天津市静海区第四中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份天津市静海区第四中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版），共33页。试卷主要包含了单选题，选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单选题：本大题共25小题，共50分。
1. 在制作果酒、果醋、腐乳、泡菜的发酵过程中，菌种由原料本身提供的有（ ）
①果酒 ②果醋 ③腐乳 ④泡菜
A. ①②B. ②③C. ③④D. ①④
2. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精
B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵
D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用
3. 下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A. 传统发酵技术的目的是获得发酵产品或更多的微生物
B. 当缺少糖源时醋酸菌进行无氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸
C. 以乙醇为底物进行果醋发酵时发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的气泡量
D. 进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止乳酸菌产生CO2导致发酵液溢出
4. 下列有关实验的描述中，正确的有（ ）
①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系
②果酒发酵的最适温度为30～35℃，果醋发酵的最适温度为18～30℃
③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主
④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种均是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种均是原核生物
⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，才可以洗得彻底
⑥制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖
A. 1项B. 2项C. 3项D. 4项
5. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列相关表述正确的是（ ）
A. 发酵工程的中心环节是菌种的选育和扩大培养
B 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
D. 发酵过程中，条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不会影响微生物的代谢途径
6. 下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ）

A. 图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响
B. 图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率（V2）的影响
C. 图3能表示在利用乳酸菌制泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸的变化趋势
D. 图4能表示在一普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化
7. 图1是制作果酒和果醋的简易装置，图2是制作果酒或果醋过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 果酒发酵阶段，若开错气阀，则会导致发酵液溢出
B. 果醋发酵阶段，醋酸菌进行④过程时发酵液中糖类充足
C. 制作果酒的主要发酵菌进行①和②过程的场所是线粒体
D. 制作果醋的主要发酵菌进行④过程时不需要O2的参与
8. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养。下列说法正确的是（ ）
A. 牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH
B. 蛋白胨可为大肠杆菌生长提供氮源、碳源和维生素
C. 倒平板操作中，平板未凝固时迅速将平板倒过来放置
D. 用显微镜直接计数的菌落数往往比活菌实际数目低
9. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（ ）
A. 每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌
B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C. 接种环共灼烧了4次
D. 不能将a区和d区划线相连
10. 在生产，生活和科研实践中，经常通过无菌操作技术避免杂菌的污染。下列有关无菌技术的叙述，正确的是（ ）
A. 通过消毒或灭菌，可将所有的杂菌，孢子和芽孢等都杀灭
B. 接种环，接种针等用具应在酒精灯火焰内焰部位灼烧灭菌
C. 为避免环境污染，操作尽量在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行
D. 对于牛奶等不耐高温的液体，一般采用紫外线照射法进行消毒
11. 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基
B. 测定土壤中分解尿素细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度
C. 细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高
D. 利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定
12. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图。据图分析正确的是（ ）
A. 4号稀释液培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍
B. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
C. 将稀释液涂布到以尿素为唯一碳源的选择培养基上培养
D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
13. 刚果红是一种可以与纤维素形成红色复合物的燃料，但不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生反应。在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是（ ）
A. 透明圈内的刚果红染料已被分解
B. 菌落②中的菌株降解纤维素能力最强
C. 图中菌落可能是细菌也可能是真菌
D. 图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制
14. 一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌富集培养，然后重复上述步骤培养三代，结果如下表所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B. 需要用特定的方法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C. 平板中①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用
D. 随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强
15. 某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性），科学家用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中列出的菌株类型。依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（ ）（注：L-亮氨酸 、 S-链霉素，“+”-加入，“-”-不加入，如，L-：不加入亮氨酸，S+：加入链霉素）
A. AB. BC. CD. D
16. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
17. 如图是四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图。下列相关叙述中正确的是( )
A. ②阶段会发生减数分裂过程
B. ①阶段需生长素，而③阶段需细胞分裂素
C. 此过程体现了植物细胞具有全能性
D. 此兰花的花药经离体培养所得植株为二倍体
18. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（ ）
A. 利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种
B. 利用植物细胞培养获得的紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产
C. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以提高基因突变率，获得有用的突变体
D. 利用植物体细胞杂交技术，能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
19. 下图示植物细胞融合及组织培养过程。下列说法中不正确的是（ ）。
A. 植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍
B. 杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株，说明杂种细胞具有全能性
C. 若A细胞的基因型为Rr，B细胞为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy
D. 尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养
20. 利用植物体细胞杂交技术获得优良新品种的过程中，不必考虑的问题是（ ）
A. 杂种细胞的筛选和培养B. 选择具优良性状的亲本
C. 亲本体细胞去壁后融合D. 亲本是否存在生殖隔离
21. 下列过程与植物细胞工程无关的是（ ）
A. 培育单倍体植株
B. 嫁接与扦插
C. 培养红豆杉细胞生产紫杉醇
D. 培育“番茄——马铃薯”杂种植株
22. 下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的（ ）
A. 无菌、无毒的环境
B. 充足的营养物质
C. 适宜的温度和pH
D. 95%的空气和5%的氧气
23. 对某种动物的肝肿瘤细胞进行动物细胞培养。下列说法不正确的是（ ）
A. 在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是抑制细胞呼吸
C. 为了防止细胞培养过程中细菌污染，可向培养液中加入适量的抗生素
D. 在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分
24. 动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质，下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，由此图获得的正确结论有（ ）
①有无血清对正常细胞培养的影响不同
②正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
③培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
④培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
A. ①③B. ①③④C. ③④D. ①②④
25. 4月13日，《自然》杂志刊发干细胞领域重大突破——运用化学小分子实现细胞命运的重编程，即将人成体细胞转变为干细胞。该成果由北京大学生命科学学院、北大-清华生命联合中心邓宏魁研究团队完成，只需在人皮肤细胞的培养液中滴上几种化学小分子制剂，一个月后皮肤细胞就能转变为干细胞，具有重新发育成所有已知的人体细胞类型的能力。下列说法错误的是（ ）
A. 干细胞是从胚胎中分离提取的细胞，造血干细胞属于成体干细胞
B. 该研究团队诱导皮肤细胞获得干细胞属于诱导多能干细胞（iPS）
C. 由上述方法获得的细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥
D. 由该技术获得的特定细胞，有望在新药的测试中发挥重要作用
二、选择题：本大题共4小题，共50分。
26. 利用传统发酵技术制作食品，历史悠久，请参照表中内容完成下表。
27. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加_________以外，还应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。
（2）统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得的菌落数的平均值是a，则1g土壤中含有此菌的菌株数是_________。统计获得的菌落数比实际的活菌数_________（填“多”或“少”），原因是____________。
（3）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的工具是_________，在第一区域划线后须将该工具_________后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是_________。
（4）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，_________是产植酸酶最理想的菌株。
28. 野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。据图回答：
（1）该过程用到的细胞工程技术称为______。
（2）过程①所需的酶是______，过程②中PEG的作用是______，经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的______（填写细胞器名称）存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的______，从而维持原生质体的形态和活性。原生质体经过细胞壁再生，进而脱分化形成______，其是处于无定形状态的______细胞。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的______。将杂种植株栽培在含有______的环境中，可筛选出具有高抗性的杂种植株。在植物组织培养的过程中，为了除去植物体表面的微生物，外植体需要先后用酒精和______处理，每次处理后都要用无菌水清洗。
29. 动物细胞培养为动物细胞工程的基本技术，下图为动物细胞培养的基本过程示意图。
请回答下列问题：
（1）动物细胞培养的原理是______。
（2）培养时先要剪碎，然后用______酶、______酶等分散成单个细胞，制成B瓶中的______，然后将其转入C瓶中进行培养，体外培养的细胞可分为两大类，一类细胞属于______的细胞，另一类的细胞会贴附在瓶壁上，称为______，这样的初次培养称为______。当细胞出现______现象时，通常会停止分裂增殖。
（3）C、D瓶中的培养液为保证______的环境，需要添加一定量的抗生素。培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是______。
静海区第四中学2024-2025学年度第二学期
第一次质量监测高二生物
一、单选题：本大题共25小题，共50分。
1. 在制作果酒、果醋、腐乳、泡菜的发酵过程中，菌种由原料本身提供的有（ ）
①果酒 ②果醋 ③腐乳 ④泡菜
A. ①②B. ②③C. ③④D. ①④
【答案】D
【解析】
【详解】试题分析：果酒发酵的酵母菌来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，①正确。泡菜发酵的乳酸菌来自菜表面，④正确。而果醋发酵的醋酸杆菌可接种或来自空气，②错误。腐乳的发酵所需毛霉来自空气，③错误。D正确。
考点：果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作
2. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ）
A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精
B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵
C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵
D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用
【答案】C
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水溶液检测产生的二氧化碳，用酸性重铬酸钾溶液鉴定酒精，A错误；
B、乳酸菌是厌氧菌，因此利用乳酸菌制作酸奶过程中都要密封发酵，B错误；
C、腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵，C正确；
D、泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量先升高后降低，发酵10天以上的泡菜中亚硝酸盐含量相对较低，可以食用，D错误。
故选C。
3. 下列关于传统发酵技术的说法，正确的是（ ）
A. 传统发酵技术的目的是获得发酵产品或更多的微生物
B. 当缺少糖源时醋酸菌进行无氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸
C. 以乙醇为底物进行果醋发酵时发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时的气泡量
D. 进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止乳酸菌产生CO2导致发酵液溢出
【答案】C
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、传统发酵技术的目的是获得将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，A错误；
B、醋酸菌为好氧菌，当缺少糖源时醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸，B错误；
C、以酒精为底物进行醋酸发酵，产物是醋酸和水，几乎不产生气泡，而果酒发酵会产生二氧化碳，故果醋发酵时产生的气泡量明显少于果酒发酵，C正确；
D、进行泡菜发酵时，原材料只能装至八成满，是为了防止发酵液溢出，乳酸菌无氧呼吸不产生气体，D错误。
故选C。
4. 下列有关实验的描述中，正确的有（ ）
①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系
②果酒发酵的最适温度为30～35℃，果醋发酵的最适温度为18～30℃
③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主
④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种均是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种均是原核生物
⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，才可以洗得彻底
⑥制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖
A. 1项B. 2项C. 3项D. 4项
【答案】A
【解析】
【分析】果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵，果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精转变成醋酸的代谢，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸发酵。
【详解】①毛霉和根霉都能参与腐乳的制作，但是缺少二者之一，另一微生物并不会死亡，所以两者并不是互利共生关系，二者为竞争关系，①错误；
②果酒发酵的最适温度为18~30°C，果醋发酵的最适温度为30~35°C，②错误；
③发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发酵为主，③正确；
④果酒、腐乳发酵利用的主要菌种分别是酵母菌和毛霉，均是真核生物，果醋、泡菜发酵利用的主要菌种分别是醋酸菌和乳酸菌，均是原核生物，④错误；
⑤在果酒的制作过程中，应先进行冲洗，然后再去除葡萄的枝梗，且冲洗时不能反复冲洗，避免冲洗掉菌种，⑤错误；
⑥制作泡菜时要选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛子，坛子需要加水密封目的是隔绝空气，为乳酸菌发酵提供无氧环境，⑥错误；
综上所述，③正确，即A正确。
故选A。
5. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列相关表述正确的是（ ）
A. 发酵工程的中心环节是菌种的选育和扩大培养
B. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
C. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
D. 发酵过程中，条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不会影响微生物的代谢途径
【答案】C
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
(1)如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。
(2)如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、发酵工程的内容包括菌种选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵罐内发酵、产品的分离、提纯（生物分离工程）等方面，发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误；
B、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，而并非微生物的代谢产物，B错误；
C、发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，C正确；
D、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，D错误。
故选C。
6. 下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ）

A. 图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响
B. 图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率（V2）的影响
C. 图3能表示在利用乳酸菌制泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸的变化趋势
D. 图4能表示在一普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化
【答案】D
【解析】
【分析】醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。
【详解】A、酵母菌酿酒初期，进行有氧呼吸，然后进行无氧呼吸，发酵后期由于产物积累，影响酒精发酵，因此曲线先从O点开始上升，再下降，A错误；
B、在果醋的制作过程中，溶氧量越多，醋酸菌产生乙酸的速率（V2）越快，B错误；
C、在利用乳酸菌制作泡菜的过程中，一定时间内泡菜坛内乳酸越来越多，C错误；
D、在一个普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，一定时间内随时间的延长，溶液的pH逐渐降低，D正确。
故选D。
7. 图1是制作果酒和果醋的简易装置，图2是制作果酒或果醋过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 果酒发酵阶段，若开错气阀，则会导致发酵液溢出
B. 果醋发酵阶段，醋酸菌进行④过程时发酵液中糖类充足
C. 制作果酒的主要发酵菌进行①和②过程的场所是线粒体
D. 制作果醋的主要发酵菌进行④过程时不需要O2的参与
【答案】A
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、果酒发酵阶段，开气阀的目的是排气，而排气时应打开气阀b，若错开气阀a，会导致发酵液从进气管溢出，A正确；
B、果醋发酵阶段，醋酸菌在糖类匮乏时能利用酒精经一系列化学反应生成醋酸，B错误；
C、图2中，①过程进行的场所是细胞质基质，C错误；
D、醋酸菌利用酒精生成醋酸时，需要氧气的参与，D错误。
故选A。
8. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养。下列说法正确的是（ ）
A. 牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH
B. 蛋白胨可为大肠杆菌生长提供氮源、碳源和维生素
C 倒平板操作中，平板未凝固时迅速将平板倒过来放置
D. 用显微镜直接计数的菌落数往往比活菌实际数目低
【答案】B
【解析】
【分析】培养基的制作流程一般为：计算→称量→溶化→调节PH→分装→灭菌→倒平板；微生物分离常用平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
【详解】A、牛肉膏蛋白胨培养基应先调pH再经高压蒸汽灭菌，A错误；
B、蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供氮源、碳源和维生素等营养，B正确；
C、倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止冷凝水滴在培养基表面造成污染，C错误；
D、由于用显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，所以用显微镜直接计数的菌落数往往比活菌实际数目偏高，D错误。
故选B。
9. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（ ）
A. 每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌
B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C. 接种环共灼烧了4次
D. 不能将a区和d区划线相连
【答案】C
【解析】
【分析】分析题干可看出本实验接种微生物的方法为平板划线法，该方法中会通过多次划线来逐步稀释以便获得单个菌落，因此在最后的一个区域中可能获得单个菌落，该方法实施时为了严格的无菌操作，需要全程在酒精灯火焰附近操作。
【详解】A、平板划线法中每次划线前都要灼烧接种环，保证菌种来自于上一次划线的末端，划线结束后也要灼烧接种环，防止污染环境、感染接种者，A正确；
B、连续划线可以将聚集的菌种逐步稀释，以便获得单个菌落，B正确；
C、接种过程中每次接种前需要灼烧，最后完成后需要灼烧以免污染环境，需要灼烧5次，C错误。
D、图中a对应的区域出现了单个菌落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的最终区域，d区域为划线的起始区域，二者不能相连，D正确。
故选C。
10. 在生产，生活和科研实践中，经常通过无菌操作技术避免杂菌的污染。下列有关无菌技术的叙述，正确的是（ ）
A. 通过消毒或灭菌，可将所有的杂菌，孢子和芽孢等都杀灭
B. 接种环，接种针等用具应在酒精灯火焰内焰部位灼烧灭菌
C. 为避免环境污染，操作尽量在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行
D. 对于牛奶等不耐高温的液体，一般采用紫外线照射法进行消毒
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：
（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、只有通过灭菌，才可以将所有的杂菌、孢子和芽孢等都杀灭，A错误；
B、接种环、接种针等金属用具，应在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，B错误；
C、为了避免周围环境中微生物的污染，接种过程中许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行，C正确；
D、对于一些不耐高温的液体，如牛奶一般采用巴氏消毒法，D错误。
故选C。
11. 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基
B. 测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度
C. 细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高
D. 利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定
【答案】C
【解析】
【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。
【详解】A、培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是选择培养基，A错误；
B、因为土壤中各类微生物的数量不同，故为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离，B错误；
C、细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，可加入酚红指示剂进行检测，C正确；
D、鉴定分解尿素的细菌应该用加酚红的鉴别培养基，D错误。
故选C。
【点睛】对微生物培养的培养基、选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法等相关知识的综合掌握是解答本题的关键。
12. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图。据图分析正确的是（ ）
A. 4号稀释液培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍
B. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
C. 将稀释液涂布到以尿素为唯一碳源的选择培养基上培养
D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
【答案】B
【解析】
【分析】从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。
【详解】A、4号中稀释液进行平板培养，稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，但不一定，A错误；
B、统计菌落时应选择30-300之间的进行计数，5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，B正确；
C、本实验目的是“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”，故应将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的选择培养基上培养，C错误；
D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D错误。
故选B。
13. 刚果红是一种可以与纤维素形成红色复合物的燃料，但不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生反应。在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是（ ）
A. 透明圈内的刚果红染料已被分解
B. 菌落②中的菌株降解纤维素能力最强
C. 图中菌落可能是细菌也可能是真菌
D. 图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制
【答案】C
【解析】
【分析】刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
【详解】A、透明圈内的纤维素被分解，不能与刚果红染料显色，A错误；
B、①的透明圈最大，说明降解能力最强，B错误；
C、细菌和真菌都可能产生能够分解纤维素的纤维素酶。纤维素酶广泛存在于自然界的生物体中。细菌、真菌等都能产生纤维素酶，此菌可能是细菌或真菌，C正确；
D、在筛选纤维素分解菌的培养基中应以纤维素为唯一碳源，D错误；
故选C。
14. 一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌富集培养，然后重复上述步骤培养三代，结果如下表所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B. 需要用特定的方法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C. 平板中①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用
D. 随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强
【答案】A
【解析】
【分析】1、抗生素是指由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。抗生素的抑菌或杀菌作用，主要是针对“细菌有而人（或其他动植物）没有”的机制进行杀伤，包含四大作用机理，即：抑制细菌细胞壁合成、增强细菌细胞膜通透性、干扰细菌蛋白质合成、抑制细菌核酸复制转录。
2、实验原理：若病原菌对各种抗生素敏感，在该抗生素纸片周围会出现透明圈，透明圈越大，说明病原菌对抗生素越敏感，若病原菌对各种抗生素不敏感，则不会出现透明圈。根据题干信息实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，故抑菌圈直径越大说明耐药性弱，抑菌圈直径越小，细菌耐药性越强。
【详解】A、细菌耐药性的变异是在使用抗生素之前就已存在，一定浓度的抗生素起选择作用，能够筛选出具有耐药性的细菌，A错误；
B、稀释涂布平板法可以获得的单个菌落且便于计数，故需要用特定的方法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上，B正确；
C、为排除滤纸片对实验结果的影响，应增设空白对照组，即增加不含抗生素的滤纸片或含无菌水的滤纸片作为对照组；平板①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用，C正确；
D、根据题干信息实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，故抑菌圈直径越小，说明细菌的耐药性越强，题表可知随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强，D正确。
故选A。
15. 某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性），科学家用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中列出的菌株类型。依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（ ）（注：L-亮氨酸 、 S-链霉素，“+”-加入，“-”-不加入，如，L-：不加入亮氨酸，S+：加入链霉素）
A. AB. BC. CD. D
【答案】B
【解析】
【分析】表中所列均为选择培养基，选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。细菌的细胞壁成分是肽聚糖，链霉素可以破坏肽聚糖而使细菌死亡。
【详解】根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L-、S+，B正确，ACD错误。
故选B。
16. 下面是植物组织培养过程示意图，相关说法正确的是（ ）
A. 上述植物组织培养的过程依据的生物学原理是植物细胞具有全能性
B. 需要对外植体进行严格的灭菌处理，以防止杂菌污染
C. 外植体若是月季的花药，则图中的①过程需要光照
D. 外植体若是菊花的根尖组织，因细胞中没有叶绿体，故培养成的新植株叶片无色
【答案】A
【解析】
【分析】
1、据图分析，①是脱分化，②③表示再分化，④表示移栽过程。
2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株。
【详解】A、植物组织培养依据的生物学原理为细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，A正确；
B、外植体一般只消毒处理，不灭菌处理，以保持外植体的活性，B错误；
C、外植体若是月季的花药，则图中的①过程是脱分化，不需要光照，C错误；
D、外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其细胞中含有叶绿体形成的相关基因，故培养成的新植株叶片有叶绿体，因此有色，D错误。
故选A。
17. 如图是四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图。下列相关叙述中正确的是( )
A. ②阶段会发生减数分裂过程
B. ①阶段需生长素，而③阶段需细胞分裂素
C. 此过程体现了植物细胞具有全能性
D. 此兰花的花药经离体培养所得植株为二倍体
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图示表示将四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；②阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体，进一步发育形成植株。
【详解】A、②阶段细胞通过有丝分裂方式增殖，不能发生减数分裂，A错误；
B、①和③阶段都需要生长素和细胞分裂素，只是这两种激素的比例不同，B错误；
C、图解显示的是植物组织培养过程，其原理是植物细胞具有全能性，C正确；
D、此兰花的花药经离体培养所得植株为单倍体，D错误。
故选C。
18. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（ ）
A. 利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种
B. 利用植物细胞培养获得的紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产
C. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以提高基因突变率，获得有用的突变体
D. 利用植物体细胞杂交技术，能打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
【答案】A
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用，植物繁殖的新途径包括微型繁殖作物脱毒，人工种子等作物。新品种的培育如单倍体育种，突变体的利用，细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织(如根尖、茎尖)进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒的新品种，A错误；
B、组织培养技术除了在农业生产上的应用外，还可广泛应用于另一个重要的领域，即细胞产物的工厂化生产，如利用细胞培养技术可大量获得紫草素，B正确；
C、利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以提高基因突变率，获得有用的突变体，C正确；
D、白菜和甘蓝不属于同一物种，它们之间存在生殖隔离，因此利用植物体细胞杂交技术培育“白菜一甘蓝”能够克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
故选A。
19. 下图示植物细胞融合及组织培养过程。下列说法中不正确的是（ ）。
A. 植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍
B. 杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株，说明杂种细胞具有全能性
C. 若A细胞的基因型为Rr，B细胞为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy
D. 尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示为植物细胞融合及组织培养过程示意图．①表示去除细胞壁，获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合的过程；③表示再生形成新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。
【详解】A、植物体细胞杂交的最大优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；
B、杂种细胞培育成杂种植株需经过④和⑤过程，采用了植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性，因此杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性，B正确；
C、杂种植株含有两个亲本的遗传物质，若A的基因型为Rr，B的基因型为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy，C正确；
D、愈伤组织细胞内没有叶绿体，不能进行光合作用，D错误。
故选D。
20. 利用植物体细胞杂交技术获得优良新品种的过程中，不必考虑的问题是（ ）
A. 杂种细胞的筛选和培养B. 选择具优良性状的亲本
C. 亲本体细胞去壁后融合D. 亲本是否存在生殖隔离
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【详解】A、植物原生质体的融合时，可能存在同种细胞的融合，故需要考虑杂种细胞的筛选和培养，A不符合题意；
B、如果利用植物体细胞杂交技术培育性状优良的作物新品种，则需选择具有期望的优良性状的亲本，只有这样亲本的性状才有可能在后代身上表达出来，B不符合题意；
C、植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，故需要考虑亲本体细胞去壁后融合，C不符合题意；
D、植物体细胞杂交能够打破生殖隔离的限制，克服远缘杂交不亲和的障碍，故不需要考虑亲本的生殖隔离问题，D符合题意。
故选D。
21. 下列过程与植物细胞工程无关的是（ ）
A. 培育单倍体植株
B. 嫁接与扦插
C. 培养红豆杉细胞生产紫杉醇
D. 培育“番茄——马铃薯”杂种植株
【答案】B
【解析】
【分析】植物细胞工程包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
【详解】A、培育单倍体植株需要采用植物细胞工程的植物组织培养技术，A不符合题意；
B、嫁接与扦插属于传统的无性繁殖方式，与植物细胞工程无关，B符合题意；
C、培养红豆杉细胞生产紫杉醇需要采用植物细胞工程的植物组织培养技术和植物细胞培养技术，C不符合题意；
D、培育“番茄—马铃薯”杂种植株需要采用植物细胞工程的植物体细胞杂交技术，D不符合题意。
故选B。
22. 下列哪项条件不是动物细胞培养所需要的（ ）
A. 无菌、无毒的环境
B. 充足的营养物质
C. 适宜的温度和pH
D. 95%的空气和5%的氧气
【答案】D
【解析】
【分析】
动物细胞的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】A、动物细胞培养也需要无菌、无毒的环境，A不符合题意；
B、用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质，B不符合题意；
C、动物细胞培养需要适宜的温度和PH，其中温度要与动物体温相近，C不符合题意；
D、动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，其中5%的CO2能调培养液的pH，D符合题意。
故选D。
23. 对某种动物的肝肿瘤细胞进行动物细胞培养。下列说法不正确的是（ ）
A. 在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B. 细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是抑制细胞呼吸
C. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
D. 在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、酶具有专一性，在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬浮液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A正确；
B、细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2的作用是维持培养基的pH，B错误；
C、动物细胞培养应注意无菌操作，为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C正确；
D、为保证动物细胞的正常生长，在合成培养基中，通常需加入动物血清等天然成分，D正确。
故选B。
24. 动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质，下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，由此图获得的正确结论有（ ）
①有无血清对正常细胞培养的影响不同
②正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
③培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
④培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
A. ①③B. ①③④C. ③④D. ①②④
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞体外培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌，②添加一定量的抗生素，③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气和5%的CO2。
【详解】①从图中曲线可看出培养基中有无血清对正常细胞的培养影响较大，二者在细胞数曲线上差别很大，①正确；
②根据曲线可知，相同条件下，癌细胞的增殖速率比正常细胞增殖速率要大，②错误；
③从图中曲线可看出正常细胞的培养过程中有无血清所获得的细胞数差距较大，有血清的培养基在相同时间内培养得到的细胞数远远多于无血清的培养基所获得的细胞数，③正确；
④从图中曲线可看出培养基中有无血清对癌细胞的培养影响不大，二者在细胞数曲线上差不多，④正确；综上所述，正确的有①③④，故选B。
25. 4月13日，《自然》杂志刊发干细胞领域重大突破——运用化学小分子实现细胞命运的重编程，即将人成体细胞转变为干细胞。该成果由北京大学生命科学学院、北大-清华生命联合中心邓宏魁研究团队完成，只需在人皮肤细胞的培养液中滴上几种化学小分子制剂，一个月后皮肤细胞就能转变为干细胞，具有重新发育成所有已知的人体细胞类型的能力。下列说法错误的是（ ）
A. 干细胞是从胚胎中分离提取的细胞，造血干细胞属于成体干细胞
B. 该研究团队诱导皮肤细胞获得的干细胞属于诱导多能干细胞（iPS）
C. 由上述方法获得的细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥
D. 由该技术获得的特定细胞，有望在新药的测试中发挥重要作用
【答案】A
【解析】
【分析】多能干细胞：具有产生多种类型细胞的能力，但却失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制，如造血干细胞。
iPS细胞是通过向成熟体细胞导入特定的基因，诱导其转变为干细胞，拥有与胚胎干细胞相似的分化潜力。
【详解】A、胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，成体干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞，所以造血干细胞属于成体干细胞，A错误；
B、该研究团队诱导皮肤细胞获得的干细胞，该细胞拥有与胚胎干细胞相似的分化潜力，属于诱导多能干细胞（iPS），B正确；
C、由上述方法获得的细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；
D、由该技术获得的细胞是一类类似胚胎干细胞的细胞，故可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。
故选A。
二、选择题：本大题共4小题，共50分。
26. 利用传统发酵技术制作食品，历史悠久，请参照表中内容完成下表。
【答案】 ①. 真核生物 ②. 酵母菌 ③. 乳酸菌 ④. 醋酸菌可将糖分解成醋酸 ⑤. 醋酸菌可以在将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 ⑥. 毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶 ⑦. 18-25℃ ⑧. 全过程无氧 ⑨. 先增加后下降 ⑩. 醋酸菌
【解析】
【分析】酒精发酵的主要菌种是酵母菌，果醋发酵的菌种是醋酸菌，腐乳制作主要依靠毛霉，酸奶制作的主要菌种是乳酸菌。
【详解】（1）腐乳制作中起主要作用的是毛霉，是真核生物；
（2）酒精发酵的主要菌种是酵母菌；
（3）酸奶制作的主要菌种是乳酸菌；
（4）当糖源充足时，醋酸菌可将糖分解成醋酸；
（5）当缺少糖源时，醋酸菌可以在将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；
（6）毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸；
（7）酵母菌进行酒精发酵的适宜温度是18-25℃；
（8）酸奶制作需要在无氧条件下进行；
（9）泡菜发酵中，亚硝酸盐的含量会先增加，10d左右会下降。
（10）在果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的。
27. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加_________以外，还应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。
（2）统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得的菌落数的平均值是a，则1g土壤中含有此菌的菌株数是_________。统计获得的菌落数比实际的活菌数_________（填“多”或“少”），原因是____________。
（3）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的工具是_________，在第一区域划线后须将该工具_________后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是_________。
（4）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，_________是产植酸酶最理想的菌株。
【答案】（1）琼脂 （2） ①. a×106 ②. 少
③. 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3） ①. 接种环 ②. 灼烧、冷却 ③. 从上一区域获得菌种，从而将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落 （4）E
【解析】
【分析】平板划线法：
①将接种环放到火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。
②在火焰旁冷却接种环。同时，拔出试管的棉塞。
③将试管口通过火焰。
④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。
⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。
⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。
⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线，注意不要将最后一次划线与第一次的相连。
【小问1详解】
科研人员要从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株，所以培养基要添加植酸钙，按照图示，选用培养基应为固体培养基，应该加入琼脂。
【小问2详解】
统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。将1g土壤放进99mL的无菌水，再经过3次10倍的稀释，最后取0.1mL进行涂布，获得平均值是a，整个过程中稀释倍数为105倍，每mL样品中的菌株数=(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) ，M代表稀释倍数，则1g土壤中含有此菌的菌株数是a÷0.1×105=a×106个。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
【小问3详解】
若要对上述菌株进行进一步纯化，通常使用的方法是平板划线法，使用的划线工具是接种环；接种时，在第一区域划线后，为了避免被接种环上的菌影响，需要将接种环灼烧、冷却后再划线。在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种，从而将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。
【小问4详解】
产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶，在五种菌株中，E的透明区域最大，说明产植酸酶最多，是产植酸酶最理想的菌株｡
28. 野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。据图回答：
（1）该过程用到的细胞工程技术称为______。
（2）过程①所需的酶是______，过程②中PEG的作用是______，经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的______（填写细胞器名称）存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的______，从而维持原生质体的形态和活性。原生质体经过细胞壁再生，进而脱分化形成______，其是处于无定形状态的______细胞。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的______。将杂种植株栽培在含有______的环境中，可筛选出具有高抗性的杂种植株。在植物组织培养的过程中，为了除去植物体表面的微生物，外植体需要先后用酒精和______处理，每次处理后都要用无菌水清洗。
【答案】（1）植物体细胞杂交和植物组织培养
（2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 诱导原生质体融合 ③. 绿色的叶绿体
（3） ①. 渗透压 ②. 愈伤组织 ③. 未分化
（4） ①. 形态和数目 ②. 含有黑腐病菌 ③. 次氯酸钠
【解析】
【分析】由图可知，①用纤维素酶、果胶酶进行去壁处理，②表示用物理或化学方法诱导原生质体融合。
【小问1详解】
图中培育抗黑腐病杂种黑芥一花椰菜植株的过程中，经过了植物原生质体的融合，经过了脱分化、再分化等过程，故用到了植物体细胞杂交和植物组织培养。
小问2详解】
过程①去壁用纤维素酶和果胶酶，过程②中PEG可以诱导原生质体融合，经过②原生质体融合后，需要筛选出融合的杂种细胞，可以通过观察杂种细胞是否含有黑芥叶肉细胞的绿色的叶绿体来进行判断。
【小问3详解】
原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压以维持原生质体的形态和活性，以避免原生质体的失水或吸水。原生质体再生细胞壁后，经过脱分化形成愈伤组织，其是处于无定形状态的未分化细胞。
【小问4详解】
若分析再生植株的染色体变异类型（包括结构变异和数目变异），应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的形态和数目。将杂种植株栽培在含有黑腐病菌的环境中，只有具有抗性的植株才能够存活。在植物组织培养的过程中，为了除去植物体表面的微生物，外植体需要先后用酒精和次氯酸钠处理，每次处理后都要用无菌水清洗。
29. 动物细胞培养为动物细胞工程的基本技术，下图为动物细胞培养的基本过程示意图。
请回答下列问题：
（1）动物细胞培养的原理是______。
（2）培养时先要剪碎，然后用______酶、______酶等分散成单个细胞，制成B瓶中的______，然后将其转入C瓶中进行培养，体外培养的细胞可分为两大类，一类细胞属于______的细胞，另一类的细胞会贴附在瓶壁上，称为______，这样的初次培养称为______。当细胞出现______现象时，通常会停止分裂增殖。
（3）C、D瓶中的培养液为保证______的环境，需要添加一定量的抗生素。培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是______。
【答案】（1）细胞增殖
（2） ①. 胰蛋白 ②. 胶原蛋白 ③. 细胞悬液 ④. 悬浮生长 ⑤. 贴壁生长 ⑥. 原代培养 ⑦. 接触抑制
（3） ①. 无菌、无毒 ②. 维持培养液的pH
【解析】
【分析】1、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、培养条件：（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量抗生素；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害；（2）营养：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分；（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4；（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）。
【小问1详解】
动物细胞培养是将动物细胞在体外进行培养，使其生长、增殖，其原理是细胞增殖。
【小问2详解】
在动物细胞培养中，为了使组织分散成单个细胞，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶来处理，将组织剪碎并用酶处理后，制成B瓶中的细胞悬液，方便后续转入培养瓶培养。体外培养的细胞一类是悬浮生长的细胞，这类细胞不贴附于支持物上，可在培养液中悬浮生长。另一类细胞会贴附在瓶壁上，称为贴壁生长，这样的初次培养称为原代培养，当细胞生长到表面相互接触时，通常会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。
【小问3详解】
在 C、D 瓶的培养液中添加一定量的抗生素，是为了保证无菌、无毒的环境，防止杂菌污染对细胞培养造成影响。通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，CO2的作用主要是维持培养液的pH。
培养代数
平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
①号区域
②号区域
③号区域
④号区域
第一代
0
2.27
2.13
2.27
第二代
0
1.95
2.02
1.87
第三代
0
1.80
1.87
1.78
筛选目的
筛选出不需要
亮氨酸的菌株
筛选出抗链霉
素的菌株
筛选出不需要亮氨
酸抗链霉素的菌株
A
L+，S+
L-，S-
L+，S-
B
L-，S-
L+，S+
L-，S+
C
L-，S+
L+，S+
L-，S-
D
L+，S-
L-，S-
L+，S+
食品名称
葡萄酒
葡萄醋
腐乳
酸奶
常用菌种分类
真核生物
原核生物
（1）____
原核生物
主要菌种
（2）___
醋酸菌
毛霉
（3）____
制作原理
无氧呼吸
产生酒精
当糖源充足时，（4）___
当缺少糖源时，（5）___
（6）____水解
蛋白质和脂肪
无氧呼吸
产生乳酸
发酵条
件控制
温度
（7）_____
30～35℃
15～18温度
酸
氧气
前期需氧
后期无氧
全过程需氧
全过程需氧
（8）____
问题探究
问题一：泡菜发酵过程中，亚硝酸盐含量变化（9）______。
问题二：果酒搁置时间过久会有酸味，而且表面
常有一层菌膜，是由于（10）______在液面大量繁殖形成
培养代数
平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
①号区域
②号区域
③号区域
④号区域
第一代
0
2.27
2.13
2.27
第二代
0
1.95
2.02
1.87
第三代
0
1.80
1.87
1.78
筛选目的
筛选出不需要
亮氨酸的菌株
筛选出抗链霉
素的菌株
筛选出不需要亮氨
酸抗链霉素的菌株
A
L+，S+
L-，S-
L+，S-
B
L-，S-
L+，S+
L-，S+
C
L-，S+
L+，S+
L-，S-
D
L+，S-
L-，S-
L+，S+
食品名称
葡萄酒
葡萄醋
腐乳
酸奶
常用菌种分类
真核生物
原核生物
（1）____
原核生物
主要菌种
（2）___
醋酸菌
毛霉
（3）____
制作原理
无氧呼吸
产生酒精
当糖源充足时，（4）___
当缺少糖源时，（5）___
（6）____水解
蛋白质和脂肪
无氧呼吸
产生乳酸
发酵条
件控制
温度
（7）_____
30～35℃
15～18温度
酸
氧气
前期需氧
后期无氧
全过程需氧
全过程需氧
（8）____
问题探究
问题一：泡菜发酵过程中，亚硝酸盐含量变化是（9）______。
问题二：果酒搁置时间过久会有酸味，而且表面
常有一层菌膜，是由于（10）______在液面大量繁殖形成