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专题10 生物技术与工程（分层练）-【考点解密】最新高考生物二轮复习考点解密与预测（浙江专用）
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这是一份专题10 生物技术与工程（分层练）-【考点解密】最新高考生物二轮复习考点解密与预测（浙江专用），文件包含专题10生物技术与工程分层练原卷版docx、专题10生物技术与工程分层练解析版docx等2份试卷配套教学资源，其中试卷共56页， 欢迎下载使用。
一、对知识进行层级化的框架梳理：生物知识点比较多，我们可以引导学生以逻辑关系对知识进行层级化的“知识框架”梳理，以便让学生更牢固地掌握基础知识， 从而能够更好地把知识融会贯通。
二、回归教材，注重教材细节：新课标I卷的题“不偏”“不怪”“不坑”，不会在题目中设“语言陷阱”，大多数题考查的内容直接或改编至教材。
三、帮助学生进行“方法类知识”的梳理，深入理解生物学研究方法
四、掌握生物学实验的两大要素：自变量和对照。自变量保证了实验设计的逻辑正确，对照保证实验在特定条件下进行。
五、帮助学生总结一些答题技巧。做好以上几点，相信二轮复习后学生会有一个很大的提升。
专题10 生物技术与工程
1．我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖， 浸于水中，…… 则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水， 用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……。如有霉花， 加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法正确的是（ ）
A．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌
B．“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜
C．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度
D．对泡菜汁中的乳酸菌计数，可用稀释涂布平板法和平板划线法
2．有一些细菌能分泌脲酶将尿素水解为NH₃和CO₂，吸收后可作为自身含氮物质合成的原料，该过程在生态系统的氮平衡中起到重要作用，通过配制尿素固体培养基可筛选出这类细菌。下列有关叙述正确的是（ ）
A．尿素是这类细菌利用的直接氮源
B．分泌脲酶的细菌在生态系统中属于次级生产者
C．配制尿素固体培养基时要用无菌水，不能用蒸馏水
D．以尿素为唯一氮源的液体培养基也能筛选出分泌脲酶的细菌
3．目前七叶一枝花属濒危名贵中药材，科学家尝试应用生物技术繁殖和保存七叶一枝花资源，并利用植物细胞工程获取其有效成分。下列叙述正确的是（ ）
A．七叶一枝花不同细胞经植物组织培养获得的新个体基因型都相同
B．将七叶一枝花茎尖或根尖组织经灭菌、脱分化、再分化可获得脱毒苗
C．利用植物细胞工程获取其有效成分过程中使用的是液体培养基
D．保护野生七叶一枝花最佳的选择是将其迁移到植物园
4．某些病毒感染会严重影响葡萄的产量和品质。某科研团队采用脱毒技术快速繁殖“阳光玫瑰”葡萄品种，具体流程如下图所示，其中①、②为植物组织培养过程。
下列叙述错误的是（ ）
A．图中的X可指试管苗的茎尖
B．推测热处理的基本原理是植物细胞比病毒更耐高温
C．过程①、②所用的MS培养基无需另外添加植物激素
D．可通过PCR、抗原-抗体杂交等方法对再生植株进行病毒检测
5．下列关于动物细胞培养和植物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性
B．动物细胞培养需在培养基中添加血清等天然成分，还需添加琼脂以便于细胞贴壁生长
C．植物细胞和动物细胞都可以悬浮在培养液中生长
D．植物细胞培养的主要目的是获得植物在生长和生存过程中必需的次生代谢物
6．为了更好的研究新冠病毒感染机制，我国科学家构建了能表达新冠病毒受体ACE2的转基因模型小鼠，具体过程如下图所示。下列分析错误的是（ ）
A．ACE2基因需要与相应载体连接才能成功导入到小鼠细胞中
B．吸附于基质表面进行增殖的小鼠细胞只能形成单层细胞
C．对小鼠体内早期胚胎发育过程及特点进行研究有助于确定移植时期
D．为获得更多转基因小鼠需要对代孕雌鼠进行超数排卵处理
7．如图所示，将由 2 种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体时可采用 PEG 融合法、电融合法和离心法诱导细胞融合
B．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的 2 种抗原
C．同时注射 2 种抗原可刺激 B 细胞分化为产双抗的浆细胞
D．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
8．我国科学家将体外培养的猕猴胎儿成纤维细胞注入到去核卵母细胞中，诱导细胞融合，然后将激活形成的重组胚胎移植到受体猴体内，发育产生了克隆猴“中中”和“华华”。科学家在克隆猴的过程中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d，并同时使用了此前科学家在其它哺乳动物中使用的组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，大大优化了克隆方法，最终获得灵长类动物克隆的首次成功。下列叙述错误的是（ ）
A．融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本
B．去除染色体―纺锤体复合物可获得去核卵母细胞
C．表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达
D．克隆猴技术可用于发展生殖性克隆人
9．2017年世界上首例体细胞克隆猴在我国诞生，分别叫“中中”和“华华”，这一成功轰动了全世界。下图是克隆“中中”的相关示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．卵子b去核通常是用显微操作法去除核膜包围的细胞核
B．重组细胞c需要物理或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育过程
C．代孕猴d对早期胚胎不发生免疫排斥，为胚胎收集提供了可能
D．克隆猴“中中”e的培育采用了胚胎细胞核移植技术
10．随着生物技术的进步，相关成果不断涌现，人们对它的安全性、与伦理道德碰撞而带来的困惑和挑战也与日俱增，下列叙述错误的是（ ）
A．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期
B．试管婴儿技术和“设计试管婴儿”都需要对胚胎进行遗传学诊断
C．我国禁止生殖性克隆，不允许进行任何生殖性克隆人实验
D．生物武器致病能力强，我国反对生物武器及其技术和设备扩散
11．生长激素是医学实验及生物实验中常用的重要物质，最初生长激素是从牛和猪脑垂体中提取出来的，但副作用过多。而化学合成的方法效率较低，没有实用价值，因此，采用基因工程方法大规模生产人生长激素是满足临床大量需求的重要手段。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示，下列相关叙述错误的是（ ）
（限制性核酸内切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）
A．图1的质粒与目的基因结合后不可直接导入受体细胞
B．BamHI酶和BclI酶切的DNA末端连接，连接部位用酶Sau3AI一定能用切开
C．用Sau3AI切图1所示的质粒A得到DNA片段对RNA聚合酶有一定的亲和力
D．生长激素基因也可以嵌入羊基因组的任何位置，以得到转基因羊并对生长激素进行大规模生产
12．镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因 (HbA) 突变为镰刀形 细胞贫血症基因 (Hbs) 引起， HbA 和 Hbs 的某片段如图甲。对胎儿基因检测的主要原理是： Mst Ⅱ限制酶处理扩增后的 DNA; 加热使酶切片段解旋，用荧光标记的 CTGACTCCT序列与其杂交；凝胶电泳分离。图乙是凝胶电泳后荧光出现的三种可能性下列叙述错误的是（ ）
A．提取胎儿DNA 样品后，扩增DNA 需要添加特定的引物
B．用 MstⅡI限制酶处理DNA 不充分，可能把正常人误判为携带者
C．荧光标记序列越长，图乙-c 中两个DNA 条带间的距离越大
D．若某胎儿检测结果为图乙-b， 则该胎儿为镰刀形细胞贫血症患者
13.下列关于物质提取、纯化原理的叙述，不正确的是（ ）
A．凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同
B．使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质
C．电泳法是利用样品中各种分子带电性质的差异以及样品分子大小、形状的不同，使带电分子产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离
D．离心法分离蛋白质的依据是密度不同的物质离心时沉降速度不同
综合题
14．如图A所示，质粒上含有X抗生素抗性基因（）和Y抗生素抗性基因（），其中内部含有限制酶KasI的识别序列，内部含有限制酶Fse I、Hpa II、Nae I、NgM IV的识别序列，五种酶的识别序列如表格所示（表示切割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在这些识别序列。
(1)若要将图B所示的目的基因直接插入到内形成重组质粒，则质粒需用限制酶___________切开。将切开的质粒溶液与目的基因溶液混合后连接，一般先用___________处理大肠杆菌后，再对其进行导入操作。
(2)取导入处理过的大肠杆菌接种到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培养基中培养，培养基___________（填“需要”或“不需要”）加入琼脂。从获得的纯培养物中取部分菌体接种到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培养基中，若无菌落生长，可初步确定获得的培养物符合要求；若有菌落生长，原因是___________。
(3)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插人目的基因的重组质粒（图C所示），拟设计引物进行PCR鉴定。图C所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，若选择引物___________进行PCR，且扩增出了450 bp片段，则说明实验成功；若选择引物甲、乙进行PCR，且扩增出了400bp片段，原因是___________。
1．（科学思维、科学探究）营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（ ）
A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选
D．可用接种环从斜面中取出菌种，振荡培养并诱变处理
2．（科学思维、科学探究）如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（ ）
A．某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少
B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白陈培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
3．（科学思维、科学探究）下列关于微生物培养和发酵工程的相关叙述正确的是（ ）
A．减少菌种的传代次数能减小菌种发生自发突变的概率
B．在液体培养基中培养细菌时，一定要通入无菌空气
C．监控发酵过程的营养供给、氧气、温度、pH等是发酵工程的前提条件
D．将单菌落接种到培养基上形成的菌落均是由一个细胞分裂形成的细胞集团
4．（科学思维、科学探究）草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。有关说法正确的是（ ）
A．通常采用 95%的酒精和 5%次氯酸钠溶液对甲进行灭菌处理
B．甲常采用茎尖为外植体，原因是其几乎未感染病毒
C．①、③两个过程都不需要光照，但需要生长素和细胞分裂素
D．判断两种选育方法的效果时，都需要通过病毒接种实验
5．（科学思维、科学探究）某研究人员设计了下图所示技术路线，以期获得甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。下列说法正确的是（ ）
A．可用无菌水洗涤去除图中所用的酶来纯化原生质体
B．原生质体A和原生质体B诱导融合前需要调整密度比例
C．诱导融合体出芽通常使用两类植物激素，其中生长素起主要作用
D．取材选用植株生长点附近细胞进行培养将增大再生植株品质退化的概率
6．（科学思维、科学探究）成体组织细胞能够被用于两种不同意义的“克隆”，具体流程如图所示。下列有关克隆的叙述错误的是（ ）
A．图中含“纺锤体”的细胞为MⅡ期卵母细胞
B．经“细胞融合”形成的重组细胞中，细胞质中的遗传物质来自成年母体的卵母细胞和另一成体组织细胞
C．图中“早期胚胎”内部的空腔为囊胚腔，此时期胚胎可进行孵化过程
D．图中两种“克隆”均需要经过动物细胞培养和胚胎移植等过程
7．（科学思维）据统计，不孕不育患病率目前已经高达18%。体外受精技术是胚胎工程的技术之一，下列有关胚胎工程的说法错误的是（ ）
A．试管婴儿技术繁殖后代属于无性繁殖，为某些不孕夫妇提供生育机会
B．判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志
C．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D．胚胎移植时可选取囊胚的滋养层细胞进行遗传病基因检测
8．（生命观念、科学思维）蛋白质的空间结构是生命科学研究领域的热点内容。某科研团队利用人工智能AI开发的AlphaFld2程序对大部分蛋白质结构的预测极为精准。下列叙述错误的是（ ）
A．依据新蛋白质的氨基酸序列能推出唯一的基因序列
B．蛋白质的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础
C．预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程
D．结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制
9．（科学思维、科学探究）我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰细胞中，获得蓝玫瑰。下列叙述错误的是（ ）
A．表达载体中sfp和idgS具有各自的启动子，表达相互独立
B．可以从链霉菌的基因文库中获取sfp和idgS基因
C．在构建表达载体时所需的限制酶是PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ
D．若受体白玫瑰细胞不变蓝，则可说明sfp和idgS未导入或导入后未成功表达
10．（科学思维、科学探究）研究人员将雪花莲凝集素（GNA）基因和尾穗苋凝集素（ACA）基因连接成融合基因后再与pBI121质粒载体结合并导入玉米细胞，最终获得了抗蚜虫玉米新品种，部分操作过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①和过程②分别需要使用DNA聚合酶和DNA连接酶
B．可将含有重组载体的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道内，获得抗蚜虫玉米新品种
C．在加入了卡那霉素的培养基上存活下来的玉米细胞均成功导入了重组载体
D．若用PCR技术检测出玉米细胞含有融合基因，则该玉米为抗蚜虫玉米
11．（科学思维、科学探究）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
12．（科学思维、科学探究）研究者欲将目的基因导入大肠杆菌中，现有质粒（图甲）和含目的基因的DNA片段（图乙），如图2所示。AmpR是氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色；Xma I、Nhe I、EcR I、Bcl I是4种限制酶，它们切割产生的黏性末端均不相同。能筛选出成功导入重组质粒（含目的基因）的大肠杆菌的最佳组合是（ ）
A．AB．BC．CD．D
综合题
13．（科学思维、科学探究）GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP基因为材料，利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白，丰富了荧光蛋白的颜色种类。回答下列问题。
(1)构建突变基因文库，科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体，并转入大肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常，基因文库是指_______。
(2)构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GFP突变基因文库中提取目的基因（均为突变基因）构建表达载体，其模式图如下所示（箭头为GFP突变基因的转录方向）。图中①为_______；②为_______，其作用是_______；图中氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因，其作用是_______。
(3)目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达，发现大肠杆菌有的发绿色荧光，有的发黄色荧光，有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析，发绿色荧光的可能原因是_______（答出1点即可）。
(4)新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后，对其所含的GFP突变基因进行测序，发现其碱基序列与GFP基因的不同，将该GFP突变基因命名为YFP基因（黄色荧光蛋白基因）。若要通过基因工程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中表达，实验思路是_______。
1．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
2．（2023·山东·高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
3．（2023·广东·统考高考真题）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（ ）
A．a点时取样、尿素氮源培养基
B．b点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c点时取样、角蛋白氮源培养基
4．（2023·浙江·统考高考真题）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．培养基pH需偏碱性
B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养
D．分离得到的微生物均为乳酸菌
5．（2023·山东·高考真题）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ）
A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物
B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产
C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养
D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量
6．（2023·北京·统考高考真题）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（ ）
A．需要使用动物细胞培养技术
B．需要制备用PTH免疫的小鼠
C．利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
7．（2023·湖北·统考高考真题）栽培稻甲产量高、品质好，但每年只能收获一次。野生稻乙种植一次可连续收获多年，但产量低。中国科学家利用栽培稻甲和野生稻乙杂交，培育出兼具两者优点的品系丙，为全球作物育种提供了中国智慧。下列叙述错误的是（ ）
A．该成果体现了生物多样性的间接价值
B．利用体细胞杂交技术也可培育出品系丙
C．该育种技术为全球农业发展提供了新思路
D．品系丙的成功培育提示我们要注重野生种质资源的保护
8．（2023·浙江·统考高考真题）植物组织培养过程中，培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如图所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．转运蔗糖时，共转运体的构型不发生变化
B．使用ATP合成抑制剂，会使蔗糖运输速率下降
C．植物组培过程中蔗糖是植物细胞吸收的唯一碳源
D．培养基的pH值高于细胞内，有利于蔗糖的吸收
9．（2023·广东·统考高考真题）人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞融合前应去除细胞壁
B．高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合
C．融合的细胞即为杂交细胞
D．杂交细胞可能具有生长快速的优势
10．（2023·广东·统考高考真题）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ）
A．超数排卵
B．精子获能处理
C．细胞核移植
D．胚胎培养
11．（2023·浙江·统考高考真题）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（ ）
A．经获能处理的精子才能用于体外受精
B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎
C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理
12．（2023·浙江·统考高考真题）以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（ ）
A．试管婴儿技术应全面禁止
B．治疗性克隆不需要监控和审查
C．生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D．我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
13．（2023·湖南·统考高考真题）盐碱胁迫下植物应激反应产生的H2O2对细胞有毒害作用。禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H2O2的跨膜转运，如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的
B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H2O2外排，从而减轻其对细胞的毒害
C．敲除AT1基因或降低其表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力
D．从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径
14．（2023·浙江·统考高考真题）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
15．（2023·浙江·统考高考真题）紫外线引发的DNA损伤，可通过“核苷酸切除修复（NER）”方式修复，机制如图所示。着色性干皮症（XP）患者的NER酶系统存在缺陷，受阳光照射后，皮肤出现炎症等症状。患者幼年发病，20岁后开始发展成皮肤癌。下列叙述错误的是（ ）
A．修复过程需要限制酶和DNA聚合酶
B．填补缺口时，新链合成以5’到3’的方向进行
C．DNA有害损伤发生后，在细胞增殖后进行修复，对细胞最有利
D．随年龄增长，XP患者几乎都会发生皮肤癌的原因，可用突变累积解释
16．（2023·湖北·统考高考真题）用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因
C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落
17．（2023·广东·统考高考真题）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A．裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B．分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C．沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度
D．鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
18．（2023·广东·统考高考真题）中外科学家经多年合作研究，发现circDNMT1（一种RNA分子）通过与抑癌基因p53表达的蛋白结合诱发乳腺癌，为解决乳腺癌这一威胁全球女性健康的重大问题提供了新思路。下列叙述错误的是（ ）
A．p53基因突变可能引起细胞癌变
B．p53蛋白能够调控细胞的生长和增殖
C．circDNMT1高表达会使乳腺癌细胞增殖变慢
D．circDNMT1的基因编辑可用于乳腺癌的基础研究
19．（2023·山西·统考高考真题）某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ）
A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E. cli DNA连接酶连接
B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接
C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接
D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E. cli DNA连接酶连接
选择题组
（2023·浙江·统考高考真题）阅读下列材料，完成下面小题。
小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。
20．小曲白酒的酿造过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸。关于酵母菌的呼吸作用，下列叙述正确的是（ ）
A．有氧呼吸产生的[H]与O2结合，无氧呼吸产生的[H]不与O2结合
B．有氧呼吸在线粒体中进行，无氧呼吸在细胞质基质中进行
C．有氧呼吸有热能的释放，无氧呼吸没有热能的释放
D．有氧呼吸需要酶催化，无氧呼吸不需要酶催化
21．关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A．糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
B．发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测
C．若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封不严
D．蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵
22．（2023·浙江·统考高考真题）赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题：
(1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于______。根据这种调节方式，在培养基中添加______，用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。
(2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：
①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通过检索______获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。
②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF膜发生______，表达载体最终进入细胞核，发生转化。
③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为______。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了_____重组细胞发育的作用。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至____，植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。
⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以______为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA，对总RNA进行______处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成cDNA，并以此为______，利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？______。
23．（2023·浙江·统考高考真题）甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题：
(1)根据研究目标，在甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交前，应检验两种植物的原生质体是否具备__________的能力。为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的__________为外植体。
(2)植物细胞壁的主要成分为__________和果胶，在获取原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的__________失活。对处理后的原生质体在显微镜下用__________计数，确定原生质体密度。两种原生质体1∶1混合后，通过添加适宜浓度的PEG进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是__________。
(3)将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养皿，融合原生质体分散固定在平板中，并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于__________。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由是哪几项？__________
A．甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂
B．同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂
C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂
D．杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂
(4)愈伤组织经__________可形成胚状体或芽。胚状体能长出__________，直接发育形成再生植株。
(5)用PCR技术鉴定再生植株。已知甲植物细胞核具有特异性DNA序列a，乙植物细胞质具有特异性DNA序列b；M1、M2为序列a的特异性引物，N1、N2为序列b的特异性引物。完善实验思路：
Ⅰ．提取纯化再生植株的总DNA，作为PCR扩增的__________。
Ⅱ．将DNA提取物加入PCR反应体系，__________为特异性引物，扩增序列a；用同样的方法扩增序列b。
Ⅲ．得到的2个PCR扩增产物经__________后，若每个PCR扩增产物在凝胶中均出现了预期的__________个条带，则可初步确定再生植株来自于杂种细胞。
名称
说别序列及切期位点
名称
识别序列及规割位点
Fse I
Hpa II
KasI
Nae I
NgM IV
组别
限制酶组合
培养基中添加的物质
菌落的颜色
A
EcRI、BclI
氨苄青霉素
蓝色
B
EcRI、BclI
X-gal
蓝色
C
XmaI、NheI
X-gal
白色
D
XmaI、NheI
氨苄青霉素和X-gal
白色
一、对知识进行层级化的框架梳理：生物知识点比较多，我们可以引导学生以逻辑关系对知识进行层级化的“知识框架”梳理，以便让学生更牢固地掌握基础知识， 从而能够更好地把知识融会贯通。
二、回归教材，注重教材细节：新课标I卷的题“不偏”“不怪”“不坑”，不会在题目中设“语言陷阱”，大多数题考查的内容直接或改编至教材。
三、帮助学生进行“方法类知识”的梳理，深入理解生物学研究方法
四、掌握生物学实验的两大要素：自变量和对照。自变量保证了实验设计的逻辑正确，对照保证实验在特定条件下进行。
五、帮助学生总结一些答题技巧。做好以上几点，相信二轮复习后学生会有一个很大的提升。
专题10 生物技术与工程
1．我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖， 浸于水中，…… 则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水， 用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……。如有霉花， 加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法正确的是（ ）
A．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌
B．“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜
C．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度
D．对泡菜汁中的乳酸菌计数，可用稀释涂布平板法和平板划线法
2．有一些细菌能分泌脲酶将尿素水解为NH₃和CO₂，吸收后可作为自身含氮物质合成的原料，该过程在生态系统的氮平衡中起到重要作用，通过配制尿素固体培养基可筛选出这类细菌。下列有关叙述正确的是（ ）
A．尿素是这类细菌利用的直接氮源
B．分泌脲酶的细菌在生态系统中属于次级生产者
C．配制尿素固体培养基时要用无菌水，不能用蒸馏水
D．以尿素为唯一氮源的液体培养基也能筛选出分泌脲酶的细菌
3．目前七叶一枝花属濒危名贵中药材，科学家尝试应用生物技术繁殖和保存七叶一枝花资源，并利用植物细胞工程获取其有效成分。下列叙述正确的是（ ）
A．七叶一枝花不同细胞经植物组织培养获得的新个体基因型都相同
B．将七叶一枝花茎尖或根尖组织经灭菌、脱分化、再分化可获得脱毒苗
C．利用植物细胞工程获取其有效成分过程中使用的是液体培养基
D．保护野生七叶一枝花最佳的选择是将其迁移到植物园
4．某些病毒感染会严重影响葡萄的产量和品质。某科研团队采用脱毒技术快速繁殖“阳光玫瑰”葡萄品种，具体流程如下图所示，其中①、②为植物组织培养过程。
下列叙述错误的是（ ）
A．图中的X可指试管苗的茎尖
B．推测热处理的基本原理是植物细胞比病毒更耐高温
C．过程①、②所用的MS培养基无需另外添加植物激素
D．可通过PCR、抗原-抗体杂交等方法对再生植株进行病毒检测
5．下列关于动物细胞培养和植物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性
B．动物细胞培养需在培养基中添加血清等天然成分，还需添加琼脂以便于细胞贴壁生长
C．植物细胞和动物细胞都可以悬浮在培养液中生长
D．植物细胞培养的主要目的是获得植物在生长和生存过程中必需的次生代谢物
6．为了更好的研究新冠病毒感染机制，我国科学家构建了能表达新冠病毒受体ACE2的转基因模型小鼠，具体过程如下图所示。下列分析错误的是（ ）
A．ACE2基因需要与相应载体连接才能成功导入到小鼠细胞中
B．吸附于基质表面进行增殖的小鼠细胞只能形成单层细胞
C．对小鼠体内早期胚胎发育过程及特点进行研究有助于确定移植时期
D．为获得更多转基因小鼠需要对代孕雌鼠进行超数排卵处理
7．如图所示，将由 2 种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体时可采用 PEG 融合法、电融合法和离心法诱导细胞融合
B．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的 2 种抗原
C．同时注射 2 种抗原可刺激 B 细胞分化为产双抗的浆细胞
D．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
8．我国科学家将体外培养的猕猴胎儿成纤维细胞注入到去核卵母细胞中，诱导细胞融合，然后将激活形成的重组胚胎移植到受体猴体内，发育产生了克隆猴“中中”和“华华”。科学家在克隆猴的过程中注射了组蛋白去甲基化酶KDM4d，并同时使用了此前科学家在其它哺乳动物中使用的组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA，大大优化了克隆方法，最终获得灵长类动物克隆的首次成功。下列叙述错误的是（ ）
A．融合细胞中的线粒体来自两个不同亲本
B．去除染色体―纺锤体复合物可获得去核卵母细胞
C．表观遗传限制了猕猴成纤维细胞核全能性的表达
D．克隆猴技术可用于发展生殖性克隆人
9．2017年世界上首例体细胞克隆猴在我国诞生，分别叫“中中”和“华华”，这一成功轰动了全世界。下图是克隆“中中”的相关示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．卵子b去核通常是用显微操作法去除核膜包围的细胞核
B．重组细胞c需要物理或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育过程
C．代孕猴d对早期胚胎不发生免疫排斥，为胚胎收集提供了可能
D．克隆猴“中中”e的培育采用了胚胎细胞核移植技术
10．随着生物技术的进步，相关成果不断涌现，人们对它的安全性、与伦理道德碰撞而带来的困惑和挑战也与日俱增，下列叙述错误的是（ ）
A．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期
B．试管婴儿技术和“设计试管婴儿”都需要对胚胎进行遗传学诊断
C．我国禁止生殖性克隆，不允许进行任何生殖性克隆人实验
D．生物武器致病能力强，我国反对生物武器及其技术和设备扩散
11．生长激素是医学实验及生物实验中常用的重要物质，最初生长激素是从牛和猪脑垂体中提取出来的，但副作用过多。而化学合成的方法效率较低，没有实用价值，因此，采用基因工程方法大规模生产人生长激素是满足临床大量需求的重要手段。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示，下列相关叙述错误的是（ ）
（限制性核酸内切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT）
A．图1的质粒与目的基因结合后不可直接导入受体细胞
B．BamHI酶和BclI酶切的DNA末端连接，连接部位用酶Sau3AI一定能用切开
C．用Sau3AI切图1所示的质粒A得到DNA片段对RNA聚合酶有一定的亲和力
D．生长激素基因也可以嵌入羊基因组的任何位置，以得到转基因羊并对生长激素进行大规模生产
12．镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因 (HbA) 突变为镰刀形 细胞贫血症基因 (Hbs) 引起， HbA 和 Hbs 的某片段如图甲。对胎儿基因检测的主要原理是： Mst Ⅱ限制酶处理扩增后的 DNA; 加热使酶切片段解旋，用荧光标记的 CTGACTCCT序列与其杂交；凝胶电泳分离。图乙是凝胶电泳后荧光出现的三种可能性下列叙述错误的是（ ）
A．提取胎儿DNA 样品后，扩增DNA 需要添加特定的引物
B．用 MstⅡI限制酶处理DNA 不充分，可能把正常人误判为携带者
C．荧光标记序列越长，图乙-c 中两个DNA 条带间的距离越大
D．若某胎儿检测结果为图乙-b， 则该胎儿为镰刀形细胞贫血症患者
13.下列关于物质提取、纯化原理的叙述，不正确的是（ ）
A．凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同
B．使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质
C．电泳法是利用样品中各种分子带电性质的差异以及样品分子大小、形状的不同，使带电分子产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离
D．离心法分离蛋白质的依据是密度不同的物质离心时沉降速度不同
综合题
14．如图A所示，质粒上含有X抗生素抗性基因（）和Y抗生素抗性基因（），其中内部含有限制酶KasI的识别序列，内部含有限制酶Fse I、Hpa II、Nae I、NgM IV的识别序列，五种酶的识别序列如表格所示（表示切割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在这些识别序列。
(1)若要将图B所示的目的基因直接插入到内形成重组质粒，则质粒需用限制酶___________切开。将切开的质粒溶液与目的基因溶液混合后连接，一般先用___________处理大肠杆菌后，再对其进行导入操作。
(2)取导入处理过的大肠杆菌接种到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培养基中培养，培养基___________（填“需要”或“不需要”）加入琼脂。从获得的纯培养物中取部分菌体接种到含有抗生素___________（填“X”或“Y”）的培养基中，若无菌落生长，可初步确定获得的培养物符合要求；若有菌落生长，原因是___________。
(3)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插人目的基因的重组质粒（图C所示），拟设计引物进行PCR鉴定。图C所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，若选择引物___________进行PCR，且扩增出了450 bp片段，则说明实验成功；若选择引物甲、乙进行PCR，且扩增出了400bp片段，原因是___________。
1．（科学思维、科学探究）营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（ ）
A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选
D．可用接种环从斜面中取出菌种，振荡培养并诱变处理
2．（科学思维、科学探究）如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（ ）
A．某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少
B．3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个
D．该实验需设置牛肉膏蛋白陈培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
3．（科学思维、科学探究）下列关于微生物培养和发酵工程的相关叙述正确的是（ ）
A．减少菌种的传代次数能减小菌种发生自发突变的概率
B．在液体培养基中培养细菌时，一定要通入无菌空气
C．监控发酵过程的营养供给、氧气、温度、pH等是发酵工程的前提条件
D．将单菌落接种到培养基上形成的菌落均是由一个细胞分裂形成的细胞集团
4．（科学思维、科学探究）草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。有关说法正确的是（ ）
A．通常采用 95%的酒精和 5%次氯酸钠溶液对甲进行灭菌处理
B．甲常采用茎尖为外植体，原因是其几乎未感染病毒
C．①、③两个过程都不需要光照，但需要生长素和细胞分裂素
D．判断两种选育方法的效果时，都需要通过病毒接种实验
5．（科学思维、科学探究）某研究人员设计了下图所示技术路线，以期获得甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。下列说法正确的是（ ）
A．可用无菌水洗涤去除图中所用的酶来纯化原生质体
B．原生质体A和原生质体B诱导融合前需要调整密度比例
C．诱导融合体出芽通常使用两类植物激素，其中生长素起主要作用
D．取材选用植株生长点附近细胞进行培养将增大再生植株品质退化的概率
6．（科学思维、科学探究）成体组织细胞能够被用于两种不同意义的“克隆”，具体流程如图所示。下列有关克隆的叙述错误的是（ ）
A．图中含“纺锤体”的细胞为MⅡ期卵母细胞
B．经“细胞融合”形成的重组细胞中，细胞质中的遗传物质来自成年母体的卵母细胞和另一成体组织细胞
C．图中“早期胚胎”内部的空腔为囊胚腔，此时期胚胎可进行孵化过程
D．图中两种“克隆”均需要经过动物细胞培养和胚胎移植等过程
7．（科学思维）据统计，不孕不育患病率目前已经高达18%。体外受精技术是胚胎工程的技术之一，下列有关胚胎工程的说法错误的是（ ）
A．试管婴儿技术繁殖后代属于无性繁殖，为某些不孕夫妇提供生育机会
B．判断培养液中卵子是否受精通常以观察到两个极体或雌、雄原核作为标志
C．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D．胚胎移植时可选取囊胚的滋养层细胞进行遗传病基因检测
8．（生命观念、科学思维）蛋白质的空间结构是生命科学研究领域的热点内容。某科研团队利用人工智能AI开发的AlphaFld2程序对大部分蛋白质结构的预测极为精准。下列叙述错误的是（ ）
A．依据新蛋白质的氨基酸序列能推出唯一的基因序列
B．蛋白质的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础
C．预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程
D．结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制
9．（科学思维、科学探究）我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰细胞中，获得蓝玫瑰。下列叙述错误的是（ ）
A．表达载体中sfp和idgS具有各自的启动子，表达相互独立
B．可以从链霉菌的基因文库中获取sfp和idgS基因
C．在构建表达载体时所需的限制酶是PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ
D．若受体白玫瑰细胞不变蓝，则可说明sfp和idgS未导入或导入后未成功表达
10．（科学思维、科学探究）研究人员将雪花莲凝集素（GNA）基因和尾穗苋凝集素（ACA）基因连接成融合基因后再与pBI121质粒载体结合并导入玉米细胞，最终获得了抗蚜虫玉米新品种，部分操作过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①和过程②分别需要使用DNA聚合酶和DNA连接酶
B．可将含有重组载体的溶液滴加到玉米受粉后形成的花粉管通道内，获得抗蚜虫玉米新品种
C．在加入了卡那霉素的培养基上存活下来的玉米细胞均成功导入了重组载体
D．若用PCR技术检测出玉米细胞含有融合基因，则该玉米为抗蚜虫玉米
11．（科学思维、科学探究）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
12．（科学思维、科学探究）研究者欲将目的基因导入大肠杆菌中，现有质粒（图甲）和含目的基因的DNA片段（图乙），如图2所示。AmpR是氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色；Xma I、Nhe I、EcR I、Bcl I是4种限制酶，它们切割产生的黏性末端均不相同。能筛选出成功导入重组质粒（含目的基因）的大肠杆菌的最佳组合是（ ）
A．AB．BC．CD．D
综合题
13．（科学思维、科学探究）GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP基因为材料，利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白，丰富了荧光蛋白的颜色种类。回答下列问题。
(1)构建突变基因文库，科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体，并转入大肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常，基因文库是指_______。
(2)构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GFP突变基因文库中提取目的基因（均为突变基因）构建表达载体，其模式图如下所示（箭头为GFP突变基因的转录方向）。图中①为_______；②为_______，其作用是_______；图中氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因，其作用是_______。
(3)目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达，发现大肠杆菌有的发绿色荧光，有的发黄色荧光，有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析，发绿色荧光的可能原因是_______（答出1点即可）。
(4)新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后，对其所含的GFP突变基因进行测序，发现其碱基序列与GFP基因的不同，将该GFP突变基因命名为YFP基因（黄色荧光蛋白基因）。若要通过基因工程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中表达，实验思路是_______。
1．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
2．（2023·山东·高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
3．（2023·广东·统考高考真题）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（ ）
A．a点时取样、尿素氮源培养基
B．b点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c点时取样、角蛋白氮源培养基
4．（2023·浙江·统考高考真题）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．培养基pH需偏碱性
B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养
D．分离得到的微生物均为乳酸菌
5．（2023·山东·高考真题）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ）
A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物
B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产
C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养
D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量
6．（2023·北京·统考高考真题）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（ ）
A．需要使用动物细胞培养技术
B．需要制备用PTH免疫的小鼠
C．利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
7．（2023·湖北·统考高考真题）栽培稻甲产量高、品质好，但每年只能收获一次。野生稻乙种植一次可连续收获多年，但产量低。中国科学家利用栽培稻甲和野生稻乙杂交，培育出兼具两者优点的品系丙，为全球作物育种提供了中国智慧。下列叙述错误的是（ ）
A．该成果体现了生物多样性的间接价值
B．利用体细胞杂交技术也可培育出品系丙
C．该育种技术为全球农业发展提供了新思路
D．品系丙的成功培育提示我们要注重野生种质资源的保护
8．（2023·浙江·统考高考真题）植物组织培养过程中，培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如图所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．转运蔗糖时，共转运体的构型不发生变化
B．使用ATP合成抑制剂，会使蔗糖运输速率下降
C．植物组培过程中蔗糖是植物细胞吸收的唯一碳源
D．培养基的pH值高于细胞内，有利于蔗糖的吸收
9．（2023·广东·统考高考真题）人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞融合前应去除细胞壁
B．高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合
C．融合的细胞即为杂交细胞
D．杂交细胞可能具有生长快速的优势
10．（2023·广东·统考高考真题）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（ ）
A．超数排卵
B．精子获能处理
C．细胞核移植
D．胚胎培养
11．（2023·浙江·统考高考真题）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（ ）
A．经获能处理的精子才能用于体外受精
B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎
C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率
D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理
12．（2023·浙江·统考高考真题）以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（ ）
A．试管婴儿技术应全面禁止
B．治疗性克隆不需要监控和审查
C．生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D．我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
13．（2023·湖南·统考高考真题）盐碱胁迫下植物应激反应产生的H2O2对细胞有毒害作用。禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H2O2的跨膜转运，如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的
B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H2O2外排，从而减轻其对细胞的毒害
C．敲除AT1基因或降低其表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力
D．从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径
14．（2023·浙江·统考高考真题）某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子
15．（2023·浙江·统考高考真题）紫外线引发的DNA损伤，可通过“核苷酸切除修复（NER）”方式修复，机制如图所示。着色性干皮症（XP）患者的NER酶系统存在缺陷，受阳光照射后，皮肤出现炎症等症状。患者幼年发病，20岁后开始发展成皮肤癌。下列叙述错误的是（ ）
A．修复过程需要限制酶和DNA聚合酶
B．填补缺口时，新链合成以5’到3’的方向进行
C．DNA有害损伤发生后，在细胞增殖后进行修复，对细胞最有利
D．随年龄增长，XP患者几乎都会发生皮肤癌的原因，可用突变累积解释
16．（2023·湖北·统考高考真题）用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因
C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落
17．（2023·广东·统考高考真题）“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A．裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B．分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C．沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度
D．鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
18．（2023·广东·统考高考真题）中外科学家经多年合作研究，发现circDNMT1（一种RNA分子）通过与抑癌基因p53表达的蛋白结合诱发乳腺癌，为解决乳腺癌这一威胁全球女性健康的重大问题提供了新思路。下列叙述错误的是（ ）
A．p53基因突变可能引起细胞癌变
B．p53蛋白能够调控细胞的生长和增殖
C．circDNMT1高表达会使乳腺癌细胞增殖变慢
D．circDNMT1的基因编辑可用于乳腺癌的基础研究
19．（2023·山西·统考高考真题）某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ）
A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E. cli DNA连接酶连接
B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接
C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接
D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E. cli DNA连接酶连接
选择题组
（2023·浙江·统考高考真题）阅读下列材料，完成下面小题。
小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。
20．小曲白酒的酿造过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸。关于酵母菌的呼吸作用，下列叙述正确的是（ ）
A．有氧呼吸产生的[H]与O2结合，无氧呼吸产生的[H]不与O2结合
B．有氧呼吸在线粒体中进行，无氧呼吸在细胞质基质中进行
C．有氧呼吸有热能的释放，无氧呼吸没有热能的释放
D．有氧呼吸需要酶催化，无氧呼吸不需要酶催化
21．关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（ ）
A．糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖
B．发酵液样品的蒸馏产物有无酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检测
C．若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封不严
D．蒸熟并摊晾的原料加入糟醅，立即密封可高效进行酒精发酵
22．（2023·浙江·统考高考真题）赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸，而人类主要食物中的赖氨酸含量很低，利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题：
(1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时，能抑制合成过程中两种关键酶的活性，导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平，这种调节方式属于______。根据这种调节方式，在培养基中添加______，用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞，可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体，通过培养获得再生植株。
(2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展，2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为：
①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展，为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通过检索______获取其编码序列，用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接，构建出乳腺专一表达载体。
②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞（BEF）。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内，与BEF膜发生______，表达载体最终进入细胞核，发生转化。
③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞，从牛卵巢获取卵母细胞，经体外培养及去核后作为______。将两种细胞进行电融合，电融合的作用除了促进细胞融合，同时起到了_____重组细胞发育的作用。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至____，植入代孕母牛子宫角，直至小牛出生。
⑤检测。DNA水平检测：利用PCR技术，以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照，以______为阳性对照，检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测：从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞，提取总RNA，对总RNA进行______处理，以去除DNA污染，再经逆转录形成cDNA，并以此为______，利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达，而不在牛耳组织细胞内表达，原因是什么？______。
23．（2023·浙江·统考高考真题）甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题：
(1)根据研究目标，在甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交前，应检验两种植物的原生质体是否具备__________的能力。为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的__________为外植体。
(2)植物细胞壁的主要成分为__________和果胶，在获取原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的__________失活。对处理后的原生质体在显微镜下用__________计数，确定原生质体密度。两种原生质体1∶1混合后，通过添加适宜浓度的PEG进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是__________。
(3)将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养皿，融合原生质体分散固定在平板中，并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于__________。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由是哪几项？__________
A．甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂
B．同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂
C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂
D．杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂
(4)愈伤组织经__________可形成胚状体或芽。胚状体能长出__________，直接发育形成再生植株。
(5)用PCR技术鉴定再生植株。已知甲植物细胞核具有特异性DNA序列a，乙植物细胞质具有特异性DNA序列b；M1、M2为序列a的特异性引物，N1、N2为序列b的特异性引物。完善实验思路：
Ⅰ．提取纯化再生植株的总DNA，作为PCR扩增的__________。
Ⅱ．将DNA提取物加入PCR反应体系，__________为特异性引物，扩增序列a；用同样的方法扩增序列b。
Ⅲ．得到的2个PCR扩增产物经__________后，若每个PCR扩增产物在凝胶中均出现了预期的__________个条带，则可初步确定再生植株来自于杂种细胞。
名称
说别序列及切期位点
名称
识别序列及规割位点
Fse I
Hpa II
KasI
Nae I
NgM IV
组别
限制酶组合
培养基中添加的物质
菌落的颜色
A
EcRI、BclI
氨苄青霉素
蓝色
B
EcRI、BclI
X-gal
蓝色
C
XmaI、NheI
X-gal
白色
D
XmaI、NheI
氨苄青霉素和X-gal
白色
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