江苏省盐城市七校联盟2024-2025学年高二下学期3月第一次联考生物试卷（解析版）

这是一份江苏省盐城市七校联盟2024-2025学年高二下学期3月第一次联考生物试卷（解析版），共27页。试卷主要包含了单项选择题，统计菌落数目的方法等内容，欢迎下载使用。
试卷分值：100分 考试时间：75分钟。
一、单项选择题：本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个最佳选项。
1.制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（ ）
A.食用醋的酸味主要来源于乙酸
B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶
D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
【答案】D
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、食用醋的酸味主要来自醋酸，醋酸学名乙酸，A正确；
B、醋酸菌是好氧型细菌，不适宜在无氧的条件下生存，B正确；
C、在制醋时，缺失原料情况下，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶，C正确；
D、醋酸菌属于细菌，没有核膜包被的细胞核和众多细胞器，因此没有线粒体，D错误。
故选D。
2.“扬美豆豉”制作技艺属于广西非物质文化遗产，该技艺包括选豆、洗豆、煮豆、制曲、洗曲、调味和发酵等。下列说法错误的是（ ）
A.煮豆可使蛋白质适度变性，易于被微生物利用
B.制曲目的是促使有益微生物生长繁殖，并分泌多种酶
C.调味时加入食盐，主要目的是促进微生物的生长繁殖
D.发酵过程中，微生物将原料转化为特定代谢产物，使豆豉风味独特
【答案】C
【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。
【详解】A、煮豆可使蛋白质适度变性，蛋白质中的肽键暴露，易于被微生物利用，A正确；
B、培养有益微生物来进行食品发酵的过程被称之为制曲，制曲是使有益微生物在基质上生长、繁殖和分泌各种酶，B正确；
C、调味时加入食盐，主要目的是抑制微生物的生长繁殖，C错误；
D、发酵过程中，微生物将原料转化为特定代谢产物，比如将蛋白质分解为氨基酸和小分子肽，将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使豆豉风味独特，D正确。
故选C。
3.以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
【答案】C
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。
（4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
（5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的乳酸菌被杀死，A错误；
B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误；
C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生的气体，C正确；
D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。
故选C。
4.为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（ ）
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
【答案】C
【分析】一、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、统计菌落数目的方法：（1）稀释涂布平板法（间接）：①当样品的稀释庋足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。（2）利用显微镜直接计数。
【详解】A、采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培养，B正确；
C、土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的细菌分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C错误；
D、不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D正确。
故选C。
5.某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（ ）
A.组别①是②③④⑤的对照组
B.培养温度和时间属于无关变量
C.①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸
D.①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型
【答案】D
【分析】实验的自变量为培养条件（基础培养基中是否添加氨基酸及添加氨基酸的种类），因变量为粗糙脉孢霉突变株的生长状况，其他的培养条件为无关变量，应该保持相同且适宜。
【详解】A、由表可知：除了组别①之外，其他组别的基础培养基中都添加了氨基酸，因此组别①是②③④⑤的对照组，A正确；
B、由题意表中信息可知：实验的自变量为培养条件，各组别的培养温度和时间均相同，说明培养温度和时间均属于无关变量，B正确；
C、由①②结果可知：粗糙脉孢霉突变株在基础培养基中无法生长，但在添加了甲、乙、丙3种氨基酸的基础培养基中能正常生长，这表明甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸，C正确；
D、与组别①相比，在基础培养基中，若添加的氨基酸中含有丙种氨基酸，则粗糙脉孢霉突变株都能正常生长，但在只添加甲、乙2种氨基酸的基础培养基中无法生长，说明该突变株为氨基酸丙缺陷型，D错误。
故选D。
6.安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）

注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。
A.经过A处理，试管中大多数放线菌都可产生安莎霉素
B.在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理
C.②和④是完全培养基，③是缺赖氨酸的不完全培养基
D.D菌落不能产生安莎霉素，而E菌落能产生安莎霉素
【答案】C
【分析】影印培养法是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是：用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小（或略小）的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。
【详解】A、基因突变是不定向的，且突变频率很低，紫外线处理后只有极少数放线菌可能成为赖氨酸缺陷型放线菌，能产生安莎霉素，A错误；
B、在①中进行菌种的扩大培养时，接种前需对培养基进行灭菌处理，接种后不能灭菌，否则会杀死目标微生物，B错误；
C、②和④中所有微生物都能长出菌落，所以②④是完全培养基，③中没有D菌落，说明③具有选择作用，赖氨酸缺陷型放线菌不能在其中生长，所以③是缺少赖氨酸的不完全培养基，C正确；
D、D菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明D菌落只能生活在完全培养基中，不能生活在缺赖氨酸的完全培养基中，即D菌落是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，可以产生安莎霉素，而E菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无赖氨酸均可生存，所以E菌落不是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，不能产生安莎霉素，D错误。
故选C。
7.下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ）

A.④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂
B.⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多
C.④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求
D.可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌
【答案】B
【分析】一、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长；
二、鉴别培养基：在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物。
【详解】A、④和⑤所用培养基从物理性质分析，④是液体培养基，⑤是固体培养基，加有琼脂，A正确；
B、⑨计数方法为稀释涂布平板法，只能统计活菌数，而细菌计数板计数法无论活菌还是死菌都统计在内，因此稀释涂布平板法统计得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较少，B错误；
C、该实验是为了分享得到纤维素分解菌，培养液中以纤维素作为唯一碳源时，只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖，从而筛选出纤维素分解菌，此外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求，C正确；
D、当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D正确。
故选B。
8.啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。下列有关叙述错误的是（ ）
A.焙烤过程通过加热杀死种子的胚细胞，从而使淀粉酶失活
B.酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成
C.发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异
D.蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
【答案】A
【分析】现代工业酿酒分为主发酵和后发酵，主发酵是主要的生产过程，主发酵后还要通过后发酵来促酒成熟、澄清。
【详解】A、焙烤是加热杀死种子的胚，但不使淀粉酶失活，A错误；
B、主发酵是主要的生产过程，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，B正确；
C、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，C正确；
D、蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，终止淀粉酶的分解作用，并对糖浆灭菌，D正确。
故选A。
9.下列有关植物组织培养技术的叙述，错误的是（ ）
A.利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体
B.经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞丧失分裂分化能力
C.利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株
D.培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向
【答案】B
【分析】植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育成植株。植物组织培养技术有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，A正确；
B、经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞具有细胞全能性，在一定条件下可培育成植株个体，B错误；
C、茎尖部位的病毒较少，花粉是植物的雄配子，染色体数目减半，故利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株，C正确；
D、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，如培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，D正确。
故选B。
10.图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列叙述错误的是（ ）
A.步骤①可添加相关酶以去除细胞壁
B.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间
C.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗
D.台盼蓝检测后应选择未被染成蓝色的原生质体继续培养
【答案】C
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在制备原生质体时，步骤①可添加纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确；
B、结合图示可知原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液之间，因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间，B正确；
C、步骤②吸取原生质体放入含有相同渗透压的溶液中清洗，若放入无菌水中，由于原生质体没有细胞壁的保护，且细胞内溶液浓度高于无菌水，根据渗透作用原理，水会进入原生质体，导致原生质体因吸水过多而涨破，所以不能将原生质体放入无菌水中清洗，C错误；
D、台盼蓝检测后应选择未被染成蓝色的原生质体继续培养，染成蓝色的原生质体活性差或死亡，D正确。
故选C。
11.植物组织培养技术常用于商业化生产：其过程一般为：无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（ ）
A.为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养
B.组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构
C.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根
D.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
【答案】D
【分析】一、离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。
二、植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培养，所用的培养基必须彻底灭菌，A正确；
B、组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包裹上人工种皮，可制作成人工种子，B正确；
C、生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确；
D、用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D错误。
故选D。
12.下图为利用玉米秸秆制备绿色能源——乙醇的工艺流程图，相关叙述错误的是（ ）

A.对玉米秸秆进行预处理的酶也可从腐木上的霉菌中提取
B.图中培养产酶微生物的培养基中的碳源一般为葡萄糖
C.在糖液发酵过程中，发酵装置一般应严格密封处理
D.发酵产生的酒精可与重铬酸钾溶液反应发生颜色变化
【答案】B
【分析】纤维素分解菌体内含有纤维素分解酶，能够将纤维素分解成葡萄糖，再用酵母菌进行无氧发酵葡萄糖即可制成燃料乙醇。
【详解】A、生长在腐木上的霉菌能够分解利用腐木中的纤维素，可以产生纤维素酶，玉米秸秆中富含纤维素，因此对玉米秸秆进行预处理的酶也可从腐木上的霉菌中提取，A正确；
B、图中培养产酶微生物主要作用是处理玉米秸秆，因此应以纤维素为碳源，B错误；
C、酒精发酵属于无氧呼吸，因此需要在无氧环境（密封）的条件下进行，C正确；
D、酒精可以与酸性的重铬酸钾溶液发生反应，由橙色变为灰绿色，D正确。
故选B。
13.迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。相关叙述正确的是（ ）
A.茉莉酸甲酯改变了迷迭香酸等次生代谢产物的合成效率
B.选取幼嫩的茎段作外植体，经灭菌处理后才能用于愈伤组织的培育
C.外植体脱分化形成的愈伤组织是一团呈正方形的薄壁细胞
D.悬浮培养时需将愈伤组织分散成单个细胞，保证充足的氧气供应和适宜的光照
【答案】A
【分析】一、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
二、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A、加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高迷迭香酸产量，说明茉莉酸甲酯改变了迷迭香酸等次生代谢产物的合成效率，A正确；
B、对外植体进行灭菌处理会使外植体细胞失去活性，无法进行植物组织培养，B错误；
C、愈伤组织是一团排列疏松而无规则的薄壁细胞，不是呈正方形，C错误；
D、悬浮培养时需将愈伤组织分散成单个细胞，此时不需要适宜的光照，D错误。
故选A。
14.动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。相关叙述错误的是（ ）
A.配制细胞培养基时，血清和氯霉素需用过滤除菌法除菌
B.采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染
C.在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素
D.检测“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释涂布在平板上培养后计数
【答案】B
【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法。微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素，A正确；
B、采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，B错误；
C、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，C正确；
D、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养，待菌落数目稳定后计数，D正确。
故选B。
15.下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（ ）
A.动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性
B.动物细胞培养时，定期更换培养液的目的是防止杂菌污染
C.在将组织分散成单个细胞时，可采用机械法，或利用胃蛋白酶进行的酶解法
D.在进行传代培养时，悬浮培养的细胞一般采用离心法收集
【答案】D
【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
【详解】A、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞的增殖，A错误；
B、‌动物细胞培养时定期更换培养液的主要目的是清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，而不是防止杂菌污染‌‌，B错误；
C、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞，也可采用机械方法获得单个细胞，胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，因此胃蛋白酶并不适用于此过程，C错误；
D、进行传代培养时，悬浮培养的细胞处于游离状态，因而可直接用离心法收集，D正确。
故选D。
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
16.中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟”“以窖养糟，以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列叙述正确的是（ ）
A.传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的
B.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易污染杂菌
C.从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在CO2或N2环境中进行
D.从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物
【答案】ABD
【分析】一、在发酵过程中分泌酶不同，它们所发挥的作用就不同，因此传统酿造不仅仅需要酵母菌，还要有其他菌种。
二、酒曲中微生物（如曲霉）分泌的淀粉酶可将谷物中的淀粉转变成单糖等，会使米酒具有甜味，进一步在酵母菌的作用下产生酒精。
三、酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
【详解】A、白酒的酿造主要依靠酿酒酵母，由于窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物，故传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的，A正确；
B、窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，且酿造过程产生的酒精也会抑制杂菌的生长与繁殖，使酿造过程不易污染杂菌，B正确；
C、酵母菌是是兼性厌氧菌，与无氧呼吸相比，细胞有氧呼吸产生的能量更多，更能满足酵母菌大量繁殖时的需求，因此，对分离的酿酒酵母扩大培养时需要在有氧的条件下进行，C错误；
D、谷物原料如高粱、玉米、大米等富含淀粉，因此从谷物原料发酵形成的酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物，D正确。
故选ABD。
17.某实验室期望用夹层培养法筛选到符合预期的酵母菌，具体操作如下：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含酵母菌液（经诱变剂处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层已灭菌的基本培养基。培养一段时间后，对出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，培养一段时间后会长出形态不一的菌落。已知微生物可透过薄层培养基形成菌落，且所有培养基均含有抗生素。下列说法正确的是（ ）
A.该实验室预期想要得到是具有营养缺陷的酵母菌
B.培养基中添加抗生素主要是为了抑制细菌的生长，对酵母菌影响较小
C.最终应选取培养基上较大的菌落作为目标菌种进行后续实验
D.在用诱变剂处理从外界富集而来的酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养
【答案】ABD
【分析】一、选择培养是利用培养基或培养条件针对性地促进或抑制某类微生物的生长，从而使目标微生物数目增加的一种培养方法；
二、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、在夹层培养法中，中间层含诱变处理后的酵母菌液，基本培养基不含特定营养成分，若有菌落能在基本培养基上生长，后在完全培养基上长出形态不同的菌落，说明这些菌落可能是具有营养缺陷的酵母菌，A正确；
B、酵母菌是真菌，细菌是原核生物，抗生素对细菌抑制作用强，对酵母菌影响较小，在培养基中添加抗生素可抑制细菌生长，B正确；
C、营养缺陷型酵母菌在基本培养基上难以生长，在完全培养基上才可以繁殖形成菌落，最终应选取培养基上较小的菌落作为目标菌种进行后续实验，C错误；
D、在用诱变剂处理酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养，这样才能保证处理后的结果是针对单一酵母菌种群的，D正确。
故选ABD。
18.儿茶素（C）具弱抗菌性，研究人员用稀土离子Yb3+形成配合物Yb3+-C，以增强其抗菌效果。为确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片，置于布满菌落的培养基中，结果如图。下列说法错误的是（ ）

A.培养基的成分应包括碳源、氮源、水、无机盐等
B.应利用平板划线法将菌种接种到培养基上
C.实验的自变量是Yb3+：C的摩尔比，因变量为是否出现抑菌圈
D.实验结果表明配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比为1：2
【答案】BCD
【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A、虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐，A正确；
B、据图可知，培养基的菌落分布特点较均匀，是稀释涂布平板法的结果，B错误；
C、分析题意，本实验目的是确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，则实验的自变量是Yb3+：C的摩尔比，因变量为抑菌圈的大小，C错误；
D、据图可知，4和5的抑菌圈最大，说明配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比在1：4-1：5之间，D错误。
故选BCD。
19.藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述错误的是（ ）
A.组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变
B.过程①中外植体依次使用次氯酸钠和70%酒精溶液进行消毒
C.过程③④所用的培养基中添加的植物激素的种类和比例不同
D.筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分
【答案】BCD
【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。
【详解】A、植物组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生突变，突变是不定向的，A正确；
B、过程①为外植体消毒，外植体依次使用70%酒精溶液和次氯酸钠进行消毒，B错误；
C、③④过程添加的植物激素种类相同，但浓度和比例不同，C错误；
D、筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产，培养生产药用成分，D错误。
故选BCD。
三、非选择题：本部分包括5题，共计58分。
20.如图为某工厂生产葡萄酒和葡萄醋的基本工艺流程，请回答：
（1）果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌从异化作用看是一类______型微生物。在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，其反应式为______，该过程在酵母菌细胞的______（场所）中进行。发酵一段时间后，观察甲罐中液体______，说明发酵完毕。
（2）在图示“葡萄→葡萄汁”的过程中辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高出汁率，原因是______。图示甲罐的液面位置表示加入葡萄汁的量，这种做法的目的是既______，又可以防止______。
（3）待甲罐发酵结束后，可转为果醋发酵，这利用了醋酸菌可以将酒精转化为______，再进而产生醋酸。转为果醋发酵除接种醋酸菌外，还要改变的发酵条件为______。
（4）甲罐连接的双U型管中一侧注满水的作用是______。
（5）为验证葡萄酒制作是否成功，可将发酵液在______条件下用______溶液来鉴定，若出现____________色，则说明有果酒产生。
【答案】（1）①.兼性厌氧 ②.C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量 ③.细胞质基质 ④.不再有气泡冒出
（2）①.纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁，使细胞更容易破碎，从而提高出汁率 ②.为酵母菌提供一定量的氧气，使其进行有氧呼吸大量繁殖 ③.发酵旺盛时发酵液溢出
（3）①.乙醛 ②.通入无菌空气、适当升高温度
（4）防止空气中的杂菌进入甲罐，同时排出甲罐内的气体
（5）①.酸性调节条件 ②.重铬酸钾 ③.灰绿
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
【小问1详解】酵母菌既可以进行有氧呼吸，又可以进行无氧呼吸，从异化作用看是一类兼性厌氧型微生物；在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精好和二氧化碳，其反应式为C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量，无氧呼吸的场所是细胞质基质；发酵过程中，酵母菌进行无氧呼吸，其产物有CO2，故发酵一段时间后，观察甲发酵罐中液体不再有气泡冒出，说明发酵完毕。
【小问2详解】因为纤维素酶、果胶酶分解细胞壁，使细胞更容易破碎，有利于榨汁处理过程中细胞内物质的释放，故“葡萄→葡萄汁”的过程中加以纤维素酶、果胶酶处理可提高出汁率；图示甲罐的液面位置表示加入葡萄汁的量，为酵母菌提供一定量的氧气，使其进行有氧呼吸大量繁殖，，又可以防止发酵旺盛时发酵液溢出
【小问3详解】在氧气充足、糖源不足的条件下，醋酸菌可以将酒精转化为乙醛，进而转化为乙酸（醋酸）；与果酒发酵相比，果醋发酵所需温度较高，故果酒发酵转为果醋发酵时，除了要接种醋酸菌外，还要通入无菌空气、适当升高温度。
【小问4详解】甲罐连接的双U型管中一侧注满水可以防止空气中的杂菌进入甲罐，同时排出甲罐内的气体。
【小问5详解】精和酸性的重铬酸钾反应溶液由橙色变成灰绿色，因此葡萄酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用重铬酸钾溶液来鉴定。
21.下图所示为从土壤中筛选、鉴定尿素分解菌的部分过程。请分析回答：
（1）在下表空白处填写相应内容，完成实验操作与分析。
（注：尿素分解产生的NH3能使酚红指示剂由原本的无色变为红色）
（2）加热溶化时，边加热边搅拌的目的是防止______溶化后的培养基通常用______（填试剂）调节pH。
（3）通常也可采用______（填接种方法）来代替表中方法分离尿素分解菌，该方法______（填“能”、“不能”）进行土样中尿素分解菌的数量测定。
（4）若B组三个平板菌落个数分别为38、36、46，则每克该批次土样中活的尿素分解菌数为______个。
【答案】（1）①.灭菌或高压蒸汽灭菌 ②.涂布器 ③.皿底 ④.24h ⑤.红色环带 ⑥.选择 ⑦.培养基平板灭菌合格，培养过程中无污染
（2）①.培养基焦糊 ②.NaOH或盐酸
（3）①.平板划线法 ②.不能
（4）4×106
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】平板A制作、接种、培养过程，在调pH，转移至锥形瓶后需要灭菌，冷却后倒平板；分析题意可知，接种后还需要进行计数，故所用方法是稀释涂布平板法，则需要用涂布器对B、C组平板分别进行接种；由于培养基需要倒置，则需要在皿底作标记，适宜环境中培养；统计菌落时以每隔24h统计一次；用含有酚红指示剂培养基筛选能分泌脲酶的细菌，若培养基中存在有脲酶的细菌，一般可观察到B组平板菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的氨，遇酚红指示剂产生颜色变化；平板A中的培养基是完全培养基，A组菌落比B组多，说明B组培养基起到了选择作用；由于平板C接种的是无菌水，所以平板C是用来检查培养基平板灭菌是否合格和培养过程中是否受到污染，C组平板中没有出现菌落表明分离纯化过程中培养基平板灭菌合格，培养过程中无污染。
【小问2详解】固体培养基一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐，还需要添加琼脂，将各种成份逐一添加后加热、融化，需要边加热边搅拌，防止培养基焦糊；溶化后的培养基通常用盐酸或NaOH调节pH，满足微生物正常生长所需的pH。
【小问3详解】微生物的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，通常也可采用平板划线法来代替表中方法分离尿素分解菌，平板划线法菌落是由两个或多个菌体连在一起形成的，只能在划线的末端分离到少量单菌落，所以不能对土样中尿素分解菌的数量进行测定。
【小问4详解】进行菌落计数时需要选择每个平板菌落数在30~300之间的平板进行统计计数，为避免误差，应当选择3个或3个以上的平板进行计数并去平均值，故每克土样中的活菌数为（38+36+46）÷3÷0.1×104=4×106个。
22.中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。
（1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。
（2）过程①通过酶解法去除_______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_______的杂种原生质体。
（3）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。
注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞
由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在_______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为_______。
（4）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。
①将表格中C组的实验处理补充完整_____。
②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
【答案】（1）①.消毒 ②.无菌水
（2）①.细胞壁 ②.PEG ③.红、绿荧光色素
（3）①.2 ②.1×106个·mL-1
（4）①.等量的蒸馏水 ②.A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组
【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL-1时，比例最高。
【小问1详解】为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂。
【小问2详解】据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。
【小问3详解】双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在2种类型的双核融合体（即三白草-三白草、鱼腥草-鱼腥草）；由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时，双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL。
【小问4详解】①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。
②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
23.糖尿病是危害全球人类健康的常见疾病，长期以来主要靠注射外源胰岛素进行治疗，严重影响患者的生活质量。我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名1型糖尿病（T1DM）患者体内，具体流程如图1所示。在一年跟踪随访中，该病例成功摆脱胰岛素依赖，各项诊断指标恢复至正常水平，回答下列问题：

（1）正常人空腹时血糖浓度范围______mml/L，人体内可以升血糖的激素有哪些______（至少写2个）。
（2）T1DM主要是由于免疫系统攻击并破坏胰岛B细胞导致胰岛素分泌不足，引发高血糖症，因此属于______，CiPSCs能够被诱导形成胰岛细胞依据的原理是______。
（3）研究人员从患者体内抽取脂肪组织，经______分散成单个细胞制备成细胞悬液，然后进行细胞培养分离出脂肪干细胞。在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的各种成分，与普通动物细胞培养基相比，不能添加______等天然成分，以免影响细胞分化进程。
（4）利用CiPSCs制备胰岛细胞后，研究人员将糖尿病模型小鼠分为A、B组，A组进行手术但不移植胰岛细胞，B组体内移植胰岛细胞，然后两组均进行腹腔注射葡萄糖实验，结果如图2所示，该实验的目的是______。经过长时间科学论证后，研究人员将胰岛细胞移植回患者体内，一年内定期进行口服耐糖检测（见图3），结果表明患者能摆脱胰岛素依赖，依据是______。（糖尿病的诊断阈值为血糖水平≥200mg/dL）。
（5）传统诱导多能干细胞（iPSCs）常利用病毒等载体将4种转录因子的基因导入体细胞，其中的C-myc和Klf4是原癌基因。据此分析，化学分子诱导CiPSCs的优势是______。
【答案】（1）① ②.胰岛血糖素、肾上腺素、甲状腺激素
（2）①.自身免疫病 ②.基因的选择性表达
（3）①.胰蛋白酶或胶原蛋白酶 ②.血清
（4）①.探究移植胰岛细胞能否降低糖尿病小鼠的血糖水平 ②.移植75天后患者血糖调节恢复正常水平
（5）不会导致细胞异常分裂（避免致癌风险）
【分析】胰岛A细胞分泌胰高血糖素，能升高血糖，只有促进效果没有抑制作用，即促进肝糖原的分解和非糖类物质转化；胰岛B细胞分泌胰岛素是唯一能降低血糖的激素，其作用分为两个方面：促进血糖氧化分解、合成糖原、转化成非糖类物质；抑制肝糖原的分解和非糖类物质转化。
【小问1详解】正常人空腹时血糖浓度范围3.9-6.1mml/L；人体内有多种激素参与调节血糖浓度，如胰高血糖素、糖皮质激素、甲状腺激素等，均能提高血糖激素。
【小问2详解】自身免疫病是指自身免疫反应对组织和器官造成损伤并出现了症状，TIMD就是免疫系统攻击了胰岛B细胞，引起其损伤导致胰岛素分泌不足，故属于自身免疫病；CiPSCs能够诱导形成胰岛细胞说明发生了细胞分化，实质是特定基因的表达（基因的选择性表达）。
【小问3详解】将动物组织分散为单个细胞所用的酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶；一般普通的动物细胞培养会加入动物血清等天然成分来确保各种营养成分全面，同时还考虑到一些我们所不清楚的生长因子的作用，而为了避免生长因子可能起到诱导分化的作用就不添加动物血清。
小问4详解】分析题干可知，自变量是是否移植胰岛细胞，题图图2可知，自变量用血糖浓度变化表示，可知实验目的为探究移植胰岛细胞能否降低糖尿病小鼠的血糖水平；分析图3可知，移植75天后患者血糖调节恢复正常水平，表明了患者能摆脱胰岛素依赖。
【小问5详解】传统制备法采用逆转录病毒为载体，将转录因子导入体细胞时，会发生随机整合，会有基因突变的风险，进而癌变，而化学分子诱导CiPSCs的优势是不会导致细胞异常分裂（避免致癌风险）。
24.I.ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1-V表示过程，①-③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
（1）实验中需注意无菌操作，下列需要灭菌处理的是______。
A.土样B.培养基C.接种环D.涂布棒
（2）图中第Ⅰ步最常用的接种方法是______。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第Ⅰ步之前______，再进行接种。
（3）第Ⅲ步接种，应挑选______（①/②/③）号菌落。
（4）如图所示操作，发生在图中哪个过程______（填图中过程编号）
（5）下列关于实验中用到的4种培养基的分析，正确的是______。
A.甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养
B.乙培养基是固体培养基，用于选择产ε-PL的菌种
C.丙培养基是固体培养基，用于分离产ε-PL菌种
D.丁培养基是液体培养基，用于目的菌的增殖、生产ε-PL
II.为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度：ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度，得到表所示的结果。

（6）下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是______。
A.结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强
B.ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C.用于实验的培养基应该用液体的选择培养基
D.接种过程需在超净工作台火焰周围进
（7）该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处，请提出1条修改建议：______。
（8）经实验筛选到的菌种通过大规模发酵可大量生产ε-聚赖氨酸（ε-PL），错误的是______。
A.发酵过程中培养基和设备均采用相同方式灭菌
B.选育出的菌种可直接用于大型发酵
C.发酵过程需严格控制温度、pH和溶解氧等培养条件
D.发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）需从微生物体内分离提纯
（9）发酵过程中要随时取样检测培养液中微生物数量，若要统计活菌数量，可采用______（显微镜计数法/稀释涂布平板法）。
（10）下面是某种培养基配方：
③根据表中培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______（填“自养型”或“异养型”）。
【答案】（1）BCD
（2）①.稀释涂布平板法 ②.稀释
（3）①
（4）Ⅳ
（5）ABCD
（6）ABD
（7）增加空白对照组；增加ε-PL浓度大于70mgL-1的实验组；增加ε-PL浓度小于20mgL-1的实验组
（8）ABD
（9）稀释涂布平板法
（10）自养型
【分析】一、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。
二、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。鉴别培养基是依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计的培养基。
【小问1详解】A、土样中含有目的菌，灭菌会杀灭所有微生物，故土样不能灭菌，A错误；B、培养基需要进行高压蒸汽灭菌，B正确；C、接种环需要进行灼烧灭菌，C正确；D、涂布棒需要用酒精引燃灭菌，D正确。
故选BCD。
【小问2详解】据图可知，第I步为接种，结合第Ⅱ步结果的均匀分布可知，所用接种方法是稀释涂布平板法；若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，说明密度过大，故则应在第I步之前先稀释，再进行接种。
【小问3详解】培养过程中由于ε-PL可使亚甲基蓝褪色，故能分泌ε-PL的微生物周围会形成透明圈，透明圈直径越大，分泌ε-PL的量越多，因此应挑选透明圈直径大的菌落继续培养，故选①。
【小问4详解】该操作为平板划线法中，用接种环在培养基划线过程，图中Ⅳ为平板划线的结果，故该操作发生在图中过程Ⅳ。
【小问5详解】A、甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养，以保证目的菌的正常生长，A正确；
B、乙培养基是固体培养基，用于选择产生ε--PL的菌种，通常需要添加琼脂等凝固剂，B正确；
C、丙培养基是固体培养基，用于分离、产生ε-PL的菌种的纯培养物，即可对目的菌进行扩大培养，C正确；
D、丁培养基是液体培养基，用于增殖培养目的菌，让目的菌增殖、生产ε-PL，D正确。
故选ABCD。
【小问6详解】A、表中结果显示，不同浓度的ε-PL处理下，酿酒酵母清晰区的宽度最大，说明ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强，A正确；
B、表中数据显示随浓度增加，清晰区的宽度越大，即ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关，B正确；
C、培养后需要测量清晰区的宽度，故用于实验的培养基应该用固体的选择培养基，C错误；
D、为了避免周围环境中微生物的污染，接种过程需在超净工作台火焰周围进行，D正确。
故选ABD。
【小问7详解】该实验缺乏空白对照组，应增加空白对照组；同时增加ε-PL浓度大于70mgL-1的实验组、增加ε-PL浓度小于20mgL-1的实验组，这样结果更具有说服力。
【小问8详解】A、发酵过程中培养基用湿热灭菌，设备用培养皿用干热灭菌，故采用不同方式灭菌，A错误；
B、选育出的菌种不一定能用于大型发酵，还需要进行发酵试验，B错误；
C、温度、Ph和溶解氧都会对发酵过程产生影响，故发酵过程需严格控制温度、Ph和溶解氧等培养条件，C正确；
D、发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）是微生物的分泌物，不需从微生物体内分离提纯，D错误。
故选ABD。
【小问9详解】显微镜计数法可以直接观察到微生物的数量，但无法区分活菌和死菌，而稀释涂布平板法通过将样品稀释后涂布在培养基上，培养后统计菌落数，可以确切统计活菌数量，故若要统计活菌数目，需要用稀释涂布平板法。
【小问10详解】分析表中培养基的成分可以看出，该培养基提供的是无机营养，因此用该培养基所培养微生物的同化作用类型是自养型。
组别
培养条件
实验结果
①
基础培养基
无法生长
②
基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸
正常生长
③
基础培养基+甲、乙2种氨基酸
无法生长
④
基础培养基+甲、丙2种氨基酸
正常生长
⑤
基础培养基+乙、丙2种氨基酸
正常生长
编号
Yb3+：C的摩尔比
1
1：1
2
1：2
3
1：3
4
1：4
5
1：5
A组平板制作、接种、培养
B、C组平板制作、接种、培养
称5.0g牛肉膏、100g蛋白胨、5.0gNaCl、10.0g琼脂及一定量酚红加入1000mL蒸馏水中，加热溶化，定容，调pH，转移至锥形瓶，①________，冷却后倒平板（全营养培养基），进行接种，……。
称1.4gKH2PO4、0.2gMgSO4·7H2O、10g葡萄糖、2.1gNaH2PO4、1.0g尿素、10.0g琼脂及一定量酚红加入1000mL蒸馏水中，……，用②________（工具）对B、C组平板分别进行接种，盖好皿盖将培养皿倒置并在③________（位置）作标记，适宜环境中培养。
观察统计：每隔④________（填时间）统计一次菌落数目，直至菌落数稳定。B组平板中菌落周围往往出现⑤________（填现象）。结果分析：A组平板中菌落数显著多于B组平板中菌落数，表明B组培养基起到了⑥________作用。C组平板中没有出现菌落表明分离纯化过程中⑦________。
组别
A组
B组
C组（空白对照组）
实验处理
三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物
三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物
每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量
Na2NO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
H2O
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
1000mL