第38讲 微生物培养技术和应用（专项训练）（含答案）2026年高考生物一轮复习讲练测（全国通用）

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题型一 培养基的成分及功能
1．下列叙述正确的是（ ）
A．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质
B．无菌技术包括对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
C．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌，以免污染环境
D．固体培养基中的琼脂可为微生物的生长提供能量
2．如表为某培养基的配方，下列叙述错误的是（ ）
A．从物理性质看，该培养基属于固体培养基
B．该培养基含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
C．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物生长越有利
D．配制好培养基后，应使用湿热灭菌法进行灭菌
3．某研究团队在实验室培养从雨林土壤中分离的微生物。请根据微生物培养的基本原理，判断以下叙述正确的是（ ）
A．牛肉膏和蛋白胨来源于微生物
B．固体培养基中加入少量水也不能制成液体培养基
C．培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性
D．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
4．科研工作者从药用植物石斛中分离得到一株好氧型枯草芽孢杆菌菌株，通过培养、发酵可用于水产养殖，提高水产动物的生长速度。下列叙述不正确的是（ ）
A．从药用植物石斛中分离的枯草芽孢杆菌具有独特的生物学特性，可能与石斛提供的特殊环境有关
B．对该枯草芽孢杆菌进行培养时，培养基中需添加水、碳源、氮源、无机盐等营养物质
C．枯草芽孢杆菌的染色体主要由DNA和蛋白质组成的，核糖体的形成与核仁有关
D．此枯草芽孢杆菌可能分泌多种酶帮助动物消化饲料，提高饲料转化率，从而促进水产动物生长
5．发酵工程中微生物的培养是一项基础技术。下列叙述错误的是（ ）
A．通常情况下琼脂可作为凝固剂也可作为微生物的碳源
B．蛋白胨主要为细菌的生长提供碳源、氮源和维生素
C．可设置一组未接种的平板倒置培养以检测培养基的灭菌状况
D．平板上长出的一个菌落一般可代表原稀释液中的一个活菌
题型二 无菌技术
6．根腐病是一种真菌引起的疾病，该病会造成根部腐烂，吸收水分和养分的功能逐渐减弱，最后全株死亡，主要表现为整株叶片发黄、枯萎。如需从土壤中分离致病真菌，流程大致如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（ ）
A．为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置
B．倒平板前需要将pH调整到中性或弱碱性
C．高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是100kPa、121℃，15～30min
D．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
7．金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（ ）
A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂
B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样
C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma
D．接种培养Ma时使用的器具需消毒
8．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。在选择消毒和灭菌方法时，应根据实验的具体情况和需要，综合考虑各种因素，选择最适合的方法。同时，还应注意操作过程中的具体步骤问题。下列相关叙述错误的是（ ）
A．微生物纯培养时，对培养基及培养用具需进行严格灭菌处理
B．在酒精灯火焰附近，不能将培养皿盖完全打开然后倒入培养基
C．玻璃器皿、金属用具可以干热灭菌，培养基一般进行湿热灭菌
D．经巴氏消毒法处理的食物因微生物被彻底消灭，可在常温下长期保存
9．大肠杆菌在伊红-亚甲蓝琼脂培养基（EMB）上会形成有金属光泽的深紫色菌落。利用EMB鉴定冰淇淋中的大肠杆菌是否超标，相关操作正确的是（ ）
A．培养基经干热灭菌后再倒平板B．冰淇淋原液可不经稀释直接涂布在培养基上
C．EMB上形成的菌落均呈有金属光泽的深紫色D．使用过的培养基可以直接丢弃
10．消毒和灭菌是两个不同的概念。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物（含芽孢和孢子）；消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。下列适用于消毒处理的是（ ）
①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀
A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩
C．①②③④⑤⑥⑧D．以上全部
题型三 微生物的接种
11．培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是（ ）
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤巴氏消毒法
A．⑤②③④①B．①②③④⑤C．③②①④⑤D．③②④①⑤
12．防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，下列关于微生物的基本培养技术的叙述，正确的是（ ）
A．培养微生物时获得纯微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B．倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质
D．接种时，为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
13．分离和纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法。下列叙述错误的是（ ）
A．分离和纯化微生物所用的培养基常用湿热灭菌法进行灭菌
B．用蘸有菌液的接种环划一条线后，再次蘸取菌液继续划线
C．稀释涂布平板法操作时，利用无菌水进行梯度稀释以分散菌种
D．用两种方法分别将同种霉菌接种于同一培养基上，得到的菌落特征基本一致
14．微生物的实验室培养有较高的技术要求，下列操作不符合规范的是（ ）
A．倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置
B．配制培养基时，应先调节pH，再进行灭菌处理
C．浸泡在酒精中的玻璃涂布器无需再灼烧灭菌
D．用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环
15．空气细菌总数测定主要有自然沉降法和撞击法。自然沉降法是让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面，撞击法是将一定量空气以较高的流速喷射撞击到琼脂平板上，空气中的细菌即滞留在琼脂表面，关于自然沉降法和撞击法，下列说法错误的是（ ）
A．用于检测空气细菌总数时，都需对不同方位和高度的空气进行采样
B．撞击法采样不受环境气流影响，对洁净空气中细菌总数的测定比自然沉降法更准确
C．两种方法均可使用牛肉膏蛋白胨培养基培养
D．两种方法取样后在琼脂平板上形成的菌落均为单菌落
题型四 微生物的分离和计数
16．下列关于微生物的选择培养和计数方法，叙述错误的是（ ）
A．菌液的稀释倍数会影响活菌计数法计数结果的准确度
B．不含氮源或碳源的培养基也能用于某些微生物的培养
C．能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长、繁殖的一定是尿素分解菌
D．用营养齐全的培养基在80℃条件下培养栖热菌属于选择培养
17．科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图，经步骤③最后一次稀释之后若在 3 个平板上分别接入 0.1 mL 稀释液，经适当培养后，得到的结果是 39、38、37。下列叙述正确的是（ ）

A．步骤②振荡 20 min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中
B．步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径与菌落直径比值较小的菌落培养
C．步骤⑤中的接种方法为平板划线法，3 次划线时需要对接种环灼烧 3 次
D．每克土样中的活菌数为 3.8×104个，该法统计的结果往往比实际值偏低
18．研究发现，某些昆虫的肠道内存在 PE（一种合成塑料）降解菌。实验小组利用如图的流程从昆虫的肠道中筛选能够降解 PE 的菌株，下列有关说法中错误的是（ ）
A．选择扩大培养的培养基中应加入 PE 作为唯一碳源
B．选择扩大培养的目的是增大 PE 降解菌的相对浓度
C．划线纯化不仅可以分离菌株还可以统计菌株的数量
D．划线纯化时每次划线开始前和结束后都要灼烧灭菌
19．某种含氮有机物的除草剂，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。其在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤破坏生态环境。为修复被破坏的生态环境，按下图选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（ ）
A．未使用该除草剂的农田中一定不存在能降解该除草剂的细菌
B．图中Ⅱ划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌5次
C．图中接种方法为平板划线法，可对细菌进行计数
D．有透明圈的菌落能够利用除草剂中的氮源，应扩大培养
20．在抗生素大规模发酵生产前，需对接种的菌种进行分离、纯化和鉴定，其操作流程如下图所示，为鉴定青霉素生产菌产抗生素的能力，培养皿丙中需预先涂布（ ）
A．生理盐水B．大肠杆菌C．青霉素D．青霉素生产菌
1．（以根瘤菌为情境）根瘤菌是最早用于生物肥料研发的微生物，其菌肥生产需经菌种选育、种子液制备、发酵罐发酵、质量检测等流程。下列说法正确的是（ ）
A．菌种选育时，需用含碳源、氮源等营养的培养基进行筛选
B．在质量检测中的活菌计数时，可采用涂布平板法进行接种
C．发酵罐发酵条件不同，仅影响代谢产物含量不影响其种类
D．田间应用时，根瘤菌主要通过产生有机酸来增加土壤肥力
2．（2025·陕西西安·一模）关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列说法错误的是（ ）
A．取样时要选择表层土，取土样的铁铲和取样纸袋要进行灭菌处理
B．本实验中使用的平板较多，需要在各培养皿底上做好标记避免混淆
C．利用显微镜直接计数结果通常较稀释涂布平板法进行计数的结果偏高
D．若涂布0.2mL稀释103倍的培养液，获得菌落平均值为58，则每克土样中尿素分解菌数为2.9×105个
3．（2025·湖南永州·一模）某同学欲用市场售卖的泡菜汁进行耐酸的乳酸杆菌分离或计数，下列操作正确的是（ ）
A．将泡菜汁直接涂布于固体培养基，培养一段时间便可得到单菌落
B．可用平板划线法对乳酸杆菌进行分离和计数
C．在固体培养基中加入碳酸钙，挑取透明溶钙圈最大的菌落即为目标菌
D．培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素并提供无氧的环境
4．（2025·福建漳州·一模）科研小组用双层平板法测定某污水样本中噬菌体的数量，操作流程是：①先铺2%琼脂于培养皿底层，形成底层琼脂培养基；②将敏感指示菌和待测污水样本混合液，加入已熔化并降温至45～48℃的1%琼脂培养基中，迅速倾注于底层培养基上，形成上层培养基；③倒置培养一段时间后，计数噬菌斑。双层平板如下图所示。下列叙述正确的是（ ）

A．倒平板前需对培养基和培养皿进行干热灭菌
B．可用酵母菌作为敏感指示菌对T2噬菌体进行计数
C．上层培养基冷却至45～48℃，主要目的是防止底层培养基液化
D．上层培养基中琼脂浓度较低，形成的噬菌斑较大便于计数
5．（2025·河北秦皇岛·模拟预测）为探究某种细菌A抑制真菌B生长的原理，实验组将细菌A接种在A1平板上，B1平板中央接种直径为0.5cm的真菌B菌落，把两个培养皿对扣，两平板上菌株无接触，放在适宜环境中培养5d，菌体生长情况如图中甲组所示。下列叙述正确的是（ ）
A．接种前需对培养基和培养皿通过干热法进行灭菌
B．需将含有细菌A的菌液进行稀释后涂布在A1平板上
C．乙组为对照组，且A2平板上接种的是无菌水
D．细菌A通过与真菌B竞争营养物质抑制其生长
6．（2025·湖南长沙·一模）科研人员先在12个固体培养基上各涂以数目相等（约5×104个）的对T1噬菌体敏感的大肠杆菌，经5h培养后，平板上长出大量的微菌落（约5100个细胞/菌落）。取其中6个（A组）直接喷上T1噬菌体，另6个（B组）则先用灭菌后的涂布器把平板上的微菌落重新均匀涂布一遍，然后喷上等量T1噬菌体。培养后计算这两组平板上形成的抗T1噬菌体的菌落数。结果发现，A组长出28个菌落，B组长出353个菌落。下列说法正确的是（ ）
A．该实验通过等比稀释的操作对微菌落进行计数
B．B组中所使用的培养基为选择培养基
C．B组的涂布使单个抗T1噬菌体自发突变大肠杆菌形成一个菌落的概率增加
D．该实验证明重新涂布后再喷T1噬菌体导致了抗性突变的大量发生
7．（以小龙虾为情境）小龙虾因肉味鲜美而广受欢迎。为提高小龙虾虾壳废弃物中甲壳素[分子式为 的利用率，某小组欲从土壤中筛选出能高效降解甲壳素的菌株。鉴别培养基可用于区分不同类型的微生物。下列相关叙述正确的是（ ）
A．土壤取样时需在小龙虾虾壳堆积较多的土壤中挖取表层土
B．所用鉴别培养基需以小龙虾虾壳粉作为唯一的碳源和氮源
C．每隔24小时计数一次，以菌落数目稳定时的记录作为结果
D．实验时需注意无菌操作，纯化后的菌种可在室温下长期保存
8．（2025·山东青岛·三模）随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。下列说法正确的是（ ）

A．诱变选育高产菌株时，通过向培养基加入刚果红染液，选择透明圈大的即为目的菌株
B．可使用紫外线进行诱变，无需筛选即可得到产纤维素酶高的菌种
C．能在以纤维素为唯一碳源培养基中生长的菌株一定是纤维素分解菌
D．富集培养应使用液体培养基，目的是能得到更多能产纤维素酶的菌株
9．（2025·云南丽江·一模）下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ）
A．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂
B．⑨计数得到的细菌数与用显微镜直接计数法得到的细菌数相比较多
C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求
D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌
10．（2025·山东聊城·三模）研究人员欲筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物以降解餐余垃圾，进行的操作如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理
B．可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上
C．X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基
D．图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型
1．（2025·广西·高考真题）利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是（ ）
A．厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率
B．对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率
C．厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源
D．含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解
2．（2025·贵州·高考真题）金龟子绿僵菌（Ma）是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子（单细胞后代）萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是（ ）
A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂
B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样
C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma
D．接种培养Ma时使用的器具需消毒
3．（2025·四川·高考真题）微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．用平板划线法能测定X菌组中的活菌数
B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高
C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
4．（2025·湖南·高考真题）采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是（ ）
A．稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数
B．完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照
C．土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分离成乙酸
D．用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质
5．（2025·江苏·高考真题）从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（ ）
A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌
B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
6．（2025·山东·高考真题）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ）
注： “+”表示有；“一”表示无
A．可用平板划线法对该菌计数
B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长
D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
7．（2025·黑吉辽蒙卷·高考真题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（ ）
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
8．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（ ）
A．组别①是②③④⑤的对照组
B．培养温度和时间属于无关变量
C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸
D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型
9．（2024·江苏·高考真题）某同学进行下列实验时，相关操作合理的是（ ）
A．从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌
B．观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋
C．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理
D．鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色
10．（2024·重庆·高考真题）养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ）
A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落
B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验
C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙
D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少
11．（2024·浙江·高考真题）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（ ）
A．镍是组成脲酶的重要元素
B．镍能提高尿素水解反应的活化能
C．产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖
D．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌
12．（2024·山东·高考真题）酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（ ）
A．X→Y→ZB．Z→Y→XC．Y→X→ZD．Z→X→Y
目录
01 课标达标练
【题型一】培养基的成分及功能
【题型二】无菌技术
【题型三】微生物的接种
【题型四】微生物的分离和计数
02 能力突破练（新角度+新情境+新考法）
03 高考溯源练（含2025年高考真题）
成分
尿素
葡萄糖
K2HPO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
琼脂
H2O
含量
1.0g
10.0g
1.4g
2.1g
0.2g
15.0g
定容至1000mL
组别
压强
纤维素
淀粉
菌落
①
常压
-
+
-
②
常压
+
-
-
③
高压
-
+
-
④
高压
+
-
+
组别
培养条件
实验结果
①
基础培养基
无法生长
②
基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸
正常生长
③
基础培养基+甲、乙2种氨基酸
无法生长
④
基础培养基+甲、丙2种氨基酸
正常生长
⑤
基础培养基+乙、丙2种氨基酸
正常生长