山东省名校考试联盟2024-2025学年高二下学期3月校际联考生物试卷（解析版）

这是一份山东省名校考试联盟2024-2025学年高二下学期3月校际联考生物试卷（解析版），共28页。
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并收回。
4．本试卷考试时间为90分钟，满分为100分。
一、选择题：本大题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 去年冬天，一则“腌酸菜‘翻车’，长出绿叶”的视频登上热搜，并被各大网站争相转发。视频介绍，一位大姐选取了新鲜的白菜，洗净后放入密封的酸菜坛子，加入一定量的盐和水，然后置于阴凉通风的地方腌制。十几天后，当她打开坛子时，发现白菜不仅没有按照预期变酸，反而长出了一些嫩绿色的新叶子，这引来一众网友惊呼，也引起了广大高校的关注。以下关于传统发酵产品的制作，叙述正确的是（ ）
A. 制作传统泡菜需要对容器和原料进行严格灭菌以防止杂菌生长
B. 利用传统发酵技术生产酱油需利用产生蛋白酶的细菌将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸
C. 白菜在腌制过程中没有变酸反而发芽的原因可能是低温抑制了微生物的发酵活动
D. 制作泡菜时，盐水需要浸没全部菜料，其主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
【答案】C
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、制作传统泡菜需要对容器进行严格消毒以防止杂菌生长，由于菌种来自原料上所带的菌体，故不需要对菜料进行消毒灭菌，A错误；
B、利用传统发酵技术生产酱油需利用产生蛋白酶的霉菌将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，霉菌是真菌，B错误；
C、白菜在腌制过程中没有变酸反而发芽的原因可能是低温抑制了微生物的发酵活动，C正确；
D、制作泡菜时，盐水需要浸没全部菜料，其主要目的是创造无氧环境，D错误。
故选C。
2. 制作酸奶用的酸奶发酵剂通常由多种同型乳酸菌组成，主要有嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，这两者具有协同生长的特点，具体表现在：产酸为主的嗜热链球菌先生长，产生的甲酸使pH值降低，促进分解酪蛋白能力强的保加利亚乳杆菌的生长，其分解产物又为嗜热链球菌提供生长所需的多肽和氨基酸。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 在培养乳酸菌时，需要将培养基调制中性或弱碱性
B. 在酸奶发酵的过程中，嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的数量会持续增加
C. 做酸奶用的牛奶可以加入适量抗生素以防杂菌污染
D. 若统计发酵结束后酸奶中乳酸菌的种类和数量，可采用稀释涂布平板法
【答案】D
【分析】保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌都属于厌氧细菌，在发酵过程中进行无氧呼吸，需要在无氧条件下进行。厌氧细菌无氧呼吸产生乳酸，不产生酒精和二氧化碳，所以不会出现涨袋现象。
【详解】A、乳酸菌适宜生活在酸性环境中，故培养乳酸菌的培养基应为酸性，A错误；
B、在发酵过程中，随着原料的不断消耗和代谢产物的不断积累，乳酸菌的数量不会持续增加，B错误；
C、抗生素也会抑制乳酸菌的生长，因此做酸奶用的牛奶不能加入抗生素，C错误；
D、稀释涂布平板法可用于统计样品中活菌的数目且可以通过观察菌落特征辨别活菌种类，D正确。
故选D。
3. 如表是一个用于分离培养某种微生物的培养基配方，下列叙述不正确的是（ ）
A. 该培养基分离培养可能是某种固氮微生物
B. 该培养基中的碳源是甘露醇
C. 碳酸钙可用于调节培养基的pH
D. 培养基没加氮源是由于有些微生物生长不需要氮
【答案】D
【分析】培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、该培养基没有加氮源，固氮微生物可利用氮气，所以培养基可用于分离培养固氮微生物，A正确；
B、甘露醇化学式为C6H14O6 ，是培养基中的碳源，B正确；
C、碳酸钙能够与酸反应，主要用于调节培养基中的pH，C正确；
D、固氮微生物生长需要氮，可以利用氮气，不需要在培养基中加氮源，D错误。
故选D。
4. 某真菌能通过图1途径合成色氨酸，而其突变株不能。将突变株trpX、trpY、trpZ（每一种突变菌株只有图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量真菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述错误的是（ ）
A. 图2所示的培养基在接种前含有少量色氨酸
B. 色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外
C. trpY菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端
D. trpX、trpY、trpZ三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻
【答案】C
【分析】基因通过中心法则控制性状，包括两种方式：
（1）通过控制酶的合成控制代谢过程，间接控制生物体的性状；
（2）可通过控制蛋白质的结构直接控制生物的性状。
【详解】A、依据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基在接种前含有少量色氨酸，A正确；
B、根据题干信息“继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖”，说明突变菌株能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，B正确；
C、结合题干情境信息，trpX能够利用trpY和trpZ合成的代谢产物，完成色氨酸的合成；trpY只能利用trpZ合成的代谢产物，完成色氨酸的合成。因此trpY菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅲ区域的一端，C错误；
D、将突变株trpX、trpY、trpZ分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，突变菌株能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，Ⅲ区域菌株不再生长，说明trpZ阻断吲哚转化为色氨酸，即阻断③过程；trpX能够利用trpY和trpZ合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明trpX阻断①过程；trpY只能利用trpZ合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明阻断的是②过程，因此trpX、trpY、trpZ三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻，D正确。
故选C。
5. 某生物兴趣小组以蓝莓为原料，尝试利用传统发酵技术制作蓝莓酒、蓝莓醋，基本流程如下图所示。下列叙述正确是（ ）
A. 为防止杂菌污染需将蓝莓汁经高压蒸汽灭菌处理后装入发酵瓶
B. ③、④过程中，需向发酵装置不断地补充无菌空气
C. ④过程中随着时间的推进，酒精的产生速率先上升后趋于稳定
D. 密封不严的果酒表面长出的菌膜很可能是好氧细菌大量繁殖形成的
【答案】D
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、传统发酵没有接种菌种，而是利用了存在原料上的天然存在的菌种，因此所用的果汁不能进行高压蒸汽灭菌，A错误；
B、醋酸菌是好氧细菌，制作蓝莓醋时，需向发酵装置不断地补充无菌空气；而酵母菌的酒精发酵需要无氧条件，B错误；
C、发酵早期，酵母菌和底物充足，发酵速率较快，酒精的产生速率呈上升趋势，后来随着底物的消耗，发酵速度下降，酒精的产生速率下降，最后底物消耗完，不再产生酒精，C错误；
D、密封不严的果酒表面长出菌膜很可能是醋酸菌等好氧细菌大量繁殖的结果，D正确。
故选D。
6. 养殖场粪便中的某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生，影响畜禽健康。为从粪便中筛选能利用氨氮化合物且产生量少的微生物。兴趣小组开展如图所示实验，下列叙述错误的是（ ）
A. ①过程可通过平板划线法或稀释涂布平板法获得单菌落
B. ②过程应筛选不能在培养基2上生长而能在培养基1上生长的菌株进行后续实验
C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙
D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于的减少
【答案】D
【分析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。图中②筛选的是不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。
【详解】A、平板划线法和稀释涂布平板法是常用的分离微生物的方法，可通过平板划线法或稀释涂布平板法获得单菌落，A正确；
B、②筛选不能在尿素为唯一氮源培养基2上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基1上生长的菌株，即能利用氨氮化合物且NH3产生量少的微生物，可用于后续的实验，B正确；
C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确；
D、由图可知，甲不产生脲酶而乙分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。
故选D。
7. 炎炎夏日，某校三位高中生吃了冰激凌之后都出现腹泻现象。他们怀疑冰激凌中的大肠杆菌含量超标，于是按照如图所示的滤膜法测定冰激凌中大肠杆菌含量（所用滤膜孔径小于大肠杆菌），生长在伊红—亚甲蓝培养基（EMB培养基）中的大肠杆菌呈现深紫色。下列叙述正确的是（ ）
A. 图中培养大肠杆菌的EMB培养基属于选择培养基
B. 与稀释涂布平板法相比，滤膜法更适用于浓度过低的菌液中活菌的计数
C. 用如图所示的方法测定冰激凌中大肠杆菌含量无需对照实验
D. 若培养基上除了深紫色菌落还有其他菌落，说明培养基灭菌不彻底
【答案】B
【分析】分析题意可知，滤膜法是检测水样中大肠杆菌群的方法。将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于（EMB培养基）上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠杆菌菌落，依据过滤水样体积计算每升或每100毫升水样中的大肠杆菌菌群数。该方法操作简单、快速，主要适用于杂质较少的水样。
【详解】A、生长在伊红—亚甲蓝培养基（EMB培养基）中的大肠杆菌呈现深紫色，说明图中培养大肠杆菌的EMB培养基属于鉴别培养基，A错误；
B、滤膜法测定所用滤膜孔径小于大肠杆菌，与稀释涂布平板法相比，滤膜法更适用于浓度过低的菌液的计数，B正确；
C、用如图所示的方法测定冰激凌中大肠杆菌含量需要不涂布的平板做阴性对照和涂布大肠杆菌的平板做阳性对照，C错误；
D、若培养结果显示除了深紫色菌落还存在其他菌落，说明待测样品中可能存在其它杂菌，D错误。
故选B。
8. 下列关于细胞全能性的描述正确的是（ ）
A. 大麦种子萌发长成完整植株的过程体现了植物细胞的全能性
B. 克隆猴中中、华华的培育体现了高度分化的动物体细胞也具有发育的全能性
C. 胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能性
D. 生殖细胞不具有控制该物种遗传特性的所有基因，所以不具备发育的全能性
【答案】C
【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握：（1）概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体或分化形成各种细胞的潜能。（2）细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。（3）细胞全能性大小：受精卵＞干细胞＞生殖细胞＞体细胞。（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。
【详解】A、种子是植物的幼体，大麦种子萌发长成完整植株的过程不能体现植物细胞的全能性，A错误；
B、克隆猴中中、华华的培育是细胞核移植的产物，体现了高度分化的动物体细胞核的全能性，B错误；
C、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有发育成完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能性，C正确；
D、单倍体育种体现了生殖细胞也具有全能性，D错误。
故选C。
9. 自植物组织培养技术发展以来，有关茎尖等顶端分生组织不带毒，即存在一个特殊的免毒区的现象已经通过电子显微镜和荧光抗体技术得到了证实。以下说法正确的是（ ）
A. 植物体出现免毒区可能是植物顶端分生组织的胞间连丝不发达，病毒不能通过胞间连丝到达顶端分生组织所致
B. 作物经茎尖培养脱毒后就对病毒产生了抗性，配合使用微生物农药效果更好
C. 外植体灭菌时，为了缩短灭菌时间，可适当提高次氯酸钠的浓度
D. 植物细胞工程技术中，均需将外植体培养到个体水平，使用的均是固体培养基
【答案】A
【分析】植物组织培养技术的应用：（1）、植物繁殖的新途径：微型繁殖、作物脱毒、人工种子；（2）、作物新品种的培育：单倍体育种、突变体的利用；（3）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、细菌或病毒感染植物时会借助输导组织的导管通道、胞间连丝等结构扩散，植物体出现免毒区可能是植物顶端分生组织的胞间连丝不发达，病毒不能通过胞间连丝到达顶端分生组织所致，A正确；
B、作物茎尖无病毒或者病毒很少，组织培养形成的幼苗无病毒，不是产生抗性，配合使用微生物农药效果更好，B错误；
C、外植体应消毒而不是灭菌，消毒时为了缩短灭菌时间，可以适当提高次氯酸钠的浓度，C错误；
D、植物细胞工程技术中，植物组织培养和植物体细胞杂交技术需培养到个体水平且使用固体培养基，但植物细胞培养需培养到愈伤组织阶段且使用固体培养基，D错误。
故选A。
10. 如图所示为某种育种方式的流程，以下说法正确的是（ ）

A. 图示是植物组织培养过程，①②分别表示脱分化和再分化
B. 单倍体育种隐性性状容易体现，是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
C. 诱变育种可以提高突变率，愈伤组织经诱变后多数细胞发生了突变
D. 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后可得到稳定遗传的植株
【答案】B
【分析】二倍体植株的花粉经脱分化和再分化后可得到单倍体植株，而单倍体植株一般长得弱小，且高度不育。
【详解】A、①②是单倍体育种过程，①用到植物组织培养技术，包括脱分化和再分化，A错误；
B、二倍体的单倍体只含一个染色体组，单倍体育种隐性性状容易体现，是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，B正确；
C、诱变育种可以提高突变率，但由于基因突变具有低频性，故愈伤组织经诱变后少数细胞发生了突变，C错误；
D、二倍体花粉经脱分化与再分化后可得到单倍体幼苗，秋水仙素加倍处理后得到稳定遗传的纯合二倍体，D错误。
故选B。
11. Teru利用农杆菌介导法将卡那霉素抗性基因和潮霉素抗性基因分别导入到2个二倍体马铃薯品种中，将2个种的原生质体融合后，采用同时含有卡那霉素和潮霉素的培养基进行选择，最终获得杂株。以下说法正确的是（ ）
A. ①过程用纤维素酶和胶原蛋白酶处理，为了细胞更好的吸水培养基渗透压应低于细胞液
B. ②过程可用灭活的仙台病毒处理，杂种植株具有2个染色体组，但没有同源染色体
C. 该育种过程发生了基因重组和染色体变异，克服了远缘杂交不亲和的障碍
D. ②过程一共产生3种类型的细胞，③过程用双抗培养基可以将杂种细胞选择出来
【答案】C
【分析】据图分析，表示植物体细胞杂交过程，①表示制备原生质体，去除细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；②表示诱导植物原生质体融合，③表示细胞融合形成杂种细胞，完成的标志：再生出新的细胞壁；④⑤表示杂种细胞通过植物组织培养技术培养成杂种植株的过程，包括脱分化和再分化过程。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此①过程应用纤维素酶和果胶酶处理，且为了维持细胞的正常形态和功能培养基渗透压应等于或略高于细胞液，A错误；
B、原生质体融合一般用PEG，高Ca2+—高pH等方法，杂种植株含有两种植物细胞的所有染色体，具有4个染色体组，有同源染色体，B错误；
C、该育种方法导入了有关基因，利用的原理有基因重组和染色体数目变异，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；
D、②过程一共产生多种类型的细胞，除了两两融合的3种细胞，还有未融合的细胞，杂种细胞具有两种抗生素的抗性，③过程用双抗培养基可以将杂种细胞选择出来，D错误。
故选C。
12. 2023年，日本大阪大学林克彦团队创造出孤雄生殖小鼠，他们将雄性小鼠的体细胞转化为iPS细胞，将一个细胞内的Y染色体剔除，再加入一条X染色体，并把两条X染色体“粘”在一起，进而使iPS细胞转变为卵细胞，经过受精后，放入代孕老鼠体内，最终产下的健康小鼠幼仔，成年后也能继续生育后代，该项技术未来可以用于拯救濒临灭绝的物种。以下说法正确的是（ ）
A. iPS细胞可来源于成纤维细胞、B细胞和T细胞等
B. 体外培养细胞时可加入适量抗生素从而保证无毒的培养环境
C. 早期胚胎培养到囊胚期时，可以取内细胞团细胞用于遗传学检测
D. 代孕老鼠需要服用免疫抑制剂从而避免免疫排斥
【答案】A
【分析】科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
【详解】A、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞，A正确；
B、体外培养细胞时可加入适量抗生素从而保证无菌的培养环境，B错误；
C、早期胚胎培养到囊胚期时，可以取滋养层细胞用于遗传学检测，C错误；
D、受体子宫不会对外来胚胎产生排斥，代孕老鼠不需要服用免疫抑制剂，D错误。
故选A。
13. 我国科学家经过多年的反复试验，在世界上率先成功完成了非人灵长类动物克隆猴。研究人员将对卵母细胞进行去核操作的时间控制在10s之内，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞，并创新思路将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，具体培育流程如下图所示。下列说法正确的是（ ）
注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，可以催化组蛋白脱去甲基化；TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可以干扰组蛋白脱去乙酰化。
A. 克隆小猴的产生使用了动物细胞培养、核移植、胚胎移植等技术，具有两个供体的遗传物质，属于有性生殖
B. 用化学方法降低重构胚中组蛋白甲基化水平、提高乙酰化水平有利于它的激活
C. “对MII期卵母细胞进行去核操作”中的“去核”是指去除DNA一蛋白质复合物
D. 为了提高克隆小猴的成活率，可以把早期胚胎分割成4等份、8等份
【答案】B
【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传，除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。
【详解】A、克隆技术属于无性生殖，A错误；
B、由题中信息可知，Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，能催化组蛋白脱去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂，可干扰组蛋白脱去乙酰化，推测重构胚中组蛋白甲基化水平降低、乙酰化水平提高有利于它的激活，B正确；
C、“对MII期卵母细胞进行去核操作”中的“去核”是指去除染色体—纺锤体复合物，C错误；
D、胚胎分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，现在目前仍以二分割为主，D错误。
故选B。
14. 曲妥珠单抗（T）是抗Her2蛋白（原癌基因Her2的表达产物）的单克隆抗体。大量临床研究表明，曲妥珠单抗（T）与细胞毒素（DM1）偶联形成ADC，可对乳腺癌细胞进行靶向杀伤，且疗效显著。其作用机制如图所示，下列说法错误的是（ ）

A. 可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗治疗癌症
B. 曲妥珠单抗本身具备杀伤乳腺癌细胞的作用，与DM1偶联可以提高其杀伤效果
C. 胞吞复合物的形成需要膜蛋白的参与
D. 利用荧光标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置
【答案】B
【分析】由单克隆抗体研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是利用抗体与抗原特异性结合，使药物能够定向作用于病灶。单克隆抗体特点为特异性强、灵敏度高。
【详解】A、单克隆抗体具有特异性，可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗治疗癌症，A正确；
B、曲妥珠单抗本身不具备杀伤乳腺癌细胞的作用，其作用为特异性识别乳腺癌细胞表面Her2蛋白，将药物靶向运输至癌细胞，B错误；
C、胞吞需要膜蛋白识别被吞的物质，因此有膜蛋白的参与，C正确；
D、曲妥珠单抗能与Her2特异性结合，故利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置，D正确。
故选B。
15. 如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称ACL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述正确的是（ ）
A. 体外培养动物细胞需定期用胰蛋白酶处理分瓶后才能继续增殖
B. 对原肠胚进行胚胎分割得到的不同个体基因型不一定相同
C. 注入荧光蛋白可以追踪4CL干细胞的分化方向，其遗传信息不一定能遗传给后代
D. 嵌合囊胚的滋养层细胞将分化为猴的各部分组织器官
【答案】C
【分析】干细胞是一类能保持分裂和分化能力的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。
【详解】A、体外培养动物细胞只有贴壁生长的细胞在分瓶前才需要用胰蛋白酶处理，A错误；
B、对桑葚胚或者囊胚进行胚胎分割，原肠胚阶段细胞已经分化，所以嵌合原肠胚阶段进行胚胎分割一般不会产生更多的嵌合体猴，嵌合胚胎来自于两个供体，基因型不一定相同，胚胎分割后得到的不同个体基因型不一定相同，B错误；
C、注入荧光蛋白可以追踪4CL干细胞的分化方向，其不一定分化为生殖器官，故其遗传信息不一定能遗传给后代，C正确；
D、嵌合囊胚的滋养层细胞将会发育成胎盘和胎膜，内细胞团细胞将分化为猴的各部分组织器官，D错误。
故选C。
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16. 2022年10月28日，为积极应对微生物耐药带来的挑战，更好地保护人民健康，国家卫生健康委等13部门联合制定了《遏制微生物耐药国家行动计划（2022—2025年）》，为探究阿莫西林（一种抗生素）对连续传代大肠杆菌耐药性产生的影响，某生物兴趣小组采用滤纸片法测定阿莫西林的抑菌效果，图甲、乙、丙分别是大肠杆菌第一、二、三代抑菌圈的实验结果，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 涂布大肠杆菌使用的涂布器必须进行消毒
B. 扩增培养下一代大肠杆菌时应在上一代培养基的中央挑取菌落
C. 培养基1号区域的滤纸片应是用无菌水处理后的滤纸片
D. 由于阿莫西林的持续作用，随着传代次数的增加，阿莫西林诱导大肠杆菌产生耐药性的变异
【答案】ABD
【分析】由图可知，随着代数增加，抑菌圈越来越小，说明阿莫西林将具有抗药性的大肠杆菌选择出来了。
【详解】A、为防止杂菌污染，涂布大肠杆菌使用的涂布器必须进行灭菌，A错误；
B、扩增培养下一代大肠杆菌时应在上一代培养基抑菌圈的边缘菌落中挑取细菌，B错误；
C、培养基1号区域的滤纸片应是用无菌水处理后的滤纸片，作为对照，C正确；
D、阿莫西林对具有耐药性的大肠杆菌进行了选择，而不是诱导大肠杆菌产生耐药性的变异，D错误。
故选ABD。
17. 聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA．PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①～⑤表示过程，Ⅰ～Ⅲ表示菌落。下列叙述错误的是（ ）
A. 甲培养基为添加PVA和碘的鉴别培养基，可筛选出PVA分解菌
B. 过程③应选菌落Ⅱ中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强
C. 过程①和③所用的接种方法均可对菌液中的PVA分解菌的活菌进行计数
D. 利用以PVA为唯一碳源的丙培养基对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养
【答案】CD
【分析】选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物。
【详解】A、根据题意可知，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA，PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈，因此甲培养基为添加PVA和碘的鉴别培养基，可鉴别并筛选出分解PVA能力强的PVA分解菌，A正确；
B、透明圈与菌落直径的比值越大，说明该菌种分解PVA的能力越强，故应选择菌落Ⅱ进行接种培养，B正确；
C、过程①所用方法为稀释涂布平板法，可使培养基上的菌落均匀分布，因此可对活菌进行计数，过程③所用方法为平板划线法，不能对活菌进行计数，C错误；
D、选择培养基一般用于选择作用，而对于已经筛选出的PVA分解菌，可利用液体完全培养基对其进行扩大培养，D错误。
故选CD。
18. 噬菌体能专一性感染细菌，进入宿主细胞的噬菌体不会被杀病毒剂灭活，在裂解宿主细胞后能继续感染并裂解周围细菌。在培养基平板上，一个被感染的细菌最终会形成一个噬菌斑。利用这一原理可以检测受污染水样中目标菌的数量，具体操作步骤如图所示，实验统计的平均噬菌斑数量为56个。下列说法正确的是（ ）
A. 步骤1保温的目的是让噬菌体侵染大肠杆菌
B. 步骤2中不加杀病毒剂对实验结果影响不大
C. 步骤3常使用的接种工具是接种环或涂布器
D. 待检测受污染水样中目标菌的浓度为11200个/mL
【答案】A
【分析】微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法接种可用来微生物计数。
【详解】A、步骤1中，将噬菌体悬液与待测水样混合后保温约5分钟，目的是让噬菌体有足够的时间去侵染大肠杆菌，A正确；
B、步骤2中，加入杀病毒剂是为了杀死游离的噬菌体，若不加杀病毒剂，游离的噬菌体也会在平板上形成噬菌斑，会对实验结果产生较大影响，导致无法准确检测出受污染水样中目标菌的数量，B错误；
C、步骤3是将经过处理的菌液接种到长满目标菌的平板上，常使用的接种工具是涂布器，而接种环一般用于划线分离等操作，不太适用于这种大量接种的情况，C错误；
D、平均噬菌斑数量为56个，所有0.1mL的水样中的大肠杆菌最终都被接种到了平板上，由此可知待测水样中的大肠杆菌浓度为560个/mL，D错误。
故选A。
19. 细胞产物的工业化生产可以使植物细胞内一些具有药用价值的次生代谢产物分泌到细胞膜外，然后从培养基中直接分离纯化得到目标次生代谢产物。例如，Ayagi将长春花体细胞用富含古罗糖醛酸的藻酸盐凝胶固定起来，然后大量生产吲哚类生物碱。以下说法正确的是（ ）
A. 需筛选吲哚类生物碱产量大的细胞进行培养，利用促进细胞生长的培养条件可进一步提高单个细胞的产量
B. 悬浮培养生产代谢物时，若添加抑制细胞壁生长的物质，可能会达到较好的分泌效果
C. 在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物以研究其对植物细胞生长分化的影响
D. 反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件
【答案】BCD
【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
【详解】A、次生代谢产物吲哚类生物碱不是细胞生长所必须，含量少，需要筛选优良的细胞进行培养，通过增加细胞数量来增加细胞产物的量，A错误；
B、悬浮培养有利于细胞与培养液进行物质交换，添加抑制细胞壁生长的物质，细胞产物更容易分泌，B正确；
C、在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物如植物激素诱导细胞分化以研究其对植物细胞生长分化的影响，C正确；
D、反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，不一定能够分泌所需物质，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件，D正确。
故选BCD。
20. 在英国成为首个立法批准线粒体捐赠治疗（MRT）的国家后，据《自然》报道，英国生育监管机构——人类受精和胚胎学管理局（HFEA）证实，截至2023年4月，使用该疗法出生的英国儿童人数尚不到5名，技术过程如下，以下说法错误的是（ ）

A. 只有极可能将严重线粒体疾病遗传给子女的人才有资格接受MRT，但存在伦理争议
B. 可以采取梯度离心、紫外线短时照射等无需穿透卵母细胞透明带的方法去核
C. 刚刚排出的精子可以与使用促性腺激素进行超数排卵得到的卵母细胞直接体外受精
D. 精子入卵后，卵细胞膜外的透明带会迅速发生生理反应，拒绝其他精子入卵
【答案】CD
【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。
【详解】A、MRT主要用于防止严重的线粒体疾病遗传给下一代，只有极可能将严重线粒体疾病遗传给子女的人才有资格接受MRT，但涉及到基因改造和胚胎操作，故存在伦理争议，A正确；
B、MRT过程中需要移除卵母细胞的核，梯度离心、紫外线短时照射等去核的方法不会穿透卵母细胞透明带，B正确；
C、刚刚排出的精子需要获能处理才能与MII期的卵母细胞体外受精，C错误；
D、精子入卵后，卵细胞膜会立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，这种生理反应称为卵细胞膜反应，这是防止多精入卵受精的第二道屏障，D错误。
故选CD。
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21. 银离子因具有抗菌作用及抗菌时效长、安全、稳定性高等优点而备受关注。研究人员探究了银离子对几种常见水产细菌的杀菌活性，以及不同细菌对银离子的耐受情况。本研究采用LB培养基（由酵母粉、蛋白胨、NaCl、蒸馏水制得，NaOH调节pH至7.4，121℃高压灭菌）进行实验，流程如图a所示。回答下列问题。
（1）配制LB培养基时，蛋白胨的作用主要是_______，调pH和灭菌的先后顺序是_______。相较于培养基甲，培养基乙在成分上的区别是_______。
（2）在下列三种菌液中分别加入不同剂量（0、5、10、20、40，单位：mg·）的硝酸银溶液，然后在不同时间点从各管取200μ菌液，用酶标仪测定菌液OD600值（可反映菌液中的细菌数），实验结果如图b所示。三种细菌中对银离子的耐受性最强的是_______。若水产养殖塘因无乳链球菌污染而减产，根据该研究结果，所用硝酸银溶液的浓度中，对该水产养殖塘中无乳链球菌进行消毒杀菌的最佳浓度是_______。
（3）为探究银离子的抗菌特点，研究人员用被银离子处理后的细菌和细菌上清液（由细菌培养液离心后获得）分别处理同种细菌及异种细菌，并计数比较。用被银离子处理后的细菌和细菌上清液处理同种细菌所得结果如图c所示，结果表明：_______；用被银离子处理后的嗜水气单胞菌及该菌上清液处理异种细菌所得结果如图d所示，结果表明：_______。请根据该研究结果分析，银离子在抗菌方面表现出来的特点是_______。
【答案】（1）①. 为微生物生长提供碳源、氮源和维生素等 ②. 先调pH再灭菌 ③. 有琼脂（或凝固剂）
（2）①. 大肠杆菌 ②. 5mg·L-1
（3）①. 经银离子处理后，被银离子杀死的细菌和细菌上清液均能对同种细菌起到抗菌作用 ②. 经银离子处理后，被银离子杀死的细菌和细菌上清液均能对异种细菌起到抗菌作用 ③. 抗菌时效长/稳定
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素等。若先灭菌再调pH会导致培养基被污染，因此应该先调pH再灭菌。培养基甲为液体培养基，培养基乙为固体培养基，因此培养基乙添加有琼脂（或凝固剂）。
【小问2详解】嗜水气单胞菌和无乳链球菌在硝酸银浓度为5mg· L-1时OD600值基本不变甚至下降，说明两者对硝酸银的耐受浓度范围均为0～5mg·L-1。大肠杆菌在硝酸银浓度为20mg· L-1时OD600值基本不变，说明其对硝酸银的耐受浓度范围为0～20mg·L-1，因此三种细菌中对银离子的耐受性最强的是大肠杆菌。分别使用5、10、20、40mg·L-1硝酸银处理无乳链球菌时，其OD600值均基本一致，说明其抗菌效果相当。因此使用硝酸银溶液对该水产养殖塘中的无乳链球菌进行消毒杀菌的最佳浓度是5mg·L-1，低于该浓度抗菌效果不好，高于该浓度则会造成不必要的浪费。
【小问3详解】由图c可知，经银离子处理后的大肠杆菌、嗜水气单胞菌和无乳链球菌的菌体和细菌上清液均对同种细菌具有明显抑制作用。由图d可知，经银离子处理后的嗜水气单胞菌的菌体和细菌上清液对异种细菌具有明显的抑制作用。说明经银离子处理后，被银离子杀死的细菌和细菌上清液均能对同种细菌及异种细菌起到持续的抗菌作用。银离子能在较长时间内起到抗菌作用，具有抗菌时效长的优点。
22. 四川蒲江是全国闻名的耙耙柑产区，所产耙耙柑热销全国，也深受全国人民喜爱。但是在贮运过程中白地霉侵染引起的酸腐病会导致耙耙柑腐烂，带来巨大经济损失。为了解决这一问题，科研人员研究了桔梅奇酵母对白地霉的抑菌效果，并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题：
（1）白地霉从耙耙柑中获得其生长繁殖所需的________等基本营养物质。
（2）将桔梅奇酵母与白地霉菌种用________法分别接种到不同的平板上进行培养，得到纯培养物后，再挑取菌落用无菌水分别制备菌种悬液，利用________计数板在显微镜下计数，并稀释至实验所需浓度。
（3）为探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用，研究人员在耙耙柑果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种0.1ml桔梅奇酵母菌悬液和0.1ml白地霉悬液。一段时间后统计果实发病率并测量白地霉菌丝生长情况，结果如下图：

另一个孔作为对照组的处理是接种________。综合图1、图2结果，表明桔梅奇酵母对白地霉最可能的抑制机制为________。
（4）铁是真菌生长的必需元素，是细胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的结合形成稳定的红色复合物。研究者配制含有不同浓度（单位：mg/L）的培养基，实验处理及结果如下图3所示。

桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是________；随培养基中浓度的增加，红色抑菌圈颜色加深但变窄，对白地霉的抑制效果________。（填“增强”或“减弱”）
【答案】（1）水、无机盐、碳源和氮源
（2）①. 平板划线法（或稀释涂布平板法） ②. 血细胞
（3）①. 等量无菌水和白地霉悬液（或0.1ml无菌水和0.1ml白地霉悬液） ②. 桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来降低酸腐病害
（4）①. 桔梅奇酵母产生的普切明酸与培养基中的Fe3+结合生成红色复合物，白地霉不能利用这种形式的Fe3+，从而生长受到抑制 ②. 减弱
【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
小问1详解】白地霉引起的酸腐病会导致柑橘腐烂分解，因此耙耙柑可为白地霉生长繁殖提供所需的碳源、氮源、水以及无机盐等营养物质。
【小问2详解】可将桔梅奇酵母与白地霉菌种用平板划线法（或稀释涂布平板法）分别接种到不同的平板上进行培养，再用无菌水分别制备菌种悬液，利用血细胞计数板在显微镜下计数，并稀释至实验所需浓度。
【小问3详解】本实验目的是探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用，则实验的自变量是梅奇酵母的有无，因变量是酸腐病的发病情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故在柑橘果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种白地霉和桔梅奇酵母菌悬液，另一孔应接种接种等量白地霉悬液。综合图1、图2结果可知，与对照组相比，接种桔梅奇酵母后果实的发病率均有所降低，且菌丝长度保持在较低水平不再生长，表明桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来显著降低酸腐病害。
【小问4详解】桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是桔梅奇酵母产生的普切明酸与培养基中的Fe3+生成红色复合物，白地霉不能利用这种形式的Fe3+，从而生长受抑制。普切明酸与高浓度的Fe3+结合形成复合物增加（颜色加深），且由于供白地霉生长利用的Fe3+增加，导致对白地霉的抑制效果逐渐变弱（抑菌圈变窄）。
23. 兰花象征高贵、优雅、纯洁。野生兰花多生于幽谷，品类繁多，具有极高的观赏价值，但数量稀少。兰花种子小如粉末，无胚乳，成熟需半年。成熟后随风飘散，遇到合适的土壤与兰菌结合形成“龙蛋”，“龙蛋”从萌发到出苗还需要一年，自然繁殖困难。在云南兰花种植基地主要通过植物组织培养快速繁殖再放归野外。培养过程及MS培养基部分成分如图1和图2所示：
图2
（1）①过程表示________，生长素和细胞分裂素的比值________（填“”或“=”）1，②过程表示________。②过程一般需要光，作用是________。
（2）筛选遗传性状优良的外植体作为实验材料，外植体是________，接种时防止倒插与________有关。
（3）为了减小误差，需要单独配制各种母液并分别灭菌，涉及灭菌的方式包括________。
（4）培养基中蔗糖作用________。（答出1点即可）
（5）为了方便运输将培养得到的胚状体包裹上人工种皮制备人工种子，结合题中信息和植物组织培养的条件推测人工种子中还应该包含什么成分________。（答出1点即可）
【答案】（1）①. 脱分化 ②. = ③. 再分化 ④. 有利于叶绿素的合成和组培苗的光合作用
（2）①. 离体的植物器官、组织或细胞 ②. 生长素的极性运输
（3）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）和过滤除菌
（4）提供碳源、调节渗透压、抑制杂菌污染等
（5）营养物质、植物激素、抗生素、兰菌等
【分析】在植物组织培养过程中涉及有丝分裂，没有减数分裂；植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个阶段，在植物组织培养过程中，培养基中需要添加生长素和细胞分裂素。
【小问1详解】过程①是脱分化形成愈伤组织，培养基中的生长素和细胞分裂素的比值为1时有利于愈伤组织的形成，②过程是再分化形成胚芽和胚根等结构，由于叶绿素的合成需要光，且形成的幼苗光合作用需要光，因此②过程一般需要光。
【小问2详解】外植体是指组织培养过程中所用的离体的植物器官、组织或细胞。由于生长素可促进生根，且生长素的运输是从产生生长素的形态学上端运到下端，因此接种时需要将形态学下端插入培养基，不能倒插。
【小问3详解】过滤除菌法为用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，以达到无菌目的。生长素、细胞分裂素等植物激素不耐热，因此需要采用过滤除菌，而其它母液则可采用湿热灭菌。
【小问4详解】培养基中蔗糖可为组织细胞提供碳源、并为植物生长提供营养和维持一定的渗透压的功能，由于蔗糖能增加培养基的渗透压，因此也具有一定的抑制细菌生长的作用。
【小问5详解】人工种子加兰菌的应用在兰花栽培中具有多重作用，不仅提高了种子的萌发率，还增强了根系的吸收能力，改善了土壤环境，促进了兰花的生长，并在一定程度上增强了兰花的抗逆性。因此人工种子中除了充入各种营养物质外，还应该充入生长素和细胞分裂素等植物激素以及抗生素、兰菌等。
24. PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28．图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。
（1）①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白的目的是________。
（2）③过程常用的方法有________（答出2点即可）。④过程的培养基从用途上看属于________培养基。
（3）图1至少进行________次抗体检测进行筛选才能得到双杂交瘤细胞XY，筛选时需在96孔板的孔洞中加入________。
（4）获得的杂交瘤细胞XY要置于含有________混合气体的培养箱中进行培养。对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用________收集。
（5）该双特异性抗体不同于普通单抗的优点是________。
（6）关于该双特异性抗体产生过程的说法正确的是_______。
A. 人对鼠源抗体可能会产生免疫排斥，通常需要人源化改造
B. 克隆化培养杂交瘤细胞XY分泌的抗体就是图2所示的抗体
C. 所需抗体可以从细胞培养液中和小鼠腹水中获得
D. 单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可大量制备
E. 结合抗原分子的特点，制备单克隆抗体时，小鼠注射的抗原和抗体检测时所用物质可以不完全相同
【答案】（1）获得能分别分泌PSMA抗体、CD28抗体的B淋巴细胞
（2）①. 灭活的病毒诱导法、PEG融合法、电融合法等 ②. 选择
（3）①. 2 ②. PSMA和CD28蛋白
（4）①. 95%空气和5%CO2 ②. 离心法
（5）PSMA×CD28既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞
（6）ACDE
【分析】单克隆抗体的制备过程：①用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。 ②用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。③对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。④将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。⑤从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。
【小问1详解】PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白，目的是使小鼠产生特异性免疫，以获得能特异性分泌PSMA抗体的B淋巴细胞和特异性分泌CD28抗体的B淋巴细胞。
【小问2详解】③过程是诱导动物细胞融合，常用的手段有灭活的病毒诱导法、PEG融合法、电融合法等。④过程是筛选融合的杂交瘤细胞，不能融合的细胞和同种核融合的细胞不能生存，因此④过程的培养基从用途上看属于选择培养基。
【小问3详解】筛选双特异性抗体时需要使用制备单克隆抗体时所使用的图中抗原物质，该过程需要先用一种抗原（如PSMA）筛选出能够分泌抗PSMA抗体的杂交瘤细胞，再用另一种抗原（如CD28）从已筛选出的杂交瘤细胞中筛选出能分泌抗CD28抗体的杂交瘤细胞，所以筛选获得双特异性抗体时至少需要进行过2次抗原检测，根据抗体和抗原能发生特异性结合，故筛选时需在96孔板的孔洞中加入PSMA和CD28蛋白。
【小问4详解】获得的杂交瘤细胞XY要置于含有95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养。杂交瘤细胞增殖时不会贴壁生长，故获得的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用离心法收集。
【小问5详解】该双特异性抗体既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞，而普通单抗只能与一种抗原发生特异性结合。
【小问6详解】A、不同生物体细胞膜上的组织相容性抗原不同，人对鼠源抗体可能会产生免疫排斥，通常需要人源化改造，以降低人对鼠源性单克隆抗体的免疫排斥反应，A正确；
B、克隆化培养杂交瘤细胞XY分泌的抗体有多种，需要筛选才能获得图2中的抗体，B错误；
C、获得的能产生所需抗体的杂交瘤细胞的大量制备可在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的所需抗体，C正确；
D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可大量制备，D正确；
E、一个抗原分子具有多种抗原决定簇，制备单克隆抗体时，小鼠注射的可以是抗原分子，抗体检测时使用的物质可以是其中一种抗原决定簇，E正确。
故选ACDE。
25. 我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：

（1）2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_______，恢复其全能性较难。
（2）动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是_______。
（3）图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在_______条件下空间位置的转移。
（4）研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_______。
（5）科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。

①据图分析，_______组蛋白乙酰化水平和_______组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。（提示：横线填入“提高”、“降低”、“既不提高也不降低”）
②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、_______、_______、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。
【答案】（1）与胚胎细胞相比，动物体细胞分化程度更高
（2）显微操作法
（3）相同生理
（4）提高融合细胞发育成囊胚的成功率和囊胚中内细胞团的形成率
（5）①. 提高 ②. 提高 ③. 等量组蛋白去甲基化酶的mRNA ④. 等量组蛋白去乙酰化酶抑制剂和组蛋白去甲基化酶的mRNA
【分析】动物细胞核移植是用体细胞作为供体细胞进行的细胞核移植，将供核细胞注射到培养到减数第二次分裂中期的卵母细胞中，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体。
【小问1详解】与胚胎细胞相比，动物体细胞分化程度更高，不容易恢复其全能性，故获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植。
【小问2详解】动物细胞核移植技术中普遍利用显微操作法去核，将染色体-纺锤体的复合物去掉。
【小问3详解】胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理条件下空间位置的转移，该技术的实施提高了优良雌性动物的繁殖潜力。
【小问4详解】分析图中数据，将正常培养的A组与向融合细胞中注入去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的融合细胞B组数据进行对照分析，后者的融合细胞发育成囊胚的成功率、囊胚中内细胞团的形成率都高于前者，说明Kd4d的mRNA既能提高融合细胞发育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中内细胞团的形成率。
【小问5详解】①由图可知，组蛋白乙酰化可激活转录，有利于基因表达，甲基化会抑制转录，因此提高组蛋白乙酰化水平，提高组蛋白去甲基化水平都有利于相关基因恢复表达。
②根据各组结果，胚胎发育率为：丙组>甲组=乙组>丁组，因此乙组应该加的是等量组蛋白去甲基化酶的mRNA，与甲组相同；而丙组胚胎发育最好，应该是加的是等量组蛋白去乙酰化酶抑制剂和组蛋白去甲基化酶的mRNA，最有利于基因表达。
甘露醇（Mannitl）
20g
0.2g
7
0.2g
NaCl
0.2g
2
0.18
5g
H2O
1000ml
MS培养基的主要成分
大量元素
如硝酸铵、硝酸钾、磷酸盐、钙盐、镁盐等
微量元素
铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、硼酸等
有机物
包括维生素（如维生素B1、维生素B6、生物素等）和糖类（主要是蔗糖）
植物激素
生长素、细胞分裂素等