是
A. 皮下注射胰岛素可起到降低血糖的作用
B. 大脑皮层受损的患者,膝跳反射不能完成
C. 婴幼儿缺乏甲状腺激素可影响其神经系统的发育和功能
D. 被病原体感染的细胞的清除是通过细胞凋亡完成的
【答案】B
【解析】
【分析】
1、胰岛素可以促进葡萄糖的吸收、利用和转化,抑制肝糖原的分解以及非糖物质转化为葡萄糖,从而降低血糖。
2、非条件反射由较低级的神经中枢(如脑干、脊髓)参与即可完成,而条件反射必须由高级神经中枢大脑皮层的参与才能完成。
【详解】A、胰岛素是唯一可以降低血糖的激素,其化学本质是蛋白质,不能口服,应静脉注射。因此,皮下注射胰岛素可起到降低血糖的作用,A正确;
B、膝跳反射为非条件反射,神经调节中枢位于脊髓,不受大脑皮层控制,故大脑皮层受损的患者,膝跳反射也可完成,B错误;
C、甲状腺激素可促进新陈代谢,加速体内物质的氧化分解,促进幼小动物的生长发育,提高神经系统的兴奋性。故婴幼儿缺乏甲状腺激素可影响其神经系统的发育和功能,C正确;
D、人体中被病原体感染的细胞和衰老细胞的清除,都需要通过细胞凋亡实现,D正确。
故选B。
【点睛】人体中被病原体感染的细胞的清除是通过细胞免疫完成,效应T细胞与靶细胞结合,激活细胞内溶酶体的酶,使靶细胞裂解死亡,属于细胞凋亡,而不是细胞坏死。
6.如图是患甲病(等位基因用A、a表示)和乙病(等位基因用B、b表示)的遗传系谱图,3号和8号的家庭中无乙病史。下列叙述与该家系遗传特性不相符合的是
A. 甲病是常染色体显性遗传病,乙病是伴X染色体隐性遗传病
B. 正常情况下5号个体的儿子可能患乙病,但不能肯定是否患甲病
C. 如果只考虑甲病的遗传,12号是杂合体的概率为1/2
D. 如果11号与无病史的男子结婚生育,无需进行产前诊断
【答案】C
【解析】
【分析】
由系谱图可知,7号、8号均患甲病,二者的女儿表现正常,说明甲病为常染色体显性遗传病。3号、4号均不患乙病,而他们的儿子患乙病,故乙病为隐性遗传病。又因为3号的家庭中无乙病史,所以乙病是伴X染色体隐性遗传病。
【详解】A、由分析可知,甲病是常染色体显性遗传病,乙病是伴X染色体隐性遗传病,A正确;
B、对系谱图分析可知,5号的基因型为aaXBXb, 其Xb染色可能会传递给其儿子,使其儿子患乙病。其儿子是否患甲病,要看5号婚配的对象是否携带甲病基因,而5号的婚配对象未知,故不能肯定其儿子是否患甲病,B正确;
C、如果只考虑甲病的遗传,7号、8号的基因型均为Aa, 12号患甲病,是杂合体的概率为2/3,C错误;
D、因为8号的家庭中无乙病史,所以11号的基因型为aaXBXB,其与无病史的男子(aaXBY)结婚生育,其子代不会患病,因此无需进行产前诊断,D正确。
故选C。
【点睛】根据口诀“无中生有显隐性,生女患病为常隐;有中生无显显性,生女正常为常显”来判断系谱图中遗传病的遗传方式是解答本题的关键。
三、非选择题
7.柱花草是我国南方地区重要的豆科牧草,对低温胁迫较为敏感,易发生冷害。下表为科研人员在不同温度下测得的柱花草叶片光合速率等相关指标。请回答下列问题:
处理 | 氧气释放速率(mmol O2/GFW·h) | 细胞内ATP含量(mmol/DW) |
对照(20℃) | 16.28 | 286.38 |
低温处理(6℃) | 3.09 | 127.67 |
高温处理(36℃) | 14.51 | 237.74 |
(1)20℃时,柱花草叶肉细胞内能产生ATP的细胞器是___________。与对照组相比,高温处理相同的时间,柱花草光合作用制造的有机物量___________(填“较多”“较少”“相等”或“无法确定”),原因是___________。
(2)根据上表分析,低温处理能抑制光合作用的原因主要包括两方面:一方面是低温导致___________结构受到破坏,使光反应阶段生成___________均减少;另一方面,低温使___________降低,从而导致暗反应速率降低。
(3)研究还发现,大气CO2浓度倍增处理柱花草15d后,柱花草的叶面积增大了47.5%,单位时间内叶肉细胞有机物积累量增加了14.7%,则大气CO2倍增处理柱花草15d后其叶肉细胞的平均光合作用速率___________(填“增大”“减小”或“不变”),理由是___________。
【答案】 (1). 线粒体、叶绿体 (2). 无法确定 (3). 不知道对照组与高温处理组柱花草的呼吸速率,因此不能确定二者光合作用制造的有机物量 (4). 类囊体薄膜 (5). ATP、[H] (6). 与暗反应有关的酶活性 (7). 减小 (8). 柱花草的叶面积增大了47.5%,但是其单位时间内叶肉细胞有机物积累量仅增加了14.7%
【解析】
【分析】
根据表格分析,该实验的自变量是温度,因变量是氧气释放速率(净光合速率)和细胞内ATP含量。与对照组相比,低温处理和高温处理下,氧气释放速率和细胞内ATP含量都下降了,但是低温处理下的氧气释放速率和细胞内ATP含量下降得更快,说明柱花草对低温胁迫更为敏感。
【详解】(1)20 ℃时,柱花草叶肉细胞的氧气释放速率大于0,说明此时细胞可以同时进行光合作用和呼吸作用,因此能够产生ATP的细胞器有线粒体和叶绿体。由于表格中的氧气释放速率代表的是净光合速率,但是并不清楚各组的呼吸速率的大小,因此无法确定在相同的处理时间内,高温处理与对照组的柱花草光合作用制造的有机物量的多少。
(2)根据表格分析,低温处理能够抑制光合作用的原因包括两点:一是低温类囊体薄膜被破坏,使得光反应生成的ATP、[H]减少;二是低温使得与暗反应有关的酶的活性降低,进而导致暗反应速率减弱。
(3)根据题意分析,柱花草的叶面积增大了47.5%,但是其单位时间内叶肉细胞有机物积累量仅增加了14.7%,说明大气CO2倍增处理柱花草15d后其叶肉细胞的平均光合作用速率反而减小了。
【点睛】解答本题的关键是根据题干信息和表格找出实验的自变量和因变量,并分析不同温度处理对柱花草叶片光合速率的影响及原因。
8.人体内环境的稳态受神经和体液调节。请回答下列问题:
(1)给实验兔静脉注射不同剂量胰岛素,测得血糖补充速率和消耗速率如图所示。请回答。
①随着曲线a的下降,非糖物质向葡萄糖转化的速率___________,当胰岛素浓度为40μU/mL时,在较长时间内血糖浓度将会___________。
②试写出酶与激素发挥作用的共同特点:___________ 。
(2)在剧烈运动过程中,尿量形成会减少,这是垂体释放的___________增加导致的。当受伤进行包扎时,运动员感到痛但并没有缩手,是因为___________对缩手反射中枢的控制,这说明神经系统具有___________调节。有人会看见流出的鲜血而导致肾上腺素增加,出现目眩心悸,调节该生理活动的方式是___________调节。
【答案】 (1). 下降 (2). 下降 (3). 高效性、特异性 (4). 抗利尿激素 (5). 大脑皮层 (6). 分级 (7). 神经—体液
【解析】
【详解】1、由题图可知,本实验的自变量是血浆胰岛素的含量,因变量是血糖含量,观测指标是血糖补充速率和血糖的消耗速率。
2、随着血浆胰岛素含量上升,组织细胞会加速摄取、利用和储存葡萄糖,即血糖消耗速率加快,故曲线b为血糖消耗速率。随着血浆胰岛素含量上升,非糖物质向葡萄糖转化的速率减慢,即血糖补充速率减慢,故a曲线为血糖补充速率。
【解答】(1)①a曲线为血糖补充速率,随着曲线a的下降,非糖物质向葡萄糖转化的速率下降。当胰岛素浓度为40μU/mL时,血糖补充速率大约1mg/kg·min,血糖消耗速率大约3.8mg/kg·min,因此在较长时间内血糖浓度将下降。
②酶与激素发挥作用的共同特点有:特异性、高效性等。
(2)在剧烈运动过程中,垂体分泌的抗利尿激素增加,导致尿量形成减少。当受伤进行包扎时,运动员感到痛但并没有缩手,是因为大脑皮层对缩手反射中枢的控制,这说明高级中枢可以调节低级中枢,即神经系统具有分级调节。有人会看见流出的鲜血而导致肾上腺素增加,出现目眩心悸,调节该生理活动的方式是神经-体液调节。
【点睛】解答本题时要避免将血糖含量、血糖的补充速率和血糖的消耗速率等3个概念混为一谈。
9.下表是湿地生态系统与其他部分生态系统碳(有机碳)储量的比较。请回答:
生态系统 | 面积/106hm2 | 单位面积碳储量/t·hm-2 | ||
植被 | 土壤 | 总计 | ||
湿地 | 350 | 43 | 643 | 686 |
热带森林 | 1755 | 121 | 123 | 244 |
北方森林 | 1372 | 64 | 343 | 407 |
苔原 | 950 | 6 | 128 | 134 |
农田 | 1600 | 2 | 80 | 82 |
(1)生态系统的功能包括___________、___________和能量流动,能量流动的特点是___________。
(2)碳循环是组成生物体的碳元素在___________之间不断循环的过程。
(3)与热带森林相比,北方森林虽然植被碳储量较小,但土壤中碳储量较高,其主要原因是___________
(4)湿地具有___________(写出1个)等作用,这体现了生物多样性的___________价值;表中生态系统抵抗力稳定性最高的是___________,原因是___________
【答案】 (1). 物质循环 (2). 信息传递 (3). 单向流动,逐级递减 (4). 无机环境与生物群落 (5). 北方气温低,土壤中微生物(分解者)的分解能力弱 (6). 蓄洪防旱(或调节气候) (7). 间接 (8). 热带森林 (9). 该生态系统的组成成分最多,营养结构最复杂
【解析】
【分析】
1、生态系统的物质循环是指组成生物体的C、H、O、N、P、S等元素,不断进行着从无机环境到生物群落,又从生物群落到无机环境的循环过程。
2、抵抗力稳定性是指生态系统抵抗外界干扰并使自身结构和功能保持原状的能力。通常生态系统的结构越复杂,其自我调节能力越强,抵抗力稳定性越强。
【详解】(1)生态系统的功能包括物质循环、信息传递和能量流动。能量流动具有单向流动,逐级递减的特点。
(2)碳循环是组成生物体的碳元素在无机环境与生物群落之间不断循环的过程。
(3)与热带地区相比,北方气温低,土壤中微生物的分解能力弱,分解的有机物少,因此,与热带森林相比,北方森林的植被碳储量较小,土壤中碳储量较高。
(4)湿地在蓄洪防旱、调节气候等方面发挥重要作用,这体现了生物多样性的湿地具有间接价值。表中热带雨林的组成成分最多,营养结构最复杂,故其生态系统抵抗力稳定性最高。
10.下面是大豆子叶颜色(BB表现深绿;Bb表现浅绿;bb呈黄色,幼苗阶段死亡)和花叶病的抗性(由R、r基因控制)遗传的实验,请据表回答以下问题:
组合 | 母本 | 父本 | F1的表现型及植株数 |
Ⅰ | 子叶深绿 不抗病 | 子叶浅 绿抗病 | 子叶深绿抗病220株;子叶浅绿抗病217株 |
Ⅱ | 子叶深绿 不抗病 | 子叶浅 绿抗病 | 子叶深绿抗病110株;子叶深绿不抗病109株;子叶浅绿抗病108株;子叶浅绿不抗病113株 |
(1)组合Ⅰ中父本的基因型是________,组合Ⅱ中父本的基因型是________。
(2)用表中F1的子叶浅绿抗病植株自交,在F2的成熟植株中,表现型的种类有______,其比例为_________________。
(3)用子叶深绿与子叶浅绿植株杂交得F1,F1随机交配得到的F2成熟群体中,B基因的基因频率为_________。
(4)将表中F1的子叶浅绿抗病植株的花粉培养成单倍体植株,再将这些植株的叶肉细胞制成不同的原生质体。如要得到子叶深绿抗病植株,需要用_______________________基因型的原生质体进行融合。
【答案】 (1). BbRR (2). BbRr (3). 子叶深绿抗病、子叶深绿不抗病、子叶浅绿抗病、子叶浅绿不抗病 (4). 3∶1∶6∶2 (5). 80% (6). BR与BR、BR与Br
【解析】
【分析】
根据表格分析,组合Ⅰ中父本为抗病,母本为不抗病,而子一代全部为抗病,说明抗病对不抗病为显性性状,且父本的基因型为BbRR,母本的基因型为BBrr;组合Ⅱ父本为抗病,母本为不抗病,而后代既有抗病,也有不抗病,说明父本的基因型为BbRr,母本的基因型为BBrr。
【详解】(1)根据以上分析已知,组合Ⅰ中父本的基因型为BbRR,组合Ⅱ中父本的基因型为BbRr。
(2)F1的子叶浅绿抗病植株基因型为BbRr,由于黄色bb幼苗阶段死亡,所以其自交产生的后代表现型种类有子叶深绿抗病、子叶深绿不抗病、子叶浅绿抗病、子叶浅绿不抗病,其比例=(1/3×3/4):(1/3×1/4):(2/3×3/4):(2/3×1/4)=3∶1∶6∶2。
(3)用子叶深绿BB与子叶浅绿植株Bb杂交,子一代为BB:Bb=1:1,子一代产生的配子中B占3/4,b占1/4,则子二代BB占9/16,Bb占6/16,bb(死亡)占1/16,所以子二代中B的基因频率=9/15+1/2×6/15=80%。
(4)表中F1的子叶浅绿抗病植株的基因型为BbRr,其花药离体培养获得的单倍体植株的基因型为BR、Br、bR、br。如要得到子叶深绿抗病(BBR_)植株,需要用基因型为BR与BR、BR与Br的原生质体进行融合。
11.中国女科学家屠呦呦由于在青蒿素研发所做的重大贡献荣获2015年诺贝尔生理医学奖。青蒿素,无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,对热不稳定,60℃以上易分解。获取途径主要是从黄花蒿中直接提取得到。根据生物相关知识,回答下列问题。
(1)提取青蒿素时,不适用水蒸气蒸馏法,原因之一是因为青蒿素对热不稳定,原因之二是____________________。
(2)若使用萃取法提取青蒿素,现有石油醚(沸点100℃)和乙醚(沸点35℃)两种溶剂,应该选用何种萃取剂并解释理由:___________________________。
(3)在进行萃取前,通常将黄花蒿茎叶进行_________和_________,以提高效率;萃取过程中应控制好_____________________,以防止青蒿素分解。萃取所得液体浓缩前需进行________________。
(4)最后用_________法对所提取物质进行鉴定,以确定是否提取到青蒿素。
【答案】 (1). 青蒿素为非挥发性物质,不能随水蒸气蒸馏出来 (2). 应该使用乙醚,因为温度高于60℃,青蒿素易分解,应选择低沸点的萃取剂 (3). 粉碎 (4). 干燥 (5). 温度和时间 (6). 过滤 (7). 纸层析法
【解析】
【分析】
青蒿素是一种无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,因此提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法,可采用有机溶剂萃取的方法;提取过程:植物材料→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→鉴定。
【详解】(1)由于青蒿素对热不稳定,且青蒿素为非挥发性物质,不能随水蒸气蒸馏出来,因此提取青蒿素时,不适宜用水蒸气蒸馏法。
(2)由于温度高于60℃时青蒿素易分解,所以应选择低沸点的萃取剂,即应该选择乙醚。
(3)为了提高提取的效率,在进行萃取前,通常将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥处理;萃取过程中应控制好温度和时间,以防止青蒿素分解;萃取所得液体浓缩前需进行过滤。
(4)青蒿素易溶于有机溶剂,不溶于水,可以利用纸层析法对其进行鉴定。
【点睛】解答本题的关键是能够利用青蒿素的性质判断其提取使用的方法和不能使用的方法,能够掌握好萃取过程中的注意事项并确定鉴定青蒿素的原理。
12.内皮抑素是从血管内皮细胞瘤中分离出的一种内源性血管生成抑制因子,能特异性地抑制内皮细胞增殖和迁移。某小组为获得内皮抑素,构建分泌型内皮抑素基因表达载体,并在C6细胞(大鼠源性胶质瘤细胞)中表达。具体操作如下:
(1)构建分泌型内皮抑素基因表达载体
①采用相关技术提取1日龄SD大鼠大脑半球组织中的总RNA,检测RNA质量和浓度。
②内皮抑素cDNA的获得:以上述提取的RNA为模板,通过________过程获得cDNA,并利用PCR技术体外扩增cDNA。PCR技术中除需目的基因作为模板外,还需要的条件有________和控制温度等。
③为避免目的基因和载体自身环化,酶切目的基因和载体时,可用________酶切割,以保证目的基因两侧和载体上具有________。
(2)目的基因在C6细胞中表达(将目的基因导入C6细胞中,并表达)
①培养C6细胞时,为防止杂菌污染,可在培养基中加入一定量的________。
②若要检测目的基因是否成功整合到受体细胞的DNA上,可采用________技术。
③导入C6细胞中的目的基因成功表达后,会使C6细胞在大鼠体内的______可能会受到抑制。
【答案】 (1). 逆转录 (2). 热稳定DNA聚合酶(Taq酶)、两种引物、四种脱氧核苷酸 (3). 不同的限制性核酸内切(限制) (4). 不同的黏性末端 (5). 抗生素 (6). DNA分子杂交 (7). 增殖和迁移
【解析】
【分析】
基因工程的基本步骤是:①目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;②基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因;③将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。④目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测,检测转基因生物染色体DNA是否插入目的基因,可以用DNA分子杂交技术;检测目的基因是否转录出了mRNA,可以用分子杂交技术;检测目的基因是否翻译成蛋白质,可以用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】(1)构建分泌型内皮抑素基因表达载体
①采用相关技术提取1日龄SD大鼠大脑半球组织中的总RNA,检测RNA质量和浓度。
②内皮抑素cDNA的获得:遗传信息从RNA到DNA的过程叫逆转录。以上述提取的RNA为模板,通过逆转录过程获得cDNA,并利用PCR技术体外扩增cDNA。PCR技术中除需目的基因作为模板外,还需要的条件有热稳定DNA聚合酶(Taq酶)、两种引物、四种脱氧核苷酸 和控制温度等。
③为避免目的基因和载体自身环化,酶切目的基因和载体时,可用双酶切法,即不同的限制性核酸内切(限制)酶切割,以保证目的基因两侧和载体上具有不同的黏性末端。
(2)目的基因在C6细胞中表达(将目的基因导入C6细胞中,并表达)
①培养C6细胞时,为防止杂菌污染,可在培养基中加入一定量的抗生素。
②据分析可知,若要检测目的基因是否成功整合到受体细胞的DNA上,可采用DNA分子杂交技术。
③根据题干中信息可知,导入C6细胞中的目的基因成功表达后,会使C6细胞在大鼠体内的增殖和迁移可能会受到抑制。