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      浙江省台州市2023_2024学年高二生物下学期4月期中测试试题含解析

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      浙江省台州市2023_2024学年高二生物下学期4月期中测试试题含解析

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      这是一份浙江省台州市2023_2024学年高二生物下学期4月期中测试试题含解析,文件包含2025届福建百校高三11月联考化学试题pdf、2025届福建百校高三11月联考化学答案pdf等2份试卷配套教学资源,其中试卷共10页, 欢迎下载使用。
      考生须知:
      1.本卷共7页,满分100分,考试时间90分钟。
      2.答题前,在答题卷指定区域填写班级、姓名、考场号、座位号及准考证号并填涂相应数字。
      3.所有答案必须写在答题纸上,写在试卷上无效。
      4.考试结束后,只需上交答题纸。
      选择题部分
      一、选择题(本大题共25小题,每小题2分,共50分。每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的,不选、多选、错选均不得分)
      1. 人们将苏云金杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中成功培育出抗虫棉。这个过程中利用的主要原理是()
      A. 基因突变B. 自然选择
      C. 基因重组D. 染色体变异
      【答案】C
      【解析】
      【分析】基因工程又叫转基因技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
      【详解】将一种生物的基因导入另一种生物体内,使其表达产生相应的物质或性状,这采用的是转基因技术,该技术的原理是基因重组,C正确,ABD错误。
      故选C。
      2. 用于动物细胞培养的组织和细胞,大多来自胚胎和出生不久的幼龄动物,其主要原因是这样的组织细胞()
      A. 容易产生各种变异
      B. 具有更强的分裂能力
      C. 取材十分方便
      D. 可进行基因的选择性表达
      【答案】B
      【解析】
      【分析】胚胎和出生不久的幼龄动物的细胞分裂能力强,易于培养。动物细胞培养的目的是通过亲代细胞的增殖获得大量的子代细胞,所以需要培养的细胞具有较强的分裂能力。
      【详解】动物细胞培养利用细胞增殖的原理,高度分化的动物细胞不能分裂,所以动物细胞培养必须选不断分裂的细胞进行培养,而胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛,因此动物细胞培养时,所用组织和细胞大都来自胚胎或出生不久的幼龄动物,即B符合题意,具有更强的分裂能力,ACD不符合题意。
      故选B。
      3. 下列不属于微生物生长所需营养物质的是( )
      A. 碳源B. 琼脂C. 氮源D. 水
      【答案】B
      【解析】
      【分析】微生物培养过程中,培养基的主要成分有:水、无机盐、碳源、氮源。培养微生物时还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
      【详解】微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源和无机盐四类,其中培养基中加琼脂会得到固体培养基,琼脂起凝固剂的作用,不属于微生物生长所需营养物质。
      故选B。
      4. 某良种公司引进了纯种荷斯坦奶牛,并利用胚胎工程技术止引进的良种奶牛快速、大量地繁殖,此过程对供体和受体进行的操作,不包括()
      A. 胚胎移植B. 体外受精C. 超数排卵D. 免疫检查
      【答案】D
      【解析】
      【分析】胚胎移植的基本程序主要包括:①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理);②配种或人工授精;③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段);④对胚胎进行移植;⑤移植后的检查.
      【详解】、胚胎移植前需要活动胚胎,而胚胎的获得需要经过体外受精或其他的手段获得,在进行体外受精时,需要对供体母牛进行超数排卵处理,以便获得大量的卵母细胞,由于受体子宫不会对植入的胚胎发生免疫排斥,所以不需要进行免疫检查,D错误。
      故选D。
      5. 对人参皂苷干粉工厂化生产,下列哪种技术是必需的( )
      A. 诱变育种B. 作物脱毒
      C. 植物细胞培养D. 花药离体培养
      【答案】C
      【解析】
      【分析】我国科学家早在1963年就成功地培育了人参的组织;后来又实现了利用人参细胞培养来生产人参中重要的活性成分——人参皂苷。
      【详解】A、诱变育种是利用基因突变原理获得新品种,人参皂苷是人参细胞自然状态下产生的代谢产物,不需要诱变育种,A错误;
      B、作物脱毒是无性繁殖的生物容易积累病毒,利用分生组织进行组织培养可得到脱毒苗,B错误;
      C、利用植物组织培养技术,可进行细胞产物的工厂化生产,如可利用人参细胞培养来生产人参中的人参皂苷,C正确;
      D、花药离体培养是利用组织培养技术获得单倍体,人参皂苷生产是获得细胞产物,D错误。
      故选C。
      6. 基因工程需要特定的工具,下列不属于基因工程基本工具的是()
      A. 限制酶B. DNA连接酶C. 质粒D. 解旋酶
      【答案】D
      【解析】
      【分析】基因工程的工具:(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)运载体:常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒。
      【详解】ABC、基因工程的基本工具有限制酶(识别特定的核苷酸序列并切割相应位点) 、 DNA连接酶(连接切割后的目的基因和运载体) 和质粒(用作运载体),ABC不符合题意;
      D、解旋酶是在DNA分子复制时起催化作用的酶,可打开DNA双链结构,D符合题意。
      故选D。
      7. 下列关于植物原生质体特点的叙述中,错误的是()
      A. 容易摄取外来的遗传物质B. 有利于进行细胞融合,形成杂交细胞
      C. 与完整细胞一样具有全能性D. 不能再生细胞壁
      【答案】D
      【解析】
      【分析】原生质体是细胞壁以内各种结构的总称,也是组成细胞的一个形态结构单位,生活细胞中各种代谢活动均在此进行。原生质体包括细胞膜、细胞质、细胞核和多种细胞器等。
      【详解】A、原生质体可作为遗传操作与生理生化研究的良好材料,是由于原生质体容易摄取外来的遗传物质,A正确;
      B、由于原生质体没有细胞壁,所以有利于进行细胞融合、体细胞杂交等操作,B正确;
      C、原生质体具有除细胞壁以外的细胞结构,且含有个体发育的全部基因,仍然具有发育成完整生物体的潜能。所以与完整细胞一样具有全能性,C正确;
      D、原生质体与完整细胞一样具有全能性,细胞中相关基因的表达使其仍可产生细胞壁,经诱导分化成完整植株,D错误。
      故选D。
      8. 发酵工程可实现发酵产品的大规模生产,下图为发酵工程的基本环节,相关叙述正确的是()
      A. ①、②可以是诱变育种或基因工程育种
      B. ③是发酵工程的中心环节
      C. 产物浓度的检测必须在发酵结束后进行
      D. 发酵条件为室温和近中性的pH等
      【答案】A
      【解析】
      【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
      【详解】A、发酵工程的基本环节有选育菌种、扩大培养、配制培养基、灭菌、接种和发酵、产品的分离和纯化,其中优良菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得,因此①、②可以是诱变育种或基因工程育种,A正确;
      B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节,③是培养基的灭菌,不是发酵工程的中心环节,B错误;
      C、在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度,以了解发酵进程,同时要严格控制发酵条件,如温度、pH、溶解氧,故可能需要适时添加营养物质等,C错误;
      D、不同微生物的最适温度和pH 值有所不同,因此不同发酵过程温度和pH也有所不同,D错误。
      故选A。
      9. 下列有关动物细胞培养的表述正确的是()
      A. 动物细胞培养的原理应用了动物细胞的全能性
      B. 细胞要经过脱分化形成愈伤组织
      C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
      D. 培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖
      【答案】C
      【解析】
      【分析】动物细胞培养需要满足以下条件:(1)无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。(2)营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。(3)温度、pH和渗透压:适宜温度:哺乳动物多是36.5°C+0.5°C;pH为7.2~7.4。(4)气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
      【详解】A、动物细胞培养应用了动物细胞增殖的原理,A错误;
      B、动物细胞培养不需要脱分化,植物细胞培养要经过脱分化形成愈伤组织,B错误;
      C、动物细胞培养的培养夜中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等,C正确;
      D、在进行传代培养时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶处理,使之分散成单个细胞,再用离心法收集。之后将收集的细胞制成细胞悬液再分瓶培养,D错误。
      故选C。
      10. 人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )
      A. 大肠杆菌B. 酵母菌C. T4噬菌体D. 质粒DNA
      【答案】B
      【解析】
      【详解】糖蛋白必须经过内质网、高尔基体加工将蛋白质糖基化,形成成熟的蛋白质,所以只有真核生物细胞内含有内质网和高尔基体,选项中只有酵母菌是真核生物,故B选项正确。
      11. 图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法操作结果。下列叙述中,错误的是()
      A. 甲图中的涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃,冷却后才能涂布菌液
      B. 稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
      C. 乙中培养皿中所得的菌落不都符合要求
      D. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
      【答案】B
      【解析】
      【分析】
      微生物常见的接种的方法1、平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。2、稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。
      【详解】A、甲图中的涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液, A正确;
      B、稀释涂布平板法使用固体培养基,B错误;
      C、乙培养皿中一般在5区域才能得到由单个细菌繁殖而形成的菌落,C正确;
      D、乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端,这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落,D正确。
      故选B。
      【点睛】
      12. 下列关于培养基的叙述,正确的是()
      A. 在培养霉菌时,需将培养基调至中性或弱碱性
      B. 倒平板时,应将皿盖放在一边,以免培养基溅到皿盖上
      C. 制作培养基时,灭菌后还需调pH
      D. 在培养乳酸菌时,要给乳酸菌创造无氧环境
      【答案】D
      【解析】
      【分析】乳酸菌是厌氧菌,在无氧情况下能将葡萄糖分解成乳酸,可用于泡菜的腌制、乳制品的发酵。
      【详解】A、霉菌适宜的pH为4.5-5.5,为酸性环境,A错误;
      B、倒平板时,不能将皿盖放在一边,否则容易引起杂菌污染,B错误;
      C、制作培养基时,应先调pH再灭菌,C错误;
      D、乳酸菌属于厌氧菌,在培养乳酸菌时,要给乳酸菌创造无氧环境,D正确。
      故选D。
      13. 如图是体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图,有关叙述错误的是()
      A. 后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定
      B. 进行胚胎移植时,代孕母体应用免疫抑制剂处理,避免发生免疫排斥反应
      C. 过程②常使用显微操作对卵母细胞进行去核处理
      D. 过程③将重组细胞可以培养至囊胚期移植
      【答案】B
      【解析】
      【分析】题图分析:图示过程为体细胞克隆过程,取甲牛体细胞,对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核,然后进行细胞核移植;融合后的细胞激活后培养到早期胚胎,再进行胚胎移植,最终得到克隆牛。
      【详解】A、乙牛提供细胞质遗传物质,甲牛提供大部分遗传物质,所以后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定,A正确;
      B、进行胚胎移植时,受体子宫一般不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应,B错误;
      C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理,因此子代中细胞质中遗传物质主要是由乙牛提供,C正确;
      D、过程③将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚后移植,D正确。
      故选B。
      14. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,需要的条件是( )
      ①无菌环境②一定浓度的植物激素③适宜的温度④充足的光照⑤充足的养料
      A. ①③④⑤B. ②④⑤C. ①②③D. ①②③⑤
      【答案】D
      【解析】
      【分析】植物组织培养过程包括脱分化和再分化两个重要的步骤.植物组织培养需要一定的条件:①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等);②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。
      【详解】①植物组织培养过程需要无菌操作,所以需要消毒灭菌,①正确;
      ②脱分化形成愈伤组织的培养基需要一定浓度的植物激素,主要是生长素和细胞分裂素,②正确;
      ③植物组织培养过程需要适宜的温度,③正确;
      ④脱分化形成愈伤组织时,需要避光,否则会形成维管组织,④错误;
      ⑤植物组织培养需要充足的养料,⑤正确。
      故选D。
      15. 下图是利用三倍体香蕉的茎尖培养脱毒香蕉植株的过程示意图。下列叙述正确的是()
      A. 过程①~③中发生了有丝分裂和减数分裂
      B. X是愈伤组织
      C. 过程②为脱分化
      D. 过程①没有进行基因的选择性表达
      【答案】B
      【解析】
      【分析】图中①表示脱分化,X表示愈伤组织,②表示再分化,③④表示个体发育过程。
      【详解】A、①~③过程(①表示脱分化,②表示再分化,③④表示个体发育过程)中发生了有丝分裂,没有发生减数分裂,A错误;
      B、X是经过①脱分化形成的愈伤组织,B正确;
      C、②阶段表示再分化形成胚状体,C错误;
      D、过程①为脱分化,进行了基因的选择性表达,使细胞的全能性增加,D错误。
      故选B。
      16. 普洱茶分为生普和熟普,其中熟普是以云南大叶种晒青茶为原料,经后发酵(人为加水提温,加速茶叶熟化去除生茶苦涩以达到入口纯和汤色红浓之独特品性)加工形成的。熟普的汤色红浓明亮,香气独特陈香,滋味醇厚回甘,叶底红褐均匀。熟普的香味会随着陈化的时间而变得越来越柔顺、浓郁。下列相关叙述错误的是()
      A. 人为加水提温可以促进微生物繁殖,进而缩短原料发酵时间
      B. 熟普发酵过程中环境条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢
      C. 熟普发酵一段时间后要进行灭菌并密封,有利于茶的长期保存
      D. 饮用熟普后回甘,可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加
      【答案】C
      【解析】
      【分析】人为加水提温,温度适当提高可以提高相应酶的活性进而可以促进微生物繁殖,进而缩短原料发酵的时间。
      【详解】A、人为加水提温,温度适当提高可以提高相应酶的活性进而可以促进微生物繁殖,进而缩短原料发酵的时间,A正确;
      B、发酵一般为微生物的无氧呼吸(部分为有氧呼吸),温度、pH、氧气含量等发酵条件,都会影响微生物的生长繁殖和代谢途径,B正确;
      C、熟普的香味会随着陈化时间而变得越来越柔顺、浓郁,说明熟普保存过程中仍在发酵,因此新茶发酵完成后进行灭菌并密封不利于进一步发酵,C错误;
      D、饮用熟普后回甘,可能是因为发酵后茶叶中单糖、二糖含量增加,D正确。
      故选C。
      17. 下列有关人工种子的叙述,错误的是()
      A. 人工种皮中通常需要加入适量的抗生素
      B. 胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞构成的
      C. 人工胚乳可以为人工种子提供营养
      D. 通过植物组织培技术获得
      【答案】B
      【解析】
      【分析】人工种子:是指通过植物组织培养的方法得到的胚状体、不定芽、顶芽或肢芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。人工种子包括胚状体、人工胚乳和人工种皮,其中胚状体是通过脱分化和再分化过程形成的;人工种皮可为种子提供营养;人工种皮具有保护作用。
      【详解】A、种皮中可加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等,也可以添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育,A正确;
      B、人工种子的主体部分是经过脱分化和再分化过程形成的胚状体,B错误;
      C、人工胚乳可为人工种子提供营养,C正确;
      D、人工种子是通过微型繁殖技术(植物组织培养技术)获得的,D正确。
      故选B。
      18. λ噬菌体的线性双链DNA两端各有一段单链序列。这种噬菌体在侵染大肠杆菌后其DNA会自连环化(如图),该线性分子两端能够相连的主要原因是()
      A. 单链序列脱氧核苷酸数量相等
      B. 分子骨架同为脱氧核糖与磷酸
      C. 单链序列的碱基能够互补配对
      D. 自连环化后两条单链方向相同
      【答案】C
      【解析】
      【分析】双链DNA的两条单链方向相反,脱氧核糖与磷酸交替连接构成DNA分子的基本骨架,两条单链之间的碱基互补配对。
      【详解】AB、单链序列脱氧核苷酸数量相等、分子骨架同为脱氧核糖与磷酸交替连接,不能决定该线性DNA分子两端能够相连,AB错误;
      C、据图可知,单链序列的碱基能够互补配对,决定该线性DNA分子两端能够相连,C正确;
      D、DNA的两条链是反向的,因此自连环化后两条单链方向相反,D错误。
      故选C。
      19. 以下关于活动“PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定”的叙述,错误的是( )
      A. 4种脱氧核苷三磷酸为PCR扩增提供原料和能量
      B. 上(载)样缓冲液中的电泳指示剂可使核酸显色
      C. 带有负电荷的核酸需要加在电泳槽的负极
      D. 不同大小的核酸迁移速率不同,从而实现其分离
      【答案】B
      【解析】
      【分析】1、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出,上百万份的DNA拷贝。利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了DNA的热变性原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器,一次PCR一般要经历30次循环。
      2、DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷,在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动,这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关,凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。
      【详解】A、脱氧核苷三磷酸有特殊化学键,能发生断裂,为PCR提供能量,同时形成的脱氧核糖核苷酸可以提供原料,A正确;
      B、上(载)样缓冲液中的电泳指示剂(溴酚蓝)不能使核酸显色,它迁移速率较快,在其迁移出凝胶前关闭电泳仪电源,可以保证核酸分子还在凝胶内,B错误;
      C、带有负电荷的核酸会向其携带电荷相反的电极迁移,故需要加在电泳槽的负极,使其向正极迁移,C正确;
      D、不同大小的核酸其质量不同,在相同电场力的作用,迁移速率不同,从而实现其分离,D正确。
      故选B。
      20. 关于DNA粗提取及鉴定的操作实验,下列叙述正确的是()
      A. 将猪的成熟红细胞置于清水中,红细胞涨破后DNA会释放出来
      B. 提取过程中加入EDTA,目的是抑制DNA酶活性,防止核DNA被酶解
      C. 提取DNA时加入酒精,目的是使不溶于酒精的蛋白质等物质析出
      D. 将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后,溶液即变为蓝色
      【答案】B
      【解析】
      【分析】DNA粗提取和鉴定的过程:(1)实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。(2)破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。(3)去除滤液中的杂质:方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。(4)DNA的析出与鉴定①将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。②取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
      【详解】A、猪属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核,不能用于DNA 的粗提取,A错误;
      B、DNA提取过程中加入EDTA(乙二胺四乙酸),目的是抑制DNA酶活性,防止核DNA被酶解, B正确;
      C、DNA不溶于酒精,提取DNA时可加入酒精,目的是让DNA析出,C 错误;
      D、将提取到的丝状物先溶解到2ml/L的氯化钠溶液中,再加入二苯胺试剂,沸水浴加热后,溶液变为蓝色,D错误。
      故选B
      酵母菌是一种单细胞真菌,能将糖发酵成酒精和二氧化碳,分布于整个自然界,是一种天然发酵剂。在生活中人们常用茶酵母、面包酵母和啤酒酵母来制作食品。
      资料1:《书经》中的“若作酒醴,尔惟曲蘖”提到酿酒必须要用酒曲。酒曲是以谷物为原料,破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物,经水浸泡活化后投入蒸熟的米即可用于酿酒。
      资料2:酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的,科研人员进行了酵母菌种的改良实验。阅读材料完成下列小题:
      21. 下列叙述错误的是()
      A. 夏季气温升高,需用沸水浸泡酒曲以防杂菌污染
      B. 夏酒曲中霉菌分泌的蛋白酶可将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
      C. 酒曲经水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢
      D. 酿酒过程中,应适时放气
      22. 下图为资料2中提到的改良酵母菌种的实验。请据图分析,下列叙述正确的是()
      A. 用PEG诱导之前需用纤维素酶去除两种酵母的细胞壁
      B. 以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标
      C. 在培养基X中以淀粉为唯一碳源即可筛选出杂种酵母
      D. 以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时,需对原料进行糖化处理
      【答案】21. A 22. D
      【解析】
      【分析】家庭制作米酒利用的是酵母菌发酵原理,酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活,有氧条件下酵母菌把葡萄糖分解成二氧化碳和水,释放出较多的能量,无氧条件下,酵母菌则把葡萄糖分解成二氧化碳和酒精,释放出较少的能量。
      【21题详解】
      A、酵母菌的生活需要适宜的温度,用煮沸的水浸泡酒曲会将酒曲内的微生物杀死,A错误;
      B、酒曲中霉菌可以分泌蛋白酶,分泌的蛋白酶可将蛋白质分解为小分子和氨基酸,B正确;
      C、酒曲浸水后酵母菌得到更多的水分,新陈代谢增强,有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢,产生大量能量使酵母菌进行繁殖,C正确;
      D、酿酒过程中,会积累很多二氧化碳,应适时放气,D正确。
      故选A。
      【22题详解】
      A、酵母菌含有细胞壁,细胞壁的主要成分是几丁质,由于酶具有专一性,故用PEG诱导之前需用几丁质酶去除两种酵母的细胞壁,而不是纤维素酶,A错误;
      B、结合题干信息分析可知,为了实现以谷物为原料高效生产酒精的目的,目的菌最终的鉴定指标应该是产生酒精的能力,B错误;
      C、糖化酵母也能以淀粉为碳源,因此在培养基X中只以淀粉为唯一碳源无法区分杂种酵母和糖化酵母,在培养基中可以加入酒精指示剂,如:酸性重铬酸钾,若有灰绿色透明圈产生,则对应的菌落是既能利用淀粉又能产生酒精的杂种酵母,C错误;
      D、酿酒酵母不能直接利用淀粉,需要将淀粉分解为葡萄糖后才能进行利用,故以谷物为原料用酿酒酵母酿酒时,需对原料进行糖化处理,将淀粉分解为葡萄糖,D正确。
      故选D。
      23. 葡萄糖异构酶能将葡萄糖转化为果糖,其最适温度约为60℃,生产上常用于高果糖浆的生产。科学家将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代,结果它的最适温度提高了约10℃。下列有关叙述正确的是( )
      A. 蛋白质工程直接对蛋白质进行操作,从而改造或制造自然界没有的蛋白质
      B. 编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核苷酸序列会有相应的改变
      C. 经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传
      D. 改造后的葡萄糖异构酶在60℃时催化活性高于70℃时的
      【答案】B
      【解析】
      【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行基因改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需要。
      【详解】A、蛋白质工程不是通过改造蛋白质来实现的,而是通过对基因进行操作来实现对蛋白质的改造,A错误;
      B、编码葡萄糖异构酶的基因是DNA上的片段,故经改造后编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核苷酸序列会有相应的改变,B正确;
      C、葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状,是通过改变基因的序列获得的,可以遗传,C错误;
      D、改造后的葡萄糖异构酶最适温度约为70℃,在60℃时活性较低,生产高果糖浆的效率可能低于70℃时的,D错误。
      故选B。
      24. 下面是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述错误的是()
      A. 以上DNA片段由4种限制酶切割后产生
      B. ②片段是在识别序列为的限制酶作用下形成的
      C. ①和④两个片段在T4DNA连接酶的作用下不能连接形成重组DNA分子
      D. 限制酶、DNA连接酶和DNA聚合酶作用的部位都是磷酸二酯键
      【答案】B
      【解析】
      【分析】分析题图:图示为几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段,其中①④具有相同的黏性末端;②经过限制酶切割后形成的是黏性末端;③经过限制酶切割后形成的是平末端。
      【详解】A、碱基序列具有方向性,图中①④的黏性末端虽然相同,但不能互补配对,限制酶的识别序列一般是带有黏性末端的一条链上由5’→3’端读,图中四种类型的限制酶的识别序列各不相同,故是由4种限制酶切割后产生的,A正确;
      B、②片段是在酶切位点为 的限制酶作用下形成的,B错误;
      C、黏性末端的碱基序列具有方向性,①和④两个片段在T4DNA连接酶的作用下不能连接形成重组DNA分子,C正确;
      D、限制酶可破坏磷酸二酯键,DNA连接酶和DNA聚合酶可催化形成磷酸二酯键,D正确。
      故选B。
      25. 镰状细胞贫血是一种单基因遗传病,由正常血红蛋白基因(HbA)突变为异常血红蛋白基因(Hbs)引起,它们的某片段如图甲。现对一胎儿进行基因检测,主要原理:限制酶MstⅡ处理扩增后的DNA,加热使酶切片段解旋后用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交,最后电泳分离。图乙为电泳后荧光出现的三种可能性。下列叙述错误的是()
      A. 正常血红蛋白基因与异常血红蛋白基因的根本区别在于碱基的排列顺序不同
      B. 若该胎儿检测结果为图乙-b,则其为镰状细胞贫血患者
      C. 荧光标记序列越长,图乙-c中两个DNA条带间的距离越大
      D. 用限制酶MstⅡ处理DNA不充分,可能把正常人误判为携带者
      【答案】C
      【解析】
      【分析】题图分析:图甲为正常人和患者血红蛋白基因的部分片段,可见镰状细胞贫血是由碱基对发生替换导致的,碱基发生改变后,中间位置的MstⅡ限制酶切割位点消失,即致病基因中MstⅡ限制酶切割位点减少了一个。
      图乙中,用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交,a中的DNA条带距离加样孔较远,说明DNA分子量较小,并且只有一种类型的条带,因此可以确定为正常血红蛋白基因被切割形成的左侧片段,即只含有显性基因;b中的DNA条带距离加样孔较近,说明DNA分子量较大,并且只有一种类型,因此可以确定为镰状细胞贫血基因的一条链与荧光标记的序列进行了杂交,即只含有致病基因;而c中同时具有正常基因和致病基因,为该病致病基因的携带者。
      【详解】A、镰状细胞贫血是由基因中碱基对发生替换导致的,即正常血红蛋白基因与异常血红蛋白基因的根本区别在于碱基的排列顺序不同,A正确;
      B、图乙b中的DNA条带距离加样孔较近,说明DNA分子量较大,并且只有一种类型,因此可以确定为镰状细胞贫血基因的一条链与荧光标记的序列进行了杂交,即只含有致病基因,因此若该胎儿检测结果为图乙-b,则其为镰状细胞贫血患者,B正确;
      C、凝胶电泳中,DNA分子量越大跑得越慢,即距离加样孔越近,因此图乙-c中两个DNA条带间的距离与切割后DNA分子量的大小有关,与荧光标记序列长短无关,C错误;
      D、正常血红蛋白基因(HbA)的中间也含有MstⅡ限制酶的酶切位点,而贫血症基因(Hbs)中没有,如果用MstⅡ限制酶处理DNA不充分,则正常血红蛋白基因(HbA)中的中间位置可能没有被切割,结果可能与贫血症基因(Hbs)酶切后电泳结果一样,因此可能把正常人误判为携带者,D正确。
      故选C。
      非选择题部分
      二、非选择题(本大题共4小题,共50分)
      26. 为建设社会主义新农村,解决农村生产生活垃圾处理的问题,某办事处给出了处理方案:
      (1)某团队从土壤中筛选出降解玉米秸秆的复合菌的过程中,用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,灭菌从___开始计时;全部工作结束后,为了不污染环境,所有使用过的器皿、废弃物都必须进行___处理后再洗涤倾倒。
      (2)若要筛选出能分解包装塑料的细菌应使用___培养基(从功能角度回答)。
      (3)调查小组为了从被污染的湖水中分离获得能降解环境污染物M(一种含有C、H、O、N的有机物)的细菌的单菌落,设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
      ①据表判断,其中成分M主要是作为___起作用,培养基___(填“甲”或“乙”)可用于分离能降解M的目的菌。
      ②如何判断该培养基有无杂菌污染___(请回答出判断方法和结果)。
      ③在接种时选用___法接种,可以计数细菌的增殖情况;接种前需用无菌水对菌液进行___,得到稀释倍数为105的土壤样品;在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为156、178和191。1mL原土壤样液中的细菌数量为___个。
      【答案】(1) ①. 达到设定的温度或压力时 ②. 高压蒸汽灭菌(或灭菌)
      (2)选择 (3) ①. 氮源 ②. 乙 ③. 选择一个未接种的培养基作为空白对照组,若该对照组无杂菌生长,则培养基无杂菌污染 ④. 稀释涂布平板法 ⑤. 梯度稀释 ⑥. 1.75×108
      【解析】
      【分析】选择培养基就是在培养基上只允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长。微生物接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法,两种方法均可以用于分离菌种,但稀释涂布平板法还可用于计数。
      【小问1详解】
      用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,灭菌从达到设定的温度或压力时开始计时;全部工作结束后,为了不污染环境,所有使用过的器皿、废弃物都必须进行高压蒸汽灭菌(或灭菌)处理后再洗涤倾倒,防止培养的杂菌污染环境和实验者。
      【小问2详解】
      选择培养基就是在培养基上只允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长,若要筛选能分解包装塑料的细菌,制作原理是只允许塑料降解菌生长,同时抑制或阻止其他种类的微生物生长,因此应使用选择培养基。
      【小问3详解】
      ①一般培养基应具有水、无机盐、碳源和氮源,由表格可知培养基甲、乙缺少氮源,故M是作为氮源。分离目的菌一般用固体培养基,甲培养基没有加琼脂,为液体培养基,所以培养基乙可用于分离能降解M的目的菌。
      ②可选择一个未接种的培养基作为空白对照组,与接种的培养基都放入恒温箱培养一段时间,若该对照组无杂菌生长,则培养基无杂菌污染。
      ③接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法,两种方法均可以用于分离菌种,但稀释涂布平板法可用于计数,接种前需用无菌水对菌液进行梯度稀释,得到稀释倍数为105的土壤样品;三个平板上菌落的平均数为(156+178+191)÷3=175,1mL原土壤样液中的细菌数量为175÷0.1×105=1.75×108个。
      27. 玉米中含有β-胡萝卜素,为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。
      (1)甲方案中,β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是___。
      (2)乙方案中,在体细胞杂交前需要用___酶除去细胞壁获得原生质体,获得原生质体后,将其置于___溶液中防止其吸水涨破。诱导原生质体融合的物理方法___(请至少答出一点)。杂种细胞形成的标志是___。
      (3)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中,植物需要依赖培养基中的蔗糖,其中蔗糖的作用是___(请至少答出两点)。杂种细胞脱分化形成愈伤组织,愈伤组织再分化发育成芽、根。生根培养基中___比值高时促进生根。植物组织培养技术得到的组培苗需要进行___处理,目的是提高试管苗对外部环境的适应能力。在植物组织培养的过程中,一直保持湿润环境,在进行该处理时,湿度逐渐___,以及应该避免强光直射等问题。
      (4)甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值,两者共有的优点是___。
      【答案】(1)玉米和水稻共用一套遗传密码(或生物共用一套遗传密码)
      (2) ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 等渗 ③. 电刺激(或离心,震荡) ④. 再生出细胞壁
      (3) ①. 作为碳源,能源物质,参与维持培养基的渗透压 ②. 生长素与细胞分裂素 ③. 炼苗 ④. 降低
      (4)克服远缘杂交不亲和的障碍(或打破生殖隔离)
      【解析】
      【分析】分析甲方案:该方案采用基因工程技术育种,其中①表示目的基因获取;②表示将目的基因导入受体细胞;③表示将转基因细胞培育成转基因植株,需要采用植物组织培养技术。分析乙方案:该方案采用植物细胞工程技术育种,其中④表示植物体细胞杂交过程,⑤表示将杂交细胞培育成杂交植株,需要采用植物组织培养技术。
      【小问1详解】
      自然界中所有生物共用一套遗传密码,因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达。
      【小问2详解】
      植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,在植物体细胞杂交前需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体;获得原生质体后,将其置于等渗溶液中防止其吸水涨破。诱导植物原生质体融合常用的物理方法是电刺激(或离心,震荡)。杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁,而植物细胞壁的形成与高尔基体有关。
      【小问3详解】
      ⑤表示将杂交细胞培育成杂交植株,需要采用植物组织培养技术。其中蔗糖可作为外植体的碳源,能源物质,还可参与维持培养基的渗透压。植物组织培养时,培养基中生长素与细胞分裂素比值高时有利于生根,植物组织培养技术得到的组培苗需要进行炼苗处理,目的是提高试管苗对外部环境的适应能力。在植物组织培养的过程中,一直保持湿润环境,在进行该处理时,湿度逐渐降低,直到与自然湿度接近后,移栽至土壤定植,同时还应该避免强光直射等问题。
      小问4详解】
      植物体细胞杂交的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
      28. Ⅰ为降低人乳腺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体药物偶联物(ADC),过程如图1所示。
      (1)本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自___。
      (2)步骤②是选择出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的特点是___,步骤③中对于抗体检测呈___性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养,克隆化培养使每个孔内不多于一个细胞,达到单个克隆培养的目的。
      (3)请写出单克隆抗体的优点___(请至少答出两点)。
      (4)体外培养杂交瘤细胞应置于___培养箱中,动物细胞培养过程为避免代谢物的毒害作用,需要进行___。
      Ⅱ目前,临床上癌症治疗的方法一般是先通过手术切除肿瘤,为杀死体内残留的癌细胞,在手术后进行化疗。有研究小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。由此推测:二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,可作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。
      实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等等。
      (5)请你帮助该研究小组设计实验思路(具体操作细节不做要求)。
      a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用___处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
      b.取洁净的试管5支,编号A、B、C、D、E,并在___,E号培养基加入等量的生理盐水;
      c.从培养皿中吸取等量培养液置于A-E号试管中,振荡后,在___条件下培养一段时间;
      d.从摇匀的5支试管中吸取适量的培养液置于___上,在显微镜下计数,记录数据。
      (6)实验结果如下:
      根据实验结果,你能得出的结论是:第一,___;第二,___。
      (7)图1步骤④是将获得的单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物,通过接头结合在一起,从而获得ADC。研究发现,ADC在患者体内的作用如图2所示。
      ①ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用,是因为___能精确地定位乳腺癌细胞,该过程依赖于___的原理。
      ②据图2可知ADC进入乳腺癌细胞后,细胞中的溶酶体可将其水解,释放出的药物最终作于___可导致癌细胞凋亡。
      【答案】(1)人乳腺癌细胞
      (2) ①. 既能无限增殖,又能产生特定抗体 ②. 阳
      (3)纯度高,可大量制备,特异性强,灵敏度高
      (4) ①. CO2 ②. 定期更换培养液
      (5) ①. 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) ②. A-D号试管分别加等量的0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL的二氯二乙胺溶液 ③. 相同且适宜 ④. 血细胞计数板
      (6) ①. 在一定范围内,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖 ②. 在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强
      (7) ①. 单克隆抗体 ②. 抗原抗体特异性结合 ③. 细胞核
      【解析】
      【分析】由于单克隆抗体的特异性强,能特异性识别抗原,因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合,制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞。疗效高,副作用小,位置准确。
      【小问1详解】
      本实验目的是生产治疗乳腺癌的单克隆抗体,故应给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞,从而引起小鼠发生特异性免疫,保证能从体内获得产生相应抗体的浆细胞。
      【小问2详解】
      步骤②是初步筛选出的杂交瘤细胞,具有既能无限增殖,又能产生特定抗体的特点,步骤③中对于抗体检测呈阳性(说明该杂交瘤细胞产生的是抗乳腺癌抗原的抗体)的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养,克隆化培养使每个孔内不多于一个细胞,达到单个克隆培养的目的。
      【小问3详解】
      单克隆抗体具有纯度高、可大量制备,特异性强,灵敏度高的优点。
      【小问4详解】
      体外培养杂交瘤细胞应置于CO2恒温培养箱中,动物细胞培养过程为避免代谢物的毒害作用,需要进行定期更换培养液。
      【小问5详解】
      a.胰蛋白酶能水解细胞表面的蛋白质,使组织细胞分散开,所以动物细胞培养常用胰蛋白酶处理。
      b.实验目的是研究二氯二乙胺作为化疗药物的适宜浓度,实验设置应遵循对照原则,所以取洁净的试管5支,编号A、B、C、D、E,,并在A﹣D号试管中分别加入等量的0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL的二氯二乙胺溶液,E号试管中加入等量的生理盐水,和前4只试管进行对照。
      c.其它无关变量应相同且适宜,故从培养皿中吸取等量的培养液置于A-E号试管中,振荡后,在相同且适宜条件下培养一段时间;
      d.从摇匀的5支试管中吸取适量的培养液置于血细胞计数板上,在显微镜下计数,记录数据。
      【小问6详解】
      根据表格数据可知,与E组相比,前四组的细胞数目均减少,且随着二氯二乙胺浓度的增加,细胞数量越来越少,因此可说明在一定范围内,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖;且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强。
      【小问7详解】
      ①由于单克隆抗体通过特异性的抗原-抗体反应,能精确地定位乳腺癌细胞,因此ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用。
      ②ADC进入乳腺癌细胞后,细胞中的溶酶体释放水解酶可将其水解,释放出的药物最终作用于细胞核,可导致癌细胞凋亡。
      29. Ⅰ、赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因(R)导入玉米中,使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。
      (1)随着测序技术的发展,通过检索___查询R基因序列,通过化学合成法得到R基因。利用PCR技术扩增R基因时,需要在一定的缓冲液中才能进行,其中需要加入___酶。为了特异性扩增R基因序列,需根据___设计特异性引物。
      (2)在构建基因表达载体时,其中载体上启动子的作用___,若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接,提高重组效率,应该选择的限制酶是___。
      (3)随着转化方法的突破,农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养,当农杆菌侵染玉米细胞后,能将Ti质粒上的___转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
      (4)检测R基因是否表达的方法是___。
      (5)在基因工程中若要培养转基因小鼠,将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是___。
      Ⅱ、乳腺生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的乳腺中,通过转基因动物分泌的乳汁来生产重组蛋白,例如,生产可用于治疗血液病、创伤性出血等疾病的重组人凝血因子VⅡ(rhFVⅡ)。请回答下列问题:
      (6)为获得人凝血因子,首先要从细胞中获取总RNA,通过___获得cDNA,再进行PCR获得人凝血因子基因。该方法获得的基因不具有___(至少答出3点)。
      (7)人凝血因子cDNA中不含限制酶识别序列,无法直接构建基因表达载体,因此,在PCR时需要在引物上加入限制酶的识别序列,应加在引物的___(填“3”或“5”)端才能不影响PCR的顺利进行。
      (8)膀胱生物反应器与乳腺生物反应器的优点相同:收集产物蛋白比较容易,不会对动物造成损伤。此外,膀胱生物反应器还具有的显著优势在于不受转基因动物的___(答出1点即可)限制,而且从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
      【答案】(1) ①. 基因数据库(或序列数据库或基因Bank) ②. 耐高温的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶) ③. R基因两端的碱基(核苷酸)序列(或R基因的已知序列)
      (2) ①. RNA聚合酶特异性识别和结合的位点,起始转录 ②. PstI、EcRI(顺序可对调)
      (3)T-DNA (4)抗原—抗体杂交
      (5)显微注射法 (6) ①. 逆转录法 ②. 启动子,终止子,内含子
      (7)5' (8)性别(或年龄)
      【解析】
      【分析】1、PCR扩增:目的基因DNA受热变性后解为单链,引物与单链相应互补序列结合;然后以单链DNA为模板,在DNA聚合酶作用下进行延伸,如此循环多次。
      2、农杆菌转化法:取Ti质粒和目的基因构建基因表达载体、将基因表达载体转入农杆菌、将农杆菌导入植物细胞、将植物细胞培育为新性状植株。
      3、构建基因表达载体:用一定的限制酶切割载体,使它出现一个切口;然后用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割目的基因的DNA片段;再利用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处。
      【小问1详解】
      随着测序技术的发展,通过检索基因数据库(或序列数据库或基因Bank)查询R基因序列,通过化学合成法得到R基因。利用PCR技术扩增R基因时,进行的是DNA复制过程,因为过程中涉及到高温环境,因此需要加入耐高温的DNA聚合酶。扩增前,需要根据R基因两端的碱基(核苷酸)序列设计特异性引物,这样能够利用模板链特异性扩增出R基因片段。
      【小问2详解】
      在构建基因表达载体时,其中载体上启动子能与RNA聚合酶特异性识别和结合的位点,起始转录,若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接,需要使用两种不同的限制酶形成两个不同的末端,HindIII会破坏抗四环素基因(抗性基因),因此应该选取PstI、EcRI。
      【小问3详解】
      农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
      【小问4详解】
      R基因正常表达将会产生对应的蛋白质,可用抗原—抗体杂交技术检测该蛋白质的产生。
      【小问5详解】
      转基因动物中最常采用将目的基因导入受体细胞(动物细胞)的技术是显微注射技术,常用的受体细胞是受精卵。
      【小问6详解】
      PCR不能直接以RNA为模板,RNA必须通过逆转录获得cDNA,才可作为PCR的模板;RNA只对应基因结构中的编码区,所以利用该方法获得的基因不具有编码区上下游的启动子,终止子,内含子。
      【小问7详解】
      在PCR时需要在引物上加入限制酶的识别序列,因为子链合成的方向为5’→3’,应加在引物的5′端才能不影响PCR的顺利进行。
      【小问8详解】
      乳腺生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的乳腺中,通过转基因动物分泌的乳汁来生产重组蛋白,转基因动物必须是雌性,而且需要到泌乳期才能产生乳汁。膀胱生物反应器是将外源基因定位表达于哺乳动物的膀胱中,通过转基因动物产生的尿液来生产重组蛋白,膀胱生物反应器具有的显著优势在于不受转基因动物的性别、年龄。成分
      无机盐
      淀粉
      M
      琼脂糖

      培养基甲
      +
      +
      +
      -
      +
      培养基乙
      +
      +
      +
      +
      +
      实验组别
      A
      B
      C
      D
      E
      二氯二乙胺浓度(mg/mL)
      0.1
      02
      0.3
      0.4
      0
      细胞数目(个/mL)
      320
      275
      186
      96
      560

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