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江苏省泰州市2023-2024学年高二下学期6月期末考试生物试卷（Word版附解析）
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这是一份江苏省泰州市2023-2024学年高二下学期6月期末考试生物试卷（Word版附解析），共36页。
注意事项：
1.本试卷共分两部分，第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。
2.所有试题的答案均填写在答题纸上，答案写在试卷上的无效。
第Ⅰ卷(选择题 共40 分)
一、单项选择题(共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意)
1. 甜味剂低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，不能被人体直接消化吸收，但能被肠道双歧杆菌利用，具有调节肠道菌群、促进肠道对钙的吸收、抗龋齿等保健功能。下列分析正确的是（ ）
A. 低聚果糖彻底水解产物包括蔗糖和果糖两种单糖分子
B. 糖尿病患者可大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥
C. 与胆固醇功能类似，低聚果糖可有效防止骨质疏松症
D. 推测造成龋齿的口腔细菌可能不吸收利用低聚果糖
2. 拟南芥液泡膜上存在 Na⁺-H⁺逆向转运蛋白，它可以利用液泡内外的 H⁺电化学梯度吸收 Na⁺。部分物质跨液泡膜转运过程如下图所示，据图判断，下列叙述正确的是（ ）
A. 液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度低而呈酸性
B. 是否消耗能量是 Na⁺进液泡与H⁺进液泡的区别之一
C. H₂O 通过与水通道蛋白结合以协助扩散方式进出液泡
D. Cl⁻进入液泡与H⁺运出液泡的运输方式都是协助扩散
3. 下图为蓝细菌的结构模式图及部分代谢过程示意图(光合片层是同心环样的膜片层结构，羧酶体是具外壳蛋白的多角形内含体)，下列叙述错误的是（ ）
A. 蓝细菌光合片层上产生的物质C、F分别为NADPH、ATP
B. 蓝细菌捕获光能的色素是叶绿素和藻蓝素，暗反应都在羧酶体内进行
C. 羧酶体的外壳会阻止O2进入和CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境
D. 蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，使细胞中的CO2浓度保持在较高水平
4. 微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，与细胞生命活动密切相关。秋水仙素可以阻止微管的组装，紫杉醇可以阻止微管的去组装。下列说法错误的是（ ）
A. 细胞骨架维持着细胞形态，锚定并支撑着众多细胞器
B. 不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异
C. 秋水仙素能阻止植物细胞的有丝分裂，而紫杉醇不能
D. 适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗
5. 立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，是专性寄生于真核细胞内的病原体，在体外很难培养。医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据。下列说法错误的是（ ）
A. 不同于宿主细胞，立克次氏体遗传物质是RNA
B. 立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体
C. 立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇
D. 患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集
6. 我国学者研究发现细胞在迁移过程中，细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状细胞器，命名为迁移体(如下图箭头所指)。敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷。下列有关迁移体的说法错误的是（ ）
A. 迁移体膜的主要成分为脂质和蛋白质
B. 迁移体形成说明细胞膜具选择透过性
C. 迁移体的形成需要细胞骨架等的参与
D. 迁移体可能对细胞间信息传递具有作用
7. 每餐吃“七分饱”是中国传统养生观念。哺乳动物实验证明，如果将正常饮食减少三至四成，则寿命可延长百分之三十左右。下列有关“七分饱”说法，错误的是（ ）
A. 可以减少热量摄入从而减少肥胖可能
B. 有利于胃肠消化、吸收功能正常运转
C. 应增加脂类食物比例以保证能量供应
D. 增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器
8. 纸层析法分离叶绿体色素时，可用迁移率(Rf)来鉴定色素的种类，迁移率=色素移动距离/溶剂移动距离。下表是叶绿体中色素层析结果(部分数据)。相关叙述正确的是（ ）
A. 该实验所用的层析液中包含苯、丙酮、无水乙醇等成分
B. 色素3的迁移率(Rf)为0.2，若植物体缺镁，该色素含量会减少
C. 色素1和2 主要吸收红光和蓝紫光，色素3 和4主要吸收蓝紫光
D. 根尖细胞中不含叶绿素及相关基因，不能作为提取色素的材料
9. 无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（ ）
A. 不同来源的血清成分存在一定差异
B. 血清的质量稳定性和储存时间有限
C. 无血清培养液利于无关变量的控制
D 无血清培养液能满足细胞所有需求
10. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A. 在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核
B. 精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C. 对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
11. 2023年 4月我国新版《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2022)正式实施，其中对微生物的检出要求如下表。兴趣小组的同学们对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。结合下表分析，下列说法错误的是（ ）
A. 可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法对取水样三角瓶灭菌
B. 培养基中应加入伊红—亚甲蓝以区分大肠杆菌和其他细菌菌落
C. 应将0.1mL 稀释水样滴加到培养基表面并用涂布器涂抹均匀
D. 应将平板倒置后在适宜条件下培养，以减少培养基污染的几率
12. 普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（ ）
A. 克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A
B. 因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响
C. 克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似
D. 融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达
13. 在利用新鲜洋葱进行DNA 粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前用液氮冷冻处理洋葱有利于 DNA 释放
B. 向研磨离心后的上清液中加入75%冷酒精可使DNA 大量析出
C. 将析出白色丝状物的溶液再离心，弃去上清液留下沉淀物
D. 向溶有丝状物的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴后会出现蓝色
14. 植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（ ）
A. 植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用
B. 植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定
C. 培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水
D. 大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染
二、多项选择题(共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分)
15. 下图a～d分别是水稻（2n＝24）花粉母细胞减数分裂不同时期的显微照片。相关叙述正确的是（ ）
A. 图a细胞中亮斑是正在螺旋化的染色体
B. 图b细胞正在发生染色体的解螺旋
C. 图c细胞中染色体的着丝粒已经分裂
D. 图d细胞中存在48个姐妹染色单体
16. 下列关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 在 10时~14时剪取洋葱根尖进行实验较容易找到分裂期细胞
B. 实验中染色剂甲紫溶液进入细胞内需消耗线粒体产生ATP
C. 在根尖细胞呈长方形的区域找到的分裂中期细胞数目最多
D. 对根尖细胞先染色后进行漂洗，可使染色体的形态更加清晰
17. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。分别用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如下图所示。下列关于质粒粗提取和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜
B. 为排除RNA 对实验结果干扰，需用RNA 水解酶处理上清液
C. 电泳鉴定时，被染色的质粒还需要在紫外灯下才能看到结果
D. 根据电泳结果，质粒上一定各有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点
18. 下列关于高中生物学实验的原理、方法、过程以及结论的叙述，错误的是（ ）
A. 为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加多滴蔗糖溶液
B. 高温变性后的蛋白质未经加热也能与双缩脲试剂发生紫色显色反应
C. 观察细胞质流动时，可见正方形黑藻叶肉细胞中叶绿体绕液泡流动
D. 连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，但易出现色素带重叠
第 II 卷 (非选择题共60分)
三、非选择题(共5题，共60分。除特别说明外，每空1分)
19. 自然界的植物丰富多样，对环境的适应也各有特色。下图是水稻和玉米的光合作用暗反应及相关代谢示意图。请据图回答相关问题：
（1）水稻在高温、光照强烈、干旱环境中，由于气孔关闭造成______，而不利于光合作用，过多的O₂可通过______过程消耗。与水稻相比，玉米多一种_______酶参与固定CO₂,该酶比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，因此玉米更能适应_______的环境。
（2）因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，推测其C₃还原过程需要的_____来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自_______(填生理过程)。玉米体内也存在光呼吸现象，炎热干燥气候下，C₄循环可以______(填“降低”或“提高”)光呼吸。
（3）科研人员给予水稻48小时持续光照，测定叶肉细胞中的淀粉量，结果如下图2所示。
图2实验结果反映出淀粉积累量与时间的变化关系是_______。
20. 泡菜是以新鲜蔬菜为原料，在乳酸菌等菌群的作用下发酵而成。控制发酵条件以及亚硝酸盐含量至关重要。请回答下列问题：
（1）在结构上，乳酸菌相对于酵母菌最大的区别是_______。
（2）泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行______(填“无氧”或“有氧”)发酵，在细胞的_______(场所)产生乳酸。泡菜制作程序和方法直接决定了泡菜的品质，下列叙述错误的有_______。
①将切成块状的新鲜蔬菜装满泡菜坛，加入香辛料并倒入冷却好的盐水
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无菌环境
④泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
（3）研究者尝试分离能产生亚硝酸盐还原酶(降解亚硝酸盐)的乳杆菌P51。分离时应先将泡菜滤液用______进行梯度稀释，再用_______法分离纯化，以便获得_______。
（4）研究者利用乳杆菌P51探究温度和加盐量对其降解亚硝酸盐的影响，结果如下图1、2。
据图1分析，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是_______。
据图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而_______，在食盐含量为_______时，降解率受到明显抑制。结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是_______。
21. 在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题：
（1）为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射_______，以期获得更多_______的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为_______的CO₂培养箱。
（2）图1中可运用______诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜的_______功能。图中筛选2运用_______等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
（3）根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是____，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
（4）治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量)
由图2可知，PD-L1的抗体对_______肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是_______。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是_______。
22. 染色体完成复制后产生的姐妹染色单体保持相互黏附状态。黏连蛋白(姐妹染色单体之间的连结蛋白)的裂解是分离姐妹染色单体的关键性事件，分离酶能水解黏连蛋白。下图示细胞分裂过程中某染色体的变化情况，请据图回答：
（1）黏连蛋白是在细胞分裂间期的______期合成后通过_______进入细胞核。
（2）同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，细胞中染色体处于图中_______状态。同源染色体分离时染色体处于______状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的_______位置。III状态→Ⅳ状态过程发生在______期(2 分)。
（3）着丝粒是一段特殊的染色体片段，其物质组成主要为______。动物细胞分裂时，_____发出的纺锤丝附着在着丝粒上。Shugshin 蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测, Shugshin蛋白的作用是______, 调控着丝粒分裂时间。
（4）分离酶的活性需要被严密调控。保全素能与分离酶紧密结合，并充当假底物而阻断其活性。下列叙述正确的有 。
A. 分离酶没有专一性
B. 保全素和黏连蛋白是同一种蛋白质
C. 保全素和黏连蛋白空间结构局部相似
D. 保全素和黏连蛋白竞争分离酶活性部位
（5）当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。根据上述材料推测其原因是_______。
23. 无缝克隆技术是依靠同源序列碱基间的配对能使载体和目的基因较为紧密地连在一起，实现 DNA 片段无缝连接的技术。其基本原理及过程如下图 1 所示。请回答相关问题：
（1）图1中①过程通过______方法获得线性化质粒，引物A和B要依据_______序列进行设计。
（2）从冰箱拿出②过程所需试剂，放在_______上缓慢融化，在离心管中加入各种反应成分后，需进行______操作，使反应液集中于离心管底部。
（3）用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，能形成_______。该酶催化的最适温度为37℃，而过程③选择的温度为50℃，目的是降低酶活性，_______。
（4）与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有 。
A. 避免限制酶切割对质粒功能区的破坏
B. 不会引入多余碱基
C. 可把目的基因插入质粒的任何位点
D. 操作时间短，成功率高
（5）不对称PCR 常用于制备DNA探针。其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物，在PCR 反应的早期10-15 个循环中，扩增产物主要是双链DNA，当数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA 单链。
①若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用上图2中引物_______；如果体系中原有模板 DNA 的数量为m，最初10次循环产物为双链，后20次循环产物为单链，则最终获得的单链探针数为______。因为 DNA 单链与双链的分子量不同，可通过______将单链探针 DNA 分离出来。
②为精确控制产物生成量，科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是_______。溶剂
色素1
色素2
色素3
色素4
实验组1
7.8
?
?
1.9
?
实验组2
8.2
?
?
1.5
?
实验组3
8.0
?
?
1.4
?
平均移动距离(cm)
8.0
7.6
?
?
0.8
迁移率(Rf)
无
095
0.53
?
0.10
序号
指 标
限 值
1
总大肠杆菌/(MPN/100mL 或 CFU/100mL)
不应检出
2
大肠埃希氏菌/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
不应检出
3
菌落总数/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
100
MPN表示最可能数， CFU表示菌落形成单位
2023~2024学年度第二学期期末考试
高二生物试题
(考试时间: 75分钟; 总分: 100分)
注意事项：
1.本试卷共分两部分，第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。
2.所有试题的答案均填写在答题纸上，答案写在试卷上的无效。
第Ⅰ卷(选择题 共40 分)
一、单项选择题(共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意)
1. 甜味剂低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，不能被人体直接消化吸收，但能被肠道双歧杆菌利用，具有调节肠道菌群、促进肠道对钙的吸收、抗龋齿等保健功能。下列分析正确的是（ ）
A. 低聚果糖彻底水解产物包括蔗糖和果糖两种单糖分子
B. 糖尿病患者可大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥
C. 与胆固醇功能类似，低聚果糖可有效防止骨质疏松症
D. 推测造成龋齿的口腔细菌可能不吸收利用低聚果糖
【答案】D
【解析】
【分析】①糖类大致可以分为单糖、二糖、多糖等几类。蔗糖属于二糖，需水解成单糖后才能被细胞吸收。淀粉是植物细胞中特有的多糖。②脂质包括脂肪、磷脂和固醇，固醇又包括胆固醇、性激素和维生素D。胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体内还参与血液中脂质的运输。
【详解】A、1分子蔗糖是由1分子果糖和1分子葡萄糖脱水缩合而成的。低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，因此，低聚果糖彻底水解产物包括葡萄糖和果糖两种单糖分子，A错误；
B、桃酥富含淀粉，脂肪含量也较高，糖尿病患者不能大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥，B错误；
C、低聚果糖能促进肠道对钙的吸收，有效防止骨质疏松症，胆固醇没有防止骨质疏松症的功能，C错误；
D、低聚果糖有可能是不被口腔细菌吸收利用，因此具有抗龋齿功能，D正确。
故选D。
2. 拟南芥液泡膜上存在 Na⁺-H⁺逆向转运蛋白，它可以利用液泡内外的 H⁺电化学梯度吸收 Na⁺。部分物质跨液泡膜转运过程如下图所示，据图判断，下列叙述正确的是（ ）
A. 液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度低而呈酸性
B. 是否消耗能量是 Na⁺进液泡与H⁺进液泡的区别之一
C. H₂O 通过与水通道蛋白结合以协助扩散方式进出液泡
D. Cl⁻进入液泡与H⁺运出液泡的运输方式都是协助扩散
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：由图可知， H+进入液泡需要消耗能量，也需要载体蛋白，故跨膜运输方式为主动运输，则液泡内的细胞液中H+浓度大于细胞质基质中H+浓度，说明H+运出液泡是顺浓度梯度，且H⁺运出液泡依赖载体蛋白，因此跨膜运输方式是协助扩散；液泡膜上的Na+ /H+逆向转运蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+转运到液泡内，说明Na+进入液泡的直接驱动力是液泡膜两侧的H+电化学梯度，因此该过程Na+的进入液泡的方式为主动运输。
【详解】A、图中H⁺进入液泡需要消耗能量，属于主动运输，从低浓度到高浓度，因此推测液泡内H⁺浓度高，溶酶体含大量的酸性水解酶，因此液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度高而呈酸性，A错误；
B、据图可知，H⁺进液泡消耗ATP水解释放的能量，因此推测液泡内H⁺浓度高。液泡膜上的Na+ /H+逆向转运蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+转运到液泡内，说明Na+进入液泡的消耗的能量是液泡膜两侧的H+电化学梯度提供的能量。因此， Na⁺进液泡与H⁺进液泡都要消耗能量，在这一点上是相同的，B错误；
C、据图可知，H2O借助水通道蛋白以协助扩散的方式进出液泡，但H2O不会与水通道蛋白结合，C错误；
D、据图可知，Cl− 借助通道蛋白，以协助扩散的方式由细胞质基质进入液泡；由图可知， H+进入液泡的跨膜运输方式为主动运输，则液泡内的细胞液中H+浓度大于细胞质基质中H+浓度，说明H+运出液泡是顺浓度梯度。且H⁺运出液泡依赖载体蛋白，因此，H⁺运出液泡的运输方式是协助扩散，D正确。
故选D。
3. 下图为蓝细菌的结构模式图及部分代谢过程示意图(光合片层是同心环样的膜片层结构，羧酶体是具外壳蛋白的多角形内含体)，下列叙述错误的是（ ）
A. 蓝细菌光合片层上产生的物质C、F分别为NADPH、ATP
B. 蓝细菌捕获光能的色素是叶绿素和藻蓝素，暗反应都在羧酶体内进行
C. 羧酶体的外壳会阻止O2进入和CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境
D. 蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，使细胞中的CO2浓度保持在较高水平
【答案】B
【解析】
【分析】根据细胞内有无以核膜为界限的细胞核，把细胞分为真核细胞和原核细胞两大类，原核细胞是组成原核生物的细胞这类细胞主要特征是没有以核膜为界限的细胞核, 同时也没有核膜和核仁, 只有拟核。根据外表特征，可把原核生物分为放线菌、细菌、支原体、立克次氏体和衣原体等。
【详解】A、G被光解形成A和O2，则A是H+，H++B+e-=C，则C是NADPH，F和C用于还原C3，则F是ATP，A正确；
B、据图可知C3的还原在羧酶体外，所以并不是所有的暗反应过程都在羧酶体内进行，B错误；
C、据图可知，羧酶体的外壳会阻止O2进入，同时有多个途径运输碳酸氢根，防止CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境，C正确；
D、蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，能使细胞中的CO2浓度保持在较高水平，有利于光合作用的进行，D正确。
故选B。
4. 微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，与细胞生命活动密切相关。秋水仙素可以阻止微管的组装，紫杉醇可以阻止微管的去组装。下列说法错误的是（ ）
A. 细胞骨架维持着细胞形态，锚定并支撑着众多细胞器
B. 不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异
C. 秋水仙素能阻止植物细胞的有丝分裂，而紫杉醇不能
D. 适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗
【答案】C
【解析】
【分析】细胞骨架是真核细胞中由蛋白质纤维组成的网架结构，维持细胞形状并控制细胞运动是细胞骨架最显著的作用，对动物细胞尤其重要；细胞骨架也与细胞的活动有关，细胞活动包括整个细胞位置的移动以及细胞某些部分的有限的运动；在物质运输、能量转换、信息传递和细胞分裂、细胞分化等一系列方面起重要作用。
【详解】A、维持细胞形状并控制细胞运动是细胞骨架最显著的作用，同时细胞骨架锚定并支撑着许多细胞器，与细胞运动、分裂、分化以及物质运输、能量转化、信息传递等生命活动密切相关，A正确；
B、微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，所以不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异，B正确；
C、紫杉醇可以阻止微管的去组装，可抑制细胞有丝分裂，C错误；
D、秋水仙素可以阻止微管的组装，可以影响癌细胞的增殖，紫杉醇可以阻止微管的去组装,从而抑制癌细胞增殖，所以适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗，D正确。
故选C。
5. 立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，是专性寄生于真核细胞内的病原体，在体外很难培养。医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据。下列说法错误的是（ ）
A. 不同于宿主细胞，立克次氏体遗传物质是RNA
B. 立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体
C. 立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇
D. 患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集
【答案】A
【解析】
【分析】具有细胞结构的生物的遗传物质是DNA，不具有细胞结构的病毒的遗传物质是DNA或RNA。
【详解】A、立克次氏体是原核生物，具有细胞结构，故其遗传物质是DNA，A错误；
B、分析题意，立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，由此可知，立克次氏体包括多个物种，故立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体，B正确；
C、分析题意，医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据，由此可推测，立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇，C正确；
D、根据抗原—抗体特异性结合的原理可知，患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集，D正确。
故选A。
6. 我国学者研究发现细胞在迁移过程中，细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状细胞器，命名为迁移体(如下图箭头所指)。敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷。下列有关迁移体的说法错误的是（ ）
A. 迁移体膜的主要成分为脂质和蛋白质
B. 迁移体形成说明细胞膜具选择透过性
C. 迁移体的形成需要细胞骨架等的参与
D. 迁移体可能对细胞间信息传递具有作用
【答案】B
【解析】
【分析】据题意可知，迁移体是细胞向外释放的一种囊泡结构，迁移体能起到细胞间物质传递的作用，细胞在迁移的过程中，迁移体发挥着重要作用。
【详解】A、迁移体是细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状的细胞器，其膜的主要成分为脂质（磷脂）和蛋白质，A正确；
B、迁移体是一种细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状的细胞器，故迁移体的形成说明细胞膜具有一定的流动性，B错误；
C、由图可知，在细胞迁移过程中，细胞通过收缩纤维的管道，持续把一些胞内物质运输到迁移体中，迁移体的形成与细胞骨架有关，C正确；
D、敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷，可说明迁移体可能对细胞间信息传递具有作用，D正确。
故选B。
7. 每餐吃“七分饱”是中国传统养生观念。哺乳动物实验证明，如果将正常饮食减少三至四成，则寿命可延长百分之三十左右。下列有关“七分饱”的说法，错误的是（ ）
A. 可以减少热量摄入从而减少肥胖可能
B. 有利于胃肠消化、吸收功能正常运转
C. 应增加脂类食物比例以保证能量供应
D. 增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器
【答案】C
【解析】
【分析】通俗地说，细胞自噬就是细胞吃掉自身的结构和物质。在一定条件下，细胞会将受损或功能退化的细胞结构等，通过溶酶体降解后再利用，这就是细胞自噬。处于营养缺乏条件下的细胞，通过细胞自噬可以获得维持生存所需的物质和能量；在细胞受到损伤、微生物入侵或细胞衰老时，通过细胞自噬，可以清除受损或衰老的细胞器，以及感染的微生物和毒素，从而维持细胞内部环境的稳定。
【详解】A、“七分饱”，可以减少每餐的热量摄入，有助于避免脂肪的积累，从而减少肥胖的可能，A正确；
B、“七分饱”，有助于减轻胃肠的消化负担，有利于胃肠消化、吸收功能正常运转，B正确；
C、“七分饱”是指在提供充分的营养成分、保证不发生营养不良的情况下适量地减少每餐食物的摄入，若增加食物中脂类的比例，有可能导致肥胖，因此不能增加脂类食物的比例，C错误；
D、长期坚持“七分饱”，可能会使细胞自噬的功能加强，有助于机体及时清除受损或衰老的细胞器，即增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器，D正确。
故选C。
8. 纸层析法分离叶绿体色素时，可用迁移率(Rf)来鉴定色素的种类，迁移率=色素移动距离/溶剂移动距离。下表是叶绿体中色素层析结果(部分数据)。相关叙述正确的是（ ）
A. 该实验所用的层析液中包含苯、丙酮、无水乙醇等成分
B. 色素3的迁移率(Rf)为0.2，若植物体缺镁，该色素含量会减少
C. 色素1和2 主要吸收红光和蓝紫光，色素3 和4主要吸收蓝紫光
D. 根尖细胞中不含叶绿素及相关基因，不能作为提取色素的材料
【答案】B
【解析】
【分析】分离色素利用纸层析法，原理是四种色素在层析液中溶解度不同，溶液度高的扩散速度快，结果从上而下分别是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色）。
【详解】A、该实验所用的层析液由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成，A错误；
B、根据实验1、2、3三组数据可求出，色素3平均移动距离为（1.9+1.5+1.4）3=1.6，溶剂平均移动距离为（7.8+8.2+8.0） 3=8.0，所以Rf值为1.6/8.0=0.2。根据Rf的大小可知，色素3是叶绿素a，其化学元素组成有镁，若植物体缺镁，该色素含量会减少，B正确；
C、根据Rf的大小可知，色素1是胡萝卜素，色素2是叶黄素，色素3是叶绿素a，色素4是叶绿素b。叶绿素（3和4）主要吸收红光和蓝紫光，类胡萝卜素（1和2）主要吸收蓝紫光，C错误；
D、根尖细胞中不含叶绿素，不能作为提取色素的材料，但是含有相关基因，D错误。
故选B。
9. 无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（ ）
A. 不同来源的血清成分存在一定差异
B. 血清质量稳定性和储存时间有限
C. 无血清培养液利于无关变量的控制
D. 无血清培养液能满足细胞所有需求
【答案】D
【解析】
【分析】血清是成分不完全明确的复杂混合物，且不同批次的血清在质量上存在很大差异，增加了含血清培养基无关比变量的控制难度，无血清培养液利于无关变量的控制。
【详解】AC、不同个体基因不同，所以不同来源的血清成分存在一定差异，无血清培养液利于无关变量的控制，AC正确；
B、由于环境的影响，血清的质量稳定性和储存时间有限，B正确；
D、血清是成分不完全明确的复杂混合物，无血清培养液能满足细胞基本需求，但不能满足所有需求，D错误。
故选D。
10. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A. 在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核
B. 精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C. 对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
【答案】C
【解析】
【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
【详解】AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核，AB正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D正确。
故选C。
11. 2023年 4月我国新版《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2022)正式实施，其中对微生物的检出要求如下表。兴趣小组的同学们对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。结合下表分析，下列说法错误的是（ ）
A. 可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法对取水样的三角瓶灭菌
B. 培养基中应加入伊红—亚甲蓝以区分大肠杆菌和其他细菌菌落
C. 应将0.1mL 稀释水样滴加到培养基表面并用涂布器涂抹均匀
D. 应将平板倒置后在适宜条件下培养，以减少培养基污染的几率
【答案】C
【解析】
【分析】获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、用三角瓶取水样前，为了防止外来杂菌污染，三角瓶（玻璃制品）可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌，A正确；
B、大肠杆菌的代谢产物能与培养基中的染料伊红—亚甲蓝反应，使菌落呈黑色，所以可根据培养基上的菌落是否呈现黑色来区分大肠杆菌和其他细菌菌落，B正确；
C、对某蓄水池进行细菌总数测定，不应对所取的水样进行稀释，C错误；
D、为了减少培养基污染的几率，在平板上接种菌液后，应将平板倒置在培养箱里培养，并提供适宜的培养条件，D正确。
故选C。
12. 普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（ ）
A. 克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A
B. 因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响
C. 克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似
D. 融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达
【答案】A
【解析】
【分析】克隆羊培育的原理：通过将体细胞的核植入去核卵细胞的方式，激活染色组的功能，实现体细胞向多能干细胞的跨越。理论上，这样的多能干细胞就有发育为完整生物个体的潜力。
【详解】A、母羊A提供了细胞质，母羊B提供了细胞核，则克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A，A正确；
B、代孕母羊C未提供遗传物质，但是为克隆羊提供了发育场所，克隆羊的性状会受其影响，B错误；
C、克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利不同，C错误；
D、供核母羊提供了已经分化细胞，融合细胞发育成桑葚胚的过程中发生了基因选择性表达，D错误。
故选A。
13. 在利用新鲜洋葱进行DNA 粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前用液氮冷冻处理洋葱有利于 DNA 释放
B. 向研磨离心后的上清液中加入75%冷酒精可使DNA 大量析出
C. 将析出白色丝状物的溶液再离心，弃去上清液留下沉淀物
D. 向溶有丝状物的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴后会出现蓝色
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14ml/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
【详解】A、冷冻研磨可以从各种环境样本中获得高质量的 DNA，研磨前先用液氮冷冻处理洋葱，有利于DNA的释放，A正确；
B、向研磨离心后的上清液中加入95%冷酒精可使DNA 大量析出，B错误；
C、将出现白色丝状物（粗提取得到的DNA）的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀，C正确；
D、将DNA丝状物放入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液中，使其溶解，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D正确。
故选B。
14. 植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（ ）
A. 植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用
B. 植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定
C. 培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水
D. 大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染
【答案】C
【解析】
【分析】配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同时，植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成的渗透压可较长时间地保持相对稳定。
【详解】A、蔗糖为二糖，在蔗糖酶的作用下水解为1分子葡萄糖和1分子果糖，才能被细胞吸收，所以植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用，A正确；
B、植物细胞吸收蔗糖的速率明显低于吸收葡萄糖的速率，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定，B正确；
C、蔗糖的分子量大于葡萄糖，培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压低于葡萄糖，可防止细胞渗透失水，C错误；
D、微生物生长所需的碳源一般是葡萄糖，所以蔗糖作为碳源与葡萄糖相比，可在一定程度上减少微生物的污染，D正确。
故选C。
二、多项选择题(共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分)
15. 下图a～d分别是水稻（2n＝24）花粉母细胞减数分裂不同时期的显微照片。相关叙述正确的是（ ）
A. 图a细胞中亮斑是正在螺旋化的染色体
B. 图b细胞正在发生染色体的解螺旋
C. 图c细胞中染色体的着丝粒已经分裂
D. 图d细胞中存在48个姐妹染色单体
【答案】AD
【解析】
【分析】分析题图：a中同源染色体联会，处于减数第一次分裂前期；b中已经形成四个细胞，表示减数分裂已经结束，处于减数第二次分裂的末期；c中每一侧有12条染色体，应该处于减数第一次分裂后期；d中同源染色体成对的排列在赤道板上，处于减数第一次分裂中期；
【详解】A、图a细胞中正在发生同源染色体联会，此时染色质丝螺旋缠绕，缩短变粗，成为染色体，因此亮斑是正在螺旋化的染色体，A正确；
B、图b中已经形成四个细胞，表示减数分裂已经结束，因此已经完成染色体的解螺旋，B错误；
C、图c细胞中的每一侧有12条染色体，应该处于减数第一次分裂后期，染色体的着丝粒没有分裂，C错误；
D、水稻体细胞含有24条染色体。图d细胞处于减数第一次分裂中期，此时细胞中每条染色体含有2个姐妹染色单体，因此存在48个姐妹染色单体，D正确。
故选AD。
16. 下列关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 10时~14时剪取洋葱根尖进行实验较容易找到分裂期细胞
B. 实验中染色剂甲紫溶液进入细胞内需消耗线粒体产生的ATP
C. 在根尖细胞呈长方形的区域找到的分裂中期细胞数目最多
D. 对根尖细胞先染色后进行漂洗，可使染色体的形态更加清晰
【答案】BCD
【解析】
【分析】观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）、漂洗（洗去解离液，便于染色）、染色（用甲紫、醋酸洋红等碱性染料）、制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）。
【详解】A、最好每天的10-14点取根，该时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期，更容易找到分裂期细胞，A正确；
B、用甲紫溶液染色时，细胞已经被杀死，甲紫溶液进入细胞内不需要消耗线粒体产生的ATP，B错误；
C、分生区细胞的特点是排列紧密，呈正方形，呈长方形的一般是伸长区细胞，C错误；
D、漂洗的目的是洗去根尖上的解离液，防止解离过度，同时避免与碱性染料发生中和反应，所以应该先漂洗再染色，D错误。
故选BCD。
17. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。分别用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如下图所示。下列关于质粒粗提取和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜
B. 为排除RNA 对实验结果干扰，需用RNA 水解酶处理上清液
C. 电泳鉴定时，被染色的质粒还需要在紫外灯下才能看到结果
D. 根据电泳结果，质粒上一定各有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点
【答案】AC
【解析】
【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜，但对DNA没有影响，A正确；
B、细胞内有RNA水解酶，不需要加入RNA水解酶处理上清液，B错误；
C、电泳鉴定时，被染色的质粒还需要通过紫外灯，会发出荧光，在特定的仪器下能看到结果，C正确；
D、质粒的化学本质是环状的DNA，且由图可知，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有1个条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，即质粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位点，但限制酶III切割后有2个条带，故一定有限制酶III的切割位点，D错误。
故选AC。
18. 下列关于高中生物学实验的原理、方法、过程以及结论的叙述，错误的是（ ）
A. 为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加多滴蔗糖溶液
B. 高温变性后的蛋白质未经加热也能与双缩脲试剂发生紫色显色反应
C. 观察细胞质流动时，可见正方形黑藻叶肉细胞中叶绿体绕液泡流动
D. 连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，但易出现色素带重叠
【答案】AC
【解析】
【分析】绿叶中色素的提取和分离实验中，提取色素时需要加入无水乙醇（或丙酮）、石英砂和碳酸钙，其中无水乙醇或丙酮的作用是溶解色素；石英砂的作用是使研磨更充分；碳酸钙的作用是防止研磨过程中色素被破坏。
【详解】A、为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸，重复几次，洋葱细胞便可浸润在蔗糖溶液中，A错误；
B、高温变性后的蛋白质与未经加热的蛋白质都含有肽键，都能与双缩脲试剂发生紫色显色反应，B正确；
C、黑藻叶肉细胞中含有叶绿体，叶绿体存在于细胞质中，呈现绿色、扁平的椭球或球形，黑藻叶肉细胞呈长方形，叶绿体围绕液泡运动，C错误；
D、在提取和分离叶绿体色素时，若连续多次重复画滤液细线，会使滤液细线过宽，易出现色素带重叠，D正确。
故选AC。
第 II 卷 (非选择题共60分)
三、非选择题(共5题，共60分。除特别说明外，每空1分)
19. 自然界的植物丰富多样，对环境的适应也各有特色。下图是水稻和玉米的光合作用暗反应及相关代谢示意图。请据图回答相关问题：
（1）水稻在高温、光照强烈、干旱环境中，由于气孔关闭造成______，而不利于光合作用，过多的O₂可通过______过程消耗。与水稻相比，玉米多一种_______酶参与固定CO₂,该酶比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，因此玉米更能适应_______的环境。
（2）因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，推测其C₃还原过程需要的_____来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自_______(填生理过程)。玉米体内也存在光呼吸现象，炎热干燥气候下，C₄循环可以______(填“降低”或“提高”)光呼吸。
（3）科研人员给予水稻48小时持续光照，测定叶肉细胞中的淀粉量，结果如下图2所示。
图2实验结果反映出淀粉积累量与时间的变化关系是_______。
【答案】（1） ①. CO2不能进入叶片，同时引起O2在细胞内积累，抑制光反应和暗反应的进行 ②. 光呼吸 ③. PEPC ④. 低浓度CO2
（2） ①. ATP和NADPH ②. 呼吸作用 ③. 降低
（3）随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定
【解析】
【分析】由图1可知，玉米参与CO2固定的酶有Rubisc和PEPC，而水稻只有Rubisc。由图2可知，随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定。
【小问1详解】
在干旱、炎热的环境中，植物由于气孔关闭，造成CO2不能进入叶片，同时引起O2在细胞内积累，抑制光反应和暗反应的进行，从而不利于光合作用。由图可知，过多的O2可通过光呼吸消耗。玉米参与CO2固定的酶有Rubisc和PEPC，而水稻只有Rubisc，由于PEPC比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，所以玉米更适应干旱环境导致的低CO2状态。
【小问2详解】
因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，不能产生ATP和NADPH，推测其C₃还原过程需要的ATP和NADPH来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自呼吸作用产生的CO2。光呼吸时O2与CO2竞争C5，C₄循环可以通过增加CO2的浓度而降低光呼吸。
【小问3详解】
由图2可知，随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定。
20. 泡菜是以新鲜蔬菜为原料，在乳酸菌等菌群的作用下发酵而成。控制发酵条件以及亚硝酸盐含量至关重要。请回答下列问题：
（1）在结构上，乳酸菌相对于酵母菌最大的区别是_______。
（2）泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行______(填“无氧”或“有氧”)发酵，在细胞的_______(场所)产生乳酸。泡菜制作程序和方法直接决定了泡菜的品质，下列叙述错误的有_______。
①将切成块状的新鲜蔬菜装满泡菜坛，加入香辛料并倒入冷却好的盐水
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无菌环境
④泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
（3）研究者尝试分离能产生亚硝酸盐还原酶(降解亚硝酸盐)的乳杆菌P51。分离时应先将泡菜滤液用______进行梯度稀释，再用_______法分离纯化，以便获得_______。
（4）研究者利用乳杆菌P51探究温度和加盐量对其降解亚硝酸盐影响，结果如下图1、2。
据图1分析，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是_______。
据图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而_______，在食盐含量为_______时，降解率受到明显抑制。结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是_______。
【答案】（1）没有核膜包被的细胞核
（2） ①. 无氧 ②. 细胞质基质 ③. ①③④
（3） ①. 无菌水 ②. 稀释涂布平板 ③. 能降解亚硝酸盐的乳酸菌单菌落
（4） ①. 37℃下乳酸菌的相应酶活性最高 ②. 增大 ③. 10% ④. 温度为37℃、食盐用量为4%
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。 （4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。 （5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【小问1详解】
乳酸菌（属于原核细胞）相对于酵母菌（属于真核细胞）最大的区别是没有核膜包被的细胞核。
【小问2详解】
乳酸菌为厌氧细菌，泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行无氧发酵，在细胞质基质中产生乳酸。
①制作泡菜时将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，①错误；
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死，从而影响发酵的进行，②正确；
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无氧环境，③错误；
④乳酸菌属于厌氧细菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，④错误。
故选①③④。
【小问3详解】
泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，所以需要稀释，为了避免稀释过程中带入其他杂菌，需要用无菌水进行梯度稀释，随后再用稀释涂布平板法进行分离纯化，以便获得能降解亚硝酸盐的乳酸菌单菌落。
【小问4详解】
温度主要通过影响酶活性影响新陈代谢，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是此时乳酸菌的相应酶活性最高。
由图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而增大，在食盐含量为10%时，降解率受到明显抑制。泡菜中亚硝酸盐的降解率越大，对人体的伤害越小，泡菜腌制时间过短，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加，导致泡菜的品质下降，在保证泡菜品质情况下，结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是温度为37℃、食盐用量为4%。
21. 在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题：
（1）为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射_______，以期获得更多_______的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为_______的CO₂培养箱。
（2）图1中可运用______诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜_______功能。图中筛选2运用_______等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
（3）根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是____，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
（4）治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量)
由图2可知，PD-L1的抗体对_______肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是_______。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是_______。
【答案】（1） ①. 人PD-L1抗原 ②. 能够分泌抗人 PD-L1抗体 ③. 95%空气+5%CO2
（2） ①. 灭活的病毒 ②. 流动性 ③. 多孔的细胞培养板（抗原-抗体杂交）
（3）针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，使肿瘤细胞不能逃避T细胞的攻击
（4） ①. C13 ②. C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳 ③. 证明细胞的翻译功能是正常的
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测：（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于治疗疾病和运载药物：抗体上带有药物，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物一并带进靶细胞，引起靶细胞凋亡。
【小问1详解】
上述实验前必须给小鼠甲多次注射人PD-L1抗原，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗人 PD-L1抗体的B淋巴细胞。动物细胞培养时，需将细胞置于气体条件为95%空气+5%CO2的CO2培养箱。
【小问2详解】
诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，采用的诱导方法有灭活的病毒、电刺激融合、聚乙二醇等方法，其中灭活的病毒诱导融合为动物细胞特有的方法，不适用于植物原生质体融合。细胞融合利用细胞膜具有一定流动性的功能。筛选2是筛选出既能产生特定抗体又能无线增殖的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，利用抗体可与特定抗原结合的原理来检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。
【小问3详解】
抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，不能逃避T细胞的攻击，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
【小问4详解】
由图2可知，C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳，所以PD-L1的抗体对C13肿瘤细胞杀伤效果较低。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是证明细胞的翻译功能是正常的。
22. 染色体完成复制后产生的姐妹染色单体保持相互黏附状态。黏连蛋白(姐妹染色单体之间的连结蛋白)的裂解是分离姐妹染色单体的关键性事件，分离酶能水解黏连蛋白。下图示细胞分裂过程中某染色体的变化情况，请据图回答：
（1）黏连蛋白是在细胞分裂间期的______期合成后通过_______进入细胞核。
（2）同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，细胞中染色体处于图中_______状态。同源染色体分离时染色体处于______状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的_______位置。III状态→Ⅳ状态过程发生在______期(2 分)。
（3）着丝粒是一段特殊的染色体片段，其物质组成主要为______。动物细胞分裂时，_____发出的纺锤丝附着在着丝粒上。Shugshin 蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测, Shugshin蛋白的作用是______, 调控着丝粒分裂时间。
（4）分离酶的活性需要被严密调控。保全素能与分离酶紧密结合，并充当假底物而阻断其活性。下列叙述正确的有 。
A. 分离酶没有专一性
B. 保全素和黏连蛋白是同一种蛋白质
C. 保全素和黏连蛋白空间结构局部相似
D. 保全素和黏连蛋白竞争分离酶活性部位
（5）当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。根据上述材料推测其原因是_______。
【答案】（1） ①. G1 ②. 核孔
（2） ①. II ②. III ③. 赤道板 ④. 有丝分裂后期或减数第二次分裂后
（3） ①. DNA和蛋白质 ②. 中心体 ③. 保护粘连蛋白不被水解酶破坏 （4）CD
（5）低温导致分离酶的活性降低
【解析】
【分析】减数分裂过程：
（1）减数分裂前的间期：染色体的复制。
（2）减数第一次分裂：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分裂。
（3）减数第二次分裂：①前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；②中期：染色体形态固定、数目清晰；③后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。
【小问1详解】
在G1期细胞合成了蛋白质，为细胞分裂做准备，所以黏连蛋白是在细胞分裂间期的G1期合成的，然后通过核孔进入细胞核与染色体结合。
【小问2详解】
在减数第一次分裂前期，同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，黏连蛋白保护着姐妹染色单体防止分离，即处于图中的II状态，同源染色体分离时，则发生互换的姐妹染色单体要分离，则染色单体两端的黏连蛋白被水解，则处于图中的III状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的赤道板两侧的位置。III状态→Ⅳ状态过程即发生了着丝粒的分裂，即发生在有丝分裂后期或减数第二次分裂后期。
【小问3详解】
着丝粒是一段特殊的染色体片段，其组成成分与染色体的相同，都是DNA和蛋白质。动物细胞的纺锤丝是由中心体发出的。Shugshin蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测，Shugshin蛋白能保护粘连蛋白不被水解酶破坏，调控着丝粒分裂时间。
【小问4详解】
A、酶都具有专一性，分离酶也具有专一性，A错误；
B、保全素和黏连蛋白是不同种蛋白质，B错误；
C、保全素和黏连蛋白都能与分离酶结合，二者空间结构有局部相似之处，C正确；
D、保全素和黏连蛋白都能与分离酶结合，并充当假底物而阻断其活性，竞争分离酶的活性部位，D正确。
故选CD。
【小问5详解】
低温导致酶的活性降低，所以当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，分离酶的活性降低，分解黏连蛋白的速度降低，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。
23. 无缝克隆技术是依靠同源序列碱基间的配对能使载体和目的基因较为紧密地连在一起，实现 DNA 片段无缝连接的技术。其基本原理及过程如下图 1 所示。请回答相关问题：
（1）图1中①过程通过______方法获得线性化质粒，引物A和B要依据_______序列进行设计。
（2）从冰箱拿出②过程所需试剂，放在_______上缓慢融化，在离心管中加入各种反应成分后，需进行______操作，使反应液集中于离心管底部。
（3）用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，能形成_______。该酶催化的最适温度为37℃，而过程③选择的温度为50℃，目的是降低酶活性，_______。
（4）与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有 。
A. 避免限制酶切割对质粒功能区的破坏
B. 不会引入多余碱基
C. 可把目的基因插入质粒的任何位点
D. 操作时间短，成功率高
（5）不对称PCR 常用于制备DNA探针。其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物，在PCR 反应的早期10-15 个循环中，扩增产物主要是双链DNA，当数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA 单链。
①若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用上图2中引物_______；如果体系中原有模板 DNA 的数量为m，最初10次循环产物为双链，后20次循环产物为单链，则最终获得的单链探针数为______。因为 DNA 单链与双链的分子量不同，可通过______将单链探针 DNA 分离出来。
②为精确控制产物生成量，科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是_______。
【答案】（1） ①. PCR ②. 质粒与目的基因
（2） ①. 冰块 ②. 离心
（3） ①. 黏性末端 ②. 防止过度水解DNA （4）ABCD
（5） ①. Ⅳ ②. 20×210·m ③. (琼脂糖凝胶）电泳 ④. 引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏
【解析】
【分析】1、PCR技术：
(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
(2)原理：DNA半保留复制。
(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
(4)条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、耐高温的DNA聚合酶。
(5)过程：变性一复性一延伸。
2、无缝克隆区别于传统PCR产物克隆，唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）依靠自身酶系将缺口修复。
【小问1详解】
据图1可知，图中①过程获得线性化质粒时利用到了引物，故获得线性化质粒的方法为PCR技术。引物是一小段能与DNA 母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，据图可知， 利用引物A和引物B扩增得到的DNA片段要含有目的基因，且能与线性化质粒连接，因此，引物A和B要依据质粒与目的基因序列进行设计。
【小问2详解】
进行PCR扩增时，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。然后 用微量移液器按照PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入各组分。待所有的组分都加入后，盖严离心管的盖子。将微量离心管放入离心机里，离心约10s，使反应液集中在管的底部。
【小问3详解】
由图可知，无缝克隆时，过程中用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，形成黏性末端。温度能影响酶活性，该酶催化的最活温度为37℃，而过程①选择的温度为50℃，其目的是降低酶活性，防止过度水解DNA。
【小问4详解】
无缝克隆与传统PCR产物克隆唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）依靠自身酶系将缺口修复。无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体。因此，与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有：避免限制酶切割对质粒功能区的破坏、不会引入多余碱基、可把目的基因插入质粒的任何位点、操作时间短且成功率高等优点，因此，ABCD都符合题意。
故选ABCD。
【小问5详解】
①DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，引物Ⅱ和Ⅲ无意义；若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物Ⅳ，引物Ⅳ引导合成的序列和B互补和A相同。如果体系中原模板DNA的数量为m，最初10次循环产物为双链DNA分子为210×m个，其中有B链为210×m个，以这些链为模板，利用引物又进行了20次循环，每次循环生成的都是A，不改变B的数目，即B每次循环开始都是210×m个，20次循环每次生成A也是210×m个，共20×210×m个A。因为DNA单链与双链的分子量不同，可通过电泳将单链探针DNA分离出来。
②限制性引物较短，引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏。
溶剂
色素1
色素2
色素3
色素4
实验组1
7.8
?
?
1.9
?
实验组2
8.2
?
?
1.5
?
实验组3
8.0
?
?
1.4
?
平均移动距离(cm)
8.0
7.6
?
?
0.8
迁移率(Rf)
无
0.95
0.53
?
0.10
序号
指 标
限 值
1
总大肠杆菌/(MPN/100mL 或 CFU/100mL)
不应检出
2
大肠埃希氏菌/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
不应检出
3
菌落总数/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
100
MPN表示最可能数， CFU表示菌落形成单位
注意事项：
1.本试卷共分两部分，第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。
2.所有试题的答案均填写在答题纸上，答案写在试卷上的无效。
第Ⅰ卷(选择题 共40 分)
一、单项选择题(共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意)
1. 甜味剂低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，不能被人体直接消化吸收，但能被肠道双歧杆菌利用，具有调节肠道菌群、促进肠道对钙的吸收、抗龋齿等保健功能。下列分析正确的是（ ）
A. 低聚果糖彻底水解产物包括蔗糖和果糖两种单糖分子
B. 糖尿病患者可大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥
C. 与胆固醇功能类似，低聚果糖可有效防止骨质疏松症
D. 推测造成龋齿的口腔细菌可能不吸收利用低聚果糖
2. 拟南芥液泡膜上存在 Na⁺-H⁺逆向转运蛋白，它可以利用液泡内外的 H⁺电化学梯度吸收 Na⁺。部分物质跨液泡膜转运过程如下图所示，据图判断，下列叙述正确的是（ ）
A. 液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度低而呈酸性
B. 是否消耗能量是 Na⁺进液泡与H⁺进液泡的区别之一
C. H₂O 通过与水通道蛋白结合以协助扩散方式进出液泡
D. Cl⁻进入液泡与H⁺运出液泡的运输方式都是协助扩散
3. 下图为蓝细菌的结构模式图及部分代谢过程示意图(光合片层是同心环样的膜片层结构，羧酶体是具外壳蛋白的多角形内含体)，下列叙述错误的是（ ）
A. 蓝细菌光合片层上产生的物质C、F分别为NADPH、ATP
B. 蓝细菌捕获光能的色素是叶绿素和藻蓝素，暗反应都在羧酶体内进行
C. 羧酶体的外壳会阻止O2进入和CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境
D. 蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，使细胞中的CO2浓度保持在较高水平
4. 微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，与细胞生命活动密切相关。秋水仙素可以阻止微管的组装，紫杉醇可以阻止微管的去组装。下列说法错误的是（ ）
A. 细胞骨架维持着细胞形态，锚定并支撑着众多细胞器
B. 不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异
C. 秋水仙素能阻止植物细胞的有丝分裂，而紫杉醇不能
D. 适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗
5. 立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，是专性寄生于真核细胞内的病原体，在体外很难培养。医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据。下列说法错误的是（ ）
A. 不同于宿主细胞，立克次氏体遗传物质是RNA
B. 立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体
C. 立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇
D. 患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集
6. 我国学者研究发现细胞在迁移过程中，细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状细胞器，命名为迁移体(如下图箭头所指)。敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷。下列有关迁移体的说法错误的是（ ）
A. 迁移体膜的主要成分为脂质和蛋白质
B. 迁移体形成说明细胞膜具选择透过性
C. 迁移体的形成需要细胞骨架等的参与
D. 迁移体可能对细胞间信息传递具有作用
7. 每餐吃“七分饱”是中国传统养生观念。哺乳动物实验证明，如果将正常饮食减少三至四成，则寿命可延长百分之三十左右。下列有关“七分饱”说法，错误的是（ ）
A. 可以减少热量摄入从而减少肥胖可能
B. 有利于胃肠消化、吸收功能正常运转
C. 应增加脂类食物比例以保证能量供应
D. 增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器
8. 纸层析法分离叶绿体色素时，可用迁移率(Rf)来鉴定色素的种类，迁移率=色素移动距离/溶剂移动距离。下表是叶绿体中色素层析结果(部分数据)。相关叙述正确的是（ ）
A. 该实验所用的层析液中包含苯、丙酮、无水乙醇等成分
B. 色素3的迁移率(Rf)为0.2，若植物体缺镁，该色素含量会减少
C. 色素1和2 主要吸收红光和蓝紫光，色素3 和4主要吸收蓝紫光
D. 根尖细胞中不含叶绿素及相关基因，不能作为提取色素的材料
9. 无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（ ）
A. 不同来源的血清成分存在一定差异
B. 血清的质量稳定性和储存时间有限
C. 无血清培养液利于无关变量的控制
D 无血清培养液能满足细胞所有需求
10. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A. 在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核
B. 精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C. 对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
11. 2023年 4月我国新版《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2022)正式实施，其中对微生物的检出要求如下表。兴趣小组的同学们对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。结合下表分析，下列说法错误的是（ ）
A. 可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法对取水样三角瓶灭菌
B. 培养基中应加入伊红—亚甲蓝以区分大肠杆菌和其他细菌菌落
C. 应将0.1mL 稀释水样滴加到培养基表面并用涂布器涂抹均匀
D. 应将平板倒置后在适宜条件下培养，以减少培养基污染的几率
12. 普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（ ）
A. 克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A
B. 因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响
C. 克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似
D. 融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达
13. 在利用新鲜洋葱进行DNA 粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前用液氮冷冻处理洋葱有利于 DNA 释放
B. 向研磨离心后的上清液中加入75%冷酒精可使DNA 大量析出
C. 将析出白色丝状物的溶液再离心，弃去上清液留下沉淀物
D. 向溶有丝状物的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴后会出现蓝色
14. 植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（ ）
A. 植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用
B. 植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定
C. 培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水
D. 大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染
二、多项选择题(共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分)
15. 下图a～d分别是水稻（2n＝24）花粉母细胞减数分裂不同时期的显微照片。相关叙述正确的是（ ）
A. 图a细胞中亮斑是正在螺旋化的染色体
B. 图b细胞正在发生染色体的解螺旋
C. 图c细胞中染色体的着丝粒已经分裂
D. 图d细胞中存在48个姐妹染色单体
16. 下列关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 在 10时~14时剪取洋葱根尖进行实验较容易找到分裂期细胞
B. 实验中染色剂甲紫溶液进入细胞内需消耗线粒体产生ATP
C. 在根尖细胞呈长方形的区域找到的分裂中期细胞数目最多
D. 对根尖细胞先染色后进行漂洗，可使染色体的形态更加清晰
17. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。分别用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如下图所示。下列关于质粒粗提取和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜
B. 为排除RNA 对实验结果干扰，需用RNA 水解酶处理上清液
C. 电泳鉴定时，被染色的质粒还需要在紫外灯下才能看到结果
D. 根据电泳结果，质粒上一定各有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点
18. 下列关于高中生物学实验的原理、方法、过程以及结论的叙述，错误的是（ ）
A. 为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加多滴蔗糖溶液
B. 高温变性后的蛋白质未经加热也能与双缩脲试剂发生紫色显色反应
C. 观察细胞质流动时，可见正方形黑藻叶肉细胞中叶绿体绕液泡流动
D. 连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，但易出现色素带重叠
第 II 卷 (非选择题共60分)
三、非选择题(共5题，共60分。除特别说明外，每空1分)
19. 自然界的植物丰富多样，对环境的适应也各有特色。下图是水稻和玉米的光合作用暗反应及相关代谢示意图。请据图回答相关问题：
（1）水稻在高温、光照强烈、干旱环境中，由于气孔关闭造成______，而不利于光合作用，过多的O₂可通过______过程消耗。与水稻相比，玉米多一种_______酶参与固定CO₂,该酶比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，因此玉米更能适应_______的环境。
（2）因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，推测其C₃还原过程需要的_____来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自_______(填生理过程)。玉米体内也存在光呼吸现象，炎热干燥气候下，C₄循环可以______(填“降低”或“提高”)光呼吸。
（3）科研人员给予水稻48小时持续光照，测定叶肉细胞中的淀粉量，结果如下图2所示。
图2实验结果反映出淀粉积累量与时间的变化关系是_______。
20. 泡菜是以新鲜蔬菜为原料，在乳酸菌等菌群的作用下发酵而成。控制发酵条件以及亚硝酸盐含量至关重要。请回答下列问题：
（1）在结构上，乳酸菌相对于酵母菌最大的区别是_______。
（2）泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行______(填“无氧”或“有氧”)发酵，在细胞的_______(场所)产生乳酸。泡菜制作程序和方法直接决定了泡菜的品质，下列叙述错误的有_______。
①将切成块状的新鲜蔬菜装满泡菜坛，加入香辛料并倒入冷却好的盐水
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无菌环境
④泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
（3）研究者尝试分离能产生亚硝酸盐还原酶(降解亚硝酸盐)的乳杆菌P51。分离时应先将泡菜滤液用______进行梯度稀释，再用_______法分离纯化，以便获得_______。
（4）研究者利用乳杆菌P51探究温度和加盐量对其降解亚硝酸盐的影响，结果如下图1、2。
据图1分析，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是_______。
据图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而_______，在食盐含量为_______时，降解率受到明显抑制。结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是_______。
21. 在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题：
（1）为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射_______，以期获得更多_______的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为_______的CO₂培养箱。
（2）图1中可运用______诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜的_______功能。图中筛选2运用_______等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
（3）根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是____，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
（4）治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量)
由图2可知，PD-L1的抗体对_______肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是_______。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是_______。
22. 染色体完成复制后产生的姐妹染色单体保持相互黏附状态。黏连蛋白(姐妹染色单体之间的连结蛋白)的裂解是分离姐妹染色单体的关键性事件，分离酶能水解黏连蛋白。下图示细胞分裂过程中某染色体的变化情况，请据图回答：
（1）黏连蛋白是在细胞分裂间期的______期合成后通过_______进入细胞核。
（2）同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，细胞中染色体处于图中_______状态。同源染色体分离时染色体处于______状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的_______位置。III状态→Ⅳ状态过程发生在______期(2 分)。
（3）着丝粒是一段特殊的染色体片段，其物质组成主要为______。动物细胞分裂时，_____发出的纺锤丝附着在着丝粒上。Shugshin 蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测, Shugshin蛋白的作用是______, 调控着丝粒分裂时间。
（4）分离酶的活性需要被严密调控。保全素能与分离酶紧密结合，并充当假底物而阻断其活性。下列叙述正确的有 。
A. 分离酶没有专一性
B. 保全素和黏连蛋白是同一种蛋白质
C. 保全素和黏连蛋白空间结构局部相似
D. 保全素和黏连蛋白竞争分离酶活性部位
（5）当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。根据上述材料推测其原因是_______。
23. 无缝克隆技术是依靠同源序列碱基间的配对能使载体和目的基因较为紧密地连在一起，实现 DNA 片段无缝连接的技术。其基本原理及过程如下图 1 所示。请回答相关问题：
（1）图1中①过程通过______方法获得线性化质粒，引物A和B要依据_______序列进行设计。
（2）从冰箱拿出②过程所需试剂，放在_______上缓慢融化，在离心管中加入各种反应成分后，需进行______操作，使反应液集中于离心管底部。
（3）用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，能形成_______。该酶催化的最适温度为37℃，而过程③选择的温度为50℃，目的是降低酶活性，_______。
（4）与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有 。
A. 避免限制酶切割对质粒功能区的破坏
B. 不会引入多余碱基
C. 可把目的基因插入质粒的任何位点
D. 操作时间短，成功率高
（5）不对称PCR 常用于制备DNA探针。其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物，在PCR 反应的早期10-15 个循环中，扩增产物主要是双链DNA，当数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA 单链。
①若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用上图2中引物_______；如果体系中原有模板 DNA 的数量为m，最初10次循环产物为双链，后20次循环产物为单链，则最终获得的单链探针数为______。因为 DNA 单链与双链的分子量不同，可通过______将单链探针 DNA 分离出来。
②为精确控制产物生成量，科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是_______。溶剂
色素1
色素2
色素3
色素4
实验组1
7.8
?
?
1.9
?
实验组2
8.2
?
?
1.5
?
实验组3
8.0
?
?
1.4
?
平均移动距离(cm)
8.0
7.6
?
?
0.8
迁移率(Rf)
无
095
0.53
?
0.10
序号
指 标
限 值
1
总大肠杆菌/(MPN/100mL 或 CFU/100mL)
不应检出
2
大肠埃希氏菌/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
不应检出
3
菌落总数/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
100
MPN表示最可能数， CFU表示菌落形成单位
2023~2024学年度第二学期期末考试
高二生物试题
(考试时间: 75分钟; 总分: 100分)
注意事项：
1.本试卷共分两部分，第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。
2.所有试题的答案均填写在答题纸上，答案写在试卷上的无效。
第Ⅰ卷(选择题 共40 分)
一、单项选择题(共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意)
1. 甜味剂低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，不能被人体直接消化吸收，但能被肠道双歧杆菌利用，具有调节肠道菌群、促进肠道对钙的吸收、抗龋齿等保健功能。下列分析正确的是（ ）
A. 低聚果糖彻底水解产物包括蔗糖和果糖两种单糖分子
B. 糖尿病患者可大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥
C. 与胆固醇功能类似，低聚果糖可有效防止骨质疏松症
D. 推测造成龋齿的口腔细菌可能不吸收利用低聚果糖
【答案】D
【解析】
【分析】①糖类大致可以分为单糖、二糖、多糖等几类。蔗糖属于二糖，需水解成单糖后才能被细胞吸收。淀粉是植物细胞中特有的多糖。②脂质包括脂肪、磷脂和固醇，固醇又包括胆固醇、性激素和维生素D。胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，在人体内还参与血液中脂质的运输。
【详解】A、1分子蔗糖是由1分子果糖和1分子葡萄糖脱水缩合而成的。低聚果糖由1分子蔗糖与1～3分子果糖聚合而成，因此，低聚果糖彻底水解产物包括葡萄糖和果糖两种单糖分子，A错误；
B、桃酥富含淀粉，脂肪含量也较高，糖尿病患者不能大量食用以低聚果糖作为甜味剂的桃酥，B错误；
C、低聚果糖能促进肠道对钙的吸收，有效防止骨质疏松症，胆固醇没有防止骨质疏松症的功能，C错误；
D、低聚果糖有可能是不被口腔细菌吸收利用，因此具有抗龋齿功能，D正确。
故选D。
2. 拟南芥液泡膜上存在 Na⁺-H⁺逆向转运蛋白，它可以利用液泡内外的 H⁺电化学梯度吸收 Na⁺。部分物质跨液泡膜转运过程如下图所示，据图判断，下列叙述正确的是（ ）
A. 液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度低而呈酸性
B. 是否消耗能量是 Na⁺进液泡与H⁺进液泡的区别之一
C. H₂O 通过与水通道蛋白结合以协助扩散方式进出液泡
D. Cl⁻进入液泡与H⁺运出液泡的运输方式都是协助扩散
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：由图可知， H+进入液泡需要消耗能量，也需要载体蛋白，故跨膜运输方式为主动运输，则液泡内的细胞液中H+浓度大于细胞质基质中H+浓度，说明H+运出液泡是顺浓度梯度，且H⁺运出液泡依赖载体蛋白，因此跨膜运输方式是协助扩散；液泡膜上的Na+ /H+逆向转运蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+转运到液泡内，说明Na+进入液泡的直接驱动力是液泡膜两侧的H+电化学梯度，因此该过程Na+的进入液泡的方式为主动运输。
【详解】A、图中H⁺进入液泡需要消耗能量，属于主动运输，从低浓度到高浓度，因此推测液泡内H⁺浓度高，溶酶体含大量的酸性水解酶，因此液泡与动物细胞的溶酶体内都因H⁺浓度高而呈酸性，A错误；
B、据图可知，H⁺进液泡消耗ATP水解释放的能量，因此推测液泡内H⁺浓度高。液泡膜上的Na+ /H+逆向转运蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+转运到液泡内，说明Na+进入液泡的消耗的能量是液泡膜两侧的H+电化学梯度提供的能量。因此， Na⁺进液泡与H⁺进液泡都要消耗能量，在这一点上是相同的，B错误；
C、据图可知，H2O借助水通道蛋白以协助扩散的方式进出液泡，但H2O不会与水通道蛋白结合，C错误；
D、据图可知，Cl− 借助通道蛋白，以协助扩散的方式由细胞质基质进入液泡；由图可知， H+进入液泡的跨膜运输方式为主动运输，则液泡内的细胞液中H+浓度大于细胞质基质中H+浓度，说明H+运出液泡是顺浓度梯度。且H⁺运出液泡依赖载体蛋白，因此，H⁺运出液泡的运输方式是协助扩散，D正确。
故选D。
3. 下图为蓝细菌的结构模式图及部分代谢过程示意图(光合片层是同心环样的膜片层结构，羧酶体是具外壳蛋白的多角形内含体)，下列叙述错误的是（ ）
A. 蓝细菌光合片层上产生的物质C、F分别为NADPH、ATP
B. 蓝细菌捕获光能的色素是叶绿素和藻蓝素，暗反应都在羧酶体内进行
C. 羧酶体的外壳会阻止O2进入和CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境
D. 蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，使细胞中的CO2浓度保持在较高水平
【答案】B
【解析】
【分析】根据细胞内有无以核膜为界限的细胞核，把细胞分为真核细胞和原核细胞两大类，原核细胞是组成原核生物的细胞这类细胞主要特征是没有以核膜为界限的细胞核, 同时也没有核膜和核仁, 只有拟核。根据外表特征，可把原核生物分为放线菌、细菌、支原体、立克次氏体和衣原体等。
【详解】A、G被光解形成A和O2，则A是H+，H++B+e-=C，则C是NADPH，F和C用于还原C3，则F是ATP，A正确；
B、据图可知C3的还原在羧酶体外，所以并不是所有的暗反应过程都在羧酶体内进行，B错误；
C、据图可知，羧酶体的外壳会阻止O2进入，同时有多个途径运输碳酸氢根，防止CO2逃逸，保持羧酶体内高 CO2浓度环境，C正确；
D、蓝细菌有碳泵等多个无机碳运输途径，能使细胞中的CO2浓度保持在较高水平，有利于光合作用的进行，D正确。
故选B。
4. 微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，与细胞生命活动密切相关。秋水仙素可以阻止微管的组装，紫杉醇可以阻止微管的去组装。下列说法错误的是（ ）
A. 细胞骨架维持着细胞形态，锚定并支撑着众多细胞器
B. 不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异
C. 秋水仙素能阻止植物细胞的有丝分裂，而紫杉醇不能
D. 适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗
【答案】C
【解析】
【分析】细胞骨架是真核细胞中由蛋白质纤维组成的网架结构，维持细胞形状并控制细胞运动是细胞骨架最显著的作用，对动物细胞尤其重要；细胞骨架也与细胞的活动有关，细胞活动包括整个细胞位置的移动以及细胞某些部分的有限的运动；在物质运输、能量转换、信息传递和细胞分裂、细胞分化等一系列方面起重要作用。
【详解】A、维持细胞形状并控制细胞运动是细胞骨架最显著的作用，同时细胞骨架锚定并支撑着许多细胞器，与细胞运动、分裂、分化以及物质运输、能量转化、信息传递等生命活动密切相关，A正确；
B、微管属于细胞骨架的一种，处于组装和去组装的动态平衡中，所以不同生理状态下的细胞内，微管含量存在一定的差异，B正确；
C、紫杉醇可以阻止微管的去组装，可抑制细胞有丝分裂，C错误；
D、秋水仙素可以阻止微管的组装，可以影响癌细胞的增殖，紫杉醇可以阻止微管的去组装,从而抑制癌细胞增殖，所以适宜浓度秋水仙素和紫杉醇都能用于癌症的临床治疗，D正确。
故选C。
5. 立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，是专性寄生于真核细胞内的病原体，在体外很难培养。医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据。下列说法错误的是（ ）
A. 不同于宿主细胞，立克次氏体遗传物质是RNA
B. 立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体
C. 立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇
D. 患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集
【答案】A
【解析】
【分析】具有细胞结构的生物的遗传物质是DNA，不具有细胞结构的病毒的遗传物质是DNA或RNA。
【详解】A、立克次氏体是原核生物，具有细胞结构，故其遗传物质是DNA，A错误；
B、分析题意，立克次氏体是介于细菌与病毒之间的一类原核生物，由此可知，立克次氏体包括多个物种，故立克次氏体进入人体会诱导产生多种类型抗体，B正确；
C、分析题意，医学上常采用变形杆菌与患者的血清反应，作为是否感染立克次氏体的诊断依据，由此可推测，立克次氏体和变形杆菌具有相同的抗原决定簇，C正确；
D、根据抗原—抗体特异性结合的原理可知，患者血清中的特定抗体会使变形杆菌产生细胞聚集，D正确。
故选A。
6. 我国学者研究发现细胞在迁移过程中，细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状细胞器，命名为迁移体(如下图箭头所指)。敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷。下列有关迁移体的说法错误的是（ ）
A. 迁移体膜的主要成分为脂质和蛋白质
B. 迁移体形成说明细胞膜具选择透过性
C. 迁移体的形成需要细胞骨架等的参与
D. 迁移体可能对细胞间信息传递具有作用
【答案】B
【解析】
【分析】据题意可知，迁移体是细胞向外释放的一种囊泡结构，迁移体能起到细胞间物质传递的作用，细胞在迁移的过程中，迁移体发挥着重要作用。
【详解】A、迁移体是细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状的细胞器，其膜的主要成分为脂质（磷脂）和蛋白质，A正确；
B、迁移体是一种细胞尾部收缩丝的尖端或分叉处会产生膜性囊泡状的细胞器，故迁移体的形成说明细胞膜具有一定的流动性，B错误；
C、由图可知，在细胞迁移过程中，细胞通过收缩纤维的管道，持续把一些胞内物质运输到迁移体中，迁移体的形成与细胞骨架有关，C正确；
D、敲除斑马鱼迁移体形成所必需的一系列基因，发现鱼的胚胎中迁移体的数量减少，且出现了器官形成缺陷，可说明迁移体可能对细胞间信息传递具有作用，D正确。
故选B。
7. 每餐吃“七分饱”是中国传统养生观念。哺乳动物实验证明，如果将正常饮食减少三至四成，则寿命可延长百分之三十左右。下列有关“七分饱”的说法，错误的是（ ）
A. 可以减少热量摄入从而减少肥胖可能
B. 有利于胃肠消化、吸收功能正常运转
C. 应增加脂类食物比例以保证能量供应
D. 增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器
【答案】C
【解析】
【分析】通俗地说，细胞自噬就是细胞吃掉自身的结构和物质。在一定条件下，细胞会将受损或功能退化的细胞结构等，通过溶酶体降解后再利用，这就是细胞自噬。处于营养缺乏条件下的细胞，通过细胞自噬可以获得维持生存所需的物质和能量；在细胞受到损伤、微生物入侵或细胞衰老时，通过细胞自噬，可以清除受损或衰老的细胞器，以及感染的微生物和毒素，从而维持细胞内部环境的稳定。
【详解】A、“七分饱”，可以减少每餐的热量摄入，有助于避免脂肪的积累，从而减少肥胖的可能，A正确；
B、“七分饱”，有助于减轻胃肠的消化负担，有利于胃肠消化、吸收功能正常运转，B正确；
C、“七分饱”是指在提供充分的营养成分、保证不发生营养不良的情况下适量地减少每餐食物的摄入，若增加食物中脂类的比例，有可能导致肥胖，因此不能增加脂类食物的比例，C错误；
D、长期坚持“七分饱”，可能会使细胞自噬的功能加强，有助于机体及时清除受损或衰老的细胞器，即增加细胞自噬，减少衰老损伤的细胞器，D正确。
故选C。
8. 纸层析法分离叶绿体色素时，可用迁移率(Rf)来鉴定色素的种类，迁移率=色素移动距离/溶剂移动距离。下表是叶绿体中色素层析结果(部分数据)。相关叙述正确的是（ ）
A. 该实验所用的层析液中包含苯、丙酮、无水乙醇等成分
B. 色素3的迁移率(Rf)为0.2，若植物体缺镁，该色素含量会减少
C. 色素1和2 主要吸收红光和蓝紫光，色素3 和4主要吸收蓝紫光
D. 根尖细胞中不含叶绿素及相关基因，不能作为提取色素的材料
【答案】B
【解析】
【分析】分离色素利用纸层析法，原理是四种色素在层析液中溶解度不同，溶液度高的扩散速度快，结果从上而下分别是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色）。
【详解】A、该实验所用的层析液由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成，A错误；
B、根据实验1、2、3三组数据可求出，色素3平均移动距离为（1.9+1.5+1.4）3=1.6，溶剂平均移动距离为（7.8+8.2+8.0） 3=8.0，所以Rf值为1.6/8.0=0.2。根据Rf的大小可知，色素3是叶绿素a，其化学元素组成有镁，若植物体缺镁，该色素含量会减少，B正确；
C、根据Rf的大小可知，色素1是胡萝卜素，色素2是叶黄素，色素3是叶绿素a，色素4是叶绿素b。叶绿素（3和4）主要吸收红光和蓝紫光，类胡萝卜素（1和2）主要吸收蓝紫光，C错误；
D、根尖细胞中不含叶绿素，不能作为提取色素的材料，但是含有相关基因，D错误。
故选B。
9. 无血清培养液指不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。有关叙述错误的是（ ）
A. 不同来源的血清成分存在一定差异
B. 血清质量稳定性和储存时间有限
C. 无血清培养液利于无关变量的控制
D. 无血清培养液能满足细胞所有需求
【答案】D
【解析】
【分析】血清是成分不完全明确的复杂混合物，且不同批次的血清在质量上存在很大差异，增加了含血清培养基无关比变量的控制难度，无血清培养液利于无关变量的控制。
【详解】AC、不同个体基因不同，所以不同来源的血清成分存在一定差异，无血清培养液利于无关变量的控制，AC正确；
B、由于环境的影响，血清的质量稳定性和储存时间有限，B正确；
D、血清是成分不完全明确的复杂混合物，无血清培养液能满足细胞基本需求，但不能满足所有需求，D错误。
故选D。
10. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（ ）
A. 在精子的刺激下，卵子完成减数分裂II，排出第二极体后形成雌原核
B. 精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞
C. 对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割
D. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术
【答案】C
【解析】
【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。
【详解】AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减 数分裂Ⅱ、排出第二极体、形成雌原核，AB正确；
C、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，C错误；
D、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，D正确。
故选C。
11. 2023年 4月我国新版《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2022)正式实施，其中对微生物的检出要求如下表。兴趣小组的同学们对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。结合下表分析，下列说法错误的是（ ）
A. 可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法对取水样的三角瓶灭菌
B. 培养基中应加入伊红—亚甲蓝以区分大肠杆菌和其他细菌菌落
C. 应将0.1mL 稀释水样滴加到培养基表面并用涂布器涂抹均匀
D. 应将平板倒置后在适宜条件下培养，以减少培养基污染的几率
【答案】C
【解析】
【分析】获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、用三角瓶取水样前，为了防止外来杂菌污染，三角瓶（玻璃制品）可采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌，A正确；
B、大肠杆菌的代谢产物能与培养基中的染料伊红—亚甲蓝反应，使菌落呈黑色，所以可根据培养基上的菌落是否呈现黑色来区分大肠杆菌和其他细菌菌落，B正确；
C、对某蓄水池进行细菌总数测定，不应对所取的水样进行稀释，C错误；
D、为了减少培养基污染的几率，在平板上接种菌液后，应将平板倒置在培养箱里培养，并提供适宜的培养条件，D正确。
故选C。
12. 普通绵羊通常可存活11到12年，克隆羊多利因肺部感染不到7岁就被实施“安乐死”。下图为克隆羊培育示意图，下列说法正确的是（ ）
A. 克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A
B. 因代孕母羊C未提供遗传物质，所以克隆羊的性状不受其影响
C. 克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利类似
D. 融合细胞发育成桑葚胚的过程中未发生基因选择性表达
【答案】A
【解析】
【分析】克隆羊培育的原理：通过将体细胞的核植入去核卵细胞的方式，激活染色组的功能，实现体细胞向多能干细胞的跨越。理论上，这样的多能干细胞就有发育为完整生物个体的潜力。
【详解】A、母羊A提供了细胞质，母羊B提供了细胞核，则克隆羊的遗传性状主要像供体母羊B，某些性状像供体母羊A，A正确；
B、代孕母羊C未提供遗传物质，但是为克隆羊提供了发育场所，克隆羊的性状会受其影响，B错误；
C、克隆羊多利与正常公羊交配产生的后代存活时间与多利不同，C错误；
D、供核母羊提供了已经分化细胞，融合细胞发育成桑葚胚的过程中发生了基因选择性表达，D错误。
故选A。
13. 在利用新鲜洋葱进行DNA 粗提取与鉴定实验中，相关叙述错误的是（ ）
A. 研磨前用液氮冷冻处理洋葱有利于 DNA 释放
B. 向研磨离心后的上清液中加入75%冷酒精可使DNA 大量析出
C. 将析出白色丝状物的溶液再离心，弃去上清液留下沉淀物
D. 向溶有丝状物的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴后会出现蓝色
【答案】B
【解析】
【分析】DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14ml/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
【详解】A、冷冻研磨可以从各种环境样本中获得高质量的 DNA，研磨前先用液氮冷冻处理洋葱，有利于DNA的释放，A正确；
B、向研磨离心后的上清液中加入95%冷酒精可使DNA 大量析出，B错误；
C、将出现白色丝状物（粗提取得到的DNA）的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀，C正确；
D、将DNA丝状物放入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液中，使其溶解，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D正确。
故选B。
14. 植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（ ）
A. 植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用
B. 植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定
C. 培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水
D. 大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染
【答案】C
【解析】
【分析】配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同时，植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成的渗透压可较长时间地保持相对稳定。
【详解】A、蔗糖为二糖，在蔗糖酶的作用下水解为1分子葡萄糖和1分子果糖，才能被细胞吸收，所以植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用，A正确；
B、植物细胞吸收蔗糖的速率明显低于吸收葡萄糖的速率，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定，B正确；
C、蔗糖的分子量大于葡萄糖，培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压低于葡萄糖，可防止细胞渗透失水，C错误；
D、微生物生长所需的碳源一般是葡萄糖，所以蔗糖作为碳源与葡萄糖相比，可在一定程度上减少微生物的污染，D正确。
故选C。
二、多项选择题(共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分)
15. 下图a～d分别是水稻（2n＝24）花粉母细胞减数分裂不同时期的显微照片。相关叙述正确的是（ ）
A. 图a细胞中亮斑是正在螺旋化的染色体
B. 图b细胞正在发生染色体的解螺旋
C. 图c细胞中染色体的着丝粒已经分裂
D. 图d细胞中存在48个姐妹染色单体
【答案】AD
【解析】
【分析】分析题图：a中同源染色体联会，处于减数第一次分裂前期；b中已经形成四个细胞，表示减数分裂已经结束，处于减数第二次分裂的末期；c中每一侧有12条染色体，应该处于减数第一次分裂后期；d中同源染色体成对的排列在赤道板上，处于减数第一次分裂中期；
【详解】A、图a细胞中正在发生同源染色体联会，此时染色质丝螺旋缠绕，缩短变粗，成为染色体，因此亮斑是正在螺旋化的染色体，A正确；
B、图b中已经形成四个细胞，表示减数分裂已经结束，因此已经完成染色体的解螺旋，B错误；
C、图c细胞中的每一侧有12条染色体，应该处于减数第一次分裂后期，染色体的着丝粒没有分裂，C错误；
D、水稻体细胞含有24条染色体。图d细胞处于减数第一次分裂中期，此时细胞中每条染色体含有2个姐妹染色单体，因此存在48个姐妹染色单体，D正确。
故选AD。
16. 下列关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验的叙述，错误的是（ ）
A. 10时~14时剪取洋葱根尖进行实验较容易找到分裂期细胞
B. 实验中染色剂甲紫溶液进入细胞内需消耗线粒体产生的ATP
C. 在根尖细胞呈长方形的区域找到的分裂中期细胞数目最多
D. 对根尖细胞先染色后进行漂洗，可使染色体的形态更加清晰
【答案】BCD
【解析】
【分析】观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）、漂洗（洗去解离液，便于染色）、染色（用甲紫、醋酸洋红等碱性染料）、制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）。
【详解】A、最好每天的10-14点取根，该时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期，更容易找到分裂期细胞，A正确；
B、用甲紫溶液染色时，细胞已经被杀死，甲紫溶液进入细胞内不需要消耗线粒体产生的ATP，B错误；
C、分生区细胞的特点是排列紧密，呈正方形，呈长方形的一般是伸长区细胞，C错误；
D、漂洗的目的是洗去根尖上的解离液，防止解离过度，同时避免与碱性染料发生中和反应，所以应该先漂洗再染色，D错误。
故选BCD。
17. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA会缠绕在细胞壁碎片上，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。分别用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如下图所示。下列关于质粒粗提取和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜
B. 为排除RNA 对实验结果干扰，需用RNA 水解酶处理上清液
C. 电泳鉴定时，被染色的质粒还需要在紫外灯下才能看到结果
D. 根据电泳结果，质粒上一定各有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点
【答案】AC
【解析】
【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、溶菌酶能溶解大肠杆菌的细胞壁，洗涤剂能瓦解其细胞膜，但对DNA没有影响，A正确；
B、细胞内有RNA水解酶，不需要加入RNA水解酶处理上清液，B错误；
C、电泳鉴定时，被染色的质粒还需要通过紫外灯，会发出荧光，在特定的仪器下能看到结果，C正确；
D、质粒的化学本质是环状的DNA，且由图可知，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有1个条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，即质粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位点，但限制酶III切割后有2个条带，故一定有限制酶III的切割位点，D错误。
故选AC。
18. 下列关于高中生物学实验的原理、方法、过程以及结论的叙述，错误的是（ ）
A. 为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加多滴蔗糖溶液
B. 高温变性后的蛋白质未经加热也能与双缩脲试剂发生紫色显色反应
C. 观察细胞质流动时，可见正方形黑藻叶肉细胞中叶绿体绕液泡流动
D. 连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，但易出现色素带重叠
【答案】AC
【解析】
【分析】绿叶中色素的提取和分离实验中，提取色素时需要加入无水乙醇（或丙酮）、石英砂和碳酸钙，其中无水乙醇或丙酮的作用是溶解色素；石英砂的作用是使研磨更充分；碳酸钙的作用是防止研磨过程中色素被破坏。
【详解】A、为尽快观察到质壁分离现象，应在盖玻片一侧滴加蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸，重复几次，洋葱细胞便可浸润在蔗糖溶液中，A错误；
B、高温变性后的蛋白质与未经加热的蛋白质都含有肽键，都能与双缩脲试剂发生紫色显色反应，B正确；
C、黑藻叶肉细胞中含有叶绿体，叶绿体存在于细胞质中，呈现绿色、扁平的椭球或球形，黑藻叶肉细胞呈长方形，叶绿体围绕液泡运动，C错误；
D、在提取和分离叶绿体色素时，若连续多次重复画滤液细线，会使滤液细线过宽，易出现色素带重叠，D正确。
故选AC。
第 II 卷 (非选择题共60分)
三、非选择题(共5题，共60分。除特别说明外，每空1分)
19. 自然界的植物丰富多样，对环境的适应也各有特色。下图是水稻和玉米的光合作用暗反应及相关代谢示意图。请据图回答相关问题：
（1）水稻在高温、光照强烈、干旱环境中，由于气孔关闭造成______，而不利于光合作用，过多的O₂可通过______过程消耗。与水稻相比，玉米多一种_______酶参与固定CO₂,该酶比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，因此玉米更能适应_______的环境。
（2）因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，推测其C₃还原过程需要的_____来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自_______(填生理过程)。玉米体内也存在光呼吸现象，炎热干燥气候下，C₄循环可以______(填“降低”或“提高”)光呼吸。
（3）科研人员给予水稻48小时持续光照，测定叶肉细胞中的淀粉量，结果如下图2所示。
图2实验结果反映出淀粉积累量与时间的变化关系是_______。
【答案】（1） ①. CO2不能进入叶片，同时引起O2在细胞内积累，抑制光反应和暗反应的进行 ②. 光呼吸 ③. PEPC ④. 低浓度CO2
（2） ①. ATP和NADPH ②. 呼吸作用 ③. 降低
（3）随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定
【解析】
【分析】由图1可知，玉米参与CO2固定的酶有Rubisc和PEPC，而水稻只有Rubisc。由图2可知，随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定。
【小问1详解】
在干旱、炎热的环境中，植物由于气孔关闭，造成CO2不能进入叶片，同时引起O2在细胞内积累，抑制光反应和暗反应的进行，从而不利于光合作用。由图可知，过多的O2可通过光呼吸消耗。玉米参与CO2固定的酶有Rubisc和PEPC，而水稻只有Rubisc，由于PEPC比Rubisc对CO₂的亲和力大且不与O₂亲和，所以玉米更适应干旱环境导致的低CO2状态。
【小问2详解】
因玉米维管束鞘细胞的叶绿体无基粒，不能进行光反应，不能产生ATP和NADPH，推测其C₃还原过程需要的ATP和NADPH来自叶肉细胞。维管束鞘细胞中丙酮酸除来自C₄的分解，还可来自呼吸作用产生的CO2。光呼吸时O2与CO2竞争C5，C₄循环可以通过增加CO2的浓度而降低光呼吸。
【小问3详解】
由图2可知，随着持续光照时间的延长，淀粉积累量先增加，后趋于稳定。
20. 泡菜是以新鲜蔬菜为原料，在乳酸菌等菌群的作用下发酵而成。控制发酵条件以及亚硝酸盐含量至关重要。请回答下列问题：
（1）在结构上，乳酸菌相对于酵母菌最大的区别是_______。
（2）泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行______(填“无氧”或“有氧”)发酵，在细胞的_______(场所)产生乳酸。泡菜制作程序和方法直接决定了泡菜的品质，下列叙述错误的有_______。
①将切成块状的新鲜蔬菜装满泡菜坛，加入香辛料并倒入冷却好的盐水
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无菌环境
④泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
（3）研究者尝试分离能产生亚硝酸盐还原酶(降解亚硝酸盐)的乳杆菌P51。分离时应先将泡菜滤液用______进行梯度稀释，再用_______法分离纯化，以便获得_______。
（4）研究者利用乳杆菌P51探究温度和加盐量对其降解亚硝酸盐影响，结果如下图1、2。
据图1分析，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是_______。
据图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而_______，在食盐含量为_______时，降解率受到明显抑制。结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是_______。
【答案】（1）没有核膜包被的细胞核
（2） ①. 无氧 ②. 细胞质基质 ③. ①③④
（3） ①. 无菌水 ②. 稀释涂布平板 ③. 能降解亚硝酸盐的乳酸菌单菌落
（4） ①. 37℃下乳酸菌的相应酶活性最高 ②. 增大 ③. 10% ④. 温度为37℃、食盐用量为4%
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。 （4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。 （5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【小问1详解】
乳酸菌（属于原核细胞）相对于酵母菌（属于真核细胞）最大的区别是没有核膜包被的细胞核。
【小问2详解】
乳酸菌为厌氧细菌，泡菜制作过程中乳酸菌能利用葡萄糖进行无氧发酵，在细胞质基质中产生乳酸。
①制作泡菜时将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，①错误；
②待沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的菌群被杀死，从而影响发酵的进行，②正确；
③盖好坛盖后向泡菜坛盖边沿的水槽中注水的目的是形成内部无氧环境，③错误；
④乳酸菌属于厌氧细菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，④错误。
故选①③④。
【小问3详解】
泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落，所以需要稀释，为了避免稀释过程中带入其他杂菌，需要用无菌水进行梯度稀释，随后再用稀释涂布平板法进行分离纯化，以便获得能降解亚硝酸盐的乳酸菌单菌落。
【小问4详解】
温度主要通过影响酶活性影响新陈代谢，在37℃下降解亚硝酸盐的速度较快，推测可能的原因是此时乳酸菌的相应酶活性最高。
由图2可知，24小时内，亚硝酸盐的降解率随发酵时间延长而增大，在食盐含量为10%时，降解率受到明显抑制。泡菜中亚硝酸盐的降解率越大，对人体的伤害越小，泡菜腌制时间过短，食盐用量过低，温度过高，都容易造成细菌大量滋生，亚硝酸盐含量增加，导致泡菜的品质下降，在保证泡菜品质情况下，结合图1和图2分析，利用乳杆菌P51进行泡菜制作的条件最好是温度为37℃、食盐用量为4%。
21. 在肿瘤微环境中, 肿瘤细胞PD-L1 表达量增加,与T细胞上的PD-1 结合, 抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人 PD-L1 的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题：
（1）为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1 实验。给小鼠甲多次注射_______，以期获得更多_______的B淋巴细胞。培养时要将细胞置于气体条件为_______的CO₂培养箱。
（2）图1中可运用______诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合，该过程需要利用细胞膜_______功能。图中筛选2运用_______等手段筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
（3）根据以上分析，抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是____，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
（4）治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞(OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7)裂解液中的 PD-L1 含量。(抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量)
由图2可知，PD-L1的抗体对_______肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是_______。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是_______。
【答案】（1） ①. 人PD-L1抗原 ②. 能够分泌抗人 PD-L1抗体 ③. 95%空气+5%CO2
（2） ①. 灭活的病毒 ②. 流动性 ③. 多孔的细胞培养板（抗原-抗体杂交）
（3）针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，使肿瘤细胞不能逃避T细胞的攻击
（4） ①. C13 ②. C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳 ③. 证明细胞的翻译功能是正常的
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测：（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、单克隆抗体的应用：（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于治疗疾病和运载药物：抗体上带有药物，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物一并带进靶细胞，引起靶细胞凋亡。
【小问1详解】
上述实验前必须给小鼠甲多次注射人PD-L1抗原，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗人 PD-L1抗体的B淋巴细胞。动物细胞培养时，需将细胞置于气体条件为95%空气+5%CO2的CO2培养箱。
【小问2详解】
诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，采用的诱导方法有灭活的病毒、电刺激融合、聚乙二醇等方法，其中灭活的病毒诱导融合为动物细胞特有的方法，不适用于植物原生质体融合。细胞融合利用细胞膜具有一定流动性的功能。筛选2是筛选出既能产生特定抗体又能无线增殖的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，利用抗体可与特定抗原结合的原理来检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。
【小问3详解】
抗人PD-Ll 的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是针对PD-1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，不能逃避T细胞的攻击，以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
【小问4详解】
由图2可知，C13肿瘤细胞 PD-L1 表达量最低，而PD-L1抗体对于 PD-L1 表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳，所以PD-L1的抗体对C13肿瘤细胞杀伤效果较低。β-actin基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-actin基因表达量的目的是证明细胞的翻译功能是正常的。
22. 染色体完成复制后产生的姐妹染色单体保持相互黏附状态。黏连蛋白(姐妹染色单体之间的连结蛋白)的裂解是分离姐妹染色单体的关键性事件，分离酶能水解黏连蛋白。下图示细胞分裂过程中某染色体的变化情况，请据图回答：
（1）黏连蛋白是在细胞分裂间期的______期合成后通过_______进入细胞核。
（2）同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，细胞中染色体处于图中_______状态。同源染色体分离时染色体处于______状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的_______位置。III状态→Ⅳ状态过程发生在______期(2 分)。
（3）着丝粒是一段特殊的染色体片段，其物质组成主要为______。动物细胞分裂时，_____发出的纺锤丝附着在着丝粒上。Shugshin 蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测, Shugshin蛋白的作用是______, 调控着丝粒分裂时间。
（4）分离酶的活性需要被严密调控。保全素能与分离酶紧密结合，并充当假底物而阻断其活性。下列叙述正确的有 。
A. 分离酶没有专一性
B. 保全素和黏连蛋白是同一种蛋白质
C. 保全素和黏连蛋白空间结构局部相似
D. 保全素和黏连蛋白竞争分离酶活性部位
（5）当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。根据上述材料推测其原因是_______。
【答案】（1） ①. G1 ②. 核孔
（2） ①. II ②. III ③. 赤道板 ④. 有丝分裂后期或减数第二次分裂后
（3） ①. DNA和蛋白质 ②. 中心体 ③. 保护粘连蛋白不被水解酶破坏 （4）CD
（5）低温导致分离酶的活性降低
【解析】
【分析】减数分裂过程：
（1）减数分裂前的间期：染色体的复制。
（2）减数第一次分裂：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分裂。
（3）减数第二次分裂：①前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；②中期：染色体形态固定、数目清晰；③后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。
【小问1详解】
在G1期细胞合成了蛋白质，为细胞分裂做准备，所以黏连蛋白是在细胞分裂间期的G1期合成的，然后通过核孔进入细胞核与染色体结合。
【小问2详解】
在减数第一次分裂前期，同源染色体的非姐妹染色单体发生交换时，黏连蛋白保护着姐妹染色单体防止分离，即处于图中的II状态，同源染色体分离时，则发生互换的姐妹染色单体要分离，则染色单体两端的黏连蛋白被水解，则处于图中的III状态。染色体处于Ⅲ状态时，染色体处于细胞的赤道板两侧的位置。III状态→Ⅳ状态过程即发生了着丝粒的分裂，即发生在有丝分裂后期或减数第二次分裂后期。
【小问3详解】
着丝粒是一段特殊的染色体片段，其组成成分与染色体的相同，都是DNA和蛋白质。动物细胞的纺锤丝是由中心体发出的。Shugshin蛋白可与着丝粒周围的黏连蛋白结合，细胞内水解黏连蛋白的酶(分离酶)在中期已开始发挥作用，但着丝粒却要到后期才断裂，据此推测，Shugshin蛋白能保护粘连蛋白不被水解酶破坏，调控着丝粒分裂时间。
【小问4详解】
A、酶都具有专一性，分离酶也具有专一性，A错误；
B、保全素和黏连蛋白是不同种蛋白质，B错误；
C、保全素和黏连蛋白都能与分离酶结合，二者空间结构有局部相似之处，C正确；
D、保全素和黏连蛋白都能与分离酶结合，并充当假底物而阻断其活性，竞争分离酶的活性部位，D正确。
故选CD。
【小问5详解】
低温导致酶的活性降低，所以当有丝分裂进行到中期时将细胞置于较低温度下，分离酶的活性降低，分解黏连蛋白的速度降低，则姐妹染色单体分离所需时间会延长。
23. 无缝克隆技术是依靠同源序列碱基间的配对能使载体和目的基因较为紧密地连在一起，实现 DNA 片段无缝连接的技术。其基本原理及过程如下图 1 所示。请回答相关问题：
（1）图1中①过程通过______方法获得线性化质粒，引物A和B要依据_______序列进行设计。
（2）从冰箱拿出②过程所需试剂，放在_______上缓慢融化，在离心管中加入各种反应成分后，需进行______操作，使反应液集中于离心管底部。
（3）用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，能形成_______。该酶催化的最适温度为37℃，而过程③选择的温度为50℃，目的是降低酶活性，_______。
（4）与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有 。
A. 避免限制酶切割对质粒功能区的破坏
B. 不会引入多余碱基
C. 可把目的基因插入质粒的任何位点
D. 操作时间短，成功率高
（5）不对称PCR 常用于制备DNA探针。其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物，在PCR 反应的早期10-15 个循环中，扩增产物主要是双链DNA，当数量较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA 单链。
①若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用上图2中引物_______；如果体系中原有模板 DNA 的数量为m，最初10次循环产物为双链，后20次循环产物为单链，则最终获得的单链探针数为______。因为 DNA 单链与双链的分子量不同，可通过______将单链探针 DNA 分离出来。
②为精确控制产物生成量，科学家尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是_______。
【答案】（1） ①. PCR ②. 质粒与目的基因
（2） ①. 冰块 ②. 离心
（3） ①. 黏性末端 ②. 防止过度水解DNA （4）ABCD
（5） ①. Ⅳ ②. 20×210·m ③. (琼脂糖凝胶）电泳 ④. 引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏
【解析】
【分析】1、PCR技术：
(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
(2)原理：DNA半保留复制。
(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
(4)条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、耐高温的DNA聚合酶。
(5)过程：变性一复性一延伸。
2、无缝克隆区别于传统PCR产物克隆，唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）依靠自身酶系将缺口修复。
【小问1详解】
据图1可知，图中①过程获得线性化质粒时利用到了引物，故获得线性化质粒的方法为PCR技术。引物是一小段能与DNA 母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，据图可知， 利用引物A和引物B扩增得到的DNA片段要含有目的基因，且能与线性化质粒连接，因此，引物A和B要依据质粒与目的基因序列进行设计。
【小问2详解】
进行PCR扩增时，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。然后 用微量移液器按照PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入各组分。待所有的组分都加入后，盖严离心管的盖子。将微量离心管放入离心机里，离心约10s，使反应液集中在管的底部。
【小问3详解】
由图可知，无缝克隆时，过程中用In-Fusin酶沿5'→3'方向水解DNA，形成黏性末端。温度能影响酶活性，该酶催化的最活温度为37℃，而过程①选择的温度为50℃，其目的是降低酶活性，防止过度水解DNA。
【小问4详解】
无缝克隆与传统PCR产物克隆唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）依靠自身酶系将缺口修复。无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体。因此，与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有：避免限制酶切割对质粒功能区的破坏、不会引入多余碱基、可把目的基因插入质粒的任何位点、操作时间短且成功率高等优点，因此，ABCD都符合题意。
故选ABCD。
【小问5详解】
①DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，引物Ⅱ和Ⅲ无意义；若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物Ⅳ，引物Ⅳ引导合成的序列和B互补和A相同。如果体系中原模板DNA的数量为m，最初10次循环产物为双链DNA分子为210×m个，其中有B链为210×m个，以这些链为模板，利用引物又进行了20次循环，每次循环生成的都是A，不改变B的数目，即B每次循环开始都是210×m个，20次循环每次生成A也是210×m个，共20×210×m个A。因为DNA单链与双链的分子量不同，可通过电泳将单链探针DNA分离出来。
②限制性引物较短，引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏。
溶剂
色素1
色素2
色素3
色素4
实验组1
7.8
?
?
1.9
?
实验组2
8.2
?
?
1.5
?
实验组3
8.0
?
?
1.4
?
平均移动距离(cm)
8.0
7.6
?
?
0.8
迁移率(Rf)
无
0.95
0.53
?
0.10
序号
指 标
限 值
1
总大肠杆菌/(MPN/100mL 或 CFU/100mL)
不应检出
2
大肠埃希氏菌/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
不应检出
3
菌落总数/(MPN/100mL 或CFU/100mL)
100
MPN表示最可能数， CFU表示菌落形成单位
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