河北省张家口市第一中学2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版）

这是一份河北省张家口市第一中学2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题（原卷版+解析版），共27页。试卷主要包含了单选题，多选题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
第I卷 选择题 （共41分）
一、单选题（共13题，每题2分，共26分）
1. 青霉素别名为盘尼西林，它是最早发现、最先提纯、临床上应用最广的一种抗生素，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 选育菌种时，可以借助诱变育种、杂交育种等技术获取高产青霉素的产黄青霉菌株
B. 由于青霉素对细菌具有广泛的抑制作用，所以对生产青霉素的发酵设备进行消毒处理即可
C. 由于产黄青霉生长最适温度和生产青霉素的适宜温度不同，所以发酵时不同阶段要控制不同温度
D. 发酵结束后，可根据青霉素的化学性质采用过滤、沉淀等方法从发酵液中提取青霉素
2. 在“酵母菌纯培养”的实验课中，学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧
B. 棉塞拔出后和塞上前装有培养液试管口都要通过火焰
C. 在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液
D. 将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线
3. 下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是（ ）
A. 对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B. 若需要调节pH，则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节
C. 家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母等的培养基
D. 固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
4. 某实验小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，操作流程如图所示，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的都是能分解尿素的细菌
B. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境
C. 培养一段时间后，培养基中的营养成分会减少，pH会降低
D. 5号试管的结果表明土壤中的菌株数为1.7×1012个/L
5. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产微生物肥料一般是微生物的代谢产物
6. 胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是（ ）
A. 从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精
B. 早期囊胚a、b、c基因型相同，但发育得到的个体表现型不一定相同
C. d可直接移植给受体，得到小牛的途径属于有性生殖
D. 胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥，因此无需使用免疫抑制剂
7. 植物细胞工程的应用有关叙述正确的是 （ ）
A. 作物脱毒选取植物的分生区是因为其具有抗病毒特性
B. 利用植物细胞培养获得目标产物都是次生代谢物
C. 突变体的利用一般培养到愈伤组织阶段，其不断增殖状态容易受诱变因素的影响产生突变
D. 单倍体育种时，需对F1花药进行筛选后才继续进行组织培养
8. 下图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列叙述错误的是（ ）
A. 卵子成熟和①过程发生在雌性动物的输卵管中
B. ②③④过程都发生有丝分裂，b时期胚胎发生孵化
C. 桑葚胚细胞具有全能性，a时期细胞开始出现分化
D. 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，是判断卵子是否受精的标志
9. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ）

A. ③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的滋养层，以免影响胚胎发育
B. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能
C. ②代表早期胚胎培养，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段
D. ⑤代表胚胎移植，成功率的高低只取决于供、受体生理状况是否一致
10. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ）

A. B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的
B. 经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体
C. ①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂
D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
11. 将正常的干细胞移植到病人体内，恢复病人的造血和免疫功能，已成为治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病的一种重要手段。下列关于干细胞的叙述，正确的是（ ）
A. 成体干细胞具有组织特异性，能发育成完整个体
B. 诱导多能干细胞是病人体内自然产生的一类治疗性干细胞
C. 胚胎干细胞存在于早期胚胎中，只能在体内分化成心肌细胞
D. 白血病的治疗主要利用造血干细胞，其主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中
12. 下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ）
A. 以洋葱为实验材料进行DNA的粗提取必须在无菌条件下进行
B. DNA可溶于2ml/L的NaCl溶液
C. 在提取液中加入预冷的95%的酒精溶液后DNA会与蛋白质分离并析出
D. 溶解后的DNA遇二苯胺试剂在沸水中加热5min冷却后会呈现蓝色
13. 下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（ ）
A. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
B. 用Bgl II切出的目的基因与BamH I切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
C. 酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH等因素
D. 用EcR I切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个
二、多选题（本题共5小题，每小题3分，共15分。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ）
A. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
B. 泡菜发酵过程中需每隔一段时间打开盖，以排出产生的
C. 腐乳发酵是在无氧条件下利用毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解为肽和氨基酸
D. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶
15. 尿素是一种高浓度氮肥，被土壤中某些细菌分解为氨后，再转化成铵盐、硝酸盐等可以被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 有些细菌能分解尿素的根本原因是其能合成脲酶
B. 若培养基要调节pH，应该在灭菌之前进行
C. KH2PO4和Na2HPO4可维持培养基pH的相对稳定
D. 在培养基中添加酚红指示剂，可以鉴别分解尿素的细菌
16. 科学家利用马铃薯和番茄叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 培育杂种植株的过程中利用了基因突变和基因的表达
B. 过程I应置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或低渗溶液中
C. 过程Ⅱ常用灭活病毒进行诱导，目的是促进原生质体融合
D. Ⅲ培养→Ⅳ培养的过程需要更换培养基，增加适宜光照
17. 利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛，流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）

A. 收集到的母牛X的卵母细胞在体外要培养到MⅠ期
B. 可使用Ca2+载体激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C. 可对母牛X注射性激素以促进其超数排卵
D. 犊牛W的遗传特性主要来自母牛X和母牛Z
18. 下列有关酶的叙述，正确的是（ ）
A. DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来
B. 反转录酶是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接合成DNA的酶
C. DNA聚合酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来
D. 限制性内切核酸酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子
第II卷 非选择题（59分）
三、非选择题
19. ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
（1）图中第I步最常用的接种方法是_____。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第I步之前___，再进行接种。
（2）第Ⅲ步接种，应挑选____（①/②/③）号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳定的____来判断微生物种类。
（3）本实验中用到了4种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是___ 、 ____。
（4）为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区（单位：mm）的宽度，得到了表所示的结果。
注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。
下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是 。
A. 结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强B. ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C. 用于实验的培养基应该用液体的选择培养基D. 接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
20. 目前全球面临粮食安全问题，农业发展至关重要。在现代生物技术高速发展的背景下，越来越多的生物技术在育种中得到应用。回答下列问题：
（1）通过植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，取优良品种的体细胞经过脱分化形成_______，该过程一般需要避光，此时所用培养基中的碳源为_______（填“有机碳源”或“无机碳源”）。诱导生芽和生根的过程中，培养基的最大区别为_______。
（2）无性生殖作物连续种植多代后产量会下降，主要是感染的病毒会传给子代。通过植物组织培养还可以对无性生殖的作物进行脱毒处理，此时一般选取______（部位）的细胞，原因是_______。
（3）耕地面积减少也是农业面临的一大问题，为了更充分地利用土地，有的研究者想到利用植物体细胞杂交技术制备“番茄—马铃薯”杂种植株，期望能得到地上结番茄，地下长马铃薯的植株。该设想需要先利用_____去除细胞壁，获得原生质体，然后利用_______诱导原生质体融合，融合细胞再生出细胞壁后经过植物组织培养发育成完整植株。植物体细胞杂交技术的原理是________。
21. 靶向治疗是目前治疗肿瘤的有效方法之一，其原理是利用抗体等特异性物质作为载体，将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤，其作用原理如图1所示。为了生产能同时与药物和肿瘤细胞抗原结合的抗体，科学家创造了制备双特异性抗体的方法，过程如图2所示。请据图分析回答下列问题：
（1）图2中①过程是给小鼠注射_____，从而获得已免疫的B淋巴细胞。
（2）经过HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后获得的细胞具有的特点是_______。
（3）图中⑤过程给小鼠注射抗肿瘤药物的目的是____，图2方框内的主要操作是______。
（4）获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或__，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。
22. 克隆技术又称生物放大技术，为探究克隆技术能否用于人帕金森病治疗，科研人员利用“人帕金森病模型鼠”进行了如图所示实验。请回答下列问题：
（1）在动物体细胞核移植技术中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有______（答出两点）等。从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至______期才能用于体细胞核移植。
（2）过程②中所使用的培养液除含有必需的营养物质外，还需要加入______等一些天然成分，培养过程中需通入一定浓度的CO2，其主要作用是______。胚胎干细胞存在于______中，______（填“具有”或“不具有”）组织特异性。
（3）过程⑤中是否需要对人帕金森病模型鼠注射相应的免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应，回答并说明理由：______。
23. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制酶，其识别序列及切割位点如下表所示。探究下列问题：
（1）限制酶 _______(填“能”或“不能”)切割原核细胞自身的DNA，试推测其理由是_______。
（2）若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，该DNA分子将被切成________个片段，共断裂________个磷酸二酯键。
（3）请画出BclⅠ切割后产生的末端_______。
（4）BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端能否被DNA连接酶连接_______？说明你的理由_______。
（5）为什么不同生物的DNA分子能拼接起来_______？
张家口市第一中学2024-2025学年度高二年级4月月考
生物试卷
第I卷 选择题 （共41分）
一、单选题（共13题，每题2分，共26分）
1. 青霉素别名为盘尼西林，它是最早发现、最先提纯、临床上应用最广的一种抗生素，发酵工程中常利用产黄青霉来生产青霉素。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 选育菌种时，可以借助诱变育种、杂交育种等技术获取高产青霉素的产黄青霉菌株
B. 由于青霉素对细菌具有广泛的抑制作用，所以对生产青霉素的发酵设备进行消毒处理即可
C. 由于产黄青霉生长最适温度和生产青霉素的适宜温度不同，所以发酵时不同阶段要控制不同温度
D. 发酵结束后，可根据青霉素的化学性质采用过滤、沉淀等方法从发酵液中提取青霉素
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。
【详解】A、产黄青霉属于真菌，不能利用杂交育种技术获取高产青霉素的菌种，A错误；
B、有些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，因此对生产青霉素的发酵设备要进行严格的灭菌处理，B错误；
C、发酵过程中要根据微生物生长和代谢等因素来确定控制的温度，因此发酵时不同阶段要控制不同温度，C正确；
D、青霉素属于代谢产物，根据其化学性质采用分离、提纯等方法从发酵液中提取青霉素，D错误。
故选C。
2. 在“酵母菌纯培养”的实验课中，学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是（ ）
A. 开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧
B. 棉塞拔出后和塞上前装有培养液的试管口都要通过火焰
C. 在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液
D. 将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线
【答案】D
【解析】
【分析】1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
2、平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
【详解】A、接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌，并需要在酒精灯火焰旁冷却才能接种，划线完毕后要将接种环进行灼烧，以防止杂菌污染，A正确；
B、接种环蘸取菌液前，需将试管口通过火焰，蘸取菌液后，需将试管口通过火焰并塞上棉塞，通过灼烧防止杂菌污染，B正确；
C、酒精灯火焰旁存在无菌区域，在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液，C正确；
D、划线操作时，为了防止杂菌污染，培养皿盖不能完全打开，操作时需要在酒精灯火焰旁进行，酒精灯火焰旁存在无菌区域，D错误。
故选D。
3. 下列有关微生物培养基及其配制的叙述，正确的是（ ）
A. 对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和煮沸灭菌等
B. 若需要调节pH，则应该在对培养基进行湿热灭菌后进行调节
C. 家庭制作腐乳时，豆腐块就是毛霉、曲霉、酵母等的培养基
D. 固体培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐、琼脂等营养物质
【答案】C
【解析】
【分析】实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。
【详解】A、对培养基常用的灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌等，A错误；
B、若需要调节pH，则应该在对培养基进行灭菌前进行调节，B错误；
C、家庭制作腐乳时，毛霉、曲霉、酵母等所需营养物质均来自豆腐块，因此豆腐块就是它们的培养基，C正确；
D、固体培养基中添加的琼脂被用作凝固剂，不属于营养物质，D错误。
故选C。
4. 某实验小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，操作流程如图所示，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的都是能分解尿素的细菌
B. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境
C. 培养一段时间后，培养基中的营养成分会减少，pH会降低
D. 5号试管的结果表明土壤中的菌株数为1.7×1012个/L
【答案】D
【解析】
【分析】分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
【详解】A、某些固氮菌不需要培养基提供氮源，所以能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，所以培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的不一定都是能分解尿素的细菌，A错误；
B、使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，B错误；
C、由于分解尿素的细菌是异养生物，所以培养基的营养成分会减少，分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH会升高，C错误；
D、5号试管的结果表明土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106×103=1.7×1012个/L，D正确。
故选D。
5. 下列关于微生物纯培养与发酵工程的说法正确的是（ ）
A. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
B. 平板划线法既可以用于微生物的纯培养，又可用于微生物计数
C. 利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于分泌蛋白，可制成微生物饲料
D. 在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物
【答案】D
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、微生物的纯培养物就是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，A错误；
B、平板划线法可以用于微生物的纯培养，不可用于微生物计数，B错误；
C、利用酵母菌发酵产生的单细胞蛋白属于微生物菌体，可制成微生物饲料，C错误；
D、在农牧业中，利用发酵工程生产的微生物肥料一般是微生物的代谢产物，D正确。
故选D。
6. 胚胎工程中各种胚胎操作技术如图所示。下列分析正确的是（ ）
A. 从良种公牛体内获得的精子可以直接与获能的卵细胞结合受精
B. 早期囊胚a、b、c基因型相同，但发育得到的个体表现型不一定相同
C. d可直接移植给受体，得到小牛的途径属于有性生殖
D. 胚胎移植时因代孕牛几乎对胚胎无免疫排斥，因此无需使用免疫抑制剂
【答案】D
【解析】
【分析】试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
【详解】A、从良种公牛体内获得的精子在体外获能后才可以与培养到MII期的卵母细胞结合受精，A错误；
B、据图可知，三种早期囊胚由不同受精卵发育而来，故a、b、c细胞核中的遗传物质不一定相同，B错误；
C、d是经过胚胎分割形成的两个健康的胚胎，可直接移植给受体，该过程属于无性生殖，C错误；
D、受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，D正确。
故选D。
7. 植物细胞工程的应用有关叙述正确的是 （ ）
A. 作物脱毒选取植物的分生区是因为其具有抗病毒特性
B. 利用植物细胞培养获得目标产物都是次生代谢物
C. 突变体的利用一般培养到愈伤组织阶段，其不断增殖状态容易受诱变因素的影响产生突变
D. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才继续进行组织培养
【答案】C
【解析】
【分析】植物细胞工程的实际应用：植物微型繁殖、作物脱毒、人工种子、单倍体育种、突变体的利用、细胞产物（蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等）的工厂化生产等。
【详解】A、利用植物分生组织（刚刚产生，病毒很少，甚至无毒）进行培养可以使新长成的植株脱去病毒，A错误；
B、愈伤组织具有旺盛的分裂能力和代谢能力，因此欲获得大量的细胞产物，可大规模培养愈伤组织细胞，获得目标产物不都是次生代谢物，B错误；
C、组织培养过程中经人工诱变或培养条件诱导可得到有用突变体，愈伤组织细胞分裂旺盛，容易诱导，C正确；
D、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，D错误。
故选C。
8. 下图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列叙述错误的是（ ）
A. 卵子成熟和①过程发生在雌性动物的输卵管中
B. ②③④过程都发生有丝分裂，b时期胚胎发生孵化
C. 桑葚胚细胞具有全能性，a时期细胞开始出现分化
D. 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，是判断卵子是否受精的标志
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：图为受精作用和胚胎发育过程，图中①为受精作用，②③④为早期胚胎发育过程，a为囊胚，b为原肠胚。
【详解】A、卵子成熟和①受精作用过程发生在雌性动物的输卵管中，A正确；
B、②③④过程都发生有丝分裂，在a囊胚期胚胎发生孵化，B错误；
C、桑葚胚细胞尚未分化，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，a囊胚时期细胞开始出现分化，C正确；
D、判断卵子是否受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体或形成雌雄原核，D正确。
故选B。
9. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ）

A. ③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的滋养层，以免影响胚胎发育
B. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能
C. ②代表早期胚胎培养，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段
D. ⑤代表胚胎移植，成功率的高低只取决于供、受体生理状况是否一致
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。分析题图：①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。
【详解】A、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，A错误；
B、①代表体外受精，体外受精和体内受精前精子均需要获能，B错误；
C、②代表早期胚胎培养，不同的动物胚胎移植的时间不同，例如，牛、羊一般要培养到16细胞阶段 （桑椹胚） 或囊胚阶段才能进行移植，小鼠和家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎即试管胚胎，可在4细胞阶段移植，故培育优质奶牛可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，C正确；
D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供体、受体进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D错误。
故选C。
10. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ）

A. B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的
B. 经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体
C. ①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂
D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、B淋巴细胞是从小鼠的脾中提取的，骨髓瘤细胞是体内浆细胞的恶性克隆性增生形成的，A错误；
B、经①诱导融合过程形成的细胞不都是能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，B错误；
C、①促进动物细胞融合，可利用灭活的病毒，也可以利用聚乙二醇作诱导剂， C错误；
D、过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。
故选D。
11. 将正常的干细胞移植到病人体内，恢复病人的造血和免疫功能，已成为治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病的一种重要手段。下列关于干细胞的叙述，正确的是（ ）
A. 成体干细胞具有组织特异性，能发育成完整个体
B. 诱导多能干细胞是病人体内自然产生的一类治疗性干细胞
C. 胚胎干细胞存在于早期胚胎中，只能在体内分化成心肌细胞
D. 白血病的治疗主要利用造血干细胞，其主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中
【答案】D
【解析】
【分析】一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不能发育成完整个体。
【详解】A、成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不能发育成完整个体，A错误；
B、诱导多能干细胞由病人自身的体细胞进行体外诱导获得，B错误；
C、胚胎干细胞存在于早期胚胎中，可以在体外分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等，C错误；
D、将正常的造血干细胞移植到病人体内，恢复病人的造血和免疫功能，已经称为治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病的一种重要手段，造血干细胞主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中，D正确。
故选D。
12. 下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ）
A. 以洋葱为实验材料进行DNA的粗提取必须在无菌条件下进行
B. DNA可溶于2ml/L的NaCl溶液
C. 在提取液中加入预冷的95%的酒精溶液后DNA会与蛋白质分离并析出
D. 溶解后的DNA遇二苯胺试剂在沸水中加热5min冷却后会呈现蓝色
【答案】A
【解析】
【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2、DNA鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、DNA粗提取不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2ml/L的NaCl溶液，B正确；
C、在提取液中加入95%的冷酒精，DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，则DNA会与蛋白质分离并析出，C正确；
D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，D正确。
故选A。
13. 下图为不同限制酶识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（ ）
A. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
B. 用Bgl II切出的目的基因与BamH I切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
C. 酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH等因素
D. 用EcR I切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个
【答案】D
【解析】
【分析】1、常用的运载体：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的、粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】A、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位的酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，A正确；
B、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，6个脱氧核苷酸对序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开 ，B正确；
C、酶的活性受温度、pH等因素影响，酶促反应需要适宜的条件，所以酶切时需要控制好温度、酶浓度、pH等因素，C正确；
D、用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有4个，D错误。
故选D。
二、多选题（本题共5小题，每小题3分，共15分。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
14. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ）
A. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
B. 泡菜发酵过程中需每隔一段时间打开盖，以排出产生的
C. 腐乳发酵是在无氧条件下利用毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解为肽和氨基酸
D. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶
【答案】ABC
【解析】
【分析】1、毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
2、果酒制备的菌种是酵母菌，最适温度在20℃左右最好，一般控制在18～30℃，属于兼性厌氧型细菌，发酵前期酵母菌先进性有氧呼吸，促进酵母菌的繁殖，后期进行无氧呼吸产生酒精。果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
3、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理是当氧气、糖原都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
4、制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜具有特殊的风味，乳酸菌是厌氧菌，发酵需要在无氧条件下进行。
【详解】A、醋酸菌是原核生物，无线粒体，A错误；
B、泡菜发酵过程中主要利用乳酸菌的无氧呼吸，不产生CO2，中间需要严格的无氧环境，不能打开盖，一般使用水进行液封，B错误；
C、腐乳发酵是在有氧条件下利用毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解为肽和氨基酸，C错误；
D、醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶，能用于乙酸发酵，D正确。
故选ABC。
15. 尿素是一种高浓度氮肥，被土壤中某些细菌分解为氨后，再转化成铵盐、硝酸盐等可以被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 有些细菌能分解尿素的根本原因是其能合成脲酶
B. 若培养基要调节pH，应该在灭菌之前进行
C. KH2PO4和Na2HPO4可维持培养基pH的相对稳定
D. 在培养基中添加酚红指示剂，可以鉴别分解尿素的细菌
【答案】BCD
【解析】
【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长。
【详解】A、有些细菌能分解尿素的根本原因是其具有合成脲酶的基因，A错误；
B、培养基制备过程中先调节pH，后灭菌，B正确；
C、KH2PO4和Na2HPO4是一对缓冲物质，可维持培养基pH的相对稳定，C正确；
D、为鉴定脲酶的产生，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红。D正确。
故选BCD
16. 科学家利用马铃薯和番茄叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 培育杂种植株的过程中利用了基因突变和基因的表达
B. 过程I应置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或低渗溶液中
C. 过程Ⅱ常用灭活病毒进行诱导，目的是促进原生质体融合
D. Ⅲ培养→Ⅳ培养的过程需要更换培养基，增加适宜光照
【答案】ABC
【解析】
【分析】植物体细胞杂交要将不同种的植物细胞诱导融合成一个杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，体现的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。在融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁获得原生质体，杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志。
【详解】A、培育杂种植株马铃薯—番茄的原理是染色体变异，培养过程中细胞进行有丝分裂，该过程没有利用基因突变原理，A错误；
B、过程I为去除细胞壁，制备原生质体，需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的等渗或者高渗溶液中，在低渗溶液中原生质体可能会吸水涨破，B错误；
C、诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等，灭活病毒是诱导动物细胞融合的方法，C错误；
D、Ⅲ培养→Ⅳ培养过程分别是脱分化和再分化，脱分化和再分化所需培养基成分不完全相同，因此通常要更换培养基，脱分化过程不需要光照，再分化过程需要光照，因此需要在适宜时间给予光照，D正确。
故选ABC。
17. 利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛，流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）

A. 收集到的母牛X的卵母细胞在体外要培养到MⅠ期
B. 可使用Ca2+载体激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C. 可对母牛X注射性激素以促进其超数排卵
D. 犊牛W的遗传特性主要来自母牛X和母牛Z
【答案】ACD
【解析】
【分析】核移植技术：将供体细胞核注入去核卵母细胞，通过电激等使细胞融合，得到重组细胞，激活得到重组胚胎，将胚胎移植到受体雌性动物体内。
【详解】A、收集到的母牛X的卵母细胞在体外要培养到MⅡ中期，A错误；
B、可使用Ca2+载体激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，促进胚胎发育过程，B正确；
C、可对母牛X注射促性腺激素以促进其超数排卵，已获得较多的卵母细胞，C错误；
D、犊牛W的遗传特性主要来自母牛Y和母牛X，其细胞中的核基因来自母牛Y，细胞质基因主要来自母牛X，D错误。
故选ACD。
18. 下列有关酶的叙述，正确的是（ ）
A. DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来
B. 反转录酶是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接合成DNA的酶
C. DNA聚合酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来
D. 限制性内切核酸酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子
【答案】BD
【解析】
【分析】1、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；“分子缝合针”--DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
【详解】A、DNA连接酶将两个DNA片段连接起来，形成磷酸二酯键，DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，A错误；
B、反转录酶是反转录过程需要的酶，反转录的结果是合成DNA，所以是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接并合成DNA的酶，B正确；
C、DNA连接酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来，形成磷酸二酯键，C错误；
D、限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，即在特定位点切割DNA分子，D正确。
故选BD。
第II卷 非选择题（59分）
三、非选择题
19. ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
（1）图中第I步最常用的接种方法是_____。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第I步之前___，再进行接种。
（2）第Ⅲ步接种，应挑选____（①/②/③）号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳定的____来判断微生物种类。
（3）本实验中用到了4种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是___ 、 ____。
（4）为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区（单位：mm）的宽度，得到了表所示的结果。
注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。
下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是 。
A. 结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强B. ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C. 用于实验的培养基应该用液体的选择培养基D. 接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 稀释
（2） ①. ① ②. 菌落特征（菌落的形状、大小和颜色等）
（3） ①. 选择产ε-PL的菌种 ②. 增加目的菌数量和生产ε-PL （4）ABD
【解析】
【分析】微生物常用的接种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
据图可知，步骤I为接种，结合培养II后的平板上菌落呈现均匀分布可知，所用接种方法是稀释涂布平板法；若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，说明密度过大，故则应在第I步之前先稀释，再进行接种。
【小问2详解】
培养过程中由于ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈，因此应挑选透明圈直径大的菌落继续培养，故选①。不同微生物在固体培养基表面形成的菌落特征不同，一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物变现出的稳定的菌落特征（菌落的形状、大小和颜色等）来判断微生物种类。
【小问3详解】
本实验中用到了4种培养基，甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养，以保证目的菌的正常生长；乙培养基是固体培养基，用于选择产生ε-PL的菌种，通常需要添加琼脂等凝固剂；丙培养基是固体培养基，用于分离、纯合产生ε-PL的菌种，即可对目的菌进行扩大培养；丁培养基是液体培养基，用于富集培养目的菌，让目的菌增殖、生产ε-PL。
【小问4详解】
A、表中结果显示：不同浓度ε-PL处理下，酿酒酵母清晰区的宽度最大，说明ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强，A正确；
B、表中数据显示随浓度增加，清洗区域抗毒越大，即ε- PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关，B正确；
C、会出现抑菌圈，用于实验的培养基应该用固体的选择培养基，C错误；
D、为了避免周围环境中微生物的污染，接种应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行，D正确。
故选 ABD。
20. 目前全球面临粮食安全问题，农业发展至关重要。在现代生物技术高速发展的背景下，越来越多的生物技术在育种中得到应用。回答下列问题：
（1）通过植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，取优良品种的体细胞经过脱分化形成_______，该过程一般需要避光，此时所用培养基中的碳源为_______（填“有机碳源”或“无机碳源”）。诱导生芽和生根的过程中，培养基的最大区别为_______。
（2）无性生殖的作物连续种植多代后产量会下降，主要是感染的病毒会传给子代。通过植物组织培养还可以对无性生殖的作物进行脱毒处理，此时一般选取______（部位）的细胞，原因是_______。
（3）耕地面积减少也是农业面临的一大问题，为了更充分地利用土地，有的研究者想到利用植物体细胞杂交技术制备“番茄—马铃薯”杂种植株，期望能得到地上结番茄，地下长马铃薯的植株。该设想需要先利用_____去除细胞壁，获得原生质体，然后利用_______诱导原生质体融合，融合细胞再生出细胞壁后经过植物组织培养发育成完整植株。植物体细胞杂交技术的原理是________。
【答案】（1） ①. 愈伤组织 ②. 有机碳源 ③. 生长素和细胞分裂素的比例和浓度不同
（2） ①. 茎尖（或芽尖或根尖） ②. 植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒
（3） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 电融合法、离心法、聚乙二醇诱导 ③. 细胞膜具有一定的流动性、植物细胞具有全能性
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。
【小问1详解】
植物组织培养过程中，经脱分化过程可形成愈伤组织；愈伤组织形成和生长、分化常在MS培养基上进行，这说明MS培养基能够给愈伤组织提供有机碳等物质，故据此推断MS培养基中的碳源是有机碳源；配制的诱导生芽和生根的培养基的最大区别是：生长素和细胞分裂素的比例和浓度不同，其中诱导生根的培养基中生长素和细胞分裂素的比例较高。
【小问2详解】
培育脱毒苗时，一般选取茎尖（或芽尖或根尖）部位的细胞作为外植体，其依据是植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒。
【小问3详解】
植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，可以利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；诱导植物原生质体融合的方法有物理方法如电融合法、离心法，化学方法如聚乙二醇诱导等；植物体细胞杂交包括植物细胞融合和植物组织培养两个阶段，因此其原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。
21. 靶向治疗是目前治疗肿瘤的有效方法之一，其原理是利用抗体等特异性物质作为载体，将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤，其作用原理如图1所示。为了生产能同时与药物和肿瘤细胞抗原结合的抗体，科学家创造了制备双特异性抗体的方法，过程如图2所示。请据图分析回答下列问题：
（1）图2中①过程是给小鼠注射_____，从而获得已免疫的B淋巴细胞。
（2）经过HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后获得的细胞具有的特点是_______。
（3）图中⑤过程给小鼠注射抗肿瘤药物的目的是____，图2方框内的主要操作是______。
（4）获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或__，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。
【答案】（1）肿瘤细胞抗原（癌细胞抗原）
（2）既能无限增殖，又能产生特异性抗体
（3） ①. 刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 ②. 将⑤步骤产生的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合
（4）注射到小鼠腹腔内增殖
【解析】
【分析】单克隆抗体制备的过程中，需要经过动物细胞的培养和动物细胞的融合，单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【小问1详解】
①表示用癌细胞抗原对小鼠进行免疫处理，以获得已免疫的B淋巴细胞。
【小问2详解】
检测出呈阳性的细胞，即能产生针对癌细胞抗原的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，该细胞既可以无限增殖，又可以产生特定抗体。
【小问3详解】
⑤过程给小鼠注射抗肿瘤药物是为了刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞，方框内表示将⑤步骤产生的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合，进而筛选出能产生双特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。
【小问4详解】
获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。
22. 克隆技术又称生物放大技术，为探究克隆技术能否用于人帕金森病的治疗，科研人员利用“人帕金森病模型鼠”进行了如图所示实验。请回答下列问题：
（1）在动物体细胞核移植技术中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有______（答出两点）等。从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至______期才能用于体细胞核移植。
（2）过程②中所使用的培养液除含有必需的营养物质外，还需要加入______等一些天然成分，培养过程中需通入一定浓度的CO2，其主要作用是______。胚胎干细胞存在于______中，______（填“具有”或“不具有”）组织特异性。
（3）过程⑤中是否需要对人帕金森病模型鼠注射相应的免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应，回答并说明理由：______。
【答案】（1） ①. 卵母细胞的体积大、易操作，营养物质含量丰富，同时还含有促进细胞核全能性表达的物 ②. MⅡ
（2） ①. 血清 ②. 维持培养液的pH ③. 早期胚胎 ④. 不具有
（3）不需要，该过程中移植的神经元的遗传物质主要来自该小鼠，不会发生免疫排斥反应
【解析】
【分析】题图分析：图中①为核移植过程，②是早期胚胎培养过程，③是获取胚胎干细胞的过程，④是诱导胚胎干细胞分化形成神经元的过程，⑤是器官移植过程。
【小问1详解】
在动物体细胞核移植过程中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有卵母细胞的体积大、易操作、营养物质含量丰富，同时还含有促进细胞核全能性表达的物质等；从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期才能用于体细胞核移植。
【小问2详解】
过程②表示早期胚胎培养，该过程中所使用的培养液除含有必需的营养物质外，还需要加入血清等一些天然成分，以保证细胞正常生长；培养过程中需通入一定浓度的CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH；胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有发育成完整个体的能力，不具有组织特异性。
【小问3详解】
利用图示方法对人帕金森病模型鼠进行治疗时不需要给小鼠注射相应的免疫抑制剂，因为该过程中移植的神经元的遗传物质主要来自该小鼠，不会发生免疫排斥反应。
23. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制酶，其识别序列及切割位点如下表所示。探究下列问题：
（1）限制酶 _______(填“能”或“不能”)切割原核细胞自身的DNA，试推测其理由是_______。
（2）若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，该DNA分子将被切成________个片段，共断裂________个磷酸二酯键。
（3）请画出BclⅠ切割后产生的末端_______。
（4）BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端能否被DNA连接酶连接_______？说明你的理由_______。
（5）为什么不同生物的DNA分子能拼接起来_______？
【答案】（1） ①. 不能 ②. 原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰了
（2） ①. 3 ②. 4
（3） （4） ①. 能 ②. 二者切割后产生的黏性末端相同，可被DNA连接酶连接。
（5）①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸；②双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构；③DNA分子都遵循碱基互补配对原则。
【解析】
【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。
【小问1详解】
限制酶能切割外源DNA， 不能切割原核细胞自身的DNA，其可能的原因是原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰了。
【小问2详解】
若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，若用限制酶BamHⅠ识别并切割，则该DNA分子将被切成3个片段，共断裂4个磷酸二酯键，每个识别序列被切割的过程中会断裂2个磷酸二酯键。
【小问3详解】
表中信息可知BclⅠ的识别序列为-TGATCA-，且在T/G之间切开，则切割后产生的序列为 。
【小问4详解】
BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端相同，均为-CTAG，可见这两种限制酶切割产生的黏性末端能被DNA连接酶连接。
【小问5详解】
不同生物的DNA具有相同的基本单位，即四种脱氧核苷酸，且双链DNA的空间结构相同，均为双螺旋结构，且不同生物的DNA分子都遵循相同的碱基互补配对原则，因此，不同生物的DNA分子能在相关酶的催化下拼接起来。
组分
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
含量
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
ε-PL浓度/mg·L-1微生物
20
30
40
50
60
70
大肠杆菌
+
+
7.2
10.8
11.6
13.3
沙门氏菌
+
+
6.5
9.2
10.9
13.0
酿酒酵母
7.2
9.1
12.6
13.4
14.8
-
红曲霉
+
+
+
+
5.1
6.3
限制酶
BamHⅠ
BclⅠ
识别序列及切割位点
组分
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
含量
1.4g
2.1g
0.2g
100g
1.0g
15.0g
ε-PL浓度/mg·L-1微生物
20
30
40
50
60
70
大肠杆菌
+
+
7.2
10.8
11.6
13.3
沙门氏菌
+
+
6.5
9.2
10.9
13.0
酿酒酵母
7.2
9.1
12.6
13.4
14.8
-
红曲霉
+
+
+
+
5.1
6.3
限制酶
BamHⅠ
BclⅠ
识别序列及切割位点