北京市清华大学附属中学2025_2026学年高二下学期期中试卷生物学（文字版，含答案）

这是一份北京市清华大学附属中学2025_2026学年高二下学期期中试卷生物学（文字版，含答案），共15页。试卷主要包含了04，CD47是一种跨膜糖蛋白等内容，欢迎下载使用。
学部 班 姓名 考号
一、选择题（每题2分，共40分）
1. 发酵食品是中国传统食品中的一个重要类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。请结合所学发酵知识和生活经验，指出下列未经发酵的食品是
A. 豆腐B. 泡菜C. 食醋D. 酸奶
2. 啤酒生产依赖于发酵工程，产品质检可应用“电子舌”。电子舌可根据不同滋味信号传感器呈现的响应值对啤酒风味进行评价，结果如下图。下列相关叙述，不正确的是
A. 啤酒主要经酵母菌和乳酸菌发酵制成
B. 发酵原料应含有糖类作为发酵菌种的碳源
C. 发酵液L1和L2口味相似，而L3涩味较强
D. 菌种选育可依赖于突变筛选或转基因技术等
3. 丙草胺（C17H26NO2Cl）是一种被广泛应用的除草剂，还能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组为获得能修复污染土壤的微生物资源，从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株并对其计数，如图所示。下列有关叙述错误的是
A. 使用以丙草胺为唯一氮源的培养基属于选择培养基
B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小
C. 涂布前要检测培养基是否被污染可接种自来水后培养
D. 涂布培养的结果表明每克土壤中的菌株数约为1.7×109个
4. 科研人员在制备原生质体时，有时会使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。下列相关叙述，合理的是
A. 原生质体无法再生出细胞壁
B. 提取液中含有纤维素酶等蛋白质
C. 提取液含胰蛋白酶使原生质体分散
D. 制备原生质体时最好选用低渗溶液
5. 植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。下列过程中不涉及植物组织培养技术是
A. 培育甘蓝—萝卜的体细胞杂交植株
B. 用秋水仙素处理二倍体西瓜幼苗获得四倍体植株
C. 用植物茎尖培养可减少病毒感染的脱毒苗
D. 将抗虫基因转入棉花体细胞中获得转基因抗虫棉
6. 植物细胞工程与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是
A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性
B. 植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性
C. 原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性
D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂
7. 为检测某药物X的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入溶于二甲基亚砜的药物X，培养72小时后进行计数，比较实验组和对照组每个孔中细胞数目。下列有关叙述错误的是
A. 动物细胞培养液中通常需要加入血清等天然成分
B. 对照组中应加入等体积的无菌水，其他条件一致
C. 可用胰蛋白酶处理使贴壁的肝癌细胞脱落下来并进行计数
D. 若实验组细胞数远低于对照组，可初步判断此药物有抗癌效果
8. 我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得5只克隆猴，用于研究节律机制。以下叙述错误的是
A. 克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
B. 可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
C. 受精卵经基因编辑后形成的胚胎可直接发育为克隆猴
D. 克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
9.CD47是一种跨膜糖蛋白。它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验。
下列叙述不正确的是
A. 多次进行步骤①的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的B细胞
B. 步骤②中可以利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导完成细胞融合
C. 经筛选可得到既能产生抗CD47抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞
D. 对照组应在巨噬细胞+正常细胞共培养体系中加入单克隆抗体
10. 利用竞争酶联免疫检测技术，检测抗虫棉中Bt抗虫蛋白表达量，原理如下图所示。检测之前，将“目的蛋白”的特异性抗体固定在支持物上，待测样本中的抗原和酶标记抗原竞争结合该抗体，标记抗原的酶可催化颜色反应，未结合的抗原会被冲洗掉。下列说法不正确的是
注：“√”为加入，“×”为不加入
A. 该实验的原理是抗原与抗体特异性结合
B. 表1中①②处均为“×”
C. 三组的底物的量和显色时间必须一致
D. 反应体系中蓝色越浅说明待测样品Bt蛋白含量越低
11. 科学家尝试将经过基因修饰的猪心脏移植到人体，下列叙述错误的是
A. 器官移植中的免疫排斥主要由细胞免疫引起
B. 供体猪需敲除其参与免疫识别的相关基因
C. 猪心移植可能缓解器官移植中供体短缺问题
D. 由于种间差异无需担心供体携带的病毒基因
12.试管牛技术和核移植技术已应用于培育良种牛。相关叙述错误的是
A. 需要注射促性腺激素促进供卵母牛超数排卵
B. 试管牛技术和核移植技术培育良种牛均需进行胚胎移植
C. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
D. 试管牛技术和核移植技术均实现了良种牛的大量克隆
13. 研究者通过下图所示的操作过程，获得导入S基因的基因编辑小鼠。下列相关叙述正确的是
A. 过程①用促性腺激素处理以获得更多卵母细胞
B. 过程②在雌鼠a的输卵管内完成受精
C. 过程③需将表达载体注射到子宫中
D. 过程④需抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥
14. 有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是
A.iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同
B.iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多
C. 若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用
D. 植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，会使“渐冻症”病情改善
15. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一。该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列相关说法正确的是
A. 经过过程①获得的精子可以直接和卵细胞发生受精作用
B. 为了获得更多的早期胚胎，常用激素对供体进行处理，从而获得更多的精子
C. 过程③的培养液中加入各种无机盐、维生素、氨基酸、核苷酸、生长素等
D. 为了提高转化率，须将外源基因导入精子的头部才有可能使外源基因进入受精卵
16. 用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞，获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T₀。T-DNA插入基因的位置如图1所示。T₀自交得T₁，同时用P1、P2、P3为引物检测T₁个体的基因组成情况，如图2所示。（图1箭头方向为子链延伸方向；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2引物无法完成PCR）。下列叙述不正确的是
A. 该实验中所用的P1、P2、P3三种引物均为单链DNA
B.R基因被T-DNA插入后导致基因突变，可能无法表达相应蛋白
C. 用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体均为R基因纯合子
D. 若调查样本量足够大，W、H、M个体的比例约为1：2：1
17. 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是
①将毒素蛋白注射到棉花受精卵中
②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉花受精卵中
③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养
④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉花的子房并进入受精卵
A. ①②B. ②③C. ③④D. ④①
18. 生物工程中，所用物质与其发挥的作用不能对应的是
A. 限制酶——识别DNA分子特定核苷酸序列并断开磷酸二酯键
B. 载体——携带目的基因导入受体细胞
C. 标记基因——鉴别筛选目的基因是否导入受体细胞
D. 钙离子——增大植物细胞的通透性
19. 生物技术操作对遗传物质的改造，不能遗传给子代的是
A. 将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌
B. 将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗
C. 将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞，经组培获得耐寒能力增强的番茄植株
D. 将生长激素基因导入奶牛受精卵，培育出能分泌含生长激素乳汁的奶牛
20．假设A、b代表玉米的优良基因，这两种基因是自由组合的。 现有AABB、aabb两个品种，为培育优良品种AAbb，可采用的方法如图所示。下列叙述中正确的是
A．若经过②过程产生的基因型为Aabb的类型再经过③过程，则子代中Aabb与aabb的数量比是3：1
B．⑥过程需要用秋水仙素处理，利用染色体变异的原理，是多倍体育种
C．可以定向改造生物性状的方法是④，其原理是基因突变
D由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出新品种的育种方法操作简单，但培育周期长
二、简答题（除特殊说明外每空1分，共60分）
21.（8分）
深海具有高压、黑暗等极端环境特征。我国科考船在南海采集到深海冷泉沉积物，从中分离培养微生物，并对深海微生物耐高压的生存机制进行了研究。
（1）我国科学家利用如图1所示过程分离培养深海微生物。
①研究发现深海沉积物中富含胞外DNA，推测这些DNA可以作为微生物生存所需的 等营养物质，因此在培养基中添加了DNA。
②将得到的菌液与II所用的培养基混合注入充满N2的密闭试管中。将试管在冰水混合物中迅速滚动，培养一段时间后可在试管壁的薄层培养基上获得单菌落。与I相比，II所用培养基中还需要添加的是 。按照对O2的需求划分，所培养的微生物属于 型。
③如图III，研究人员从 水平对微生物的种类进行了鉴定，最终获得了纯培养物，并命名为鮸父鱼菌，为进一步研究奠定了基础。
（2）深海微生物能够利用TMA转运蛋白从深海环境吸收TMA，在TMA单加氧酶的作用下合成TMAO。为研究TMAO与微生物耐受高压能力的关系，将构建的3种不同质粒分别导入不耐高压的大肠杆菌，在高压下用含有TMA的培养基培养48h，实验结果如图2所示。
分析实验结果得出的结论合理的有 （选填下列选项）。
A. 转基因操作对常压下甲组大肠杆菌的生存能力无明显影响
B. 细胞中的TMAO降解酶能够增强大肠杆菌耐受高压的能力
C. 细胞中的TMA和TMA单加氧酶都会影响大肠杆菌耐受高压的能力
D. 细胞中的TMAO含量与大肠杆菌耐受高压能力呈正相关
22.（10分）学习以下材料，回答问题。
基因魔剪：CRISPR/Cas系统
2020年诺贝尔化学奖授予Emmanuelle Charpentier和Jennifer Dudna，以表彰她们开发了一种高精度基因组编辑的方法——CRISPR/Cas9基因剪刀。
之前，Mjica曾观察到微生物基因组里有一些奇怪片段：这些片段长30个碱基，且会不断重复；在两段间有长约36个碱基的间隔，Mjica给片段起名“成簇规律间隔短回文重复序列”（简称CRISPR）。2003年，Mjica教授惊喜地发现，一些大肠杆菌内的CRISPR序列，与一种叫做“P1噬菌体”的病毒的碱基序列高度吻合。Mjica教授立刻意识到，这与人类的免疫系统何其相似！
之后几年里，科学家们阐明了CRISPR的作用详细机理：CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和人工设计的gRNA构成。在gRNA引导下，Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断。随后细胞通过自身的DNA损伤修复机制，将断裂上下游两端的序列连接起来，但通常会在断裂处造成少量核苷酸的插入或缺失（如图1中①）。当DNA双链断裂后，如果细胞中有DNA修复模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列组成），断裂部分可依修复模板进行精确修复，从而将目的基因插入到特定位点（如图1中②）。
通过在Cas9基因中引入突变，获得了只有切割一条链活性的nCas9。将nCas9与胞嘧啶脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶融合，科学家开发出了单碱基编辑技术（图2），能够对靶位点进行精准的碱基编辑，最终可以分别实现C→T（G→A）或A→G（T→C）的碱基替换。
对CRISPR/Cas系统的不断改造，使其在基因编辑外，还可用于激活或抑制基因的转录等。虽然目前CRISPR/Cas技术还存在一些不足，如脱靶问题等，但作为一种革命性的技术，其应用前景广阔。
（1）利用CRISPR/Cas9技术进行基因编辑，需构建含 的重组DNA，并导入受体细胞。gRNA依据 原则与靶序列特异性结合，引导Cas9蛋白进行切割。
（2）有些遗传病是由于基因中一个碱基对的改变引起的，如果要修正此基因突变，图示的三种途径中，哪种（填写①-③）更合适？请判断并说明理由。
（3）将CRISPR/Cas9技术用于抑制基因转录时（不改变基因的碱基序列），需对CRISPR/Cas9系统进行改造和设计，对Cas9基因的改造，使Cas9蛋白失去 的功能，且对gRNA基因碱基序列进行设计，设计后的gRNA基因碱基序列 。
（4）CRISPR/Cas9技术可实现对特定基因位点切割，如果将其类比于“抗体-药物偶联物”，gRNA和Cas9蛋白分别对应于抗体-偶联药物中的 。
（5）将CRISPR/Cas9技术应用于人类基因的编辑时，特别要注意安全性和 方面的问题。
23.（11分）
在单克隆抗体（简称单抗）治疗过程中，癌细胞会发生免疫逃逸，出现耐药性。研究癌细胞的免疫逃逸机制有重要意义。
（1）机体识别并清除癌细胞，属于免疫系统的 功能。免疫功能的发挥依赖于各种免疫细胞，如 细胞（一种即可）、NK细胞等。乳腺癌细胞膜蛋白E含量显著升高，成为常用的单抗治疗靶点。如图1，当抗E单抗结合E蛋白，NK细胞能够通过结合抗体的另一区域，接近并杀伤癌细胞。
（2）NAT8L是中枢神经系统神经元的重要表达产物，长期使用单抗治疗可能出现耐药性，这些患者的乳腺癌细胞中NAT8L基因表达明显上调。推测NAT8L减弱了NK细胞对肿瘤生长的抑制作用。如图2进行实验，结果证实推测成立。选择实验材料填入表中完善实验方案并填写实验结果。
实验材料：a.小鼠乳腺癌细胞系 b.转入E基因的小鼠乳腺癌细胞系（E+） c.敲除NAT8L基因的E+ d.对人E蛋白无排异反应的小鼠 e.不产生免疫细胞的免疫缺陷小鼠
注：“+”越多表示肿瘤体积越大
（3）NK细胞接近癌细胞后，与癌细胞之间形成特定连接结构，穿孔素在连接处聚集后释放，诱导癌细胞凋亡。研究证实NAT8L催化生成的NAA是对NK细胞产生影响的物质，用不同预处理的NK细胞与乳腺癌细胞共培养，实验结果如图3所示。综合上述信息，推测在单抗治疗过程中，乳腺癌细胞形成免疫逃逸的机制。
NK细胞与乳腺癌细胞共培养
（4）研究发现，中枢神经系统神经元高表达NAT8L可能是机体的一种自我保护机制。若以NAT8L作为肿瘤治疗的靶点，请从降低副作用的角度，提出一个进一步研究的具体问题。
24.（9分）
人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：
（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是____，若BamHⅡ酶切的DNA末端与BclⅡ酶切的DNA末端连接来，连接部位两种酶____（填“都不能”或“只有一种能”）切开。
（2）若选用牛作为转基因动物可将人乳铁蛋白基因与____基因的启动子等调控组件重组在一起，可通过____方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。
（3）据图分析，初步筛选时，含有重组质粒的受体细应表现为____。
（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好，形态正常的____，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。
（5）若利用转基因大肠杆菌（工程菌）则不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为____。
25.（10分）
新冠病毒的疫苗研发过程和新冠病毒的检测都需要用到现代生物技术。图1为科研人员研发新冠病毒一种疫苗的思路，图中①~⑦表示过程。图中质粒B上的箭头分别表示NcI、SphI、NheI、BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表2），标记基因“SUC2”控制合成蔗糖酶，其能使P型酵母菌利用培养基中的蔗糖。
表2
（1）图中①过程需要使用____酶先得到cDNA，再使用____技术扩增得到S基因。
（2）图中③过程需使用限制酶____切割质粒B，再用DNA连接酶连接构建重组DNA分子，两种酶催化的化学键都是____。
（3）图中表示筛选的过程是____（填序号），为达到筛选的目的，普通的P型酵母菌应满足的条件是____。
（4）新冠病毒感染的常规检测方法是实时荧光PCR（原理如图3甲示意）。实时荧光PCR扩增目的基因时，需额外添加荧光标记探针（一小段单链DNA，可与目的基因中部分序列特异性结合），当探针结构完整时，无荧光。在PCR的子链延伸过程中，与模板结合的探针被耐高温的DNA聚合酶水解，R与Q分离后，R可发出荧光且被检测到。使用该技术检测样本中新冠病毒时，检测到的荧光强度变化如图3乙。
①如图3乙，与指数增长期相比，线性增长期荧光强度增长速度迅速上升的原因是____。
②Ct值的含义：在PCR扩增过程中，每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此，当样本中初始模板越少时，Ct值就越____。
③某新冠病毒核酸检测说明书中标明，Ct≤37判定为“阳性”，Ct>40或无Ct值判定为“阴性”。图乙所示结果应判定为____。
④阴性结果也不能完全排除新冠病毒感染，以下选项可能是产生假阴性的原因是（填字母） 。
a.样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解
b.取样太少，样本中病毒量少
26.（12分）
萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。
（1）研究者用相同的 酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经 处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。
（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。
①这是一种定点的 技术。
②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。
（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和 分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用 方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较 的大小，以确定表达产物的生物活性大小。
（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是 。
高二第二学期期中试卷
生物学 参考答案
2026.04
一、选择题（每题2分，共40分）
二、简答题（除特殊说明外每空1分，共60分）
21.（8分）
（1）①碳源、氮源（2分） ②琼脂 厌氧 ③分子、细胞、群体（2分）
（2）ACD（2分）
22.（10分）
（1）gRNA基因和Cas基因（2分） 碱基互补配对
（2）③（或②） 能够对突变基因进行精确编辑
（3）剪切DNA
转录形成的gRNA与靶基因的启动子区域序列互补
（4）抗体、药物（有顺序）（2分）
（5）伦理
23.（11分）
（1）免疫监视B/T/巨噬等
（2）（5分）
（3）使用单抗治疗乳腺癌的过程中，癌细胞高表达NAT8L，产生大量NAA，NAA抑制穿孔素在NK细胞与癌细胞连接处聚集，减少穿孔素释放，降低NK细胞对癌细胞的杀伤作用，形成免疫逃逸。（3分）
（4）从使用剂量、使用时间、药物靶向性等角度作答（合理即可）。
24.（共9分）
（1）Sau3A都不能
（2）牛乳腺蛋白（在乳腺细胞特异性表达的） 显微注射
（3）能在含氨苄青霉素的培养基上存活，不能在含有四环素的培养基上存活（2分）
（4）桑葚胚或囊胚（2分）
（5）大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
25.（10分）
（1）逆转录 PCR
（2）NcI和NheI 磷酸二酯键
（3）⑤ 不能利用蔗糖
（4）①前期扩增得到数量较多的DNA，作为模板DNA增多，单位时间水解的探针数增加
②高 ③阳性 ④ab
26.（12分）
（1）限制酶和DNA连接 CaCl2
（2）①基因突变
②如下表所示。（注：正确填写PCR1、PCR2、PCR3、PCR4的引物组合之一，每填对一个得1分，共4分。）
（3）含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）（2分）
抗原-抗体杂交 抑菌圈
（4）对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。（答对一点或其他合理答案均可得分）
试卷答案
一、选择题（每题2分，共40分）
二、简答题（除特殊说明外每空1分，共60分）
21.（8分）
（1）①碳源、氮源（2分）
②琼脂 厌氧
③分子、细胞、群体（2分）
（2）ACD（2分）
22.（10分）
（1）gRNA基因和Cas基因（2分） 碱基互补配对
（2）③（或②） 能够对突变基因进行精确编辑
（3）剪切DNA转录形成的gRNA与靶基因的启动子区域序列互补
（4）抗体、药物（有顺序）（2分）
（5）伦理
23.（11分）
（1）免疫监视B/T/巨噬等
（2）（5分）
组别2供体鼠：植入细胞c的小鼠d；受体鼠：小鼠e；肿瘤体积：+
组别3受体鼠：小鼠e；肿瘤体积：++++
（3）使用单抗治疗乳腺癌的过程中，癌细胞高表达NAT8L，产生大量NAA，NAA抑制穿孔素在NK细胞与癌细胞连接处聚集，减少穿孔素释放，降低NK细胞对癌细胞的杀伤作用，形成免疫逃逸。（3分）
（4）从使用剂量、使用时间、药物靶向性等角度作答（合理即可）。
24.（共9分）
（1）Sau3A都不能
（2）牛乳腺蛋白（在乳腺细胞特异性表达的） 显微注射
（3）能在含氨苄青霉素的培养基上存活，不能在含有四环素的培养基上存活（2分）
（4）桑葚胚或囊胚（2分）
（5）大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
25.（10分）
（1）逆转录PCR
（2）NcI和NheI磷酸二酯键
（3）⑤ 不能利用蔗糖
（4）①前期扩增得到数量较多的DNA，作加
②高
③阳性
④ab
26.（12分）
（1）限制酶和DNA连接CaCl
（2）①基因突变
②
| |引物A|引物B|引物C|引物D|
| | | | | |
|PCR1|√|√|×|×|
|PCR2|×|×|√|√|
|PCR3|×|×|×|×|
|PCR4|√|×|×|√|
（3）含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒抑菌圈
（4）对人、畜、农作物和自然环境安全；答对一点或其他合理答案均可得分）
为模板DNA增多，单位时间水解的探针数增
（pET质粒）（2分） 抗原抗体杂交
不会造成基因污染；有效成分纯度较高（待测抗原
酶标记抗原
实验组
√
√
对照组1
①
√
对照组2
√
②
组别
供体鼠
获取NK细胞
受体鼠
肿瘤体积
1
植入细胞b的小鼠d
由供体鼠肿瘤区域分离NK细胞并注入受体鼠
已植入细胞c的小鼠
+++
2
植入细胞 的小鼠

3
/

限制酶
BamH Ⅰ
Hae Ⅲ
Bcl Ⅰ
Sau3A Ⅰ
Nt Ⅰ
识别序列及切割位点
GGATCC↓CCTAGG↑
GGCC↓CCGG↑
TGATCA↓ACTAGT↑
GATC↓CTAG↑
GCGGCCGC↓CGCCGGCG↑
限制酶
NcI
SphI
NheI
BamHI
识别序列和切割位点
C↓CATGG
GCATG↓C
G↓GATCC
G↓CTAGC
引物A
引物B
引物C
引物D
PCR1
PCR2
PCR3
PCR4
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
A
A
C
B
B
B
B
C
D
D
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
D
D
A
A
D
C
C
D
B
D
组别
供体鼠
获取NK细胞
受体鼠
肿瘤体积
1
植入细胞b的小鼠d
由供体鼠肿瘤区域分离NK细胞并注入受体鼠
已植入细胞c的小鼠e
+++
2
植入细胞 的小鼠
+
3
/
/
++++
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
A
A
C
B
B
B
B
C
D
D
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
D
D
A
A
D
C
C
D
B
D