浙江台州十校联盟2025—2026学年高二年级下学期期中联考生物试题

这是一份浙江台州十校联盟2025—2026学年高二年级下学期期中联考生物试题，共8页。试卷主要包含了考试结束后，只需上交答题纸等内容，欢迎下载使用。
考生须知：
1．本卷共8页满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，在答题卷指定区域填写班级、姓名、考场号、座位号及准考证号并填涂相应数字。
3．所有答案必须写在答题纸上，写在试卷上无效。
4．考试结束后，只需上交答题纸。
选择题部分
一、选择题（本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. 微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种，据下图分析下列操作方法正确的是（ ）
A. 在该操作过程中只需要灼烧接种环5次
B. 第5区域的划线与第1区域的划线不得相连
C. 确定对照组无菌后，选择菌落数合适的实验组平板进行计数
D. 划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作
2. 下列关于实验操作中消毒灭菌说法错误的是（ ）
A. 对实验需要的实验材料、器具和培养基均采用高压蒸汽灭菌
B. 划线分离需对接种环进行多次灼烧灭菌，各次灭菌目的并不完全相同
C. 实验结束后，将实验产生的废弃物进行灭菌处理
D. 灭菌较消毒更为彻底，可杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物
3. 某除草剂不易被降解，长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员如图程序选育能降解该除草剂的细菌，已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是（ ）
A. 操作I中接种环在酒精灯灼烧后无需冷却
B. 操作I的接种方法可用于细菌计数
C. 药品称量、溶化和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行
D. 分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养
4. 苹果营养丰富，其深加工产品苹果酒和苹果醋具有独特风味，生产流程包括酒精发酵和醋酸发酵。下列叙述正确的是（ ）
A. 酒精发酵的终产物均可直接被醋酸菌利用
B. 酒精发酵需定期排气，醋酸发酵需持续通气
C. 酒精发酵完成后需要升高温度杀死酵母菌从而进行醋酸发酵
D. 利用酒精进行醋酸发酵，发酵液面会出现气泡
5. 下列关于细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 种子发育成为完整植株，不能体现植物细胞的全能性
B. 只有植物的生殖细胞才具有发育成完整植株的潜能
C. 愈伤组织是高度分化的细胞，丧失了全能性
D. 植物体细胞杂交获得的杂种植株不具有全能性
6. 植物组织培养技术可实现优良品种的快速繁殖，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 外植体需经过严格的消毒处理后才能用于接种
B. 脱分化过程需要适宜的植物激素配比诱导
C. 外植体直接再分化就能形成完整的植株，无需脱分化
D. 再分化是愈伤组织重新分化形成根、芽等器官的过程
7. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，正确的是（ ）
A. 利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体
B. 取马铃薯的顶端分生区细胞进行组织培养，可获得抗病毒的脱毒苗
C. 通过细胞产物的工厂化生产获得紫杉醇时，需要把外植体培养成完整的紫杉醇植株幼苗
D. 由愈伤组织培养到幼苗的过程需要光照，以诱导叶绿素的形成
8. 非对称细胞融合是指融合前分别用射线破坏某原生质体的细胞核和用碘乙酰胺破坏另一原生质体的细胞质，实现细胞质基因和细胞核基因的优化组合。已知甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙植物细胞进行非对称细胞融合相关研究，以期获得高产耐盐碱再生植株。下列说法错误的是（ ）
A. 原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证
B. 在用酶解法降解细胞壁之前，先用较高渗透压溶液处理细胞
C. 用碘乙酰胺处理甲植物原生质体，用射线照射乙植物原生质体
D. 原生质体需在等渗溶液中保存，以防止过度失水或吸水而死亡
9. 研究发现雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 经射线处理①后可能获得雪莲次生代谢产物高产的细胞
B. 图中培养单细胞或小细胞团所用的培养基为液体培养基
C. 可将培养的细胞置于低渗溶液中涨破以便提取次生代谢物
D. 利用该技术生产的雪莲次生代谢物不受季节和气候的影响
10. 胚胎工程具有广阔的应用前景，如可用于繁殖高产奶牛。下列叙述正确的是（ ）
A. 可对优质母牛饲喂促性腺激素，使其排出更多卵细胞
B. 胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
C. 胚胎分割只能对桑葚胚进行操作，囊胚阶段无法分割
D. 一般取囊胚内细胞团细胞进行性别鉴定以获得雄性奶牛
11. 下列关于对小牛组织进行动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A. 需要选用幼龄动物的组织是因为其全能性高
B. 为防止污染，培养基中需加入高浓度的抗生素
C. 应在无菌、无毒，温度、pH和渗透压适宜的环境中培养
D. 体外培养时，所有动物细胞必须贴附在某一固相支持物上生长
12. “试管牛”是从优质供体母牛体内采集卵母细胞，经体外培养成熟后，加入优质种公牛精液进行体外受精，所获得的受精卵经体外培养后，再将早期胚胎移植到受体牛体内，即“借腹怀胎”。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①体外受精时，经过获能处理的精子才可与培养成熟的卵细胞完成受精作用
B. ②胚胎移植应取发育到囊胚或囊胚期以前的胚胎
C. 受体母牛和供体母牛可以是不同的品种
D. 运用胚胎分割技术获得的多个胚胎，发育成的个体性状完全相同
13. 中科院动物所和大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（ ）
A. 克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有细胞核移植、动物细胞融合、早期胚胎体外培养
B. 上述事例说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达
C. 在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
D. 若选用胚胎细胞核移植，成功率将明显高于体细胞核移植
14. 下列有关动物细胞培养和植物组织培养的说法错误的是（ ）
A. 两者依据的原理不相同
B. 两者所需要的培养基和用具都要进行严格消毒
C. 两者所需的培养基不同
D. 两者培养过程中一般不会发生基因重组
15. 细胞生命周期指体外培养细胞经历增殖与衰老的全过程，通常分为原代培养期、传代期和衰退期（如图所示）。下列叙述错误的是（ ）
A. 原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系
B. 动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织器官
C. 有限细胞系培养过程中会出现接触抑制现象，而无限细胞系不会
D. 图示“传代”中的“一代”不同于细胞的增殖次数
16. 作为基因工程的运输工具载体，必须具备的条件及理由对应叙述正确的是（ ）
A. 基因工程中目的基因的运输工具只能是质粒
B. 具有某些标记基因，以便目的基因能够准确定位与其结合
C. 只有一个限制酶切割位点，便于目的基因的插入
D. 能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因
17. 研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤①注射抗原的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量
B. 步骤②可使用灭活的病毒，在病毒的作用下，细胞膜会发生一定程度的损伤
C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原-抗体杂交
D. 步骤⑥培养瓶需要置于含有95%CO2和5%空气的混合气体中培养
18. 用农杆菌转化法培育转基因植物，下列叙述错误的是（ ）
A. 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA片段
B. 农杆菌转化法构建成功的重组质粒需要转入农杆菌中再导入植物细胞中
C. 采用抗原-抗体杂交技术可检测目的基因在受体细胞中是否表达
D. 利用农杆菌转化法将重组质粒导入植物细胞是培育转基因植物的核心步骤
19. 在基因工程研究里，利用PCR技术扩增目的基因是常见操作。以下关于PCR技术扩增目的基因的相关叙述，错误的是（ ）
A. 在PCR反应体系中，除了加入模板DNA、引物、四种脱氧核苷三磷酸外，还需要加入耐高温的DNA聚合酶，如TaqDNA聚合酶
B. PCR扩增目的基因时，引物的设计非常关键，引物应能与目的基因的两条模板链分别互补配对，且引物自身不能形成稳定的二级结构
C. 若对一个含目的基因的DNA片段进行PCR扩增，经过3次循环后，含目的基因的DNA片段占所有DNA片段总数的比例为1/2
D. PCR反应的变性阶段，温度通常设置为90-95℃，此过程是为了使DNA双链解开，形成单链模板，该过程破坏的是碱基对之间的氢键
20. 下列关于动物细胞融合的说法，错误的是（ ）
A. 常用于诱导动物细胞融合的方法有灭活病毒诱导法、紫外线照射法等
B. 动物细胞融合就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
C. 动物细胞融合可用于染色体上的基因定位
D. 动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性
21. 2023年10月我国科研团队在《发育细胞》上发表研究成果：提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，在体外制备出桑葚胚样全潜能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚胚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。根据该研究，下列相关分析错误的是（ ）
A. 桑葚胚发育成囊胚的过程中pSTAT3基因表达水平下降
B. 在桑葚胚阶段，胚胎内部开始出现含有液体的腔
C. 囊胚期细胞重置至桑葚胚样全潜能细胞的过程类似于脱分化
D. 体外模拟胚胎发育过程也涉及细胞衰老和细胞凋亡
22. PCR技术是在DNA聚合酶作用下，在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是（ ）
A. 双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B. 温度降低后，单链DNA和引物结合的部分碱基序列相同
C. 以2条DNA单链为模板，以4种NTP为原料，经耐高温酶在高温下合成2个新的DNA
D. PCR结果出现较多非目的基因片段，可能是引物过短造成
23. 科学家将玉米的OsHKT1（抗盐）基因转入普通小麦细胞，培育出“盐抗1号”小麦，其根部排盐能力增强。下列叙述正确的是（ ）
A. 利用PCR技术完成OsHKT1基因的扩增后，可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定产物
B. 构建基因表达载体时，需将OsHKT1基因置于终止子下游
C. 可采用显微注射法将OsHKT1基因注射到小麦根细胞
D. 检测OsHKT1基因是否转录成功，可采用抗原—抗体杂交技术
24. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
A. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因
B. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定目的基因与质粒是否正确连接
D. 受体菌本身应不具有对这两种抗生素的抗性
25. 蛋白质工程是基因工程的延伸，可通过改造基因来获得具有特定功能的蛋白质。科学家为提高某植酸酶的热稳定性，将其第23位的赖氨酸替换为精氨酸，下列相关操作正确的是（ ）
A. 直接对植酸酶的氨基酸序列进行改造，无需改变其编码基因
B. 通过PCR定点诱变技术，改变植酸酶基因中特定位点的核苷酸序列
C. 改造后的植酸酶基因，无法在原核生物中实现表达
D. 蛋白质工程只能改造自然界已存在的蛋白质，无法合成全新的蛋白质
非选择题部分
二、非选择题（本大题共五小题，共50分）
26. 有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
（1）配制分离细菌的固体培养基时，培养基的主要成分有水、无机盐、碳源和氮源等营养成分外，还需要添加________。其中氮源的主要作用是_____（答出1点即可）。配制完成后，还需要调节培养基的pH至________（填“中性偏酸”或“中性偏碱”）。实验室利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理时，应先_____以保证达到灭菌所需的温度。灭菌结束后，实验器具不能直接使用，需先经过______处理才能使用，否则易造成污染。
（2）通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。你认为可能的原因是________。
（3）实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是_________。按图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL细菌悬液用_______进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10²的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕取样区的细菌数为_______个。
27. 植物细胞工程在优良品种繁育、濒危植物保护、作物育种等领域应用广泛。请结合所学知识回答下列问题：
（1）植物组织培养技术是植物细胞工程的基础，其理论依据是______。
（2）进行植物组织培养时，外植体需先用75%酒精和次氯酸钠溶液进行_______处理，再接种到培养基上；培养基中需添加_______类和细胞分裂素类植物激素，调控细胞的分裂和分化。
（3）利用植物组织培养技术可获得脱毒苗，通常选用植物的_______作为外植体，原因是该部位的病毒浓度极低甚至无病毒；该技术还可将体细胞胚包埋在含有营养和保护功能的物质中，制成_______，实现优良品种的快速推广。
（4）植物几乎能生产人类所需要的一切天然有机物，如香料、染料、燃料等，这些物质属于植物的________。生产过程如下：取外植体经脱分化形成愈伤组织，接着将愈伤组织接种在液体培养基中_______获得分散细胞，后经多次悬浮培养，可提取相应产物。
（5）组织培养技术可用于作物新品种的培育。①单倍体育种：离体培养_______可获得单倍体；②细胞突变体的筛选：在细胞和原生质体培养时进行人工诱变，其优点有_______。
28. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
（1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的_______，以满足动物细胞培养的营养需要。浆细胞需要与骨髓瘤细胞融合的原因是_______。
（2）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_______。为了防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。
（3）每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_____，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是_______。
（4）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得_______。
（5）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定_____来判断待测抗原量。
29. 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。甲图和乙图分别是牛胚胎移植和克隆猴培育图，请据图完成下列问题：
（1）在试管牛和克隆猴的培育过程中都必须用到的生物技术有_____（至少写出两项）；其中产生克隆猴的方式是_____生殖，与试管牛的生殖方式_____（“相同”或“不同”）。
（2）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____。
（3）图甲中试管牛采集到的卵细胞需要培养到_____期才具备与精子受精的能力。图乙中克隆猴“中中”和“华华”的核遗传物质来自________（填“A猴”“B猴”或“C猴”），它们的性别_____（填“相同”或“不相同”）
（4）为提高胚胎的利用率，尽快获得数量较多的子代，需要利用______技术对胚胎进行处理。若处理对象为囊胚，应注意________。
30. 人干扰素是一种具有特定功能的蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来，人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我国科学家侯云德通过基因工程等技术研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。图甲和图乙为质粒和人干扰素α-1b基因的结构图。
回答下列问题：
（1）目的基因的获取和扩增。从_____细胞中提取_____，经逆转录获取目的基因，再通过PCR技术扩增目的基因。PCR在延伸最后阶段需要设置10min的原因是_____。
（2）表达载体的构建和筛选。应选取限制酶__________切割图甲中质粒与图乙中的目的基因，以防止目的基因与质粒_____、______。之后，用DNA连接酶连接并使用合适方法进行筛选。
（3）导入受体细胞。将大肠杆菌放于低温、低浓度的CaCl2溶液中，使之成为感受态细胞。再在低温条件下将感受态大肠杆菌与表达载体混合，然后进行短暂的_____处理，使外源DNA转入大肠杆菌。2025学年第二学期台州十校联盟期中联考
高二年级生物学科试题
考生须知：
1．本卷共8页满分100分，考试时间90分钟。
2．答题前，在答题卷指定区域填写班级、姓名、考场号、座位号及准考证号并填涂相应数字。
3．所有答案必须写在答题纸上，写在试卷上无效。
4．考试结束后，只需上交答题纸。
选择题部分
一、选择题（本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. 微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种，据下图分析下列操作方法正确的是（ ）
A. 在该操作过程中只需要灼烧接种环5次
B. 第5区域的划线与第1区域的划线不得相连
C. 确定对照组无菌后，选择菌落数合适的实验组平板进行计数
D. 划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作
【答案】B
【解析】
【分析】平板划线的操作的基本步骤是：
1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
2、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
3、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
4、将平板倒置，放入培养箱中培养。
【详解】A、在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此在该操作过程中需要灼烧接种环6次，A错误；
B、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连。因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，B正确；
C、平板划线法不可以用来进行菌种的计数，C错误；
D、划线操作时，如接种环不慎划破培养基，则该培养基将不能继续使用，D错误。
故选B。
2. 下列关于实验操作中消毒灭菌说法错误的是（ ）
A. 对实验需要的实验材料、器具和培养基均采用高压蒸汽灭菌
B. 划线分离需对接种环进行多次灼烧灭菌，各次灭菌目的并不完全相同
C. 实验结束后，将实验产生的废弃物进行灭菌处理
D. 灭菌较消毒更为彻底，可杀死包括芽孢和孢子在内的所有微生物
【答案】A
【解析】
【详解】A、高压蒸汽灭菌仅适用于耐高温、耐高压的物品，不耐高温的实验材料（如植物外植体）、遇热易分解的培养基成分（如尿素）均不能采用高压蒸汽灭菌，并非所有实验材料、器具和培养基都适用该方法，A错误；
B、划线分离操作中，接种环第一次灼烧是为了杀灭环上原有杂菌，避免污染培养物；每次划线结束后灼烧是为了杀死环上残留的菌种，保证下一次划线的菌种仅来自上一次划线的末端，实现菌种稀释；实验结束后灼烧是为了避免残留菌种污染环境、感染操作者，各次灭菌目的并不完全相同，B正确；
C、实验产生的废弃物可能携带致病微生物或实验用菌种，灭菌处理后再丢弃可防止污染环境，C正确；
D、消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物，不能杀灭芽孢和孢子；灭菌可杀死包括芽孢、孢子在内的所有微生物，因此灭菌较消毒更为彻底，D正确。
3. 某除草剂不易被降解，长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员如图程序选育能降解该除草剂的细菌，已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是（ ）
A. 操作I中接种环在酒精灯灼烧后无需冷却
B. 操作I的接种方法可用于细菌计数
C. 药品称量、溶化和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行
D. 分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养
【答案】D
【解析】
【详解】A、操作I中接种环在酒精灯灼烧后需要冷却，然后才能接种，A错误；
B、操作I的接种方法为平板划线法，不能用于菌体计数，B错误；
C、药品称量、溶化是进行培养基配制的过程，培养基配制后还需要灭菌，故称量和溶化不需要无菌操作，倒平板过程需要进行无菌操作，C错误；
D、因为E菌落外围的透明圈和E菌落直径的比例最大，因此分解除草剂能力最强的是E菌株，应对其扩大培养，D正确。
4. 苹果营养丰富，其深加工产品苹果酒和苹果醋具有独特风味，生产流程包括酒精发酵和醋酸发酵。下列叙述正确的是（ ）
A. 酒精发酵的终产物均可直接被醋酸菌利用
B. 酒精发酵需定期排气，醋酸发酵需持续通气
C. 酒精发酵完成后需要升高温度杀死酵母菌从而进行醋酸发酵
D. 利用酒精进行醋酸发酵，发酵液面会出现气泡
【答案】B
【解析】
【详解】A、酒精发酵的终产物包括酒精、二氧化碳等，其中二氧化碳无法被醋酸菌代谢利用，并非所有终产物都可直接被醋酸菌利用，A错误；
B、酒精发酵过程中酵母菌无氧呼吸会产生二氧化碳，需定期排气避免发酵装置胀裂；醋酸菌为好氧细菌，生命活动需要氧气参与，因此醋酸发酵需持续通气保证氧气供应，B正确；
C、酒精发酵完成后仅需将温度升高至醋酸菌适宜的30~35℃即可，不需要专门杀死酵母菌，醋酸发酵的有氧、较高温度条件会自然抑制酵母菌的代谢活性，不会干扰醋酸发酵，C错误；
D、利用酒精进行醋酸发酵时，反应过程无气体生成，因此发酵液面不会出现气泡，D错误。
5. 下列关于细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 种子发育成为完整植株，不能体现植物细胞的全能性
B. 只有植物的生殖细胞才具有发育成完整植株的潜能
C. 愈伤组织是高度分化的细胞，丧失了全能性
D. 植物体细胞杂交获得的杂种植株不具有全能性
【答案】A
【解析】
【详解】A、种子是植物的幼体，属于器官层次，并非单个分化细胞，其发育为完整植株是个体正常生长发育的过程，因此不能体现植物细胞的全能性，A正确；
B、植物的体细胞和生殖细胞都含有该物种全套的遗传信息，都具备发育成完整植株的潜能，B错误；
C、愈伤组织是高度分化的植物细胞经脱分化形成的，分化程度低、全能性较高，可经再分化发育为完整植株，并未丧失全能性，C错误；
D、植物体细胞杂交获得的杂种植株的细胞含有全套遗传物质，具有全能性，D错误。
6. 植物组织培养技术可实现优良品种的快速繁殖，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 外植体需经过严格的消毒处理后才能用于接种
B. 脱分化过程需要适宜的植物激素配比诱导
C. 外植体直接再分化就能形成完整的植株，无需脱分化
D. 再分化是愈伤组织重新分化形成根、芽等器官的过程
【答案】C
【解析】
【详解】A、植物组织培养需避免杂菌污染，外植体携带的杂菌会竞争培养基营养、产生有害物质干扰培养，因此外植体需经过严格消毒后才能接种，A正确；
B、脱分化需要适宜的生长素和细胞分裂素配比诱导，才能让已经分化的细胞恢复分裂能力，形成未分化的愈伤组织，B正确；
C、植物组织培养的必要流程为：外植体先经脱分化形成愈伤组织，再经再分化发育为根、芽等器官，最终形成完整植株，无法跳过脱分化过程直接由外植体再分化得到完整植株，C错误；
D、再分化指的是脱分化得到的愈伤组织，在特定的激素、营养等条件诱导下，重新分化形成根、芽等器官的过程，D正确。
7. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，正确的是（ ）
A. 利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体
B. 取马铃薯的顶端分生区细胞进行组织培养，可获得抗病毒的脱毒苗
C. 通过细胞产物的工厂化生产获得紫杉醇时，需要把外植体培养成完整的紫杉醇植株幼苗
D. 由愈伤组织培养到幼苗的过程需要光照，以诱导叶绿素的形成
【答案】D
【解析】
【详解】A、花药离体培养获得的玉米幼苗是单倍体，普遍具有植株弱小、高度不育的特点，无法直接筛选出可稳定遗传的优良性状个体，需经秋水仙素处理使染色体数目加倍后再进行筛选，A错误；
B、马铃薯顶端分生区细胞代谢旺盛、病毒极少甚至无病毒，经组织培养可获得脱毒苗，但脱毒苗仅指自身不携带病毒，不具备抗病毒的能力，抗病毒植株需要通过基因工程技术导入抗病毒基因才能获得，B错误；
C、细胞产物的工厂化生产只需将外植体培养到愈伤组织阶段即可，利用愈伤组织细胞分裂快、代谢旺盛的特点大量生产紫杉醇等细胞产物，不需要培养为完整植株，C错误；
D、愈伤组织再分化形成幼苗的过程需要光照，光照可诱导叶绿素的合成，保证幼苗长出后可正常进行光合作用维持生长，D正确。
8. 非对称细胞融合是指融合前分别用射线破坏某原生质体的细胞核和用碘乙酰胺破坏另一原生质体的细胞质，实现细胞质基因和细胞核基因的优化组合。已知甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙植物细胞进行非对称细胞融合相关研究，以期获得高产耐盐碱再生植株。下列说法错误的是（ ）
A. 原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证
B. 在用酶解法降解细胞壁之前，先用较高渗透压溶液处理细胞
C. 用碘乙酰胺处理甲植物原生质体，用射线照射乙植物原生质体
D. 原生质体需在等渗溶液中保存，以防止过度失水或吸水而死亡
【答案】A
【解析】
【详解】A、原生质体是已经去除细胞壁的植物细胞，不存在细胞壁，无法发生细胞壁与原生质层分离的质壁分离现象，因此不能用质壁分离与复原实验验证原生质体活力，A错误；
B、用较高渗透压溶液预处理细胞，可使细胞微弱失水发生质壁分离，原生质体收缩，避免后续去除细胞壁后原生质体直接吸水涨破，B正确；
C、本实验需要保留甲的细胞核（耐盐碱基因）、乙的细胞质（高产基因），碘乙酰胺的作用是破坏细胞质，因此处理甲植物原生质体，仅保留其有功能的细胞核；射线的作用是破坏细胞核，因此处理乙植物原生质体，仅保留其有功能的细胞质，二者融合后即可得到符合要求的杂种细胞，C正确；
D、原生质体无细胞壁的保护，在低渗溶液中会吸水涨破，高渗溶液中会过度失水死亡，因此需要在等渗溶液中保存，D正确。
9. 研究发现雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如下。下列叙述错误的是（ ）
A. 经射线处理①后可能获得雪莲次生代谢产物高产的细胞
B. 图中培养单细胞或小细胞团所用的培养基为液体培养基
C. 可将培养的细胞置于低渗溶液中涨破以便提取次生代谢物
D. 利用该技术生产的雪莲次生代谢物不受季节和气候的影响
【答案】C
【解析】
【详解】A、射线处理属于诱变因素，可诱导①（愈伤组织）发生基因突变或染色体变异，在这些变异细胞里，有可能出现雪莲次生代谢产物高产的细胞，A正确；
B、图中培养单细胞或小细胞团的目的为增加细胞数量，获取大量雪莲次生代谢物，因此该过程使用的是液体培养基，B正确；
C、图中细胞为植物细胞，由于细胞壁对细胞的支持保护作用，在低渗溶液中不会被涨破，C错误；
D、植物细胞培养是在人工构建的环境中进行，因此使用该方法获得次生代谢产物具有不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制等优点，D正确。
故选C。
10. 胚胎工程具有广阔的应用前景，如可用于繁殖高产奶牛。下列叙述正确的是（ ）
A. 可对优质母牛饲喂促性腺激素，使其排出更多卵细胞
B. 胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
C. 胚胎分割只能对桑葚胚进行操作，囊胚阶段无法分割
D. 一般取囊胚内细胞团细胞进行性别鉴定以获得雄性奶牛
【答案】B
【解析】
【详解】A、促性腺激素的化学本质为蛋白质，若饲喂会被动物消化道的蛋白酶分解失活，无法发挥作用，因此需通过注射方式处理优质母牛使其超数排卵，A错误；
B、胚胎移植过程中，雌性优良个体仅需提供早期胚胎，妊娠、哺乳的任务由普通受体雌性承担，大幅缩短了优良个体的繁殖周期，可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，B正确；
C、胚胎分割可选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行操作，囊胚阶段分割时仅需注意将内细胞团均等分割即可，并非无法分割，C错误；
D、胚胎性别鉴定一般取囊胚的滋养层细胞检测，若取内细胞团会破坏胚胎正常发育，且高产奶牛需选择雌性个体才能产奶，D错误。
11. 下列关于对小牛组织进行动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A. 需要选用幼龄动物的组织是因为其全能性高
B. 为防止污染，培养基中需加入高浓度的抗生素
C. 应在无菌、无毒，温度、pH和渗透压适宜的环境中培养
D. 体外培养时，所有动物细胞必须贴附在某一固相支持物上生长
【答案】C
【解析】
【详解】A、选用幼龄动物组织的原因是其细胞分化程度低、增殖能力强、分裂旺盛，并非全能性高，高度分化的动物体细胞全能性受限制，且动物细胞培养一般不需要体现细胞全能性，A错误；
B、培养基中添加适宜浓度的抗生素可防止污染，高浓度抗生素会对培养的动物细胞产生毒害作用，破坏细胞结构或影响细胞代谢，B错误；
C、动物细胞培养的环境要求为无菌、无毒，同时需要维持适宜的温度、pH和渗透压，才能保证细胞正常的生命活动，C正确；
D、体外培养的动物细胞包括贴壁生长型和悬浮生长型，如杂交瘤细胞、淋巴细胞可在培养液中悬浮生长，并非所有细胞都必须贴附在固相支持物上生长，D错误。
12. “试管牛”是从优质供体母牛体内采集卵母细胞，经体外培养成熟后，加入优质种公牛精液进行体外受精，所获得的受精卵经体外培养后，再将早期胚胎移植到受体牛体内，即“借腹怀胎”。如图是试管奶牛的生产流程示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A. ①体外受精时，经过获能处理的精子才可与培养成熟的卵细胞完成受精作用
B. ②胚胎移植应取发育到囊胚或囊胚期以前的胚胎
C. 受体母牛和供体母牛可以是不同的品种
D. 运用胚胎分割技术获得的多个胚胎，发育成的个体性状完全相同
【答案】D
【解析】
【详解】A、体外受精前，精子需进行获能处理达到获能状态，才可与培养成熟的卵细胞完成受精作用，A正确；
B、胚胎移植应取发育到桑葚胚或囊胚期的胚胎，此时胚胎发育相对早期，移植成功率较高，B正确；
C、胚胎移植中，供体提供优良胚胎，受体仅需要为同种、生理状态合适的健康雌性即可，供体和受体可以是不同品种，C正确；
D、胚胎分割获得的多个胚胎，虽然核遗传物质相同，但生物性状是基因和环境共同作用的结果，还可能存在细胞质遗传物质差异、基因突变等情况，发育得到的个体性状不会完全相同，D错误。
13. 中科院动物所和大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（ ）
A. 克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有细胞核移植、动物细胞融合、早期胚胎体外培养
B. 上述事例说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达
C. 在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现细胞的分化
D. 若选用胚胎细胞核移植，成功率将明显高于体细胞核移植
【答案】A
【解析】
【详解】A、克隆大熊猫过程中用到了细胞核移植、早期胚胎体外培养技术，未使用动物细胞融合技术（动物细胞融合是两个或多个动物细胞融合形成杂种细胞的技术，与核移植技术原理不同），A错误；
B、大熊猫的细胞核在异种的兔子去核卵细胞中能完成基因表达，发育为早期胚胎，说明异种生物的细胞质也可以调控细胞核基因的表达，B正确；
C、早期胚胎发育过程中，囊胚期细胞首次出现分化，分化为将来发育成胎儿的内细胞团和发育成胎膜胎盘的滋养层细胞，C正确；
D、胚胎细胞的分化程度远低于体细胞，全能性更高，更容易诱导发育为完整个体，因此胚胎细胞核移植的成功率明显高于体细胞核移植，D正确。
14. 下列有关动物细胞培养和植物组织培养的说法错误的是（ ）
A. 两者依据的原理不相同
B. 两者所需要的培养基和用具都要进行严格消毒
C. 两者所需的培养基不同
D. 两者培养过程中一般不会发生基因重组
【答案】B
【解析】
【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、动物细胞培养和植物组织培原理分别是细胞增殖和植物细胞的全能性，A正确；
B、动物细胞培养和植物组织培培养基和用具都要进行严格灭菌，而非严格消毒，B错误；
C、动物细胞培养一般用液体培养基，加入动物血清等特殊成分，植物组织培培养基一般为固体培养基，需加入植物生长调节剂等，C正确；
D、基因重组发生在减少分裂过程中，两者培养过程是细胞的有丝分裂和分化，一般不会发生基因重组，D正确。
故选B。
15. 细胞生命周期指体外培养细胞经历增殖与衰老的全过程，通常分为原代培养期、传代期和衰退期（如图所示）。下列叙述错误的是（ ）
A. 原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系
B. 动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织器官
C. 有限细胞系培养过程中会出现接触抑制现象，而无限细胞系不会
D. 图示“传代”中的“一代”不同于细胞的增殖次数
【答案】C
【解析】
【详解】A、原代培养物经首次传代成功后即成为有限细胞系，A正确；
B、动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织器官，其细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，B正确；
C、有的无限细胞系虽已获得了不死性，但保留接触抑制现象，不致癌，是良性无限细胞系，C错误；
D、图示中的“一代”为“传代”的“一代”，指每分瓶培养一次为一代，不同于细胞的增殖次数，D正确。
16. 作为基因工程的运输工具载体，必须具备的条件及理由对应叙述正确的是（ ）
A. 基因工程中目的基因的运输工具只能是质粒
B. 具有某些标记基因，以便目的基因能够准确定位与其结合
C. 只有一个限制酶切割位点，便于目的基因的插入
D. 能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因
【答案】D
【解析】
【详解】A、基因工程中目的基因的运输工具即运载体，常见类型有质粒、噬菌体、动植物病毒等，并非只能是质粒，A错误；
B、运载体上标记基因的作用是筛选出成功导入目的基因的受体细胞，目的基因与运载体结合依赖的是同种限制酶切割产生的相同黏性末端和DNA连接酶的作用，与标记基因无关，B错误；
C、运载体需要具有一个或多个限制酶切割位点，便于适应不同限制酶切割的目的基因完成插入，并非只能有一个限制酶切割位点，C错误；
D、运载体需要能在宿主细胞中稳定保存并大量复制，其携带的目的基因会随运载体同步复制，从而获得大量的目的基因，D正确。
17. 研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤①注射抗原的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量
B. 步骤②可使用灭活的病毒，在病毒的作用下，细胞膜会发生一定程度的损伤
C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原-抗体杂交
D. 步骤⑥培养瓶需要置于含有95%CO2和5%空气的混合气体中培养
【答案】B
【解析】
【详解】A、步骤①注射抗原的目的是刺激小鼠产生能分泌抗TREM2抗体的已免疫B淋巴细胞，A错误；
B、步骤②可使用灭活的病毒诱导后让骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，灭活的病毒仍然具有一定的毒性和侵染性，在病毒的作用下，细胞膜表面会发生一定程度的损伤，但是伤害程度一般不大，B正确；
C、步骤③是特定培养基筛选杂交瘤细胞，步骤④是抗原-抗体杂交，C错误；
D、步骤⑥培养瓶需要置于含有95%的空气和5%的CO2的混合气体中培养，D错误。
18. 用农杆菌转化法培育转基因植物，下列叙述错误的是（ ）
A. 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA片段
B. 农杆菌转化法构建成功的重组质粒需要转入农杆菌中再导入植物细胞中
C. 采用抗原-抗体杂交技术可检测目的基因在受体细胞中是否表达
D. 利用农杆菌转化法将重组质粒导入植物细胞是培育转基因植物的核心步骤
【答案】D
【解析】
【详解】A、将目的基因插入Ti质粒的T-DNA片段，而T-DNA片段可以发生转移，并整合到宿主细胞的染色体DNA上，得到转基因植物，A正确；
B、农杆菌转化法的操作流程为先构建重组质粒，再将重组质粒转入农杆菌，之后利用农杆菌侵染植物细胞，将目的基因导入植物细胞，B正确；
C、在分子水平上，采用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否在受体细胞中表达形成蛋白质，若出现杂交带，则表明目的基因在受体细胞内成功表达，C正确；
D、基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，D错误。
19. 在基因工程研究里，利用PCR技术扩增目的基因是常见操作。以下关于PCR技术扩增目的基因的相关叙述，错误的是（ ）
A. 在PCR反应体系中，除了加入模板DNA、引物、四种脱氧核苷三磷酸外，还需要加入耐高温的DNA聚合酶，如TaqDNA聚合酶
B. PCR扩增目的基因时，引物的设计非常关键，引物应能与目的基因的两条模板链分别互补配对，且引物自身不能形成稳定的二级结构
C. 若对一个含目的基因的DNA片段进行PCR扩增，经过3次循环后，含目的基因的DNA片段占所有DNA片段总数的比例为1/2
D. PCR反应的变性阶段，温度通常设置为90-95℃，此过程是为了使DNA双链解开，形成单链模板，该过程破坏的是碱基对之间的氢键
【答案】C
【解析】
【详解】A、PCR反应体系的必需组分包含模板DNA、特异性引物、四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶（常用Taq DNA聚合酶），此外还需要缓冲液等，A正确；
B、引物需要分别与目的基因的两条模板链3'端互补配对，才能保证扩增的序列是目的基因；若引物自身形成稳定的二级结构（如发夹结构），会无法与模板正常结合，因此引物设计时需避免该情况，B正确；
C、1个含目的基因的模板DNA经3次PCR循环后，共产生23=8个子代DNA片段，所有子代DNA均包含目的基因序列，占比为1，并非1/2，C错误；
D、PCR变性阶段温度通常设置为90~95℃，高温会破坏DNA双链碱基对之间的氢键，使双链解开为单链，作为后续延伸的模板，D正确。
20. 下列关于动物细胞融合的说法，错误的是（ ）
A. 常用于诱导动物细胞融合的方法有灭活病毒诱导法、紫外线照射法等
B. 动物细胞融合就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
C. 动物细胞融合可用于染色体上的基因定位
D. 动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性
【答案】A
【解析】
【详解】A、常用于诱导动物细胞融合的方法有灭活病毒诱导法、PEG融合法、电融合法等，紫外线照射法不能用于诱导细胞融合，A错误；
B、将两个或多个动物细胞融合后，形成了具有原来两个或多个细胞的遗传信息的细胞，该细胞即为杂交细胞，B正确；
C、动物细胞融合技术可通过染色体选择性丢失与筛选机制实现基因定位‌，C正确；
D、动物细胞融合的基础是细胞膜可以发生融合，原理是细胞膜具有一定的流动性，D正确。
21. 2023年10月我国科研团队在《发育细胞》上发表研究成果：提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，在体外制备出桑葚胚样全潜能细胞。该细胞在分子水平及发育潜能上均具有自然胚胎桑葚胚期细胞特性，并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段。根据该研究，下列相关分析错误的是（ ）
A. 桑葚胚发育成囊胚的过程中pSTAT3基因表达水平下降
B. 在桑葚胚阶段，胚胎内部开始出现含有液体的腔
C. 囊胚期细胞重置至桑葚胚样全潜能细胞的过程类似于脱分化
D. 体外模拟胚胎发育过程也涉及细胞衰老和细胞凋亡
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎发育过程:
(1)卵裂期:细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
(2)桑葚胚:32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都有发育成完整胚胎的潜能属全能细胞；
(3)囊胚:细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织;而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注:囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；
(4)原肠胚:内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全潜能细胞，因此推断桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3的表达下降，A正确；
B、当卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，内部没有含有液体的腔，B错误；
C、囊胚期细胞重置至桑葚胚样全潜能细胞的过程类似于植物组织培养中的脱分化，恢复细胞的全能性，C正确；
D、细胞衰老是人体内发生的正常生命现象，正常的细胞，衰老有利于机体更好地实现自我更新，细胞凋亡是一种程序性死亡，有利于机体细胞的自然更新，早期胚胎过程中也涉及细胞衰老和细胞凋亡，D正确。
故选B。
22. PCR技术是在DNA聚合酶作用下，在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是（ ）
A. 双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B. 温度降低后，单链DNA和引物结合的部分碱基序列相同
C. 以2条DNA单链为模板，以4种NTP为原料，经耐高温酶在高温下合成2个新的DNA
D. PCR结果出现较多非目的基因片段，可能是引物过短造成
【答案】D
【解析】
【分析】1、PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
2、PCR包括三个步骤：第一步变性，当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链；第二步复性，当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；第三步延伸，当温度上升到72 ℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】A、双链DNA在高温下解旋使得DNA双链打开，破坏的是碱基对之间的氢键，磷酸二酯键没有断裂，A错误；
B、当温度降低时，引物与模板链结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程以4种脱氧核苷酸为原料，遵循碱基互补配对原则，单链DNA和引物结合的部分碱基序列互补，B错误；
C、以2条DNA单链为模板，以4种NTP为原料，温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，当温度上升到72 ℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成2个新的DNA，C错误；
D、引物过短，特异性差，可能会和非目的基因片段结合，导致PCR结果出现较多非目的基因片段，D正确。
故选D。
23. 科学家将玉米的OsHKT1（抗盐）基因转入普通小麦细胞，培育出“盐抗1号”小麦，其根部排盐能力增强。下列叙述正确的是（ ）
A. 利用PCR技术完成OsHKT1基因的扩增后，可采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定产物
B. 构建基因表达载体时，需将OsHKT1基因置于终止子下游
C. 可采用显微注射法将OsHKT1基因注射到小麦根细胞
D. 检测OsHKT1基因是否转录成功，可采用抗原—抗体杂交技术
【答案】A
【解析】
【详解】A、PCR扩增后的产物可通过琼脂糖凝胶电泳进行分离和鉴定，依据DNA片段大小判断结果，A正确；
B、基因表达载体中，目的基因应位于启动子（RNA聚合酶识别结合位点）下游和终止子上游，而非终止子下游，B错误；
C、显微注射法适用于动物细胞（如受精卵），植物细胞常用农杆菌转化法等，C错误；
D、检测OsHKT1基因是否转录需用分子杂交技术（如用标记的DNA探针与mRNA结合），抗原—抗体杂交用于检测翻译产物，D错误。
24. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
A. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因
B. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定目的基因与质粒是否正确连接
D. 受体菌本身应不具有对这两种抗生素的抗性
【答案】C
【解析】
【详解】A、若用PvuI酶切，则破坏了氨苄青霉素抗性基因，导入普通质粒和重组质粒的受体菌形成的菌落都具有抗四环素的能力，都能在含Tet（四环素）培养基中生存，A正确；
B、若用HindⅢ酶切，目的基因可能会以不同的方向插入质粒，因此目的基因转录的产物可能不同，B正确；
C、若用SphI酶切，目的基因可以和质粒进行正向拼接或反向拼接，但两种拼接方式形成的重组DNA分子碱基对数量相等，电泳形成的条带是一样的，因此不可通过DNA凝胶电泳技术鉴定目的基因与质粒是否正确连接，C错误；
D、我们利用氨苄青霉素或四环素来对受体菌进行筛选，首要条件就是受体菌本身应不具有对这两种抗生素的抗性，若受体菌本身有抗性，则无论是否成功导入质粒，受体菌都能在相应抗生素的培养基中活下来，D正确。
25. 蛋白质工程是基因工程的延伸，可通过改造基因来获得具有特定功能的蛋白质。科学家为提高某植酸酶的热稳定性，将其第23位的赖氨酸替换为精氨酸，下列相关操作正确的是（ ）
A. 直接对植酸酶的氨基酸序列进行改造，无需改变其编码基因
B. 通过PCR定点诱变技术，改变植酸酶基因中特定位点的核苷酸序列
C. 改造后的植酸酶基因，无法在原核生物中实现表达
D. 蛋白质工程只能改造自然界已存在的蛋白质，无法合成全新的蛋白质
【答案】B
【解析】
【详解】A、蛋白质工程的操作对象是基因，直接改造蛋白质无法使改造后的性状稳定遗传，也无法实现蛋白的大量生产，因此必须改造植酸酶的编码基因，A错误；
B、要实现特定位点氨基酸的替换，需定向改变植酸酶基因对应位点的核苷酸序列，PCR定点诱变技术可实现基因特定位点的定向改造，B正确；
C、生物界共用一套遗传密码，只要将改造后的植酸酶基因构建为适配原核生物的基因表达载体，就可在原核生物中完成表达，C错误；
D、蛋白质工程既可以改造自然界已存在的蛋白质，也可以根据人类需求设计合成自然界不存在的全新蛋白质，D错误。
非选择题部分
二、非选择题（本大题共五小题，共50分）
26. 有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
（1）配制分离细菌的固体培养基时，培养基的主要成分有水、无机盐、碳源和氮源等营养成分外，还需要添加________。其中氮源的主要作用是_____（答出1点即可）。配制完成后，还需要调节培养基的pH至________（填“中性偏酸”或“中性偏碱”）。实验室利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理时，应先_____以保证达到灭菌所需的温度。灭菌结束后，实验器具不能直接使用，需先经过______处理才能使用，否则易造成污染。
（2）通过观察菌落的特征可知，手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两研究性学习小组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同。你认为可能的原因是________。
（3）实验中，两研究性学习小组采用的接种方法是_________。按图示操作取样固定实验员欲测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL细菌悬液用_______进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10²的样品液接种到三个培养基上培养一段时间后，统计菌落数分别为38、40、42，则该手机屏幕取样区的细菌数为_______个。
【答案】（1） ①. 琼脂##凝固剂 ②. 为细菌合成蛋白质、核酸等有机物提供氮元素 ③. 中性偏碱 ④. 排尽锅内的冷空气 ⑤. 烘干
（2）取样的手机屏幕、马桶按钮的具体部位不同/取样时的环境条件不同
（3） ①. 稀释涂布平板法 ②. 无菌水 ③. 4×105
【解析】
【小问1详解】
固体培养基需要添加琼脂（凝固剂）才能形成固体状态；氮源可为微生物合成蛋白质、核酸等有机物提供氮元素；细菌适合在中性偏碱的环境中生长；高压蒸汽灭菌时，需要先排尽灭菌锅内的冷空气，否则锅内温度达不到灭菌要求；高压蒸汽灭菌结束后，由于玻璃器皿等都带有一定的水分容易染菌，需先经过烘干处理再拿来使用。
【小问2详解】
两组操作均正确，结果不同是因为取样的差异：取样的手机屏幕、马桶按钮的具体部位不同、取样时的环境条件不同，因此结果会有差异。
【小问3详解】
该方法需要对细菌计数，得到均匀分布的单菌落，接种方法为稀释涂布平板法；梯度稀释菌悬液需要使用无菌水，避免引入杂菌； 计算过程：三个培养基菌落平均数为（38+40+42）​/3=40，取样区细菌总数=平均菌落数/涂布体积×稀释倍数×总菌悬液体积=40​/0.1×102×10=4×105个。
27. 植物细胞工程在优良品种繁育、濒危植物保护、作物育种等领域应用广泛。请结合所学知识回答下列问题：
（1）植物组织培养技术是植物细胞工程的基础，其理论依据是______。
（2）进行植物组织培养时，外植体需先用75%酒精和次氯酸钠溶液进行_______处理，再接种到培养基上；培养基中需添加_______类和细胞分裂素类植物激素，调控细胞的分裂和分化。
（3）利用植物组织培养技术可获得脱毒苗，通常选用植物的_______作为外植体，原因是该部位的病毒浓度极低甚至无病毒；该技术还可将体细胞胚包埋在含有营养和保护功能的物质中，制成_______，实现优良品种的快速推广。
（4）植物几乎能生产人类所需要的一切天然有机物，如香料、染料、燃料等，这些物质属于植物的________。生产过程如下：取外植体经脱分化形成愈伤组织，接着将愈伤组织接种在液体培养基中_______获得分散细胞，后经多次悬浮培养，可提取相应产物。
（5）组织培养技术可用于作物新品种的培育。①单倍体育种：离体培养_______可获得单倍体；②细胞突变体的筛选：在细胞和原生质体培养时进行人工诱变，其优点有_______。
【答案】（1）植物细胞的全能性
（2） ①. 消毒 ②. 生长素
（3） ①. 茎尖（或根尖） ②. 人工种子
（4） ①. 细胞代谢产物 ②. 振荡培养
（5） ①. 花药或花粉 ②. 突变频率高，可在较小空间内一次处理大量材料
【解析】
【小问1详解】
植物细胞的全能性是指已分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 这是因为每个植物细胞都包含该物种全套的遗传信息，在适宜的营养、激素和环境条件下，就能脱分化、再分化，最终发育为完整植株，这也是植物组织培养技术的核心理论基础。
【小问2详解】
75% 酒精和次氯酸钠溶液都属于消毒剂，外植体在接种前需要进行消毒处理，目的是杀灭外植体表面的杂菌，避免培养过程中发生污染，保证无菌环境。植物组织培养中，调控细胞分裂和分化的关键激素是生长素类和细胞分裂素类： 生长素/细胞分裂素比值高时，促进根的分化； 比值低时，促进芽的分化； 比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【小问3详解】
植物的茎尖（或根尖）分生区细胞分裂速度快，病毒极少，甚至无病毒，因此选用茎尖 / 根尖作为外植体，通过组织培养可以获得脱毒苗。将植物组织培养得到的体细胞胚（或不定芽、顶芽、腋芽）包裹在含有营养成分和保护功能的人工种皮中，就制成了人工种子。人工种子可以实现优良品种的快速推广，还能保持亲本的优良性状。
【小问4详解】
植物的代谢产物是指植物在细胞代谢过程中产生的，比如香料、染料、燃料、生物碱、萜类等，这些物质大多具有特殊的生理功能或经济价值。将愈伤组织接种到液体培养基中进行振荡培养，可以使愈伤组织分散成单个细胞，同时保证细胞与营养物质充分接触，也能提供充足的氧气，有利于细胞悬浮培养和次生代谢产物的生产。
【小问5详解】
单倍体育种的第一步是获得单倍体植株，通常通过离体培养花药或花粉（花粉粒中含有单倍的生殖细胞） 来实现，再经过秋水仙素处理使染色体加倍，即可获得纯合的二倍体植株，明显缩短育种年限。在细胞和原生质体培养过程中进行人工诱变（如物理诱变、化学诱变），有以下优势： 细胞分裂旺盛，DNA 复制过程中更容易发生突变，突变频率高； 细胞和原生质体体积小，可以在较小的空间内一次处理大量材料，便于筛选出具有优良性状的突变体，如抗逆、抗病、高产的突变体。
28. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
（1）动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的_______，以满足动物细胞培养的营养需要。浆细胞需要与骨髓瘤细胞融合的原因是_______。
（2）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_______。为了防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。
（3）每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_____，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是_______。
（4）甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得_______。
（5）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定_____来判断待测抗原量。
【答案】（1） ①. 动物血清（或血浆） ②. 浆细胞不能无限增殖，骨髓瘤细胞能无限增殖，融合后获得的杂交瘤细胞兼具两者特性（答到融合后还获得了无限增殖的特性即可）
（2） ①. 抗生素 ②. 定期更换培养液
（3） ①. 加强免疫，刺激小鼠产生更多的浆细胞（效应B细胞） ②. 聚乙二醇（PEG）
（4） ①. 乙和丙 ②. 能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞
（5） ①. 与抗原结合，同时催化底物发生反应 ②. 酶促反应的产物量
【解析】
【小问1详解】
人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。浆细胞（效应 B 细胞）：能产生特异性抗体，但不能无限增殖（体外培养条件下很快死亡）。 骨髓瘤细胞：能无限增殖（体外可长期培养），但不能产生抗体。 融合目的：让杂交瘤细胞同时兼具两者的优点 —— 既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
【小问2详解】
抗生素能抑制细菌的增殖，对真核细胞的培养没有影响。因此为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。根据制作流程要求，细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液。
【小问3详解】
为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体产生更多的浆细胞（能产生更多的抗体），一般通过多次注射相应抗原实现；取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是聚乙二醇（PEG）。
【小问4详解】
看图可知：杂交瘤细胞需要对甲筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞；其中①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的细胞。
【小问5详解】
分析图中过程，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的，而酶标抗体可以与待测抗原结合，催化底物发生反应，催化抗原分解，所以通过检测其分解产物多少（酶促反应的产物量）就可确定抗原的含量。
29. 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。甲图和乙图分别是牛胚胎移植和克隆猴培育图，请据图完成下列问题：
（1）在试管牛和克隆猴的培育过程中都必须用到的生物技术有_____（至少写出两项）；其中产生克隆猴的方式是_____生殖，与试管牛的生殖方式_____（“相同”或“不同”）。
（2）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____。
（3）图甲中试管牛采集到的卵细胞需要培养到_____期才具备与精子受精的能力。图乙中克隆猴“中中”和“华华”的核遗传物质来自________（填“A猴”“B猴”或“C猴”），它们的性别_____（填“相同”或“不相同”）
（4）为提高胚胎的利用率，尽快获得数量较多的子代，需要利用______技术对胚胎进行处理。若处理对象为囊胚，应注意________。
【答案】（1） ①. 动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植 ②. 无性 ③. 不同
（2）促性腺激素 （3） ①. 减数第二次分裂中期（MⅡ中期/中期Ⅱ） ②. A猴 ③. 相同
（4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团均等分割
【解析】
【小问1详解】
试管牛（有性生殖的胚胎工程）需要动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，克隆猴（无性的核移植技术）需要动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，二者共有的核心技术为动物细胞培养、胚胎移植、早期胚胎培养；克隆猴未经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，试管牛经过两性生殖细胞受精形成受精卵，属于有性生殖，二者生殖方式不同。
【小问2详解】
胚胎工程中，超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射促性腺激素，得到多个卵母细胞。
【小问3详解】
试管牛采集到的卵母细胞，需要在体外培养到减数第二次分裂中期（MⅡ 中期），此时卵母细胞才具备与精子受精的能力。试管牛由供体公牛的精子和供体母牛的卵细胞受精发育而来，遗传物质来自双亲（供体公牛+供体母牛）；克隆猴的细胞核由A猴提供，因此核遗传物质来自A猴；中中和华华的细胞核遗传物质来源相同，性染色体组成一致，因此性别相同。
【小问4详解】
要提高胚胎利用率、获得更多子代，需要利用胚胎分割技术对早期胚胎进行分割，这属于无性繁殖（克隆）的一种。 若处理的是囊胚阶段的胚胎，分割时必须将内细胞团均等分割，因为内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，若分割不均，会导致胚胎恢复和发育能力差异，影响成活率。
30. 人干扰素是一种具有特定功能的蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来，人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我国科学家侯云德通过基因工程等技术研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。图甲和图乙为质粒和人干扰素α-1b基因的结构图。
回答下列问题：
（1）目的基因的获取和扩增。从_____细胞中提取_____，经逆转录获取目的基因，再通过PCR技术扩增目的基因。PCR在延伸最后阶段需要设置10min的原因是_____。
（2）表达载体的构建和筛选。应选取限制酶__________切割图甲中质粒与图乙中的目的基因，以防止目的基因与质粒_____、______。之后，用DNA连接酶连接并使用合适方法进行筛选。
（3）导入受体细胞。将大肠杆菌放于低温、低浓度的CaCl2溶液中，使之成为感受态细胞。再在低温条件下将感受态大肠杆菌与表达载体混合，然后进行短暂的_____处理，使外源DNA转入大肠杆菌。
（4）检测目的基因及表达产物。可用含有适宜浓度的______的培养基来筛选含有表达载体的大肠杆菌。若该物质浓度过低，可能会使检测结果出现假阴性。可采用_____方法来进一步检测目的基因的存在。为检测是否产生干扰素，分子水平上可采用_____的方法进行检测。
【答案】（1） ①. 被病毒诱导的白细胞（或免疫后的白细胞） ②. mRNA ③. 使所有DNA片段充分延伸，保证PCR扩增的完整性
（2） ①. BamHⅠ和HindⅢ ②. 自身环化 ③. 反向连接
（3）热刺激 （4） ①. 氨苄青霉素 ②. PCR技术##核酸分子杂交技术 ③. 抗原-抗体杂交
【解析】
【小问1详解】
据题干信息可知，干扰素的产生是在相关病毒诱导后的白细胞才能产生，没有病毒诱导一般是不会产生干扰素的，所以应从被相关病毒免疫的白细胞或者被相关病毒诱导后的白细胞中提取mRNA，通过逆转录后获得所需的目的基因。PCR在延伸最后阶段需要设置10min，使所有DNA片段充分延伸，确保PCR产物完整，提高扩增效率。
【小问2详解】
为了防止目的基因与质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接，应选用限制酶 BamHⅠ和HindⅢ 切割图甲中质粒与图乙中的目的基因。因为使用两种不同的限制酶切割可以产生不同的黏性末端，避免上述情况发生。
【小问3详解】
将大肠杆菌放在低温、低浓度的 CaCl2溶液中，使之成为感受态细胞。在低温条件下将感受态大肠杆菌与表达载体混合，然后进行短暂的热刺激处理，使外源DNA转入大肠杆菌。
【小问4详解】