江苏省常州市金坛区第一中学2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份江苏省常州市金坛区第一中学2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版），共43页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单项选择题：本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。
1. 我国科研人员鉴定出飞蝗群聚的信息素4-乙烯基苯甲醚（4VA），它能诱导蝗虫从低密度的散居型转变为高密度的群居型，最终形成蝗灾。下列有关说法错误的是（ ）
A. 常用样方法调查蝗虫的若虫（跳蝻）的种群密度
B. 蝗虫散居型和群居型体现了种群的空间特征
C. 利用 4VA诱杀蝗虫可改变蝗虫的性别比例
D. 可根据 4VA 的结构设计拮抗剂，阻止蝗虫的聚集
2. 将少量酵母菌接种到一定体积的培养液中，在适宜条件下培养，得到的酵母菌数目变化曲线如图一所示，图二为观察到的血细胞计数板的一个中方格。下列分析错误的是（ ）

A. 从培养瓶中吸取培养液前要充分振荡，否则计数结果一定偏小
B. 实验开始时接种酵母菌数量的多少，会影响到达K值所需的时间
C. 计数图二所示的中方格内的酵母菌数目应为24个
D. 利用图二的计数方法获得图一曲线，需要对酵母菌进行染色排除死亡个体
3. 调查法是生物学常用方法之一，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 调查沿河岸分布的某植物种群密度时，宜采用五点取样法
B. 调查某濒临灭绝的大型肉食动物的种群数量时，宜采用标记重捕法
C. 调查一农田中某种鼠的种群密度，最常用的方法是标记重捕法
D. 调查分布范围小而个体大的生物群落的物种丰富度时，应采用目测估计法
4. 超强台风使某海岸的原生植被遭到严重破坏，经过一年的人工和自然修复，现有植被分布如下图所示。以下叙述错误的是（ ）
A. 群落的物种组成是区分不同群落的重要特征
B. 海岸的低潮带至超高潮带分布的植被不同，这体现了群落的垂直结构
C. 该海岸上枸杞和柽柳之间的竞争程度比獐毛和白茅之间的竞争程度强
D. 互花米草虽能保滩护堤、消减海浪，但其繁殖快速，修复选用需慎用
5. 为落实“绿水青山就是金山银山”理念，某地实施了退耕还湖工程。某经过改造的湖泊生态系统中存在三个营养级，其能量流动情况如下表（单位：×103kJ）。下列叙述正确的是（ ）
A. 该生态系统的结构是指各种生物通过食物链和食物网形成的营养结构
B. 候鸟迁入和迁出导致群落物种组成和空间结构发生变化，这属于群落演替
C. 通过该表无法计算出第三营养级的消费者用于生长、发育和繁殖的能量
D. 表中的X的具体数值是6，由第一营养级向第二营养级的能量传递效率是14%
6. 如图为某生态系统的组成成分图，其中字母表示各组成成分，箭头表示碳元素的流动方向，下列叙述错误的是（ ）
A. a、b、c、d、e、f组成了一个完整的生态系统
B. 该系统中的能量通过b→c→d →e渠道进行流动
C. 碳在系统中循环的形式是CO2，图中还缺少b→a、c→a和d→a
D. 该系统中营养结构由1条食物链组成；f为分解者，只包含真菌和细菌
7. 中国传统文化中有很多农牧业生产的现象规律总结，下列相关说法错误的是（ ）
A. “无田甫田，维莠骄骄”描述的是农田中狗尾草的生长的现象，狗尾草与农作物之间是种间竞争关系
B “菜花黄，蜂闹房”体现消费者对农作物传粉具有重要作用
C. “呦呦鹿鸣，食野之苹”描述的是捕食关系，“呦呦”属于生态系统中的行为信息
D. “去其螟螣，及其蟊贼，无害我田稚”描述农业生产应避免虫害，体现了合理调整能量流动关系，使能量持续流向对人最有益的部分
8. A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理
B. 四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
C. 滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强
D. 接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养
9. 在制作发酵食品的实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料
B. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
C. 葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋
D. 果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃
10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 图示途径体现了植物组织培养技术用于作物繁殖的新途径
B. 通常需用体积分数为70%的酒精对外植体进行消毒
C. 通过液体培养基来大量培养高产细胞系，可以实现对辣椒素的工业化生产
D. 植物茎尖分生区附近几乎无病毒，可用作外植体培养脱毒苗，获得抗病毒的植株
11. 为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，采用细胞培养板添加溶于DMSO溶剂的三种药物培养肺癌细胞，培养过程及结果如图所示。下列说法正确的是（ ）

A. 细胞培养液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染
B. 对照组中应加入等体积的生理盐水在CO2培养箱中培养肺癌细胞
C. 起始肺癌细胞数量应保持一致，计数时应用胃蛋白酶处理贴壁细胞
D. 根据实验结果，药物X的抗癌效果比Y好，药物Z没有抗癌作用
12. 为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者增加了一个步骤，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。如图为该实验操作示意图。下列叙述错误的是
A. 骨髓瘤细胞无法在HAT选择培养基中存活
B. 杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
C. B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
D. 该实验最终目的是筛选出能产生抗EBV抗体的杂交瘤细胞
13. 三亲婴儿技术是一种辅助生殖技术，旨在帮助那些有线粒体疾病风险的女性生育健康的孩子。其培育过程如图，下列叙述错误的是（ ）

A. 卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 供体精子需获能后才能与卵母细胞发生受精作用
C. 该技术可避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
14. 已知正常β珠蛋白基因(以βA表示)经Mst I限制酶切割后可得到长度为1． 15kb和．2kb的两个片段(其中0．2kb的片段通常无法检测到)，异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在Mst I限制酶切割点上，因而失去了该酶切位点，经Mst I限制酶处理后只能形成一个1.35kb的DNA片段，如图l；现用Mst I限制酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理，并进行DNA电泳，结果如图2，则1、2、3号样品的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)
A. βSβS、βAβS、βAβAB. βAβA、βAβS、βSβS
C. βAβS、βSβS、βAβAD. βAβS、βAβA、βSβS
15. 目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片段。下列有关说法错误的是（ ）

A. PCR复性温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B. 电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C. 选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接
D. 选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得3分。选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
16. 长白山地区稻田很好地形成了“四周种芋头、空中频灯诱、禾间天敌吃、禾下养蛙鳅”的共养体系。如图为该共养体系的能量流动示意图，字母代表能量值，其中a2、b3、d1、d2表示同化量。下列叙述正确的是（ ）
A. 该共养体系物种丰富度增加，提高了稻田生态系统的稳定性和生产力
B. “空中频灯诱”是利用物理信息对害虫进行生物防治
C. 第二营养级和第三营养级之间的能量传递效率为b3/（b1+b2+b3+d1）×100%
D. 两种植食性动物之间的种间竞争，一定会导致它们的生态位发生分化
17. 畜牧业上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列叙述错误的是（ ）
A. 图中的激素处理是用添加促性腺激素的饲料使雌牛超数排卵
B. 为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
C. 途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D. 途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
18. 我国科学家利用了Xba I和Sac I两种限制酶，并运用农杆菌转化法，将富含赖氨酸蛋白质编码基因（含678pp）导入某植物细胞，再经植物组织培养获得转基因植株，使赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图所示是相关培育过程（质粒的其他部位和目的基因内部均无Xba I、Sac I、Hind III的识别位点），下列说法正确的是（ ）
A. 一个内含目的基因的模板DNA经PCR扩增6次共产生52个等长片段
B. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法
C. 植物组织培养过程中，培养基需添加卡那霉素以便筛选转基因植株
D. 使用Sac I和Hind III切割重组质粒后能得到1500bp左右的片段
19. 重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物，在PCR过程中，互补的核苷酸片段形成重叠，重叠的部分互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1，构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是（ ）

A. 通过PCR1获得产物AB需要进行2轮PCR扩增
B. 无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C. 在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D. 通过重叠延伸PCR技术对甘油激酶的改造属于蛋白质工程
三、非选择题：本部分包括5题，共58分
20. I：生态工作者从东到西对我国北方A、B、C三种类型的草原的植物物种数量进行调查。下表是不同调查面积的统计结果。请回答下列问题：
（1）调查A草原时最适宜的样方是______，为了使结果更加可靠，可以随机选取5个样方，应该以______（填“平均数目”、“最大数目”“最少数目”）作为最终结果。调查结果显示，A草原中共有植物______种。
（2）调查B草原某种双子叶草本植物种群密度时，应选取______为最佳样方面积，且取样时应注意______。若选取3个合适的样方对该物种计数的结果分别是 n1、n2、n3， 则该物种的种群密度为______株/m2。
Ⅱ：图甲是某草原中的鼠数量变化曲线图；图乙表示某同学进行“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验得到的曲线图。该同学的具体操作为：先向试管中加入10mL 无菌马铃薯培养液，再向试管中接入酵母菌，之后将试管置于适宜环境中连续培养，每天定时取样，计数，并绘制曲线图。请回答下列问题：
（3）草原上的鼠对生态环境破坏极大，最好在图甲中______（填“b”“c”或“d”）时刻前进行防治。若图甲中曲线Ⅱ表示在草原中投放了一定数量的蛇之后鼠的数量变化曲线，曲线Ⅱ表明蛇发挥明显生态效应的时间段是______。若投放的蛇因不适应当地草原的环境部分死亡，则图中α的角度将会______（填“变大”“变小”或“不变”）。
（4）为了绘制得到图乙的曲线图，可采取______法每天对酵母菌数量进行调查。图丙是b时刻等量台盼蓝染色后用血细胞计数板（400个小方格，体积为1mm×1mm×0.1mm）测得的酵母菌分布情况，一个中方格上有24个酵母菌，其中被染上颜色的有10个，若以该中方格的酵母菌数代表整个计数室中每个中方格酵母菌数的平均值。则该1L培养液中酵母菌的K值约为______个。
21. 近年来基于植物根际促生菌（PGPR）的生物修复技术逐渐成为修复严重受损的河湖生态系统的一种重要手段。下图为利用固化载体微生物（将PGPR固定于载体中）修复某重度富营养化小型湖泊的作用示意图。请回答下列问题。
（1）区分不同水体群落的最重要特征是_________。滤食性鱼类主要分布在水体上层，草食性鱼类主要分布在水体的中下层和水草多的地方，这种分布的意义是__________。
（2）少量的污染物流入湖泊，无需进行治理即可快速恢复，原因是生态系统存在__________能力。若污染物持续不断流入，会导致湖泊中鱼虾大量死亡，________稳定性降低。
（3）固定于载体中的PGPR一方面可快速降解污染物，释放_________，为沉水植物和挺水植物提供养分；另一方面可与水体中的有害菌竞争，降低水体中有害菌的比例，减植物病虫害的发生。沉水植物也可为PGPR提供有机养分和_________，二者的种间关系为________。接种PGPR时通常需选择土著微生物，遵循了生态工程的__________原理。
（4）某科研团队对采取该生物修复技术修复后的人工鱼塘的能量流动进行定量分析，得出相关数据，如下表所示（部分数据未给出，能量单位为×103J/cm2·a，肉食性动物作为只占据一个营养级研究）。
据表分析，Y的数值为________，流入该人工鱼塘的总能量为________J/cm2·a，植食性动物和肉食性动物间的传递效率为_________（保留1位小数）。
22. 炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病，其病原体炭疽杆菌是一类需氧芽孢杆菌，其代谢过程中会将大量的代谢产物排出胞外。某种噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，以下是对炭疽杆菌的实验室培养和炭疽病疑似患者的诊断过程。回答下列问题。
（1）培养基的营养成分见下表。制备该培养基时需采取______方法灭菌，该培养基属于______（填序号）
①固体培养基 ②液体培养基③基础培养基 ④选择培养基
（2）从生态系统的成分上看，炭疽杆菌属于______，噬菌体与它的种间关系是______。
（3）具体诊断过程见下表
（4）据上表数据分析，每毫升样品中的细菌数量为______个。在进行以上定量实验时，采取的分离计数方法为______，该方法统计得到的细菌数量与实际相比______（填“偏大”或“不变”或“偏小”）。
（5）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与炭疽杆菌不相同的是______。
A. 制作果酒B. 制作果醋
C. 制作泡菜D. 酸奶
23. 黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员开展下列研究。
（1）科研人员利用小鼠制备抗AFB 的单克隆抗体（即AFB 单抗），运用了______和______的动物细工程技术，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用______。
（2）AFB 单抗的制备过程如图1，杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ______和Ⅲ______检测，经过多次筛选获得。
（3）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述流程获得的AFB单抗具有极强的特异性，应补充的检测是______，预测相应的实验结果是______。
（4）科研人员拟将 AFB 单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M 稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图2，探针发光性能与物质 P的浓度关系如图3。
依据图3结果，科研人员选择物质 P的浓度为______作为生产检测探针的条件。
（5）科研人员制备定量检测AFB 的免疫试纸，如图4。试纸的T线处固定的物质是AFB，C线处固定的物质是抗AFB 单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向有扩散经过T线和C线。
若加样处，滴加只含“MP-AFB 单抗探针”的样液，能检测到荧光的线为______（填“T线”、“C线”或“T线和C线”）；若滴加样液中含有MP-AFB 单抗探针和高浓度的AFB，T线的发光性为______（填“发荧光”或“不发荧光”）。
（6）单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用?______（至少写两点）。
24. 2'-岩藻糖基乳糖（2'-FL）是一种新型稀有母乳寡糖，具有提高婴幼儿免疫力的作用，常用转基因大肠杆菌为生产菌株进行发酵生产。大肠杆菌合成2'-FL过程（图1）中涉及6种关键酶，其中FutC 蛋白的溶解性与酶促效率紧密相关。我国科学家尝试将某高产岩藻多糖细菌（K菌）的相关基因和MBP-futC 融合基因（MBP 为促融标签基因，其表达产物可提高异源蛋白的溶解性）导入大肠杆菌，从而构建高产2'-FL的工程菌株。请回答下列问题：

（1）利用BiBrick技术（图2）构建pET-ABDFG质粒：

①提取K菌的DNA，通过PCR扩增分别获得K菌的A、B、D、F和G基因，PCR时在上述基因模板链的5'端引入XbaI的识别序列、3'端引入____的识别序列，一般还需要往PCR反应缓冲液中加入Mg2+，其原因是____。PCR 后通过____（方法）鉴定和提纯上述目的基因。
②利用BiBrick技术将上述基因逐个接入pET质粒（图3）中，获得pET-ABDFG质粒。BiBrick技术需用SpeI+SacI和XbaI+SacI分别对质粒和待接入基因进行酶切处理，由于SpeI和XbaI酶切处理后的黏性末端____，因此可在DNA连接酶的作用下彼此连接，连接处形成的DNA序列____（填“能”或“不能”）被Spel再次识别，从而保证在接入下一个目的基因时____。
（2）构建pET-ABDFG-MfutC质粒：

①利用重叠PCR的方法构建MBP-futC融合基因，具体过程见图4。其中，F₂和R₁的5'端引入的序列____（填“相同”或“互补”），在第三次PCR的反应体系中____。
A.需加入F1和R2
B.需加入F2和R1
C.不需要加入引物
②利用BiBrick技术将MBP-futC 融合基因接入pET-ABDFG质粒，获得pET-ABDFG-MfutC质粒。
（3）质粒转化：向感受态大肠杆菌悬液中加入pET-ABDFG 质粒，转化后接种于含____的、平板上筛选出成功转化的大肠杆菌。
（4）2'-FL发酵检测：
①挑选成功转化的大肠杆菌单菌落扩大培养后进行培养。
②通过检测后发现2'-FL产量可达30.1mL/L，若要进一步提高发酵菌的产2'-FL能力，据图1分析，还可对发酵菌进行____等遗传改造。
2025年春学期金坛一中高二年级生物学科4月阶段调研试卷
（检测用时：75分钟 本卷满分：100分）
一、单项选择题：本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。
1. 我国科研人员鉴定出飞蝗群聚的信息素4-乙烯基苯甲醚（4VA），它能诱导蝗虫从低密度的散居型转变为高密度的群居型，最终形成蝗灾。下列有关说法错误的是（ ）
A. 常用样方法调查蝗虫的若虫（跳蝻）的种群密度
B. 蝗虫散居型和群居型体现了种群的空间特征
C. 利用 4VA诱杀蝗虫可改变蝗虫的性别比例
D. 可根据 4VA 的结构设计拮抗剂，阻止蝗虫的聚集
【答案】C
【解析】
【分析】种群具有种群密度、出生率和死亡率、迁出率和迁入率、年龄组成和性别比例四个基本特征．种群在单位面积或单位体积中的个体数就是种群密度。对于活动能力强、活动范围大的个体调查种群密度时适宜用标志重捕法，而一般植物和个体小、活动能力小的动物以及虫卵等种群密度的调查方式常用的是样方法。
【详解】A、由于跳蝻个体较小，数量较多，没有翅，活动能力小，所以调查跳蝻的种群密度的大小可采用的调查方法是样方法，A正确；
B、种群的空间特征包括随机分布型、均匀分布型和集群分布型，蝗虫散居型和群居型体现了种群的空间特征，B正确；
C、据题干信息“4VA能诱导蝗虫从低密度的散居型转变为高密度的群居型”可知，4VA诱杀蝗虫改变了蝗虫的空间特征，但无法推知其可以改变蝗虫的性别比例，C错误；
D、据题干信息“4VA能诱导蝗虫从低密度的散居型转变为高密度的群居型”可知，可根据4VA的结构设计拮抗剂，阻止蝗虫的聚集，D正确。
故选C。
2. 将少量酵母菌接种到一定体积的培养液中，在适宜条件下培养，得到的酵母菌数目变化曲线如图一所示，图二为观察到的血细胞计数板的一个中方格。下列分析错误的是（ ）

A. 从培养瓶中吸取培养液前要充分振荡，否则计数结果一定偏小
B. 实验开始时接种酵母菌数量的多少，会影响到达K值所需的时间
C. 计数图二所示的中方格内的酵母菌数目应为24个
D. 利用图二的计数方法获得图一曲线，需要对酵母菌进行染色排除死亡个体
【答案】A
【解析】
【分析】利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。
【详解】A、从试管中吸取培养液前要振荡试管，从而使酵母菌分布均匀，否则会导致结果有误差，但不一定就是偏小，A错误；
B、K值大小与接种酵母菌数量的多少无关，但接种数量的多少会影响到达K值所需的时间，B正确；
C、在酵母菌计数时，计数原则为“计上不计下，计左不计右”，因此计数两条相邻边和顶角，计数结果酵母菌有24个，C正确；
D、用血细胞计数板对酵母菌进行计数时，由于观察到的细胞中含有死细胞，故需要对酵母菌进行染色排除死亡个体，这样会使实验结构更加精确，D正确。
故选A。
3. 调查法是生物学常用的方法之一，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 调查沿河岸分布的某植物种群密度时，宜采用五点取样法
B. 调查某濒临灭绝的大型肉食动物的种群数量时，宜采用标记重捕法
C. 调查一农田中某种鼠的种群密度，最常用的方法是标记重捕法
D. 调查分布范围小而个体大的生物群落的物种丰富度时，应采用目测估计法
【答案】C
【解析】
【分析】调查种群密度常用样方法和标记重捕法，其中样方法适用于调查植物和活动能力弱、活动范围小的动物，而标记重捕法适用于调查活动能力强、活动范围大的动物。当种群数量极少，调查其种群数量时，应该逐个计数。
【详解】A、沿河岸通常为长方形，因此调查沿河岸的某植物的种群密度适宜采用等距取样法，A错误；
B、濒临灭绝的动物数量极少而且是大型肉食动物，适合采用逐个计数的方法，不适合用标记重捕法，B错误；
C、农田中某种鼠为活动能力强、活动范围大的动物，故调查一农田中某种鼠的种群密度，最常用的方法是标记重捕法，C正确；
D、调查分布范围小而个体大的生物群落的物种丰富度时，应采用记名计算法，D错误。
故选C。
4. 超强台风使某海岸的原生植被遭到严重破坏，经过一年的人工和自然修复，现有植被分布如下图所示。以下叙述错误的是（ ）
A. 群落的物种组成是区分不同群落的重要特征
B. 海岸的低潮带至超高潮带分布的植被不同，这体现了群落的垂直结构
C. 该海岸上枸杞和柽柳之间的竞争程度比獐毛和白茅之间的竞争程度强
D. 互花米草虽能保滩护堤、消减海浪，但其繁殖快速，修复选用需慎用
【答案】B
【解析】
【分析】区分不同群落的重要特征是群落的物种组成。生物群落有一定的生态环境，在不同的生态环境中有不同的生物群落。生态环境越优越,组成群落的物种种类数量就越多，反之则越少。
【详解】A、群落是一定范围内所有生物的集合体，物种组成越丰富，群落越复杂，A正确；
B、海岸的低潮带至超高潮带分布的植被不同，这是水平方向上的变化，体现了群落的水平结构，B错误；
C、该海岸上枸杞和柽柳都处于超高潮带，獐毛和白茅分别处于不同的潮带，因此枸杞和柽柳之间的竞争程度比獐毛和白茅之间的竞争程度强，C正确；
D、互花米草虽能保滩护堤、消减海浪，但其繁殖快速，威胁当地的物种，需慎用，D正确。
故选B。
5. 为落实“绿水青山就是金山银山”理念，某地实施了退耕还湖工程。某经过改造的湖泊生态系统中存在三个营养级，其能量流动情况如下表（单位：×103kJ）。下列叙述正确的是（ ）
A. 该生态系统的结构是指各种生物通过食物链和食物网形成的营养结构
B. 候鸟迁入和迁出导致群落物种组成和空间结构发生变化，这属于群落演替
C. 通过该表无法计算出第三营养级消费者用于生长、发育和繁殖的能量
D. 表中的X的具体数值是6，由第一营养级向第二营养级的能量传递效率是14%
【答案】D
【解析】
【分析】1、生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构两部分，组成成分有非生物物质和能量、生产者、消费者和分解者，营养结构指生物之间以食物营养为纽带所形成的食物链和食物网；
2、同化量=呼吸作用消耗+用于生长、发育和繁殖的能量，用于生长、发育和繁殖的能量=未利用+流入下一营养级+其他部分；
3、能量传递效率=下一营养级同化量/上一营养级同化量×100%。
【详解】A、生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构两部分，组成成分有非生物物质和能量、生产者、消费者和分解者，营养结构指生物之间以食物营养为纽带所形成的食物链和食物网，A错误；
B、候鸟的迁入和迁出导致群落的物种组成和空间结构发生变化属于群落的季节性，B错误；
C、根据计算公式：同化量=呼吸作用消耗+用于生长、发育和繁殖的能量，用于生长发育和繁殖的能量=未利用+流入下一营养级+其他部分，在该生态系统中，肉食性动物为最高营养级，无流入下一营养级的能量，结合表中数据可得肉食性动物用于生长、发育和繁殖的能量为3.2×103KJ，C错误；
D、根据C选项中的计算公式可推算出肉食性动物能量计算公式为：Z=3.8+3.1+0.1=7，植食性动物能量计算公式为：Y=26.5+34.3+2.2+7=70，植物能量计算公式为：500=132+292+X+70，即X=6；结合能量传递效率计算公式：能量传递效率=下一营养级同化量/上一营养级同化量×100%，可计算第一营养级向第二营养级的传递效率为70/500×100%=14%，D正确。
故选D。
6. 如图为某生态系统的组成成分图，其中字母表示各组成成分，箭头表示碳元素的流动方向，下列叙述错误的是（ ）
A. a、b、c、d、e、f组成了一个完整的生态系统
B. 该系统中的能量通过b→c→d →e渠道进行流动
C. 碳在系统中循环的形式是CO2，图中还缺少b→a、c→a和d→a
D. 该系统中营养结构由1条食物链组成；f为分解者，只包含真菌和细菌
【答案】D
【解析】
【分析】生态系统的组成成分是按其营养功能区分的，包括生产者、消费、分解者和非生物的物质和能量，其中生产者是生态系统的主要成分，是生态系统的基石。图中c为植食性动物，e为大型肉食动物，f为分解者。
【详解】A、a为非生物的物质和能量，b、c、d、e、f为生物成分，它们组成了一个完整的生态系统，A正确；
B、b→c→d →e构成食物链，该系统中的能量通过b→c→d →e渠道进行流动，B正确；
C、碳在系统中循环的形式是CO2，生产者、消费者均可以产生二氧化碳，图中还缺少b→a、c→a和d→a，C正确；
D、b、c、d、e可能各包含多种生物，该系统中营养结构不止1条，分解者也包括蚯蚓等腐生动物，D错误。
故选D。
【点睛】
7. 中国传统文化中有很多农牧业生产的现象规律总结，下列相关说法错误的是（ ）
A. “无田甫田，维莠骄骄”描述的是农田中狗尾草的生长的现象，狗尾草与农作物之间是种间竞争关系
B. “菜花黄，蜂闹房”体现消费者对农作物传粉具有重要作用
C. “呦呦鹿鸣，食野之苹”描述的是捕食关系，“呦呦”属于生态系统中的行为信息
D. “去其螟螣，及其蟊贼，无害我田稚”描述农业生产应避免虫害，体现了合理调整能量流动关系，使能量持续流向对人最有益的部分
【答案】C
【解析】
【分析】农作物和杂草间构成了种间竞争关系。消费者在对于植物传粉具有重要意义，对生态系统来说可以促进种群繁衍，对于农作物来说可以提高产量。生态系统的信息包括三种，声音属于物理信息。农业生产中应调整能量流动关系，使能量持续流向对人类最有益的部分。
【详解】A、狗尾草与农作物之间竞争阳光、养料，是种间竞争关系，A正确；
B、消费者对农作物传粉具有重要作用，传粉后可形成受精卵，进而形成种子形成果实，B正确；
C、“呦呦鹿鸣，食野之苹”描述的是捕食关系，“呦呦”属于生态系统中的物理信息，而非行为信息，C错误；
D、“去其螟螣，及其蟊贼，无害我田稚”描述农业生产避免虫害，体现了合理调整能量流动关系，使能量持续流向对人最有益的部分的生态学原理，D正确。
故选C。
8. A、B、C、D四种抗生素均可治疗金黄色葡萄球菌(Sau) 引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于Sau均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验中一般采用干热灭菌的方法对培养皿进行灭菌处理
B. 四种抗生素中，抗生素A治疗Sau感染引起的肺炎效果最好
C. 滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远抗药性越强
D. 接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术，可以对培养皿进行灭菌处理，A正确；
B、据抑菌圈的大小，抗生素D的抑菌圈最小，治疗Sau感染引起的肺炎效果最差；而抗生素A抑菌圈最大，则治疗Sau感染引起的肺炎效果最好，B正确；
C、滤纸片b周围抑菌圈中出现的菌落，离抑菌圈越远，药性变弱，说明菌落抗药性越弱，C错误；
D、接种涂布后的培养皿倒置于37℃的恒温箱中培养，防止冷凝水滴落引发杂菌污染，D正确。
故选C。
9. 在制作发酵食品的实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料
B. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
C. 葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋
D. 果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃
【答案】A
【解析】
【分析】温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃。果醋发酵的条件是温度为：30～35 ℃为适宜，pH为酸性条件，且醋酸菌是好氧细菌，需要充足的氧气。
【详解】A、制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢出，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，A正确；
B、乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，B错误；
C、醋酸菌为需氧菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；
D、果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，果醋发酵时温度宜控制在30-35℃，泡菜的制作温度低于30-35℃，D错误。
故选A。
10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 图示途径体现了植物组织培养技术用于作物繁殖的新途径
B. 通常需用体积分数为70%的酒精对外植体进行消毒
C. 通过液体培养基来大量培养高产细胞系，可以实现对辣椒素的工业化生产
D. 植物茎尖分生区附近几乎无病毒，可用作外植体培养脱毒苗，获得抗病毒的植株
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：途径1是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；途径2是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。
【详解】A、途径1是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物，途径2是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物，图示途径体现了植物组织培养技术用于作物繁殖的新途径，A正确；
B、植物组织培养过程中需用体积分数70%的酒精对外植体进行消毒，以实现无菌操作，B正确；
C、植物细胞的培养一般使用液体培养基，辣椒素可从细胞培养物中获取，从而实现对辣椒素的工业化生产，C正确；
D、植物茎尖分生区附近几乎无病毒，可用作外植体培养脱毒苗，但不能抗病毒，D错误。
故选D。
11. 为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，采用细胞培养板添加溶于DMSO溶剂的三种药物培养肺癌细胞，培养过程及结果如图所示。下列说法正确的是（ ）

A. 细胞培养液中通常需要加入一定量的血清和抗生素，防止病毒污染
B. 对照组中应加入等体积的生理盐水在CO2培养箱中培养肺癌细胞
C. 起始肺癌细胞数量应保持一致，计数时应用胃蛋白酶处理贴壁细胞
D. 根据实验结果，药物X的抗癌效果比Y好，药物Z没有抗癌作用
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析题意可知：该实验目的是检测药物X、Y和Z的抗癌效果，自变量是检测药物X、Y和Z，因变量是检测细胞数量。
2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的pH）。
【详解】A、抗生素具有杀菌（不是杀病毒）作用，为防止培养液被污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，A错误 ；
B、由题干信息可知，三种药物是溶于DMSO溶剂的，则对照组中应加入等体积的DMSO溶剂，以排除体积和溶剂等无关因素的影响，B错误；
C、遵循实验的单一变量原则，无关变量起始肺癌细胞数量应保持一致，计数时要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C错误；
D、分析实验结果，加入X的癌细胞个数是6.7×104，加入Y的癌细胞个数是5.3×105，说明药物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌细胞个数是8.0×106，与空白对照相比，药物Z无抗癌作用，D正确。
故选D。
12. 为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者增加了一个步骤，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。上述细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。如图为该实验操作示意图。下列叙述错误的是
A. 骨髓瘤细胞无法在HAT选择培养基中存活
B. 杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降
C. B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等
D. 该实验最终目的是筛选出能产生抗EBV抗体的杂交瘤细胞
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：图示为单克隆抗体制备过程，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，该细胞株能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。
【详解】A、据图可知，骨髓瘤细胞在HAT选择培养基中死亡，A正确；
B、抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞可能丢失来自（效应）B细胞的染色体，故可能导致抗体产生能力下降，B正确；
C、B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，C正确；
D、该实验最终目是获得能产生可与抗原特异性结合的单克隆抗体，D错误。
故选D。
【点睛】
13. 三亲婴儿技术是一种辅助生殖技术，旨在帮助那些有线粒体疾病风险的女性生育健康的孩子。其培育过程如图，下列叙述错误的是（ ）

A. 卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 供体精子需获能后才能与卵母细胞发生受精作用
C. 该技术可避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. 三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。
【详解】A、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，A正确；
B、供体精子需经过体外获能处理后才能与卵母细胞发生受精作用，B正确；
C、母亲为“三亲婴儿“提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，C正确；
D、三亲婴儿来源于精子和卵母细胞结合形成的受精卵，属于有性生殖，D错误。
故选D。
14. 已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)经Mst I限制酶切割后可得到长度为1． 15kb和．2kb的两个片段(其中0．2kb的片段通常无法检测到)，异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在Mst I限制酶切割点上，因而失去了该酶切位点，经Mst I限制酶处理后只能形成一个1.35kb的DNA片段，如图l；现用Mst I限制酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理，并进行DNA电泳，结果如图2，则1、2、3号样品的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)
A. βSβS、βAβS、βAβAB. βAβA、βAβS、βSβS
C. βAβS、βSβS、βAβAD. βAβS、βAβA、βSβS
【答案】A
【解析】
【分析】电泳是指带电粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。不同的带电颗粒在同一电厂中涌动的速度不同，从而可将不同的DNA片段分开。
【详解】BD、因为0.2kb的片段通常无法检测到，所以βA只有一条带，由于其分子量相对小，跑得快，电泳带在下面，可知3号样品为βAβA，BD错误；
C、同理，1号样品为βSβS，C错误；
A、2号样品为两条带，说明既有βA，又有βS，A正确。
故选A。
15. 目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片段。下列有关说法错误的是（ ）

A. PCR复性温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B. 电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C. 选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接
D. 选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接
【答案】C
【解析】
【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。
【详解】A、退火是在高温解旋后降低温度让引物与模板链结合，退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链，A正确；
B、电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关，如电泳一段时间后，较大的DNA分子迁移距离小，离加样孔近，而较小的DNA分子迁移距离大，离加样孔远，B正确；
C、由于使用的引物是甲和丙，没有与基因相应位置配对，因此不管基因正接还是反接，均为450bp，C错误；
D、选取引物甲乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接，若正接，不能扩增出100bp的片段，D正确。
故选C。
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得3分。选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
16. 长白山地区稻田很好地形成了“四周种芋头、空中频灯诱、禾间天敌吃、禾下养蛙鳅”的共养体系。如图为该共养体系的能量流动示意图，字母代表能量值，其中a2、b3、d1、d2表示同化量。下列叙述正确的是（ ）
A. 该共养体系物种丰富度增加，提高了稻田生态系统的稳定性和生产力
B. “空中频灯诱”利用物理信息对害虫进行生物防治
C. 第二营养级和第三营养级之间的能量传递效率为b3/（b1+b2+b3+d1）×100%
D. 两种植食性动物之间的种间竞争，一定会导致它们的生态位发生分化
【答案】AB
【解析】
【分析】生态系统稳定性
1、概念：生态系统所具有保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力；
2、生态系统之所以能维持相对稳定，是由于生态系统具有自我调节能力。生态系统自我调节能力的。基础是负反馈。物种数目越多，营养结构越复杂，自我调节能力越大；
3、生态系统的稳定性具有相对性。当受到大规模干扰或外界压力超过该生态系统自身更新和自我调节能力时，便可能导致生态系统稳定性的破坏、甚至引发系统崩溃；
4、生态系统的稳定性：包括抵抗力稳定性和恢复力稳定性。生态系统成分越单纯，结构越简单抵抗力稳定性越低，反之亦然。草原生态系统恢复力稳定性较强，草地破坏后能恢复，而森林恢复很困难。抵抗力稳定性强的生态系统，它的恢复力稳定就弱。
【详解】A、物种丰富度增加意味着生态系统的营养结构更复杂，复杂的营养结构能够提高生态系统的自我调节能力，从而提高稳定性，并且通过各种生物之间的相互作用（如共养体系中的互利共生等）能够提高生产力，A 正确；
B、利用生态系统中的信息传递在生态系统中的作用来控制有害生物的数量，这属于生物防治 ，“空中频灯诱”是利用物理信息对害虫进行生物防治，B正确；
C、图中，第二营养级同化的能量为a2 +d1，第三营养级从第二营养级同化的能量为b3，因此第二营养级和第三营养级之间的能量传递效率为b3 /( a2 +d1)×100%，C错误；
D、两种植食性动物之间的种间竞争，不一定会导致它们的生态位发生改变，有可能达到一种相对稳定的共存状态，D错误。
故选AB。
17. 畜牧业上可通过下图两种途径实现良种牛的快速大量繁殖。下列叙述错误的是（ ）
A. 图中的激素处理是用添加促性腺激素的饲料使雌牛超数排卵
B. 为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精
C. 途径2进行胚胎移植前，不要对供体和受体进行免疫检查
D. 途径1和途径2过程中都有胚胎的形成，均为有性生殖
【答案】ABD
【解析】
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、图中的激素处理不能用添加促性腺激素的饲料，因为促性腺激素的本质是蛋白质，会被消化分解，应采用注射的方法，A错误；
B、新采集的精子应经过获能处理后再用于体外受精，B错误；
C、途径2进行胚胎移植前，需要对供体和受体进行同期发情处理，不需要做免疫检查，因为受体子宫对移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应，C正确；
D、途径1获得试管牛的技术流程中包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；途径2获得是试管牛是通过核移植技术获得的，为无性生殖，D错误。
故选ABD。
18. 我国科学家利用了Xba I和Sac I两种限制酶，并运用农杆菌转化法，将富含赖氨酸的蛋白质编码基因（含678pp）导入某植物细胞，再经植物组织培养获得转基因植株，使赖氨酸的含量比对照组明显提高，如图所示是相关培育过程（质粒的其他部位和目的基因内部均无Xba I、Sac I、Hind III的识别位点），下列说法正确的是（ ）
A. 一个内含目的基因的模板DNA经PCR扩增6次共产生52个等长片段
B. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的常用方法
C. 植物组织培养过程中，培养基需添加卡那霉素以便筛选转基因植株
D. 使用Sac I和Hind III切割重组质粒后能得到1500bp左右的片段
【答案】ABD
【解析】
【分析】图中①表示将目的基因导入农杆菌细胞，②表示采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，③表示采用植物组织培养将转基因植物细胞培养长转基因植株。
【详解】A、一个内含目的基因的模板DNA经PCR扩增6次共产生26-2×6=52个DNA，A正确；
B、将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法、花粉管通道法，B正确；
C、目的基因插入两个限制酶酶切位点之间，对卡那霉素抗性基因和新霉素抗性基因都无影响。之所以不能用卡那霉素筛选，是因为插入植物细胞染色体上的是质粒的T-DNA片段，而卡那霉素抗性基因不在此片段上，导入成功的植物细胞对卡那霉素无抗性，C错误；
D、根据切割目的基因的限制酶在质粒上的切割位点，可知由于重组质粒上移除1900bp而补充了目的基因的678个碱基对，加上未移除的822bp，所以用SacⅠ和HindⅢ切割重组质粒后，可得到822+678=1500bp的新片段，D正确。
故选ABD。
19. 重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物，在PCR过程中，互补的核苷酸片段形成重叠，重叠的部分互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1，构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是（ ）

A. 通过PCR1获得产物AB需要进行2轮PCR扩增
B. 无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C. 在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D. 通过重叠延伸PCR技术对甘油激酶的改造属于蛋白质工程
【答案】BD
【解析】
【分析】1、PCR原理：高温条件下打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。
【详解】A、通过PCR1获得产物AB需要进行3轮PCR扩增，A错误；
B、AB下链的延伸方向向左，CD上链的延伸方向向右，所以无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD，B正确；
C、需要分别在不同的反应体系中通过PCR获得AB和CD，C错误；
D、通过重叠延伸PCR技术对甘油激酶的改造，创造了自然界不存在的蛋白质，则属于蛋白质工程，D正确。
故选BD。
三、非选择题：本部分包括5题，共58分
20. I：生态工作者从东到西对我国北方A、B、C三种类型的草原的植物物种数量进行调查。下表是不同调查面积的统计结果。请回答下列问题：
（1）调查A草原时最适宜的样方是______，为了使结果更加可靠，可以随机选取5个样方，应该以______（填“平均数目”、“最大数目”“最少数目”）作为最终结果。调查结果显示，A草原中共有植物______种。
（2）调查B草原某种双子叶草本植物种群密度时，应选取______为最佳样方面积，且取样时应注意______。若选取3个合适的样方对该物种计数的结果分别是 n1、n2、n3， 则该物种的种群密度为______株/m2。
Ⅱ：图甲是某草原中的鼠数量变化曲线图；图乙表示某同学进行“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验得到的曲线图。该同学的具体操作为：先向试管中加入10mL 无菌马铃薯培养液，再向试管中接入酵母菌，之后将试管置于适宜环境中连续培养，每天定时取样，计数，并绘制曲线图。请回答下列问题：
（3）草原上的鼠对生态环境破坏极大，最好在图甲中______（填“b”“c”或“d”）时刻前进行防治。若图甲中曲线Ⅱ表示在草原中投放了一定数量的蛇之后鼠的数量变化曲线，曲线Ⅱ表明蛇发挥明显生态效应的时间段是______。若投放的蛇因不适应当地草原的环境部分死亡，则图中α的角度将会______（填“变大”“变小”或“不变”）。
（4）为了绘制得到图乙的曲线图，可采取______法每天对酵母菌数量进行调查。图丙是b时刻等量台盼蓝染色后用血细胞计数板（400个小方格，体积为1mm×1mm×0.1mm）测得的酵母菌分布情况，一个中方格上有24个酵母菌，其中被染上颜色的有10个，若以该中方格的酵母菌数代表整个计数室中每个中方格酵母菌数的平均值。则该1L培养液中酵母菌的K值约为______个。
【答案】（1） ①. 120cm×120cm ②. 最大数目 ③. 20
（2） ①. 100cm×100cm ②. 随机取样 ③. （n1+n2+n3）/3
（3） ①. b ②. ef ③. 变大
（4） ①. 抽样检测 ②. 7×109
【解析】
【分析】在对植物种群密度的取样调查中，通常采用样方法即在被调查种群的生存环境内，随机选取若干个样方，通过计数每个样方内的个体数，求得每个样方的种群密度，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。其实验过程为确定调查对象、选取样方、计数和计算种群密度。
【小问1详解】
据表格数据可知，在120×120调查范围下该草原的物种数量达到最大，此后调查范围增加，物种数量不变，故调查A草原时最适宜的样方是120cm×120cm，为了使结果更加可靠，可以随机选取5个样方，应该以样方中最大数目作为最终结果，调查结果显示，A草原中共有植物20种；
【小问2详解】
调查B草原某种双子叶草本植物种群密度时，选取物种数量达到稳定的最小面积100cm×100cm即1m×1m=1m2为最佳样方面积，且应采取随机取样。若选取3个合适的样方对该物种计数的结果分别是n1、n2、n3，应以调查样方的单位面积中种群个体数量的平均数作为种群密度的估计值，则该物种的种群密度为 （n1+n2+n3）/3株/m2；
【小问3详解】
草原上的鼠在b时刻种群数量为K/2，此时增长速率最快，故最好在b时刻前进行防治。在草原中投放了一定数量的蛇之后，鼠的天敌增加，环境容纳量下降，种群数量也会降低，因此，图甲曲线Ⅱ中，蛇在ef时间段发挥明显生态效应。若投放的蛇因不适应当地草原的环境部分死亡，鼠的天敌增加量变小，鼠种群数量下降速率将小一些，图中α角变大；
【小问4详解】
采取抽样检测的方法每天对酵母菌数量进行调查，可绘制得到图乙所示曲线图。由图丙及血球计数板规格可知，该血球计数板共25个中方格，一个中方格上有24个酵母菌，其中被染上颜色的有10个，说明活的酵母菌有14个，血球计数板上酵母菌数量为25×14=350个，又因为血球计数板体积为1mm×1mm×0.1mm，故1L酵母菌培养液含有的酵母菌数量为350/（0.1×10-3）×103=3.5×109个，此时刻测得酵母菌数量是K/2，故K值为3.5×109×2=7×109。
21. 近年来基于植物根际促生菌（PGPR）的生物修复技术逐渐成为修复严重受损的河湖生态系统的一种重要手段。下图为利用固化载体微生物（将PGPR固定于载体中）修复某重度富营养化小型湖泊的作用示意图。请回答下列问题。
（1）区分不同水体群落的最重要特征是_________。滤食性鱼类主要分布在水体上层，草食性鱼类主要分布在水体的中下层和水草多的地方，这种分布的意义是__________。
（2）少量的污染物流入湖泊，无需进行治理即可快速恢复，原因是生态系统存在__________能力。若污染物持续不断流入，会导致湖泊中鱼虾大量死亡，________稳定性降低。
（3）固定于载体中的PGPR一方面可快速降解污染物，释放_________，为沉水植物和挺水植物提供养分；另一方面可与水体中的有害菌竞争，降低水体中有害菌的比例，减植物病虫害的发生。沉水植物也可为PGPR提供有机养分和_________，二者的种间关系为________。接种PGPR时通常需选择土著微生物，遵循了生态工程的__________原理。
（4）某科研团队对采取该生物修复技术修复后的人工鱼塘的能量流动进行定量分析，得出相关数据，如下表所示（部分数据未给出，能量单位为×103J/cm2·a，肉食性动物作为只占据一个营养级研究）。
据表分析，Y的数值为________，流入该人工鱼塘的总能量为________J/cm2·a，植食性动物和肉食性动物间的传递效率为_________（保留1位小数）。
【答案】（1） ①. 物种组成 ②. 有利于充分利用环境资源
（2） ①. 自我调节 ②. 抵抗力
（3） ①. N和P ②. 氧气##O2 ③. 原始合作（互惠） ④. 协调
（4） ①. 8 ②. 1.25×105 ③. 19.2%
【解析】
【分析】能量流经某一营养级过程：输入某一营养级的能量，一部分在本营养级的呼吸作用中以热能的形式散失；另一部分用于本营养级的生长、发育和繁殖等生命活动，这部分能量其中一些以遗体残骸的形式被分解者利用。如果本营养级被下一营养级捕食，能量就流入了下一营养级。如果时间较短，本营养级生物大量繁殖后，会有一部分能量留在本营养级内，即未利用的部分。
【小问1详解】
区分不同群落的重要特征是物种组成。滤食性鱼类主要分布在水体上层，草食性鱼类主要分布在水体的中下层和水草多的地方，这种垂直分层有利于动物充分利用环境资源。
【小问2详解】
少量的污染物流入湖泊，无需进行治理即可快速恢复，这主要是由于生态系统具有自我调节能力。若污染物持续不断流入，会导致湖泊中鱼虾大量死亡，说明生态系统的自我调节能力是有一定限度的，生态系统的抵抗力稳定降低。
【小问3详解】
PGPR属于生态系统的分解者，一方面可快速降解污染物，释放N和P，进而为沉水植物和挺水植物提供养分；另一方面可与水体中的有害菌竞争，降低水体中有害菌的比例，减植物病虫害的发生。沉水植物作为生产者的一部分，也可为PGPR提供有机养分和氧气，二者共同生活在一起时，双方都受益，分开后，二者又都可以独立生活，所以二者的种间关系是原始合作。接种PGPR时通常需选择土著微生物，体现了在进行生态工程建设时，生物与环境、生物与生物的协调与适应，是生态工程协调原理的体现。
【小问4详解】
生产者的同化量=呼吸作用散失的能量+用于生长发育繁殖的能量=48+62=110×103J/cm2·a，流入该人工鱼塘的总能量=生产者的同化量+外来有机物输入的能量=110+5+10=125×103J/cm2·a=1.25×105J/cm2·a，生产者流向植食性动物的能量=生产者用于生长发育繁殖的能量-流向分解者的能量-未利用的能量=62-6-35=21×103J/cm2·a，植食性动物固定的能量=输出的能量，所以X=21+5-13=13×103J/cm2·a，由植食性动物流向肉食性动物的能量=植食性动物用于生长发育繁殖的能量-流入分解者的能量-未利用的能量=13-3-5=5×103J/cm2·a，肉食性动物固定的能量=输出的能量，所以呼吸作用散失的热能Y=肉食性动物固定的能量-肉食性动物用于生长发育繁殖的能量=5+10-7=8×103J/cm2·a，植食性动物和肉食性动物间的传递效率=植食性动物流向肉食性动物的能量植食性动物固定的能量100%=5（21+5）100%19.2%。
22. 炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病，其病原体炭疽杆菌是一类需氧芽孢杆菌，其代谢过程中会将大量的代谢产物排出胞外。某种噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，以下是对炭疽杆菌的实验室培养和炭疽病疑似患者的诊断过程。回答下列问题。
（1）培养基的营养成分见下表。制备该培养基时需采取______方法灭菌，该培养基属于______（填序号）
①固体培养基 ②液体培养基③基础培养基 ④选择培养基
（2）从生态系统的成分上看，炭疽杆菌属于______，噬菌体与它的种间关系是______。
（3）具体诊断过程见下表
（4）据上表数据分析，每毫升样品中的细菌数量为______个。在进行以上定量实验时，采取的分离计数方法为______，该方法统计得到的细菌数量与实际相比______（填“偏大”或“不变”或“偏小”）。
（5）使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与炭疽杆菌不相同的是______。
A. 制作果酒B. 制作果醋
C. 制作泡菜D. 酸奶
【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. ①③
（2） ①. 消费者 ②. 寄生
（3） ①. 等量生理盐水 ②. 低 ③. 噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降 ④. 炭疽杆菌大量繁殖产生大量代谢产物
（4） ①. 1.63×109 ②. 稀释涂布平板法 ③. 偏小 （5）A
【解析】
【分析】1、常见的灭菌方法主要有以下几种： 高压蒸汽灭菌法：通常在高压蒸汽灭菌锅中进行，通过高温高压（一般是 121℃、101kPa 压力）来杀灭微生物。适用于培养基、手术器械、敷料等的灭菌。 例如，在实验室中对培养细菌用的培养基进行灭菌时，常采用高压蒸汽灭菌法。 灼烧灭菌法：直接在火焰上灼烧，使微生物被彻底烧死。常用于接种工具如接种环、接种针等的灭菌。 比如在微生物实验中，接种环在使用前后都要在酒精灯火焰上充分灼烧，以杀灭可能残留的微生物。 干热灭菌法：在干燥箱中通过高温（一般在 160 - 170℃）来灭菌，适用于玻璃器皿（如吸管、培养皿）、金属用具等。2、生态系统的成分包括非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者。
【小问1详解】
培养基灭菌是需要减少对水分的影响，需采用高压蒸汽灭菌法灭菌；培养基中含有琼脂作为凝固剂，含有蛋白胨、牛肉膏等多种营养物质，可满足多种微生物的生长需求，因此该培养基属于固体培养基、基础培养基，即①③。
【小问2详解】
生态系统的成分包括非生物的物质和能量、生产者、消费者和分解者。从生态系统的成分上看，炭疽杆菌属于消费者，噬菌体与它的种间关系是寄生。
【小问3详解】
分析实验操作过程，实验组加入一定量生理盐水配制的澄清噬菌体溶液，对照组相应的加入等量生理盐水；实验组中若浑浊度比对照组低，说明患者感染该病毒，原理是噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降，对照组也可以变浑浊，原因是炭疽杆菌大量繁殖产生大量代谢产物。
【小问4详解】
在进行平板菌落计数时，为了保证结果的准确性和可靠性，通常选择菌落数在 30 - 300 之间的平板进行计数，因此314需舍弃，据上表数据分析，每毫升样品中的细菌数量为（163 + 171 + 140 + 178）÷ 4÷0.1× 106 = 1.63×109个。在进行以上定量实验时，采取的分离计数方法为稀释涂布平板法，该方法统计得到的细菌数量与实际相比偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
【小问5详解】
使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与炭疽杆菌相同的有制作果醋、制作泡菜、酸奶。炭疽杆菌是细菌，属于原核生物，制作果醋利用的醋酸菌也是原核生物；制作果酒利用的酵母菌是真核生物，制作泡菜和酸奶利用的乳酸菌是原核生物，A正确，BCD错误，故选A。
23. 黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员开展下列研究。
（1）科研人员利用小鼠制备抗AFB 的单克隆抗体（即AFB 单抗），运用了______和______的动物细工程技术，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用______。
（2）AFB 单抗的制备过程如图1，杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ______和Ⅲ______检测，经过多次筛选获得。
（3）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述流程获得的AFB单抗具有极强的特异性，应补充的检测是______，预测相应的实验结果是______。
（4）科研人员拟将 AFB 单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料M 稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图2，探针发光性能与物质 P的浓度关系如图3。
依据图3结果，科研人员选择物质 P的浓度为______作为生产检测探针的条件。
（5）科研人员制备定量检测AFB 的免疫试纸，如图4。试纸的T线处固定的物质是AFB，C线处固定的物质是抗AFB 单抗的抗体。在加样处滴加的样液会向有扩散经过T线和C线。
若加样处，滴加只含“MP-AFB 单抗探针”的样液，能检测到荧光的线为______（填“T线”、“C线”或“T线和C线”）；若滴加样液中含有MP-AFB 单抗探针和高浓度的AFB，T线的发光性为______（填“发荧光”或“不发荧光”）。
（6）单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用?______（至少写两点）。
【答案】（1） ①. 动物细胞融合 ②. 动物细胞培养 ③. 灭活的病毒
（2） ①. 克隆化培养 ②. 抗体
（3） ①. 用AFB单抗分别与 CIT、FB 进行杂交实验 ②. AFB单抗与 CIT、FB 不发生杂交反应 （4）0.8mg/mL
（5） ①. T线 ②. 不发荧光
（6）作为诊断试剂、用于治疗疾病、运载药物等
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。
【小问1详解】
制备单克隆抗体运用了动物细胞融合和动物细胞培养的动物细胞工程技术。动物细胞融合常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用灭活的病毒，植物原生质体融合常用物理方法（离心、振动、电激等）和化学方法（聚乙二醇），而动物细胞融合除了这些还可用灭活的病毒诱导。
【小问2详解】
杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【小问3详解】
若想确认AFB单抗具有极强的特异性，应补充的检测是用AFB单抗分别与 CIT、FB 进行杂交实验。因为如果AFB单抗具有特异性，那么它只能与AFB特异性结合，而与CIT、FB 不结合，所以预测相应的实验结果是AFB单抗与 CIT、FB 不发生杂交反应。
【小问4详解】
图3结果表明，在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，因此科研时可选择该浓度（0.8mg/mL）作为生产检测探针的条件，可节省成本。
【小问5详解】
若滴加只含“MP - AFB单抗探针”的样液，由于T线处固定的物质是AFB，“MP - AFB单抗探针”中的AFB单抗会与T线处固定的物质AFB结合，从而能检测到荧光的线为T线；若滴加样液中含有“MP - AFB单抗探针”和正常的AFB，AFB会与T线处固定的AFB竞争结合“MP - AFB单抗探针”中的AFB单抗，导致“MP - AFB单抗探针”中的AFB单抗不能与T线处的AFB充分结合，所以T线不发荧光。
【小问6详解】
单克隆抗体除了用于检测，还可作为诊断试剂，准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合；用于治疗疾病，如制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；还可用于运载药物等。
24. 2'-岩藻糖基乳糖（2'-FL）是一种新型稀有母乳寡糖，具有提高婴幼儿免疫力的作用，常用转基因大肠杆菌为生产菌株进行发酵生产。大肠杆菌合成2'-FL过程（图1）中涉及6种关键酶，其中FutC 蛋白的溶解性与酶促效率紧密相关。我国科学家尝试将某高产岩藻多糖细菌（K菌）的相关基因和MBP-futC 融合基因（MBP 为促融标签基因，其表达产物可提高异源蛋白的溶解性）导入大肠杆菌，从而构建高产2'-FL的工程菌株。请回答下列问题：

（1）利用BiBrick技术（图2）构建pET-ABDFG质粒：

①提取K菌的DNA，通过PCR扩增分别获得K菌的A、B、D、F和G基因，PCR时在上述基因模板链的5'端引入XbaI的识别序列、3'端引入____的识别序列，一般还需要往PCR反应缓冲液中加入Mg2+，其原因是____。PCR 后通过____（方法）鉴定和提纯上述目的基因。
②利用BiBrick技术将上述基因逐个接入pET质粒（图3）中，获得pET-ABDFG质粒。BiBrick技术需用SpeI+SacI和XbaI+SacI分别对质粒和待接入基因进行酶切处理，由于SpeI和XbaI酶切处理后的黏性末端____，因此可在DNA连接酶的作用下彼此连接，连接处形成的DNA序列____（填“能”或“不能”）被Spel再次识别，从而保证在接入下一个目的基因时____。
（2）构建pET-ABDFG-MfutC质粒：

①利用重叠PCR的方法构建MBP-futC融合基因，具体过程见图4。其中，F₂和R₁的5'端引入的序列____（填“相同”或“互补”），在第三次PCR的反应体系中____。
A.需加入F1和R2
B.需加入F2和R1
C.不需要加入引物
②利用BiBrick技术将MBP-futC 融合基因接入pET-ABDFG质粒，获得pET-ABDFG-MfutC质粒。
（3）质粒转化：向感受态大肠杆菌悬液中加入pET-ABDFG 质粒，转化后接种于含____的、平板上筛选出成功转化的大肠杆菌。
（4）2'-FL发酵检测：
①挑选成功转化的大肠杆菌单菌落扩大培养后进行培养。
②通过检测后发现2'-FL产量可达30.1mL/L，若要进一步提高发酵菌的产2'-FL能力，据图1分析，还可对发酵菌进行____等遗传改造。
【答案】（1） ①. Spc1和Sacl ②. 激活DNA聚合酶（Taq酶） ③. 琼脂糖凝胶电泳 ④. 互补（或相同） ⑤. 不能 ⑥. 不会把上一次接入的目的基因切除
（2） ①. 互补 ②. C
（3）氨苄青霉素 （4）敲除wcaJ 基因、转入乳糖转运蛋白基因（写出一项即可）
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因便于目的基因的鉴定和筛选；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【小问1详解】
①由图2可知，PCR时在模板链的5'端引入Xba I的识别序列、3'端引入Spe I和Sac I的识别序列。往PCR反应缓冲液中加入Mg2+可以激活DNA聚合酶（Taq酶）。PCR后可通过琼脂糖凝胶电泳鉴定和提纯目的基因。
②由图2可知SpeI和Xba I酶切处理后的黏性末端相同，因此可用DNA连接酶连接。连接处形成的 DNA序列不再是Spe I酶识别序列，因此不能被Spe I再次识别，从而保证在接入下一个目的基因时不会把上一次接入的目的基因切除。
【小问2详解】
利用重叠PCR 的方法构建MBP-futC融合基因，由图4可知，F₂ 和R₁5 '端部分序列进行碱基互补配对，由图4知，PCR时子链延伸的方向是5'→3'，因此在第三次PCR 的反应体系中需加入F₁ 和R₂ ，故选A。
【小问3详解】
pET-ABDFG 质粒中氨苄青霉素抗性基因是标记基因，因此可在培养基上添加氨苄青霉素进行筛选。
【小问4详解】
若要进一步提高发酵菌的产2'-FL能力，增加2'-FL含量，还可减少2'-FL 降解，即敲除wcaJ 基因，也可增加GDP-L-岩藻糖和乳糖反应形成2'-FL，即转入乳糖转运蛋白基因，增加细胞内乳糖的含量，使2'-FL合成量增加。
营养级
第一营养级
第二营养级
第三营养级
同化量
500
Y
Z
呼吸作用消耗
132
26.5
3.8
未被利用
292
34.3
3.1
分解者
X
2.2
0.1
草原类型
调查面积cm×cm
A
B
C
10×10
3
3
2
20×20
5
5
3
40×40
8
6
5
80×80
14
9
8
90×90
16
11
8
100×100
17
13
8
110×110
19
13
8
120×120
20
13
8
130×130
20
13
8
140×140
20
13
8
生物类型
呼吸散失的热能
用于生长发育繁殖的能量
流入分解者的能量
未利用的能量
外来有机物输入的能量
生产者
48
62
6
35
0
植食性动物
13
X
3
5
5
肉食性动物
Y
7
1
6
10
培养基成分
蛋白胨
牛肉粉
氯化钠
多种生长因子
琼脂
蒸馏水
含量
10g
3g
5g
50ml
15g
1000ml

培养
分组
加入溶液
培养
现象
定性
可疑菌落接种到液体培养基35℃培养24小时
实验组
一定量生理盐水配制澄清噬菌体溶液
35℃培养6小时
若浑浊度比对照组______（高/低），说明患者感染该病毒，原理是______。
对照组
______
变浑浊，原因是______。
定量
在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁶的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为163、171、140、178和314，统计每毫升样品中的细菌数量。
营养级
第一营养级
第二营养级
第三营养级
同化量
500
Y
Z
呼吸作用消耗
132
26.5
3.8
未被利用
292
34.3
3.1
分解者
X
2.2
0.1
草原类型
调查面积cm×cm
A
B
C
10×10
3
3
2
20×20
5
5
3
40×40
8
6
5
80×80
14
9
8
90×90
16
11
8
100×100
17
13
8
110×110
19
13
8
120×120
20
13
8
130×130
20
13
8
140×140
20
13
8
生物类型
呼吸散失的热能
用于生长发育繁殖的能量
流入分解者的能量
未利用的能量
外来有机物输入的能量
生产者
48
62
6
35
0
植食性动物
13
X
3
5
5
肉食性动物
Y
7
1
6
10
培养基成分
蛋白胨
牛肉粉
氯化钠
多种生长因子
琼脂
蒸馏水
含量
10g
3g
5g
50ml
15g
1000ml

培养
分组
加入溶液
培养
现象
定性
可疑菌落接种到液体培养基35℃培养24小时
实验组
一定量生理盐水配制的澄清噬菌体溶液
35℃培养6小时
若浑浊度比对照组______（高/低），说明患者感染该病毒，原理是______。
对照组
______
变浑浊，原因是______。
定量
在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁶的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为163、171、140、178和314，统计每毫升样品中的细菌数量。