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辽宁省抚顺市六校协作体2023-2024学年高二下学期期末考试生物试卷
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这是一份辽宁省抚顺市六校协作体2023-2024学年高二下学期期末考试生物试卷，共10页。试卷主要包含了本试卷主要考试内容等内容，欢迎下载使用。
注意事项：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
4.本试卷主要考试内容：人教版必修1第1章~第4章，选择性必修3。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.秋冬季是由肺炎支原体和流感病毒（单链RNA病毒）引起的呼吸道感染疾病的高发期。已知青霉素类抗生素的抑菌机制是抑制细菌细胞壁的合成。下列相关叙述正确的是（ ）
A.肺炎支原体的mRNA从核孔出来，指导翻译过程
B.流感病毒和肺炎支原体的遗传物质中均含有4种碱基
C.细菌和肺炎支原体的核酸均位于拟核中
D.青霉素类抗生素可抑制肺炎支原体，但对流感病毒无抑制作用
2.某同学将小鼠肝脏细胞匀浆置于缓冲液中，利用差速离心法分离出几种细胞器并对其进行物质分析，结果如表所示。下列有关说法正确的是（ ）
注：“+”表示有，“—”表示没有。
A.细胞器①是生产蛋白质的机器，细胞器②可能是细胞内的“消化车间”
B.缓冲液中的无机盐的主要作用是进入细胞后参与构成复杂化合物
C.细胞器③有双层膜，将其置于清水后，内膜比外膜先破裂
D.细胞器④与细胞的分裂有关，其只分布在动物细胞中
3.下图是细胞膜的流动镶嵌结构模型示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A.该模型属于数学模型
B.细胞膜的流动性对细胞功能没有影响
C.通常功能越复杂的细胞膜，3的种类与数量就越多
D.图中1、4分别表示细胞骨架、糖链，组成二者的单体相同
4.无机盐在生物体内含量很少，却担负着重要功能。下列关于无机盐的叙述，正确的是（ ）
A.人体血液中Ca2+、Na+含量过多都会引起抽搐
B.人体细胞吸收无机盐都是通过主动运输完成的
C.无机盐可参与淀粉、几丁质等化合物的构成
D.某些无机盐有助于维持细胞的酸碱平衡
5.下列有关真核细胞中物质跨膜运输方式与膜蛋白关系的叙述，错误的是（ ）
A.自由扩散不需要转运蛋白参与
B.胞吞过程中不需要膜蛋白参与
C.借助通道蛋白的跨膜运输方式是协助扩散
D.借助载体蛋白转运物质时不一定消耗ATP
6.某研究小组将1~6组质量相同的马铃薯条分别用浓度为a、b、c、d、e、f的蔗糖溶液处理，一段时间后测得的马铃薯条的质量变化如图所示。下列说法错误的是（ ）
A.当蔗糖溶液浓度小于a时，马铃薯条的质量变化可能大于8%
B.马铃薯条细胞液的浓度最可能在c和d之间
C.与c相比，d浓度条件下的马铃薯条细胞的吸水能力更弱
D.长时间置于浓度为f的蔗糖溶液中，马铃薯条细胞可能会失水死亡
7.“探究植物细胞的吸水和失水”实验中，常用紫色洋葱鳞片叶作材料。下列相关叙述正确的是（ ）
A.实验操作中，使用吸水纸主要是吸去盖玻片旁的多余液体
B.该实验没有另外设置对照组，但仍符合对照原则——自身对照
C.低倍镜下观察质壁分离后，再换成高倍镜观察质壁分离复原
D.使用紫色洋葱鳞片叶作材料的最主要原因是洋葱鳞片叶容易获取
8.我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如腐乳、果酒、果醋和泡菜等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵食品的叙述，正确的是（ ）
A.腐乳制作中起作用的微生物主要是曲霉
B.家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌
C.醋酸菌能将酒精转化成乙酸
D.泡菜制作时需要保持有氧环境
9.在动物细胞培养的实验操作中，需要一些关键步骤和适宜的条件。下列叙述正确的是（ ）
A.体外培养的动物细胞都必须贴附于某些基质的表面才能生长繁殖
B.将动物组织或贴壁细胞分散成单个细胞都可用胰蛋白酶处理
C.由于对细胞所需营养物质已完全清楚，故动物细胞培养使用合成培养基
D.进行动物细胞培养的CO2培养箱中的混合气体应含有95%的O2和5%的CO2
10.花椰菜易受黑腐病病原菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。将花椰菜和野生黑芥进行植物细胞融合获得抗黑腐病杂种植株，流程如图所示。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。下列叙述错误的是（ ）
A.①过程需要在等渗溶液中进行，以确保细胞结构不受破坏
B.紫外线处理黑芥原生质体的过程利用了染色体变异的原理
C.通常可使用灭活的病毒来诱导②过程中的原生质体融合
D.获得的杂种植株可通过接种黑腐病病原菌来鉴定其抗黑腐病的能力
11.肌萎缩侧索硬化，又称渐冻症，被称为世界五大绝症之一，主要表现为肌肉弱化和神经元损伤。研究发现，利用诱导多能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给肌萎缩侧索硬化实验鼠，能延长其寿命。下列叙述错误的是（ ）
A.iPS细胞由胚胎干细胞进行体外培养和诱导形成
B.iPS细胞分化成前驱细胞后DNA不变，蛋白质改变
C.iPS细胞来源于实验鼠本身，可避免免疫排斥作用
D.植入前驱细胞不能根治肌萎缩侧索硬化但能延缓其症状
12.鱼腥草中的次生代谢物萜类物质具有抗过敏作用，可用于治疗过敏性荨麻疹，实验人员通过植物细胞悬浮培养技术可大量获取鱼腥草细胞中的萜类化合物。下列说法错误的是（ ）
A.鱼腥草中的萜类化合物是细胞代谢所必需的营养物质
B.培养过程中，悬浮细胞的密度过大会限制悬浮细胞的增殖
C.培养过程中所用的外植体一般取自鱼腥草的分生区细胞
D.为了有利于外植体的脱分化，往往需要在培养基中加入植物激素
13.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“PCR扩增”“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是（ ）
A.在50~65℃条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
B.DNA聚合酶能够从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸
C.琼脂糖凝胶电泳时，凝胶中的DNA被染色，可在自然光下被检测出来
D.PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致的
14.蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，蛋白质工程的操作过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A.图中a、b过程分别是转录、翻译
B.蛋白质工程需要从预期的蛋白质功能出发
C.通过蛋白质工程可能构建出一种全新的基因
D.蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列
15.基因工程在农业、工业、牧业、药业等多领域得到了广泛应用，随之而来的是质疑、担忧甚至反对的声音。下列关于转基因产品安全性问题的叙述，错误的是（ ）
A.转基因动植物在自然界中正常生存繁殖可能造成基因污染
B.转基因植物体内代谢途径发生变化，可导致该作物营养成分发生改变
C.转基因技术的本质是基因重组，不会改变生物的遗传多样性
D.消费者有知情权，转基因产品包装上要明确标注“转基因××”
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16.线粒体遗传病是由线粒体DNA突变引起的，也受核基因的影响。为了研究线粒体遗传病的机制，需要构建核基因相同的转线粒体永生细胞系。构建转线粒体永生细胞系的过程如图所示。淋巴细胞受EB病毒（EBV）感染后能无限增殖，会被BrdU杀死。ρ°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶的培养基中才能生长。下列叙述正确的是（ ）
A.可通过紫外线短时间照射去除淋巴细胞的细胞核，实质是去除纺锤体—染色体复合物
B.ρ°细胞由于缺少核DNA，因此不能在缺乏尿嘧啶的培养基中生长
C.为了筛选出转线粒体永生细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶
D.由于细胞融合具有随机性，因此需要经过选择培养基筛选，后续不需要经过克隆化培养和抗体检测
17.某研究所采用最新生物技术实现了哺乳动物的同性繁殖，得到了具有正常繁殖能力的孤雌小鼠，具体操作过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A.为了获得更多的卵母细胞，可以用性激素处理雌性小鼠
B.图中卵母细胞一般需要培养到减数分裂Ⅱ的中期
C.需要将胚胎甲移植到小鼠的子宫中继续培养
D.通过图示方法得到的孤雌小鼠一般是二倍体的雌性个体
18.生物技术的进步，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑和挑战。下列叙述错误的是（ ）
A.我国政府允许通过生殖性克隆来解决一些夫妇不孕不育的问题
B.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及抗生素等来形成杀伤力的
C.试管婴儿技术和“设计试管婴儿”都需要对胚胎进行遗传学诊断
D.转基因食品风险评估时需要考虑目的基因和标记基因的安全性问题
19.一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。某同学所做的探究抗生素对细菌的选择作用实验步骤如下：
①取少量含大肠杆菌的培养液，用涂布器涂布到固体培养基平板上；
②将含有青霉素的滤纸片放在培养基表面，37℃恒温培养后出现抑菌圈；
③从抑菌圈边缘的菌落中挑取细菌，接种到液体培养基中；
④重复步骤①②。
下列分析正确的是（ ）
A.步骤③中，抑菌圈边缘生长的细菌都是耐药菌
B.连续培养几代后，抑菌圈直径的变化趋势可能为变小
C.连续培养几代后，该大肠杆菌种群不会发生进化
D.实验结束后，应将耐药菌、培养基、滤纸片等灭菌
20.图1表示CRISPR/Cas9基因编辑的主要作用机理，其通过gRNA识别目的基因组靶序列来对相应基因进行剪切（Cas9基因编码的酶能在特定的DNA序列上切割DNA）等机制从而实现对靶基因的定点突变。图2是DNA分子中的FANCM基因的切割位点示意图，FANCM蛋白能阻止减数分裂过程中染色体片段互换的发生。科研人员通过构建CRISPR/Cas9重组表达载体，以生菜嫩叶作为外植体，经农杆菌转化，培育出FANCM基因的突变纯合新品种。下列叙述正确的是（ ）
图1图2
A.构建CRISPR/Cas9重组表达载体时主要利用的工具酶有限制酶和DNA连接酶
B.根据靶序列设计的gRNA中相应序列是5′-UUGUAUACCAUGAGCUGAAAGG-3′
C.研究中需要将gRNA和Cas9基因序列均插入农杆菌Ti质粒的T-DNA内部
D.获得的FANCM基因突变纯合体在遗传育种中的应用价值是降低基因重组率
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21.（11分）胞内体是动物细胞内由膜包围的细胞器，其作用是将胞吞作用新摄取的物质转运到溶酶体使其被降解。血液中的胆固醇通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL），LDL通过受体介导的胞吞作用进入细胞的过程如图所示。回答下列问题：
（1）构成胞内体的膜的成分和结构与______（答出两种结构即可）的相似，膜成分中的脂质有________________________。
（2）网格蛋白包被膜泡脱包被后与胞内体融合，胞内体内部酸性较强，使得LDL与受体分离，胞内体以出芽的方式形成含有受体的小囊泡，含有受体的小囊泡的去路和作用是______。胞内体与溶酶体的融合体现了膜结构具有__________________。
（3）血液中的LDL水平与心血管疾病的发病率呈正相关，他汀类药物是常规的降脂药物，但在临床上发现其降脂效果有限。研究发现该药物可促进LDL受体和PCSK9蛋白的合成，而PCSK9蛋白与LDL受体结合会促进LDL受体在溶酶体中的降解。
①他汀类药物降脂效果有限的原因可能是________________________。
②据此推测，研发新药降低血脂的机理可以是________________________（答出2点）。
22.（11分）ε-聚赖氨酸能抑制多种微生物的活性，是一种优良的食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-聚赖氨酸的细菌，做了如图所示的实验。其中Ⅰ~Ⅴ表示步骤，①~③表示菌落。已知ε-聚赖氨酸能使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。回答下列问题：
（1）在配制培养基时，常需要加入牛肉膏、水、琼脂等物质，其中牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和______。琼脂的作用是________________________。
（2）步骤Ⅰ使用的接种方法是______，判断依据是________________________。乙培养基中需要加入各种营养物质，为了鉴别出能分泌ε-聚赖氨酸的细菌，还应该加入的物质是______。
（3）若经过步骤Ⅱ培养后发现菌落铺满了整个培养基，无法分辨出单菌落，则应在步骤Ⅰ之前进行______，再接种。步骤Ⅲ接种时，应挑选______（填“①”“②”或“③”）号菌落。
（4）若想要快速直观地测量样液中该细菌的数量，可采用的方法是________________________。
23.（11分）直接靶向癌症的单克隆抗体的出现和发展从根本上改变了肿瘤靶向治疗的前景，已经成为许多血液病和一些实体癌症的一线护理标准。单克隆抗体在癌症的临床治疗上实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。制备单克隆抗体的过程如图1所示，为增强其治疗效果，可采用双特异性单克隆抗体，其构建思路如图2所示。回答下列问题：
图1图2
（1）图1中的B淋巴细胞一般取自癌症患者，原因是________________________。B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞具有________________________的特点。
（2）图2中由单克隆杂交瘤细胞与脾脏细胞融合而成的融合细胞染色体数比前两种细胞染色体数之和少，说明细胞融合会导致__________________。对相关细胞进行多次检测和筛选，目的是获得能______的单克隆杂交—杂交瘤细胞。
（3）图2中，为制备双特异性单克隆抗体，其思路是以癌细胞的细胞膜外表面的特异性蛋白为抗原A，T细胞细胞膜外表面的受体蛋白（能激活其免疫能力）为抗原B，选择T细胞是因为其具有__________________的作用。这种双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果优于抗体1、抗体2单独使用，原因是________________________。
24.（10分）苏云金杆菌中含有一种抗虫基因（Bt基因），通过产生苏云金杆菌伴孢晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将该细菌的“杀虫基因”转到棉花里，培育出了抗虫棉，让棉花也能产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。图1表示含目的基因的DNA结构与限制酶酶切图谱；图2表示某质粒的结构与限制酶酶切图谱，已知图中不同限制酶切割序列不同。现利用图示目的基因和质粒构建基因表达载体，进而培育转基因抗虫棉。回答下列问题：
图1 图2
（1）由图分析可知，β链从左向右的方向是______（用“5′”“3′”和“→”表示），处理含目的基因的DNA片段时应选用的两种限制酶是________________________。
（2）目的基因需要通过PCR技术进行扩增，PCR技术扩增的原理是____________，原料是______。PCR扩增过程中，复性、延伸温度正常，若把变性温度调到60℃，则无法得到扩增产物，原因是________________________。
（3）图2中的卡那霉素抗性基因作为______，用于筛选含有重组质粒的细胞。获得转基因棉后，为检测该植物的抗虫特性，在个体水平上需要进行的操作是________________________。
25.（12分）In-Fusin技术是一项新型的无缝克隆技术。该技术的关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（同源序列，通常为15~20bp），然后用In-Fusin酶处理即可实现无缝连接，相关操作如图所示。回答下列问题：
（1）过程①是利用PCR技术将质粒线性化，为了保证扩增后的产物是图中所示的线性化质粒，应该选择引物______。
（2）过程②是扩增出的两端含线性化质粒同源序列的目的基因，其关键是设计引物A和引物B，引物A和引物B中的一部分序列要与目的基因部分序列相同，另一部分要与____________序列相同。同源序列1和同源序列2相同则会导致______________________________（答出1点即可）。
（3）过程③是目的基因与线性化质粒的同源区域在In-Fusin酶的作用下形成重组中间体的过程。In-Fusin酶能识别双链线性化DNA片段5′→3′末端部分核苷酸，并使其降解，使目的基因与线性化质粒__________________，从而形成重组中间体，In-Fusin反应混合物中的物质可增强重组中间体的稳定性。
（4）过程④将重组中间体导入受体细胞，利用受体细胞修复系统中的______酶，将重组中间体闭合成重组质粒。如果受体细胞是大肠杆菌，往往需要用钙离子处理大肠杆菌，目的是________________________。
生物学试卷参考答案
1.B【解析】肺炎支原体是原核生物，无细胞核；细菌和肺炎支原体的核酸可位于拟核和细胞质中；支原体无细胞壁，使用青霉素类抗生素不能抑制肺炎支原体，B项符合题意。
2.A【解析】缓冲液中的无机盐的主要作用是维持溶液的渗透压和pH，B项错误。细胞器③为线粒体，其内膜面积大于外膜，将其置于清水后，外膜先破裂，C项错误。细胞器④为中心体，其可分布在动物细胞和低等植物细胞中，D项错误。
3.C【解析】图中模型属于物理模型；细胞膜的流动性对细胞功能有影响；细胞骨架的主要成分是蛋白质，其组成单位是氨基酸，多糖的组成单位是单糖，C项符合题意。
4.D【解析】人体缺Ca2+会引起抽搐，人体细胞吸收无机盐也可以通过协作扩散完成，无机盐不能参与淀粉、几丁质的构成，D项符合题意。
5.B【解析】胞吞过程中不需要载体蛋白，但需要膜蛋白参与，B项错误。
6.C【解析】当蔗糖溶液浓度小于a时，马铃薯条细胞可能渗透吸收更多的水分子，质量变化大于8%，A项正确。马铃薯条细胞液的浓度最可能在c和d之间，B项正确。与c相比，d浓度条件下的马铃薯条细胞的吸水能力更强，C项错误。长时间置于浓度为f的蔗糖溶液中，马铃薯条细胞可能会失水过多死亡，D项正确。
7.B【解析】实验操作中，使用吸水纸的作用是引流，A项错误。“探究植物细胞的吸水和失水”实验中，一直用的是低倍镜，C项错误。使用紫色洋葱鳞片叶作材料的最主要原因是紫色洋葱鳞片叶有紫色大液泡，D项错误。
8.C【解析】腐乳制作中起作用的微生物主要是毛霉，家庭制作果酒不需要接种酿酒酵母菌，泡菜制作时需要保持无氧环境，C项符合题意。
9.B【解析】体外培养的某些动物细胞能悬浮培养，对细胞所需营养物质尚未完全弄清楚，进行动物细胞培养的CO2培养箱中的混合气体应含有95%的CO2和5%的O2，B项符合题意。
10.C【解析】可使用灭活的病毒来诱导动物细胞融合，一般不用来诱导原生质体的融合，C项错误。
11.A【解析】iPS细胞由已分化的细胞进行体外培养和诱导形成，A项错误。
12.A【解析】鱼腥草中的萜类化合物是次生代谢物，不是细胞代谢所必需的营养物质，A项错误。
13.D【解析】在沸水条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，A项错误。DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，B项错误。琼脂糖凝胶电泳时，凝胶中的DNA被染色，可在紫外光下被检测出来，C项错误。
14.D【解析】蛋白质工程一般改变蛋白质的个别或部分氨基酸序列，D项错误。
15.C【解析】转基因技术的本质是基因重组，会改变生物的遗传多样性，C项错误。
16.ACD【解析】ρ°细胞缺少的是线粒体DNA，ρ°细胞在含有尿嘧啶的培养基中能够生长，B项错误。
17.A【解析】为了获得更多的卵母细胞，可以用促性腺激素处理雌性小鼠，A项错误。
18.ABC【解析】我国禁止生殖性克隆人，A项错误。生物武器包括病菌类、病毒类和生化毒剂类，不包括干扰素和抗生素，B项错误。一般试管婴儿技术不需要对胚胎进行基因检测，C项错误。
19.BD【解析】步骤③中，抑菌圈边缘生长的细菌不一定都是耐药菌，A项错误。连续培养几代后，该大肠杆菌种群耐药性基因频率可能会发生变化，可能会发生进化，C项错误。
20.ABC【解析】获得的FANCM基因突变纯合体在遗传育种中的应用价值是提高基因重组率，D项错误。
21.（1）细胞膜、内质网膜、高尔基体膜（2分） 磷脂、胆固醇（2分）
（2）与细胞膜融合，其中的受体重新分布在细胞膜上被重新利用（2分） 一定的流动性（1分）
（3）他汀类药物能促进PCSK9蛋白的合成，PCSK9蛋白结合LDL受体后会促进LDL受体在溶酶体中的降解，使细胞表面LDL受体减少（2分） 增加LDL受体的表达量（或延长LDL受体的“生命周期”）、减少LDL受体与PCSK9蛋白的结合（2分）
【解析】由题干可知，LDL受体有利于降低血液中的胆固醇，他汀类药物降脂效果有限的原因是他汀类药物能促进PCSK9蛋白的合成，PCSK9蛋白结合LDL受体后会促进LDL受体在溶酶体中的降解，使细胞表面LDL受体减少。降低血脂的研究方向可以是增加LDL受体的表达量、减少LDL受体与PCSK9蛋白的结合等。
22.（1）维生素（1分） 作为凝固剂（1分）
（2）稀释涂布平板法（1分） 培养后，菌落在平板上是均匀分布的（2分） 亚甲基蓝（1分）
（3）进一步稀释（1分） ①（2分）
（4）细菌计数板计数法（2分）
【解析】若经过步骤Ⅱ培养后发现菌落铺满了整个培养基，无法分辨出单菌落，则应在步骤Ⅰ之前进行进一步稀释，再接种。①号菌落透明圈最大，说明该菌落产生的ε-聚赖氨酸较多，步骤Ⅲ接种时，应挑选①号菌落。若想要快速直观地测量样液中该细菌的数量，可采用的方法是细菌计数板计数法。
23.（1）癌症患者体内的B淋巴细胞能够产生针对癌细胞的抗体（答全给分，2分）既能无限增殖，又能分泌抗体（答全给分，2分）
（2）染色体丢失（1分） 产生双特异性抗体（2分）
（3）识别并清除癌细胞（“识别”“清除”各1分，共2分） T细胞能更精准地接触到癌细胞，加强对癌细胞的杀伤作用（“精准接触”“加强杀伤作用”各1分，共2分）
【解析】（3）图2中，为制备双特异性单克隆抗体，其思路是以癌细胞的细胞膜外表面的特异性蛋白为抗原A，T细胞细胞膜外表面的受体蛋白（能激活其免疫能力）为抗原B，选择T细胞是因为其具有识别并清除癌细胞的作用。这种双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果优于抗体1、2单独使用，原因是T细胞能更精准地接触到癌细胞，加强对癌细胞的杀伤作用。
24.（1）3′→5′（1分） BamHⅠ和EcRⅠ（2分）
（2）半保留复制（1分） 4种脱氧核苷酸（1分） 该温度条件下，不能使双链DNA解旋（2分）
（3）标记基因（或筛选标记）（1分） 采摘转基因棉的叶片饲喂棉铃虫（，观察棉铃虫存活状况）（2分）
【解析】变性过程中需要将温度上升到90℃以上，60℃条件下，不能使双链DNA解旋。图2中的卡那霉素抗性基因作为标记基因，用于筛选含有重组质粒的细胞。获得转基因棉后，为检测该植物的抗虫特性，需要的操作是采摘转基因棉的叶片饲喂棉铃虫。
25.（1）1和2（2分）
（2）质粒上的同源（2分） 目的基因自连、质粒自连、目的基因与质粒反向连接（答出1点即可，2分）
（3）同源区域形成碱基对（2分）
（4）DNA连接（2分） 使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态（2分）
【解析】在引物1和引物2的作用下可形成线性化质粒。图中在设计引物A和引物B时，引物A和引物B中的一部分序列要与目的基因部分序列相同，另一部分要与质粒上的同源序列相同，从而扩增出两端含线性化质粒同源序列的目的基因。扩增出的该目的基因在In-Fusin酶的作用下形成重组中间体。
物质
细胞器
DNA
RNA
磷脂
蛋白酶
①
—
+
—
—
②
—
—
+
+
③
+
+
+
—
④
—
—
—
—
注意事项：
1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
4.本试卷主要考试内容：人教版必修1第1章~第4章，选择性必修3。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.秋冬季是由肺炎支原体和流感病毒（单链RNA病毒）引起的呼吸道感染疾病的高发期。已知青霉素类抗生素的抑菌机制是抑制细菌细胞壁的合成。下列相关叙述正确的是（ ）
A.肺炎支原体的mRNA从核孔出来，指导翻译过程
B.流感病毒和肺炎支原体的遗传物质中均含有4种碱基
C.细菌和肺炎支原体的核酸均位于拟核中
D.青霉素类抗生素可抑制肺炎支原体，但对流感病毒无抑制作用
2.某同学将小鼠肝脏细胞匀浆置于缓冲液中，利用差速离心法分离出几种细胞器并对其进行物质分析，结果如表所示。下列有关说法正确的是（ ）
注：“+”表示有，“—”表示没有。
A.细胞器①是生产蛋白质的机器，细胞器②可能是细胞内的“消化车间”
B.缓冲液中的无机盐的主要作用是进入细胞后参与构成复杂化合物
C.细胞器③有双层膜，将其置于清水后，内膜比外膜先破裂
D.细胞器④与细胞的分裂有关，其只分布在动物细胞中
3.下图是细胞膜的流动镶嵌结构模型示意图，下列相关叙述正确的是（ ）
A.该模型属于数学模型
B.细胞膜的流动性对细胞功能没有影响
C.通常功能越复杂的细胞膜，3的种类与数量就越多
D.图中1、4分别表示细胞骨架、糖链，组成二者的单体相同
4.无机盐在生物体内含量很少，却担负着重要功能。下列关于无机盐的叙述，正确的是（ ）
A.人体血液中Ca2+、Na+含量过多都会引起抽搐
B.人体细胞吸收无机盐都是通过主动运输完成的
C.无机盐可参与淀粉、几丁质等化合物的构成
D.某些无机盐有助于维持细胞的酸碱平衡
5.下列有关真核细胞中物质跨膜运输方式与膜蛋白关系的叙述，错误的是（ ）
A.自由扩散不需要转运蛋白参与
B.胞吞过程中不需要膜蛋白参与
C.借助通道蛋白的跨膜运输方式是协助扩散
D.借助载体蛋白转运物质时不一定消耗ATP
6.某研究小组将1~6组质量相同的马铃薯条分别用浓度为a、b、c、d、e、f的蔗糖溶液处理，一段时间后测得的马铃薯条的质量变化如图所示。下列说法错误的是（ ）
A.当蔗糖溶液浓度小于a时，马铃薯条的质量变化可能大于8%
B.马铃薯条细胞液的浓度最可能在c和d之间
C.与c相比，d浓度条件下的马铃薯条细胞的吸水能力更弱
D.长时间置于浓度为f的蔗糖溶液中，马铃薯条细胞可能会失水死亡
7.“探究植物细胞的吸水和失水”实验中，常用紫色洋葱鳞片叶作材料。下列相关叙述正确的是（ ）
A.实验操作中，使用吸水纸主要是吸去盖玻片旁的多余液体
B.该实验没有另外设置对照组，但仍符合对照原则——自身对照
C.低倍镜下观察质壁分离后，再换成高倍镜观察质壁分离复原
D.使用紫色洋葱鳞片叶作材料的最主要原因是洋葱鳞片叶容易获取
8.我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如腐乳、果酒、果醋和泡菜等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵食品的叙述，正确的是（ ）
A.腐乳制作中起作用的微生物主要是曲霉
B.家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌
C.醋酸菌能将酒精转化成乙酸
D.泡菜制作时需要保持有氧环境
9.在动物细胞培养的实验操作中，需要一些关键步骤和适宜的条件。下列叙述正确的是（ ）
A.体外培养的动物细胞都必须贴附于某些基质的表面才能生长繁殖
B.将动物组织或贴壁细胞分散成单个细胞都可用胰蛋白酶处理
C.由于对细胞所需营养物质已完全清楚，故动物细胞培养使用合成培养基
D.进行动物细胞培养的CO2培养箱中的混合气体应含有95%的O2和5%的CO2
10.花椰菜易受黑腐病病原菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。将花椰菜和野生黑芥进行植物细胞融合获得抗黑腐病杂种植株，流程如图所示。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。下列叙述错误的是（ ）
A.①过程需要在等渗溶液中进行，以确保细胞结构不受破坏
B.紫外线处理黑芥原生质体的过程利用了染色体变异的原理
C.通常可使用灭活的病毒来诱导②过程中的原生质体融合
D.获得的杂种植株可通过接种黑腐病病原菌来鉴定其抗黑腐病的能力
11.肌萎缩侧索硬化，又称渐冻症，被称为世界五大绝症之一，主要表现为肌肉弱化和神经元损伤。研究发现，利用诱导多能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给肌萎缩侧索硬化实验鼠，能延长其寿命。下列叙述错误的是（ ）
A.iPS细胞由胚胎干细胞进行体外培养和诱导形成
B.iPS细胞分化成前驱细胞后DNA不变，蛋白质改变
C.iPS细胞来源于实验鼠本身，可避免免疫排斥作用
D.植入前驱细胞不能根治肌萎缩侧索硬化但能延缓其症状
12.鱼腥草中的次生代谢物萜类物质具有抗过敏作用，可用于治疗过敏性荨麻疹，实验人员通过植物细胞悬浮培养技术可大量获取鱼腥草细胞中的萜类化合物。下列说法错误的是（ ）
A.鱼腥草中的萜类化合物是细胞代谢所必需的营养物质
B.培养过程中，悬浮细胞的密度过大会限制悬浮细胞的增殖
C.培养过程中所用的外植体一般取自鱼腥草的分生区细胞
D.为了有利于外植体的脱分化，往往需要在培养基中加入植物激素
13.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“PCR扩增”“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是（ ）
A.在50~65℃条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
B.DNA聚合酶能够从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸
C.琼脂糖凝胶电泳时，凝胶中的DNA被染色，可在自然光下被检测出来
D.PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致的
14.蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，蛋白质工程的操作过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A.图中a、b过程分别是转录、翻译
B.蛋白质工程需要从预期的蛋白质功能出发
C.通过蛋白质工程可能构建出一种全新的基因
D.蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列
15.基因工程在农业、工业、牧业、药业等多领域得到了广泛应用，随之而来的是质疑、担忧甚至反对的声音。下列关于转基因产品安全性问题的叙述，错误的是（ ）
A.转基因动植物在自然界中正常生存繁殖可能造成基因污染
B.转基因植物体内代谢途径发生变化，可导致该作物营养成分发生改变
C.转基因技术的本质是基因重组，不会改变生物的遗传多样性
D.消费者有知情权，转基因产品包装上要明确标注“转基因××”
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16.线粒体遗传病是由线粒体DNA突变引起的，也受核基因的影响。为了研究线粒体遗传病的机制，需要构建核基因相同的转线粒体永生细胞系。构建转线粒体永生细胞系的过程如图所示。淋巴细胞受EB病毒（EBV）感染后能无限增殖，会被BrdU杀死。ρ°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶的培养基中才能生长。下列叙述正确的是（ ）
A.可通过紫外线短时间照射去除淋巴细胞的细胞核，实质是去除纺锤体—染色体复合物
B.ρ°细胞由于缺少核DNA，因此不能在缺乏尿嘧啶的培养基中生长
C.为了筛选出转线粒体永生细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶
D.由于细胞融合具有随机性，因此需要经过选择培养基筛选，后续不需要经过克隆化培养和抗体检测
17.某研究所采用最新生物技术实现了哺乳动物的同性繁殖，得到了具有正常繁殖能力的孤雌小鼠，具体操作过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A.为了获得更多的卵母细胞，可以用性激素处理雌性小鼠
B.图中卵母细胞一般需要培养到减数分裂Ⅱ的中期
C.需要将胚胎甲移植到小鼠的子宫中继续培养
D.通过图示方法得到的孤雌小鼠一般是二倍体的雌性个体
18.生物技术的进步，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑和挑战。下列叙述错误的是（ ）
A.我国政府允许通过生殖性克隆来解决一些夫妇不孕不育的问题
B.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及抗生素等来形成杀伤力的
C.试管婴儿技术和“设计试管婴儿”都需要对胚胎进行遗传学诊断
D.转基因食品风险评估时需要考虑目的基因和标记基因的安全性问题
19.一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。某同学所做的探究抗生素对细菌的选择作用实验步骤如下：
①取少量含大肠杆菌的培养液，用涂布器涂布到固体培养基平板上；
②将含有青霉素的滤纸片放在培养基表面，37℃恒温培养后出现抑菌圈；
③从抑菌圈边缘的菌落中挑取细菌，接种到液体培养基中；
④重复步骤①②。
下列分析正确的是（ ）
A.步骤③中，抑菌圈边缘生长的细菌都是耐药菌
B.连续培养几代后，抑菌圈直径的变化趋势可能为变小
C.连续培养几代后，该大肠杆菌种群不会发生进化
D.实验结束后，应将耐药菌、培养基、滤纸片等灭菌
20.图1表示CRISPR/Cas9基因编辑的主要作用机理，其通过gRNA识别目的基因组靶序列来对相应基因进行剪切（Cas9基因编码的酶能在特定的DNA序列上切割DNA）等机制从而实现对靶基因的定点突变。图2是DNA分子中的FANCM基因的切割位点示意图，FANCM蛋白能阻止减数分裂过程中染色体片段互换的发生。科研人员通过构建CRISPR/Cas9重组表达载体，以生菜嫩叶作为外植体，经农杆菌转化，培育出FANCM基因的突变纯合新品种。下列叙述正确的是（ ）
图1图2
A.构建CRISPR/Cas9重组表达载体时主要利用的工具酶有限制酶和DNA连接酶
B.根据靶序列设计的gRNA中相应序列是5′-UUGUAUACCAUGAGCUGAAAGG-3′
C.研究中需要将gRNA和Cas9基因序列均插入农杆菌Ti质粒的T-DNA内部
D.获得的FANCM基因突变纯合体在遗传育种中的应用价值是降低基因重组率
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21.（11分）胞内体是动物细胞内由膜包围的细胞器，其作用是将胞吞作用新摄取的物质转运到溶酶体使其被降解。血液中的胆固醇通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白（LDL），LDL通过受体介导的胞吞作用进入细胞的过程如图所示。回答下列问题：
（1）构成胞内体的膜的成分和结构与______（答出两种结构即可）的相似，膜成分中的脂质有________________________。
（2）网格蛋白包被膜泡脱包被后与胞内体融合，胞内体内部酸性较强，使得LDL与受体分离，胞内体以出芽的方式形成含有受体的小囊泡，含有受体的小囊泡的去路和作用是______。胞内体与溶酶体的融合体现了膜结构具有__________________。
（3）血液中的LDL水平与心血管疾病的发病率呈正相关，他汀类药物是常规的降脂药物，但在临床上发现其降脂效果有限。研究发现该药物可促进LDL受体和PCSK9蛋白的合成，而PCSK9蛋白与LDL受体结合会促进LDL受体在溶酶体中的降解。
①他汀类药物降脂效果有限的原因可能是________________________。
②据此推测，研发新药降低血脂的机理可以是________________________（答出2点）。
22.（11分）ε-聚赖氨酸能抑制多种微生物的活性，是一种优良的食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-聚赖氨酸的细菌，做了如图所示的实验。其中Ⅰ~Ⅴ表示步骤，①~③表示菌落。已知ε-聚赖氨酸能使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。回答下列问题：
（1）在配制培养基时，常需要加入牛肉膏、水、琼脂等物质，其中牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和______。琼脂的作用是________________________。
（2）步骤Ⅰ使用的接种方法是______，判断依据是________________________。乙培养基中需要加入各种营养物质，为了鉴别出能分泌ε-聚赖氨酸的细菌，还应该加入的物质是______。
（3）若经过步骤Ⅱ培养后发现菌落铺满了整个培养基，无法分辨出单菌落，则应在步骤Ⅰ之前进行______，再接种。步骤Ⅲ接种时，应挑选______（填“①”“②”或“③”）号菌落。
（4）若想要快速直观地测量样液中该细菌的数量，可采用的方法是________________________。
23.（11分）直接靶向癌症的单克隆抗体的出现和发展从根本上改变了肿瘤靶向治疗的前景，已经成为许多血液病和一些实体癌症的一线护理标准。单克隆抗体在癌症的临床治疗上实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。制备单克隆抗体的过程如图1所示，为增强其治疗效果，可采用双特异性单克隆抗体，其构建思路如图2所示。回答下列问题：
图1图2
（1）图1中的B淋巴细胞一般取自癌症患者，原因是________________________。B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞具有________________________的特点。
（2）图2中由单克隆杂交瘤细胞与脾脏细胞融合而成的融合细胞染色体数比前两种细胞染色体数之和少，说明细胞融合会导致__________________。对相关细胞进行多次检测和筛选，目的是获得能______的单克隆杂交—杂交瘤细胞。
（3）图2中，为制备双特异性单克隆抗体，其思路是以癌细胞的细胞膜外表面的特异性蛋白为抗原A，T细胞细胞膜外表面的受体蛋白（能激活其免疫能力）为抗原B，选择T细胞是因为其具有__________________的作用。这种双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果优于抗体1、抗体2单独使用，原因是________________________。
24.（10分）苏云金杆菌中含有一种抗虫基因（Bt基因），通过产生苏云金杆菌伴孢晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将该细菌的“杀虫基因”转到棉花里，培育出了抗虫棉，让棉花也能产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。图1表示含目的基因的DNA结构与限制酶酶切图谱；图2表示某质粒的结构与限制酶酶切图谱，已知图中不同限制酶切割序列不同。现利用图示目的基因和质粒构建基因表达载体，进而培育转基因抗虫棉。回答下列问题：
图1 图2
（1）由图分析可知，β链从左向右的方向是______（用“5′”“3′”和“→”表示），处理含目的基因的DNA片段时应选用的两种限制酶是________________________。
（2）目的基因需要通过PCR技术进行扩增，PCR技术扩增的原理是____________，原料是______。PCR扩增过程中，复性、延伸温度正常，若把变性温度调到60℃，则无法得到扩增产物，原因是________________________。
（3）图2中的卡那霉素抗性基因作为______，用于筛选含有重组质粒的细胞。获得转基因棉后，为检测该植物的抗虫特性，在个体水平上需要进行的操作是________________________。
25.（12分）In-Fusin技术是一项新型的无缝克隆技术。该技术的关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（同源序列，通常为15~20bp），然后用In-Fusin酶处理即可实现无缝连接，相关操作如图所示。回答下列问题：
（1）过程①是利用PCR技术将质粒线性化，为了保证扩增后的产物是图中所示的线性化质粒，应该选择引物______。
（2）过程②是扩增出的两端含线性化质粒同源序列的目的基因，其关键是设计引物A和引物B，引物A和引物B中的一部分序列要与目的基因部分序列相同，另一部分要与____________序列相同。同源序列1和同源序列2相同则会导致______________________________（答出1点即可）。
（3）过程③是目的基因与线性化质粒的同源区域在In-Fusin酶的作用下形成重组中间体的过程。In-Fusin酶能识别双链线性化DNA片段5′→3′末端部分核苷酸，并使其降解，使目的基因与线性化质粒__________________，从而形成重组中间体，In-Fusin反应混合物中的物质可增强重组中间体的稳定性。
（4）过程④将重组中间体导入受体细胞，利用受体细胞修复系统中的______酶，将重组中间体闭合成重组质粒。如果受体细胞是大肠杆菌，往往需要用钙离子处理大肠杆菌，目的是________________________。
生物学试卷参考答案
1.B【解析】肺炎支原体是原核生物，无细胞核；细菌和肺炎支原体的核酸可位于拟核和细胞质中；支原体无细胞壁，使用青霉素类抗生素不能抑制肺炎支原体，B项符合题意。
2.A【解析】缓冲液中的无机盐的主要作用是维持溶液的渗透压和pH，B项错误。细胞器③为线粒体，其内膜面积大于外膜，将其置于清水后，外膜先破裂，C项错误。细胞器④为中心体，其可分布在动物细胞和低等植物细胞中，D项错误。
3.C【解析】图中模型属于物理模型；细胞膜的流动性对细胞功能有影响；细胞骨架的主要成分是蛋白质，其组成单位是氨基酸，多糖的组成单位是单糖，C项符合题意。
4.D【解析】人体缺Ca2+会引起抽搐，人体细胞吸收无机盐也可以通过协作扩散完成，无机盐不能参与淀粉、几丁质的构成，D项符合题意。
5.B【解析】胞吞过程中不需要载体蛋白，但需要膜蛋白参与，B项错误。
6.C【解析】当蔗糖溶液浓度小于a时，马铃薯条细胞可能渗透吸收更多的水分子，质量变化大于8%，A项正确。马铃薯条细胞液的浓度最可能在c和d之间，B项正确。与c相比，d浓度条件下的马铃薯条细胞的吸水能力更强，C项错误。长时间置于浓度为f的蔗糖溶液中，马铃薯条细胞可能会失水过多死亡，D项正确。
7.B【解析】实验操作中，使用吸水纸的作用是引流，A项错误。“探究植物细胞的吸水和失水”实验中，一直用的是低倍镜，C项错误。使用紫色洋葱鳞片叶作材料的最主要原因是紫色洋葱鳞片叶有紫色大液泡，D项错误。
8.C【解析】腐乳制作中起作用的微生物主要是毛霉，家庭制作果酒不需要接种酿酒酵母菌，泡菜制作时需要保持无氧环境，C项符合题意。
9.B【解析】体外培养的某些动物细胞能悬浮培养，对细胞所需营养物质尚未完全弄清楚，进行动物细胞培养的CO2培养箱中的混合气体应含有95%的CO2和5%的O2，B项符合题意。
10.C【解析】可使用灭活的病毒来诱导动物细胞融合，一般不用来诱导原生质体的融合，C项错误。
11.A【解析】iPS细胞由已分化的细胞进行体外培养和诱导形成，A项错误。
12.A【解析】鱼腥草中的萜类化合物是次生代谢物，不是细胞代谢所必需的营养物质，A项错误。
13.D【解析】在沸水条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，A项错误。DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，B项错误。琼脂糖凝胶电泳时，凝胶中的DNA被染色，可在紫外光下被检测出来，C项错误。
14.D【解析】蛋白质工程一般改变蛋白质的个别或部分氨基酸序列，D项错误。
15.C【解析】转基因技术的本质是基因重组，会改变生物的遗传多样性，C项错误。
16.ACD【解析】ρ°细胞缺少的是线粒体DNA，ρ°细胞在含有尿嘧啶的培养基中能够生长，B项错误。
17.A【解析】为了获得更多的卵母细胞，可以用促性腺激素处理雌性小鼠，A项错误。
18.ABC【解析】我国禁止生殖性克隆人，A项错误。生物武器包括病菌类、病毒类和生化毒剂类，不包括干扰素和抗生素，B项错误。一般试管婴儿技术不需要对胚胎进行基因检测，C项错误。
19.BD【解析】步骤③中，抑菌圈边缘生长的细菌不一定都是耐药菌，A项错误。连续培养几代后，该大肠杆菌种群耐药性基因频率可能会发生变化，可能会发生进化，C项错误。
20.ABC【解析】获得的FANCM基因突变纯合体在遗传育种中的应用价值是提高基因重组率，D项错误。
21.（1）细胞膜、内质网膜、高尔基体膜（2分） 磷脂、胆固醇（2分）
（2）与细胞膜融合，其中的受体重新分布在细胞膜上被重新利用（2分） 一定的流动性（1分）
（3）他汀类药物能促进PCSK9蛋白的合成，PCSK9蛋白结合LDL受体后会促进LDL受体在溶酶体中的降解，使细胞表面LDL受体减少（2分） 增加LDL受体的表达量（或延长LDL受体的“生命周期”）、减少LDL受体与PCSK9蛋白的结合（2分）
【解析】由题干可知，LDL受体有利于降低血液中的胆固醇，他汀类药物降脂效果有限的原因是他汀类药物能促进PCSK9蛋白的合成，PCSK9蛋白结合LDL受体后会促进LDL受体在溶酶体中的降解，使细胞表面LDL受体减少。降低血脂的研究方向可以是增加LDL受体的表达量、减少LDL受体与PCSK9蛋白的结合等。
22.（1）维生素（1分） 作为凝固剂（1分）
（2）稀释涂布平板法（1分） 培养后，菌落在平板上是均匀分布的（2分） 亚甲基蓝（1分）
（3）进一步稀释（1分） ①（2分）
（4）细菌计数板计数法（2分）
【解析】若经过步骤Ⅱ培养后发现菌落铺满了整个培养基，无法分辨出单菌落，则应在步骤Ⅰ之前进行进一步稀释，再接种。①号菌落透明圈最大，说明该菌落产生的ε-聚赖氨酸较多，步骤Ⅲ接种时，应挑选①号菌落。若想要快速直观地测量样液中该细菌的数量，可采用的方法是细菌计数板计数法。
23.（1）癌症患者体内的B淋巴细胞能够产生针对癌细胞的抗体（答全给分，2分）既能无限增殖，又能分泌抗体（答全给分，2分）
（2）染色体丢失（1分） 产生双特异性抗体（2分）
（3）识别并清除癌细胞（“识别”“清除”各1分，共2分） T细胞能更精准地接触到癌细胞，加强对癌细胞的杀伤作用（“精准接触”“加强杀伤作用”各1分，共2分）
【解析】（3）图2中，为制备双特异性单克隆抗体，其思路是以癌细胞的细胞膜外表面的特异性蛋白为抗原A，T细胞细胞膜外表面的受体蛋白（能激活其免疫能力）为抗原B，选择T细胞是因为其具有识别并清除癌细胞的作用。这种双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果优于抗体1、2单独使用，原因是T细胞能更精准地接触到癌细胞，加强对癌细胞的杀伤作用。
24.（1）3′→5′（1分） BamHⅠ和EcRⅠ（2分）
（2）半保留复制（1分） 4种脱氧核苷酸（1分） 该温度条件下，不能使双链DNA解旋（2分）
（3）标记基因（或筛选标记）（1分） 采摘转基因棉的叶片饲喂棉铃虫（，观察棉铃虫存活状况）（2分）
【解析】变性过程中需要将温度上升到90℃以上，60℃条件下，不能使双链DNA解旋。图2中的卡那霉素抗性基因作为标记基因，用于筛选含有重组质粒的细胞。获得转基因棉后，为检测该植物的抗虫特性，需要的操作是采摘转基因棉的叶片饲喂棉铃虫。
25.（1）1和2（2分）
（2）质粒上的同源（2分） 目的基因自连、质粒自连、目的基因与质粒反向连接（答出1点即可，2分）
（3）同源区域形成碱基对（2分）
（4）DNA连接（2分） 使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态（2分）
【解析】在引物1和引物2的作用下可形成线性化质粒。图中在设计引物A和引物B时，引物A和引物B中的一部分序列要与目的基因部分序列相同，另一部分要与质粒上的同源序列相同，从而扩增出两端含线性化质粒同源序列的目的基因。扩增出的该目的基因在In-Fusin酶的作用下形成重组中间体。
物质
细胞器
DNA
RNA
磷脂
蛋白酶
①
—
+
—
—
②
—
—
+
+
③
+
+
+
—
④
—
—
—
—
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