四川省南充市嘉陵区第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份四川省南充市嘉陵区第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题（原卷版+解析版），共29页。试卷主要包含了单选题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1. 关于试管婴儿和克隆羊，下面正确是
A. 都属于无性生殖B. 都属细胞工程技术
C. 都充分体现了体细胞的全能性D. 都不发生基因重组
2. 下面是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图。请据图判断，下列说法中正确的是
A. 冲洗葡萄时，先去除烂子粒和枝梗，再用清水冲洗掉污物
B. 榨汁前，榨汁机和发酵瓶都需要用体积分数为70%的盐酸消毒
C. 制作葡萄酒的装置采用长而弯曲的导管排气可以防止杂菌污染
D. 在葡萄酒深层发酵时接种醋酸杆菌可以发酵得到葡萄醋
3. 下列关于传统发酵食品制作的描述中，正确的是（ ）
A. 酵母菌是腐乳制作中起主要作用的微生物
B. 泡菜制作时要将盐水煮沸冷却后待用，煮沸的主要作用是将盐水杀菌并除溶氧
C. 果酒制作过程中发酵瓶盖应一直处于密封状态
D. 制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸
4. 下列关于微生物鉴定方法的叙述，错误的是（ ）
A. 利用酚红指示剂鉴定尿素分解菌，指示剂将变红
B. 利用刚果红试剂鉴定纤维素分解菌，纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈
C. 利用青霉素鉴定酵母菌，酵母菌的菌落会呈现青色
D. 利用伊红—亚甲蓝试剂鉴定大肠杆菌，大肠杆菌的菌落会呈现深紫色
5. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。如图为科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应使用含合成塑料的选择培养基进行筛选
B. 挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
C. 扩大培养的过程中，需要将接种后的培养基进行倒置培养
D. 用稀释涂布平板法接种，需用涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面
6. 为探究辣椒素和辣椒水对肠道微生物的影响，某研究小组选择含辣椒素的辣椒水（PE组）和标准辣椒素溶液（SC组）进行实验，部分结果如下图表所示。据下图表分析，下列说法错误的是（ ）
不同时间段各组培养液辣椒素含量变化（mg/L）
A. SC组添加的标准辣椒素溶液应和PE组的辣椒水等量
B. 活菌计数时，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果
C. 培养过程中肠道微生物可以利用辣椒素进行细胞代谢
D. 辣椒水和辣椒素对肠道微生物的繁殖均具有促进作用
7. 谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸来制取谷氨酸钠（味精），该细菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气，并通过搅拌使空气形成细小的气泡，迅速溶解在培养液中（溶氧）；在温度为30～37℃，pH为7～8的情况下，经28～32小时，培养液中会生成大量的谷氨酸。如图表示利用玉米淀粉为材料制备谷氨酸的流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. 尿素能为谷氨酸棒状杆菌提供氮源和碳源
B 利用玉米淀粉制备糖液时，可采用酶解法
C. 谷氨酸棒状杆菌通过有氧发酵产生谷氨酸
D. 维生素B能为发酵菌提供特殊的营养物质
8. 科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量如图所示，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。下列分析错误的是（ ）
A. 利用愈伤组织细胞来生产人参皂苷不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制
B. 杂种胚诱导的愈伤组织细胞中各种皂苷的含量均高于其他两种细胞的
C. 诱导三种胚细胞形成愈伤组织，只需要经过脱分化过程
D. 通过促进人参种子胚愈伤组织的生长，可以提高次生代谢产物Rg3的含量
9. 植物组织培养技术广泛应用于工业厂化生产，下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物组织培养的条件是外植体细胞发生了基因突变
B. 外植体培养到植株过程只受外源激素调控，不受内源激素调控
C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病能力
D. 通过植物组织培养获得次生代谢产物紫杉醇的过程不需要表达细胞的全能性
10. 采用植物组织培养技术可加快杜鹃花品种的改良，流程如图所示。下列分析错误的是（ ）

A. 选择芽尖作为外植体可减少病毒感染
B. 外植体可用酒精和次氯酸钠进行消毒处理
C. 图中②过程必须给予适当时间和强度的光照
D. 射线处理后可选择有用突变体培育成新品种
11. 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B. 动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C. 烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
D. 动物细胞培养可获得大量细胞，茎尖培养可用于植物脱除病毒
12. 研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。相关叙述错误的是（ ）
A. 肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH等条件
B. 肺类装配体形成过程中运用了动物细胞融合技术
C. 肺上皮干细胞传代培养时，用胰蛋白酶处理后收集细胞并分瓶培养
D. 由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
13. 病毒没有细胞结构，在生物学中应用广泛。下列有关病毒在生物学中的应用的叙述，错误的是（ ）
A. 病毒经灭活处理后，常用于介导植物细胞的融合
B. 某些病毒的DNA经改造后，可用作基因工程的运载体
C. 病毒经灭活处理后，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗
D. 某些病毒的核酸制成探针可用于检测机体是否感染该种病毒
14. 下列有关细胞核移植中的供体细胞的说法，正确的是
A. 只能是分化程度低、全能性高的细胞
B. —般选择传代培养10〜50代的细胞
C. 供体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期
D. 供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能
15. 下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 胚胎的早期发育在子宫内进行
B. 桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
C. 胚胎移植前需对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
二、非选择题（本大题共5小题，共55分）
16. 科学家研究发现一种树突状细胞(DC细胞)，在免疫反应中有强大的摄取、处理和传递抗原的功能。图示DC细胞参与免疫的过程，回答下列问题：
（1）DC细胞能通过__________方式将外来抗原摄入细胞内，将其分解；同时．免疫调节也可对付体内的异常细胞，这体现了免疫系统的__________功能。
（2）DC细胞处理抗原后，细胞外出现特定的物质能与T细胞外具有__________作用的受体相结合，激活信号分子(S1、S2)从面激发T细胞出现免疫效应，此过程称为细胞间的__________。具有摄取、处理及传递抗原能力的细胞，除树突状细胞外还有__________等。
（3）T细胞发生免疫效应时，它产生的__________可作用于已被抗原刺激的__________细胞，并促进其增殖分化。
（4）DC细胞的研究成果已应用于癌症患者的治疗，癌细胞是正常细胞中的__________在致癌因子的作用下发生突变产生的，其细胞膜上的糖蛋白分子会__________，从而容易扩散和转移，给彻底治愈带来困难，DC免疫疗法是通过采集患者自身的外周血液，在体外诱导培养出大量DC细胞，使之负载上肿瘤抗原信息后再输回给患者。这些DC细胞进入患着体内后，可诱导T细胞迅速增殖分化成__________精确杀伤肿瘤细胞。
17. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有水、无机盐、______________、_____________等基本营养物质。
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行_______________。接种后须将培养皿呈_______________状态放置，这样做的目的是______________。
（3）统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是35，则1g土壤中含有此菌的菌株数是_______________。统计获得的菌落数比实际的活菌数_______________，原因是______________。
（4）若要对上述菌株进行纯化，在第一区域划线后须将该工具灼烧、冷却后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是____________________________。
（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A-E五种菌株中，______________是产植酸酶最理想的菌株。
18. 肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）是人体心肌细胞中的肌钙蛋白的一种亚基，其在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
（1）细胞培养中，可采用_____的方法防止有害代谢物的积累。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_____，3次注射后的第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，经过筛选后符合要求的杂交瘤细胞可以在_____扩大培养。
（2）②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗体阳性检测，之后经稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，检测原理是_____， 其目的是筛选获得_____细胞。
（3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是_____，另一方面_____从而通过测定产物量来判断待测抗原量。
（4）杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为_____，但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入_____等成分。
（5）单克隆抗体的优点是_____。
19. 生姜既是一种重要的调味蔬菜，又具有较高的药用价值。科研人员对生姜的繁殖以及药用价值开展了一系列研究。
（1）生姜通常采用无性繁殖的方式进行生产，但感染的病毒很容易在植株体内累积。生姜的茎尖分生区附近无病毒，可作为组织培养的_______，经脱分化形成_______，进一步培养可获得脱毒苗进行大量种植。
（2）生姜块茎可以提取生姜精油，为进一步研究生姜精油的药用价值，科研人员进行了如下实验。
实验一：分别取0.1mL的表皮葡萄球菌（A）、金黄色葡萄球菌（B）、枯草芽孢杆菌（C）悬液，与20mL熔化的培养基混匀。在培养基中制备4个直径为8mm的小孔，向培养基的4个小孔中分别加入不同添加物，添加情况及实验结果如下表所示。
①制备培养基时，需要添加的必备营养物质有______，除此之外，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及______的需求。
②实验结果表明______。
实验二：实验研究发现生姜精油还有抗衰老的作用，向果蝇饲料中添加不同浓度的生姜精油后，测定衰老相关基因的表达量，结果如下图。由图可推测这三种基因与细胞衰老的关系是______。
20. 塑料制品方便人们生活的同时，也造成了短时期难以降解的“白色污染”。研究人员欲比较肠杆菌YT1和芽孢杆菌YP1两类细菌降解塑料（主要成分为聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，两类细菌主要降解PE）的能力，并通过基因工程拼接黄粉虫肠道内菌株WZ的降解PVC的胞外酶基因A，培育降解塑料的“超级菌”。
（1）菌株筛选。配置固体培养基，接种菌株后表层覆盖0．1mm厚度的PE塑料。分组实验结果如图所示：
①在筛选分解PE塑料能力大小的菌株时，应将两类菌株接种到以_____为唯一碳源的培养基，从功能上讲，该培养基属于_____。
②筛选分解PE塑料能力强的菌株不能直接以降解圈的大小为指标，其原因是_____。培养基3中接种混合培养后的YP1，其降解圈直径明显加大，其原因可能是_____。
（2）培育“超级菌”。对菌株WZ的A基因测序可知，如果在其调节功能区增加一个碱基对A/T，则可以大大增强其基因表达能力。通过经典的大引物PCR定点诱变技术在体外改造A基因，操作过程如图1．然后与图2所示的质粒构建表达载体，培育“超级菌”。
①利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1，和PCR2），在PCR，中获得的大引物是指_____，至少需要_____个PCR循环才能获得完整的改良A基因。
②构建改良基因表达载体时，为实现质粒和改良基因的准确连接，应选用的限制酶是_____。表达载体导入受体菌株时，有的质粒含有改良的A基因，有的质粒为空白质粒。在含氨苄青霉素和β半乳糖苷的平板上培养一段时间后，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是_____。
四川省南充市嘉陵区第一中学2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题
一、单选题（本大题共15小题，共45分）
1. 关于试管婴儿和克隆羊，下面正确是
A. 都属于无性生殖B. 都属细胞工程技术
C. 都充分体现了体细胞的全能性D. 都不发生基因重组
【答案】B
【解析】
【分析】试管动物技术和克隆动物技术的比较：
【详解】A、试管婴儿是体外受精、胚胎移植形成的，属于有性生殖；克隆羊是核移植、胚胎移植形成的，属于无性生殖，A错误；B、试管婴儿和克隆羊都属于细胞工程技术，B正确；
C、试管婴儿技术体现了体细胞的全能性，但克隆羊体现的是体细胞核的全能性，C错误；
D、形成试管婴儿的精子和卵细胞是减数分裂形成的，在减数分裂过程中发生了基因重组，而克隆羊是核移植形成的，没有发生基因重组，D错误．
故选B。
2. 下面是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图。请据图判断，下列说法中正确的是
A. 冲洗葡萄时，先去除烂子粒和枝梗，再用清水冲洗掉污物
B. 榨汁前，榨汁机和发酵瓶都需要用体积分数为70%的盐酸消毒
C. 制作葡萄酒的装置采用长而弯曲的导管排气可以防止杂菌污染
D. 在葡萄酒深层发酵时接种醋酸杆菌可以发酵得到葡萄醋
【答案】C
【解析】
【详解】制作果酒冲洗葡萄时，应该先用清水冲洗掉污物，再去除烂子粒和枝梗，A错误；榨汁机要清洗干净，并晾干；发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒，B错误；制作葡萄酒的装置采用长而弯曲的导管排气可以防止杂菌污染，C正确；醋酸菌是好氧菌，所以在葡萄酒表层发酵时接种醋酸杆菌可以发酵得到葡萄醋，D错误。
【点睛】解答本题的关键是掌握酵母菌和醋酸菌的代谢类型，从而明确果酒发酵产生果醋应该提供的反应条件。
3. 下列关于传统发酵食品制作的描述中，正确的是（ ）
A. 酵母菌是腐乳制作中起主要作用的微生物
B. 泡菜制作时要将盐水煮沸冷却后待用，煮沸的主要作用是将盐水杀菌并除溶氧
C. 果酒制作过程中发酵瓶盖应一直处于密封状态
D. 制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸
【答案】B
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸；
4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、在腐乳制作过程中，‌起主要作用的微生物是毛霉，‌而不是酵母菌，A错误；
B、泡菜制作时要将盐水煮沸冷却后待用，煮沸有两大作用，一是除去水中氧气，二是杀灭盐水中的微生物；冷却是为了防止杀死坛内的微生物，B正确；
C、果酒制作过程中发酵瓶盖应定时打开，而不一直处于密封状态，因为是酒精发酵过程中产生CO2，拧松瓶盖以放出CO2，C错误；
D、醋酸菌在需氧条件下可生成醋酸，‌而在无氧状态下，‌醋酸菌可将醋酸分解为水和二氧化碳，‌还可将乙醇氧化成醋酸，‌并将醋酸和乳酸氧化为二氧化碳和水，因此制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，D错误。
故选B。
4. 下列关于微生物鉴定方法的叙述，错误的是（ ）
A. 利用酚红指示剂鉴定尿素分解菌，指示剂将变红
B. 利用刚果红试剂鉴定纤维素分解菌，纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈
C. 利用青霉素鉴定酵母菌，酵母菌的菌落会呈现青色
D. 利用伊红—亚甲蓝试剂鉴定大肠杆菌，大肠杆菌的菌落会呈现深紫色
【答案】C
【解析】
【分析】微生物接种方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过用接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以获得单菌落；后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养以获得单菌落。
【详解】A、尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红，A正确；
B、在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，B正确；
C、细菌对含青霉素培养基敏感，酵母菌则不敏感，可以筛选酵母菌，利用青霉素鉴定酵母菌，酵母菌的菌落会呈现乳白色，C错误；
D、伊红-亚甲蓝琼脂培养基可用来鉴别大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽， D正确。
故选C。
5. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。如图为科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 应使用含合成塑料的选择培养基进行筛选
B. 挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
C. 扩大培养的过程中，需要将接种后的培养基进行倒置培养
D. 用稀释涂布平板法接种，需用涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、由题干信息可知，PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，为寻找到产生PHA菌种，应使用含盐量较高的选择培养基进行筛选，A错误；
B、为获得高产的PHA菌种，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，以确定高产菌株，B正确；
C、步骤④是为了进行扩大培养，扩大培养采用的是液体培养基，不能进行倒置培养，C错误；
D、如用稀释涂布平板法接种，需将一定体积的菌液滴在培养基上，再用涂布器涂布均匀，D错误。
故选B。
6. 为探究辣椒素和辣椒水对肠道微生物的影响，某研究小组选择含辣椒素的辣椒水（PE组）和标准辣椒素溶液（SC组）进行实验，部分结果如下图表所示。据下图表分析，下列说法错误的是（ ）
不同时间段各组培养液辣椒素含量变化（mg/L）
A. SC组添加的标准辣椒素溶液应和PE组的辣椒水等量
B. 活菌计数时，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果
C. 培养过程中肠道微生物可以利用辣椒素进行细胞代谢
D. 辣椒水和辣椒素对肠道微生物的繁殖均具有促进作用
【答案】D
【解析】
【分析】稀释涂布平板计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。统计平板上的菌落数，就能推测样品中大约含有多少活菌。其计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M（C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
【详解】A、SC组和PE组的溶液添加量是无关变量，无关变量需保持相同，SC组添加的标准辣椒素溶液应和PE组的辣椒水等量 ，A正确；
B、菌落生长需要时间，活菌计数时，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果 ，B正确；
C、据表格，PE组和SC组中辣椒素的含量逐渐减少，说明肠道微生物吸收了辣椒素，肠道微生物可以利用辣椒素进行细胞代谢 ，C正确；
D、据柱状图，第6h、第24h时，PE组、SC组的肠道微生物数量比对照组低，第12h时PE组、SC组的肠道微生物数量比对照组高，所以不是都具有促进作用，D错误。
故选D。
7. 谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸来制取谷氨酸钠（味精），该细菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气，并通过搅拌使空气形成细小的气泡，迅速溶解在培养液中（溶氧）；在温度为30～37℃，pH为7～8的情况下，经28～32小时，培养液中会生成大量的谷氨酸。如图表示利用玉米淀粉为材料制备谷氨酸的流程图。下列叙述错误的是（ ）
A. 尿素能为谷氨酸棒状杆菌提供氮源和碳源
B. 利用玉米淀粉制备糖液时，可采用酶解法
C. 谷氨酸棒状杆菌通过有氧发酵产生谷氨酸
D. 维生素B能为发酵菌提供特殊的营养物质
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物的数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养成分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。
【详解】A、谷氨酸棒状杆菌为异养型生物，糖液中的糖为谷氨酸棒状杆菌提供碳源，而尿素为谷氨酸棒状杆菌提供氮源，A错误；
B、玉米淀粉在淀粉酶的作用下，可以制备成糖液，因此利用玉米淀粉制备糖液时，可采用酶解法，B正确；
C、谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气，因此谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸，进行的是有氧发酵，C正确；
D、糖液中的糖为发酵菌提供碳源，尿素提供氮源，另外，还有水和无机盐，因此，维生素B为发酵菌的生长提供特殊的营养物质，D正确。
故选A。
8. 科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量如图所示，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。下列分析错误的是（ ）
A. 利用愈伤组织细胞来生产人参皂苷不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制
B. 杂种胚诱导的愈伤组织细胞中各种皂苷的含量均高于其他两种细胞的
C. 诱导三种胚细胞形成愈伤组织，只需要经过脱分化过程
D. 通过促进人参种子胚愈伤组织的生长，可以提高次生代谢产物Rg3的含量
【答案】B
【解析】
【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体，利用了植物细胞全能性的特点。
【详解】A、利用愈伤组织细胞来生产人参皂苷是在实验室中培养，不占用耕地，且实验条件可控，几乎不受季节、天气等的限制，A正确；
B、图2可知，杂种胚中人参皂苷Re、Rb1和M-Rb1含量均高于其他两种细胞，Rg3含量低于其他两种，B错误；
C、结合教材植物组织培养的流程可知,诱导胚细胞形成愈伤组织只需要经历脱分化过程，C正确；
D、人参愈伤组织可以产生次生代谢产物Rg3，通过促进人参种子胚愈伤组织的生长，可以提高次生代谢产物Rg3的含量，D正确。
故选B。
9. 植物组织培养技术广泛应用于工业厂化生产，下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 植物组织培养的条件是外植体细胞发生了基因突变
B. 外植体培养到植株的过程只受外源激素调控，不受内源激素调控
C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病能力
D. 通过植物组织培养获得次生代谢产物紫杉醇的过程不需要表达细胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）．②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素），A错误；
B、外植体培养到植株的过程既受外源激素调控，又受内源激素调控，B错误；
C、获得脱毒苗常用的外植体是幼嫩的根和茎，脱毒苗不一定具有抗病毒能力，C错误；
D、获得紫杉醇的过程只要培养到愈伤组织，不需要形成完整植株，没有体现植物细胞的全能性，D正确。
故选D。
10. 采用植物组织培养技术可加快杜鹃花品种的改良，流程如图所示。下列分析错误的是（ ）

A. 选择芽尖作为外植体可减少病毒感染
B. 外植体可用酒精和次氯酸钠进行消毒处理
C. 图中②过程必须给予适当时间和强度的光照
D. 射线处理后可选择有用的突变体培育成新品种
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。
【详解】A、植物的根尖、茎尖、芽尖部位几乎不含病毒，因此采用芽尖等组织培养，可减少病毒感染，A正确；
B、植物组织培养过程中，可用酒精和次氯酸钠溶液等对外植体进行消毒处理，B正确；
C、过程②表示脱分化，不需要光照，如果给予光照，易形成维管组织，不易形成愈伤组织，C错误；
D、射线处理可诱发基因突变，由于基因突变具有不定向性，可选择有用的突变体培育成新品种，D正确。
故选C。
11. 关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B. 动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶
C. 烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
D. 动物细胞培养可获得大量细胞，茎尖培养可用于植物脱除病毒
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖。
【详解】A、动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，动物细胞培养采用的是液体培养基、植物组织培养采用的是固体培养基，A正确；
B、动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，B错误；
C、植物细胞具有全能性，因此烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖，因此小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖，C正确；
D、动物细胞培养可以用于检测有毒物质，茎尖（几乎不含病毒）培养可用于植物脱除病毒，D正确。
故选B。
【点睛】
12. 研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。相关叙述错误的是（ ）
A. 肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH等条件
B. 肺类装配体形成过程中运用了动物细胞融合技术
C. 肺上皮干细胞传代培养时，用胰蛋白酶处理后收集细胞并分瓶培养
D. 由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、由图示可知，肺类装配体的获得需要进行动物细胞培养，如需要适宜的营养、温度、pH等基本条件，A正确；
B、肺类装配体的形成过程为器官自组装或器官与细胞组装成装配体的过程而不是细胞融合的过程，B错误；
C、肺上皮干细胞传代培养时，有接触抑制的现象，需要用胰蛋白酶处理后收集细胞并分瓶培养，C正确；
D、由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。
故选B。
13. 病毒没有细胞结构，在生物学中应用广泛。下列有关病毒在生物学中的应用的叙述，错误的是（ ）
A. 病毒经灭活处理后，常用于介导植物细胞的融合
B. 某些病毒的DNA经改造后，可用作基因工程的运载体
C. 病毒经灭活处理后，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗
D. 某些病毒的核酸制成探针可用于检测机体是否感染该种病毒
【答案】A
【解析】
【分析】1、病毒是非细胞生物，只能寄生在活细胞中进行生命活动。病毒依据宿主细胞的种类可分为植物病毒、动物病毒和噬菌体；根据遗传物质来分，分为DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白质组成。
2、疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。应用转基因技术生产的疫苗，主要成分是病毒的表面抗原蛋白，接种后能刺激机体免疫细胞产生抵抗病毒的抗体。
【详解】A、病毒经灭活处理后，常用于介导动物细胞的融合，A错误；
B、某些病毒的DNA经改造后，可用作基因工程的运载体，如动植物病毒等，B正确；
C、经过灭活或减毒处理的病毒可，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗，可以激发机体的特异性免疫反应，用于免疫预防，C正确；
D、某些病毒的核酸制成探针，利用分子杂交技术，可用于检测机体是否感染该种病毒，D正确。
故选A。
14. 下列有关细胞核移植中的供体细胞的说法，正确的是
A. 只能是分化程度低、全能性高的细胞
B. —般选择传代培养10〜50代的细胞
C. 供体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期
D. 供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能
【答案】D
【解析】
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。
【详解】A、核移植技术分为体细胞核移植和胚胎细胞核移植，因此分化程度高、全能性低的体细胞也可以作为供体细胞，A错误；
B、核移植时一般都选用传代10代以内的细胞，因为正常细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，B错误；
C、受体细胞要在体外培养到减数第二次分裂中期，C错误；
D、供体细胞的细胞核应具有发育成完整个体的潜能，D正确。
故选D。
15. 下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A. 胚胎的早期发育在子宫内进行
B. 桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化
C. 胚胎移植前需对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体“，接受胚胎的个体叫“受体“。
【详解】A、早期胚胎发育是在输卵管中进行的，A错误；
B、桑葚胚的细胞一般都具有全能性，囊胚的细胞逐渐分化，出现内细胞团和滋养层，B正确；
C、由于经过同期发情等处理过程，不会发生免疫排斥，故胚胎移植前无需对供体和受体进行免疫检查，C错误；
D、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞有杂交瘤细胞、骨-骨融合细胞，B-B融合细胞等，还需进一步选择，D错误。
故选B。
二、非选择题（本大题共5小题，共55分）
16. 科学家研究发现一种树突状细胞(DC细胞)，在免疫反应中有强大的摄取、处理和传递抗原的功能。图示DC细胞参与免疫的过程，回答下列问题：
（1）DC细胞能通过__________方式将外来抗原摄入细胞内，将其分解；同时．免疫调节也可对付体内的异常细胞，这体现了免疫系统的__________功能。
（2）DC细胞处理抗原后，细胞外出现特定的物质能与T细胞外具有__________作用的受体相结合，激活信号分子(S1、S2)从面激发T细胞出现免疫效应，此过程称为细胞间的__________。具有摄取、处理及传递抗原能力的细胞，除树突状细胞外还有__________等。
（3）T细胞发生免疫效应时，它产生的__________可作用于已被抗原刺激的__________细胞，并促进其增殖分化。
（4）DC细胞研究成果已应用于癌症患者的治疗，癌细胞是正常细胞中的__________在致癌因子的作用下发生突变产生的，其细胞膜上的糖蛋白分子会__________，从而容易扩散和转移，给彻底治愈带来困难，DC免疫疗法是通过采集患者自身的外周血液，在体外诱导培养出大量DC细胞，使之负载上肿瘤抗原信息后再输回给患者。这些DC细胞进入患着体内后，可诱导T细胞迅速增殖分化成__________精确杀伤肿瘤细胞。
【答案】 ①. 胞吞 ②. 防卫、监控和清除 ③. 识别 ④. 信息交流 ⑤. 吞噬细胞 ⑥. 淋巴因子 ⑦. B ⑧. 原癌基因和抑癌基因 ⑨. 减少 ⑩. 效应T细胞
【解析】
【分析】1.根据图示分析可知：DC细胞在免疫调节中能吞噬、处理并呈递抗原；T细胞能识别抗原表面的抗原决定簇，这个过程称细胞间的信息交流，是细胞膜的功能之一。
2.T细胞在体液免疫中合成释放的淋巴因子，作用于B细胞，使B细胞增殖分化为浆细胞和记忆细胞；T细胞也可以增殖分化为效应T细胞和记忆细胞，参与细胞免疫，与被抗原入侵的宿主细胞密切接触，使宿主细胞裂解死亡。
【详解】（1）据图分析，DC细胞能通过胞吞将外来抗原摄取入细胞内，将其分解；同时，免疫调节也可对付体内的异常细胞，这体现了免疫系统的防卫、监控和清除功能。
（2）DC细胞处理抗原后，细胞外出现特定的结构能被T细胞的受体识别，从而激发T细胞出现免疫效应，体现细胞间信息交流功能。吞噬细胞能够摄取、处理和呈递抗原。
（3）T受刺激后会产生淋巴因子，促进B细胞增殖分化为浆细胞，产生抗体。
（4）癌细胞形成的原因是由于原癌基因和抑癌基因在致癌因子的作用下发生突变产生的，细胞癌变后细胞膜上的糖蛋白减少，因此癌细胞容易扩散和转移。根据题意，DC细胞携带的抗原信息可以刺激T细胞增殖分化，形成效应T细胞，效应T细胞也能直接作用于肿瘤细胞，发生细胞免疫。
【点睛】本题考查细胞癌变和免疫的知识点，要求学生掌握细胞癌变的原因和癌细胞的特征，理解细胞癌变引起的免疫类型是细胞免疫，把握细胞免疫和体液免疫过程中不同免疫细胞的作用，理解T细胞与B细胞在特异性免疫过程中的关系，识记免疫系统的功能，能够正确识图判断图中的生理过程，这是该题考查的重点。
17. 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有水、无机盐、______________、_____________等基本营养物质。
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行_______________。接种后须将培养皿呈_______________状态放置，这样做的目的是______________。
（3）统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是35，则1g土壤中含有此菌的菌株数是_______________。统计获得的菌落数比实际的活菌数_______________，原因是______________。
（4）若要对上述菌株进行纯化，在第一区域划线后须将该工具灼烧、冷却后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是____________________________。
（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A-E五种菌株中，______________是产植酸酶最理想的菌株。
【答案】（1） ①. 碳源 ②. 氮源
（2） ①. 灭菌 ②. 倒置 ③. 防止培养基中的水分过快蒸发和防止冷凝的水珠倒流污染培养基
（3） ①. 3.5×107 ②. 低##少 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，观察计数时只能计为一个菌落
（4）从上一区域获得菌种 （5）E
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
【小问1详解】
培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，该研究的目的是从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株，故培养基中除了添加植酸钙以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。
【小问2详解】
为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行灭菌；接种后须将培养皿呈倒置状态放置，这样做的目的是防止培养基中的水分过快蒸发和防止冷凝的水珠倒流污染培养基。
【小问3详解】
菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是35，图中用于计数的稀释倍数为105，则1g土壤中含有此菌的菌株数是35÷0.1×105=3.5×107个；图示计数方法是稀释涂布平板法，该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，观察计数时只能计为一个菌落。
【小问4详解】
接种时，在第一区域划线后须将接种环灼烧（为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端）并冷却（以免接种环温度太高，杀死菌种）后再划线。
【小问5详解】
产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A-E五种菌株中，E菌株的透明圈最大，说明其水解植酸钙的能力最强，故E是产植酸酶最理想的菌株。
18. 肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）是人体心肌细胞中的肌钙蛋白的一种亚基，其在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
（1）细胞培养中，可采用_____的方法防止有害代谢物的积累。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是_____，3次注射后的第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，经过筛选后符合要求的杂交瘤细胞可以在_____扩大培养。
（2）②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗体阳性检测，之后经稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，检测原理是_____， 其目的是筛选获得_____细胞。
（3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是_____，另一方面_____从而通过测定产物量来判断待测抗原量。
（4）杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为_____，但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入_____等成分。
（5）单克隆抗体的优点是_____。
【答案】（1） ①. 定期更换培养液 ②. 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 ③. 体外或小鼠腹腔
（2） ①. 抗原抗体的特异性结合 ②. 能产生（特异性强、灵敏度高的）抗 cTnI抗体的杂交瘤细胞
（3） ①. 抗体与待测抗原结合 ②. 酶催化特定底物反应产生相应产物（两个空可调换顺序）
（4） ①. 合成培养基 ②. 动物血清
（5）特异性强、灵敏度高、可大量制备
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
在动物细胞培养的过程中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液。
为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体形成更多能产生抗cTnI抗体的B淋巴细胞，一般通过多次注射相同抗原实现。取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，经过筛选后符合要求的杂交瘤细胞可以在体外或小鼠腹腔扩大培养。
【小问2详解】
B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的细胞甲经过HAT选择培养基选择出杂交瘤细胞乙，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗体阳性检测，原理是利用抗原抗体的特异性结合反应，目的是筛选获得能产生（特异性强、灵敏度高的）抗 cTnI抗体的杂交瘤细胞。
【小问3详解】
结合图示分析，该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是与待测抗原结合，另外还可以利用酶标抗体上的酶催化特定底物反应产生相应产物，从而通过测定产物量来判断待测抗原量。
【小问4详解】
培养基可以分为天然培养基和合成培养基、半合成培养基，根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基，这种培养基称为合成培养基。但在实践中上述培养基只能维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入动物的血清等成分。
【小问5详解】
根据单克隆抗体获取的过程可知，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。
19. 生姜既是一种重要的调味蔬菜，又具有较高的药用价值。科研人员对生姜的繁殖以及药用价值开展了一系列研究。
（1）生姜通常采用无性繁殖的方式进行生产，但感染的病毒很容易在植株体内累积。生姜的茎尖分生区附近无病毒，可作为组织培养的_______，经脱分化形成_______，进一步培养可获得脱毒苗进行大量种植。
（2）生姜块茎可以提取生姜精油，为进一步研究生姜精油的药用价值，科研人员进行了如下实验。
实验一：分别取0.1mL的表皮葡萄球菌（A）、金黄色葡萄球菌（B）、枯草芽孢杆菌（C）悬液，与20mL熔化的培养基混匀。在培养基中制备4个直径为8mm的小孔，向培养基的4个小孔中分别加入不同添加物，添加情况及实验结果如下表所示。
①制备培养基时，需要添加的必备营养物质有______，除此之外，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及______的需求。
②实验结果表明______。
实验二：实验研究发现生姜精油还有抗衰老的作用，向果蝇饲料中添加不同浓度的生姜精油后，测定衰老相关基因的表达量，结果如下图。由图可推测这三种基因与细胞衰老的关系是______。
【答案】（1） ①. 外植体 ②. 愈伤组织
（2） ①. 碳源、氮源、水、无机盐 ②. O2 ③. 纯生姜精油具有抑菌的作用，且吐温溶液可以增加纯生姜精油的抑菌作用 ④. SODI基因表达的产物能延缓细胞衰老，TOR基因和MTH基因表达产物能促进细胞衰老
【解析】
【分析】培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养物质。植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【小问1详解】
植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。生姜的茎尖分生区附近无病毒，可作为组织培养的外植体，经脱分化形成愈伤组织，而后通过再分化过程在分化培养基上进一步培养可获得脱毒苗进行大量种植。
【小问2详解】
①不同的微生物对生长繁殖的需求是不同的，制备培养基时，除了添加必备的营养物质如碳源、氮源、水、无机盐外，还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
②由表格可知，小孔添加150μL纯生姜精油对不同菌种的抑菌圈直径比空白对照组以及添加150μL吐温溶液和缓冲液（体积比1∶1）都要大，说明纯生姜精油对不同菌种均有抑制作用，另外，小孔添加150μL吐温溶液和纯生姜精油（体积比1∶1）对不同菌种的抑菌圈直径比小孔添加150μL纯生姜精油的抑菌圈直径大，说明吐温溶液可以增加纯生姜精油的抑菌作用，综上所述，实验结果表明纯生姜精油具有抑菌的作用，且吐温溶液可以增加纯生姜精油的抑菌作用。
由题意可知，生姜精油具有抗衰老的作用，根据柱形图结果可知，与对照组相比，SODI基因的表达量随生姜精油的浓度增大而增大，而TOR和MTH基因表达量减小，说明SODI基因表达的产物能延缓细胞衰老，TOR基因和MTH基因表达产物能促进细胞衰老。
20. 塑料制品方便人们生活的同时，也造成了短时期难以降解的“白色污染”。研究人员欲比较肠杆菌YT1和芽孢杆菌YP1两类细菌降解塑料（主要成分为聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，两类细菌主要降解PE）的能力，并通过基因工程拼接黄粉虫肠道内菌株WZ的降解PVC的胞外酶基因A，培育降解塑料的“超级菌”。
（1）菌株的筛选。配置固体培养基，接种菌株后表层覆盖0．1mm厚度的PE塑料。分组实验结果如图所示：
①在筛选分解PE塑料能力大小的菌株时，应将两类菌株接种到以_____为唯一碳源的培养基，从功能上讲，该培养基属于_____。
②筛选分解PE塑料能力强的菌株不能直接以降解圈的大小为指标，其原因是_____。培养基3中接种混合培养后的YP1，其降解圈直径明显加大，其原因可能是_____。
（2）培育“超级菌”。对菌株WZ的A基因测序可知，如果在其调节功能区增加一个碱基对A/T，则可以大大增强其基因表达能力。通过经典的大引物PCR定点诱变技术在体外改造A基因，操作过程如图1．然后与图2所示的质粒构建表达载体，培育“超级菌”。
①利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR（PCR1，和PCR2），在PCR，中获得的大引物是指_____，至少需要_____个PCR循环才能获得完整的改良A基因。
②构建改良基因表达载体时，为实现质粒和改良基因的准确连接，应选用的限制酶是_____。表达载体导入受体菌株时，有的质粒含有改良的A基因，有的质粒为空白质粒。在含氨苄青霉素和β半乳糖苷的平板上培养一段时间后，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是_____。
【答案】（1） ①. PE塑料 ②. 选择 ③. 因为菌体繁殖力不同，形成的菌落大小不同 ④. YP1和YT1混合培养过程中，YP1菌株整合了YT1的对PE塑料高分解力的基因，发生了转化
（2） ①. 以诱变引物延伸得到的DNA链为模板，引物1与之结合延伸得到的DNA子链 ②. 4 ③. XmaⅠ和BglⅡ ④. 含有改良基因A的重组质粒不含有完整的LacZ基因，受体菌不能分泌分解β-半乳糖苷而使培养基变蓝的酶
【解析】
【分析】PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变性原理，通过控制温度控制控制DNA分子的解聚和结合，过程：①高温变性: DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
基因工程技术的基本步骤：
(1) 目的基因的筛选和获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2) 基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子.终止子和标记基因等。
(3) 将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4) 目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
小问1详解】
在筛选分解PE塑料能力大小的菌株时，应将两类菌株接种到以PE塑料为唯一碳源的培养基，不能分解PE塑料的细菌，因为缺少营养物质碳源死亡；该培养基属筛选出能分解PE塑料类的细菌，所以从功能上讲属于选择培养基；筛选分解PE塑料能力强的菌株不能直接以降解圈的大小为指标，因为菌体繁殖力不同，形成的菌落大小不同，故应该看菌落直径和降解圈直径的比值来判断菌株对PE塑料的分解能力；原本YP1对PE塑料的分解能力弱于YT1，而培养基3中接种混合培养后的YP1，其降解圈直径明显加大，其原因可能是YP1菌株整合了YT1的对PE塑料高分解力的基因，发生了转化。
【小问2详解】
①观察图1PCR1大引物是指：以诱变引物延伸得到的DNA链为模板，引物1与之结合延伸得到的DNA子链；经过PCR1得到大引物再利用大引物和引物2至少3个PCR循环才能获得完整的改良A基因，所以至少需要4个PCR循环才能获得完整的改良A基因；
②构建改良基因表达载体时，为实现质粒和改良基因的准确连接，应选用的限制酶是XmaⅠ和BglⅡ，酶切位点在目的基因两侧，且在质粒中这两个酶切位点在启动子和终止子之间，不破坏氨苄青霉素抗性基因，复制原点等重要原件，两种限制酶，形成的黏性末端不同，所以不会出现目的基因和质粒的自我环化以及目的基因的反向连接；在含氨苄青霉素和β半乳糖苷的平板上培养一段时间后，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是含有改良基因A的重组质粒不含有完整的LacZ基因，受体菌不能分泌分解β-半乳糖苷而使培养基变蓝的酶。
组别
0h
6h
12h
24h
PE组
1.12
1.00
0.32
0
SC组
1.12
1.00
0
0
组别（小孔编号）
小孔添加物
对不同菌种的抑菌圈直径（mm）
A
B
C
1
150μL纯生姜精油
13.4
13.3
13.9
2
150μL吐温溶液和纯生姜精油
（体积比1∶1）
15.8
15.6
15.6
3
150μL缓冲液（空白对照）
8
8
8
4
150μL吐温溶液和缓冲液（体积比1∶1）
8
8
8
培养基及接种菌株
培养基1
培养基2
培养基3
单独培养并接种YT1
单独培养并接种YP1
混合培养YT1和YP1后，选取YP1接种
降解圈（直径D/mm）
3．5
1．8
4．2
试管动物
克隆动物
生殖方式
有性生殖
无性生殖
技术手段
体外受精、胚胎移植
核移植技术、胚胎移植
遗传规律
遵循
不遵循
组别
0h
6h
12h
24h
PE组
1.12
1.00
0.32
0
SC组
1.12
1.00
0
0
组别（小孔编号）
小孔添加物
对不同菌种的抑菌圈直径（mm）
A
B
C
1
150μL纯生姜精油
13.4
13.3
13.9
2
150μL吐温溶液和纯生姜精油
（体积比1∶1）
15.8
15.6
15.6
3
150μL缓冲液（空白对照）
8
8
8
4
150μL吐温溶液和缓冲液（体积比1∶1）
8
8
8
培养基及接种菌株
培养基1
培养基2
培养基3
单独培养并接种YT1
单独培养并接种YP1
混合培养YT1和YP1后，选取YP1接种
降解圈（直径D/mm）
3．5
1．8
4．2